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基因芯片技术 被引量：28
1
作者 冯永强 阎小君 苏成芝 《国外医学（分子生物学分册）》 CSCD 2000年第1期1-5,共5页
基因芯片技术是同时将大量的探针分子固定到固相支持物上,借助核酸分子杂交配对的特性对DNA样品的序列信息进行高效的解读和分析。它可用于基因表达谱的分析、突变检测、多态性分析、基因测序和基因组文库作图等研究工作,同时在人类疾... 基因芯片技术是同时将大量的探针分子固定到固相支持物上,借助核酸分子杂交配对的特性对DNA样品的序列信息进行高效的解读和分析。它可用于基因表达谱的分析、突变检测、多态性分析、基因测序和基因组文库作图等研究工作,同时在人类疾病的检测、预防等方面也具有广阔的潜在应用价值,在未来的生命科学领域中必将发挥重要的作用。 展开更多
关键词 基因芯片 遗传工程
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结肠癌中p73基因改变的意义 被引量：16
2
作者 李陕区 崔大祥 +5 位作者 刘变英 闫小君 孙安乐 郭宴海 段杰 苏成芝 《第四军医大学学报》 2000年第3期314-316,共3页
目的　研究 p73基因在结肠癌中的改变及其意义 .方法　采用 PCR- SSCP方法检测 40例结肠癌及其癌旁非癌组织中 p73基因突变 ,采用定量 RT- PCR方法检测 p73基因的表达 .结果　 1PCR- SSCP检测出 7例存在 p73等位基因缺失 ,未见突变 ;2定... 目的　研究 p73基因在结肠癌中的改变及其意义 .方法　采用 PCR- SSCP方法检测 40例结肠癌及其癌旁非癌组织中 p73基因突变 ,采用定量 RT- PCR方法检测 p73基因的表达 .结果　 1PCR- SSCP检测出 7例存在 p73等位基因缺失 ,未见突变 ;2定量 RT- PCR检测出 33例结肠癌呈高表达 ,7例呈中等表达 ;非癌组织中 2 6例呈低水平表达 ,14例呈中等水平表达 ;p73基因在结肠癌与癌旁组织中的表达存在显著性差异 (P<0 .0 1) .结论　 p73基因以等位基因缺失。 展开更多
关键词 结肠癌 P73基因 定量RT-PCR
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p53抗癌基因和消化系肿瘤 被引量：21
3
作者 许昌泰 闫小君 《世界华人消化杂志》 CAS 1999年第1期77-79,共3页
癌基因概述癌基因显性作用与抗癌基因的失活是肿瘤发生的分子基础．现认为，肿瘤是多种癌基因多阶段途径协同作用的结果［１－４］．癌基因（ｏｎｃｏｇｅｎｅ）是指细胞内或病毒内存在的，能诱导正常细胞发生转化，使正常细胞获得一个... 癌基因概述癌基因显性作用与抗癌基因的失活是肿瘤发生的分子基础．现认为，肿瘤是多种癌基因多阶段途径协同作用的结果［１－４］．癌基因（ｏｎｃｏｇｅｎｅ）是指细胞内或病毒内存在的，能诱导正常细胞发生转化，使正常细胞获得一个或多个新生物特性的基因，１９６８年... 展开更多
关键词 消化系统肿瘤 P53基因 基因表达 基因突变
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HPV检测在宫颈癌预警和筛查中的研究 被引量：21
4
作者 张菊 高艳娥 +1 位作者 赵锦荣 闫小君 《国外医学（妇产科学分册）》 2003年第5期319-322,共4页
