银杏不同组织的总RNA提取方法的改进 被引量：15

1

作者 蔡荣 许锋 +1 位作者 陈柳吉 程水源 《生物技术》 CAS CSCD 2007年第4期38-41,共4页

方法:采用改进的CTAB法高效地从富含多糖、多酚类化合物的银杏的根、茎、叶和果实四个组织中提取RNA。结果:抽提的不同组织的RNA经电泳检测,可见28S和18S两条清晰的主带,且28S rRNA在亮度上均为18S rRNA的2倍,两条带之间无弥散现象;根... 方法:采用改进的CTAB法高效地从富含多糖、多酚类化合物的银杏的根、茎、叶和果实四个组织中提取RNA。结果:抽提的不同组织的RNA经电泳检测,可见28S和18S两条清晰的主带,且28S rRNA在亮度上均为18S rRNA的2倍,两条带之间无弥散现象;根、茎、叶、果所提的RNA的经紫外吸收检测得到A260/A230分别为1.9、1.4、2.1、1.7,测得A260/A280分别为1.8、2.0、2.3、1.8,鲜重分别达到78μg/g、69μg/g、150μg/g、90μg/g;通过RT-PCR及凝胶检测,得到了银杏看家基因18S基因的约150bp清晰的条带,从而进一步检测提取RNA的质量。结论:提取的总RNA纯度高,质量好,足以为研究提供RNA材料。 展开更多

关键词 银杏 不同组织 总rna提取

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木本植物老根老叶总RNA的提取方法 被引量：7

2

作者 周春娥 段红英 齐力旺 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第10期2831-2832,共2页

对于含有大量多糖、酚、酯、萜类等其他二次代谢产物的木本植物的老根和老叶,要从它们的组织中提取高质量的RNA一般都比较困难。以小叶杨的老根、麻黄的老根、沙冬青的老叶、梭梭老根为材料提取出质量比较好的RNA。

关键词 木本植物 二次代谢产物 老根 老叶 提取rna

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植物病毒RNA提取方法的研究 被引量：2

3

作者 高昌勇 《菏泽学院学报》 2007年第5期95-97,共3页

病毒RNA提取技术是分子生物学中经常应用的重要技术,是对RNA病毒在分子水平进行研究的必要手段。介绍了一种从染病植物组织中提取病毒RNA的方法,利用此方法提取了马铃薯X病毒(PVX)的RNA基因组,并通过RT-PCR得到其外壳蛋白基因,提取的病... 病毒RNA提取技术是分子生物学中经常应用的重要技术,是对RNA病毒在分子水平进行研究的必要手段。介绍了一种从染病植物组织中提取病毒RNA的方法,利用此方法提取了马铃薯X病毒(PVX)的RNA基因组,并通过RT-PCR得到其外壳蛋白基因,提取的病毒RNA在纯度和产量上都可满足反转录和PCR扩增等基本分子生物学操作。 展开更多

关键词 病毒 rna提取 PVX RT—PCR

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乳汁中RNA提取方法的建立 被引量：2

4

作者 乔新安 朱彦彩 +4 位作者 范沛 都军霞 贾海丽 韩立强 杨国宇 《中国畜牧兽医》 CAS 2008年第1期77-79,共3页

用牛初乳作为试验材料,进行乳汁体细胞的提取及RNA的提取与扩增。结果显示:牛初乳中含有大量的体细胞(SCC约为20万/ml,活力约为60%),从体细胞中提取RNA,所提取的RNA完整性和纯度可以用来合成cDNA,管家基因GAPDH扩增条带正确,表明可以用... 用牛初乳作为试验材料,进行乳汁体细胞的提取及RNA的提取与扩增。结果显示:牛初乳中含有大量的体细胞(SCC约为20万/ml,活力约为60%),从体细胞中提取RNA,所提取的RNA完整性和纯度可以用来合成cDNA,管家基因GAPDH扩增条带正确,表明可以用合成的cDNA作为模板进行其它基因的扩增,为奶牛在基因工程方面的研究提供分子生物学技术平台。 展开更多

