人类辅助生殖技术中胚胎质量评估方法的研究进展 被引量：7

1

作者 赵杰 陈秀娟 何江峰 《生殖与避孕》 CAS CSCD 2014年第1期65-72,共8页

胚胎质量评估方法的优劣直接关系到辅助生殖临床妊娠结局的好坏。目前,对胚胎质量评估的方法中,应用最广泛的是对配子、胚胎各时期的形态特征进行评分的形态学评价法;近来,在形态学评分系统的基础上,结合实时成像分析系统对胚胎发育过... 胚胎质量评估方法的优劣直接关系到辅助生殖临床妊娠结局的好坏。目前,对胚胎质量评估的方法中,应用最广泛的是对配子、胚胎各时期的形态特征进行评分的形态学评价法;近来,在形态学评分系统的基础上,结合实时成像分析系统对胚胎发育过程进行连续观察并对胚胎进行选择,其应用价值已得到确认。而通过测定卵泡液及培养基中代谢物的代谢组学法虽然能更有效地分析胚胎活性、预测临床结局,但因受检测技术手段的限制,该方法尚未广泛应用于临床。且形态学和代谢组学分析不能确定染色体的异常,因此,染色体筛查已成为选择活力胚胎的方法之一,但是该法会对胚胎造成损伤及结果偏差较大,其应用还需要进一步评估。 展开更多

关键词 胚胎发育 代谢组学 基因组学 植入前非整倍体筛查

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毛建草离体培养快繁体系的建立 被引量：6

2

作者 刘俊 孙瑞芬 +3 位作者 耿牡丹 王冬霓 张艳芳 孙钟 《北方农业学报》 2017年第6期102-106,共5页

以大田毛建草为试验材料,通过研究不同外植体、不同激素种类和浓度配比对再生芽诱导、增殖培养及不定根诱导的影响,首次建立了毛建草离体培养快繁体系。结果表明:带腋芽茎段是毛建草组培快繁最适外植体;芽诱导培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+... 以大田毛建草为试验材料,通过研究不同外植体、不同激素种类和浓度配比对再生芽诱导、增殖培养及不定根诱导的影响,首次建立了毛建草离体培养快繁体系。结果表明:带腋芽茎段是毛建草组培快繁最适外植体;芽诱导培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+IAA 0.2 mg/L,诱导率为63.6%;继代培养基为MS+6-BA 0.75 mg/L+KT 4.0 mg/L+NAA 0.01 mg/L+GA30.2 mg/L,平均增殖数为4.3;不定根诱导培养基为MS+NAA 0.2 mg/L,生根率为85.1%;试管苗移栽成活率为100%,研究结果为毛建草组培苗的工厂化繁育奠定了基础。 展开更多

关键词 毛建草 组织培养 快速繁殖

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拟南芥AtCDPK1基因克隆与转化马铃薯的研究 被引量：5

3

作者 聂利珍 于肖夏 +4 位作者 李国婧 鞠天华 孙瑞芬 崔阔澍 于卓 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期447-453,共7页

以野生拟南芥生态型(Col-0)为材料,利用PCR和DNA重组技术,克隆了拟南芥钙依赖蛋白激酶基因(AtCDPK1)。AtCDPK1基因全长为2 269bp,碱基序列与已知基因At1g18890完全一致。构建AtCDPK1基因的植物表达载体pCHF3-CDPK1,并利用农杆菌介导法将... 以野生拟南芥生态型(Col-0)为材料,利用PCR和DNA重组技术,克隆了拟南芥钙依赖蛋白激酶基因(AtCDPK1)。AtCDPK1基因全长为2 269bp,碱基序列与已知基因At1g18890完全一致。构建AtCDPK1基因的植物表达载体pCHF3-CDPK1,并利用农杆菌介导法将pCHF3-CDPK1转入马铃薯品种‘费乌瑞它’的脱毒试管微型薯中,经筛选与植株再生,共获得50个抗性再生植株。PCR检测显示,有36个植株基因组中含有AtCDPK1基因。RT-PCR分析证实,AtCDPK1基因在这些马铃薯植株的基因组中均能正常转录表达。这一结果为进一步开展AtCDPK1基因功能分析及转基因抗旱马铃薯新品种选育研究奠定了基础。 展开更多