人乳头瘤病毒(HPV)感染与宫颈癌发生密切相关,该病毒感染的检测对宫颈癌的筛查和预警有重要意义。综述近年宫颈癌筛查中 HPV DNA的检测方法和HPV感染的病毒学、血清学追踪调查、宫颈癌前、癌变相关分子标志的研究进展,以及HPV检测在宫... 人乳头瘤病毒(HPV)感染与宫颈癌发生密切相关,该病毒感染的检测对宫颈癌的筛查和预警有重要意义。综述近年宫颈癌筛查中 HPV DNA的检测方法和HPV感染的病毒学、血清学追踪调查、宫颈癌前、癌变相关分子标志的研究进展,以及HPV检测在宫颈癌筛查中的地位、临床应用前景。 展开更多
关键词 HPV检测 宫颈癌 预警 筛查 研究 人乳头瘤病毒
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p73基因在肺癌组织中的表达 被引量：13
5
作者 黄立军 王云杰 +2 位作者 崔大祥 刘锟 程庆书 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第1期49-52,共4页
目的：探讨ｐ７３基因在肺癌组织中的表达情况。方法：采用定量ＲＴ－ＰＣＲ技术检测４０例肺癌及其癌旁肺组织中ｐ７３基因的表达程度；采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术检测肺癌与癌旁组织中ｐ７３基因的突变情况。结果：①定量ＲＴ－ＰＣＲ... 目的：探讨ｐ７３基因在肺癌组织中的表达情况。方法：采用定量ＲＴ－ＰＣＲ技术检测４０例肺癌及其癌旁肺组织中ｐ７３基因的表达程度；采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术检测肺癌与癌旁组织中ｐ７３基因的突变情况。结果：①定量ＲＴ－ＰＣＲ检出ｐ７３基因在２４例肺癌中呈中高表达，在癌旁组织中未检出高表达。ｐ７３基因在肺癌与癌旁组织中的表达率之间存在显著性差异（Ｐ＜０．０１）；在１９例中高分化标本中检出９例呈中高表达，在２１例低分化标本中检出１５例呈中高表达，两者之间存在显著性差异（Ｐ＜ ０．０１）；ｐ７３基因表达程度在１５例肺癌Ⅰ～Ⅱ期标本检出 ９例呈中高表达，２５例Ⅲ～Ⅳ期标本中检出１５例呈中高表达，两者之间无显著差异（Ｐ＞ ０．０５）。②等位基因表达分析示ｐ７３基因在１２例杂合标本肺癌组织中１０例存在Ｇ／Ｃ：Ａ／Ｔ双等位基因表达，在癌旁组织中皆为Ｇ／Ｃ表达，未见Ａ／Ｔ表达。③ＰＣＲ－ＳＳＣＰ未检出ｐ７３基因突变。结论：ｐ７３基因ｍＲＮＡ的表达可能与肺癌分化程度有关，与临床分期无关。 展开更多
关键词 肺肿瘤 P73基因 聚合酶链反应 杂合性分析
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乙脑病毒核酸诊断方法的建立及应用 被引量：7
6
作者 郭进军 张国英 +1 位作者 赵中夫 阎小君 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第5期67-69,共3页
目的　建立一种新的乙脑病毒基因诊断方法 ,并进行大样本检测。方法　使用一步反转录巢式PCR进行乙脑患者血液及脑脊液的病毒核酸检测 ,并与 2 -巯基乙醇耐性试验进行对比检测。结果　 2 16例乙脑就诊患者血清的PCR阳性率为 77.8% ,2 -M... 目的　建立一种新的乙脑病毒基因诊断方法 ,并进行大样本检测。方法　使用一步反转录巢式PCR进行乙脑患者血液及脑脊液的病毒核酸检测 ,并与 2 -巯基乙醇耐性试验进行对比检测。结果　 2 16例乙脑就诊患者血清的PCR阳性率为 77.8% ,2 -ME阳性率为 4 5 .3 7% ,脑脊液的PCR阳性率为 93 .2 0 % ,2 -ME阳性率为 3 7.3 8% ,有显著性差异。对不同病程日乙脑患者的检测 ,在初期和极期早期PCR的阳性检测率高 ,在极期后期和恢复期 2 -ME的阳性检测率高。结论　PCR法为一种适合于乙脑早期特异性诊断的新型基因诊断技术。 展开更多
