高校实验动物屏障设施微生物监控管理 被引量：13

1

作者 彭丽娜 王朝霞 《实验动物与比较医学》 CAS 2018年第2期154-159,共6页

通过阐述实验动物微生物监控的理念,结合自身实际情况,从环境质量控制、动物质量控制、人员管理等三个主要控制点对高校实验动物屏障设施微生物监控管理进行了探讨,以期对高校实验动物屏障设施微生物监控管理提供有益借鉴,使其制定出符... 通过阐述实验动物微生物监控的理念,结合自身实际情况,从环境质量控制、动物质量控制、人员管理等三个主要控制点对高校实验动物屏障设施微生物监控管理进行了探讨,以期对高校实验动物屏障设施微生物监控管理提供有益借鉴,使其制定出符合自身设施的动物微生物监测计划。 展开更多

关键词 屏障设施 实验动物 微生物监控

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高校实验动物的传染源防控措施研究与实践 被引量：10

2

作者 王朝霞 蒋兴浩 《实验技术与管理》 CAS 北大核心 2020年第3期9-12,共4页

实验动物生物安全管理一直是高校实验动物中心的重要工作环节,传染源的防控更是重中之重。上海交通大学实验动物中心根据管理经验,对传染源进行了分析评估,建立了较为完善的运行管理体系,并采取了多项传染源防控的具体措施,以确保设施... 实验动物生物安全管理一直是高校实验动物中心的重要工作环节,传染源的防控更是重中之重。上海交通大学实验动物中心根据管理经验,对传染源进行了分析评估,建立了较为完善的运行管理体系,并采取了多项传染源防控的具体措施,以确保设施的安全运行,从而提升了公共平台服务支撑能力,为广大师生的科研工作顺利开展提供了强有力的保障。 展开更多

关键词 实验动物 传染源 生物安全 防控措施

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高校实验动物中心发展的瓶颈问题与对策 被引量：7

3

作者 马倩 王朝霞 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2018年第10期266-268,共3页

高校实验动物中心作为公共服务平台,是高校科技工作者开展研究的必要条件。分析认为,目前高校实验动物中心发展的瓶颈问题主要为发展资源不足、技术队伍不稳定及实验人员管理困难。通过探讨解决对策,研究认为投入发展资源、加强队伍建... 高校实验动物中心作为公共服务平台,是高校科技工作者开展研究的必要条件。分析认为,目前高校实验动物中心发展的瓶颈问题主要为发展资源不足、技术队伍不稳定及实验人员管理困难。通过探讨解决对策,研究认为投入发展资源、加强队伍建设与稳定、提高实验人员培训效率是打破发展瓶颈的重要手段,促进"服务、教学、科研"一体化发展是高校实验动物中心的发展趋势。加强以上对策的落实,有利于技术突破及资源共享,为高校相关学科科研实力的发展和创新人才的培养做出贡献。 展开更多

关键词 高校实验动物中心 动物管理 实验人员 公共服务平台

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基于DHGF法的高校实验动物中心安全风险评价 被引量：6

4

作者 马倩 王朝霞 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2019年第1期276-280,共5页

针对高校实验动物中心安全管理现状,从规章制度、职业健康安全、微生物控制、危化品管理及设施5个方面建立了安全风险评价指标体系。运用由德尔菲法(Delphi),层次分析法(AHP)、灰色关联分析法(Grey relational analysis)、模糊综合评判... 针对高校实验动物中心安全管理现状,从规章制度、职业健康安全、微生物控制、危化品管理及设施5个方面建立了安全风险评价指标体系。运用由德尔菲法(Delphi),层次分析法(AHP)、灰色关联分析法(Grey relational analysis)、模糊综合评判法(Fuzzy mathematics)综合形成的DHGF法,对实验动物中心的安全风险进行综合评价,判定评价对象的安全风险状况为良好。通过实例应用检验,说明DHGF法具有很强的应用性。结合几种方法的优点,增强了评价结果的科学性和准确性。 展开更多

