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三七PnbHLH转录因子过表达与PnCAS RNAi协同作用对皂苷合成的影响 被引量:4
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作者 姜利 于怡琳 +3 位作者 江敏 崔秀明 刘迪秋 葛锋 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期94-102,共9页
该研究克隆了三七转录因子基因PnbHLH,其开放阅读框长为966 bp,编码321个氨基酸。构建了三七转录因子PnbHLH过表达载体,成功实现了转录因子PnbHLH基因过表达与植物甾醇合成支路关键酶基因PnCAS RNAi在三七细胞中的整合,探讨过表达PnbHL... 该研究克隆了三七转录因子基因PnbHLH,其开放阅读框长为966 bp,编码321个氨基酸。构建了三七转录因子PnbHLH过表达载体,成功实现了转录因子PnbHLH基因过表达与植物甾醇合成支路关键酶基因PnCAS RNAi在三七细胞中的整合,探讨过表达PnbHLH基因与PnCAS RNAi协同作用对三七皂苷生物合成的调控作用。结果表明,转录因子PnbHLH能够与三七皂苷生物合成途径关键酶基因PnDS,PnSS和PnSE的启动子互作,进而通过调控关键酶基因的表达,间接影响皂苷的生物合成。进一步研究证明,过表达PnbHLH与PnCAS RNAi协同作用是调控皂苷生物合成更加高效的手段。与野生型和PnCAS RNAi三七细胞相比,过表达PnbHLH和PnCAS RNAi细胞系中,三七总皂苷和主要单体皂苷(Rd,Rb_(1),Re,Rg_(1),R_(1))的含量均有不同程度提高,说明皂苷生物合成的正向调节和反向调节2种方式产生了叠加效应。该研究既发挥了转录因子的“多点调控”优势,又整合了皂苷副产物支路的弱化调节,探索出针对三七皂苷生物合成更加合理而高效的调控策略。 展开更多
关键词 三七 皂苷 人参属 bhlh转录因子 RNA干扰
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bHLH转录因子的磷酸化调控植物生理功能的研究进展 被引量:1
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作者 刘铖霞 孙宗艳 +2 位作者 罗云波 朱鸿亮 曲桂芹 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期26-34,共9页
bHLH转录因子是植物体内第二大类转录因子,在植物生长发育和胁迫反应的转录调控网络中扮演着非常重要的角色。磷酸化作为蛋白质翻译后重要的调控方式,影响转录因子的转录活性、定位、蛋白间互作、稳定性。为深入了解磷酸化对bHLH转录因... bHLH转录因子是植物体内第二大类转录因子,在植物生长发育和胁迫反应的转录调控网络中扮演着非常重要的角色。磷酸化作为蛋白质翻译后重要的调控方式,影响转录因子的转录活性、定位、蛋白间互作、稳定性。为深入了解磷酸化对bHLH转录因子的影响,本文对近年来bHLH家族成员的磷酸化研究进展进行综述,包括bHLH转录因子的结构、分类、功能以及磷酸化位点上的突变对其生理及生化功能的改变,为从磷酸化调控角度提升农作物的营养利用效率、品质和抗逆性等农艺性状提供理论依据。 展开更多
关键词 碱性螺旋-环-螺旋转录因子 磷酸化 生理功能
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一个水稻bHLH转录因子的反向遗传学分析 被引量:1
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作者 孙琼琳 罗倩 +2 位作者 宋婷 李莹莹 栾维江 《天津师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2015年第2期67-70,共4页
b HLH类型转录因子对于植物开花具有重要的调控作用.为了揭示b HLH转录因子在短日照植物水稻中的功能,利用反向遗传学方法构建了水稻Osb HLH1基因过表达载体,获得过表达转基因植株,分析目的基因在过量表达条件下的功能.结果表明:过表达O... b HLH类型转录因子对于植物开花具有重要的调控作用.为了揭示b HLH转录因子在短日照植物水稻中的功能,利用反向遗传学方法构建了水稻Osb HLH1基因过表达载体,获得过表达转基因植株,分析目的基因在过量表达条件下的功能.结果表明:过表达Osb HLH1能够导致水稻的抽穗期推迟;Osb HLH1在水稻中的表达还具有光周期昼夜节律性,无论是在长日照还是在短日照条件下,Osb HLH1都在夜间具有表达高峰.组织特异性表达结果表明:Osb HLH1在水稻的不同器官中都有表达,但在叶片中表达较高,与光周期相关基因的表达吻合. 展开更多
关键词 水稻 转录因子bhlh Osbhlh1基因 光周期 过表达分析
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苦荞转录因子基因FtbHLH4的克隆及其对非生物胁迫的应答 被引量:1
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作者 周婧 高飞 +4 位作者 张润敏 雒晓鹏 黄云吉 李成磊 吴琦 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期2399-2404,共6页
