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犬细小病毒:从起源到进化 被引量：37
1
作者 赵建军 闫喜军 吴威 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期869-875,共7页
犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV-2)首次分离于1978年,被认为是由遗传关系相近的猫泛白细胞减少症病毒(FPLV)或其他肉食兽细小病毒(FPLV-like virus)跨宿主感染犬产生的新病原。其感染能引起新生犬急性心肌炎或幼犬出血性肠炎,造成较... 犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV-2)首次分离于1978年,被认为是由遗传关系相近的猫泛白细胞减少症病毒(FPLV)或其他肉食兽细小病毒(FPLV-like virus)跨宿主感染犬产生的新病原。其感染能引起新生犬急性心肌炎或幼犬出血性肠炎,造成较高的发病率和死亡率。该病原爆发后短短一年时间内即广泛流行到世界各地。随着CPV-2对宿主的适应和变异,新抗原变异型(CPV-2a、CPV-2b和CPV-2c)不断产生并在世界各地逐步替代了CPV-2的流行。伴随CPV-2抗原变异的同时,其对宿主(犬、猫)嗜性、毒力等生物学特性也随之改变。本文综述了CPV-2过去30多年在世界流行和变异情况,并探讨了基因变异在病毒跨宿主传播中的意义。 展开更多
关键词 犬细小病毒 进化 抗原变异
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貉细小病毒LN10-1株分离鉴定及其免疫原性研究 被引量：11
2
作者 康洪涛 赵建军 +4 位作者 柴秀丽 张蕾 胡博 闫喜军 吴威 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期956-964,共9页
为研制貉细小病毒性肠炎疫苗,筛选出针对貉细小病毒性肠炎免疫原性好、安全高效的疫苗备选株,应用CRFK细胞从辽宁省发病貉的粪便中分离病毒,并通过形态学、血清学、分子生物学、动物回归及免疫接种等方法对分离株进行鉴定。鉴定结果表... 为研制貉细小病毒性肠炎疫苗,筛选出针对貉细小病毒性肠炎免疫原性好、安全高效的疫苗备选株,应用CRFK细胞从辽宁省发病貉的粪便中分离病毒,并通过形态学、血清学、分子生物学、动物回归及免疫接种等方法对分离株进行鉴定。鉴定结果表明成功分离出1株貉细小病毒,命名为LN10-1株。其VP2基因核苷酸序列与猕猴源猫泛白细胞综合征病毒株(BJ-22/2008/CHN株)相似性高达99.7%。VP2蛋白上决定宿主范围的2个氨基酸位点发生了突变。VP2基因种系发生分析显示,LN10-1株位于猫泛白细胞综合征病毒(Feline panleukopenia virus,FPLV)、蓝狐细小病毒(Blue fox parvovirus,BFPV)、水貂肠炎病毒(Mink enteritis virus,MEV)组成的食肉类动物细小病毒聚类分支与由犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)组成的聚类分支。由LN10-1株制备的灭活疫苗免疫结果显示,接种28d细小病毒中和抗体滴度可达到1∶256以上。推测LN10-1株可能正处于FPLV与CPV进化的中间状态,或是CPV适应新宿主(貉)而形成的一种新病毒,可以作为针对貉细小病毒性肠炎灭活疫苗的候选株。 展开更多
关键词 貉细小病毒 分离鉴定 VP2基因 免疫原性
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稳定表达貉犬瘟热病毒细胞受体SLAM的Vero细胞系的建立及应用 被引量：11
3
作者 赵建军 闫如勋 +7 位作者 张海玲 张蕾 胡博 白雪 邵西群 柴秀丽 闫喜军 吴威 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1515-1523,共9页
【目的】信号淋巴激活分子(SLAM又称CD150)为犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)的细胞受体。本研究目的在于建立稳定表达犬瘟热易感动物貉SLAM基因的Vero细胞系,用于犬瘟热诊断及CDV强毒株的快速分离。【方法】从重组质粒pMD-18-T... 【目的】信号淋巴激活分子(SLAM又称CD150)为犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)的细胞受体。本研究目的在于建立稳定表达犬瘟热易感动物貉SLAM基因的Vero细胞系,用于犬瘟热诊断及CDV强毒株的快速分离。【方法】从重组质粒pMD-18-T-rSLAM扩增rSLAM基因编码区,通过分子克隆技术构建真核表达质粒pIRES2-EGFP-rSLAMhis。将该质粒转染Vero细胞后,经EGFP荧光观察、G418抗性压力和单细胞克隆化及RT-PCR筛选表达rSLAM阳性细胞系。应用获得细胞系对临床犬瘟热病例进行病毒分离,对分离得到CDV进行RT-PCR鉴定及动物回归试验。【结果】经过RT-PCR和免疫组化试验证实,本实验筛选获得一株能稳定表达rSLAM的Vero细胞系———Vero-rSLAM。该细胞系接种CDV阳性样品36-48h即可产生典型CDV致细胞融合病变,而其亲本Vero细胞接种至6d均无可见细胞病变出现。应用Vero-rSLAM细胞系从狐狸、貉犬瘟热阳性病料中分离获得了3株犬瘟热病毒。其中犬瘟热病毒LN(10)f1株对易感狐狸、貉均可产生致死性感染。【结论】成功建立了稳定表达rSLAM的Vero细胞系,用它分离的CDV对本动物保持较强的毒力。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 貉 信号淋巴细胞激活分子 VERO细胞
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犬瘟热病毒N基因在昆虫杆状病毒表达系统中的表达及应用 被引量：2
4
作者 冯佩平 张蕾 +9 位作者 柴秀丽 张海玲 赵建军 胡博 白雪 高晗 邵西群 闫喜军 赵权 徐磊 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期60-66,共7页
目的:为检测犬瘟热抗体提供诊断抗原,应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)N蛋白。方法:采用RT-PCR克隆CDV-N基因,构建重组杆粒BacmidCDV-N,并将其转染Sf9昆虫细胞。通过Western blot和间接免疫... 目的:为检测犬瘟热抗体提供诊断抗原,应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)N蛋白。方法:采用RT-PCR克隆CDV-N基因,构建重组杆粒BacmidCDV-N,并将其转染Sf9昆虫细胞。通过Western blot和间接免疫荧光检测N蛋白的表达。以表达的CDV N蛋白为包被抗原,建立了检测犬瘟热抗体的间接ELISA方法。结果:成功表达了CDV N蛋白。间接ELISA(iELISA)方法中,犬血清最佳稀释度1∶80,N蛋白稀释度1∶40(6.3μg/100μl)。应用该方法共检测了36份犬血清,与中和试验检测方法相比较,其特异性为81.8%,灵敏度为96.0%,符合率为91.7%。结论:表达的CDV-N蛋白具有良好反应原性,建立了快速检测CDV阳性血清的iELISA方法。 展开更多
关键词 CDV-N蛋白 杆状病毒表达系统 IELISA
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