关键词 牛初乳 乳汁体细胞 rna提取

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鱼组织血液样本采集及RNA的提取

5

作者 陈传 魏泉德 邵筱 《现代医药卫生》 2007年第20期3006-3007,共2页

目的:探讨从鱼组织、血液样本的采集及提取RNA的方法和其他方法的比较。方法:应用本层析柱方法从金鱼组织所提取RNA和采用异硫氰酸胍-酚-氯仿一步法提取RNA的比较。结果:应用本层析柱方法所提取RNA具有质量高、完整性好的特点。结论:用... 目的:探讨从鱼组织、血液样本的采集及提取RNA的方法和其他方法的比较。方法:应用本层析柱方法从金鱼组织所提取RNA和采用异硫氰酸胍-酚-氯仿一步法提取RNA的比较。结果:应用本层析柱方法所提取RNA具有质量高、完整性好的特点。结论:用此法获得的RNA用于RT-PCR取得满意效果,不失为一种可取的RNA提取方法。 展开更多

关键词 鱼组织 血液样本 提取rna

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CD1_D基因与B7-1基因真核表达载体的构建

6

作者 王昆华 张杰 +7 位作者 龚昆梅 肖乐 欧阳一鸣 刘为军 凌平 黄映光 龙亚新 郭世奎 《中国肿瘤外科杂志》 CAS 2010年第4期199-201,206,共4页

目的构建表达小鼠CD1_D基因和B7-1基因的真核表达载体。方法用PCR方法获得基因,定向克隆连接到真核表达载体上,得到重组真核表达载体,使用酶切方法加以鉴定。结果酶切得到的片段与所需相符,得到重组的逆转录病毒载体。结论重组小鼠CD1_... 目的构建表达小鼠CD1_D基因和B7-1基因的真核表达载体。方法用PCR方法获得基因,定向克隆连接到真核表达载体上,得到重组真核表达载体,使用酶切方法加以鉴定。结果酶切得到的片段与所需相符,得到重组的逆转录病毒载体。结论重组小鼠CD1_D基因和B7-1基因真核表达载体的构建为今后进一步的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 CD1D基因 B7—1基因 真核表达载体 rna提取 重组载体的构建

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Trizol法提取新生小鼠脑组织总RNA优化比较 被引量：12

7

作者 杨智 程春凤 +5 位作者 黄昕艳 刘爽 尹兴忠 李艳丽 王坤 朱晓峰 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期155-156,共2页

目的对Trizol法中不同组织研磨方法进行比较,优化新生鼠脑总RNA提取方法。方法取新生24h小鼠脑组织,分别采用常规玻璃组织研磨器(常规研磨法)、剪刀剪碎法、液氮研钵研磨(液氮研磨法)3种方法对组织匀浆进行分离,采用Trizol试剂提取总RNA... 目的对Trizol法中不同组织研磨方法进行比较,优化新生鼠脑总RNA提取方法。方法取新生24h小鼠脑组织,分别采用常规玻璃组织研磨器(常规研磨法)、剪刀剪碎法、液氮研钵研磨(液氮研磨法)3种方法对组织匀浆进行分离,采用Trizol试剂提取总RNA,紫外分光法测定浓度和纯度,凝胶电泳验证完整性。结果 3种方法均可以提取出总RNA,但相对剪碎法和常规研磨法,液氮研磨法提取的总RNA浓度、纯度及完整性更佳(P<0.05)。结论液氮研磨法虽然对实验条件有一定要求,但仍然是目前最为可靠的脑组织总RNA提取方法,可以完全满足后续实验需要。 展开更多

