胃癌相关抗原MG7-Ag模拟肽表位的筛选及测序分析 被引量：11

1

作者 徐立 乔泰东 +7 位作者 陈宝军 欧阳为明 丁杰 张庆华 周隽 吴昕彦 金伯泉 樊代明 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期304-307,共4页

目的　从噬菌体呈现的随机肽库中筛选胃癌单克隆抗体MG7所识别的胃癌相关抗原的短肽模拟表位 ,为进一步研究胃癌相关抗原与单抗结合的结构基序奠定基础。方法　用胃癌单克隆抗体MG7对呈现于噬菌体衣壳蛋白pⅧ上的 2个九肽库分别进行亲... 目的　从噬菌体呈现的随机肽库中筛选胃癌单克隆抗体MG7所识别的胃癌相关抗原的短肽模拟表位 ,为进一步研究胃癌相关抗原与单抗结合的结构基序奠定基础。方法　用胃癌单克隆抗体MG7对呈现于噬菌体衣壳蛋白pⅧ上的 2个九肽库分别进行亲和富集和免疫筛选 ;阳性克隆进一步用荧光标记和硝酸纤维素膜斑点印迹法证实其结合活性 ;经随机抽取部分阳性克隆进行DNA序列分析 ,推导出相应噬菌体呈现肽的氨基酸序列 ,通过序列比较分析相对保守的表位信息 ;运用HLA分子结合分析软件预测已测序短肽与HLA分子结合的可能性。结果　经反复多轮筛选和结合活性检测 ,从pⅧ和pⅧ cys 2个噬菌体肽库中分别得到了 12和 30个阳性克隆 ;通过对部分阳性克隆进行测序分析 ,推导相应的随机肽序列和序列比较分析 ,得到具有相对保守性的表位信息如PLX0 2 S、SAVR、XRMX、YARN等。经计算机预测分析 ,发现它们可与HLA多个分子结合。结论　PLX0 2 S、SAVR、XRMX、YARN等有可能为胃癌单克隆抗体MG7所识别的表位基序。 展开更多

关键词 噬菌体 单克隆抗体 肽类 胃肿瘤

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用随机肽库筛选胃癌相关抗原MGb2-Ag模拟肽表位 被引量：2

2

作者 徐立 陈宝军 +7 位作者 乔泰东 欧阳为明 何凤田 张庆华 周隽 吴昕彦 金伯泉 樊代明 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期381-384,共4页

的　运用肽库筛选技术寻找胃癌单克隆抗体ＭＧｂ２ 所识别的胃癌相关抗原的短肽模拟表位。方法　以胃癌单克隆抗体ＭＧｂ２ 作为筛选配基，对呈现于噬菌体衣壳蛋白ｐⅧ上的两个九肽库进行了亲和富集和免疫筛选；阳性克隆用荧光标记和硝... 的　运用肽库筛选技术寻找胃癌单克隆抗体ＭＧｂ２ 所识别的胃癌相关抗原的短肽模拟表位。方法　以胃癌单克隆抗体ＭＧｂ２ 作为筛选配基，对呈现于噬菌体衣壳蛋白ｐⅧ上的两个九肽库进行了亲和富集和免疫筛选；阳性克隆用荧光标记和硝酸纤维素膜斑点印迹证实结合活性；随机抽取部分阳性克隆进行了ＤＮＡ 测序分析。结果　经ＤＮＡ 测序分析推导出相应的氨基酸序列并加以比较分析，得到具有保守性的表位信息。结论　具有相对保守性的ＶＣＸＸＤＧＶ 可能为胃癌单克隆抗体ＭＧｂ２所识别的表位基序。 展开更多

关键词 胃肿瘤 噬菌体呈现 单克隆抗体 模拟肽表位

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PML-RARα基因反义核酸与全反式维A酸对早幼粒白血病细胞株作用比较 被引量：1

3

作者 于文强 孙秉中 陈竺 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期23-25,共3页

探讨应用反义核酸（ＡＳＯＤＮ）替代ＡＴＲＡ治疗急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）的可行性。ＮＢ４和ＨＬ－６０细胞的生长、分化及功能通过细胞生长曲线、形态学、细胞表面标志及ＮＢＴ还原试验加以判定，细胞周期应用流式细胞仪进行... 探讨应用反义核酸（ＡＳＯＤＮ）替代ＡＴＲＡ治疗急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）的可行性。ＮＢ４和ＨＬ－６０细胞的生长、分化及功能通过细胞生长曲线、形态学、细胞表面标志及ＮＢＴ还原试验加以判定，细胞周期应用流式细胞仪进行分析。结果显示：①ＡＳＯＤＮ仅能够抑制ＮＢ４的生长，促进ＮＢ４细胞的分化，具有特异性；②ＡＴＲＡ能够同时影响ＮＢ４和ＨＬ－６０细胞的生长分化；③ＡＳＯＤＮ能够降低ＮＢ４细胞Ｓ期细胞百分比，而ＡＴＲＡ不能；④与ＡＴＲＡ相比，ＡＳＯＤＮ对ＮＢ４细胞ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因的抑制作用强，作用时相早。因此，通过单纯封闭ＰＭＬ－ＲＡＲα基因对ＡＰＬ行使基因治疗是可行的，而将ＰＭＬ－ＲＡＲα基因的封闭和ＲＡＲα基因的激活结合起来也许是基因治疗的最佳方案。 展开更多

