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胰岛素样生长因子-1对甲状旁腺激素介导成骨细胞增殖及成骨活性的影响 被引量:7
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作者 刘冰 卢蕾阳 +1 位作者 高飞 杨静 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1298-1301,共4页
目的通过构建乳鼠颅盖骨成骨细胞分离培养与鉴定方法,研究胰岛素样生长因子-1(Insulin-like growth factor-1,IGF-1)及IGF-1联合重组人甲状旁腺激素1-34(recombinant human parathyroid hormone 1-34,rhPTH1-34)对成骨细胞增殖及I型胶... 目的通过构建乳鼠颅盖骨成骨细胞分离培养与鉴定方法,研究胰岛素样生长因子-1(Insulin-like growth factor-1,IGF-1)及IGF-1联合重组人甲状旁腺激素1-34(recombinant human parathyroid hormone 1-34,rhPTH1-34)对成骨细胞增殖及I型胶原蛋白mRNA表达的影响。方法培养乳鼠成骨细胞,并观察其形态及功能,以原代培养乳鼠成骨细胞为实验模型,分空白组、PTH组、IGF-1组及不同浓度IGF-1作用的PTH介导的成骨细胞组(0、10、50、100 ng/L)。通过不同剂量的胰岛素样生长因子-1(0、10、50、100 ng/L)联合10-9mol/L重组人甲状旁腺素刺激体外培养的成骨细胞,用噻唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖能力,RT-PCR法检测成骨细胞I型胶原蛋白mRNA的表达。结果 PTH和IGF-1均可促进成骨细胞增殖;IGF-1联合PTH可以促进成骨细胞增殖,且具有剂量依赖性。PTH联合IGF-1使成骨细胞增殖能力增强、I型胶原蛋白mRNA表达增强。IGF-1可以促进成骨细胞I型胶原蛋白mRNA的表达,且具有剂量依赖性。IGF-1可以促进成骨细胞I型胶原蛋白mRNA的表达,且具有剂量依赖性。结论 PTH与IGF-1均可刺激成骨细胞增殖和分化,IGF-1可促进PTH对成骨细胞的分化、增殖。两者合用其作用增强,有协同促进作用。 展开更多
关键词 重组人甲状旁腺激素1-34 胰岛素样生长因子-1 成骨细胞 增殖 I型胶原蛋白mRNA
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Effects of the CNTF-collagen gel-controlled delivery system on rat neural stem/progenitor cells behavior 被引量:3
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作者 YANG ZhaoYang1, QIAO Hui2 & LI XiaoGuang1,3 1School of Biological Science and Medical Engineering, Beihang University, Beijing 100191, China 2Public Heath School, Ningxia Medical University, Yinchuan 750004, China 3Beijing Institute for Neuroscience, Capital Medical University, Beijing 100069, China 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2010年第4期504-510,共7页
The injury of central nervous system (CNS) usually causes the cavity formation. Although transplantation of neural stem/precursor cells (NSPCs) into the lesioned area of CNS has been shown to be implicated in the func... The injury of central nervous system (CNS) usually causes the cavity formation. Although transplantation of neural stem/precursor cells (NSPCs) into the lesioned area of CNS has been shown to be implicated in the functional restoration, the therapeutic result is limited by the poor survival of NSPCs as well as their insufficient proliferation and differentiation abilities. Type-1 collagen is considered as a candidate scaffold or drug delivery system to overcome the aforementioned obstacle. This study observed the effects of the CNTF (ciliary neurotrophic factor)-collagen gel-controlled delivery system and daily addition of soluble-form CNTF on the NSPC survival, migration, proliferation and differentiation. The results showed that, within 12 h of the initial co-culture, CNTF was released in a burst pattern, then the CNTF-collagen gel-controlled delivery system stably released CNTF for up to 12 d. The cell viability test, together with immunohistochemistry, RT-PCR and Western