关键词 脑组织 rna提取 TRIZOL 实验方法

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不同植物组织RNA提取方法的比较分析 被引量：30

8

作者 王杰 王全 +4 位作者 田娜 王瑜 王爱香 张克中 崔金腾 《北京农学院学报》 2015年第1期76-80,共5页

不同的植物组织都有较优化RNA提取方法。本文针对蜡质的红掌叶片、含糖较多的百合花瓣、含色素较多的万寿菊花瓣,使用改良CTAB法、Trizol法、快速RNA提取试剂盒法提取RNA,比较提取效果,以确定适合几种植物组织的最优RNA提取方法。结果表... 不同的植物组织都有较优化RNA提取方法。本文针对蜡质的红掌叶片、含糖较多的百合花瓣、含色素较多的万寿菊花瓣,使用改良CTAB法、Trizol法、快速RNA提取试剂盒法提取RNA,比较提取效果,以确定适合几种植物组织的最优RNA提取方法。结果表明:改良CTAB法提取的红掌叶片总RNA,Trizol法提取的百合花瓣总RNA和万寿菊总RNA,28SRNA和18SRNA条带都较清晰,且28SRNA亮度较18SRNA明亮,效果较好,部分RNA提取试验中5SRNA也较明亮,说明提取的总RNA有部分降解,但总RNA质量符合后续试验要求。RT-PCR检验符合上述结论。 展开更多

关键词 总rna提取 改良CTAB TRIZOL rna提取试剂盒

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从动物组织提取高质量总RNA方法的改进 被引量：23

9

作者 王桂玲 刘戈飞 黄东阳 《生物技术通讯》 CAS 2003年第6期512-514,共3页

RNA提取技术是分子生物学研究中的重要实验技术。介绍一种高纯度、高产量的从动物组织中提取总RNA 的改进的方法,该法实用性强、重复性好。提取的RNA无DNA等污染物,其产量、纯度完全能满足分子克隆和基因表 达研究的需要。利用改进后的... RNA提取技术是分子生物学研究中的重要实验技术。介绍一种高纯度、高产量的从动物组织中提取总RNA 的改进的方法,该法实用性强、重复性好。提取的RNA无DNA等污染物,其产量、纯度完全能满足分子克隆和基因表 达研究的需要。利用改进后的方法提取牛组织的总RNA,研究了NRDR基因在牛组织中的表达分布。 展开更多

关键词 rna提取 动物组织 分子生物学 纯度

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一种从动物组织中提取高质量总RNA的方法 被引量：16

10

作者 王桂玲 黄东阳 刘戈飞 《生命科学研究》 CAS CSCD 2003年第3期275-278,共4页

RNA提取技术是分子生物学研究中经常应用的最重要的实验技术.简要介绍了一种高纯度、高产量的从动物组织中提取总RNA的方法.该方法具有实用性强、重复性好的特点.提取的RNA无DNA等污染物,并且其产量、纯度完全能满足分子克隆和基因表达... RNA提取技术是分子生物学研究中经常应用的最重要的实验技术.简要介绍了一种高纯度、高产量的从动物组织中提取总RNA的方法.该方法具有实用性强、重复性好的特点.提取的RNA无DNA等污染物,并且其产量、纯度完全能满足分子克隆和基因表达研究的需要.利用此方法提取牛组织的总RNA,进行了NRDR基因在牛组织中的表达分布研究. 展开更多

