目的探讨信号转导与转录激活因子5(signal transducers and activators of transcription 5,STAT5)基因沉默及过表达对人乳腺癌细胞SKBR3和MCF-7紫杉醇化疗耐药性的影响及可能的分子机制。方法构建紫杉醇耐药株SKBR3/PR和MCF-7/PR,Weste...目的探讨信号转导与转录激活因子5(signal transducers and activators of transcription 5,STAT5)基因沉默及过表达对人乳腺癌细胞SKBR3和MCF-7紫杉醇化疗耐药性的影响及可能的分子机制。方法构建紫杉醇耐药株SKBR3/PR和MCF-7/PR,Western blot检测STAT5蛋白表达情况;用STAT5特异性shRNA转染SKBR3/PR和MCF-7/PR细胞,MTS法检测SKBR3/PR-shRNA和MCF-7/PR-shRNA细胞对紫杉醇的敏感性;通过STAT5过表达脂质体载体及shRNA转染SKBR3和MCF-7细胞,MTS法和流式细胞术检测紫杉醇化疗对SKBR3-STAT、SKBR3-STAT-shRNA、MCF-7-STAT和MCF-7-STAT-shRNA细胞生存率和凋亡率的影响,Western blot及qPCR法检测细胞周期调控蛋白cyclin B1、CDK2和c-myc蛋白表达及mRNA转录水平。结果SKBR3/PR和MCF-7/PR细胞中STAT5的表达显著高于SKBR3和MCF7细胞(P<0.01),而SKBR3/PR和MCF-7/PR细胞STAT5沉默后,紫杉醇化疗敏感性显著升高(P<0.05)。SKBR3和MCF-7细胞过表达STAT5后,紫杉醇敏感性显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著下降(P<0.05),cyclin B1、CDK2和c-myc蛋白表达及mRNA转录水平均显著上调(P<0.01),而STAT5沉默后,其紫杉醇敏感性显著提高(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05),cyclin B1、CDK2和c-myc蛋白表达及mRNA转录水平均显著降低(P<0.01)。结论STAT5基因调控细胞周期相关因子cyclin B1、CDK2和c-myc的表达,进而介导乳腺癌细胞紫杉醇耐药。展开更多
多发性骨髓瘤(multiple myeloma, MM)是一种肿瘤性浆细胞疾病,其特征在于骨髓微环境中恶性浆细胞的克隆性增殖,分泌单克隆免疫球蛋白以及相关的器官功能障碍。近年来,由于自体干细胞移植的引入,以及来那度胺和硼替佐米等药物的应用改变...多发性骨髓瘤(multiple myeloma, MM)是一种肿瘤性浆细胞疾病,其特征在于骨髓微环境中恶性浆细胞的克隆性增殖,分泌单克隆免疫球蛋白以及相关的器官功能障碍。近年来,由于自体干细胞移植的引入,以及来那度胺和硼替佐米等药物的应用改变了骨髓瘤的传统治疗方法,延长了总生存期。尽管取得了显著的治疗进展但目前仍无法治愈,其主要是由于原发耐药和疾病复发。信号转导及转录激活因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)是一种细胞信号转录因子,参与正常细胞的分化、增殖和血管生成等多种生命活动。近年来发现,STAT3在肿瘤中高表达与多种恶性肿瘤的发生、发展、侵袭和转移密切相关。STAT3在多发性骨髓瘤的发生和进展中同样也发挥关键作用。本文综述了STAT3分子结构、信号通路、激活、调控及基本生物学功能,并发现非编码RNA、热激蛋白90(heat shock protein 90,Hsp90)、血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)等因子,通过STAT3途径在多发性骨髓瘤的发生、存活以及免疫逃逸中发生重要作用,并且STAT3途径活化与多发性骨髓瘤细胞对硼替佐米、来那度胺等常规药物的耐药相关,故STAT3可作为多发性骨髓瘤潜在靶点,为精准诊疗及预后标志物提供依据与参考。展开更多
上皮-间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)是指上皮细胞通过特定程序转化为间质表型细胞的生物学过程,其在肿瘤的发生、发展、转移中发挥重要作用。近年来的研究表明,信号转导子和转录激活子3(Signal transducer and activ...上皮-间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)是指上皮细胞通过特定程序转化为间质表型细胞的生物学过程,其在肿瘤的发生、发展、转移中发挥重要作用。近年来的研究表明,信号转导子和转录激活子3(Signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)通过多种调控因子参与肿瘤上皮间质转化各个环节的调控过程,并在EMT中多变的角色对肿瘤的发生、发展有着重要的意义。展开更多
