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全二维液相色谱串联质谱用于银杏叶提取物成分分析的研究 被引量:22
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作者 陈学国 孔亮 +2 位作者 盛亮洪 厉欣 邹汉法 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期46-51,共6页
建立了全二维液相色谱串联质谱分离分析模式,将质脂体色谱柱和ODS反相色谱柱作为二维分析色谱柱,二者通过一个连有两个0 5mL定量环的八通阀耦联。质脂体色谱柱上的馏分在反相色谱柱上分离后,直接进入紫外 检测器,然后经分流器分流后进... 建立了全二维液相色谱串联质谱分离分析模式,将质脂体色谱柱和ODS反相色谱柱作为二维分析色谱柱,二者通过一个连有两个0 5mL定量环的八通阀耦联。质脂体色谱柱上的馏分在反相色谱柱上分离后,直接进入紫外 检测器,然后经分流器分流后进入大气压电离质谱。将该体系用于银杏叶提取物的组成研究,共检测到至少41个组分,结合紫外 可见光谱和质谱信息,其中13个组分初步鉴定为银杏内酯B、银杏内酯C、白果内酯、槲皮素芸香糖苷、槲皮素、槲皮素 3 O β D 葡萄糖基(1 2) α L 鼠李糖苷、槲皮素 3 O β D 葡萄糖苷、异鼠李素、山柰酚 3 O β D 芸香糖基(1 2) α L 鼠李糖苷、异鼠李素 3 O β D 芸香糖苷、山柰酚 3 O β D 葡萄糖苷、山柰酚和山柰酚 3 O β D 芸香糖苷。 展开更多
关键词 全二维液相色谱 质谱 银杏叶提取物 中药
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二维液相色谱-质谱联用分离中药复方葛根芩连汤中的有效成分 被引量:18
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作者 郭菲 王彦 +1 位作者 王刃锋 阎超 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期15-21,共7页
建立了二维液相色谱-质谱联用方法分离中药复方葛根芩连汤的成分。以CN柱作第一维色谱柱,水和甲醇梯度洗脱分离;以ODS柱作第二维色谱柱,20mmol/L乙酸铵缓冲液和乙腈梯度洗脱分离;质谱检测采用电喷雾电离/大气压化学电离(ESI/APCI)复合... 建立了二维液相色谱-质谱联用方法分离中药复方葛根芩连汤的成分。以CN柱作第一维色谱柱,水和甲醇梯度洗脱分离;以ODS柱作第二维色谱柱,20mmol/L乙酸铵缓冲液和乙腈梯度洗脱分离;质谱检测采用电喷雾电离/大气压化学电离(ESI/APCI)复合离子源,正负离子扫描。实验结果表明搭建的二维液相色谱的峰容量显著高于一维色谱,分离效率得到了明显的提高。以第一维色谱的第3个流分为例,对其二维分离进行仔细分析,发现质谱比紫外光谱检测到的组分多,质谱中采用负离子模式比正离子模式检测到的组分多。表明搭建的二维液相色谱-质谱分离平台分离效果好,提高了液相色谱的峰容量和分离效率。该方法操作简便,可作为中药等复杂体系分离分析的有效手段。 展开更多
关键词 二维液相色谱-质谱联用 电喷雾电离/大气压化学电离复合离子源 活性成分 葛根芩连汤
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中药质量标准研究的关键科学问题与相关前沿分析技术应用展望 被引量:22
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作者 潘丽 王峥涛 杨莉 《上海中医药杂志》 2020年第1期14-20,36,13,共9页
探讨中药质量标准研究的现状、难点及关键科学问题;结合文献实例介绍液质联用、二维色谱分离、离子淌度质谱和解吸电喷雾电离质谱成像等现代先进分析技术在中药质量分析中的应用,希冀借助这些前沿技术突破中药质量标准研究的瓶颈问题。
关键词 中药质量控制 关键科学问题 液质联用 二维色谱分离 离子淌度质谱 质谱成像
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2D-LC/MS技术在中药分析中的应用
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作者 侯晓燕 周利 +2 位作者 李翔 康利平 刘二伟 《化学工程师》 CAS 2024年第7期64-68,共5页
