细胞因子对感染性休克作用的新进展 被引量：14

1

作者 肖莉 《国外医学（生理病理科学与临床分册）》 2003年第1期100-102,共3页

细胞因子的过度释放在感染性休克发生发展过程中有重要作用。TNF α ,IL 6 ,IL 1等可以直接或间接加速其病理过程 ,而IL 4,IL 1 0等则具有保护作用 ,各种细胞因子相互刺激 ,相互抑制 。

关键词 感染性休克 细胞因子 TNF-α IL-1 IL-6 IL-10 IFN-Γ

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4-PBA通过抑制内质网应激减轻原代海马神经元的损伤 被引量：8

2

作者 柳秀平 吕凌云 李夏春 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期2215-2220,共6页

目的:探讨内质网应激后原代海马神经元树突棘密度及突触蛋白表达的变化,以及通过内质网应激分子伴侣4-苯基丁酸(4-phenylbutyric acid,4-PBA)抑制内质网应激对这种神经元损伤的抑制作用。方法:原代培养新生大鼠海马神经元,将表达增强型... 目的:探讨内质网应激后原代海马神经元树突棘密度及突触蛋白表达的变化,以及通过内质网应激分子伴侣4-苯基丁酸(4-phenylbutyric acid,4-PBA)抑制内质网应激对这种神经元损伤的抑制作用。方法:原代培养新生大鼠海马神经元,将表达增强型绿色荧光蛋白的质粒转染到原代培养5～7 d(DIV 5～7)的大鼠海马神经元内持续培养,DIV 20时分为对照组、衣霉素(tunicamycin,Tm)处理组和Tm+4-PBA预处理组(Tm处理前1 h给予4-PBA),采用Western blot法检测内质网应激标志蛋白Bi P和突触蛋白的表达水平,激光共聚焦显微镜下观察神经元,分析树突棘密度,采用MTT法分析细胞活力。结果:Tm处理后使Bi P蛋白水平明显升高,而4-PBA预处理使Bi P蛋白水平显著下降(P <0. 05)。Tm引起的原代海马神经元树突棘密度下降及突触蛋白的表达下降能够被4-PBA抑制。Tm引起的细胞活力下降可被4-PBA抑制。结论:Tm能够通过诱导内质网应激而引起原代海马神经元树突棘密度下降及突触蛋白表达下降,而提前给予4-PBA预处理可明显降低内质网应激反应,抑制树突棘密度下降及突触蛋白表达下降,从而减轻原代海马神经元的损伤。 展开更多

关键词 内质网应激 阿尔茨海默病 4-苯基丁酸 树突棘 原代海马神经元

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肉苁蓉对败血症大鼠胸腺细胞的保护作用 被引量：4

3

作者 肖莉 王志强 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期386-389,共4页

目的 :探讨肉苁蓉提取物对败血症休克大鼠胸腺细胞凋亡的影响及其可能机制。方法 :盲肠结扎穿孔术 (CLP)造成大鼠败血症休克。防治组术前 14d开始给药 (1 2 5g/kg) ,分别于术后 12h、2 4h取材。流式细胞仪检测细胞凋亡率和线粒体膜电位 ... 目的 :探讨肉苁蓉提取物对败血症休克大鼠胸腺细胞凋亡的影响及其可能机制。方法 :盲肠结扎穿孔术 (CLP)造成大鼠败血症休克。防治组术前 14d开始给药 (1 2 5g/kg) ,分别于术后 12h、2 4h取材。流式细胞仪检测细胞凋亡率和线粒体膜电位 ,分光光度法测定细胞线粒体ATP酶活力。结果预先给予肉苁蓉提取物的大鼠 ,行CLP术后 12、2 4h胸腺细胞凋亡率均低于模型组 (P <0 . 0 1) ,线粒体膜电位和ATP酶活力则显著上升 (P <0 . 0 1)。结论 :肉苁蓉提取物对败血症休克时胸腺细胞有保护作用 ,其机制可能是提高ATP酶活力 ,维持了细胞线粒体膜电位。 展开更多

关键词 肉苁蓉 脓毒症 胸腺 线粒体

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上调星形胶质细胞中PP2A对APP/PS1双转基因小鼠的神经保护作用 被引量：5

