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HIV-1膜蛋白抗原表位突变对感染性以及中和特性的影响
被引量：
2
1
作者
王文波
聂建辉
+1 位作者
宋爱京
王佑春
《中国病毒病杂志》
CAS
2012年第5期341-346,共6页
目的对1株人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)CRF_07BC亚型的膜蛋白进行突变,以暴露保守的中和表位,从而增强其中和活性。方法通过PCR定点突变获得突变克隆。以假病毒系统评价病毒感染力和改造效果。结果获得了FE、FE-2G12、FE-S365A、FE-22L、...
目的对1株人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)CRF_07BC亚型的膜蛋白进行突变,以暴露保守的中和表位,从而增强其中和活性。方法通过PCR定点突变获得突变克隆。以假病毒系统评价病毒感染力和改造效果。结果获得了FE、FE-2G12、FE-S365A、FE-22L、FE-N197D、FE-N197Q和FE-N301Q突变体,与其改造前的病毒株S939比较,在感染能力方面:FE-S365A增强约45%,而FE-N301Q下降约90%,N197Q失去了感染能力,其他突变体无明显变化;在中和活性方面:FE对2F5敏感性提高11倍以上;FE-N197D对单克隆抗体(单抗)2F5敏感性增强了63倍,对单抗4E10增强了3倍,对单抗b12增强了17倍,而且对5份阳性血浆的中和敏感性增强了2倍以上;FE-N301Q对单抗2F5的敏感性增强了119倍,对单抗4E10和b12的敏感性有一定增强,而且对6份阳性血浆的中和敏感性增强了2倍以上。FE-S365A和FE-F22L对病毒中和活性基本无影响。结论对HIV-1膜蛋白关键位点的改造能够显著增强病毒的中和敏感性。对改造后膜抗原的免疫原性需要进一步评价。
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关键词
HIV膜蛋白
定点突变
假病毒
原文传递
针对诱导HIV-1中和抗体的膜蛋白抗原的优化研究进展
被引量：
1
2
作者
王文波
王佑春
《中国病毒病杂志》
CAS
2012年第5期321-325,共5页
自1981年人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）被发现以来,尽管科研工作者在HIV感染的阻断及AIDS病毒治疗方面都取得了一些成绩,但尚未从疫苗角度解决HIV感染的问题,其瓶颈是没有一种有效的疫苗能调动机体产生强大的抗病毒感染能力。解决这一...
自1981年人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）被发现以来,尽管科研工作者在HIV感染的阻断及AIDS病毒治疗方面都取得了一些成绩,但尚未从疫苗角度解决HIV感染的问题,其瓶颈是没有一种有效的疫苗能调动机体产生强大的抗病毒感染能力。解决这一问题的希望之一是设计优良的疫苗抗原,以诱导出针对HIV流行株的广谱中和抗体。
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关键词
HIV膜蛋白
中和抗体
抗原改造
原文传递
基于HIV中和单抗4E10表位的免疫原设计和效果评价的初步研究
被引量：
1
3
作者
聂建辉
王文波
+1 位作者
宋爱京
王佑春
《中国病毒病杂志》
CAS
2012年第5期335-340,共6页
目的构建基于4E10表位的免疫原,评价其在豚鼠体内诱导中和抗体的能力。方法构建3种免疫原,将3个4E10表位基因串联后连接至GST基因上融合表达蛋白GST-3EP;将4E10表位基因连接柔性连接子GGSGG,再将4个该肽串联后连接至CKS基因融合表达蛋白...
目的构建基于4E10表位的免疫原,评价其在豚鼠体内诱导中和抗体的能力。方法构建3种免疫原,将3个4E10表位基因串联后连接至GST基因上融合表达蛋白GST-3EP;将4E10表位基因连接柔性连接子GGSGG,再将4个该肽串联后连接至CKS基因融合表达蛋白CKS-4EP;将合成的4E10表位多肽通过Sulfo-SMCC连接至P64K载体蛋白构建结合型免疫原PKEP。用SDS-PAGE电泳的方法检测各种免疫原的分子质量和纯度。用假病毒中和试验评价豚鼠体内中和抗体水平。结果蛋白电泳显示所有免疫原的分子量大小正确,纯度在95%以上。GST-3EP能在豚鼠体内诱导一定水平的中和抗体,3次免疫后5只豚鼠4只阳转,阳转的豚鼠中2只中和抗体水平IC50>200,另外两只抗体水平在100左右。对各组血清50倍稀释后中和抑制率进行统计分析,3EP组与佐剂对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论构建的融合蛋白GST-3EP 3次免疫后能在豚鼠体内诱导一定水平的中和抗体。
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关键词
人类免疫缺陷病毒
中和抗体
融合蛋白
偶联蛋白
4E10
原文传递
题名
HIV-1膜蛋白抗原表位突变对感染性以及中和特性的影响
被引量：
2
1
作者
王文波
聂建辉
宋爱京
王佑春
机构
中国
食品药品
检定
研究院
卫生部
生物
技术
产品
检定
方法
及其
标准化
重点
实验室
细胞
室
出处
《中国病毒病杂志》
CAS
2012年第5期341-346,共6页
基金
国家"十二五"艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治科技重大专项(2012ZX10004701001)