关键词 动物组织 rna提取 产量 纯度 克隆

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一种快速的胚胎组织总RNA的提取方法 被引量：17

11

作者 王雁云 罗开梅 +2 位作者 李永青 朱传炳 吴秀山 《生命科学研究》 CAS CSCD 2001年第1期88-90,共3页

简要介绍一种改进的提取人体器官组织总 RNA的方法 ,该方法具有费用低 ,快速简便 ,重复性好的优点 ,提取的 RNA无 DNA等污染物 。

关键词 人体器官 胚胎组织 总rna 提取方法

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一种适合葡萄多种组织的总RNA提取方法 被引量：14

12

作者 李红熙 徐美隆 杨智 《中国农学通报》 CSCD 2012年第7期155-159,共5页

为了解决葡萄组织中总RNA提取难度大的问题,以感染葡萄卷叶病毒-3的葡萄品种‘蛇龙珠’为试验材料,采用CTAB结合SDS法对总RNA提取方法进行了研究,建立了一套适合葡萄叶片、叶柄及韧皮部等多种组织总RNA提取的方法。结果表明,该方法在多... 为了解决葡萄组织中总RNA提取难度大的问题,以感染葡萄卷叶病毒-3的葡萄品种‘蛇龙珠’为试验材料,采用CTAB结合SDS法对总RNA提取方法进行了研究,建立了一套适合葡萄叶片、叶柄及韧皮部等多种组织总RNA提取的方法。结果表明,该方法在多种组织中均能获得高质量的RNA,OD260/OD280=1.8～1.9,电泳结果表明,所得RNA完整性好,无降解。同时用所得RNA进行了GLRaV-3的检测,电泳结果表明该法所得RNA可满足葡萄病毒病RT-PCR检测的质量要求。该方法操作简单,结果稳定,对其他富含多酚、多糖类植物组织总RNA的提取具有借鉴意义。 展开更多

关键词 葡萄 rna提取 病毒检测

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Trizol法大鼠心肌总RNA提取方法探讨 被引量：11

13

作者 戴先成 柴智锋 +1 位作者 徐永城 王山青 《刑事技术》 2014年第3期15-16,共2页

目的探讨大鼠心肌总RNA的提取方法,为今后法医学研究和实践工作提供参考。方法用Trizol法,严格注意无RNA酶操作,通过裂解组织,分离、沉淀RNA而提取大鼠心肌总RNA,并用分光光度计、凝胶电泳及RT-PCR检测结果。结果 Trizol法能获得较高纯... 目的探讨大鼠心肌总RNA的提取方法,为今后法医学研究和实践工作提供参考。方法用Trizol法,严格注意无RNA酶操作,通过裂解组织,分离、沉淀RNA而提取大鼠心肌总RNA,并用分光光度计、凝胶电泳及RT-PCR检测结果。结果 Trizol法能获得较高纯度和产量的完整总RNA。结论 Trizol法是提取总RNA可靠有效的方法,可望在法医学领域有较广的应用。 展开更多

关键词 法医病理学 总rna提取 TRIZOL法

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一种植物总RNA的快速提取方法 被引量：7

14

作者 刘芬 于秀梅 刘大群 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2010年第2期140-144,共5页

为验证NaAc/无水乙醇沉淀法提取植物总RNA的质量,本研究对小麦不同组织及其他不同种属植物花的总RNA进行提取和检验,结果表明,该方法提取的植物总RNA完整性好、纯度高。以Tubulin为参照对其余4个持家基因GAPDH、Actin、Rubisco和Ubiqui... 为验证NaAc/无水乙醇沉淀法提取植物总RNA的质量,本研究对小麦不同组织及其他不同种属植物花的总RNA进行提取和检验,结果表明,该方法提取的植物总RNA完整性好、纯度高。以Tubulin为参照对其余4个持家基因GAPDH、Actin、Rubisco和Ubiquitin的表达情况进行分析。扩增结果表明,选定的各持家基因在叶锈菌侵染不同时间的小麦叶片中的表达量并不一致,且各基因在小麦叶片中的丰度也存在差异。通过对几种基因的扩增,进一步证实该方法能够满足一般分子生物学下游操作的要求,是一种理想的植物总RNA提取方法。 展开更多

关键词 植物 总rna提取 持家基因 小麦 RT—PCR

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血红鸡爪槭叶片总RNA提取方法的比较研究 被引量：8

15

作者 张琰 安龙杰 +1 位作者 史宝胜 卓丽环 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2011年第2期7-11,共5页