4

作者 李夏春 彭敏峰 +2 位作者 高丽华 楼正青 柳秀平 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1189-1194,共6页

目的:探讨上调星形胶质细胞中蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)对APP/PS1双转基因小鼠的神经保护作用。方法:构建带胶质细胞原纤维酸性蛋白启动子的e GFP-wt PP2A慢病毒,特异性上调星形胶质细胞中的PP2A。将实验小鼠随机分为... 目的:探讨上调星形胶质细胞中蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)对APP/PS1双转基因小鼠的神经保护作用。方法:构建带胶质细胞原纤维酸性蛋白启动子的e GFP-wt PP2A慢病毒,特异性上调星形胶质细胞中的PP2A。将实验小鼠随机分为野生对照+慢病毒空载体组(Con组)、APP/PS1双转基因小鼠+慢病毒空载体组(APP/PS1组)和APP/PS1双转基因小鼠+慢病毒感染组(PP2A组),各组小鼠经侧脑室注射慢病毒4周后,采用脑片免疫荧光检测β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)的水平,通过Golgi染色观察树突棘密度和形态学变化,电镜检测突触后致密物(postsynaptic density,PSD)的厚度,Morris水迷宫定位航行实验检测感染慢病毒后对学习和记忆的影响。结果:上调星形胶质细胞中PP2A降低APP/PS1双转基因小鼠Aβ的水平,增加树突棘密度、有突触功能的蘑菇状树突棘比例和PSD厚度,缩短寻找平台逃避潜伏期。结论:上调星形胶质细胞中PP2A改善APP/PS1双转基因小鼠AD样Aβ聚集的病理改变,具有重塑突触结构与功能和改善学习记忆能力的作用。 展开更多

关键词 蛋白磷酸酶2A 星形胶质细胞 APP/PS1双转基因小鼠 神经保护作用

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褪黑素对花萼海绵诱癌素诱导的tau蛋白过度磷酸化的影响 被引量：3

5

作者 李夏春 王建枝 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期354-357,共4页

目的探讨褪黑素(Mel)对花萼海绵诱癌素(CA)在成神经瘤细胞诱导的tau蛋白过度磷酸化的影响及其机制。方法采用鼠野生型成神经瘤细胞(N2awt),给予CA处理,或同时给予50μmol/L Mel处理,用免疫荧光检测tau蛋白磷酸化水平,32P-特异底物标记... 目的探讨褪黑素(Mel)对花萼海绵诱癌素(CA)在成神经瘤细胞诱导的tau蛋白过度磷酸化的影响及其机制。方法采用鼠野生型成神经瘤细胞(N2awt),给予CA处理,或同时给予50μmol/L Mel处理,用免疫荧光检测tau蛋白磷酸化水平,32P-特异底物标记技术检测GSK-3活性,免疫印迹技术检测P-Ser9-GSK-3β和GSK-3β的表达水平,计算P-Ser9-GSK-3β/GSK-3β的比率。结果①CA可在N2awt细胞使tau蛋白在Ser396/404位点和Ser198/202位点过度磷酸化,同时伴有GSK-3活性升高和P-Ser9-GSK-3β表达水平降低。②Mel对CA引起的tau蛋白过度磷酸化有保护作用;Mel同时对抗CA诱导的GSK-3活性升高和P-Ser9-GSK-3β表达水平降低。结论Mel可减轻CA引起的tau蛋白过度磷酸化,其机制可能与调节细胞内P-Ser9-GSK-3β的表达水平和改变GSK-3活性有关。 展开更多

关键词 花萼海绵诱癌素 tau褪黑素 过度磷酸化 阿尔茨海默病

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肉苁蓉对败血症大鼠肝线粒体ATP酶变化的影响 被引量：2