blotting, showed that the CNTF-collagen gel-controlled delivery system supported the NSPCs seeded on the surface of collagen gel survival and facilitated their migration and proliferation. The daily addition of soluble-form CNTF to the medium had similar effects to the CNTF-collagen gel-controlled delivery system, but large quantities of soluble-form CNTF were consumed during the entire process. Taken together, the CNTF-collagen gel-controlled delivery system not only provides a physical scaffold for the transplanted NSPCs to adhere and migrate, but also facilitates the NSPC survival, growth and proliferation, simultaneously reducing the consumption of the expensive growth factors. This system may be used to enhance the microenvironment in the lesioned area of CNS. 展开更多
关键词 SPINAL CORD NEURAL stem/progenitor cells control release type-1 collagen CNTF
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RGD七肽固定胶原对人牙周膜成纤维细胞增殖的影响 被引量:3
3
作者 朱丽红 吴勇 +2 位作者 袁理 马丽辉 郑雨燕 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期856-859,共4页
目的将RGD七肽(GRGDSPC)固定于Ⅰ型胶原材料,检测其对人牙周膜成纤维细胞增殖的影响。方法实验分4组,A组:耦联组,采用化学交联剂Sulfo-LC-SPDP,使含RGD肽的GRGDSPC肽与胶原支架耦联;B组:混合组,将GRGDSPC肽与Ⅰ型胶原直接混合后涂层;C组... 目的将RGD七肽(GRGDSPC)固定于Ⅰ型胶原材料,检测其对人牙周膜成纤维细胞增殖的影响。方法实验分4组,A组:耦联组,采用化学交联剂Sulfo-LC-SPDP,使含RGD肽的GRGDSPC肽与胶原支架耦联;B组:混合组,将GRGDSPC肽与Ⅰ型胶原直接混合后涂层;C组:单纯胶原涂层组;D组:未涂层孔板组。采用贴壁法培养人牙周膜成纤维细胞,鉴定其细胞起源。采用CCK-8实验检测种植于材料表面的人牙周膜成纤维细胞在2、4、6 h时的增殖效果。多因素方差分析涂层分组、RGD七肽浓度及时间变量对吸光度(A)值的影响。结果耦联组GRGDSPC肽固定Ⅰ型胶原后人牙周膜成纤维细胞增殖效应明显高于其它各组,在所观察的时间段和浓度范围内呈现一定的时间和肽浓度依赖性。结论 GRGDSPC肽对Ⅰ型胶原的表面修饰,可提高人牙周膜成纤维细胞增殖,有利于牙周组织再生及重建。 展开更多
关键词 RGD七肽 人牙周膜成纤维细胞 Ⅰ型胶原 细胞增殖
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血清脂质运载蛋白2、骨代谢指标与中年女性骨密度相关性研究 被引量:7
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作者 张月辉 姜虹 +1 位作者 矫亚男 栾树礼 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1739-1742,共4页
目的观察血清脂质运载蛋白2(lipocalin 2,LCN2)、骨代谢指标与中年女性骨密度的相关性。方法分析253名汉族女性资料,通过双能X线吸收测定法测量其腰椎和股骨颈的骨密度(bone mineral density,BMD),测量LCN2、I型胶原的羧基末端交联端肽(... 目的观察血清脂质运载蛋白2(lipocalin 2,LCN2)、骨代谢指标与中年女性骨密度的相关性。方法分析253名汉族女性资料,通过双能X线吸收测定法测量其腰椎和股骨颈的骨密度(bone mineral density,BMD),测量LCN2、I型胶原的羧基末端交联端肽(type I collage cross-linked-telopeptide,CTX)、骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)和肌酸酐(screatinine,Scr)的血清水平。结果LCN2与腰椎和股骨颈的BMD呈负相关。LCN2和CTX、OCN、年龄、Scr之间呈显著正相关。调整年龄和Scr后,LCN2、BMDs和OCN之间的相关性消失,但LCN2仍与CTX呈正相关。LCN2的血清浓度在有和没有骨质疏松性骨折的受试者之间没有显示出显著差异。在多变量回归分析中,LCN2是血清CTX变化的主要决定因素之一。结论在中年女性中,血清LCN2水平、BMD和OCN之间的关系受到年龄和Scr的干扰。虽然LCN2与CTX呈正相关,但相关性非常小。 展开更多
关键词 脂质运载蛋白2 1型胶原的竣基末端交联端肽 骨钙蛋白 骨密度
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有氧运动在预防兔膝骨关节炎发生中的作用及其机制研究 被引量:3
5
作者 兰纯娜 王如蜜 +2 位作者 周罗治非 张长杰 师婕 《中华物理医学与康复杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期561-565,共5页