目的构建信号传导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription factor 3,STAT3)二聚化抑制剂筛选模型,为STAT3抑制剂筛选提供实验方法。方法分别构建pECFP-N1-STAT3和pEYFP-N1-STAT3的荧光报告载体,利用脂质体...目的构建信号传导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription factor 3,STAT3)二聚化抑制剂筛选模型,为STAT3抑制剂筛选提供实验方法。方法分别构建pECFP-N1-STAT3和pEYFP-N1-STAT3的荧光报告载体,利用脂质体转染技术将二者共转入HEK-293T细胞,利用ECFP和EYFP 2种荧光蛋白之间能量共振转移,检测磷酸化STAT3分子的二聚化水平,并检测Stattic对二聚化的影响。结果成功构建了pECFP-N1-STAT3和pEYFP-N1-STAT3的荧光报告载体。将2种荧光报告载体共转染HEK-293T细胞后,Western Blot检测结果显示STAT3以及p-STAT3的表达水平明显增加。以458nm波长激发ECFP,其发射波长可激发EYFP。加入STAT3二聚化抑制剂Stattic后,荧光强度降低,且呈现一定的剂量依赖性。结论基于荧光共振能量转移技术的STAT3二聚化抑制剂筛选模型构建成功。展开更多
目的敲低宫颈癌HeLa细胞中信号转导与转录激活子3(signal transducers and activators of tran-scription 3,STAT3)的表达,观察肿瘤细胞超微结构变化,并检测化疗药物诱导肿瘤细胞凋亡的情况。方法利用在线设计软件小分子干扰核糖核酸(sm...目的敲低宫颈癌HeLa细胞中信号转导与转录激活子3(signal transducers and activators of tran-scription 3,STAT3)的表达,观察肿瘤细胞超微结构变化,并检测化疗药物诱导肿瘤细胞凋亡的情况。方法利用在线设计软件小分子干扰核糖核酸(small interfering RNA,siRNA)Target Finder设计一对STAT3短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)的上下游引物,在宫颈癌HeLa细胞中特异性敲低STAT3的表达,通过透射电子显微镜观察对照组及STAT3敲低组HeLa细胞内染色体分布情况,并利用流式细胞术检测化疗药物多柔比星诱导对照组及STAT3敲低组细胞凋亡情况的差异。结果免疫印记表明,STAT3特异性shRNA可在HeLa细胞中显著敲低STAT3的表达;电镜观察发现,在HeLa细胞中敲低STAT3表达可显著诱导染色体边集现象;流式细胞术检测表明,敲低STAT3表达可显著增强多柔比星诱导的细胞凋亡。结论敲低STAT3表达可诱导宫颈癌细胞发生超微结构的改变,并增强宫颈癌细胞对化疗药物的敏感性。展开更多
目的:通过宫腔注射信号传导与活化转录因子3(St a t3)抑制剂抑制大鼠胚胎着床,探讨补肾益气活血方改善胚胎着床的有关机制。方法:将妊娠雌鼠随机分为Stat3抑制剂组(SI组)及Stat3抑制剂加中药组(SI+BR组),并于妊娠第4天行宫腔注射(右侧:S...目的:通过宫腔注射信号传导与活化转录因子3(St a t3)抑制剂抑制大鼠胚胎着床,探讨补肾益气活血方改善胚胎着床的有关机制。方法:将妊娠雌鼠随机分为Stat3抑制剂组(SI组)及Stat3抑制剂加中药组(SI+BR组),并于妊娠第4天行宫腔注射(右侧:Stat3抑制剂;左侧:0.9%氯化钠溶液作为对照),SI+BR组灌胃补肾益气活血方,SI组则给予等体积无菌蒸馏水。收集妊娠第8天大鼠子宫标本,记录各组大鼠每侧子宫胚胎着床情况,免疫印迹法检测子宫内膜PR、Stat3及p-Stat3蛋白表达,RT-PCR检测子宫内膜PR mRNA表达。结果:SI组及SI+BR组与自身对照侧比较,抑制剂侧子宫着床胚胎数均显著减少(P<0.01),子宫内膜PR及p-Stat3/Stat3表达均显著下降(P<0.01),PR mRNA表达均显著降低(P<0.01)。两组各对照侧、抑制剂侧着床胚胎数、子宫内膜PR及p-Stat3/Stat3蛋白及PR mRNA表达比较,差异均无统计学意义。结论:补肾益气活血方改善大鼠胚胎着床的机制可能与其激活Stat3并上调PR表达,改善子宫内膜容受性有关。展开更多
