枯草芽孢杆菌XF-1中脱乙酰几丁质酶在大肠杆菌中的表达及其抑菌活性 被引量：6

1

作者 赵静 熊国如 +3 位作者 王志远 毛自朝 吴毅歆 何月秋 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2011年第4期504-509,共6页

根据脱乙酰几丁质酶同源基因序列设计引物,扩增、克隆和测序了枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis菌株XF-1的脱乙酰几丁质酶基因(csn)。该基因编码区为834bp,编码由277个氨基酸组成的约30kD的蛋白质,其基因序列与枯草芽孢杆菌菌株B168的脱... 根据脱乙酰几丁质酶同源基因序列设计引物,扩增、克隆和测序了枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis菌株XF-1的脱乙酰几丁质酶基因(csn)。该基因编码区为834bp,编码由277个氨基酸组成的约30kD的蛋白质,其基因序列与枯草芽孢杆菌菌株B168的脱乙酰几丁质酶基因的相似性达到99%,氨基酸序列相似性为98%,在第19、47、60、256和257位的氨基酸发生了变化,分别由异亮氨酸代替了菌株B168脱乙酰几丁质酶中的甲硫氨酸、缬氨酸代替了谷氨酸、苏氨酸代替了异亮氨酸、天冬氨酸代替了谷氨酸、赖氨酸代替了天冬酰胺。菌株XF-1对稻瘟病菌Magnaporthe oryzae和芸薹根肿菌Plasmodiophora brassicae有抑制作用,而菌株B168没有。菌株XF-1和B168的csn基因在大肠杆菌Escherichia coli中的表达产物均具有脱乙酰几丁质酶活性,但前者的表达产物对稻瘟病菌及芸薹根肿菌具有抑制作用,而后者没有。表明脱乙酰几丁质酶是XF-1抑制根肿病作用机制之一,且上述5个氨基酸替代可能与抑菌机制有关。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌XF-1 脱乙酰几丁质酶 根肿菌 抑菌作用

下载PDF 职称材料

斑褐孔菌子实体化学成分的分离鉴定及生物活性研究 被引量：1

2

作者 吴晓鹏 李冉 +4 位作者 马青云 杨理 谢晴宜 戴好富 赵友兴 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2023年第6期1246-1254,共9页

为了研究斑褐孔菌(Fuscoporia punctata)子实体的药效物质基础、化学成分及生物活性,采用各种柱色谱与高效液相色谱相结合的方法进行分离纯化,采用核磁共振和质谱等方法鉴定化合物的结构;采用PNPG法、pNPP法和DPPH法分别测定化合物对α... 为了研究斑褐孔菌(Fuscoporia punctata)子实体的药效物质基础、化学成分及生物活性,采用各种柱色谱与高效液相色谱相结合的方法进行分离纯化,采用核磁共振和质谱等方法鉴定化合物的结构;采用PNPG法、pNPP法和DPPH法分别测定化合物对α-糖苷酶、蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)的抑制活性和清除DPPH自由基的活性。研究结果初步明确了海南斑褐孔菌的主要化学成分类型,从斑褐孔菌子实体的乙醇提取物中分离得到12个化合物,分别为inoscavin A(1)、inoscavin C(2)、phellibaumin A(3)、phellibaumin D(4)、inonotusin B(5)、phellifuropyranone A(6)、phelligridin D(7)、原儿茶醛(8)、儿茶酚(9)、没食子酚(10)、对羟基苯甲酸(11)和对羟基苄叉丙酮(12),其中化合物1~7为聚酮类成分,化合物4、5、7抑制PTP1B的IC50值分别为(60.83±2.01)、(56.33±1.57)、(66.89±0.96)μmol/L,化合物2、7抑制α-糖苷酶的IC_(50)值分别为(127.77±0.56)、(122.99±1.39)μmol/L,化合物4、7、2、6清除DPPH自由基的IC50值分别为(6.71±0.69)、(25.79±1.59)、(30.45±1.67)、(32.90±1.59)μmol/L。所有化合物均为首次从斑褐孔菌中分离得到,大部分的聚酮类成分具有PTP1B抑制活性、α-糖苷酶抑制活性和清除DPPH活性,研究结果为海南斑褐孔菌的深度开发利用提供理论依据。 展开更多