关键词 高校实验动物中心 DHGF算法 安全风险评价 指标体系

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人肝肿瘤细胞的裸小鼠原位癌建模条件优化及评价

5

作者 孟雨 梁冬丽 +2 位作者 郑琳琳 周园园 王朝霞 《实验动物与比较医学》 CAS 2024年第5期511-522,共12页

目的优化通过注射人肝肿瘤细胞株构建原位癌裸小鼠模型的条件,并探索适宜的给药治疗时间。方法选用稳定表达萤光素酶报告基因(LUC)的人肝细胞癌Hep3B与肝母细胞瘤HepG2细胞株,使用小动物活体成像系统分析萤光素酶发光强度与肝肿瘤细胞... 目的优化通过注射人肝肿瘤细胞株构建原位癌裸小鼠模型的条件,并探索适宜的给药治疗时间。方法选用稳定表达萤光素酶报告基因(LUC)的人肝细胞癌Hep3B与肝母细胞瘤HepG2细胞株,使用小动物活体成像系统分析萤光素酶发光强度与肝肿瘤细胞数量之间的线性相关性,验证人源肝肿瘤细胞的发光效率。在5周龄雌性BALB/c裸小鼠的肝叶原位接种不同浓度(8×10^(6)、2.4×10^(7)、7.2×10^(7)个/mL)、不同重悬介质(PBS、Matrigel)的人肝肿瘤细胞悬液HepG2-LUC和Hep3B-LUC(共12组,每组7只),分别构建人肝肿瘤裸小鼠原位癌模型。每7 d为1个周期记录各组小鼠体重,用小动物活体成像系统定期监测原位肿瘤的生长过程,观察肿瘤生长趋势。接种肿瘤细胞后第35天剖取小鼠肝脏,制备病理切片,进行苏木精-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色观察组织病理学变化。结果两种人肝肿瘤细胞株的发光强度均与细胞数量呈正相关(R^(2)=0.9831,R^(2)=0.9705),适宜用于原位癌模型的构建。HepG2-LUC高浓度组,HepG2-LUC+Matrigel低、中、高浓度组,Hep3B-LUC中、高浓度组与Hep3B-LUC+Matrigel低、中、高浓度组均成功造模。HepG2-LUC+Matrigel高浓度组较低浓度与中浓度组小鼠的体重显著下降(P<0.05),Hep3B-LUC+Matrigel高浓度组较低浓度与中浓度组小鼠的体重也显著下降(P<0.05)。成功造模组小鼠的荧光发光强度随时间呈指数型增长(R^(2)>0.9500),且在移植后14 d发光强度至少可达到1.0×10^(7) p/(s·cm^(2)·sr)。HepG2-LUC低、中浓度组和Hep3B-LUC低浓度组小鼠肝脏未见明显的病理学变化,其余组肝脏肿瘤和肝细胞病变明显。结论对于HepG2-LUC细胞株,推荐肝叶原位注射2.4×10^(7)个/mL(50μL)且与Matrigel重悬的混合细胞液体造模,并于造模后第7天给药或采取预后措施;而对于Hep3B-LUC细胞株,推荐肝叶原位注射7.2×10^(7)个/mL(50μL)(不与Matrigel重悬混合)造模,并于造模后� 展开更多