6

作者 王志强 尹刚 《四川中医》 北大核心 2003年第10期15-17,共3页

目的 :研究败血症肝线粒体ATP酶活性的变化及肉苁蓉对其影响。方法 :4 0只SD大鼠随机分假手术组、 12小时对照组、 12小时给药组、 16小时对照组、 16小时给药组 ,采用盲肠结扎穿孔术 (CLP)复制败血症模型 ,比较各组存活率和平均动脉压 ... 目的 :研究败血症肝线粒体ATP酶活性的变化及肉苁蓉对其影响。方法 :4 0只SD大鼠随机分假手术组、 12小时对照组、 12小时给药组、 16小时对照组、 16小时给药组 ,采用盲肠结扎穿孔术 (CLP)复制败血症模型 ,比较各组存活率和平均动脉压 (MAP)、肝线粒体ATP酶活性的变化。结果 :大鼠在复制败血症模型后 ,肝线粒体ATP酶活性降低 ,2 4小时存活率明显下降。给予肉苁蓉后肝线粒体ATP酶活性较对照组明显改善 (P <0 0 5 ) ,与大鼠死亡率的降低呈显著正相关。结论 :败血症线粒体ATP酶活性下降 ,细胞钙超载和水肿坏死是败血症大鼠死亡的直接原因 ,肉苁蓉增强ATP酶活性是肉苁蓉治疗败血症的重要机制。 展开更多

关键词 肉苁蓉 败血症 大鼠 肝线粒体 ATP酶 影响

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褪黑素对花萼海绵诱癌素诱导的神经细丝过度磷酸化的影响及机制 被引量：2

7

作者 李夏春 张军霞 王建枝 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期123-126,共4页

目的探讨褪黑素(Mel)对花萼海绵诱癌素(CA)在成神经瘤细胞诱导的神经细丝过度磷酸化中的影响及其机制。方法采用鼠野生型成神经瘤细胞(N2awt),给予CA处理,或同时给予不同浓度Mel或维生素E(Vit E)处理,并用免疫印迹法检测神经细丝磷酸化... 目的探讨褪黑素(Mel)对花萼海绵诱癌素(CA)在成神经瘤细胞诱导的神经细丝过度磷酸化中的影响及其机制。方法采用鼠野生型成神经瘤细胞(N2awt),给予CA处理,或同时给予不同浓度Mel或维生素E(Vit E)处理,并用免疫印迹法检测神经细丝磷酸化水平和蛋白磷酸酯酶2A(PP-2A)含量,32P-特异底物标记技术检测PP-2A活性。结果①CA可在N2awt细胞引起神经细丝过度磷酸化,同时伴有PP-2A含量和活性降低。②Mel对CA引起的神经细丝过度磷酸化有保护作用,且强于Vit E;Mel同时对抗CA诱导的PP-2A活性和含量降低。结论Mel可通过调节细胞内PP-2A的含量和活性而减轻CA引起的神经细丝过度磷酸化。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 花萼海绵诱癌素 褪黑素 神经细丝 过度磷酸化

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Tau蛋白对阿尔茨海默病线粒体形态分布及功能的影响机制的研究进展 被引量：3

8

作者 李夏春 《华西医学》 CAS 2014年第8期1583-1585,共3页

过度磷酸化的微管结合Tau蛋白是阿尔茨海默病患者神经元内神经原纤维缠结的主要成分,但适度磷酸化的Tau蛋白又是参与微管组装和维持微管稳定的重要骨架蛋白。近年来,Tau蛋白对线粒体的转运、分布和形态及功能的影响受到广泛研究。现对... 过度磷酸化的微管结合Tau蛋白是阿尔茨海默病患者神经元内神经原纤维缠结的主要成分,但适度磷酸化的Tau蛋白又是参与微管组装和维持微管稳定的重要骨架蛋白。近年来,Tau蛋白对线粒体的转运、分布和形态及功能的影响受到广泛研究。现对上述研究进展作一综述。 展开更多