血红鸡爪槭叶片中富含多糖、多酚物质,严重影响了RNA提取纯度和质量。为了获得适宜血红鸡爪槭叶片总RNA提取的方法,采用柱式植物RNAout法、TRIZOL法和改良CTAB法3种提取方法对其叶片总RNA提取效果进行比较分析。结果显示,采用柱子法提... 血红鸡爪槭叶片中富含多糖、多酚物质,严重影响了RNA提取纯度和质量。为了获得适宜血红鸡爪槭叶片总RNA提取的方法,采用柱式植物RNAout法、TRIZOL法和改良CTAB法3种提取方法对其叶片总RNA提取效果进行比较分析。结果显示,采用柱子法提取获得的总RNA产率最高,但是有DNA污染;TRIZOL法提取的总RNAOD260/OD280为1.65,可能有多糖和酚类物质的污染,并且产率最低;改良CTAB法提取的总RNA纯度很高,OD260/OD280平均值在2.0左右,产率在上述2种方法之间,电泳图清晰,而且改良CTAB法提取的总RNA,经RT-PCR获得了清晰的特异性条带。表明改良CTAB法提取的总RNA纯度和产率高,完全可以满足进一步分子生物学研究的需要,是血红鸡爪槭叶片总RNA提取的适宜方法。 展开更多

关键词 血红鸡爪槭 总rna提取 RT-PCR

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蓖麻总RNA提取 被引量：7

16

作者 张继星 刘鹏 +2 位作者 黄凤兰 陈永胜 鲁廷超 《内蒙古民族大学学报（自然科学版）》 2010年第1期38-39,共2页

作者借鉴高山红景天总RNA提取方法,成功提取了蓖麻的总RNA,并对出现的问题进行了分析.

关键词 蓖麻 rna提取

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从动物组织中提取总RNA的CTAB法 被引量：7

17

作者 左欣欣 陈泽宇 +2 位作者 马腾 严海燕 谭艳平 《中国西部科技》 2011年第2期35-36,76,共3页

在生物及生物技术的研究和应用中,RNA的提取已经成为重要的基本实验技术。本研究对CTAB法提取RNA的过程中影响因素进行分析,尝试采用改良的CTAB方法从动物组织中提取总RNA。通过紫外分光光度法和凝胶电泳检测分析可知,采用该方法提取的... 在生物及生物技术的研究和应用中,RNA的提取已经成为重要的基本实验技术。本研究对CTAB法提取RNA的过程中影响因素进行分析,尝试采用改良的CTAB方法从动物组织中提取总RNA。通过紫外分光光度法和凝胶电泳检测分析可知,采用该方法提取的总RNA纯度高,完整性好,电泳条带完整清晰,可以进行下一步的分子生物学研究。结果表明,用改良的CTAB法提取动物组织RNA是切实可行的,它具有简便、实用性强的特点,是一个符合分子生物学实验教学要求的新方法。 展开更多

关键词 rna提取 动物组织 CTAB法 实验教学 分子生物学技术

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长江华溪蟹组织RNA提取的研究 被引量：6

18

作者 高爱保 王兰 《海洋水产研究》 CSCD 北大核心 2008年第5期107-111,共5页

比较了长江华溪蟹Sinopotamon yangtsekiense心脏、肝胰腺、鳃和性腺等组织中提取总RNA的4种方法,同时比较了同一方法提取不同组织RNA的质量,总结出适合于蟹类组织RNA提取的方法。结果表明,TRIzol法提取效果最好,心脏总RNA质量最高。此... 比较了长江华溪蟹Sinopotamon yangtsekiense心脏、肝胰腺、鳃和性腺等组织中提取总RNA的4种方法,同时比较了同一方法提取不同组织RNA的质量,总结出适合于蟹类组织RNA提取的方法。结果表明,TRIzol法提取效果最好,心脏总RNA质量最高。此外,实验中提取的总RNA污染少、完整性好,为以后进行cDNA合成、基因表达及定量分析等研究奠定了基础。 展开更多

关键词 长江华溪蟹 rna提取TRIzol SDS法

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木薯块根总RNA提取方法的比较和改进 被引量：4

19

作者 余洁 郭运玲 +1 位作者 郭安平 贺立卡 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第12期4872-4873,4887,共3页