2D-LC/MS技术具有强大的分离能力和分辨率,且分析速度快、灵敏度高,能够提供化合物的精确质量数及碎片结构信息,可有效解决中药复杂体系中共洗脱及微量成分无法表征鉴定的问题,在中药分析领域具有良好的应用前景。本文简要综述了2D-LC/M... 2D-LC/MS技术具有强大的分离能力和分辨率,且分析速度快、灵敏度高,能够提供化合物的精确质量数及碎片结构信息,可有效解决中药复杂体系中共洗脱及微量成分无法表征鉴定的问题,在中药分析领域具有良好的应用前景。本文简要综述了2D-LC/MS技术的特点及其在中药化学成分分析和鉴定中的应用,为今后2D-LC/MS技术在中药研究中发挥更大的作用提供参考。 展开更多
关键词 二维液相色谱 高分辨质谱 在线二维 中药化学成分 表征鉴定
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基于等电聚焦-反相HPLC的虎纹捕鸟蛛毒素组学的初步研究 被引量:4
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作者 周铁杨 周健 +1 位作者 熊继先 王贤纯 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期823-831,共9页
虎纹捕鸟蛛(Ornithoctonus huwena)是中国最毒的蜘蛛之一.已有研究表明,其粗毒中含有丰富的低分子量(<10kD)多肽活性成分.为分析这些成分,利用目标蛋白快速分离系统(Proteome LabPF 2D)建立了一种新的二维液相色谱分离方法.该方法包... 虎纹捕鸟蛛(Ornithoctonus huwena)是中国最毒的蜘蛛之一.已有研究表明,其粗毒中含有丰富的低分子量(<10kD)多肽活性成分.为分析这些成分,利用目标蛋白快速分离系统(Proteome LabPF 2D)建立了一种新的二维液相色谱分离方法.该方法包括一维的基于蛋白质等电点(pI)的色谱聚焦分离和二维利用无孔硅胶反相柱的基于疏水性的高效液相色谱分离.得到的反相图谱通过仪器配套的ProteoVue软件转换成与凝胶电泳图像相似的pI/UV图,以更直观地显示多肽成分的数量、分布规律及相对丰度等.洗脱的多肽自动收集后用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱进行分析.从一维分离的11个馏分(pH4.53~8.59)中共检测到大约600个多肽条带.通过质谱分析测得130个多肽的精确分子量,同时通过Denovo测序得到26种多肽(其中包括12种已知多肽)的部分序列信息,并利用这些序列信息对未知多肽进行了生物信息学分析. 展开更多
关键词 蜘蛛 毒素组学 多肽 二维液相色谱 质谱
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基于二维色谱及其联用技术筛查乳及乳制品中外源性风险物质的分析方法研究进展 被引量:4
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作者 贾玮 张荣 +3 位作者 石琳 代春吉 许秀丽 储晓刚 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2018年第23期339-345,共7页
近年来,随着色谱技术飞速发展,二维气相色谱与二维液相色谱等高分辨色谱及其联用技术在乳品质量安全领域被广泛应用。乳及乳制品为复杂基质,基质组分种类多,含量差异性大,色谱共流出化合物给外源性风险物质分离检测带来困难。二维色谱... 近年来,随着色谱技术飞速发展,二维气相色谱与二维液相色谱等高分辨色谱及其联用技术在乳品质量安全领域被广泛应用。乳及乳制品为复杂基质,基质组分种类多,含量差异性大,色谱共流出化合物给外源性风险物质分离检测带来困难。二维色谱具有峰容量大,分辨率和精确度高等优势,与质谱技术进行有效联用,可实现乳及乳制品中外源性风险物质的高通量、快速筛查。本文论述乳制品中风险物质及二维色谱的技术原理、工作流程,综述近十年来二维色谱在乳及乳制品中风险物质筛查研究的应用进展,对其发展趋势及相关应用前景进行了总结展望。 展开更多
关键词 全二维气相色谱 二维液相色谱 风险物质筛查 乳及乳制品 质谱
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基于不同提取方法的水稻叶片蛋白质组的二维液相色谱分离及高分辨质谱分析 被引量:3