目的通过观察有氧运动对兔膝骨关节炎(OA)软骨中Ⅱ型胶原和糖胺聚糖(GAG)含量及软骨细胞凋亡率的影响,探讨有氧运动对OA的预防作用及其可能的作用机制。方法将新西兰大白兔20只按随机数字表法分为A、B、C、D四组,每组5只大白兔。... 目的通过观察有氧运动对兔膝骨关节炎(OA)软骨中Ⅱ型胶原和糖胺聚糖(GAG)含量及软骨细胞凋亡率的影响,探讨有氧运动对OA的预防作用及其可能的作用机制。方法将新西兰大白兔20只按随机数字表法分为A、B、C、D四组,每组5只大白兔。入组后,A组笼内自由活动9周;B组笼内自由活动4周;C组接受有氧运动,训练速度为0.5km/h,每周3次,每次20min,训练4周;D组亦接受有氧运动,训练速度为1.5km/h,每周5次,每次20min,共4周。B、c、D3组均于活动或训练4周后,采用木瓜蛋白酶法建立OA模型,1周后经磁共振成像(MRI)检查,均确认造模成功,然后笼内自由活动4周。入组9周后,将4组大白兔处死,采用Mankin评分比较各组问关节软骨损伤程度,并对软骨Ⅱ型胶原的表达、软骨GAG的含量以及软骨细胞凋亡率进行检测。结果人组9周后,B、c、D3组大白兔的Mankin评分、Ⅱ型胶原和GAG含量均显著低于A组,差异均有统计学意义(P〈O.05),B组的Mankin评分、Ⅱ型胶原和GAG含量亦显著低于D组,差异均有统计学意义(P〈O.05)。人组9周后,A组的软骨细胞凋亡率为(3.45±18)%,显著低于B、C、D3组,差异均有统计学意义(P〈O.05),且c、D2组的软骨细胞凋亡率亦显著低于与B组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论有氧运动可能通过抑制骨性关节炎关节软骨基质中Ⅱ型胶原和GAG总量的减少预防兔膝关节软骨的退变,其作用机制可能与软骨细胞凋亡的减少有关。 展开更多
关键词 有氧运动 骨关节炎 Ⅱ型胶原 糖胺聚糖 软骨细胞凋亡
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Bone markers predict survival in castration-resistant prostate cancer patients treated with docetaxel
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作者 Takumi Endo Naoto Kamiya +8 位作者 Hiroyoshi Suzuki Ryo Oka Fang-Ching Lee Takanobu Utsumi Masashi Yano Shuichi Kamijima Koji Kawamura Takashi Imamoto Tomohiko Ichikawa 《World Journal of Clinical Urology》 2014年第2期139-143,共5页
AIM: To investigate the relationship between clinicopathological features and bone turnover markers in castration-resistant prostate cancer(CRPC) patients treated with docetaxel.METHODS: Thirty-three patients were enr... AIM: To investigate the relationship between clinicopathological features and bone turnover markers in castration-resistant prostate cancer(CRPC) patients treated with docetaxel.METHODS: Thirty-three patients were enrolled in this study. Serum levels of carboxyterminal cross-linked telopeptide of type 1 collagen generated by metalloproteinases(1CTP) and alkaline phosphatase(ALP) were measured at the start of docetaxel chemotherapy. We examined the relationship between clinicopathological features and serum levels of 1CTP and ALP levels in CRPC patients treated with docetaxel.RESULTS: For the total patient group, the mean ± standard deviation(SD) values for docetaxel chemotherapy dose, dose intensity, dosage interval, and num-ber of cycles were 59.3 ± 10.6 mg/m2, 13.9 ± 5.2 mg/m2 per week, 4.7 ± 1.2 wk, and 11.2 ± 7.4, respectively. Fourteen patients died from prostate cancer. Patients were divided into two groups according to mean + SD of serum 1CTP(8.2 ng/m L) and ALP(538.2 IU/L) levels at the start of docetaxel chemotherapy. Patients with lower levels of serum 1CTP and ALP had significantly better survivals than those with higher serum levels(P < 0.05).CONCLUSION: Serum levels of 1CTP and ALP are predictors of survival in patients with CRPC who are treated with docetaxel. 展开更多
关键词 PROSTATE cancer DOCETAXEL chemotherapy Carboxy-terminal PYRIDINOLINE CROSS-LINKED telopeptide parts of type-1 collagen Alkaline PHOSPHATASE PROGNOSTIC factor
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慢性肾脏病患者尿血管紧张素原与肾脏肾素血管紧张素系统活性的相关性 被引量:11
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作者 章晓燕 吕文律 +2 位作者 滕杰 钟一红 丁小强 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期327-332,共6页
