O139群霍乱弧菌染色体中整合两种CTXΦ前噬菌体基因组的多样性 被引量：3

1

作者 陈爱平 阚飙 +2 位作者 陈拱立 陈亢川 刘延清 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期239-242,共4页

目的　研究同时携带两种CTXΦ基因组的O139群霍乱弧菌中CTXΦ基因组的多样性。方法　Southernblot检测分离自福建的部分O139霍乱弧菌菌株中ctxAB和zot基因的多态性 ,然后选取ctxAB和zot基因拷贝数差异较大的 3株菌 ,扩增其调控抑制基因r... 目的　研究同时携带两种CTXΦ基因组的O139群霍乱弧菌中CTXΦ基因组的多样性。方法　Southernblot检测分离自福建的部分O139霍乱弧菌菌株中ctxAB和zot基因的多态性 ,然后选取ctxAB和zot基因拷贝数差异较大的 3株菌 ,扩增其调控抑制基因rstR基因片段 ,克隆并进行序列测定、分析。结果　此 3株菌染色体zot杂交条带多于ctxAB 2～ 5条 ,提示 1个菌株染色体上有编码ctxAB的CTXΦ以及不编码ctxAB的CTXΦ两种基因组。以保守区设计的引物扩增此 3株菌的rstR区 ,均得到 2条大小不同的条带 ,分别克隆后进行测序 ,经GenBank同源性检索 ,发现在此 3个菌株染色体中分别有来自ElTor型的CTXETΦ与不编码ctxAB的nct CTXO13 9Φ、来自加尔各答型的CTXcalcΦ与nct CTXO13 9Φ、以及CTXETΦ与新报道的一种具有独特rstR序列的CTXΦ类基因组两两共存于 1个菌株染色体上。这 3个菌株还具有不同的 16S核糖体基因杂交图谱。结论　不同rstR序列的CTXΦ基因组可以共存于 1个菌株染色体中 ,提示CTXΦ家族进化过程中的复杂分化 ,CTXΦ家族在不同霍乱菌株间的出现及传递。 展开更多

关键词 噬菌体 CTXφ基因组 基因多态性 O139群霍乱弧菌 染色体

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黄连素和6种抗生素对大肠杆菌O157∶H7中国分离株产生志贺毒素的影响 被引量：12

2

作者 范光伟 徐建国 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期218-221,共4页

目的　研究黄连素和 6种常用抗生素对大肠杆菌O15 7∶H7中国分离株产生志贺样毒素的影响。方法　利用志贺毒素对Vero细胞具有细胞毒性 ,并可使其释放乳酸脱氢酶 (LDH)的原理 ,使用Vero细胞的细胞毒性检测试剂盒 ,检测培养基中的LDH的含... 目的　研究黄连素和 6种常用抗生素对大肠杆菌O15 7∶H7中国分离株产生志贺样毒素的影响。方法　利用志贺毒素对Vero细胞具有细胞毒性 ,并可使其释放乳酸脱氢酶 (LDH)的原理 ,使用Vero细胞的细胞毒性检测试剂盒 ,检测培养基中的LDH的含量。结果　将大肠杆菌O15 7∶H7在环丙沙星、氨苄西林、庆大霉素、链霉素、青霉素、红霉素的亚抑制浓度中培养后 ,可增加大肠杆菌O15 7∶H7对Vero细胞的毒性 ,但不同菌株有差异。环丙沙星对大肠杆菌O15 7∶H7的最小抑制浓度很低 ,但其对Vero细胞毒性作用 ,随着药浓度的降低而增高。黄连素在试管内对大肠杆菌O15 7∶H7没有抑制作用。和抗生素相比 ,黄连素对大肠杆菌O15 7∶H7产生和释放志贺毒素比较小。结论　黄连素在试管内对大肠杆菌O15 7∶H7的生长抑制作用不明显 ,其刺激大肠杆菌O15 展开更多

关键词 大肠杆菌O157:H7 志贺毒素 抗生素 黄连素 出血性肠炎

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聚合酶链反应检测小肠结肠炎耶尔森菌的研究 被引量：9

3

作者 景怀奇 徐建国 +4 位作者 邵祝军 姜淑贤 马烨 武素怀 尚德秋 《中华医学检验杂志》 CSCD 1997年第4期242-243,共2页

聚合酶链反应检测小肠结肠炎耶尔森菌的研究景怀奇徐建国邵祝军姜淑贤马烨武素怀尚德秋小肠结肠炎耶尔森菌（Ｙｅｒｓｉｎｉａｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ，Ｙｅ）是人类和动物肠道致病菌。近年来国际上对该菌的研究已引起高度重视，... 聚合酶链反应检测小肠结肠炎耶尔森菌的研究景怀奇徐建国邵祝军姜淑贤马烨武素怀尚德秋小肠结肠炎耶尔森菌（Ｙｅｒｓｉｎｉａｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ，Ｙｅ）是人类和动物肠道致病菌。近年来国际上对该菌的研究已引起高度重视，其原因不仅在于该菌能引起腹泻，还由... 展开更多