关键词 拟南芥 AtCDPK1 基因克隆 马铃薯 遗传转化 转录表达

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向日葵单染色体显微分离及特异文库的构建 被引量：5

4

作者 孙瑞芬 闫素丽 安玉麟 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期33-38,共6页

采用玻璃针分离法，通过显微操作系统成功地分离到内葵杂3号三交种和单交种的随体染色体，经两轮LA．PCR扩增得到250～1500bp的DNA片段。用各自的基因组DNA标记成探针，与随体染色体扩增产物进行Southern杂交，显示杂交信号，证明内葵杂... 采用玻璃针分离法，通过显微操作系统成功地分离到内葵杂3号三交种和单交种的随体染色体，经两轮LA．PCR扩增得到250～1500bp的DNA片段。用各自的基因组DNA标记成探针，与随体染色体扩增产物进行Southern杂交，显示杂交信号，证明内葵杂3号三交种和单交种随体染色体DNA已被成功扩增。将第2轮PCR产物构建质粒文库，得到三交种和单交种克隆数分别约为2．26×10^5和2．57×10^5。各随机挑取30个重组子进行分析，发现插入片段大小分别为200-700bp和200～500bp，平均插入片段大小分别为535bp和480bp。这是染色体微分离与微克隆技术首次在向日葵上的应用。 展开更多

关键词 向日葵 染色体 显微分离 PCR扩增 单染色体文库

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内蒙古巴彦淖尔市典型饲料资源及肉羊饲养方式调查 被引量：3

5

作者 赵媛 王海荣 +2 位作者 曹秀月 薛淑媛 金海 《畜牧与饲料科学》 2011年第1期44-45,共2页

巴彦淖尔市是内蒙古的养羊大市,其饲料资源丰富,具有得天独厚的条件。针对巴彦淖尔地区的饲料利用及肉羊饲养方式进行了调查,结果发现,巴彦淖尔地区农副产品丰富,价格低廉,但是在饲养过程中却得不到合理利用;另外,在饲养管理方面也存在... 巴彦淖尔市是内蒙古的养羊大市,其饲料资源丰富,具有得天独厚的条件。针对巴彦淖尔地区的饲料利用及肉羊饲养方式进行了调查,结果发现,巴彦淖尔地区农副产品丰富,价格低廉,但是在饲养过程中却得不到合理利用;另外,在饲养管理方面也存在缺乏优良品种、基础设施薄弱等问题。因此,巴彦淖尔市在饲料资源的合理利用以及肉羊养殖的发展方面仍有较大的空间。 展开更多

关键词 肉羊养殖 饲料 巴彦淖尔市

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向日葵rRNA基因克隆及其染色体定位研究 被引量：4

6

作者 高猛 安玉麟 +1 位作者 孙瑞芬 张艳芳 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期195-199,共5页

该研究以内葵杂3号三交种为材料,采用同源序列法克隆了5S rRNA和18S rRNA基因并进行了序列测定,测得片段长度分别为515 bp和1 808 bp。以5S rRNA、18S rRNA和45S rRNA基因为探针,分别与内葵杂3号三交种染色体进行荧光原位杂交(FISH)分... 该研究以内葵杂3号三交种为材料,采用同源序列法克隆了5S rRNA和18S rRNA基因并进行了序列测定,测得片段长度分别为515 bp和1 808 bp。以5S rRNA、18S rRNA和45S rRNA基因为探针,分别与内葵杂3号三交种染色体进行荧光原位杂交(FISH)分析。结果表明:45S rRNA和18S rRNA基因均得到3对杂交信号且位点分布相同,分别位于第3对和第10对染色体及第2对随体染色体的短臂末端;5S rRNA基因的信号位点共有2对,分布在第7对和第10对染色体短臂端部。 展开更多

关键词 向日葵 染色体 RRNA基因 荧光原位杂交(FISH)

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不同饲养条件下内蒙古绒山羊瘤胃甲烷菌组成的研究 被引量：4

7

作者 李长青 金海 栗原光规 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2010年第5期228-233,共6页