目的探讨慢性肾脏病(CKD)患者尿血管紧张素原(AGT)与肾损伤指标及肾脏局部肾素血管紧张素系统(RAS)活性的关系。方法用放射免疫法和酶联免疫吸附法(ELISA)测定血、尿RAS组分的浓度,并用免疫组织化学方法评价肾内肾素、ACT、血... 目的探讨慢性肾脏病(CKD)患者尿血管紧张素原(AGT)与肾损伤指标及肾脏局部肾素血管紧张素系统(RAS)活性的关系。方法用放射免疫法和酶联免疫吸附法(ELISA)测定血、尿RAS组分的浓度,并用免疫组织化学方法评价肾内肾素、ACT、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和血管紧张素Ⅱ受体的表达。分析129例CKD患者尿AGT与临床指标的相关性以及73例行肾组织活检的CKD患者尿AGT与肾脏局部RAS组分表达的相关性。结果129例CKD患者尿AGT(159.08±125.18)μg/g Cr,Scr(113.20±105.05)μmol/L,估算肾小球滤过率(eGFR)(58.52±27.15)ml·min-1·(1.73m2)-1,尿蛋白量(2.03±2.65)g/24h,尿Ang Ⅱ(164.71±139.25)ng/g Cr,尿Ⅳ型胶原(447.60±800.66)μg/g Cr,尿钠(162.17±81.61)mmol/24h。经Pearson单因素相关分析,尿AGT与eGFR(r=-0.55,P〈0.01)、尿钠(r=-0.20,P〈0.05)呈负相关;与Ser(r=0.51,P〈0.01)、24h尿蛋白量(r=0.30,P〈0.01)、尿AngⅡ(r=0.20,P〈0.05)及尿Ⅳ型胶原(r=0.47,P〈0.01)呈正相关。多元回归分析发现尿AGT与eGFR呈负相关(P〈0.01),与Scr(P〈0.01)、24h尿蛋白量(P〈0.05)、尿Ang Ⅱ(P〈0.05)、尿Ⅳ型胶原(P〈0.01)呈正相关。73例CKD患者。肾活检组织中,尿AGT与肾脏AGT(r=0.45,P〈0.01)、Ang1I(r=0.52,P〈0.01)和Ang Ⅱ1型受体(r=0.28,P〈0.05)免疫组化阳性面积呈正相关。结论尿AGT可能是反映CKD肾脏损伤尤其是慢性损伤程度的指标,可作为肾脏局部AngⅡ活性的无创评价指标。 展开更多
关键词 血管紧张素原 肾小球滤过率 蛋白尿 血管紧张素Ⅱ IV型胶原 肾素血管紧张素系统
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参与骨关节炎的P38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路 被引量:10
8
作者 田佳 王文雅 张柳 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第28期5243-5248,共6页
背景:p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路属于丝裂原活化蛋白激酶家族成员,在骨关节炎的发生发展中发挥重要作用。目的:对骨关节炎病理进程中p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路相关作用机制的研究进展进行综述。方法:由第一作者用计算... 背景:p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路属于丝裂原活化蛋白激酶家族成员,在骨关节炎的发生发展中发挥重要作用。目的:对骨关节炎病理进程中p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路相关作用机制的研究进展进行综述。方法:由第一作者用计算机检索中国期刊全文数据库和PubMed数据库,检索词分别为"p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路、骨关节炎、关节软骨、软骨细胞"和"p38MAPK signal transduction pathway,osteoarthritis,Articular cartilage,Chondrocyte"。从p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路简介,p38丝裂原活化蛋白激酶在骨关节炎中的作用,p38丝裂原活化蛋白激酶阻断剂在骨关节炎中的应用3方面进行总结。共检索到可应用文献90篇,按纳入标准对文献进行筛选,共纳入46篇文章。结果与结论:p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路与软骨细胞的肥大化和钙化、软骨细胞的凋亡、软骨基质金属蛋白酶的合成、软骨炎性细胞因子的产生等有密切关系,对骨关节炎的发生发展有重要影响。p38丝裂原活化蛋白激酶通过多种复杂的机制参与骨关节炎的形成和发展,对其起到极其重要的作用,因此阻断p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路可能成为骨关节炎治疗的新靶点。 展开更多
关键词 组织构建 组织构建综述 骨关节炎 P38丝裂原活化蛋白激酶 信号转导通路 关节软骨 软骨细胞 基质金属蛋白酶 Ⅱ型胶原 病理机制
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ADAMTS-1对小鼠肺成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白的影响 被引量:6
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作者 董素素 张平 +1 位作者 许霞辉 阳洁 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期40-43,共4页