关键词 小肠结肠炎 耶尔森杆菌 聚合酶链反应

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抑制差减杂交克隆E1 Tor霍乱弧菌流行株与非流行株基因组差异片段及其分析 被引量：3

4

作者 张丽娟 阚飙 +3 位作者 杨帆 高守一 刘延清 祁国明 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期573-577,共5页

为了克隆与分析霍乱弧菌O1E1Tor流行株与非流行株两类菌株基因组差异片段 ,采用抑制差减杂交技术 (suppressionsubtractivehybridization ,SSH)分别以国内保留的流行株Wujiang 2及非流行株Js 32一株作为被检菌 ,另一株作为参考菌进行基... 为了克隆与分析霍乱弧菌O1E1Tor流行株与非流行株两类菌株基因组差异片段 ,采用抑制差减杂交技术 (suppressionsubtractivehybridization ,SSH)分别以国内保留的流行株Wujiang 2及非流行株Js 32一株作为被检菌 ,另一株作为参考菌进行基因组差异研究 .在进行的差减杂交实验中 ,流行株Wujiang 2共检出 34个特异差异片段 ,经同源检索共代表 35个基因片段 ,其中包括许多重要的霍乱弧菌毒力相关基因如CTX遗传单元、TLC因子及可移动外来成分如霍乱弧菌整合子RVC序列及Tn10转位酶 .非流行株Js 32共检出 14个特异差异片段 ,经同源检索未能检出同源片段 ,可能代表新基因序列 .研究表明 ,霍乱弧菌流行株与非流行株基因组存在较多差异基因 ,表现在毒力、毒力相关基因。 展开更多

关键词 抑制差减杂交 EL Tor霍乱弧菌流行株 非流行株 基因组差异片段 序列分析 基因克隆

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一种新的编码霍乱毒素的丝状噬菌体CTAKΦ 被引量：5

5

作者 邓训安 高守一 +1 位作者 刘延清 祁国明 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期1-5,共5页

目的　探讨介导霍乱弧菌毒素基因水平转移的一种独特的遗传结构。方法　从O139群霍乱弧菌菌株FJ9712 9上清中分离出丝状噬菌体颗粒CTAKΦ ,并进行电镜观察。从丝状噬菌体颗粒CTAKΦ中纯化出DNA ,并进行链型分析。对pCTAK进行酶谱分析。... 目的　探讨介导霍乱弧菌毒素基因水平转移的一种独特的遗传结构。方法　从O139群霍乱弧菌菌株FJ9712 9上清中分离出丝状噬菌体颗粒CTAKΦ ,并进行电镜观察。从丝状噬菌体颗粒CTAKΦ中纯化出DNA ,并进行链型分析。对pCTAK进行酶谱分析。用ctxAB、zot引物对pCTAK进行PCR扩增检测 ,用RS1探针对pCTAK进行Southernblot检测 ;用pCTAK转化DH5α和IEM10 1得到DX2 9和 432 9,将pCTAK克隆于pUC18载体并转入DH5α得到UD2 9,用GM1 ELISA检测DX2 9、432 9、UD2 9的CT表达。对pCTAK的ctxAB、zot基因片段进行测序 ,并用DNASTAR软件和BLAST算法 ,在国际互联网上对测序结果进行序列分析。结果　发现和分离了一种编码霍乱毒素的质粒pCTAK ,它以稳定的高拷贝数存在于 1株天然的O139霍乱弧菌FJ9712 9中 ;酶谱分析发现其明显不同于CTX元件酶谱 ,在CTX元件中相当保守的酶切位点 :BglⅡ、EcoRⅤ、PstⅠ、EcoRⅠ ,在pCTAK中没有切点。ctxAB、zot引物对pCTAK的PCR扩增检测呈阳性 ,RS1探针杂交呈阳性 ;pCTAK的ctxAB、zot基因序列与已报道的序列有很高的同源性。pCTAK能直接或经载体转化DH5α和IEM10 1并表达CT。从FJ9712 9培养上清中分离出丝状噬菌体颗粒CTAKΦ ,电镜观察并计算其直径大小为 7nm左右。其全基因组大小为 8.5kb ,为? 展开更多