关键词 乙型脑炎 聚合酶链反应 PCR 免疫学 诊断学 核酸
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Ndrg2基因及NDRG2蛋白的生物信息学分析 被引量：9
7
作者 张文红 刘新平 +2 位作者 王琰 韩月恒 药立波 《第四军医大学学报》 北大核心 2003年第17期1537-1539,共3页
目的 :对ndrg2 (n mycdownsreamregulatorgene 2 )基因调控区和NDRG2蛋白序列进行生物信息学分析 ,从结构上预测其功能 .方法 :运用internet网络上的数据库及程序 ,对ndrg2基因的调控区和NDRG2蛋白的二级结构进行生物信息学分析 .结果 :... 目的 :对ndrg2 (n mycdownsreamregulatorgene 2 )基因调控区和NDRG2蛋白序列进行生物信息学分析 ,从结构上预测其功能 .方法 :运用internet网络上的数据库及程序 ,对ndrg2基因的调控区和NDRG2蛋白的二级结构进行生物信息学分析 .结果 :ndrg2基因调控区存在多种转录因子结合位点 ,功能主要涉及组织特异性表达调控 ,细胞生长发育相关基因和应激反应基因的表达调控等 ;NDRG2蛋白的结构属于α/β水解酶类折叠 ,其分类预测表明与细菌环氧化物水解酶的二级结构极为相似 .结论 :生物信息学分析提示NDRG2蛋白具有一定的酶活性 ,可能参与细胞抗氧化应激反应 ,内外源有毒物质的代谢 。 展开更多
关键词 NDRG2基因 NDRG2蛋白 生物信息学分析 α/β水解酶
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外源核酸促核辐射鼠肠腺细胞修复的基因分析 被引量：14
8
作者 崔大祥 曾桂英 +6 位作者 王枫 田芙蓉 郭晏海 徐俊荣 闫小君 任东清 苏成芝 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第3期353-357,共5页
初步探讨外源核酸促电离辐射损伤的小鼠肠腺细胞修复的分子机理 .建立BALB/c小鼠电离辐射后给予外源RNA与生理盐水治疗的 6h、 12h、 2 4h、 4d和 8d的模型 ,采集空肠组织标本后采用消减杂交基础上的LD PCR技术 ,获取与受照小鼠肠腺损... 初步探讨外源核酸促电离辐射损伤的小鼠肠腺细胞修复的分子机理 .建立BALB/c小鼠电离辐射后给予外源RNA与生理盐水治疗的 6h、 12h、 2 4h、 4d和 8d的模型 ,采集空肠组织标本后采用消减杂交基础上的LD PCR技术 ,获取与受照小鼠肠腺损伤修复相关的基因克隆 ,对其进行全自动序列分析与GenBank检索 . 6h治疗组同源性较高的序列主要为 :热休克蛋白mRNA、NmimRNA、Dutt1蛋白mRNA、Na ,K ATPaseγ亚单位mRNA等 ;12h治疗组同源性较高的序列为 :碱性磷酸酶mRNA、碱性磷酸酶 2、glkA基因、单链复制着丝粒基因等 ;2 4h治疗组同源性较高的序列为 :抗CEA单链抗体重链可变区基因、抗DNA重链可变区基因、Igkappa链mRNA等 ;4d治疗组同源性较高的序列为 :双特异性磷酸酶、端粒酶相关蛋白家族mRNA、β GABA转运基因、紧张激活蛋白mRNA、FK5 0 6结合蛋白、Ca2 +/Ca2 +调蛋白依赖性基因等 ;8d治疗组同源性较高的序列为 :免疫球蛋白可变区基因、鼠免疫球蛋白DNA、易弯曲肽DNA、tsrglkA基因、修复蛋白A等 .新发现的 18个基因片段递交给GeneBank ,接受号为AF2 40 16 4 AF2 40 181.结果表明 :外源核酸促电离辐射损伤的小鼠肠腺修复的机理可能与一些基因、蛋白质的异常表达有关 ,与免疫系统的作用可能有关 . 展开更多