目的探讨含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)对小鼠肺成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白(COL1)表达的影响及可能的机制。方法应用细胞培养技术进行小鼠肺成纤维细胞培养,利用ADAMTS-1为刺激因子,将培养的细胞分为空白组、... 目的探讨含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)对小鼠肺成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白(COL1)表达的影响及可能的机制。方法应用细胞培养技术进行小鼠肺成纤维细胞培养,利用ADAMTS-1为刺激因子,将培养的细胞分为空白组、低、中、高浓度组,应用逆转录-多聚酶链反应技术(RT-PCR)观察COL1 mRNA、转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA在各组中的表达情况;采用蛋白质印迹法(Western blotting)观察各组细胞COL1、TGF-β1的变化。结果与空白组相比,低浓度组、中浓度组、高浓度组的COL1、TGF-β1表达水平下降,其中高浓度组表达水平最低(P<0.05)。结论 ADAMTS-1能降低COL1的表达,抑制TGF-β1是其抗纤维化作用的可能潜在机制。 展开更多
关键词 含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶 肺成纤维细胞 Ⅰ型胶原蛋白 转化生长因子Β1
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补钙理论创新--胶原多肽与钙结合物 被引量:5
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作者 谢静 李宗军 《国际中医中药杂志》 2008年第1期69-71,共3页
钙缺乏是目前全球普遍存在的并且严重影响人们生活质量的营养素缺乏病之一,我国作为发展中国家,尤其应该加强全民科学补钙的意识。补钙的关键在于减少钙质的流失而不是过于强调钙的吸收,人体内骨骼中的钙是以羟基磷酸钙方式沉积、以... 钙缺乏是目前全球普遍存在的并且严重影响人们生活质量的营养素缺乏病之一,我国作为发展中国家,尤其应该加强全民科学补钙的意识。补钙的关键在于减少钙质的流失而不是过于强调钙的吸收,人体内骨骼中的钙是以羟基磷酸钙方式沉积、以骨胶原为黏合剂固定下来的。 展开更多
关键词 Ⅰ型胶原蛋白 胶原多肽 结合性能
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雌激素对大鼠胚胎成骨细胞增殖及胶原合成的影响 被引量:2
11
作者 刘敬 许增禄 +3 位作者 仇文颖 王计奎 钱晓菁 徐园园 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期638-641,共4页
目的 研究雌激素对大鼠胚胎成骨细胞增殖及I型胶原代谢的影响。 方法 分离大鼠胚胎头盖骨成骨细胞 ,分别给予不同浓度雌激素培养 ;观察细胞增殖情况和ALP活性变化 ;苦味酸天狼星红及I型胶原免疫组织化学染色 ,从蛋白质水平观察成骨... 目的 研究雌激素对大鼠胚胎成骨细胞增殖及I型胶原代谢的影响。 方法 分离大鼠胚胎头盖骨成骨细胞 ,分别给予不同浓度雌激素培养 ;观察细胞增殖情况和ALP活性变化 ;苦味酸天狼星红及I型胶原免疫组织化学染色 ,从蛋白质水平观察成骨细胞中I型胶原的变化 ;地高辛标记的I型胶原基因探针进行原位杂交 ,从mRNA水平观察I型胶原的变化。 结果 雌激素可降低大鼠胚胎成骨细胞增殖水平而使ALP活性以及I型胶原蛋白质和mRNA水平均升高。 结论 雌激素可促进成骨细胞分化 ,而抑制增殖。 展开更多
关键词 雌激素 成骨细胞 细胞增殖 I型胶原 骨质疏松
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异槲皮苷对成骨细胞分化及HDAC1和Runx2表达的影响 被引量:2
12
作者 季泽娟 张春旭 +2 位作者 郭占豪 刘方娜 刘鑫 《临床与病理杂志》 2017年第11期2291-2298,共8页
目的:探讨异槲皮苷对成骨细胞分化及对HDAC1和Runx2表达情况的影响。方法:不同浓度梯度异槲皮苷(1×10^(-8),1×10^(-7),1×10^(-6),1×10^(-5) mol/L)连续处理MC3T3-E1细胞系,在作用第3天,借助q RT-PCR技术对MC3T3-E1... 目的:探讨异槲皮苷对成骨细胞分化及对HDAC1和Runx2表达情况的影响。方法:不同浓度梯度异槲皮苷(1×10^(-8),1×10^(-7),1×10^(-6),1×10^(-5) mol/L)连续处理MC3T3-E1细胞系,在作用第3天,借助q RT-PCR技术对MC3T3-E1细胞系中I型胶原蛋白(type 1 collagen,Col 1)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)及骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达进行检测,并对骨细胞分化关键酶ALP的活性和骨钙的形成进行检测,以评估成骨细胞的分化程度。通过q RT-PCR技术检测MC3T3-E1细胞中HDAC1及Runx2的表达水平。结果:异槲皮苷能促进成骨细胞MC3T3-E1中Col 1,ALP及OPN的上调表达,且差异具有统计学意义(P<0.05),并且呈现出一定的剂量效应。异槲皮苷诱导时,成骨细胞分化过程中ALP活性显著增强,骨钙形成明显增加。在1×10-6 mol/L异槲皮苷作用下,成骨细胞系中HDAC1 m RNA和蛋白水平均显著下调(P<0.05),而Runx2 m RNA和蛋白水平均明显上调(P<0.05)。结论:异槲皮苷可能通过下调HDAC1表达、促进Runx2表达,有效地促进成骨细胞分化,为异槲皮苷应用于治疗骨质损伤类疾病提供新的依据。 展开更多
关键词 异槲皮苷 成骨细胞分化 Ⅰ型胶原蛋白 碱性磷酸酶 HDAC1 RUNX2
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RNA干扰沉默CTGF表达对人成骨样MG63细胞Ⅰ型胶原、ALP mRNA表达的影响 被引量:2
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作者 隋国良 彭依群 +1 位作者 翟木绪 廖二元 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2007年第7期469-473,共5页