为了解天然放牧和舍饲条件下内蒙古绒山羊瘤胃中甲烷菌的种群组成。选取甲烷菌mcrA基因的特异性引物序列,利用PCR技术对从瘤胃液中抽提的细菌总DNA进行扩增,并建立了甲烷菌特异性的mcrA基因文库。用限制性内切酶Taq I对该文库特异性片... 为了解天然放牧和舍饲条件下内蒙古绒山羊瘤胃中甲烷菌的种群组成。选取甲烷菌mcrA基因的特异性引物序列,利用PCR技术对从瘤胃液中抽提的细菌总DNA进行扩增,并建立了甲烷菌特异性的mcrA基因文库。用限制性内切酶Taq I对该文库特异性片段进行了限制性酶切片断长度多态性分析(Restriction fragment lengthpolymor-phism,RFLP)。放牧和舍饲内蒙古绒山羊瘤胃中甲烷菌的mcrA基因片段被分成6个不同的RFLP类型,并由此建立了DNA指纹图谱;系统发育树分析表明,其属于甲烷杆菌目和甲烷微菌目,且绒山羊瘤胃中的甲烷菌大部分属于甲烷短杆菌。放牧绒山羊瘤胃内甲烷菌种类比舍饲绒山羊更加丰富,6种甲烷菌所占比例均较高,而舍饲绒山羊只有两种优势菌比例较高,其他几种所占比例极低。 展开更多

关键词 甲烷菌 mcrA基因 瘤胃液 绒山羊

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葡聚糖外切酶和葡聚糖内切酶基因密码子的优化及表达 被引量：3

8

作者 苏少锋 萨初拉 +5 位作者 刘红葵 赵小庆 吴青海 其布日 王蕴华 呼和 《畜牧与饲料科学》 2017年第3期1-8,共8页

[目的]合成经过密码子优化的葡聚糖外切酶和葡聚糖内切酶基因,并将2个基因在乳酸乳球菌(Lactococcus lactis,L.lactis)中进行分泌表达。[方法]对瘤胃真菌(Piromyces rhizinflatus,P.rhizinflatus)的外切葡聚糖酶cbhYW23-1基因(Gen Bank... [目的]合成经过密码子优化的葡聚糖外切酶和葡聚糖内切酶基因,并将2个基因在乳酸乳球菌(Lactococcus lactis,L.lactis)中进行分泌表达。[方法]对瘤胃真菌(Piromyces rhizinflatus,P.rhizinflatus)的外切葡聚糖酶cbhYW23-1基因(Gen Bank登录号:EU314937.1)和产琥珀酸丝状杆菌(Fibrobacter succinogenes,F.succinogenes)的内切葡聚糖酶end-1基因(Gen Bank登录号:X88561.1)进行L.lactis MG1363密码子偏爱性优化,并在2个基因的上游和下游分别引入ClaⅠ/XbaⅠ和Hind Ⅲ酶切位点,得到含有优化的cbhYW23-1基因和end-1基因的克隆载体p UC57-cbhYW23-1和p UC57-end-1;通过酶切后分别连接到构建的组成型分泌载体p MG36e+P32+SPusp45上,得到2个基因的表达载体,然后电转至L.lactis MG1363中,利用红霉素抗性筛选得到高拷贝转化重组子;以CMC-Na(羧甲基纤维素钠)为底物验证其活性及表达情况。[结果]成功地构建了cbhYW23-1基因和end-1基因的分泌型表达载体,2个基因均能够在L.lactis MG1363中高效稳定表达,2株重组菌株表达的外切葡聚糖酶酶活和内切葡聚糖酶酶活分别为118.80 U/mL和294.32 U/mL。[结论]密码子优化后的2个纤维素酶基因在L.lactis中获得理想稳定的表达,其高效基因工程菌的构建为将来实现这2种纤维素酶的工业化生产奠定了技术基础。 展开更多

关键词 外切葡聚糖酶 内切葡聚糖酶 克隆 密码子优化 功能表达

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沙拐枣属植物的研究进展 被引量：2

9

作者 王力伟 房永雨 +1 位作者 何江峰 刘红葵 《畜牧与饲料科学》 2016年第12期48-52,共5页

沙拐枣属植物(Calligonum L.)作为我国荒漠地区的一种固沙造林先锋树种,具有抗旱、耐高温、耐瘠薄、抗风蚀沙埋、繁殖容易、适应性强、生长迅速、对干旱和流沙具有特殊适应性等特点。从种类分布、繁殖技术、化学成分、抗逆分子生物学及... 沙拐枣属植物(Calligonum L.)作为我国荒漠地区的一种固沙造林先锋树种,具有抗旱、耐高温、耐瘠薄、抗风蚀沙埋、繁殖容易、适应性强、生长迅速、对干旱和流沙具有特殊适应性等特点。从种类分布、繁殖技术、化学成分、抗逆分子生物学及生态特性等方面对沙拐枣属植物的研究进展进行了综述,旨在为沙拐枣的荒漠治理、抗逆机理、基因资源挖掘等研究奠定基础。 展开更多