关键词 小鼠 电离辐射 细胞修复 表达基因 外源核酸 肠道辐射损伤
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新型Taq Man-MGB探针在结核分枝杆菌实时PCR检测中的应用 被引量：11
9
作者 赵锦荣 白玉杰 +4 位作者 罗明 张庆华 郭晏海 张菊1 阎小君 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期807-810,共4页
为建立一种比现有方法敏感、准确性高、重复性好的结核分枝杆菌DNA定性定量检测方法 ,以TaqMan探针技术为基础 ,运用TaqMan MGB探针 ,实时检测临床标本中的结核分枝杆菌DNA .用来自临床标本的DNA及克隆于载体的IS6 1 1 0序列检测所建立... 为建立一种比现有方法敏感、准确性高、重复性好的结核分枝杆菌DNA定性定量检测方法 ,以TaqMan探针技术为基础 ,运用TaqMan MGB探针 ,实时检测临床标本中的结核分枝杆菌DNA .用来自临床标本的DNA及克隆于载体的IS6 1 1 0序列检测所建立方法的有效性 .结果显示 ,所建立方法的最低检测限度为 1个基因拷贝 反应 ,在每反应 1 0 0 ～ 1 0 8拷贝范围内 ,Ct 值同DNA量的对数呈线性关系 .同一模板不同时间或同一时间不同管内扩增 ,所得Ct 值恒定 .用该方法检测 37例结核分枝杆菌培养阳性的痰液标本 ,敏感度为 1 0 0 % ;用该方法检测 1 6例TB系列阴性参考品 ,特异性为1 0 0 % .结果表明 。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 聚合酶链式反应 荧光定量PCR TAQMAN-MGB探针
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mRNA差异展示PCR的进展 被引量：11
10
作者 崔大祥 闫小君 苏成芝 《生命的化学》 CAS CSCD 1997年第4期39-41,共3页
ｍＲＮＡ差异展示ＰＣＲ的进展崔大祥闫小君苏成芝（第四军医大学全军基因诊断技术应用研究所，西安７１００３２）关键词ｍＲＮＡ差异展示聚合酶链反应ｍＲＮＡ差异展示（ｍＲＮＡｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｌｄｉｓｐｌａｙ，ＤＤ）是目前... ｍＲＮＡ差异展示ＰＣＲ的进展崔大祥闫小君苏成芝（第四军医大学全军基因诊断技术应用研究所，西安７１００３２）关键词ｍＲＮＡ差异展示聚合酶链反应ｍＲＮＡ差异展示（ｍＲＮＡｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｌｄｉｓｐｌａｙ，ＤＤ）是目前筛选差异表达基因最有效的方法，自１... 展开更多
关键词 MRNA 差异展示 聚合酶链反应
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幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A及细胞空泡毒素A的研究 被引量：13
11
作者 韩锋产 阎小君 苏成芝 《华人消化杂志》 1998年第2期160-161,共2页
幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白Ａ及细胞空泡毒素Ａ的研究韩锋产阎小君苏成芝Ｓｕｂｊｅｃｔｈｅａｄｉｎｇｓｂａｃｔｅｒｉａｌｐｒｏｔｅｉｎ／ａｎａｌｙｓｉｓ；Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ；ｃｙｔｏｔｏｘｉｎｓ／ａｎ... 幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白Ａ及细胞空泡毒素Ａ的研究韩锋产阎小君苏成芝Ｓｕｂｊｅｃｔｈｅａｄｉｎｇｓｂａｃｔｅｒｉａｌｐｒｏｔｅｉｎ／ａｎａｌｙｓｉｓ；Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ；ｃｙｔｏｔｏｘｉｎｓ／ａｎａｌｙｓｉｓ主题词细菌蛋白质类／分... 展开更多
关键词 细胞蛋白质类 幽门螺杆菌 细胞毒素
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人食管鳞状细胞癌标本中乳头状瘤病毒DNA的检测 被引量：11
12
作者 马群风 江红 +4 位作者 冯永强 王小平 周勇安 刘锟 贾再利 《世界华人消化杂志》 CAS 2000年第11期1218-1224,共7页
目的食管鳞状细胞癌有明显的地域性差异,它的发生与遗传、环境、饮食和某些微生物的感染有密切的关系,本研究通过检测食管鳞状细胞癌和相应正常食管组织中 HPV-11型和HPV-16型的 DNA,阐明 HPV 与食管鳞状细胞癌的关系.方法用 PCR 的方... 目的食管鳞状细胞癌有明显的地域性差异,它的发生与遗传、环境、饮食和某些微生物的感染有密切的关系,本研究通过检测食管鳞状细胞癌和相应正常食管组织中 HPV-11型和HPV-16型的 DNA,阐明 HPV 与食管鳞状细胞癌的关系.方法用 PCR 的方法检测22位食管鳞状细胞癌患者手术切除的癌组织和相应癌旁正常食管粘膜(共44例标本)中的HPV-11型和 HPV-16型 DNA 的存在情况,并对其中一例 HPV阳性肿瘤标本的 HPV 序列进行测定.结果在本组所涉及的22位患者共计44例标本中,对于HPV-11型,12例癌组织为阳性;有7例癌旁组织为阳性;癌组织和癌旁组织均为阳性的有6例.对于 HPV-16型,6例癌组织为阳性;6例癌旁组织为阳性;癌组织和癌旁组织均为阳性的有3例.序列分析结果表明所测定的序列与 GeneBank 登录的NC001525.1(HPV-11)、M14119.1(HPV-11)和 AF217526.1(HPV-11)的同源性极高,均为99%.结论通过实验结果分析,我们认为食管鳞状细胞癌与 HPV-11型和 HPV-16型主要衣壳蛋白 L1基因密切相关,HPV 可能在一定的地域环境中与食管鳞状细胞癌的发生具有相关性. 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 人乳头状瘤病毒 DNA PCR
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分级定量PCR检测血清HBV DNA 被引量：13
13
作者 郭晏海 任峰玲 +1 位作者 闫小君 苏成芝 《世界华人消化杂志》 CAS 1999年第1期49-51,共3页
目的利用竞争ＰＣＲ法建立分级测定ＨＢＶＤＮＡ含量的定量方法．方法设立３个标准竞争模板（１０２ｃｏｐ，１０４ｃｏｐ，１０６ｃｏｐ），分别和恒量的待测模板混合，分别进行４０，３０，２０次循环的ＰＣＲ扩增，最后凝胶电泳分离... 目的利用竞争ＰＣＲ法建立分级测定ＨＢＶＤＮＡ含量的定量方法．方法设立３个标准竞争模板（１０２ｃｏｐ，１０４ｃｏｐ，１０６ｃｏｐ），分别和恒量的待测模板混合，分别进行４０，３０，２０次循环的ＰＣＲ扩增，最后凝胶电泳分离待测模板和竞争模板的ＰＣＲ产物，测定两者的荧光强度的比值，计算待测模板的初始量．结果对乙型肝炎血清ＨＢＶＤＮＡ定量表明，１２份ＨＢｅＡｇ阳性血清，ＨＢＶＤＮＡ的血清浓度在６×１０７～１×１０１１ｃｏｐ／Ｌ，而１２份ＨＢｅＡｂ阳性血清只有７份可检出ＨＢＶＤＮＡ，它们的血清浓度均在３×１０８ｃｏｐ／Ｌ以下，其余５份用该ＰＣＲ方法，检测不到． 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 DNA 聚合酶链反应