关键词 基因 寡核苷酸 反义核酸 维A酸 急性 白血病

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间期细胞核中abl和bcr基因的三维空间分布在bcr/abl融合基因形成中的作用 被引量：1

4

作者 张青 周淑芸 +3 位作者 刘晓力 牛超 徐岚 陈赛娟 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第3期197-199,共3页

目的从生物体视学角度分析bcr/abl融合基因的形成机制。方法应用荧光原位杂交和激光共聚焦扫描显微镜技术,观察γ-射线对IM9细胞中的bcr和abl基因在间期核内三维空间分布的影响。结果abl和bcr基因在间期核内有其特定的分布区域,且该分... 目的从生物体视学角度分析bcr/abl融合基因的形成机制。方法应用荧光原位杂交和激光共聚焦扫描显微镜技术,观察γ-射线对IM9细胞中的bcr和abl基因在间期核内三维空间分布的影响。结果abl和bcr基因在间期核内有其特定的分布区域,且该分布区域在细胞周期中呈规律性的动态变化。放射性照射会使abl和bcr基因之间的距离缩短。结论abl和bcr基因在间期细胞核内的易接近性是bcr/abl融合基因形成的因素之一。 展开更多

关键词 BCR基因 abl基因 三维空间定位 荧光原位杂交 激光共聚焦显微镜 新时期细胞核 BCR/ABL融合基因

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反义核酸和维甲酸对早幼粒白血病细胞NB4的诱导分化

5

作者 于文强 孙秉中 陈竺 《第四军医大学学报》 1998年第2期192-194,共3页

目的:探讨反义核酸和维甲酸对早幼粒白血病细胞株NB_4细胞生长分化的影响.方法:采用细胞生长曲线、形态学、细胞表面标志及硝基四氮唑蓝(NBT)还原试验判定NB_4细胞的生长、分化及功能.结果:PML-RARα基因的反义核酸和全反式维甲酸能够诱... 目的:探讨反义核酸和维甲酸对早幼粒白血病细胞株NB_4细胞生长分化的影响.方法:采用细胞生长曲线、形态学、细胞表面标志及硝基四氮唑蓝(NBT)还原试验判定NB_4细胞的生长、分化及功能.结果:PML-RARα基因的反义核酸和全反式维甲酸能够诱导NB_4细胞分化,提高NBT还原率,降低细胞表面的CD33抗原,升高CD11b抗原.反义核酸更有利于CD33抗原的降低,而全反式维甲酸更有利于CD11b抗原的升高.结论:PML-RARα基因的反义核酸和全反式维甲酸能诱导NB_4细胞分化,但它们的作用机制可能不同. 展开更多

关键词 白血病 APL 诱导分化 反义核酸 维甲酸

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PML-RAR α基因在早幼粒细胞性白血病发病中的作用研究

6

作者 于文强 孙秉中 +1 位作者 朱华锋 陈竺 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1998年第3期168-170,共3页

目的：通过封闭ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因对ＮＢ４细胞生长分化作用的影响，探讨ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因与ＡＰＬ发病的关系。方法：用反义核酸封闭ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因的表达。ＮＢ４细胞的生长、分化及功能，通过细胞生长曲线... 目的：通过封闭ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因对ＮＢ４细胞生长分化作用的影响，探讨ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因与ＡＰＬ发病的关系。方法：用反义核酸封闭ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因的表达。ＮＢ４细胞的生长、分化及功能，通过细胞生长曲线、形态学、细胞表面标志及ＮＢＴ还原试验判定；细胞周期应用流式细胞仪分析。结果：ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因的封闭能够抑制ＮＢ４细胞生长，促进其分化成熟，同时可降低Ｓ期细胞的百分比（由５６％降至３７％）。结论：急性早幼粒细胞性白血病（ＡＰＬ）特征性的染色体易位ｔ（１５；１７）形成的ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因，是ＡＰＬ发病的分子基础。 展开更多

关键词 白血病 APL PML-RARΑ 融合基因 基因治疗

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人参炔醇对HL-60细胞体外诱导分化作用的研究 被引量：6

7

作者 王泽剑 吴英理 +2 位作者 林琦 陈红专 陆阳 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期736-738,共3页