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作者 柴爽爽 马有宁 +5 位作者 高欢欢 秦美玲 杨欢 张涵彤 何巧 林晓燕 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期107-113,共7页
建立了酚法提取-二维液相色谱分离-高分辨质谱分析水稻叶片蛋白质组的方法。水稻叶片蛋白质经过酚法提取,酶解肽段脱盐后用离线反相-反相二维液相色谱分离,然后用线性离子阱/静电场轨道阱组合式高分辨质谱分析,共鉴定到2 712种蛋白质。... 建立了酚法提取-二维液相色谱分离-高分辨质谱分析水稻叶片蛋白质组的方法。水稻叶片蛋白质经过酚法提取,酶解肽段脱盐后用离线反相-反相二维液相色谱分离,然后用线性离子阱/静电场轨道阱组合式高分辨质谱分析,共鉴定到2 712种蛋白质。比较了液相色谱分离系统(一维液相色谱与二维液相色谱)和水稻叶片蛋白质提取方法(酚法、十二烷基硫酸钠法(SDS法)和三氯乙酸/丙酮法(TCA/丙酮法))对鉴定蛋白质数量的影响,结果表明:在二维液相色谱条件下,酚法、SDS法和TCA/丙酮法鉴定到的蛋白质数目为2 712、2 415和1 914,分别是一维液相色谱条件下鉴定到的蛋白质数目的 2.7、2.5和1.9倍。二维液相色谱条件下,酚法鉴定到的蛋白质数目比SDS法和TCA/丙酮法分别多297和798。与SDS法和TCA/丙酮法相比,酚法不但鉴定到的蛋白质数量多,而且能够鉴定到一些极端蛋白质,如酸性、碱性及高等电点的蛋白质。此外,对二维液相色谱条件下3种蛋白质提取方法提取到的蛋白质进行生物学功能分类,发现3种方法鉴定到的蛋白质的功能存在互补性,但酚法鉴定到的蛋白质功能种类最多。该法为水稻蛋白质组学研究提供了技术支撑,同时也为其他作物的蛋白质组学研究技术提供重要的借鉴。 展开更多
关键词 酚法 二维液相色谱 高分辨质谱 蛋白质组学 水稻叶片
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基于蛋白质组学技术筛查维吾尔族妇女宫颈癌前病变患者血浆蛋白预警标志物 被引量:3
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作者 郭霞 郝轶 +4 位作者 吐尔逊帕夏.吾布力卡斯木 哈丽丹.热依木 纳菲沙.卡德尔 武贵臻 阿布力孜.阿布杜拉 《科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期37-43,共7页
依托蛋白质二维液相色谱和质谱技术,寻找与新疆维吾尔族妇女宫颈癌癌前病变高度宫颈鳞状上皮内瘤样变(HSIL)相关的血浆预警蛋白标志物,旨在对宫颈癌做到早期预防和诊断。收集维吾尔族HSIL(21例)和宫颈炎(22例)患者血浆标本并制备血浆低... 依托蛋白质二维液相色谱和质谱技术,寻找与新疆维吾尔族妇女宫颈癌癌前病变高度宫颈鳞状上皮内瘤样变(HSIL)相关的血浆预警蛋白标志物,旨在对宫颈癌做到早期预防和诊断。收集维吾尔族HSIL(21例)和宫颈炎(22例)患者血浆标本并制备血浆低丰度蛋白质组样品,通过对蛋白质二维液相色谱系统的分离与鉴别分析,筛选出差异表达的组分,并运用质谱和生物信息学技术进行鉴定和功能识别分析。确定了宫颈炎和HSIL患者的基于蛋白质等电点和疏水性特征的血浆低丰度蛋白质组图谱,筛选出10个差异表达蛋白组分。结果表明,在HSIL患者血浆中3个低丰度蛋白组分含量明显上升,1个组分含量下降;而通过质谱技术鉴定出31种蛋白质,其中4种蛋白质与肿瘤进程密切相关,分别是代谢相关蛋白(APOA1)、信号转导相关蛋白(mTOR、EphA3)和免疫功能相关蛋白(HLA-DQB1)。本文针对维吾尔族妇女这一宫颈癌高发人群,展开癌前病变患者血浆低丰度蛋白组表达水平的研究,鉴定出多种差异表达血浆蛋白预警标志物,为本区宫颈癌的预防和早期鉴别诊断及癌变机制研究提供了依据。 展开更多
关键词 维吾尔族妇女 高度宫颈鳞状上皮内瘤样变 血浆蛋白质组 二维液相色谱 质谱
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二维液相色谱-质谱法研究犬肾小管上皮细胞脂质组成及马兜铃酸(Ⅰ)对其影响 被引量:2
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作者 聂洪港 刘冉冉 +2 位作者 杨悠悠 刘虎威 白玉 《质谱学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第4期289-300,共12页