关键词 肝癌 原位移植 HepG2-LUC Hep3B-LUC BALB/C裸小鼠

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妊娠期小鼠血浆促肾上腺皮质激素释放激素水平变化研究

6

作者 张曼 彭丽娜 王朝霞 《动物医学进展》 北大核心 2024年第5期46-50,共5页

为了探讨促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)在小鼠妊娠期间血浆中的浓度变化及其与小鼠妊娠持续时间的关系,选取自然交配的见栓雌鼠,自见栓当天开始,通过面颊采血分离、收集血浆,采用酶联免疫吸附试验测定CRH含量。通过对孕鼠妊娠期间、分... 为了探讨促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)在小鼠妊娠期间血浆中的浓度变化及其与小鼠妊娠持续时间的关系,选取自然交配的见栓雌鼠,自见栓当天开始,通过面颊采血分离、收集血浆,采用酶联免疫吸附试验测定CRH含量。通过对孕鼠妊娠期间、分娩当天及分娩后24 h血浆CRH水平的分析,发现正常妊娠孕鼠血浆中CRH水平在妊娠早期即升高,妊娠13.5 d起血浆CRH水平[(21.6±3.90)pg/mL]呈进行性升高,妊娠晚期升高显著,至分娩时达最高水平,分娩后24 h CRH基本恢复至正常值;早产孕鼠13.5 d时血浆含量高于正常妊娠的小鼠,而难产孕鼠的CRH则明显低于正常妊娠小鼠;孕鼠13.5 d血浆中CRH的含量与妊娠持续时间呈负相关。说明小鼠血浆中CRH水平可作为判定妊娠持续时间的一个标志,用于预测孕鼠的分娩时间,为小鼠的剖宫产生物净化提供理论基础。 展开更多

关键词 促肾上腺皮质激素释放激素 分娩 妊娠 生物净化

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大型实验动物设施信息化集成建设的必要性和对策

7

作者 郑琳琳 魏迅 +1 位作者 吴起亮 徐汪节 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2024年第1期265-268,共4页

目前我国实验动物中心设施均采用信息化的软件进行管理,主要依据业务需求进行模块化建设和运行,但伴随着单体设施饲养规模的扩大,相应的管理和服务也出现新的问题。实验动物中心平台依根据国家和学校新的政策,整合传统模块功能,以实验... 目前我国实验动物中心设施均采用信息化的软件进行管理,主要依据业务需求进行模块化建设和运行,但伴随着单体设施饲养规模的扩大,相应的管理和服务也出现新的问题。实验动物中心平台依根据国家和学校新的政策,整合传统模块功能,以实验动物饲养管理及技术服务为核心,将动物伦理审批、生物安全监管、培训资源共享等方面有机融合集成建设,配套人脸识别系统、便携笼牌打印系统、便携信息采集系统、智能巡检系统、智能电源控制系统等硬件设备,采用“一码通”形式,对动物实验的全流程进行监管,确保实验动物设施安全稳定运行;实施科研工作的科学、准确、溯源管理,为学校科研教学工作提供有力支持。 展开更多

关键词 实验动物设施 信息化集成建设 科研综合管理系统

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上海交通大学实验动物中心公共细胞培养平台管理经验探讨

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作者 彭丽娜 张曼 +1 位作者 艾敏 徐汪节 《实验动物与比较医学》 CAS 2024年第2期227-233,共7页

公共细胞培养平台作为实验动物设施中一个重要的配套设施,是实验动物肿瘤疾病模型以及转基因动物制备等科学研究的重要支撑。实验动物中心搭建公共细胞培养实验平台,能充分整合实验动物和细胞培养资源,更为高效、合理地配置相关科研资源... 公共细胞培养平台作为实验动物设施中一个重要的配套设施,是实验动物肿瘤疾病模型以及转基因动物制备等科学研究的重要支撑。实验动物中心搭建公共细胞培养实验平台,能充分整合实验动物和细胞培养资源,更为高效、合理地配置相关科研资源,便于科研人员更好地开展研究。实验动物中心公共细胞培养平台内培养的细胞大部分用于动物实验,细胞如果存在污染或者质量问题,不但影响实验结果,还会影响实验动物健康,造成实验动物的微生物感染,严重者甚至会扩散污染整个动物饲养设施。因此实验动物中心的公共细胞培养实验室在细胞质量把控上相比常规的细胞培养室更为严格。本文以上海交通大学实验动物中心公共细胞培养平台为例,从设施维护与管理、人员管理、细胞生物风险质控管理等三个主要控制点对公共细胞培养室的管理经验进行了探讨,以期为国内其他实验动物机构的公共细胞培养实验室管理提供有益借鉴。 展开更多

