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嗜热细菌木糖异构酶基因xylA在酿酒酵母中的高效表达 被引量:33
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作者 鲍晓明 高东 王祖农 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期49-54,共6页
采用PCR技术克隆得到嗜热细菌Clostridiumthermohydrosulfuricum木糖异构酶(xyloseisomeraseXI)基因xylA,将该基因连接于酵母表达载体pMA91的磷酸甘油激酶(PGK)... 采用PCR技术克隆得到嗜热细菌Clostridiumthermohydrosulfuricum木糖异构酶(xyloseisomeraseXI)基因xylA,将该基因连接于酵母表达载体pMA91的磷酸甘油激酶(PGK)启动子下,得到重组质粒pBX1。通过LiAc完整细胞转化法将重组质粒转移至酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)H158受体菌中,得到重组酵母转化子H612,酶活测定结果表明,成功地在酿酒酵母中得到木糖异构酶的活性表达。SDSPAGE电泳结果显示出明显的特异性表达产物带,单体分子量为43kD。由酿酒酵母重组子H612产生的木糖异构酶最高酶活条件与其在自然状态下的一致,均为85℃,pH70,在这一条件下酶的比活力为10U/mg蛋白,而在接近酵母最适生长温度的30℃和40℃时,其相对酶活分别下降37%和11%。研究结果显示在酿酒酵母中得到木糖异构酶的活性表达,为进一步在酿酒酵母菌中建立新的木糖代谢途径打下了基础。 展开更多
关键词 木糖代谢 木糖异构酶 XYLA 酿酒酵母
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米根霉利用木糖与葡萄糖的代谢差异 被引量:17
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作者 窦畅 徐晴 +2 位作者 宋萍 江凌 李霜 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期468-473,共6页
【目的】木质纤维素是世界上储量最丰富、最廉价的可再生生物质资源,以米根霉为研究对象,探讨对木质纤维素中主要单糖成分——木糖和葡萄糖的代谢差异,为木质纤维素的高效利用提供科学依据。【方法】分别以木糖和葡萄糖为碳源,考察米根... 【目的】木质纤维素是世界上储量最丰富、最廉价的可再生生物质资源,以米根霉为研究对象,探讨对木质纤维素中主要单糖成分——木糖和葡萄糖的代谢差异,为木质纤维素的高效利用提供科学依据。【方法】分别以木糖和葡萄糖为碳源,考察米根霉的生物量、细胞大分子组分、胞内还原力(NADH/NAD+)、ATP含量以及有机酸积累的差异。【结果】以木糖为碳源时,米根霉生物量较高,达到9.93 g/L,对糖转化率达37.2%,同时胞内还原力(NADH/NAD+)和ATP含量较高,几乎不积累有机酸;以葡萄糖为碳源时,米根霉生物量为7.28 g/L,对糖转化率仅25.46%,细胞大分子组分、胞内还原力以及ATP的含量较低,但有机酸(乳酸为主)积累量较高。在混糖条件下培养时,米根霉优先利用葡萄糖,当剩余葡萄糖浓度较低时,转向利用木糖。【结论】米根霉代谢木糖和葡萄糖时,胞内还原力和ATP等能量代谢存在较大差异,前者趋向生物大分子合成和生物量的积累,后者趋向积累有机酸等小分子。 展开更多
关键词 木糖 葡萄糖 物质代谢 能量代谢 米根霉
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构建微生物细胞工厂利用木糖合成高值化学品
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作者 王彤 陆亮宇 +3 位作者 申晓林 孙新晓 王佳 袁其朋 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期2695-2709,共15页
木质纤维素是地球上最丰富的可再生资源。以木质纤维素为原料利用微生物细胞工厂合成高附加值化学品是实现绿色生物制造的关键。木糖是木质纤维素中含量仅次于葡萄糖的第二大可发酵糖,因此构建可高效代谢木糖的微生物细胞工厂对于实现... 木质纤维素是地球上最丰富的可再生资源。以木质纤维素为原料利用微生物细胞工厂合成高附加值化学品是实现绿色生物制造的关键。木糖是木质纤维素中含量仅次于葡萄糖的第二大可发酵糖,因此构建可高效代谢木糖的微生物细胞工厂对于实现木质纤维素的全利用具有重要意义。然而与葡萄糖相比,大多数微生物代谢木糖的效率较低,限制了木糖的应用。近年来,微生物代谢机制的深入理解和合成生物学技术的不断进步极大地提高了微生物代谢木糖的效率,拓展了木糖衍生产品的种类。本文综述了自然界存在的几条木糖代谢途径及其衍生的相关产品,总结了构建木糖和葡萄糖共利用菌株的策略,概括了利用木质纤维素水解产物合成目标产品的研究进展,并对相关技术瓶颈和未来发展方向进行了讨论与展望。 展开更多