目的本研究将利用RNA干扰技术,阻断CTGF在人成骨样MG63细胞中的表达,观察CTGF降表达后对人成骨样MG63细胞Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶 mRNA表达的影响。方法针对人CTGF mRNA440、875、910位点设计、合成3对21核苷酸siRNA(siRNA1、siRNA2、siRN... 目的本研究将利用RNA干扰技术,阻断CTGF在人成骨样MG63细胞中的表达,观察CTGF降表达后对人成骨样MG63细胞Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶 mRNA表达的影响。方法针对人CTGF mRNA440、875、910位点设计、合成3对21核苷酸siRNA(siRNA1、siRNA2、siRNA3);在阳离子脂质体介导下转染人成骨样MG63细胞,以空白及非特异性siRNA作为对照,转染48h后收集细胞。采用Northern杂交研究CTGF mRNA表达水平的改变,半定量RT-PCR观察Ⅰ型胶原、ALP mRNA表达的改变,Western blotting观察CTGF蛋白表达的变化。MTT法测定RNA干扰后人成骨样MG63细胞活力的改变。结果空白对照组相比,转染siRNA1、siRNA3的MG63细胞CTGF mRNA和蛋白表达明显下调,转染siRNA2及非特异性siRNA的MG63细胞CTGF的表达无明显变化。转染siRNA1、siRNA3的MG63细胞Ⅰ型胶原、ALP mRNA表达明显下调,细胞活力明显降低。结论针对人CTGF mRNA设计、合成的siRNA可有效抑制人成骨样MG63细胞CTGF的转录和表达;CTGF表达下调可抑制MG63细胞表型标志物Ⅰ型胶原、ALP mRNA的表达,降低MG63细胞活力,这说明CTGF可能在维持骨代谢平衡中具有重要的作用。 展开更多
关键词 RNA干扰 小干扰RNA 结缔组织生长因子 Ⅰ型胶原 碱性磷酸酶
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shRNA对瘢痕疙瘩成纤维细胞Smad3及Ⅰ型胶原表达的影响 被引量:2
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作者 但洋 沈为民 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期78-80,共3页
目的:构建抑制瘢痕成纤维细胞(keloid fibroblast,KFB)Smad3基因表达的shRNA真核表达载体。研究Smad3 shRNA对KFBSmad3及I型胶原(type I collagen,COL1A2)表达的影响。方法:用前期实验筛选出的1对最有效SiRNA重组构建Smad3shRNA表达质... 目的:构建抑制瘢痕成纤维细胞(keloid fibroblast,KFB)Smad3基因表达的shRNA真核表达载体。研究Smad3 shRNA对KFBSmad3及I型胶原(type I collagen,COL1A2)表达的影响。方法:用前期实验筛选出的1对最有效SiRNA重组构建Smad3shRNA表达质粒。通过脂质体介导的方法,将Smad3 shRNA转染到KFB,用RT-PCR及Western blot的方法检测Smad3、COLlA2在不同时间点(0d至9d)表达的变化。结果:①重组质粒经酶切鉴定和测序、RT-PCR和Western blot的结果均证实Smad3 shRNA载体构建成功。②转染Smad3 shRNA后,随着时间的延长,KFB中Smad3的mRNA与蛋白表达都显著减低,到72h作用最强。光密度分析与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。COLlA2的mRNA与蛋白表达都明显下降(P<0.05)。结论:体外构建的shRNA-Smad3 RNAi真核表达载体能显著抑制KFBSmad3的表达。并使其I型胶原mRNA和蛋白水平表达出现相同的变化,提示Smad3 shRNA可能是改善皮肤创面愈合和抑制瘢痕增生一个新的治疗方向。 展开更多
关键词 瘢痕成纤维细胞 SMAD3 Ⅰ型胶原 RNA干扰 SHRNA
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骨髓间充质干细胞调控肝星状细胞增殖和胶原合成的实验研究
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作者 何颖 张伦理 《江西医药》 CAS 2011年第6期502-505,共4页
目的研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)对肝星状细胞(HSCs)增殖、胶原合成的影响。方法 (1)BMSCs对HSCs增殖的影响:利用transwell共培养体系,按1:1细胞比例在6孔塑料培养板上室接种BMSCs(1×105cells/well),下室接种HSCs;对照组成纤维细... 目的研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)对肝星状细胞(HSCs)增殖、胶原合成的影响。方法 (1)BMSCs对HSCs增殖的影响:利用transwell共培养体系,按1:1细胞比例在6孔塑料培养板上室接种BMSCs(1×105cells/well),下室接种HSCs;对照组成纤维细胞代替BMSCs接种于上室;空白组为HSCs单独培养。培养24、48、72h后MTT法检测HSCs增殖抑制率;(2)BMSCs对HSCs胶原合成的影响:实验分为3组,A:HSCs组,B:HSCs+TGF-β1组,C:共培养+TGF-β1组。按上述方法进行BMSCs、HSCs共培养,培养液中加入TGF-β1诱导活化。培养72h后,取出BMSCs并换液,24h后收集培养液,用ELISA方法测定Ⅰ型胶原浓度,收集HSCs,RT-PCR检测HSCsα-SMA以及Ⅰ型胶原的基因表达。结果培养24、48、72 h后,共培养组较对照组可明显提高HSCs增殖抑制率(P<0.01);比较B组,C组Ⅰ型胶原浓度显著下降(P<0.01),同时HSCsα-SMA及Ⅰ型胶原基因表达出现显著下调(P<0.01)。结论 BMSCs在体外可明显抑制HSCs增殖以及抑制TGF-β1诱导的α-SMA表达和Ⅰ型胶原合成。 展开更多
关键词 共培养 骨髓间充质干细胞 肝星状细胞 增殖 Ⅰ型胶原
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基质金属蛋白酶-9在大鼠终板软骨细胞中的表达及意义
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作者 赵平 耿家金 +2 位作者 张永强 张强 程加峰 《国际骨科学杂志》 2013年第4期287-289,301,共4页