关键词 斑褐孔菌 子实体 化学成分 分离鉴定 生物活性

下载PDF 职称材料

抗肿瘤海绵放线菌的分离及菌株HA01041的初步鉴定

3

作者 李传浩 黄惠琴 +2 位作者 方哲 吴小鹏 鲍时翔 《Journal of Life Sciences》 2008年第4期28-31,共4页

对采自海南、湛江等海域的海绵样品进行放线菌选择性分离，采用其发酵液进行抗肿瘤活性筛选，并对活性较好的菌株进行鉴定。采用MTT法筛选分离出的菌株，通过对菌株的培养特徵、形态特徵、生理生化特徵、16SrDNA序列测定及其系统发育分... 对采自海南、湛江等海域的海绵样品进行放线菌选择性分离，采用其发酵液进行抗肿瘤活性筛选，并对活性较好的菌株进行鉴定。采用MTT法筛选分离出的菌株，通过对菌株的培养特徵、形态特徵、生理生化特徵、16SrDNA序列测定及其系统发育分析对菌株HA01041进行鉴定。以含50μg/ml的重铬酸钾作抑制剂的海水高氏一号合成培养基，用于海绵放线菌的分离培养具有很好的选择性，从海绵样品中共分离得到放线菌165株，活性筛选得到细胞毒活性达80％以上的阳性菌株10株，其中菌株HA01041的发酵液细胞毒活性为91％。结合形态观察，生理生化特徵和16SrDNA序列的比封分析，初步鉴定菌株kHA01041为春季链霉菌Streptomyces verne。菌株HA01041的发酵液细胞毒活性为91％，初步鉴定菌株HA01041为春季链霉菌Streptomyces verne。 展开更多

关键词 海绵 放线菌 抗肿瘤 STREPTOMYCES verne

下载PDF 职称材料

草菇gpd启动子的克隆及序列分析 被引量：10

4

作者 杨帆 刘瑞瑞 +1 位作者 林俊芳 郭丽琼 《热带作物学报》 CSCD 2004年第4期72-77,共6页

根据已报道的gpd启动子的序列设计合成了一对引物,以草菇菌丝的基因组DNA为模板,采用PCR扩增的方法克隆出一条长1367bp的DNA特异片段gpd-vv。gpd-vv序列用Promoter Scan Ⅱ和Promoter Predictions软件进行分析,结果表明,其序列上有6个... 根据已报道的gpd启动子的序列设计合成了一对引物,以草菇菌丝的基因组DNA为模板,采用PCR扩增的方法克隆出一条长1367bp的DNA特异片段gpd-vv。gpd-vv序列用Promoter Scan Ⅱ和Promoter Predictions软件进行分析,结果表明,其序列上有6个核心启动子区,而且除了具有一般启动子的CAAT-box、TATA-box等基本顺式作用元件外,还含有几个重要的元件如G-box,GC-motif,CTrich-motif等。经Tfsitescan Service分析,gpd-vv序列还包含多个转录因子的结合位点,包括GCR1,GCN4,AFT1,Repressor of CAR1等。 展开更多

关键词 核心启动子 克隆 序列分析 转录因子 GC CT 序列设计 草菇 特异片段 菌丝

下载PDF 职称材料

干旱胁迫对木薯K＋、Ca2＋和ABA的影响 被引量：4

5

作者 杨子 曾长英 +3 位作者 王斌 杨仪伶 卢诚 彭明 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2013年第9期1725-1729,共5页

为了研究干旱胁迫木薯K+、Ca2+和ABA对干旱胁迫的响应及其变化规律,对2个品种的木薯SC124(高抗)和KU50(低抗)进行对照、驯化、非驯化旱害和驯化旱害等不同方式的干旱处理。研究发现2个木薯品种中,干旱胁迫对叶片K+和ABA的含量影响较大,... 为了研究干旱胁迫木薯K+、Ca2+和ABA对干旱胁迫的响应及其变化规律,对2个品种的木薯SC124(高抗)和KU50(低抗)进行对照、驯化、非驯化旱害和驯化旱害等不同方式的干旱处理。研究发现2个木薯品种中,干旱胁迫对叶片K+和ABA的含量影响较大,而Ca2+含量变化较小;SC124在驯化和非驯化处理下的K+含量发生显著变化;ABA的含量在2个品种中的驯化干旱和非驯化干旱中变化显著,且变化趋势不同;干旱胁迫下,ABA、K+和Ca2+之间存在显著相关性。 展开更多