关键词 木质纤维素 木糖代谢 葡萄糖-木糖共利用 合成生物学
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Xylose: absorption, fermentation, and post-absorptive metabolism in the pig 被引量:3
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作者 Nichole F.Huntley John F.Patience 《Journal of Animal Science and Biotechnology》 SCIE CAS CSCD 2018年第1期1-9,共9页
Xylose, as β-1,4-linked xylan, makes up much of the hemicel ulose in cel wal s of cereal carbohydrates fed to pigs. As inclusion of fibrous ingredients in swine diets continues to increase, supplementation of carbohy... Xylose, as β-1,4-linked xylan, makes up much of the hemicel ulose in cel wal s of cereal carbohydrates fed to pigs. As inclusion of fibrous ingredients in swine diets continues to increase, supplementation of carbohydrases, such as xylanase,is of interest. However, much progress is warranted to achieve consistent enzyme efficacy, including an improved understanding of the utilization and energetic contribution of xylanase hydrolysis product(i.e. xylooligosaccharides or monomeric xylose). This review examines reports on xylose absorption and metabolism in the pig and identifies gaps in this knowledge that are essential to understanding the value of carbohydrase hydrolysis products in the nutrition of the pig. Xylose research in pigs was first reported in 1954, with only sporadic contributions since. Therefore, this review also discusses relevant xylose research in other monogastric species, including humans. In both pigs and poultry, increasing purified D-xylose inclusion general y results in linear decreases in performance, efficiency, and diet digestibility. However,supplementation levels studied thus far have ranged from 5% to 40%, while theoretical xylose release due to xylanase supplementation would be less than 4%. More than 95% of ingested D-xylose disappears before the terminal ileum but mechanisms of absorption have yet to be ful y elucidated. Some data support the hypothesis that mechanisms exist to handle low xylose concentrations but become overwhelmed as luminal concentrations increase. Very little is known about xylose metabolic utilization in vertebrates but it is wel recognized