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PPAR-γ_2基因Pro12Ala多态性与2型糖尿病的关联性 被引量：11
14
作者 牛丹 白玉杰 阎小君 《第四军医大学学报》 CAS 北大核心 2004年第16期1506-1509,共4页
目的 :确定中国西北人群中 2型糖尿病 (T2DM )与PPAR γ2 基因Pro1 2Ala多态性的关联性 .方法 :应用模板指导荧光标记终止子结合的荧光偏振 (TDI FP)技术确定PPAR γ2 基因Pro1 2Ala多态性的基因型 .比较基因型及基因频率在两组中的差... 目的 :确定中国西北人群中 2型糖尿病 (T2DM )与PPAR γ2 基因Pro1 2Ala多态性的关联性 .方法 :应用模板指导荧光标记终止子结合的荧光偏振 (TDI FP)技术确定PPAR γ2 基因Pro1 2Ala多态性的基因型 .比较基因型及基因频率在两组中的差异 .结果 :PPAR γ2 基因Pro1 2Ala多态性基因型及基因频率在T2DM组和对照组中分别为 5 .9%和 5 .8% ,无显著性差异 .结论 :TDI FP技术是一种较可靠的新型单核苷酸多态性 (SNP)技术 .在本实验中的中国西北人群中PPAR γ2 基因Pro1 展开更多
关键词 荧光偏振 糖尿病 多态现象(遗传学) 过氧化物酶体增殖物激动受体-γ
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胃癌早期诊断及预警系统的建立 被引量：12
15
作者 闫小君 《世界华人消化杂志》 CAS 1999年第2期96-97,共2页
１胃癌早期诊断的概念１．１胃癌是一种基因病和绝大多数肿瘤一样，胃癌也是由多基因参予的一种渐进积累转化性疾病，这种转化过程是一个长期的细胞生物学行为由正常演变为异常的过程，即由量变到质变的过程．细胞的这种变化首先发生在... １胃癌早期诊断的概念１．１胃癌是一种基因病和绝大多数肿瘤一样，胃癌也是由多基因参予的一种渐进积累转化性疾病，这种转化过程是一个长期的细胞生物学行为由正常演变为异常的过程，即由量变到质变的过程．细胞的这种变化首先发生在基因水平上，当变化涉及到基因表达产... 展开更多
关键词 胃肿瘤 病因学 诊断 基因 预警系统
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mdm2与p53在骨骼肌恶性肿瘤中的改变及其临床意义 被引量：10
16
作者 李丁 崔大祥 +2 位作者 苏海川 闫小君 范清宇 《第四军医大学学报》 2000年第8期1002-1004,共3页
目的　探讨 mdm2与 p5 3基因在骨骼肌恶性肿瘤中的改变及其临床意义 .方法　采用 RNA打点杂交技术分析2 0例骨骼肌恶性肿瘤中的 mdm2与 p5 3基因的表达水平 ,采用 PCR- SSCP技术分析 p5 3基因的突变情况 ,结合随访结果 ,分析其临床意义 ... 目的　探讨 mdm2与 p5 3基因在骨骼肌恶性肿瘤中的改变及其临床意义 .方法　采用 RNA打点杂交技术分析2 0例骨骼肌恶性肿瘤中的 mdm2与 p5 3基因的表达水平 ,采用 PCR- SSCP技术分析 p5 3基因的突变情况 ,结合随访结果 ,分析其临床意义 .