关键词 沙拐枣 抗逆性 固沙 研究进展

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植物乳杆菌H18抑制4-NQO基因毒性功能的研究 被引量：1

10

作者 吴青海 萨初拉 +3 位作者 苏少锋 其布日 三月 呼和 《畜牧与饲料科学》 2017年第1期6-10,共5页

旨在评价植物乳杆菌H18对4-硝基喹啉-1-氧化物(4-NQO)基因毒性的抑制作用。利用SOS显色反应对指示菌E.coli PQ37进行验证,确定其产生β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶的性能;通过测定植物乳杆菌H18与4-NQO共培养体系中β-半乳糖苷酶的活性,评... 旨在评价植物乳杆菌H18对4-硝基喹啉-1-氧化物(4-NQO)基因毒性的抑制作用。利用SOS显色反应对指示菌E.coli PQ37进行验证,确定其产生β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶的性能;通过测定植物乳杆菌H18与4-NQO共培养体系中β-半乳糖苷酶的活性,评价植物乳杆菌H18抑制4-NQO基因毒性的能力。结果显示,一定浓度的4-NQO能够诱导E.coli PQ37表达β-半乳糖苷酶和组成型碱性磷酸酶;当4-NQO的浓度范围在0~333.33 ng/m L时,E.coli PQ37的组成型碱性磷酸酶活性保持稳定状态(11.95~14.40 U),表明选取的4-NQO浓度范围合适,可以开展后续试验;植物乳杆菌H18与3个浓度的4-NQO共培养后,均降低了共培养体系中E.coli PQ37的β-半乳糖苷酶活性,其中植物乳杆菌H18对83.33 ng/m L的4-NQO基因毒性的抑制率在3个4-NQO设定浓度中最高,为42.87%,不属于高抗突变菌株。综上表明,植物乳杆菌H18能够降低4-NQO的基因毒性。 展开更多

关键词 植物乳杆菌 4-硝基喹啉-1-氧化物 基因毒性 SOS显色反应

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基因工程技术的发展及其在农作物上的应用

11

作者 刘红葵 何江峰 《畜牧与饲料科学》 2012年第10期21-23,共3页

对基因工程技术的发展历程进行了概述,总结了不同的转基因方法;对基因工程技术在农作物上的应用进行了阐述;分析了转基因技术目前存在的问题,并对其发展前景进行了展望。

关键词 基因工程技术 转基因方法 农作物 应用

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植物乳杆菌野生质粒分析及其提取方法的优化

12

作者 萨初拉 苏少锋 +5 位作者 吴青海 其布日 高娃 王蕴华 刘红葵 呼和 《畜牧与饲料科学》 2018年第11期6-9,共4页

乳酸菌质粒提取研究具有很长的历史。目前已有多个有效的乳酸菌质粒提取方法被报道,其中多数以乳酸球菌为研究对象,而植物乳杆菌质粒提取有效方法报道较少。该研究以植物乳杆菌为研究对象,通过对比分析并优化已报道的乳酸菌质粒提取方法... 乳酸菌质粒提取研究具有很长的历史。目前已有多个有效的乳酸菌质粒提取方法被报道,其中多数以乳酸球菌为研究对象,而植物乳杆菌质粒提取有效方法报道较少。该研究以植物乳杆菌为研究对象,通过对比分析并优化已报道的乳酸菌质粒提取方法,得到了高效且适于平台期植物乳杆菌野生质粒的提取方法。通过该方法进一步分析了植物乳杆菌野生质粒数和高拷贝质粒,为后续构建植物乳杆菌表达系统所需供体质粒和受体菌株提供了重要依据。 展开更多

关键词 植物乳杆菌 质粒 提取 优化

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燕麦种子萌发期抗旱能力的综合评价 被引量：13

13

作者 王力伟 付晓峰 +5 位作者 房永雨 刘红葵 王蕴华 张志芬 刘俊青 何江峰 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期692-702,共11页