目的　通过细胞形态学和增殖动力学研究人参炔醇对 HL-60细胞诱导分化作用。方法　采用台盼蓝染色及细胞计数器测定细胞存活量 ,流式细胞仪检测人参炔醇对细胞周期和分子标志表达的影响 ,观察信号通路阻断剂对人参炔醇诱导细胞分化的影... 目的　通过细胞形态学和增殖动力学研究人参炔醇对 HL-60细胞诱导分化作用。方法　采用台盼蓝染色及细胞计数器测定细胞存活量 ,流式细胞仪检测人参炔醇对细胞周期和分子标志表达的影响 ,观察信号通路阻断剂对人参炔醇诱导细胞分化的影响。结果　人参炔醇使 HL-60细胞倍增时间延长 ,诱导 HL-60向单核细胞分化 ,细胞集中于 G1 期 ,显著上调细胞表面 CD14分子表达 ,并中度上调 CD11b分子表达 ,Rpc AMPS及 H7均可使人参炔醇诱导的 HL-60细胞 NBT阳性率降低。结论　人参炔醇诱导 HL-60向单核细胞分化 ,与细胞内腺苷酸环化酶(c AMP) ,蛋白激酶 C(PKC)信号通路活化有关。 展开更多

关键词 三七 人参炔醇 HL—60 细胞分化

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口腔癌组织基因表达谱的cDNA微阵列检测结果分析 被引量：2

8

作者 陶疆 周曾同 +2 位作者 张庆华 杜艳姿 郑培蒸 《上海口腔医学》 CAS CSCD 2003年第5期344-348,共5页

目的运用cDNA微阵列技术,研究口腔鳞状细胞癌组织和癌旁正常组织基因表达谱的变化,为探讨口腔癌发生机制提供筛选资料。方法应用cDNA微阵列技术(含4124条基因),对5例口腔癌患者的癌组织及同一患者的癌旁正常组织进行分析。由2种组织中... 目的运用cDNA微阵列技术,研究口腔鳞状细胞癌组织和癌旁正常组织基因表达谱的变化,为探讨口腔癌发生机制提供筛选资料。方法应用cDNA微阵列技术(含4124条基因),对5例口腔癌患者的癌组织及同一患者的癌旁正常组织进行分析。由2种组织中分别抽提TotalRNA后,经逆转录合成荧光分子(Cy3/Cy5)掺入的cDNA链制备表达谱探针,与微阵列芯片杂交,严格洗片后,用荧光扫描仪扫描芯片,获得荧光信号图像,利用计算机分析肿瘤及癌旁正常组织中差异表达的基因,并进行分子生物信息学分析。结果在4124条基因中,口腔癌和癌旁正常组织间存在差异表达的基因。在所检测的5对临床标本中,发现有显著差异表达的基因37条(0.89%)。生物信息学分析显示,该37条显著差异表达的基因与肿瘤的发病机制可能存在相关性。结论cDNA微阵列技术能同时检测2种不同组织中多个基因的差异表达,能为研究肿瘤发病机制提供有价值的筛选资料。 展开更多

关键词 口腔癌 基因表达 微阵列

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白斑癌变相关基因的表达谱研究 被引量：1

9

作者 周曾同 陶疆 +2 位作者 张庆华 杜艳姿 郑培蒸 《临床口腔医学杂志》 2003年第8期491-494,共4页

目的　运用cDNA微阵列技术研究口腔白斑组织和口腔鳞癌组织的基因表达谱的变化 ,为探讨口腔白斑癌变基因提供初步筛选资料。方法　对临床切除的 5例口腔白斑和口腔癌组织进行总RNA抽提 ,逆转录制备探针 ,纯化后与含有 412 4个基因的微... 目的　运用cDNA微阵列技术研究口腔白斑组织和口腔鳞癌组织的基因表达谱的变化 ,为探讨口腔白斑癌变基因提供初步筛选资料。方法　对临床切除的 5例口腔白斑和口腔癌组织进行总RNA抽提 ,逆转录制备探针 ,纯化后与含有 412 4个基因的微阵列杂交 ,杂交后的信号经扫描仪检测和计算机分析后筛选出与白斑癌变相关的基因。结果　对口腔白斑和口腔癌基因表达谱进行分析 ,发现存在 3 0个差异表达的基因 ,它们可能与白斑癌变有关。结论　采用cDNA微阵列技术能成功检测出两种不同组织中多个基因的差异表达 。 展开更多

关键词 白斑癌变 相关基因 表达谱 研究 口腔鳞癌组织

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AC133抗原研究进展 被引量：3

10

作者 吴英理 孙关林 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期189-192,共4页

关键词 AC133 克隆 结构 表达 造血功能

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血友病患者的肝癌外科切除治疗一例 被引量：4

11

作者 马曾辰 方涛林 +6 位作者 孙惠川 钦伦秀 王学锋 徐建民 郭善禹 方浩 夏景林 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期791-791,共1页

关键词 血友病 肝癌 外科手术 治疗 病例报告

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