目的观察大鼠终板软骨细胞体外自然退变过程中基质金属蛋白酶(MMP)-9表达变化及意义。方法酶消化法及自然传代法获取大鼠腰椎终板软骨细胞,选取P1代及P7代并分别定义为实验组和对照组,倒置相差显微镜、HE染色、甲苯胺蓝染色及实时逆转录... 目的观察大鼠终板软骨细胞体外自然退变过程中基质金属蛋白酶(MMP)-9表达变化及意义。方法酶消化法及自然传代法获取大鼠腰椎终板软骨细胞,选取P1代及P7代并分别定义为实验组和对照组,倒置相差显微镜、HE染色、甲苯胺蓝染色及实时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定终板软骨细胞。实时RT-PCR及Western免疫印迹检测MMP-9变化。结果实验组终板软骨细胞增殖速度减慢并呈梭型,Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖表达均明显下调,MMP-9表达明显增加。结论 MMP-9可能参与终板软骨细胞退变过程,早期调节其表达有可能会阻止终板软骨细胞退变,为椎间盘退变防治提供新的理论依据。 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶-9 终板软骨细胞 Ⅱ型胶原 聚集蛋白聚糖
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健康汉族男女性血清骨转换生化指标P1NP和β-CTX浓度范围再分析 被引量:24
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作者 李梅 章振林 +6 位作者 李艳 邓伟民 邓忠良 胡莹莹 吕芳 徐苓 夏维波 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 2016年第1期7-13,共7页
目的根据健康汉族男女性血清Ⅰ型原胶原氨基端肽(procollagen type 1 N-terminal propeptide,P1NP)和Ⅰ型胶原羧基端肽交联(βcross-linked C-telopeptide of type 1 collagen,β-CTX)浓度,按照不同年龄段进行分层再分析,建立简便... 目的根据健康汉族男女性血清Ⅰ型原胶原氨基端肽(procollagen type 1 N-terminal propeptide,P1NP)和Ⅰ型胶原羧基端肽交联(βcross-linked C-telopeptide of type 1 collagen,β-CTX)浓度,按照不同年龄段进行分层再分析,建立简便的参考范围。方法纳入位于中国不同纬度5个城市的健康汉族受试者,采用化学发光法检测血清骨形成指标P1NP及骨吸收指标β-CTX浓度,并检测骨代谢调节激素甲状旁腺素(parathyroid hormone,PTH)及25羟维生素D(25 hydroxy vitamin D,25OHD)水平。采用自动分析仪检测肝肾功能及血清钙、磷浓度。按照〈30岁;男性:30~50岁,女性:30岁~绝经前;男性:51~70岁,女性:绝经~70岁;〉70岁不同年龄段,分层分析男女性β-CTX和P1NP浓度范围。结果纳入健康受试者1 436人,其中女性936人(65.18%),男性500人(34.82%)。受试者平均年龄(50.6±19.6)岁(15~110岁)。血清P1NP及β-CTX浓度呈非正态分布,总人群P1NP和β-CTX浓度中位数分别是49.36 ng/m L(95%CI:18.79~155.55 ng/m L)及0.37 ng/m L(95%CI:0.11~0.90 ng/m L)。女性按30岁~绝经前作为正常参考人群,血清P1NP及β-CTX浓度范围95%CI分别为17.10~102.15及0.08~0.72 ng/m L;以30~50岁男性为正常参考人群,血清P1NP及β-CTX浓度95%CI分别是20.29~110.53及0.11~0.83 ng/m L。结论在健康汉族大样本男女性建立不同年龄段血清P1NP及β-CTX浓度的正常范围,30岁以下男女性及女性绝经后20年骨转换处于较高水平。 展开更多
关键词 骨转换生化指标 1型胶原羧基端肽交联 血清1型原胶原氨基端肽
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血清β-胶原降解产物、组织蛋白酶K和骨保护素对绝经后骨质疏松患者诊断的研究 被引量:14
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作者 王丹 王治洁 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1231-1235,共5页
目的观察血清β-胶原降解产物(β-CTX)、组织蛋白酶K(CatheK)和骨保护素(OPG)在绝经后骨质疏松患者的诊断意义。方法选择2011年1月至2017年12月在同济医院和第八医院就诊诊断为绝经后骨质疏松的患者110例,为骨质疏松组。选择同期在我院... 目的观察血清β-胶原降解产物(β-CTX)、组织蛋白酶K(CatheK)和骨保护素(OPG)在绝经后骨质疏松患者的诊断意义。方法选择2011年1月至2017年12月在同济医院和第八医院就诊诊断为绝经后骨质疏松的患者110例,为骨质疏松组。选择同期在我院诊断为骨量减少者(65例)和骨量正常者(30例)分别为骨量减少组和骨量正常组。观察各组血清β-CTX,CatheK和OPG水平,骨质疏松患者血清β-CTX,CatheK和OPG与骨折的关系和椎体骨折严重程度的关系,骨质疏松患者血清β-CTX,CatheK和OPG水平的相关性分析,及血清β-CTX,CatheK和OPG的受试者工作特征曲线(ROC)在诊断椎体骨折的价值。结果骨质疏松组的血清β-CTX和CatheK水平明显高于骨量减少组和骨量正常组(P<0.01),骨量减少组明显高于骨量正常组(P<0.01),而骨质疏松组的OPG水平明显低于骨量减少组和骨量正常组(P<0.01),而骨量减少组明显低于骨量正常组(P<0.01)。骨折组的血清β-CTX和CatheK水平明显高于未骨折组(P<0.01),而骨折组的OPG水平明显低于未骨折组(P<0.01)。骨质疏松患者血清β-CTX和CatheK水平随着骨折严重程度的增加出现升高(P<0.01),而OPG水平随着严重程度增加而降低(P<0.01)。骨质疏松患者血清β-CTX与CatheK呈正相关(r=0.816,P<0.05),与OPG水平呈负相关(r=-0.763,P<0.05),CatheK与OPG水平呈负相关(r=-0.687,P<0.05)。通过ROC来预测骨质疏松发生椎体骨折的灵敏度和特异性,联合检测ROC曲线下的面积明显高于β-CTX(Z=2.389,P=0.017),CatheK(Z=2.707,P=0.007)和OPG(Z=2.926,P=0.003)检测,而β-CTX、CatheK和OPG的比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论联合检测β-CTX、CatheK和OPG对骨质疏松患者合并椎体骨折的诊断具有重要的临床价值。 展开更多