为了研究不同燕麦材料的抗旱能力,以83份燕麦为试验对象,以200g/L聚乙二醇(PEG-6000)进行胁迫处理,测定各燕麦品种的相对发芽势、相对发芽率、发芽指数、种子萌发率、发芽势和发芽率共6个形态指标,通过计算并绘制韦恩图,筛选出9份抗旱... 为了研究不同燕麦材料的抗旱能力,以83份燕麦为试验对象,以200g/L聚乙二醇(PEG-6000)进行胁迫处理,测定各燕麦品种的相对发芽势、相对发芽率、发芽指数、种子萌发率、发芽势和发芽率共6个形态指标,通过计算并绘制韦恩图,筛选出9份抗旱性较强的燕麦材料。进一步对9份燕麦萌发期的丙二醛(MDA)质量摩尔浓度、脯氨酸(Pro)质量分数、过氧化物酶(POD)活性及超氧化物歧化酶(SOD)活性进行测定。在主成分分析的基础上,利用加权隶属函数法构建燕麦萌发期抗旱性的综合评价体系,探究燕麦种子萌发的抗旱评价指标。通过两种指标同时检测和相互映证,建立萌发期燕麦抗旱综合评价体系,研究结果表明‘2010-48’和‘H44’为强抗旱品种;‘2010-5’和‘04-111’为中抗旱品种;‘ly05-2’‘05-22’‘06-31’‘2010-26’‘05-34’为弱抗旱品种。 展开更多

关键词 裸燕麦 干旱胁迫 萌发期 隶属函数 生理指标

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微生物青贮添加剂研究进展 被引量：12

14

作者 萨初拉 苏少锋 +4 位作者 吴青海 其布日 高娃 赵俊利 呼和 《畜牧与饲料科学》 2020年第1期48-55,共8页

青贮制备技术的发展与人类农牧历史紧密相关。青贮作为家畜尤其是反刍动物的重要饲料来源,如何充分发挥其营养价值、提升家畜生产性能,一直是动物饲料科学方面的研究热点。青贮添加剂的出现为实现这一目标提供了机遇。目前,许多种类的... 青贮制备技术的发展与人类农牧历史紧密相关。青贮作为家畜尤其是反刍动物的重要饲料来源,如何充分发挥其营养价值、提升家畜生产性能,一直是动物饲料科学方面的研究热点。青贮添加剂的出现为实现这一目标提供了机遇。目前,许多种类的微生物青贮添加剂已实现商品化,并且制备开发的新型添加剂也在不断涌现。围绕现有青贮微生物添加剂的发展历史、主要类型、发展现状与发展前景等方面进行了综述,以期为进一步开发新型优良微生物添加剂提供参考。 展开更多

关键词 青贮 微生物 添加剂

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干旱胁迫和复水处理后梭梭转录因子的转录组分析 被引量：6

15

作者 何江峰 王力伟 +3 位作者 房永雨 王蕴华 王朝 刘红葵 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2020年第1期36-43,共8页

为了探明梭梭应对干旱胁迫和水分刺激的分子调控机理,利用高通量测序技术对正常浇水(对照,CK)、干旱胁迫组(轻度干旱胁迫组,LWS;中度干旱胁迫组,MWS;重度干旱胁迫组,SWS)和复水组(RSWS)梭梭的转录组和转录因子表达谱进行分析。结果表明... 为了探明梭梭应对干旱胁迫和水分刺激的分子调控机理,利用高通量测序技术对正常浇水(对照,CK)、干旱胁迫组(轻度干旱胁迫组,LWS;中度干旱胁迫组,MWS;重度干旱胁迫组,SWS)和复水组(RSWS)梭梭的转录组和转录因子表达谱进行分析。结果表明:数据经de novo拼接共获得74641条非冗余Unigene,N50长度1537 bp,对转录组数据比对、注释后共检测到56个转录因子家族、1307个转录因子编码基因。与对照组相比,干旱胁迫组和复水组中的差异表达基因均以下调表达方式为主,其中,AP2-EREBP、MYB、bHLH、WRKY、NAC、ABI3VP1家族基因在各胁迫组中均表达且表达数较多。复水组中偏向通过增加AP2-EREBP、WRKY和NAC家族上调编码基因数量来实现梭梭幼苗对水分刺激的应答调节;而干旱组更偏向下调AP2-EREBP和bHLH的编码基因数量来实现幼苗对干旱胁迫的响应。干旱组和复水组测序结果的表达量(FPKM)与用荧光定量PCR法得到的基因表达量之间的相关性分别为0.9478(P<0.01),0.9672(P<0.01),结果证实了2种处理产生的差异表达基因数据的有效性。综合而言,AP2-EREBP、MYB和bHLH转录因子家族成员对梭梭干旱胁迫具有正负调控的作用。 展开更多