关键词 霍乱弧菌 霍乱毒素 CTX元素 丝状噬菌体 编码霍乱毒素 细菌学

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军团菌巨噬细胞感染增强蛋白研究及其应用前景 被引量：3

6

作者 邵祝军 万超群 徐建国 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期146-148,共3页

关键词 军团病 军团菌 巨噬细胞感染 增强蛋白

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多聚酶链反应在衣原体感染诊断中的研究进展 被引量：1

7

作者 景怀奇 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1995年第3期42-45,共4页

多聚酶链反应在衣原体感染诊断中的研究进展景怀奇综述尚德秋，阎世德审校多聚酶链反应（ＰＣ）是一种新的检验诊断方法，自１９８３年Ｍｕｌｌｉｓ建立ＰＣＲ技术和１９８８年Ｅｒｌｉｃｈ引人了具有热稳定性的ＴａｑＤＮＡ多聚酶之后... 多聚酶链反应在衣原体感染诊断中的研究进展景怀奇综述尚德秋，阎世德审校多聚酶链反应（ＰＣ）是一种新的检验诊断方法，自１９８３年Ｍｕｌｌｉｓ建立ＰＣＲ技术和１９８８年Ｅｒｌｉｃｈ引人了具有热稳定性的ＴａｑＤＮＡ多聚酶之后短短几年间，ＰＣＲ技术得到了迅速发... 展开更多

关键词 衣原体 诊断 聚合酶链反应 感染

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O139霍乱弧菌CTAKΦ的基因水平转移的研究 被引量：2

8

作者 邓训安 高守一 +1 位作者 刘延清 祁国明 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期6-9,共4页

目的　探讨CTAKΦ介导的霍乱弧菌毒素基因水平转移。方法　用抗生素敏感试验筛选出几组基因水平转移试验组合的供、受体菌 ,以便于用抗性筛选来确定基因转移的情况。在这几组试验组合中分别用接合转移、上清水平转移、培养液水平转移的... 目的　探讨CTAKΦ介导的霍乱弧菌毒素基因水平转移。方法　用抗生素敏感试验筛选出几组基因水平转移试验组合的供、受体菌 ,以便于用抗性筛选来确定基因转移的情况。在这几组试验组合中分别用接合转移、上清水平转移、培养液水平转移的方法 ,检查供体菌将CTAKΦ的ARKR抗性转移给受体菌的能力。结果　供体菌FJ9712 9、DX2 9能通过多种转移方式 ,以很高的频率将CTAKΦ的ARKR 抗性转移给受体菌HK42、XJ93172、GD3188、776 3、5 6 9B和 940 0 1;而受体菌IEM10 1对CTAKΦ有一定的抗感染能力。 展开更多

关键词 霍乱弧菌 霍乱霉素 丝状噬菌体 基因水平转移 细菌学

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O139霍乱弧菌的分子流行病学特征 被引量：2

9

作者 刘彩莲 祁国明 +2 位作者 刘延清 章丽娟 高守一 《疾病监测》 CAS 1997年第9期325-330,共6页

利用ｃｔｘＡ，Ｚｏｔ，Ａｃｅ，ＲＳ１，ｓｔ和ｉｇａ等基因探针检测５７８株霍乱弧菌，发现其中１株埃尔托型霍乱弧菌和６株Ｏ１３９霍乱弧菌不含ｃｔｘＡ，进一步分析证明这７个菌株中，除１株含ＲＳ１序列外，其他毒力基因检测均为... 利用ｃｔｘＡ，Ｚｏｔ，Ａｃｅ，ＲＳ１，ｓｔ和ｉｇａ等基因探针检测５７８株霍乱弧菌，发现其中１株埃尔托型霍乱弧菌和６株Ｏ１３９霍乱弧菌不含ｃｔｘＡ，进一步分析证明这７个菌株中，除１株含ＲＳ１序列外，其他毒力基因检测均为阴性，这为菌苗候选株的筛选提供了依据。用１６ＳｒＲＮＡ基因探针检测不同地区分离的６２株Ｏ１３９菌株和Ｏ－１群埃尔托型菌株，将其分为９个１６ＳｒＲＮＡ基因型。结合ｃｔｘＡ探针检测结果，认为我国流行的Ｏ１３９霍乱弧菌有两种类型，与印度、孟加拉国分离的菌株不尽相同。本文首次报导，通过１６ＳｒＲＮＡ基因检测，可区分Ｏ－１群埃尔托型霍乱弧菌与Ｏ１３９霍乱弧菌，并建议将ｃｔｘＡ、１６ＳｒＲＮＡ两个基因作为确定Ｏ１３９霍乱弧菌分子流行病学特征的指标。 展开更多

关键词 O139霍乱弧菌 分子流行病学 霍乱弧菌

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我国O139群霍乱弧菌CTX遗传单元基因分布特征 被引量：1

10

作者 曲梅 阚飙 +1 位作者 祁国明 刘延清 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期276-278,共3页

关键词 霍乱毒素 O139群霍乱弧菌 CTX遗传 单元基因 分布特征

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霍乱弧菌与大肠杆菌recA基因的功能互补性分析

11

作者 徐菁 张达琳 +3 位作者 阚飙 刘延清 祁国明 高守一 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期647-648,共2页

关键词 霍乱弧菌 大肠杆菌 RECA基因 功能互补性

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O139霍乱弧菌中存在编码霍乱毒素的质粒 被引量：3

12

作者 邓训安 高守一 +1 位作者 刘延清 祁国明 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期573-573,共1页

关键词 霍乱弧菌 0139菌株 编码霍乱毒素 质粒

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