[目的]为更好地利用基因操作手段改良木薯品质和提取高质量的木薯总RNA提供科学依据。[方法]采用4种方法提取木薯块根RNA,筛选一种最简单、有效的方法,并利用RT-PCR技术克隆木薯淀粉分支酶,分析所提取RNA的质量。[结果]结果表明,用改进... [目的]为更好地利用基因操作手段改良木薯品质和提取高质量的木薯总RNA提供科学依据。[方法]采用4种方法提取木薯块根RNA,筛选一种最简单、有效的方法,并利用RT-PCR技术克隆木薯淀粉分支酶,分析所提取RNA的质量。[结果]结果表明,用改进的CTAB法和plant RNAReagent kit均能提取高质量的RNA,用plant RNAReagent更能节省时间,而且纯度比较高。对plant RNAReagent提取的RNA进行RT-PCR克隆,克隆出了与木薯淀粉合成有关的SBEII基因。[结论]plant RNAReagent kit提取的RNA,其质量可以满足基本的试验要求。 展开更多

关键词 木薯 块根 总rna提取 SBEII基因 基因克隆

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COVID-19 RNA提取期间不同压力下的通风系统对实验室污染的影响

20

作者 李丹 盛梦秋 +3 位作者 刘甜恬 朱丹丹 侯铁英 张玉 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期618-623,共6页

目的探究COVID-19 RNA提取期间不同压力下的通风系统对实验室污染的影响.方法聚合酶链式反应(PCR)实验室通风系统在开启负压及关闭负压条件下,提取新型冠状假病毒核酸,对于空气及实验室表面的污染情况,确定操作风险区域.本实验分为两部... 目的探究COVID-19 RNA提取期间不同压力下的通风系统对实验室污染的影响.方法聚合酶链式反应(PCR)实验室通风系统在开启负压及关闭负压条件下,提取新型冠状假病毒核酸,对于空气及实验室表面的污染情况,确定操作风险区域.本实验分为两部分,一部分为真实场景试验,另一部分为气溶胶发生器模拟实验意外喷洒实验.结果真实场景试验:开启负压,Ⅰ室空气采样呼吸道合胞假病毒(RSV),新型冠状假病毒(2019-nCoV)均为阴性,甲型流感和乙型流感假病毒(H1N1亚型)(ABH1)紫外消毒后门口采样出现阳性;Ⅱ室空气采样ABH1结果均为阴性,RSV在冰箱处出现阳性.2019-nCoV操作中均出现阳性,紫外消毒后仅冰箱处出现阳性,消毒后未出现阳性结果.擦拭采样中,Ⅰ室和Ⅱ室利用ABH1、RSV、2019-nCoV溶液在操作中和紫外后均存在有较多污染,消毒后结果均由阳性转阴或Ct值变大;关闭负压,Ⅰ室空气采样RSV反应液操作中,窗户采样出现阳性;擦拭采样在冰箱和门把手、传递柜把手、桌子处均出现阳性.Ⅱ室ABH1反应液空气采样操作中均为阳性,紫外消毒后冰箱空气采样仍为阳性;Ⅱ室擦拭采样操作中除桌子1外均出现阳性,消毒后门把手、冰箱把手、生物安全柜表面仍为阳性.气溶胶模拟意外喷溅试验,实验室Ⅱ开启负压和关闭负压,均未出现阳性结果.结论非负压条件下呈现的点较负压条件下多,说明负压可能对生物安全柜实验的防控起到一定作用;在实验过程中以实验员手套为传播源的污染较多;规范操作使用生物安全柜,自带的防污染系统和紫外消杀系统可防止污染;实验室做好消毒工作的同时也要做好清洁防止实验室污染. 展开更多

关键词 实验室安全 实验室污染 COVID-19 负压 rna提取期间 聚合酶链式反应实验室通风系统

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