采用在线正反相二维液相色谱-质谱联用技术研究了犬肾小管上皮细胞脂质组成及马兜铃酸(Ⅰ)对其影响。二维色谱的第一维用于分离不同种类脂质,第二维用于分离同类脂质的不同分子,进而利用高分辨质谱对脂质分子进行检测。该方法减少了... 采用在线正反相二维液相色谱-质谱联用技术研究了犬肾小管上皮细胞脂质组成及马兜铃酸(Ⅰ)对其影响。二维色谱的第一维用于分离不同种类脂质,第二维用于分离同类脂质的不同分子,进而利用高分辨质谱对脂质分子进行检测。该方法减少了共流出,降低了电离抑制,提高了灵敏度与准确性。借助精确质荷比检索数据库、高分辨二级质谱和当量碳数与保留时间规律等方法检测了犬肾小管上皮细胞中13类脂质的1 416个脂质分子。选取11种外源性脂质标准品进行方法验证,方法的线性关系、检测限、重复性均满足检测要求。在此基础上,考察了犬肾小管上皮细胞暴露于马兜铃酸(Ⅰ)后的脂质变化情况,对改变含量2~4倍的15个脂质分子进行了鉴定。该实验结果可为马兜铃酸的毒理、病理研究和相关疾病的临床诊断提供丰富的信息,并展现了二维液相色谱-质谱法在脂质组学研究中广阔的应用前景。 展开更多
关键词 二维液相色谱-质谱 犬肾小管上皮细胞 马兜铃酸 脂质组学
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磷脂组学二维检测平台的建立及其在血清中的应用研究 被引量:1
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作者 李丽 薛芸 +1 位作者 王彦 闫超 《化学与生物工程》 CAS 2017年第5期61-70,共10页
采用离线亲水/反相二维液相色谱-质谱联用(HILIC-RPLC-MS)技术分析血清中的磷脂。以HILIC柱为第一维色谱柱,乙酸铵缓冲液和乙腈为流动相;以C18柱为第二维色谱柱,甲酸铵缓冲液和甲醇为流动相;质谱采用电喷雾离子源,正、负离子扫描。结果... 采用离线亲水/反相二维液相色谱-质谱联用(HILIC-RPLC-MS)技术分析血清中的磷脂。以HILIC柱为第一维色谱柱,乙酸铵缓冲液和乙腈为流动相;以C18柱为第二维色谱柱,甲酸铵缓冲液和甲醇为流动相;质谱采用电喷雾离子源,正、负离子扫描。结果表明,搭建的二维液相色谱的峰容量高于一维色谱,尤其是低丰度磷脂的分离效率得到明显提高。该方法减少了共流出峰,降低了电离抑制,可作为血清等生物复杂体系分离分析的有效手段,为磷脂代谢组学的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 磷脂 二维液相色谱-质谱联用 亲水作用色谱 代谢组学
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中心切割二维高效液相色谱质谱联用法分析磷酸雌莫司汀胶囊中的有关物质
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作者 邓云菲 王林波 +2 位作者 吴晓鸾 彭兴盛 林梅 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1571-1580,共10页
采用中心切割技术将磷酸雌莫司汀(EMP)一维目标组分在定量环收集,经二维色谱在线净化后,用电喷雾离子源(ESI)正负离子模式,以四极杆-飞行时间串联质谱(Q-TOFMS)测定精确相对分子质量和相应组分的二级质谱图,进行结构解析。结果在EMP胶... 采用中心切割技术将磷酸雌莫司汀(EMP)一维目标组分在定量环收集,经二维色谱在线净化后,用电喷雾离子源(ESI)正负离子模式,以四极杆-飞行时间串联质谱(Q-TOFMS)测定精确相对分子质量和相应组分的二级质谱图,进行结构解析。结果在EMP胶囊中检出5个有关物质。它们均具有与主药EMP相似的结构碎片,结合EMP的裂解碎片信息、合成路线及强制降解试验结果,推测出5个有关物质的可能结构及来源,为本品的质量控制提供参考。 展开更多
关键词 磷酸雌莫司汀 有关物质 二维液相色谱 中心切割 四极杆-飞行时间串联质谱
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应用iTRAQ结合2D LC-MS/MS技术分析草菇同核和异核菌丝蛋白质组 被引量:11