结果　 1RNA打点杂交结果 :mdm2基因在 10例恶性肿瘤标本中呈高表达 ,在 8例肿瘤标本与 2 0例瘤旁组织标本中呈低表达 ,mdm2的表达在骨骼肌恶性肿瘤中显著高于瘤旁组织 (P<0 .0 1) ;p5 3基因在 12例骨骼肌肿瘤标本中呈高表达 ,在相应瘤旁组织中呈低表达 ,两者之间存在显著性差异 (P<0 .0 1) ;2 PCR- SSCP未检出 mdm 2基因突变 ,检出 9例肿瘤标本中存在 p5 3基因突变 ;33a随访结果 :9例p5 3突变患者 ,3例死于术后 0 .5 a,4例死于术后 1a,2例死于术后 1.5 a,11例无 p5 3突变患者 ,6例死于术后 2 a,1例死于术后 3a,4例 3a后尚存活 .结论　 mdm2基因以高表达方式 ,p5 3以突变、高表达方式参与骨骼肌恶性肿瘤发生发展 ,检测 mdm2有无高表达与 p5 3有无异常可辅助判断运动系统肿瘤患者的预后 . 展开更多
关键词 骨骼肌肿瘤 MDM2 P53 RNA打点杂交 PCR-SSCP
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斑点金免疫渗滤试验快速检测抗甲型肝炎病毒IgM抗体 被引量：10
17
作者 肖乐义 阎小君 +5 位作者 徐德忠 韩锋铲 苏成芝 候瑜 米明仁 李陕区 《第四军医大学学报》 1996年第6期441-443,共3页
目的：建立胶体金免疫渗滤试验用于快速检测抗甲型肝炎ＩｇＭ抗体．方法：将甲型肝炎抗原固相在硝酸纤维薄膜上，用来捕获血清标本中的ＩｇＭ抗ＨＡＶ，通过胶体金标记抗人ＩｇＭ而显色．斑点色泽鲜艳，结果易于判断．整个试验过程仅需... 目的：建立胶体金免疫渗滤试验用于快速检测抗甲型肝炎ＩｇＭ抗体．方法：将甲型肝炎抗原固相在硝酸纤维薄膜上，用来捕获血清标本中的ＩｇＭ抗ＨＡＶ，通过胶体金标记抗人ＩｇＭ而显色．斑点色泽鲜艳，结果易于判断．整个试验过程仅需２～４ｍｉｎ．结果：用本法与ＥＬＩＳＡ对比检测血清标本２７９份，两法均阳性１４８份，两法均阴性１２５份，总符合率为９７．８％．阻断试验与２－ＭＥ破坏试验证实其结果是特异的．本试验不需任何仪器设备，不受类风湿因子影响．结论：本方法可用于甲型肝炎的早期诊断和流行病学监测． 展开更多
关键词 斑点金免疫渗滤试验 甲型肝炎病毒 免疫球蛋白M
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全自动(定量PCR)基因扩增诊断仪配套定量试剂的研制 被引量：12
18
作者 郭晏海 阎小君 +6 位作者 孟宪润 崔大祥 侯瑜 韩锋产 冯永强 张菊 赵锦荣 《第四军医大学学报》 北大核心 2001年第15期1349-1351,共3页
目的　研制一种能用于仪器操作的灵敏、快速、特异的定量试剂 .方法　使用一个生物素标记的上游引物 ,对HBVDNA及其竞争模板DNA进行不对称PCR扩增 ,使扩增出的单链带有生物素 ,并可结合在固定有链亲合素的微孔板的表面 .用标有辣根过氧... 目的　研制一种能用于仪器操作的灵敏、快速、特异的定量试剂 .方法　使用一个生物素标记的上游引物 ,对HBVDNA及其竞争模板DNA进行不对称PCR扩增 ,使扩增出的单链带有生物素 ,并可结合在固定有链亲合素的微孔板的表面 .用标有辣根过氧化物酶的待测模板探针和竞争模板探针分别与两个微孔中固定的相应单链PCR产物杂交 ,而后加底物显色 ,测定吸光度进行分级定量分析 .结果　该定量方法可以检测 10拷贝数的模板 ,而且对简便处理的标本适应性强 ;以分级定量的形式定量时 ,具有良好的重复性 .结论　该试剂适用于仪器操作 。 展开更多
关键词 定量PCR 探针杂交 定量试剂
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斑点金免疫渗滤试验快速检测抗Hp细胞毒素相关蛋白A抗体 被引量：10