that a large proportion of dietary xylose appears in the urine and significantly decreases the metabolizable energy available from the diet. Nevertheless, evidence of labeled D-xylose-1-^(14)C appearing as expired^(14)CO_2 in both humans and guinea pigs suggests that there is potential,although small, for xylose oxidation. It is yet to be determined if pigs develop increased xylose metabolic capacity with increa 展开更多
关键词 Pentose utilization SWINE Threitol xylose absorption xylose metabolism
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酿酒酵母转录因子Ask10p的研究进展
5
作者 王赟 袁嫒 +1 位作者 李晨豪 徐丽丽 《齐鲁工业大学学报》 CAS 2024年第2期57-61,共5页
酿酒酵母的转录因子Ask10p又称Rgc2p,作为RNA聚合酶II全酶的一个组分参与调节氧化应激反应,还可以作为水甘油通道蛋白Fps1p的正调节因子调节胞内渗透压平衡,近年来随着研究的不断深入,Ask10p已被证实在氧化应激、渗透压胁迫、热激胁迫... 酿酒酵母的转录因子Ask10p又称Rgc2p,作为RNA聚合酶II全酶的一个组分参与调节氧化应激反应,还可以作为水甘油通道蛋白Fps1p的正调节因子调节胞内渗透压平衡,近年来随着研究的不断深入,Ask10p已被证实在氧化应激、渗透压胁迫、热激胁迫和木糖代谢等方面发挥重要的调节作用,本文将概述Ask10p在酿酒酵母中的生物学功能及研究进展,并对其未来研究提出展望,以期为今后的研究提供理论参考。 展开更多
关键词 酿酒酵母 Ask10p Fps1p 胁迫 木糖代谢
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微生物共利用木糖和葡萄糖生产化学品研究进展
6
作者 王川东 张君奇 +3 位作者 刘丁源 马媛媛 李锋 宋浩 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第1期354-372,共19页
木质纤维素生物质是储量丰富的可再生资源,在能源、化工及医药领域具有广阔的应用前景。木质纤维素各组分因氢键和共价键的存在而结合紧密,需经酸、碱、高温、有机溶剂等预处理后才能高效酶解利用,其水解产物的主要成分为己糖(60%~70%,... 木质纤维素生物质是储量丰富的可再生资源,在能源、化工及医药领域具有广阔的应用前景。木质纤维素各组分因氢键和共价键的存在而结合紧密,需经酸、碱、高温、有机溶剂等预处理后才能高效酶解利用,其水解产物的主要成分为己糖(60%~70%,葡萄糖为主)和戊糖(30%~40%,木糖为主)的混合物。本文主要针对水解液中木糖和葡萄糖的共利用效率相关问题,以基因工程改造微生物利用木糖和葡萄糖共发酵生产醇类、生物油脂、γ-聚谷氨酸及有机酸等生物基化学品为主线,从代谢途径重构、基因水平调控及发酵技术优化等方面综述了近年来的研究进展。最后,从菌株筛选、基因与代谢工程调控、细胞固定化、产物处理及发酵工艺等层面总结了该领域目前的研究特点、技术瓶颈和未来的研究方向与思路。 展开更多
关键词 木糖代谢 葡萄糖代谢 发酵 生物能源 有机酸
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酵母发酵生产木糖醇的研究 被引量:4
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作者 秦海青 邱学良 +3 位作者 王成福 赵培培 李林 曹玉华 《中国食品添加剂》 CAS 北大核心 2013年第3期152-157,共6页
木糖醇是一种天然存在的糖醇,通过化学方法目前已经实现了规模化生产。近几年科研人员对发酵生产木糖醇的关注度很高,因为由半纤维素水解得到的木糖料液直接发酵生产木糖醇,具有工序步骤短、产品更天然、生产安全容易保障的优点。要发... 木糖醇是一种天然存在的糖醇,通过化学方法目前已经实现了规模化生产。近几年科研人员对发酵生产木糖醇的关注度很高,因为由半纤维素水解得到的木糖料液直接发酵生产木糖醇,具有工序步骤短、产品更天然、生产安全容易保障的优点。要发酵生产木糖醇,首先微生物必须能够利用木糖,从国内外的研究来看,酵母在发酵生产木糖醇方面具有很大的优势。本文主要综述了木糖在酵母细胞中的运输与代谢、影响发酵生产木糖醇的因素,以及优化发酵生产木糖醇的方法。 展开更多
关键词 木糖醇 木糖代谢 酵母