关键词 TAU蛋白 线粒体 分布 形态 功能

原文传递

肉苁蓉对败血症休克大鼠胸腺细胞凋亡的影响

9

作者 肖莉 王志强 《河北中医》 2008年第2期198-200,共3页

目的探讨肉苁蓉提取物对败血症休克大鼠胸腺细胞凋亡的影响及其机制。方法60只大鼠随机分为实验组、空白对照组和对照组,各20只,空白对照组分离盲肠后不做结扎、穿孔处理,实验组及对照组行盲肠结扎穿孔术(CLP)建立大鼠败血症休克模型。... 目的探讨肉苁蓉提取物对败血症休克大鼠胸腺细胞凋亡的影响及其机制。方法60只大鼠随机分为实验组、空白对照组和对照组,各20只,空白对照组分离盲肠后不做结扎、穿孔处理,实验组及对照组行盲肠结扎穿孔术(CLP)建立大鼠败血症休克模型。术前14日开始实验组给予肉苁蓉溶液1.25g/kg,对照组及空白对照组给予等量0.9%氯化钠注射液。于术后12、24h取材。流式细胞仪检测各组胸腺细胞凋亡率和线粒体膜电位,分光光度法测定细胞SOD活性、MDA含量。结果实验组CLP术后12、24h胸腺细胞凋亡率均低于对照组(P<0.01),线粒体膜电位显著上升(P<0.01),细胞超氧化物转化酶(SOD)活性上升、丙二醛(MDA)含量下降与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论肉苁蓉提取物对败血症休克时胸腺细胞有保护作用,其机制可能是提高SOD活性,降低MDA含量,清除自由基反应,维持了细胞线粒体膜电位。 展开更多

关键词 肉苁蓉 出血性败血症 细胞调亡 线粒体 超氧化物歧化酶 丙二醛 动物 实验

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抑制JNK磷酸化参与褪黑素对花萼海绵诱癌素引起的tau蛋白过度磷酸化的保护机制

10

作者 李夏春 王志强 柳秀平 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期830-836,共7页

目的探讨花萼海绵诱癌素(CA)在成神经瘤细胞(N2a)引起tau蛋白过度磷酸化的机制,及褪黑素对其是否具有保护作用。方法小鼠成神经瘤细胞(N2a)给予CA 5 nmol·L-1处理,或同时给予褪黑素50 mol·L-1,或同时给予维生素E(Vit E)50 mol... 目的探讨花萼海绵诱癌素(CA)在成神经瘤细胞(N2a)引起tau蛋白过度磷酸化的机制,及褪黑素对其是否具有保护作用。方法小鼠成神经瘤细胞(N2a)给予CA 5 nmol·L-1处理,或同时给予褪黑素50 mol·L-1,或同时给予维生素E(Vit E)50 mol·L-1处理12 h,用免疫印迹技术检测tau蛋白在Ser422位点的磷酸化水平,磷酸化c-jun氨基端激酶(p-JNK)和磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶(p-MKK4)的含量,免疫荧光检测p-JNK含量和分布,荧光法测定细胞内丙二醛(MDA)含量,32P-特异底物标记技术检测p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)活性。结果 CA在N2a细胞引起tau蛋白Ser422位点磷酸化水平显著升高(1.70±0.19,1.0,P<0.01),褪黑素拮抗CA引起的tau蛋白Ser422位点过度磷酸化(0.98±0.12,1.70±0.19,P<0.01);CA引起细胞内MDA含量升高(μmol·g-1蛋白,0.241±0.006,0.141±0.006,P<0.01),褪黑素和Vit E均可抑制CA引起的细胞内MDA含量升高(μmol·g-1蛋白,0.172±0.004,0.193±0.005,0.241±0.006,P<0.01);CA不改变p38MAPK活性和蛋白水平,但引起p-JNK含量升高(1.91±0.27,1,P<0.01)和p-MKK4(1.81±0.09,P<0.01)含量升高,褪黑素抑制CA引起的p-JNK含量升高(1.11±0.15,1.91±0.27,P<0.01)和p-MKK4(1.14±0.06,1.81±0.09,P<0.01)含量升高;JNK抑制剂SP600125可抑制CA诱导的tau蛋白过度磷酸化,MKK4磷酸化抑制剂地昔帕明可消除CA诱导的JNK磷酸化和tau蛋白过度磷酸化。结论褪黑素抑制JNK磷酸化参与其对CA诱导的tau蛋白Ser422位点过度磷酸化的预防作用。 展开更多

关键词 褪黑素 花萼海绵诱癌素 TAU磷酸化 丝裂原活化蛋白激酶激酶4

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白细胞介素10与感染性休克 被引量：1

11

作者 肖莉 王志强 《医学综述》 2004年第3期185-186,共2页

关键词 白细胞介素10 感染性休克 细胞因子 免疫抑制

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体外rhTNF-α对人精子运动、线粒体功能影响的实验研究 被引量：5