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作者 刘靖宇 江玉姬 +4 位作者 谢宝贵 陈炳智 廖伟 邓优锦 刘朋虎 《食用菌学报》 北大核心 2012年第1期1-12,F0003,共13页
首次利用同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantification,iTRAQ)技术结合二维液相色谱串联质谱对草菇(Volvariella volvacea)同核和异核菌丝蛋白质组进行研究。采用QExactive质谱鉴定并经MASCOT软... 首次利用同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantification,iTRAQ)技术结合二维液相色谱串联质谱对草菇(Volvariella volvacea)同核和异核菌丝蛋白质组进行研究。采用QExactive质谱鉴定并经MASCOT软件搜库,对所有鉴定蛋白进行主成分分析(principal component analysis,PCA)、层次聚类(hierarchical clustering)分析和GO(gene ontology)注释,并进行生物信息学分析。结果共获得2335个不同肽段,鉴定到1039个蛋白,其中1030个蛋白具有定量信息。在同核菌丝中显著上调蛋白83个,下调蛋白97个,表明iTRAQ标记技术结合二维液相色谱串联质谱可有效地分离和鉴定草菇菌丝蛋白质组。该研究结果为更深入全面地研究草菇菌丝蛋白质组学奠定基础。 展开更多
关键词 草菇 蛋白质组 ITRAQ 二维液相色谱 串联质谱
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草菇子实体不同成熟阶段的比较蛋白质组学分析 被引量:7
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作者 刘靖宇 江玉姬 +2 位作者 谢宝贵 陈炳智 严俊杰 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期55-68,共14页
采用iTRAQ标记结合二维液相色谱串联质谱技术对草菇不同成熟阶段的差异蛋白质组进行研究。首先将提取的草菇不同成熟阶段蛋白样品进行SDS‐PAGE分析,其次将经二维液相色谱串联质谱技术获取的串联质谱数据通过MASCOT软件搜库,之后对鉴定... 采用iTRAQ标记结合二维液相色谱串联质谱技术对草菇不同成熟阶段的差异蛋白质组进行研究。首先将提取的草菇不同成熟阶段蛋白样品进行SDS‐PAGE分析,其次将经二维液相色谱串联质谱技术获取的串联质谱数据通过MASCOT软件搜库,之后对鉴定蛋白质数据进行了KEGG代谢通路分析。试验共计获得2 335个不同肽段,鉴定到1 039个蛋白质,其中1 030个蛋白质具有定量信息。与蛋形期相比,在伸长期和成熟期阶段显著上调蛋白质85个,下调蛋白质103个。KEGG代谢通路分析结果显示,草菇不同成熟阶段中的68个差异蛋白质可定位于4种伞菌目模式真菌(灰盖鬼伞、双色蜡蘑、可可丛枝病菌和裂褶菌)的45个不同生物代谢途径,全景展示出草菇成熟阶段差异表达蛋白质定位的代谢网络。结果表明,iTRAQ标记技术结合二维液相色谱串联质谱可对不同生长发育时期的草菇蛋白样品进行有效地分离和鉴定。 展开更多
关键词 草菇 KEGG代谢通路分析 iTRAQ标记 二维液相色谱串联质谱
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2D-LC-QTOF-MS法鉴定酒石酸托特罗定片辅料中未知杂质及来源分析
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作者 刘晓佳 潘芳芳 +2 位作者 徐东海 柳文媛 邵鹏 《中国药业》 CAS 2024年第16期68-73,共6页
目的建立鉴定酒石酸托特罗定片辅料中未知杂质的中心切割在线二维液相色谱-四极杆飞行时间质谱(2D-LC-QTOFMS)法,并归属杂质来源。方法一维液相色谱采用Waters XBridge-C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水-高氯酸(200∶... 目的建立鉴定酒石酸托特罗定片辅料中未知杂质的中心切割在线二维液相色谱-四极杆飞行时间质谱(2D-LC-QTOFMS)法,并归属杂质来源。