关键词 细胞培养室 设施维护与管理 人员管理 细胞生物风险质控管理

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4种病原菌“单管一步法”PCR快速检测方法的建立 被引量：2

9

作者 潘雅君 徐汪节 +2 位作者 彭丽娜 乔中东 王朝霞 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2021年第5期68-72,共5页

为了检测实验动物常见的4种条件性致病菌:肺炎克雷伯杆菌、金黄色葡萄球菌、嗜肺巴斯德杆菌和绿脓杆菌,提出一种可更准确、灵敏、快速、简便的多重巢式PCR方法(MN-PCR)。根据待检微生物16S rDNA序列的保守区和可变区分别设计通用引物和... 为了检测实验动物常见的4种条件性致病菌:肺炎克雷伯杆菌、金黄色葡萄球菌、嗜肺巴斯德杆菌和绿脓杆菌,提出一种可更准确、灵敏、快速、简便的多重巢式PCR方法(MN-PCR)。根据待检微生物16S rDNA序列的保守区和可变区分别设计通用引物和特异引物,通过两种引物长短差异化创新设计,将模板富集和特异片段扩增两个过程整合为单个反应体系内的一步PCR反应。结果表明,MN-PCR方法能够在标准株DNA混合模板中同时扩增出4条待检测片段;而在阴性对照组中未检测出任何片段。MN-PCR方法在实际检测应用中能够成功检测出细菌感染阳性样本,且未扩增出其他微生物的特异性条带。建立的MN-PCR体系可以同时检测实验动物咽拭子等临床样本中的多种病原菌,与常规多重PCR方法相比,该方法具有特异性和灵敏度高、操作简便、节省时间等优点。 展开更多

关键词 多重巢式PCR 肺炎克雷伯杆菌 金黄色葡萄球菌 嗜肺巴斯德杆菌 绿脓杆菌 小鼠

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雌激素与尼古丁对软骨细胞基质代谢影响 被引量：1

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作者 彭笑芸 乔之光 王朝霞 《上海交通大学学报（农业科学版）》 2019年第2期47-53,58,共8页

雌激素和尼古丁是2种对骨关节炎发病有影响的重要因素,但其影响的具体分子机制仍然存在争议。本研究旨在探讨这2种因素单独和叠加对软骨细胞代谢的影响,从而为骨关节炎的发病机制研究提供一定的参考。鼠胚胎瘤来源的软骨前体细胞系ATDC... 雌激素和尼古丁是2种对骨关节炎发病有影响的重要因素,但其影响的具体分子机制仍然存在争议。本研究旨在探讨这2种因素单独和叠加对软骨细胞代谢的影响,从而为骨关节炎的发病机制研究提供一定的参考。鼠胚胎瘤来源的软骨前体细胞系ATDC5在进行铁硒传递蛋白ITS定向诱导能够分化为软骨细胞。研究中对诱导后获得的软骨细胞用雌激素及尼古丁进行了处理。处理后细胞胞外基质蛋白聚糖和二型胶原表达水平分别用甲苯胺蓝染色和免疫组化进行检测,蛋白表达水平和mRNA水平分别进行了Western blot和Real-time PCR验证。研究结果显示尼古丁会造成软骨细胞2种胞外基质分泌的降低,并且促进分解酶MMP13的表达,抑制合成相关蛋白BMP-7的表达。而雌激素能够通过抑制分解酶MMP13和促进基质合成相关蛋白BMP-7的表达来挽回尼古丁对软骨细胞胞外基质的破坏作用。但在mRNA水平,与仅用尼古丁处理相比,雌激素会同时促进mmp13和bmp-7的表达,推测是因为雌激素增强了细胞的代谢效率。这些结果表明,雌激素对受到尼古丁影响的软骨细胞具有保护作用,这可能是骨关节炎初期防治的一个潜在治疗方案。 展开更多