关键词 梭梭 转录因子 转录组测序 干旱胁迫 差异表达

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内蒙古胡麻地方品种资源遗传多样性分析 被引量：5

16

作者 伊六喜 斯钦巴特尔 +5 位作者 高凤云 周宇 贾霄云 陈明哲 张辉 贾海滨 《作物杂志》 CAS 北大核心 2018年第6期53-57,共5页

为了揭示内蒙古胡麻地方品种的遗传多样性和亲缘关系,采用SRAP分子标记对23份胡麻地方品种进行了遗传多样性分析。结果表明:胡麻25.0μL SRAP-PCR最佳反应体系为10μmol/L正反向引物0.3μL、2×Taq Master Mix 9.0μL、DNA模板量40n... 为了揭示内蒙古胡麻地方品种的遗传多样性和亲缘关系,采用SRAP分子标记对23份胡麻地方品种进行了遗传多样性分析。结果表明:胡麻25.0μL SRAP-PCR最佳反应体系为10μmol/L正反向引物0.3μL、2×Taq Master Mix 9.0μL、DNA模板量40ng;18对SRAP引物扩增得到219个条带,平均每对引物扩增的条带为12.17,多态性条带为136,多态性比率为62.10%,观测等位基因数为2.00,平均每个位点有效等位基因数1.59,多态性信息量(PIC)平均为0.61;有效等位基因数(N_e)、香农信息指数(Ⅰ)和Nei’s遗传相似系数(H)分别为1.5630、0.6715和0.4738;在遗传相似系数0.55处供试胡麻分为两大类,在遗传相似系数0.38处,第一大类群分为3个亚群。结论认为,内蒙古胡麻地方品种的遗传多样性丰富,同一个地区培育的胡麻品种亲缘关系较近。 展开更多

关键词 胡麻 内蒙古地区 遗传多样性 SRAP

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高丹草叶片总蛋白双向电泳体系的建立 被引量：4

17

作者 韩平安 李晓东 +2 位作者 石海波 王良 牟英男 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期2322-2327,共6页

本研究以杂种高丹草及其亲本为试材,分别采用2种方法(三氯乙酸丙酮沉淀法,丙酮沉淀法)提取高丹草叶片总蛋白,并对IPG胶条的pH范围、蛋白上样量进行了优化。研究结果表明:与三氯乙酸丙酮沉淀法相比,丙酮沉淀法更适合高丹草叶片总蛋白的提... 本研究以杂种高丹草及其亲本为试材,分别采用2种方法(三氯乙酸丙酮沉淀法,丙酮沉淀法)提取高丹草叶片总蛋白,并对IPG胶条的pH范围、蛋白上样量进行了优化。研究结果表明:与三氯乙酸丙酮沉淀法相比,丙酮沉淀法更适合高丹草叶片总蛋白的提取;采用17 cm pH 4~7 IPG胶条,上样量为800μg,构建了背景清晰,分辨率高,重复性好的高丹草双向电泳图谱,为后期高丹草差异蛋白质组学研究提供良好的技术支撑。 展开更多

关键词 高丹草 叶片 蛋白质组 双向电泳

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利用农杆菌介导法将抗草甘膦基因转入玉米自交系H99的研究 被引量：4