关键词 β-胶原降解产物 组织蛋白酶K 骨保护素 骨质疏松 绝经
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骨质疏松性椎体骨折术后血钙、骨代谢状态变化及再骨折风险分析 被引量:11
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作者 潘洪 陈宏 +2 位作者 林宗阳 刘志荣 丁舒晨 《中华内分泌外科杂志》 CAS 2022年第1期108-112,共5页
目的探讨骨质疏松性椎体骨折术后血钙骨代谢状态的变化及再骨折的风险分析。方法选择2018年2月至2020年2月中国人民解放军联勤保障部队第九〇三医院骨四科治疗的骨质疏松性椎体骨折患者260例进行研究,所有患者均给予脊柱后凸成形术治疗... 目的探讨骨质疏松性椎体骨折术后血钙骨代谢状态的变化及再骨折的风险分析。方法选择2018年2月至2020年2月中国人民解放军联勤保障部队第九〇三医院骨四科治疗的骨质疏松性椎体骨折患者260例进行研究,所有患者均给予脊柱后凸成形术治疗。观察临床疗效、血钙、PINP、β-CTX水平变化情况,随访术后再发骨折情况,收集患者临床资料,分析骨质疏松性椎体骨折患者术后再发骨折的危险因素,采用受试者工作特征曲线分析血钙、PINP、β-CTX在骨质疏松性椎体骨折术后再发骨折中的预测价值。结果治疗后,临床总有效率为95.77%(249/260);治疗后,患者血钙、PINP、β-CTX均随着时间的推移而降低,较治疗前差异显著(P<0.05)。所有患者均随访6个月,术后再发骨折81例(31.15%),未再发骨折179例(68.85%)。单因素分析两组年龄、性别、BMI、外伤史、基础疾病、手术椎体部位、手术椎体节段、脊柱矢状面后凸矫正角度、骨水泥注入量差异无统计学意义(P>0.05);长期糖皮质激素使用史、术前骨折椎体数、手术椎体数、血钙、PINP、β-CTX、骨折压缩率、椎体高度恢复率、强化椎体数、骨水泥渗漏与骨质疏松性椎体骨折患者术后再发骨折相关(P<0.05)。多因素非条件Logistic分析显示,长期糖皮质激素使用史、术前骨折椎体数、手术椎体数、骨折压缩率、椎体高度恢复率、强化椎体数、骨水泥渗漏、血钙、PINP、β-CTX均是骨质疏松性椎体骨折患者术后再发骨折的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清血钙预测骨质疏松性椎体骨折患者术后再发骨折AUC为0.820,95%CI为0.770~0.871,截断值为2.12 mmol/L;PINP预测骨质疏松性椎体骨折患者术后再发骨折AUC为0.915,95%CI为0.873~0.957,截断值为45.51 ng/ml;β-CTX预测骨质疏松性椎体骨折患者术后再发骨折AUC为0.973,95%CI为0.957~0.988,截断值为463.29ng/ml。结论在骨质疏� 展开更多
关键词 脊柱后凸成形术 骨质疏松 骨折 I型胶原氨基端前肽 1型胶原交联羧基端肽β特殊序列
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注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对强直性脊柱炎患者血清DKK-1及骨代谢指标的影响 被引量:7
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作者 胡佳琳 郝喆 +2 位作者 杨颖莹 王丹 曾昆 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2021年第8期820-823,共4页
目的:观察注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis, AS)患者血清Dickkopf-1蛋白(DKK-1)及骨代谢指标的影响。方法:选取2016年12月至2018年6月华中科技大学同济医学院附属普爱医院诊治的40... 目的:观察注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis, AS)患者血清Dickkopf-1蛋白(DKK-1)及骨代谢指标的影响。方法:选取2016年12月至2018年6月华中科技大学同济医学院附属普爱医院诊治的40名AS患者为AS组,另选取同期40名健康体检者为对照组,所有AS患者均接受注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白25 mg、每周2次皮下注射治疗,疗程24周。比较2组患者外周血清DKK-1、骨代谢指标[骨钙素(osteocalcin, OC)、Ⅰ型胶原氨基端前肽(aminoterminal propeptide of type 1 collagen, PINP)、Ⅰ型胶原交联C端肽(C-terminal cross-linking telopeptide of type 1 collagen, CTX-1)]、红细胞沉降率(ESR)和C-反应蛋白(CRP)水平。比较AS组患者治疗前及治疗24周后疾病活动度、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、DKK-1、骨代谢指标、ESR及CRP水平。分析AS组患者DKK-1及骨代谢指标与疾病活动度、ESR及CRP的关系。结果:AS组患者血清DKK-1水平明显低于对照组(P<0.01),CTX-1、OC及PINP水平高于对照组(P<0.01)。AS组患者治疗24周后,CTX-1、TNF-α、BASDI、ESR及CRP水平均较治疗前明显下降(P<0.01),而DKK-1、IL-6、OC及PINP变化不明显(P>0.05)。AS组患者血清CTX-1水平与ESR、CRP、 BASDI水平呈正相关关系,而DKK-1、OC、PINP水平与ESR、 CRP、 BASDI水平无相关性。结论:AS患者存在骨代谢的紊乱;DKK-1参与AS新骨形成;注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白能有效控制AS炎症,改善骨代谢,但不能上调DKK-1的表达。 展开更多
关键词 注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白 强直性脊柱炎 Dickkopf-1蛋白 骨钙素 Ⅰ型胶原氨基端前肽 Ⅰ型胶原交联C端肽
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