12

作者 边疆 郭贤坤 +7 位作者 熊承良 黎家华 田永红 马华刚 张燕 聂勇 余伶俐 肖莉 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2004年第6期415-419,共5页

关键词 精子 重组人肿瘤坏死因子-a 线粒体 体外 人

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病案分析法在病理生理学教学中的应用体会 被引量：7

13

作者 尹刚 王志强 《右江民族医学院学报》 2006年第6期1091-1092,共2页

目的探讨以病案分析为基础在《病理生理学》教学中的应用效果。方法根据学生现有的知识结构,把精选的临床病案在上课前几天发放给学生或上课时直接引出,采取分组讨论,由代表发言或即兴自由发言,最后由老师或学生代表进行点评、总结等多... 目的探讨以病案分析为基础在《病理生理学》教学中的应用效果。方法根据学生现有的知识结构,把精选的临床病案在上课前几天发放给学生或上课时直接引出,采取分组讨论,由代表发言或即兴自由发言,最后由老师或学生代表进行点评、总结等多种形式进行教学。结果本教学方法深受学生喜爱,能锻炼学生解决实际问题的能力,巩固所学的知识等,收到满意的效果。结论本教学方法可激发学生的学习热情,提高他们参与课堂教学的主动性;充分挖掘学生潜能,培养他们的临床思维及自学能力和团队协作精神;同时也有利于提高教师的综合素质。 展开更多

关键词 病理生理学 教学 病案分析

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病理生理学开展研究性课堂教学的探索 被引量：6

14

作者 李夏春 《山西医科大学学报（基础医学教育版）》 2007年第4期380-382,共3页

病理生理学作为一门介绍疾病的发病机制,研究并总结其规律的学科,是一门适宜研究性教学的课程。课堂教学中进行研究性教学,选择适当的方法非常重要。根据病理生理学各章内容和各专业的特点采取不同的研究性教学方法,并结合课程特点进行... 病理生理学作为一门介绍疾病的发病机制,研究并总结其规律的学科,是一门适宜研究性教学的课程。课堂教学中进行研究性教学,选择适当的方法非常重要。根据病理生理学各章内容和各专业的特点采取不同的研究性教学方法,并结合课程特点进行适当的研究性实验教学改革,既有助于发展医学生的专业思维,更有助于培养医学生的创新思维。 展开更多

关键词 病理生理学 教学方法 研究性教学 创新思维

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流式细胞仪检测rhTNF-α对人正常精子线粒体功能和质膜完整性影响的实验研究

15

作者 郭贤坤 边疆 +6 位作者 杜丹 周永芹 韩莉 张燕 聂勇 肖莉 余伶俐 《实用医学进修杂志》 2004年第4期206-211,共6页

目的：观察rhTNF-α在体外对人正常精子线粒体功能和质膜完整性的影响。方法：56例健康成年男性手淫法获得精液，按照WHO精液标准分析，合格40例。Peroll梯度离心法得到的精子为精子模型，将精子密度调整为10×10^6／ml，与终浓度3... 目的：观察rhTNF-α在体外对人正常精子线粒体功能和质膜完整性的影响。方法：56例健康成年男性手淫法获得精液，按照WHO精液标准分析，合格40例。Peroll梯度离心法得到的精子为精子模型，将精子密度调整为10×10^6／ml，与终浓度30pg／ml、60pg／ml、90pg/ml、270pg／ml的rhTNF-α分别在37℃、5％CO2的环境中孵育，同时设立对照组。在0．5h、1h、2h、3h、4h时间段取样，用终浓度为10μg／ml的Rhl23和Pl双染色精子，流式细胞仪俭测精子线粒体膜电位及质膜完整性的变化。结果：与对照组相比较，60pg／ml、90pg／ml、270pg／ml各组的线粒体功能良好的精子明显减少，这种变化趋势与TNF-α浓度和孵育时间呈正相关(P<0．01)。30pg／ml组的精子线粒体功能与对照组相比较无统计学差异(P>0．05)；30pg／ml、60pg／ml、90pg／ml、270pg／ml各组的P1染色阳性而Rh123染色阳性的精子数量较对照组多，并且与rhTNF-α浓度和孵育时间呈正相关(P<0．01)。结论：rhTNF-α对人精子线粒体功能有一定的影响，提示有可能干扰精子的能量代谢，降低精子受精能力，并有可能通过线粒体凋亡途径，促进精子凋亡；同时影响精子质膜的完整性。 展开更多