方法一维液相色谱采用Waters XBridge-C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水-高氯酸(200∶800∶1.5,V/V/V)-乙腈(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为220 nm,柱温为65℃,进样量为10μL;二维液相色谱采用Agilent Poroshell 120 EC-C_(18)柱(100 mm×2.1 mm,2.7μm),流动相为甲酸铵缓冲液(20 mmol/L甲酸铵溶液,用甲酸调pH至3.0)-乙腈(55∶45,V/V),流速为0.3 mL/min,检测波长为220 nm,柱温为25℃;质谱采用电喷雾离子源(ESI),正离子检测模式。结果鉴定了1个未知杂质的可能结构,确认该杂质由制剂的预混包衣剂辅料羟丙甲纤维素引入;检测了8家羟丙甲纤维素生产企业的产品,有1家企业检测出该杂质。结论该方法可用于酒石酸托特罗定片中未知杂质的在线定性鉴别。 展开更多
关键词 酒石酸托特罗定片 二维液相色谱-四极杆飞行时间质谱法 中心切割 辅料 羟丙甲纤维素
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用于相对和绝对定量的等量异位标签-二维液相色谱-串联质谱法分析雌二醇和血清剥夺对乳腺癌细胞内蛋白质含量的影响 被引量:6
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作者 朱镭 倪国新 +3 位作者 张政希 徐学敏 胡晓芳 李伟 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期270-278,共9页
雌激素和血清中的激素及各种生长因子在乳腺癌的发生、发展过程中发挥着重要的作用。研究雌激素和血清对乳腺癌细胞中蛋白质组成和含量的影响对于阐明雌激素和血清对乳腺癌细胞影响的分子机理具有重要的意义。利用四重用于相对和绝对定... 雌激素和血清中的激素及各种生长因子在乳腺癌的发生、发展过程中发挥着重要的作用。研究雌激素和血清对乳腺癌细胞中蛋白质组成和含量的影响对于阐明雌激素和血清对乳腺癌细胞影响的分子机理具有重要的意义。利用四重用于相对和绝对定量的等量异位标签(isobaric tags for relative and absolute quantification,iTRAQ)标记结合二维液相色谱-串联质谱(two-dimensional liquid chrom atography-tandem mass spectrometry,2D-LC-MS/MS)对雌二醇(17β-oestradiol,E2)和血清各自以及共同作用对MCF7乳腺癌细胞内蛋白质表达的影响进行了比较,共鉴定到置信度在95%以上的蛋白质576种,其中各组相对于正常培养组的细胞共找到26种差异在1倍以上的蛋白质,其中10种上调,16种下调。研究发现E2和血清可显著影响细胞内与蛋白质合成相关的蛋白质的水平。实验结果表明:iTRAQ-LC-MS/MS是进行多个样品差异蛋白组比较的一种有效方法。 展开更多
关键词 用于相对和绝对定量的等量异位标签(iTRAQ) 二维液相色谱-串联质谱 雌激素 血清剥夺 乳腺癌细胞
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在线固相萃取-二维液相色谱串联质谱法测定人脑脊液中替考拉宁浓度 被引量:5
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作者 左利民 姚静 +3 位作者 王强 周洁 冯梦雪 山广志 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1773-1778,共6页
建立测定人脑脊液中替考拉宁浓度的在线固相萃取-二维液相色谱-串联质谱( SPE-2DLC-MS/MS)法。脑脊液样品经在线固相萃取处理后,通过阀切换二维色谱技术,转载至Shiseido CAPCALL-PAK C18分析柱上进行分离,以25mmol/L乙酸铵(pH 6.0)... 建立测定人脑脊液中替考拉宁浓度的在线固相萃取-二维液相色谱-串联质谱( SPE-2DLC-MS/MS)法。脑脊液样品经在线固相萃取处理后,通过阀切换二维色谱技术,转载至Shiseido CAPCALL-PAK C18分析柱上进行分离,以25mmol/L乙酸铵(pH 6.0)-乙腈为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL/min。采用电喷雾离子源( ESI),以选择反应监测( SRM)方式进行正离子检测,采用氢溴酸东莨菪碱为内标,对脑脊液样本中替考拉宁浓度进行定量检测。本方法中替考拉宁浓度在25~5000μg/L的范围内线性关系良好(R2=0.9993,n=6);日间和日内精密度RSD均小于6%,低中高3个浓度的回收率在100.8%~109.9%之间。结果表明,本方法的选择性好,线性、精密度、准确度和灵敏度高,可用于临床监测替考拉宁浓度。 展开更多