关键词 K＋ Ca2＋ ABA 驯化 相关性

下载PDF 职称材料

大肠杆菌glgC基因的定点突变及高效表达

6

作者 姚庆荣 郭运玲 +4 位作者 孔华 张金文 郭安平 贺立卡 刘恩平 《热带作物学报》 CSCD 2007年第1期60-64,共5页

通过PCR方法,从E.coliJM109基因组DNA中扩增到全长为1296bp的glgC基因,对其进行定点突变,获得第296位和336位氨基酸同时突变的glgC336基因。将2者亚克隆进pET-30a,成功构建了重组表达载体pET-C和pET-C336,转化大肠杆菌BL21(DE3),在1mmol... 通过PCR方法,从E.coliJM109基因组DNA中扩增到全长为1296bp的glgC基因,对其进行定点突变,获得第296位和336位氨基酸同时突变的glgC336基因。将2者亚克隆进pET-30a,成功构建了重组表达载体pET-C和pET-C336,转化大肠杆菌BL21(DE3),在1mmol/LIPTG诱导下进行表达。SDS-PAGE电泳分析显示,在约53kD处有1条明显的蛋白表达带,证明目的基因已得到高效表达,且重组蛋白表达量占菌体蛋白总量的77.3%。 展开更多

关键词 glgC基因 定点突变 原核表达

下载PDF 职称材料

海洋放线菌Actinoplanes sp.M4I6化学成分研究 被引量：1

7

作者 王子鹏 李芬发 +5 位作者 谢晴宜 马青云 杨理 戴好富 罗都强 赵友兴 《热带海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期38-44,共7页

对海洋放线菌Actinoplanes sp.M4I6的次生代谢产物进行分离鉴定,并评价了其生物活性。采用正相硅胶柱色谱、反相C18柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱和高效液相色谱等技术进行分离纯化,运用核磁共振波谱技术对分离所得化合物进行结构... 对海洋放线菌Actinoplanes sp.M4I6的次生代谢产物进行分离鉴定,并评价了其生物活性。采用正相硅胶柱色谱、反相C18柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱和高效液相色谱等技术进行分离纯化,运用核磁共振波谱技术对分离所得化合物进行结构鉴定。对分离得到化合物进行了抗枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis ATCC 6633)和抑制乙酰胆碱酯酶活性评价。共分离得到9个化合物,经鉴定为(E)-prop-1-enyl-2-hydroxypropanoate(1)、cyclo-(R-Pro-R-Phe)(2)、cyclo-(L-Val-L-Leu)(3)、cyclo-(L-Phe-L-Val)(4)、cyclo-(L-Leu-L-Phe)(5)、lumichrome(6)、2-(4-hydroxyphenyl)ethylacetate(7)、4-hydroxysattabacin(8)、3-hydroxybutan-2-yl 2-phenylacetate(9),其中化合物1为新天然产物。化合物5、6、8、9对Bacillus subtilis ATCC 6633有一定的抑制活性,化合物4、6对乙酰胆碱酯酶有较弱的抑制活性。 展开更多

关键词 海洋放线菌 游动放线菌属 化学成分 乙酰胆碱酯酶抑制活性 抗枯草芽孢杆菌活性

下载PDF 职称材料

海洋真菌Phaeosphaeriopsis sp. ZYX-Z-811次生代谢产物研究

8

作者 全苗苗 马青云 +4 位作者 杨理 谢晴宜 戴好富 郝玉娥 赵友兴 《热带海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期121-127,共7页

对海洋真菌Phaeosphaeriopsis sp. ZYX-Z-811发酵液中次生代谢产物进行分离鉴定,并评价其生物活性。采用正相硅胶柱色谱、反向C18柱色谱、高效液相色谱、SephadexLH-20凝胶柱色谱等技术进行分离纯化,共分离得到10个化合物,利用核磁及红... 对海洋真菌Phaeosphaeriopsis sp. ZYX-Z-811发酵液中次生代谢产物进行分离鉴定,并评价其生物活性。采用正相硅胶柱色谱、反向C18柱色谱、高效液相色谱、SephadexLH-20凝胶柱色谱等技术进行分离纯化,共分离得到10个化合物,利用核磁及红外和紫外波谱技术对分离的单体化合物进行结构鉴定,分别为4-epi-lignicol(1)、lignicol(2)、6-demethylkigelin(3)、6,8-dihydroxy-3,4,7-trimethylisocoumarin(4)、6,7-dimethoxymellein(5)、musaone A(6)、2-(4-hydroxyphenyl)ethylacetate(7)、3-吲哚甲醛(8)、吲哚-3-乙酸甲酯(9)、对羟基苯甲酸甲酯(10),其中化合物1为未发表的化合物,文章通过电子圆二色谱(electrostatic circular dichroism, ECD)计算确定了其绝对构型。对这些化合物分别进行抗氧化和α-糖苷酶抑制活性评价,发现化合物10有弱的抗氧化活性。 展开更多