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枯草芽孢杆菌基因修饰生产核黄素 被引量:4
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作者 张续 班睿 +1 位作者 刘露 张然 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期59-67,共9页
【目的】研究枯草芽孢杆菌核黄素合成途径、木糖代谢相关基因修饰对核黄素合成的影响。【方法】单独过表达或共同过表达核黄素操纵子中的基因、过表达木糖代谢相关基因构建相应的重组菌株。通过测定和比较重组菌株摇瓶发酵的核黄素产量... 【目的】研究枯草芽孢杆菌核黄素合成途径、木糖代谢相关基因修饰对核黄素合成的影响。【方法】单独过表达或共同过表达核黄素操纵子中的基因、过表达木糖代谢相关基因构建相应的重组菌株。通过测定和比较重组菌株摇瓶发酵的核黄素产量和生物量,表征各个基因修饰的效应。采用摇瓶和5 L罐发酵,考察木糖作为主要碳源以及木糖与蔗糖共代谢对核黄素发酵的影响。【结果】ribA基因单独过表达,使核黄素产量提高99%,但生物量降低30%,出现细胞自溶现象。ribA-ribH基因共表达,使核黄素产量提高280%,并且无细胞自溶和生物量下降现象。1.5%蔗糖与6.5%木糖作为碳源,5 L发酵罐发酵70 h,核黄素产量达到3.6 g/L,与8%蔗糖为碳源的发酵相比,核黄素产量提高80%。木糖代谢相关基因过表达,均明显降低核黄素产量。【结论】与ribA基因单独过表达相比,ribA-ribH基因共表达可有效避免细胞自溶现象,并能进一步提高核黄素产量。蔗糖与木糖共代谢,能够改善前体物供给,有利于提高核黄素产量。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 核黄素 ribH基因 基因表达 木糖 共代谢
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休哈塔假丝酵母转化木糖和葡萄糖为乙醇的发酵转录谱 被引量:2
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作者 熊许洁 蔡鹏 +2 位作者 徐勇 勇强 余世袁 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期338-345,共8页
【目的】探究木糖发酵典型菌株休哈塔假丝酵母在己糖和戊糖发酵中的转录谱及差异,筛选出与木糖利用和乙醇发酵代谢途径及调控相关的关键性酶和功能蛋白质基因。【方法】应用新一代高通量测序技术454 GS FLX Titanium分别构建了休哈塔假... 【目的】探究木糖发酵典型菌株休哈塔假丝酵母在己糖和戊糖发酵中的转录谱及差异,筛选出与木糖利用和乙醇发酵代谢途径及调控相关的关键性酶和功能蛋白质基因。【方法】应用新一代高通量测序技术454 GS FLX Titanium分别构建了休哈塔假丝酵母木糖、葡萄糖发酵的cDNA文库,并进行De novo转录组的表达序列标签大规模测序和序列比较分析,进而挖掘出该酵母中参与木糖代谢和乙醇发酵的相关基因。【结果】分别对木糖和葡萄糖发酵样本进行二分之一RUN测序并各自得到60万条reads,序列平均长度400 bp。共拼接得到7250条(木糖)和7168条(葡萄糖)contigs,并利用BLAST对木糖样品和葡萄糖样品中的2421个基因(contig)和2456个基因(contig)进行了功能注释和GO分类。通过两个文库间的序列对比分析,共发现158个基因属于差异表达状态(P<0.05)。基于经典的糖酵解及乙醇发酵途径筛选出与木糖乙醇发酵相关的候选基因,并且比较分析其转录水平的差异。【结论】基于大规模转录谱测序和比较分析首次筛选出休哈塔假丝酵母中参与木糖代谢和乙醇发酵的基因群,可为后续的分子生物学及代谢调控研究提供基础数据。 展开更多
关键词 休哈塔假丝酵母 木糖代谢 乙醇发酵 转录谱 表达序列标签
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罗氏真养菌W50的D-木糖代谢途径工程改造 被引量:2
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作者 刘凯 刘桂明 +2 位作者 张英姿 丁久元 翁维琦 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期42-52,共11页