文摘
目的对1株人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)CRF_07BC亚型的膜蛋白进行突变,以暴露保守的中和表位,从而增强其中和活性。方法通过PCR定点突变获得突变克隆。以假病毒系统评价病毒感染力和改造效果。结果获得了FE、FE-2G12、FE-S365A、FE-22L、FE-N197D、FE-N197Q和FE-N301Q突变体,与其改造前的病毒株S939比较,在感染能力方面:FE-S365A增强约45%,而FE-N301Q下降约90%,N197Q失去了感染能力,其他突变体无明显变化;在中和活性方面:FE对2F5敏感性提高11倍以上;FE-N197D对单克隆抗体(单抗)2F5敏感性增强了63倍,对单抗4E10增强了3倍,对单抗b12增强了17倍,而且对5份阳性血浆的中和敏感性增强了2倍以上;FE-N301Q对单抗2F5的敏感性增强了119倍,对单抗4E10和b12的敏感性有一定增强,而且对6份阳性血浆的中和敏感性增强了2倍以上。FE-S365A和FE-F22L对病毒中和活性基本无影响。结论对HIV-1膜蛋白关键位点的改造能够显著增强病毒的中和敏感性。对改造后膜抗原的免疫原性需要进一步评价。
关键词
HIV膜蛋白
定点突变
假病毒
Keywords
HIV glycoprotein
Site-directed mutagenesis
Pseudovirus
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
针对诱导HIV-1中和抗体的膜蛋白抗原的优化研究进展
被引量：
1
2
作者
王文波
王佑春
机构
中国
食品药品
检定
研究院
卫生部
生物
技术
产品
检定
方法
及其
标准化
重点
实验室
细胞
室
出处
《中国病毒病杂志》
CAS
2012年第5期321-325,共5页
基金
国家"十二五"艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治科技重大专项(2012ZX10004701001)
文摘
自1981年人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）被发现以来,尽管科研工作者在HIV感染的阻断及AIDS病毒治疗方面都取得了一些成绩,但尚未从疫苗角度解决HIV感染的问题,其瓶颈是没有一种有效的疫苗能调动机体产生强大的抗病毒感染能力。解决这一问题的希望之一是设计优良的疫苗抗原,以诱导出针对HIV流行株的广谱中和抗体。
关键词
HIV膜蛋白
中和抗体
抗原改造
Keywords
HIV envelope glycoprotein
Neutralizing antibody
Antigen modification
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
基于HIV中和单抗4E10表位的免疫原设计和效果评价的初步研究
被引量：
1
3
作者
聂建辉
王文波
宋爱京
王佑春
机构
中国
食品药品
检定
研究院
卫生部
生物
技术
产品
检定
方法
及其
标准化
重点
实验室
细胞
室
出处
《中国病毒病杂志》
CAS
2012年第5期335-340,共6页
基金
国家"十二五"艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治科技重大专项(2012ZX10004701001)
文摘
目的构建基于4E10表位的免疫原,评价其在豚鼠体内诱导中和抗体的能力。方法构建3种免疫原,将3个4E10表位基因串联后连接至GST基因上融合表达蛋白GST-3EP;将4E10表位基因连接柔性连接子GGSGG,再将4个该肽串联后连接至CKS基因融合表达蛋白CKS-4EP;将合成的4E10表位多肽通过Sulfo-SMCC连接至P64K载体蛋白构建结合型免疫原PKEP。用SDS-PAGE电泳的方法检测各种免疫原的分子质量和纯度。用假病毒中和试验评价豚鼠体内中和抗体水平。结果蛋白电泳显示所有免疫原的分子量大小正确,纯度在95%以上。GST-3EP能在豚鼠体内诱导一定水平的中和抗体,3次免疫后5只豚鼠4只阳转,阳转的豚鼠中2只中和抗体水平IC50>200,另外两只抗体水平在100左右。对各组血清50倍稀释后中和抑制率进行统计分析,3EP组与佐剂对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论构建的融合蛋白GST-3EP 3次免疫后能在豚鼠体内诱导一定水平的中和抗体。
关键词
人类免疫缺陷病毒
中和抗体
融合蛋白
偶联蛋白
4E10
Keywords
HIV
Neutralizing antibody
Recombinant protein
Conjugate protein
4E10
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HIV-1膜蛋白抗原表位突变对感染性以及中和特性的影响
王文波
聂建辉
宋爱京
王佑春
《中国病毒病杂志》
CAS
2012
2
原文传递
2
针对诱导HIV-1中和抗体的膜蛋白抗原的优化研究进展
王文波
王佑春
《中国病毒病杂志》
CAS
2012
1
原文传递
3
基于HIV中和单抗4E10表位的免疫原设计和效果评价的初步研究
聂建辉
王文波
宋爱京
王佑春
《中国病毒病杂志》
CAS
2012
1
原文传递
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