关键词 骨关节炎 软骨细胞 雌激素 尼古丁

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基因工程小鼠剖宫产生物净化技术的研究 被引量：2

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作者 张曼 彭丽娜 +2 位作者 高则发 徐汪节 王朝霞 《实验动物科学》 2021年第6期76-79,84,共5页

目的改进剖宫产手术,提高剖宫产生物净化效率,获得SPF级基因工程小鼠。方法结合小鼠妊娠时间,触诊判断胎鼠发育情况推测剖宫产手术时间,优化剖宫产手术流程,缩短手术时间以提高手术效率;改进剖出仔鼠由SPF级ICR小鼠代乳以提高成活率;采... 目的改进剖宫产手术,提高剖宫产生物净化效率,获得SPF级基因工程小鼠。方法结合小鼠妊娠时间,触诊判断胎鼠发育情况推测剖宫产手术时间,优化剖宫产手术流程,缩短手术时间以提高手术效率;改进剖出仔鼠由SPF级ICR小鼠代乳以提高成活率;采用统计学方法对剖宫产净化数据进行分析。结果以触摸胎鼠四肢清晰,头部与躯干长度相似,且胎位朝下为剖宫产手术最佳时间,改进手术细节使成功率达(97.9±8.25)%;选择分娩时间和手术时间间隔最小的ICR母鼠代乳,间隔时间<24 h,可提高仔鼠的离乳率,平均窝离乳率为91.2%;经剖宫产净化技术成功获得的仔鼠检测微生物级别符合SPF级。结论剖宫产净化技术的优化可显著提高实验小鼠的净化效率,为基因工程小鼠的生物净化奠定基础。 展开更多

关键词 基因工程小鼠 代乳 剖宫产手术 生物净化

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生殖细胞条件性敲除Usp16基因小鼠的建立、鉴定及表型分析

12

作者 李卫杰 梁冬丽 +3 位作者 刘永忠 王朝霞 乔中东 徐汪节 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期376-383,共8页

目的建立生殖细胞特异性敲除去泛素化酶Usp16小鼠,并分析其生殖表型,探究Usp16是否在精子发生过程发挥功能。方法首先,将Vasa-cre转基因小鼠与Usp16条件性小鼠(Usp16flox/flox)杂交获得生殖细胞特异性敲除Usp16小鼠;其次,利用qPCR、West... 目的建立生殖细胞特异性敲除去泛素化酶Usp16小鼠,并分析其生殖表型,探究Usp16是否在精子发生过程发挥功能。方法首先,将Vasa-cre转基因小鼠与Usp16条件性小鼠(Usp16flox/flox)杂交获得生殖细胞特异性敲除Usp16小鼠;其次,利用qPCR、Western Blot和免疫荧光检测睾丸中Usp16表达;并通过合笼交配、计算机辅助精子分析和HE染色法进行生殖表型分析。结果成功获得了生殖细胞特异性敲除Usp16纯合子(Usp16flox/flox/Vasa-cre+),及杂合子小鼠(Usp16flox/wt/Vasa-cre+)。与野生型相比,Usp16flox/wt/Vasa-cre+雄鼠生殖表型没有显著性变化,但与纯合子雄鼠交配的雌鼠受孕率仅为7%,精子数量减少约79%,活力下降约87%,精子畸形率高达83%,睾丸曲细精管中出现多核细胞,附睾中早熟精子数增多了约3倍。结论小鼠睾丸内生殖细胞Usp16纯合敲除会严重降低精子质量,从而降低雄性生育能力。 展开更多