【目的】拓宽高产聚-β-羟基丁酸酯(poly-β-hydroxybutyrate,PHB)罗氏真养菌(Ralstonia eutropha)W50的碳源使用范围,使其获得D-木糖代谢能力。【方法】运用PCR技术扩增大肠杆菌(Escherichia coli)K-12W3110来源的D-木糖转运蛋白基因xy... 【目的】拓宽高产聚-β-羟基丁酸酯(poly-β-hydroxybutyrate,PHB)罗氏真养菌(Ralstonia eutropha)W50的碳源使用范围,使其获得D-木糖代谢能力。【方法】运用PCR技术扩增大肠杆菌(Escherichia coli)K-12W3110来源的D-木糖转运蛋白基因xylE,利用同源重组技术将xylE基因整合到R.eutropha W50的染色体上构建菌株W50-E。运用PCR技术扩增E.coli K-12 W3110来源的D-木糖代谢基因xylAB和R.eutropha H16来源的PHA合酶基因phaC1的启动子片段P pha C1,同表达载体连接后构建重组质粒p1-AB。将重组质粒分别转入菌株R.eutropha W50和W50-E中构建工程菌株W50-AB和W50-EAB。通过摇瓶发酵研究W50-AB和W50-EAB的D-木糖代谢特性。【结果】酶活分析结果表明,xylA和xylB基因在菌株R.eutropha W50中得到表达。摇瓶发酵结果表明,W50-AB在含0.1 mol/L D-木糖的基础发酵培养基中的最大比生长速率为0.025 h-1,在含0.01 mol/L D-木糖的基础发酵培养基中没有生长;W50-EAB在含0.01 mol/L D-木糖的基础发酵培养基中表现出一定生长,在含0.1 mol/L D-木糖的基础发酵培养基中最大比生长速率为0.035 h-1。PHB含量分析结果表明,摇瓶发酵终点时,W50-AB和W50-EAB菌株内的PHB含量分别为细胞干重的15.07±1.01%和15.07±1.64%,其相应的D-木糖-PHB转化率分别为0.0920 g·g-1和0.0838 g·g-1,低于两重组菌株利用葡萄糖发酵的糖-PHB转化率(>0.22 g·g-1)。另外,重组菌株W50-AB和W50-EAB在含葡萄糖(0.01 mol/L)和D-木糖(0.09 mol/L)的混合糖培养基中的发酵结果表明,两重组菌株均表现出更高的生长速率和D-木糖消耗速率以及胞内PHB积累量。【结论】来源于E.coli K-12W3110菌株的xylAB基因的表达使R.eutropha W50获得了一定的D-木糖代谢能力,通过D-木糖转运蛋白基因xylE的表达能提高菌株的D-木糖代谢能力,同时重组菌株利用D-木糖能积累一定量PHB。 展开更多
关键词 罗氏真养菌(Ralstonia eutropha)W50 D-木糖代谢 聚-β-羟基丁酸酯(PHB) 转运蛋白
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木糖发酵生产燃料酒精的研究进展
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作者 方春雷 修秀红 +1 位作者 马风顺 贺东海 《山东轻工业学院学报(自然科学版)》 CAS 2012年第2期34-37,共4页
木糖发酵产生酒精是植物纤维资源综合利用的一条重要途径,本文主要对木糖性质、木糖代谢及其应用前景进行阐述。本文重点阐述了温度和通气量以及酒精和底物浓度对木糖发酵的影响。分析了木糖发酵生产乙醇的现状。提出木糖发酵生产乙醇... 木糖发酵产生酒精是植物纤维资源综合利用的一条重要途径,本文主要对木糖性质、木糖代谢及其应用前景进行阐述。本文重点阐述了温度和通气量以及酒精和底物浓度对木糖发酵的影响。分析了木糖发酵生产乙醇的现状。提出木糖发酵生产乙醇未来应重点做的研究。 展开更多
关键词 木糖 发酵 燃料酒精 代谢
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重组菌Ralstonia eutropha W50-EAB D-木糖代谢相关的限速靶点
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作者 王露 刘桂明 +3 位作者 张英姿 王宇 丁久元 翁维琦 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期164-175,共12页
【目的】通过代谢工程改造真养罗氏菌(Ralstonia eutropha)W50-EAB木糖代谢的相关限速靶点,进一步提高R.eutropha W50-EAB的D-木糖利用效率,为获得高效利用纤维素水解液的菌株奠定基础。【方法】利用PCR技术扩增R.eutropha转酮酶基因tkt... 【目的】通过代谢工程改造真养罗氏菌(Ralstonia eutropha)W50-EAB木糖代谢的相关限速靶点,进一步提高R.eutropha W50-EAB的D-木糖利用效率,为获得高效利用纤维素水解液的菌株奠定基础。【方法】利用PCR技术扩增R.eutropha转酮酶基因tkt A,cbb T2和转醛酶基因tal,将扩增的tkt A,cbb T2和tal基因分别构建到表达载体p BBR1MCS-3上,获得重组质粒p WL1-TKT,p WL1-CBBT2,p WL1-TAL。通过电转的方式将质粒分别转化W50-EAB获得重组菌W50-KAB,W50-CAB和W50-TAB。利用基因敲除的方法,获得醛还原酶基因h16_A3186敲除株W50'-EAB。通过电转的方式将重组质粒p WL1-TAL导入敲除株W50'-EAB获得重组菌株W50'-TAB。通过摇瓶发酵研究重组菌株W50-KAB,W50-CAB,W50-TAB,W50'-EAB以及W50'-TAB的发酵特性。