关键词 精子 HTNF-Α 线粒体功能 对照组 正常 流式细胞仪检测 影响 质膜 能量代谢 精液

原文传递

卡泼氏肉瘤病毒复制转录激活因子上调宿主细胞survivin表达的机制 被引量：2

16

作者 高建明 Erle S.Robertson 《湖北民族学院学报（医学版）》 2015年第3期1-3,共3页

目的研究卡泼肉瘤病毒(KSHV)编码的复制转录激活因子(RTA)对宿主细胞survivin表达的调控及机制。方法用实时聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹(Western blot)技术检测RTA转染的细胞、TPA诱导的KSHV阳性细胞survivin mRNA和蛋白质表达水... 目的研究卡泼肉瘤病毒(KSHV)编码的复制转录激活因子(RTA)对宿主细胞survivin表达的调控及机制。方法用实时聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹(Western blot)技术检测RTA转染的细胞、TPA诱导的KSHV阳性细胞survivin mRNA和蛋白质表达水平;采用荧光素酶报告基因技术,检测RTA对survivin基因启动子活性的调节。结果 RTA转染的细胞、TPA诱导的KSHV阳性细胞survivin mRNA和蛋白质表达水平显著增高。RTA通过增强survivin基因启动子活性反式激活survivin表达。结论 KSHV RTA能够特异性地增强survivin基因启动子活性,上调宿主细胞survivin表达。 展开更多

关键词 卡泼肉瘤病毒 复制转录激活因子 SURVIVIN 启动子活性

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医学专业基础课教学中加强职业道德教育的探索 被引量：1

17

作者 李夏春 杨红卫 陆永利 《中国医药科学》 2013年第22期141-142,171,共3页

医学生的职业道德素质直接影响医生的职业道德水平。为探讨在专业基础课程中加强对医学生的职业道德的培养的方法,本院教师在生理学及病理生理学教学中,采取结合相关专业知识组织医学生讨论医学伦理学原则,用医界德材兼备的楷模鼓励医... 医学生的职业道德素质直接影响医生的职业道德水平。为探讨在专业基础课程中加强对医学生的职业道德的培养的方法,本院教师在生理学及病理生理学教学中,采取结合相关专业知识组织医学生讨论医学伦理学原则,用医界德材兼备的楷模鼓励医学生树立钻研医学难题的志向,加强医学生职业道德自我评估等措施,促进了医学生职业道德和专业技能的平衡发展。 展开更多

关键词 医学专业基础课 课堂教学 职业道德教育

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KSHV RTA上调宿主细胞Bcl-2表达的分子机制研究 被引量：1

18

作者 高建明 Erle S.Robertson 《中国当代医药》 2012年第30期12-15,共4页

目的研究卡波氏肉瘤病毒(Kaposis's Sarcoma-Associated Herpesvirus,KSHV)编码的复制转录激活因子(replication and transcription activator,RTA)调控宿主细胞Bcl-2表达的分子机制。方法用实时聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹(W... 目的研究卡波氏肉瘤病毒(Kaposis's Sarcoma-Associated Herpesvirus,KSHV)编码的复制转录激活因子(replication and transcription activator,RTA)调控宿主细胞Bcl-2表达的分子机制。方法用实时聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹(Western blot)技术检测RTA转染的细胞、TPA诱导的KSHV阳性细胞Bcl-2 mRNA和蛋白质表达水平;采用PCR定点突变和荧光素酶报告基因技术,检测RTA对Bcl-2基因启动子活性的调节,并鉴定启动子序列中对RTA调控具有重要作用的顺式反应元件。结果 RTA转染的细胞、TPA诱导的KSHV阳性细胞Bcl-2 mRNA和蛋白质表达水平显著增高。RTA通过与Bcl-2基因启动子中CCN9GG反应元件结合激活Bcl-2的转录,这种激活作用呈剂量依赖性,并且P2启动子对RTA反式激活Bcl-2基因不可或缺。结论 KSHVRTA能够上调宿主细胞Bcl-2表达,CCN9GG样RTA反应元件和P2启动子对RTA调控Bcl-2表达具有重要作用。 展开更多