18

作者 韩平安 吴新荣 +7 位作者 孙瑞芬 石海波 薛春雷 常悦 唐宽刚 梁亚晖 任芹勇 李晓东 《北方农业学报》 2020年第2期21-26,共6页

【目的】利用转基因手段培育抗除草剂玉米品种以解决草害问题。【方法】采用农杆菌介导法对玉米自交系H99的幼胚进行遗传转化研究,进行单因素试验,分别设置不同胚的大小、农杆菌的菌液浓度和共培养时间处理,比较分析转基因幼胚GUS的瞬... 【目的】利用转基因手段培育抗除草剂玉米品种以解决草害问题。【方法】采用农杆菌介导法对玉米自交系H99的幼胚进行遗传转化研究,进行单因素试验,分别设置不同胚的大小、农杆菌的菌液浓度和共培养时间处理,比较分析转基因幼胚GUS的瞬时表达率。【结果】幼胚大小1.5~2.0 mm、农杆菌的侵染浓度OD_(600)为0.4、侵染5 min、共培养3 d,GUS的瞬时表达率最高。PCR检测证明成功获得7株阳性转基因苗,且抗性鉴定实验证明转基因苗具有草铵膦抗性。【结论】为玉米转基因技术体系优化和培育抗除草剂新品种提供了理论参考。 展开更多

关键词 玉米 抗草甘膦基因(EPSPS) 农杆菌介导法 遗传转化 GUS染色

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蒙古马盲肠中纤维素分解菌的筛选、鉴定及酶学特性分析 被引量：2

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作者 李雅静 宋海燕 +5 位作者 苏少锋 其日格日 陶金山 张建强 芒来 赵一萍 《饲料工业》 CAS 北大核心 2022年第1期52-58,共7页

为研究蒙古马耐粗饲料的优良特点,试验以蒙古马盲肠内容物为研究对象,旨在筛选、分离出高效的蒙古马源纤维素分解菌株,并对分离菌株进行鉴定和酶学特性分析。采用羧甲基纤维素平板法和摇瓶发酵法分离菌株并鉴定菌株类型。最后,通过测定... 为研究蒙古马耐粗饲料的优良特点,试验以蒙古马盲肠内容物为研究对象,旨在筛选、分离出高效的蒙古马源纤维素分解菌株,并对分离菌株进行鉴定和酶学特性分析。采用羧甲基纤维素平板法和摇瓶发酵法分离菌株并鉴定菌株类型。最后,通过测定纤维素酶活力分析菌株在不同pH、温度、碳源和氮源条件下的酶学特性。研究从蒙古马盲肠内容物中分离筛选到具有较高降解纤维素能力的解淀粉芽孢杆菌H3(Bacillus amyloliquefaciens H3)。菌株H3分泌纤维素酶的最适p H为4.8,在p H 3.0~8.0范围内,其酶活力相对稳定;在温度为65℃,酶活力最高,当温度为40~50℃时,该酶活力维持在80%左右,稳定性强。此外,H3发酵所需的最佳碳源为玉米粉,最佳氮源为2%的蛋白胨+酵母粉复合物(1:1),它具有相对较高的纤维素酶活力,有深入开发的潜力。 展开更多

关键词 蒙古马 纤维素分解菌 盲肠 纤维素酶 酶学特性

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葡萄F1代杂交种的SRAP分子标记鉴定 被引量：2

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作者 耿牡丹 刘俊 +4 位作者 孙瑞芬 赵镒 石慧芹 苏慧明 金珂 《北方农业学报》 2019年第5期76-81,共6页

葡萄在遗传上高度杂合,从分子水平上对葡萄杂交后代的真伪性进行早期、快速鉴定,旨在为加速葡萄种质创制提供辅助手段。采用SRAP分子标记技术对3对葡萄杂交组合红提×红玫瑰、红提×贝达和红提×贵妃的8个F1代实生苗进行了... 葡萄在遗传上高度杂合,从分子水平上对葡萄杂交后代的真伪性进行早期、快速鉴定,旨在为加速葡萄种质创制提供辅助手段。采用SRAP分子标记技术对3对葡萄杂交组合红提×红玫瑰、红提×贝达和红提×贵妃的8个F1代实生苗进行了杂种真实性鉴定。从196对SRAP-PCR引物中筛选出10对可以在红提与贝达间产生清晰、稳定的多态性条带的引物,其中有4对引物能够区别红提与红玫瑰,有4对引物能够区别红提与贵妃;各选取3对引物分别对3对杂交组合的F1代实生苗进行鉴定。结果表明:8个F1代实生苗均为真杂种。该研究为利用SRAP标记技术有效、快速鉴定葡萄杂种后代提供依据。 展开更多

关键词 葡萄 SRAP分子标记 杂交种鉴定

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