【结果】酶活分析结果表明,转酮酶和转醛酶基因实现表达。摇瓶发酵结果表明,转酮酶基因过表达菌株W50-KAB和W50-CAB相比于对照菌株W50-EAB/p3,表现出降低的木糖利用能力;而转醛酶基因过表达重组菌株W50-TAB以及敲除菌株W50'-EAB对木糖的利用得到一定的提高。在0.1 mol/L木糖的发酵培养基中,W50-EAB的最大比生长速率为0.035 h-1,PHB干重比为16.2±1.01%;而W50-TAB的最大比生长速率提高到0.039 h-1,PHB干重比达到20.5±0.76%;醛还原酶基因敲除菌株W50'-EAB最大比生长速率提高到0.040 h-1,PHB含量提高到19.8±1.05%。结果显示转醛酶基因的过表达与醛还原酶基因的敲除对木糖利用均表现出一定的优势,将这两种优势组合获得菌株W50'-TAB,摇瓶发酵分析结果为最大比生长速率达到0.042 h-1,PHB积累达到27.9±0.47%,相比于对照菌株提高了72.2%。另外,在含有葡萄糖(0.01 mol/L)和木糖(0.09 mol/L)的混合糖培养下,重组菌株W50-TAB,W50'-EAB和W50'-TAB相比于在纯木糖培养下都表现出更高的生物量和胞内PHB积累量。【结论】磷酸戊糖途径关键酶转醛酶基因的过表达加速了木糖代谢流,从而 展开更多
关键词 R.eutropha W50-EAB 木糖代谢 聚-β-羟基丁酸酯 磷酸戊糖途径 醛还原酶
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转录因子MtlR介导嗜热厌氧杆菌SCUT27木糖代谢途径的激活
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作者 陈莉莉 屈春云 +1 位作者 傅宏鑫 王菊芳 《生物技术》 CAS 2021年第4期321-328,共8页
[目的]探究嗜热厌氧杆菌Thermoanaerobacterium aotearoense SCUT27(SCUT27)木糖代谢途径的调控机制,强化葡萄糖和木糖共利用。[方法]通过q PCR、RT-PCR对木糖代谢相关基因xyl A、xyl B和xyl T的共转录及功能进行验证,然后利用基因敲除... [目的]探究嗜热厌氧杆菌Thermoanaerobacterium aotearoense SCUT27(SCUT27)木糖代谢途径的调控机制,强化葡萄糖和木糖共利用。[方法]通过q PCR、RT-PCR对木糖代谢相关基因xyl A、xyl B和xyl T的共转录及功能进行验证,然后利用基因敲除技术构建rok、lac I和mtlR的敲除菌,以探究其对木糖代谢的调控,最后构建mtlR的过表达菌株,强化葡萄糖和木糖的共利用。[结果]RT-PCR结果显示xyl A、xyl B和xyl T共转录;敲除xyl AB后,木糖利用能力下降83.72%;当敲除rok和lac I后,木糖利用能力变化不显著;敲除mtlR后,木糖利用能力下降67.56%,xyl AB和xyl T的转录水平分别下降约39.67%和86.93%。过表达mtlR后,xyl AB的转录水平提高约44.75%,木糖利用能力提高25.71%。[结论]转录因子MtlR是SCUT27木糖代谢的正调控因子,过表达mtlR可强化SCUT27的葡萄糖和木糖共利用。 展开更多
关键词 Thermoanaerobacterium aotearoense 木糖代谢 木糖操纵子 转录因子MtlR
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CIT2基因对突变酿酒酵母木糖利用影响的研究
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作者 李维维 张骥 +5 位作者 陈朝儒 王智 曲娟娟 顿宝庆 李桂英 路明 《生物技术进展》 2016年第6期455-461,共7页
木糖利用困难是秸秆燃料乙醇产业化的制约因素,改造酿酒酵母使其能够代谢木糖生成乙醇是当前研究的热点之一。为了研究CIT2基因对遗传改良酿酒酵母C5D-P-M菌株中葡萄糖与木糖共发酵过程中木糖利用的影响,设计引物并应用重叠PCR技术获得... 木糖利用困难是秸秆燃料乙醇产业化的制约因素,改造酿酒酵母使其能够代谢木糖生成乙醇是当前研究的热点之一。为了研究CIT2基因对遗传改良酿酒酵母C5D-P-M菌株中葡萄糖与木糖共发酵过程中木糖利用的影响,设计引物并应用重叠PCR技术获得敲除CIT2基因的敲除组件,通过同源重组的方法将C5D-P-M中的CIT2基因敲除得到突变菌株C5D-P-M-CIT2Δ。通过对出发菌株和突变菌株的生长速率、葡萄糖利用率、木糖利用率及乙醇产量进行研究,结果表明突变菌株C5D-P-M-CIT2Δ的上述指标比出发菌株C5D-P-M均有一定程度的提高。因此推测,酿酒酵母中CIT2基因是影响木糖利用的因素之一,CIT2基因的敲除可提高酿酒酵母的木糖利用率。 展开更多
关键词 酿酒酵母 CIT2基因 基因敲除 木糖代谢
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