关键词 精子发生 Usp16 生殖力 CRE-LOXP

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还原型谷胱甘肽对C57BL/6J小鼠体外受精的影响 被引量：1

13

作者 赵晨 张双琴 +1 位作者 王利凤 李薇 《实验动物与比较医学》 CAS 2016年第3期208-211,共4页

目的 探讨受精液中添加还原型谷胱甘肽（GSH）对C57BL/6J小鼠体外受精的影响.方法 以体外受精液（HTF）作为对照,在HTF液中添加不同浓度（0.25 mmol/L、0.50 mmol/L、0.75 mmol/L、1.00 mmol/L、1.25 mmol/L和1.50 mmol/L）的GSH,对C57B... 目的 探讨受精液中添加还原型谷胱甘肽（GSH）对C57BL/6J小鼠体外受精的影响.方法 以体外受精液（HTF）作为对照,在HTF液中添加不同浓度（0.25 mmol/L、0.50 mmol/L、0.75 mmol/L、1.00 mmol/L、1.25 mmol/L和1.50 mmol/L）的GSH,对C57BL/6J近交系小鼠进行体外受精实验,观察体外受精和早期胚胎发育情况.同时,用5种C57BL/6J小鼠背景的基因工程小鼠加以验证.结果 与对照组相比,实验组的体外受精率显著升高,浓度为0.50 mmol/L时,体外受精率提高显著（P＜0.05）,浓度在1.25 mmol/L时,体外受精率最高（P＜0.01）.受精卵的体外囊胚发育率实验组与对照组无显著性差异（P＞0.05）.C57BL/6J背景的基因工程小鼠的体外受精率和体外囊胚发育率与C57BL/6J近交系小鼠相似.结论 在HTF中添加一定浓度的GSH能够提高C57BL/6J小鼠及C57BL/6J背景的基因工程小鼠的体外受精效果. 展开更多

关键词 还原型谷胱甘肽(GSH) C57BL/6J小鼠 体外受精

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实验动物设施洗笼机配置调研及安装设计 被引量：1

14

作者 郑琳琳 舒加乐 +1 位作者 徐汪节 王朝霞 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第9期92-96,共5页

我国实验动物行业伴随着单体设施饲养规模的扩大,实验动物饲养用具的清洗问题也越来越凸显,本文就目前国内柜式、步入式、隧道式洗笼机的配置情况进行调研,已有66家单位或企业配置洗笼机,其中配置2种及以上的单位占67%,同时在新建设施... 我国实验动物行业伴随着单体设施饲养规模的扩大,实验动物饲养用具的清洗问题也越来越凸显,本文就目前国内柜式、步入式、隧道式洗笼机的配置情况进行调研,已有66家单位或企业配置洗笼机,其中配置2种及以上的单位占67%,同时在新建设施设计阶段,列举了不同洗笼机诸多需考虑的因素以供参考。在未来,配套清洗设备作为实验动物设施的基础,其自动化将会是我国实验动物发展又一阶段性标志。 展开更多

关键词 实验动物中心 实验动物设施 清洗自动化 洗笼机

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濒危基因编辑小鼠品系拯救技术及其应用探讨

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作者 聂永强 王朝霞 《实验动物与比较医学》 CAS 2023年第6期636-640,共5页