根据苦荞花期转录组数据,克隆得到1个苦荞bHLH类转录因子基因,命名为FtbHLH4。采用实时荧光定量PCR技术,分析了非生物胁迫对苦荞芽期FtbHLH4基因表达的影响。序列分析表明,苦荞FtbHLH4基因DNA全长1 852bp,由7个外显子和6个内含子构成,符... 根据苦荞花期转录组数据,克隆得到1个苦荞bHLH类转录因子基因,命名为FtbHLH4。采用实时荧光定量PCR技术,分析了非生物胁迫对苦荞芽期FtbHLH4基因表达的影响。序列分析表明,苦荞FtbHLH4基因DNA全长1 852bp,由7个外显子和6个内含子构成,符合GT-AG剪接原则;cDNA序列包含1个1 062bp的开放阅读框,编码353个氨基酸,具有bHLH类蛋白典型的螺旋-环-螺旋保守结构域。在脱落酸(ABA)、NaCl和PEG模拟干旱胁迫下,苦荞芽期FtbHLH4基因表达量均持续上升,至48h时达最大,分别为胁迫前的11.3倍、12.0倍和6.1倍。而在冷胁迫和UV-B胁迫下,苦荞芽期FtbHLH4基因表达量迅速下降,分别于6h和12h降低至胁迫前的24%和23%。研究推测FtbHLH4基因以不同机制参与了苦荞对非生物胁迫的应答过程。 展开更多
关键词 苦荞 转录因子bhlh 基因克隆 非生物胁迫
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FabHLH37调控草莓抗灰霉病的功能分析 被引量:1
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作者 刘晓宇 张欣 +3 位作者 彭悦 于淼 熊劲松 程宗明 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期213-221,共9页
[目的]本文旨在通过验证草莓bHLH(basic/helix-loop-helix)家族转录因子FabHLH37的功能,解析其调控草莓抗灰霉病的机制,为草莓的抗病育种提供新的基因资源。[方法]以栽培草莓品种‘红颜’为试验材料,提取灰霉菌侵染后的草莓果实总RNA并... [目的]本文旨在通过验证草莓bHLH(basic/helix-loop-helix)家族转录因子FabHLH37的功能,解析其调控草莓抗灰霉病的机制,为草莓的抗病育种提供新的基因资源。[方法]以栽培草莓品种‘红颜’为试验材料,提取灰霉菌侵染后的草莓果实总RNA并反转录为cDNA,克隆FabHLH37编码区序列,并使用在线软件对其进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR(qPCR)分别检测该基因在草莓不同组织及果实接种灰霉菌后的相对表达量;利用烟草瞬时表达系统研究该基因的亚细胞定位;通过草莓果实瞬时表达系统研究FabHLH37抗灰霉病功能。[结果]FabHLH37基因CDS全长789 bp,编码262个氨基酸,理论等电点(pI)为6.61,相对分子质量为2.9×10^(5)。进化分析显示FabHLH37与月季、苹果等蔷薇科植物bHLH37蛋白同源关系较近。亚细胞定位分析显示FabHLH37特异性定位于细胞核。qPCR分析表明FabHLH37在草莓根中表达量最高,叶次之,灰霉病菌侵染可以显著诱导FabHLH37基因的表达。草莓果实瞬时表达结果显示,与对照相比,过表达FabHLH37的草莓果实接种灰霉菌后感病程度轻,而沉默FabHLH37的草莓果实相反。进一步的qPCR检测发现,在草莓果实瞬时表达体系中,FaPR1/4/5-1、FaBG2-1、FaCHI3-1、FaSOD、FaPAL等多个防御基因的表达量与FabHLH37的表达量呈正相关,即过量表达FabHLH37可显著提高这些基因的表达量,而沉默FabHLH37则显著降低这些基因的表达量。[结论]FabHLH37可通过诱导防御基因的表达从而正向调控草莓灰霉病。 展开更多
关键词 草莓 灰霉病 bhlh转录因子bhlh37 防御基因
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水稻OsMYB57基因表达的调控与其化感抑草作用
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作者 杨陆可 王浩 +4 位作者 高钰杰 严雪 母丹 林文雄 方长旬 《中国生态农业学报(中英文)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期236-247,共12页
转录因子MYB57能够调控水稻化感抑草能力。为进一步研究调控OsMYB57基因表达的上游因子,以化感水稻‘PI312777’和非化感水稻‘Lemont’为对象,分离鉴定了OsMYB57基因启动子的转录因子。结果显示,OsMYB57基因表达受转录因子basic helix-... 转录因子MYB57能够调控水稻化感抑草能力。为进一步研究调控OsMYB57基因表达的上游因子,以化感水稻‘PI312777’和非化感水稻‘Lemont’为对象,分离鉴定了OsMYB57基因启动子的转录因子。结果显示,OsMYB57基因表达受转录因子basic helix-loop-helix protein 009(bHLH009,基因:OsMYC2)、LOC_Os04g32590.1(基因:Os04g0397500)、LOC_Os02g31160.1(基因:Os02g0516800)以及转录调节因子LOC_Os03g25430.1(基因:Os03g0370250)、LOC_Os03g50110.1(基因:Os03g0708800)等的调控。稗草胁迫下的‘PI312777’和‘Lemont’中的这些基因上调表达。bHLH009(OsMYC2)是茉莉酸信号途径的调节因子,外源添加0.05 mmol∙L−1茉莉酸甲酯(MeJA)不同程度提高了‘PI312777’和‘Lemont’中的OsMYC2、Os04g0397500、Os02g0516800、Os03g0370250和Os03g0708800基因的表达,水稻根系分泌液对稗草的化感抑制率提高;化感水稻‘PI312777’根系分泌液对稗草地上和地下部生物量的抑制率分别提高25.82%和17.01%;而非化感水稻‘Lemont’根系分泌液的抑制率则分别提高5.30%和15.36%。本研究表明,OsMYB57基因表达受bHLH009(MYC2)等的转录调控,适宜浓度的茉莉酸甲酯则能够促进OsMYC2的表达,进而调控提高OsMYB57表达,增强水稻化感抑草能力。 展开更多
关键词 化感作用 茉莉酸甲酯 转录调控 水稻 转录因子bhlh009
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