信号传导与转录活化因子3(signal transducers and activators of transcription,STAT3)信号通路参与细胞因子及生长因子介导的信号转导。STAT3的持续激活与多种肿瘤的发生发展密切相关。STAT3可影响以DNA及组蛋白修饰为主的表观遗传修...信号传导与转录活化因子3(signal transducers and activators of transcription,STAT3)信号通路参与细胞因子及生长因子介导的信号转导。STAT3的持续激活与多种肿瘤的发生发展密切相关。STAT3可影响以DNA及组蛋白修饰为主的表观遗传修饰的异常调控:一方面,表观遗传修饰相关酶类可受到STAT3的转录调节;另一方面,STAT3可与其形成功能复合物调控其下游基因表达。STAT3的非磷酸化形式亦可直接影响局部表观遗传修饰。STAT3通过与表观遗传修饰系统的相互作用,可影响局部染色质构象,参与下游关键基因的转录调节,也可维持自身信号通路在肿瘤中的持续活化。阐明STAT3信号通路与表观遗传修饰异常的调控关系,将有助于进一步明确相关肿瘤的发病机制,为临床治疗提供新途径。展开更多
文摘多发性骨髓瘤(multiple myeloma, MM)是一种肿瘤性浆细胞疾病,其特征在于骨髓微环境中恶性浆细胞的克隆性增殖,分泌单克隆免疫球蛋白以及相关的器官功能障碍。近年来,由于自体干细胞移植的引入,以及来那度胺和硼替佐米等药物的应用改变了骨髓瘤的传统治疗方法,延长了总生存期。尽管取得了显著的治疗进展但目前仍无法治愈,其主要是由于原发耐药和疾病复发。信号转导及转录激活因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)是一种细胞信号转录因子,参与正常细胞的分化、增殖和血管生成等多种生命活动。近年来发现,STAT3在肿瘤中高表达与多种恶性肿瘤的发生、发展、侵袭和转移密切相关。STAT3在多发性骨髓瘤的发生和进展中同样也发挥关键作用。本文综述了STAT3分子结构、信号通路、激活、调控及基本生物学功能,并发现非编码RNA、热激蛋白90(heat shock protein 90,Hsp90)、血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)等因子,通过STAT3途径在多发性骨髓瘤的发生、存活以及免疫逃逸中发生重要作用,并且STAT3途径活化与多发性骨髓瘤细胞对硼替佐米、来那度胺等常规药物的耐药相关,故STAT3可作为多发性骨髓瘤潜在靶点,为精准诊疗及预后标志物提供依据与参考。
文摘上皮-间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)是指上皮细胞通过特定程序转化为间质表型细胞的生物学过程,其在肿瘤的发生、发展、转移中发挥重要作用。近年来的研究表明,信号转导子和转录激活子3(Signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)通过多种调控因子参与肿瘤上皮间质转化各个环节的调控过程,并在EMT中多变的角色对肿瘤的发生、发展有着重要的意义。
文摘目的构建信号传导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription factor 3,STAT3)二聚化抑制剂筛选模型,为STAT3抑制剂筛选提供实验方法。方法分别构建pECFP-N1-STAT3和pEYFP-N1-STAT3的荧光报告载体,利用脂质体转染技术将二者共转入HEK-293T细胞,利用ECFP和EYFP 2种荧光蛋白之间能量共振转移,检测磷酸化STAT3分子的二聚化水平,并检测Stattic对二聚化的影响。结果成功构建了pECFP-N1-STAT3和pEYFP-N1-STAT3的荧光报告载体。将2种荧光报告载体共转染HEK-293T细胞后,Western Blot检测结果显示STAT3以及p-STAT3的表达水平明显增加。以458nm波长激发ECFP,其发射波长可激发EYFP。加入STAT3二聚化抑制剂Stattic后,荧光强度降低,且呈现一定的剂量依赖性。结论基于荧光共振能量转移技术的STAT3二聚化抑制剂筛选模型构建成功。
文摘信号传导与转录活化因子3(signal transducers and activators of transcription,STAT3)信号通路参与细胞因子及生长因子介导的信号转导。STAT3的持续激活与多种肿瘤的发生发展密切相关。STAT3可影响以DNA及组蛋白修饰为主的表观遗传修饰的异常调控:一方面,表观遗传修饰相关酶类可受到STAT3的转录调节;另一方面,STAT3可与其形成功能复合物调控其下游基因表达。STAT3的非磷酸化形式亦可直接影响局部表观遗传修饰。STAT3通过与表观遗传修饰系统的相互作用,可影响局部染色质构象,参与下游关键基因的转录调节,也可维持自身信号通路在肿瘤中的持续活化。阐明STAT3信号通路与表观遗传修饰异常的调控关系,将有助于进一步明确相关肿瘤的发病机制,为临床治疗提供新途径。