19
作者 韩锋产 阎小君 +4 位作者 张沥 侯瑜 苏成芝 张玲霞 江梅 《华人消化杂志》 1998年第5期407-408,共2页
目的建立快速检测抗幽门螺杆菌（Ｈｐ）细胞毒素相关蛋白Ａ（ＣａｇＡ）的斑点金免疫渗滤试验（ＤＩＧＦＡ）．方法将ＣａｇＡ抗原点于硝酸纤维素膜上，然后依次加入患者血清及用抗人ＩｇＧ抗体标记的胶体金颗粒，如血清中存在抗Ｃａｇ... 目的建立快速检测抗幽门螺杆菌（Ｈｐ）细胞毒素相关蛋白Ａ（ＣａｇＡ）的斑点金免疫渗滤试验（ＤＩＧＦＡ）．方法将ＣａｇＡ抗原点于硝酸纤维素膜上，然后依次加入患者血清及用抗人ＩｇＧ抗体标记的胶体金颗粒，如血清中存在抗ＣａｇＡ的ＩｇＧ，在膜上便出现一个红色斑点．结果ＤＩＧＦＡ仅需几分种便可完成．当用ＤＩＧＦＡ及ＥＩＡ对１０８份血清进行检测时，两种方法之特异性及敏感性相当．当以聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测胃粘膜组织中ＨｐＣａｇＡ的结果作为参照时，ＤＩＧＦＡ的特异性及敏感性分别为９８％（５７／５８）和９４％（４５／４８）．结论ＤＩＧＦＡ特异性强，敏感度高，操作快速且简便。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 细菌抗体 免疫组织化学
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聚合酶链反应荧光偏振技术在乙型肝炎病毒DNA检测中的应用及价值 被引量：10
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作者 郭晏海 张菊 +4 位作者 赵锦荣 白玉杰 李丁 韩峰产 闫小君 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期26-28,共3页
目的　探讨聚合酶链反应荧光偏振技术 (PCR FP)检测乙型肝炎病毒 (HBV)DNA的临床应用价值。方法　将PCR扩增得到的HBVDNA特定片段 ,与荧光素标记探针和PCR产物中的一条DNA链杂交 ,形成特异杂交体 ,用荧光偏振光检测仪检测特异杂交体 ,... 目的　探讨聚合酶链反应荧光偏振技术 (PCR FP)检测乙型肝炎病毒 (HBV)DNA的临床应用价值。方法　将PCR扩增得到的HBVDNA特定片段 ,与荧光素标记探针和PCR产物中的一条DNA链杂交 ,形成特异杂交体 ,用荧光偏振光检测仪检测特异杂交体 ,最终判断HBVDNA是否存在。并对对 10 2份乙型肝炎患者和 30份非乙型肝炎患者血清进行检测结果比较。结果　PCR FP检测HBVDNA的最低检测限为 1× 10 1拷贝 ,在 4 0份乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)、乙型肝炎e抗体 (HBeAg)和抗乙型肝炎核心抗原 (抗HBc)均阳性患者血清标本中检出HBVDNA阳性率为 10 0 % ;33份HBsAg、抗乙型肝炎e抗体 (抗Hbe)和抗HBc均阳性患者血清HBVDNA阳性率为 81 8% ;2 9份HBsAg和抗HBc阳性患者血清HBVDNA阳性率为 72 4 % ;14份乙型肝炎患者和 30份非乙型肝炎患者血清均为阴性。方法的灵敏性和特异性分别为 86 %和 10 0 %。结论　PCR FP操作简单、灵敏、特异 ,适用于临床HBV基因检测。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 荧光偏振技术 乙型肝炎病毒 DNA 检测
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