基因编辑小鼠模型优势显著,是人类基因功能研究、疾病机制探索和新药研发等理想的实验动物。基因编辑小鼠因自身生育力低下、年老、疾病等因素导致的品系断代会对科学研究造成不可挽回的损失。相关从业人员需针对不同情况采用相应的技... 基因编辑小鼠模型优势显著,是人类基因功能研究、疾病机制探索和新药研发等理想的实验动物。基因编辑小鼠因自身生育力低下、年老、疾病等因素导致的品系断代会对科学研究造成不可挽回的损失。相关从业人员需针对不同情况采用相应的技术手段进行品系拯救,同时要综合考虑技术选择和成本控制,尽可能降低小鼠品系拯救的实验成本。首先,当仅存的处于生育年龄的基因编辑小鼠突然死亡时,对死亡雄鼠可以通过体外受精(in vitro fertilization,IVF)、单精子卵胞质显微注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI),对雌鼠可通过卵巢移植等技术进行品系拯救。其次,由于年老或疾病因素具有断代风险的小鼠,可以通过IVF-胚胎移植(embryo transfer,ET)、单侧附睾尾活体辅助生殖等技术进行品系拯救。再者,生命状态差的性成熟前小鼠,可以采用圆形精子注射(round spermatid injection,ROSI)或卵巢移植等技术进行品系拯救。本文对常用濒危小鼠品系拯救技术及其应用进行了探讨,以期为相关从业人员更好地做好基因编辑小鼠品系维护提供参考。 展开更多

关键词 基因编辑 濒危小鼠 品系拯救 辅助生殖技术

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单增李斯特标准菌NrdD基因插入突变株的构建 被引量：1

16

作者 舒加乐 郑琳琳 《湖北畜牧兽医》 2019年第5期5-7,共3页

利用同源重组的原理构建了单增李斯特氏菌NrdD基因插入突变株,从大肠杆菌基因组中分别扩增出NrdD基因上下游同源臂,与pKSV7质粒相连,构建成功重组突变载体pKSV7-D1D2,将其电转入单增李斯特菌后,用氯霉素抗性平板筛选得到NrdD基因插入突... 利用同源重组的原理构建了单增李斯特氏菌NrdD基因插入突变株,从大肠杆菌基因组中分别扩增出NrdD基因上下游同源臂,与pKSV7质粒相连,构建成功重组突变载体pKSV7-D1D2,将其电转入单增李斯特菌后,用氯霉素抗性平板筛选得到NrdD基因插入突变株,并对突变菌株序列测定,证明回复突变株构建成功。该突变株可在严格无氧环境中生存,为进一步研究NrdD基因功能、单增李斯特的致病机制和疫苗载体的研发奠定了基础。 展开更多

关键词 单增李斯特菌 NrdD基因 突变株 同源重组

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精子介导外源DNA转基因技术

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作者 李卫杰 丁巍 +1 位作者 王朝霞 徐汪节 《生物技术》 CAS 2021年第6期607-611,600,共6页

转基因技术在现代生命科学研究、药物开发、临床治疗、遗传育种等方面发挥重要作用。精子介导转基因技术(sperm-mediated gene transfer,SMGT)是以精子细胞为载体,携带外源基因进入卵细胞受精,从而获得转基因动物。该文回顾了SMGT的历... 转基因技术在现代生命科学研究、药物开发、临床治疗、遗传育种等方面发挥重要作用。精子介导转基因技术(sperm-mediated gene transfer,SMGT)是以精子细胞为载体,携带外源基因进入卵细胞受精,从而获得转基因动物。该文回顾了SMGT的历史发展,简述了SMGT的分子机制,包括外源DNA与精子的相互作用、外源DNA内化入精子细胞中整合重排等,又介绍了注射转染法、电击法、脂质体法、纳米颗粒载体法,尤其是近些年来的人工精子法等技术方法的研究进展,最后分析了SMGT所存在的问题,以及对它未来发展前景进行的讨论。 展开更多

关键词 精子 转基因 外源DNA

原文传递

实验大小鼠病原微生物检测技术及检测常见问题

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作者 章蓉 舒加乐 《畜牧兽医科学（电子版）》 2019年第19期50-51,共2页

该文通过概括实验大小鼠病原微生物的检测技术及在检测工作中遇到的常见问题分析,对病原微生物质量控制的必要性进行阐明,为检测实验方法的建立提供参考帮助。

关键词 实验大小鼠 病原微生物 检测

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小鼠嗜肺巴斯德杆菌PCR检测方法的优化及在不同样本处理中初步应用