关键词 海洋真菌 Phaeosphaeriopsis sp. 次生代谢产物 生物活性

下载PDF 职称材料

拟鹿角灵芝子实体的化学成分研究 被引量：2

9

作者 董观海 马青云 +4 位作者 杨理 谢晴宜 戴好富 吴友根 赵友兴 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期334-341,共8页

目的为研究拟鹿角灵芝Ganoderma amboinense中的化学成分及其生理活性。方法采用各种柱色谱与高效液相色谱相结合的方法进行分离纯化,通过光谱分析(UV、IR、HR-ESI-MS及1D、2D-NMR)鉴定了它们的结构;采用四甲基偶氮唑盐[3-(4,5-dimethyl... 目的为研究拟鹿角灵芝Ganoderma amboinense中的化学成分及其生理活性。方法采用各种柱色谱与高效液相色谱相结合的方法进行分离纯化,通过光谱分析(UV、IR、HR-ESI-MS及1D、2D-NMR)鉴定了它们的结构;采用四甲基偶氮唑盐[3-(4,5-dimethylthiazol)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT]法及4-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷(4-nitrophenyl-β-D-glucopyranoside,PNPG)法测定化合物的体外抗肿瘤活性以及α-糖苷酶抑制活性。结果从拟鹿角灵芝子实体的乙醇提取物中分离得到10个化合物,分别鉴定为lanosta-7,9(11)-dien-3β-acetyloxy-24-methoxy-25,26-dihydroxy (1)、赤芝萜醇B (2)、灵芝萜酮二醇(3)、11-oxo-赤芝二醇(4)、lanosta-7,9(11)-dien-3β-acetyloxy-24,26-dihydroxy-25-methoxy(5)、灵芝醇B (6)、灵芝醇A (7)、3α-acetyloxy-15α-hydroxylanosta-7,9 (11),24E-trien-26-oic acid (8)、(24S,25R)-25-methoxylanosta-7,9 (11)-dien-3β,24,26-triol(9)、灵芝醇F(10)。化合物1~5对α-糖苷酶的抑制率分别为86.0%、50.8%、52.8%、76.9%和88.0%;化合物7对人宫颈癌HeLa细胞的抑制率分别为57.9%,化合物5对人胃癌SGC-7901细胞抑制率为67.2%。结论所分离鉴定的化合物均为灵芝三萜类结构,所有化合物均为首次从拟鹿角灵芝种中分离得到,其中化合物1为新化合物,命名为拟鹿角灵芝醇A。化合物1~5对α-糖苷酶有一定抑制活性,化合物7和5有较弱的肿瘤细胞毒活性。 展开更多

关键词 拟鹿角灵芝 三萜 抗肿瘤活性 α-糖苷酶抑制活性 赤芝萜醇B 灵芝醇A 拟鹿角灵芝醇A

原文传递

喜热灵芝子实体的化学成分研究 被引量：2

10

作者 张婷婷 郭教岑 +6 位作者 马青云 孔凡栋 周丽曼 谢晴宜 戴好富 郁志芳 赵友兴 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期1783-1789,共7页

采用多种柱色谱技术方法对喜热灵芝子实体乙醇提取物中化合物进行分离纯化,通过波谱数据鉴定其结构,并检测化合物抗肿瘤活性。结果分离得到11个化合物,分别鉴定为(24E)-lanosta-8,24-dien-3, 11-dione-26-al(1)、ganoderone A(2)、3-oxo... 采用多种柱色谱技术方法对喜热灵芝子实体乙醇提取物中化合物进行分离纯化,通过波谱数据鉴定其结构,并检测化合物抗肿瘤活性。结果分离得到11个化合物,分别鉴定为(24E)-lanosta-8,24-dien-3, 11-dione-26-al(1)、ganoderone A(2)、3-oxo-15α-乙酰氧基-羊毛甾-7,9(11),24-三烯-26-油酸(3)、(23E)-27-nor-羊毛甾-8,23-二烯-3,7,25-三酮(4)、ganodecalone B(5)、ganoderic aldehyde A(6)、11β-hydroxy-lucidadiol(7)、3,4-二羟基苯乙酮(8)、龙胆酸甲酯(9)、ganoleucin C(10)和ganot-heaecolumol H(11),其中化合物1为1个新的三萜类化合物。抗肿瘤活性测定结果表明化合物1,3,4和6对肝癌BEL-7402细胞株具有细胞毒活性,其IC50分别为26.55, 11.35, 23.23, 18.66μmol·L^(-1);化合物1和3~6对白血病K562具有细胞毒活性,其IC50分别为5.79, 22.16, 12.16, 35.32和5.59μmol·L^(-1);化合物4对肺癌A549具有细胞毒活性,其IC_(50)为42.50μmol·L^(-1)。 展开更多