关键词 在线固相萃取 替考拉宁 人脑脊液 二维液相色谱-串联质谱
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合并与不合并2型糖尿病的下肢动脉硬化闭塞症患者血清差异性蛋白组学分析 被引量:3
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作者 杨晓虎 林裕辉 +1 位作者 徐欣 范隆华 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第30期18-21,共4页
目的通过蛋白组学研究,鉴定合并2型糖尿病的下肢动脉硬化闭塞症(DLASO)患者与不合并2型糖尿病下肢动脉硬化闭塞症(LASO)患者血清的差异性蛋白,为防治2型糖尿病患者发生LASO提供依据。方法收集DLASO、LASO各15例患者的血清,对蛋白进行提... 目的通过蛋白组学研究,鉴定合并2型糖尿病的下肢动脉硬化闭塞症(DLASO)患者与不合并2型糖尿病下肢动脉硬化闭塞症(LASO)患者血清的差异性蛋白,为防治2型糖尿病患者发生LASO提供依据。方法收集DLASO、LASO各15例患者的血清,对蛋白进行提取、定量和酶解,应用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)结合二维液相色谱串联质谱(2DLC-MS/MS)技术,鉴定DLASO、LASO患者血清中的蛋白,筛选出DLASO患者与LASO患者的差异表达蛋白。利用PANTHER数据库对鉴定得到的差异性蛋白进行生物学过程、分子作用和细胞组分分析。结果共鉴定出蛋白质338种,筛选出差异性蛋白27种,其中DLASO患者出现表达上调蛋白8种、表达下调蛋白19种。在生物学过程方面,差异性蛋白主要为参与细胞反应(48.1%)、代谢过程(48.1%)和生物黏附(29.6%)的蛋白;在分子作用方面,差异性蛋白主要为参与细胞结合作用(33.3%)、催化活性作用(29.6%)和结构分子活性作用(18.5%)的蛋白;在细胞组分方面,差异性蛋白主要为位于细胞区域(14.8%)、细胞器(14.8%)和细胞外区域(14.8%)的蛋白。结论发现DLASO与LASO患者血清中的差异性蛋白27种,这些差异性蛋白可作为防治DLASO的潜在生物学靶点。 展开更多
关键词 2型糖尿病 下肢动脉硬化闭塞症 蛋白组学 同位素标记 二维液相色谱串联质谱 差异性蛋白
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卵巢浆液性囊腺癌及囊腺瘤的差异蛋白质组学分析 被引量:3
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作者 刘彦红 刘红燕 +2 位作者 张立会 田雪红 聂建国 《中国实验诊断学》 北大核心 2011年第6期1069-1073,共5页
目的探讨卵巢浆液性囊腺癌与卵巢浆液性囊腺瘤的差异表达蛋白质谱,从而寻找特异性诊断标志物。方法采用二维液质联用分析技术。结果卵巢浆液性囊腺癌与卵巢浆液性囊腺瘤两组间差异蛋白数共计128个。其中116个蛋白在卵巢浆液性囊腺癌中... 目的探讨卵巢浆液性囊腺癌与卵巢浆液性囊腺瘤的差异表达蛋白质谱,从而寻找特异性诊断标志物。方法采用二维液质联用分析技术。结果卵巢浆液性囊腺癌与卵巢浆液性囊腺瘤两组间差异蛋白数共计128个。其中116个蛋白在卵巢浆液性囊腺癌中表达上调,12个蛋白表达下调。结论纤维结合蛋白1,基膜聚糖,核心蛋白多糖,骨诱导因子,微管蛋白A、B,肌动蛋白,肌动蛋白素,角蛋白8,结蛋白,膜联蛋白A1、A2,YWHAZ,踝蛋白1,转酮醇酶1,组织蛋白酶D,X线交错互补修复基因6,谷胱甘肽转移酶,核仁蛋白,抑制素,抗原提呈蛋白1,补体4A等22个差异蛋白在卵巢浆液性囊腺癌中的表达异常为首次报道。这些蛋白将有利于卵巢浆液性囊腺癌及卵巢浆液性囊腺瘤的鉴别诊断。与肿瘤物质和能量代谢异常相关的蛋白质可以用于卵巢癌诊断的代谢组学识别模式的建立。 展开更多
关键词 差异蛋白质组学 二维液质联用 卵巢浆液性囊腺癌 卵巢浆液性囊腺瘤