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作者 彭丽娜 潘雅君 +2 位作者 张曼 谷佳男 徐汪节 《实验动物与比较医学》 CAS 2020年第3期236-241,共6页

目的建立活体实验动物中嗜肺巴斯德杆菌的实时快速、灵敏简便的PCR检测方法。方法通过比较不同样本采集及处理方法,优化样本的处理流程,简化DNA的提取步骤,快速获取PCR模板后对嗜肺巴斯德杆菌Jawetz型和Heyl型进行PCR扩增,并结合测序进... 目的建立活体实验动物中嗜肺巴斯德杆菌的实时快速、灵敏简便的PCR检测方法。方法通过比较不同样本采集及处理方法,优化样本的处理流程,简化DNA的提取步骤,快速获取PCR模板后对嗜肺巴斯德杆菌Jawetz型和Heyl型进行PCR扩增,并结合测序进行鉴定。结果4种采样方法中,口腔样本的检测效果最好;2种DNA提取方法中,用培养后煮沸1 min的方法能快速获取样本中细菌基因组DNA,比试剂盒提取方法效果更好。结论通过培养煮沸1 min的方法快速提取实验动物口腔样本中的细菌基因组DNA作为PCR模板,能显著提高嗜肺巴斯德杆菌的阳性检出率。 展开更多

关键词 嗜肺巴斯德杆菌 样本处理 DNA快速提取 PCR

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GLP-1重组减毒沙门菌对2型糖尿病小鼠的血糖调控作用 被引量：2

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作者 田丽芳 刘尚全 +4 位作者 李卫东 田晓丽 陈蕾 任斌 袁媛 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第5期639-644,共6页

目的观察重组减毒沙门菌作为胰高血糖素样肽-1(GLP-1)的基因载体,对2型糖尿病小鼠的血糖调控作用。方法高脂饲料饲喂4周后予以链脲佐菌素(STZ)腹腔注射构建KM种小鼠2型糖尿病模型,小鼠分为4组,每组10只,即:正常组、模型组、空载组及治疗... 目的观察重组减毒沙门菌作为胰高血糖素样肽-1(GLP-1)的基因载体,对2型糖尿病小鼠的血糖调控作用。方法高脂饲料饲喂4周后予以链脲佐菌素(STZ)腹腔注射构建KM种小鼠2型糖尿病模型,小鼠分为4组,每组10只,即:正常组、模型组、空载组及治疗组,分别予以:5%NaHCO_3、5%NaHCO_3、同等剂量的空载减毒沙门菌及GLP-1重组减毒沙门菌灌胃治疗,观察并记录治疗前后第0、7、14、21、28天的空腹血糖值及进食量、饮水量、体重变化,分别于治疗后第14天及第28天行口服葡萄糖耐量试验(OGTT)。取小鼠胰腺组织,采用HE染色法观察各组小鼠的胰腺组织形态学变化。结果 GLP-1重组减毒沙门菌灌胃治疗后,模型组小鼠空腹血糖水平较正常组升高,差异有统计学意义(P<0.01),空载组空腹血糖与模型组比较,差异无统计学意义,治疗组空腹血糖与空载组比较降低,差异有统计学意义(P<0.01),糖尿病小鼠体重变化有明显改善(P<0.01),多饮多食症状好转;第14天及第28天OGTT示:空载组血糖与模型组比较,差异无统计学意义,治疗组血糖较空载组降低,差异有统计学意义(P<0.01)。胰腺HE染色结果示,空载组与模型组比较,无明显变化,治疗组与空载组比较有明显改善。结论 GLP-1重组减毒沙门菌能够改善2型糖尿病小鼠多饮、多食、体重下降等症状,降低血糖,改善胰岛形态学变化,对2型糖尿病小鼠具有一定的治疗作用。 展开更多

关键词 GLP-1 减毒沙门菌 2型糖尿病 链脲佐菌素

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