关键词 卡波氏肉瘤病毒 复制转录激活因子 Bcl-2 表达上调 启动子活性

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卡泼肉瘤病毒复制转录激活因子调控宿主细胞Bcl-2表达的分子机制及其生物学意义 被引量：1

19

作者 高建明 Erle S. Robertson 《中国医药导报》 CAS 2012年第31期12-15,共4页

目的研究卡泼肉瘤病毒(Kaposis′s sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)编码的复制转录激活因子(replication and transcription activator,RTA)调控宿主细胞Bcl-2表达的分子机制及其生物学意义。方法突变Bcl-2启动子第1个与第2个CCN... 目的研究卡泼肉瘤病毒(Kaposis′s sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)编码的复制转录激活因子(replication and transcription activator,RTA)调控宿主细胞Bcl-2表达的分子机制及其生物学意义。方法突变Bcl-2启动子第1个与第2个CCN9GG样序列,构建了新的报告质粒(命名为pGL3-△RRE1,2),用荧光素酶试验和染色质免疫共沉淀进一步验证CCN9GG样RTA反应元件的功能。构建RNA干扰慢病毒载体,筛选稳定感染的BC3细胞,佛波酯诱导48 h后,分别用PCR、PI(碘化吡啶)染色流式细胞术检测病毒子DNA和细胞凋亡率。结果突变第1个与第2个CCN9GG序列导致启动子活性显著降低;染色质免疫共沉淀试验证实RTA蛋白与CCN9GG序列存在直接相互作用。用RNA干扰技术抑制Bcl-2基因后,佛波酯诱导的KSHV阳性细胞与对照组细胞相比凋亡率增加,病毒子产生减少。结论 KSHV RTA能够调控内源性细胞凋亡信号通路,延缓溶解性感染宿主细胞的凋亡,并促进病毒子产生。 展开更多

关键词 复制转录激活因子 Bcl-2 表达上调 抗凋亡 溶解性感染

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KSHV RTA介导的宿主细胞Bcl-2表达上调促进病毒的溶解性感染 被引量：1

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作者 高建明 Erle S.Robertson 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第29期8-13,共6页

目的研究卡泼肉瘤病毒(kaposis's sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)编码的复制转录激活因子(replication and transcription activator,RTA)调控宿主细胞Bcl-2表达的分子机制及其生物学意义。方法用实时聚合酶链反应(RT-PCR)... 目的研究卡泼肉瘤病毒(kaposis's sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)编码的复制转录激活因子(replication and transcription activator,RTA)调控宿主细胞Bcl-2表达的分子机制及其生物学意义。方法用实时聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹(western blotting)技术检测RTA转染的细胞、TPA诱导的KSHV阳性细胞Bcl-2 mRNA和蛋白质表达水平;采用荧光素酶报告基因技术检测RTA对Bcl-2基因启动子活性的调节。构建RNA干扰慢病毒载体,筛选稳定感染的BC3细胞,TPA诱导48 h后,分别用PCR、PI染色流式细胞术检测病毒子DNA和细胞凋亡率。结果 RTA转染的细胞、TPA诱导的KSHV阳性细胞Bcl-2 mRNA和蛋白质表达水平显著增高。RTA反式激活Bcl-2基因启动子,这种激活作用具有剂量依赖性。用RNA干扰技术抑制Bcl-2基因后,TPA诱导的KSHV阳性细胞与对照组细胞相比凋亡率增加,病毒子产生减少。结论KSHV RTA能够调控内源性细胞凋亡信号通路,延缓溶解性感染宿主细胞的凋亡,并促进病毒子产生。 展开更多

关键词 复制转录激活因子 B细胞淋巴瘤-2 表达上调 抗凋亡 溶解性感染

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