关键词 喜热灵芝 化学成分 抗肿瘤活性

原文传递

曲霉属真菌Aspergillus clavatonanicus HNMF114的次生代谢产物及其抗菌活性研究 被引量：2

11

作者 王府润 张圣良 +5 位作者 孔凡栋 马青云 谢晴宜 戴好富 陈萍 赵友兴 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2021年第6期971-976,共6页

本文对一株来自中华紫蛤的附生真菌HNMF114进行次生代谢产物的研究。从中分离鉴定了1个新化合物和8个已知化合物。分别鉴定为clavatone(1)、cyclo(L-Trp-L-Trp)(2)、2,4(1 H,3 H)-quinazolinedione(3)、clavatol(4)、kotanin(5)、orland... 本文对一株来自中华紫蛤的附生真菌HNMF114进行次生代谢产物的研究。从中分离鉴定了1个新化合物和8个已知化合物。分别鉴定为clavatone(1)、cyclo(L-Trp-L-Trp)(2)、2,4(1 H,3 H)-quinazolinedione(3)、clavatol(4)、kotanin(5)、orlandin(6)、desmethylkotanin(7)、(S)-2-(1-Hydroxy-2,2-dimethylpropyl)quinazolin-4(3 H)-one(8)、(S)-2-methyl-1-(4-oxo-3,4-dihydroquinazolin-2-yl)propyl acetate(9)。新化合物1对大肠杆菌的生长具有一定的抑制作用,最小抑菌浓度(MIC)为2μg/mL。化合物4、9对金黄色葡萄球菌有一定的抑制作用,最小抑制浓度分别为1μg/mL和4μg/mL。化合物5对枯草芽孢杆菌有一定的抑制作用,最小抑制浓度分别为8μg/mL。化合物4、5和9对李斯特菌有一定的抑制作用,最小抑制浓度分别为4、4和8μg/mL。 展开更多

关键词 Aspergillus clavatonanicus 次生代谢产物 抗菌活性

下载PDF 职称材料

海绵共生真菌Chaetomium globosum HXL-1次级代谢产物及其体外抗肿瘤活性研究 被引量：1

12

作者 晏骄阳 孔凡栋 +6 位作者 马青云 谢晴宜 张菲 郭教岑 戴好富 黄小龙 赵友兴 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第13期3790-3797,共8页

目的研究海绵共生真菌Chaetomium globosum HXL-1的次级代谢产物及其抗肿瘤活性。方法利用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、高效液相色谱等方法对其次级代谢产物进行分离纯化,运用NMR、MS等多种波谱方法鉴定化合物结构;采用MTT方法评价化合物的... 目的研究海绵共生真菌Chaetomium globosum HXL-1的次级代谢产物及其抗肿瘤活性。方法利用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、高效液相色谱等方法对其次级代谢产物进行分离纯化,运用NMR、MS等多种波谱方法鉴定化合物结构;采用MTT方法评价化合物的体外抗肿瘤活性。结果从该菌株发酵液的醋酸乙酯萃取物中分离得到16个化合物,分别鉴定为4-甲氧基-3,5-二甲基-6-(2-甲基丁酰基)-2氢-2-吡喃酮(1)、吡啶并戊二烯(2)、1-脱乙酰基-吡啶并戊二烯(3)、7-脱乙酰基-吡啶并戊二烯(4)、大黄素-8-甲醚(5)、8-羟基-1,3-二甲氧基-6-甲基蒽醌(6)、cytoglobosins D(7)、isochaetoglobosin D(8)、球毛壳菌素E(9)、球毛壳菌素Vb(10)、monohydroxyisoaflavinine(11)、aflavazole(12)、烟曲酶毒素C(13)、chaetoviridin B(14)、杀锥曲菌素(15)、oxidized-nodulisporic acid B(16)。结论化合物1是吡喃酮类新化合物;化合物7~13为吲哚生物碱类化合物;化合物1、11、12为首次从球毛壳菌中分离得到;化合物2、8、15对选定的人肿瘤细胞具有一定的体外抗增殖活性。 展开更多

关键词 海绵真菌 球毛壳菌 次级代谢产物 抗肿瘤活性 4-甲氧基-3 5-二甲基-6-(2-甲基丁酰基)-2氢-2-吡喃酮 吡啶并戊二烯 杀锥曲菌素

原文传递