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2D-LC-QTOF MS识别氨基葡萄糖液相含量测定方法中可疑色谱峰 被引量:3
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作者 徐明明 郑璐侠 +3 位作者 汪泓 邵泓 刘国强 陈钢 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期336-341,共6页
目的:采用在线二维液相色谱-四极杆飞行时间质谱法(2D-LC-QTOF MS)对进口药品注册标准JX20030178中氨基葡萄糖液相含量测定法测定的3个可疑色谱峰进行结构分析。方法:第一维色谱采用Inertsil C_8-3色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流... 目的:采用在线二维液相色谱-四极杆飞行时间质谱法(2D-LC-QTOF MS)对进口药品注册标准JX20030178中氨基葡萄糖液相含量测定法测定的3个可疑色谱峰进行结构分析。方法:第一维色谱采用Inertsil C_8-3色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为磷酸盐缓冲液(pH 2.5)-乙腈(80∶20),流速0.5 mL·min^(-1),检测波长195 nm,柱温30℃;第二维色谱采用Poroshell120 EC-C_(18)色谱柱(100 mm×3.0 mm,2.7μm),0.1%(v/v)甲酸水溶液和0.1%(v/v)甲酸乙腈溶液梯度洗脱,流速0.3 mL·min^(-1),柱温30℃。当第一维HPLC目标组分出峰时,通过阀切换将目标组分准确切割并捕获在40μL定量环中,之后第二维HPLC泵将捕获的组分洗脱进行质谱检测。采用正负离子模式采集数据,对第一维谱图中3个色谱峰进行了结构分析。结果:第一维氨基葡萄糖液相含量测定法测定的3个色谱峰分别为氨基葡萄糖、硫酸根离子和氯离子,其中主峰为氯离子,而非活性组分氨基葡萄糖。结论:本实验建立的2D-LC-QTOF MS能用于氨基葡萄糖液相含量测定法测定的3个可疑色谱峰的结构分析。进口药品注册标准JX20030178中氨基葡萄糖液相含量测定法专属性差,该标准亟需改进和提高。 展开更多
关键词 二维液相色谱-四极杆飞行时间质谱法(2D-LC-QTOF MS) 氨基葡萄糖 氯离子 硫酸根离子
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在线二维液相色谱-四极杆飞行时间质谱法检测二丁酰环磷腺苷钙的杂质谱 被引量:3
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作者 徐明明 尹红锐 +2 位作者 邵泓 刘国强 陈钢 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期981-987,共7页
建立了在线二维液相色谱-四极杆飞行时间质谱法(2D-LC-Q-TOF MS)分析二丁酰环磷腺苷钙的杂质谱。第一维色谱采用C18色谱柱,流动相为0.1 mol/L磷酸二氢钾溶液∶甲醇(60∶40),检测波长273 nm;第二维色谱采用Poroshell 120 EC-C18色谱柱,以... 建立了在线二维液相色谱-四极杆飞行时间质谱法(2D-LC-Q-TOF MS)分析二丁酰环磷腺苷钙的杂质谱。第一维色谱采用C18色谱柱,流动相为0.1 mol/L磷酸二氢钾溶液∶甲醇(60∶40),检测波长273 nm;第二维色谱采用Poroshell 120 EC-C18色谱柱,以0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈溶液为流动相,线性梯度洗脱。当第一维HPLC目标组分洗脱时,通过阀切换将目标组分准确切割并捕获在40μl定量环中,之后第二维HPLC泵将捕获的组分洗脱并进行质谱检测。采用正离子模式采集数据。对第一维谱图中的7个杂质进行了结构推测,并分析其来源和稳定性。本试验建立的2D-LC-Q-TOF MS法能用于二丁酰环磷腺苷钙杂质谱的分析,可为其生产工艺和质量控制提供参考。 展开更多
关键词 在线二维液相色谱-四极杆飞行时间质谱法 二丁酰环磷腺苷钙 杂质谱
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