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七种中药乙醇提取物及补骨脂素对人黑素瘤YUGEN8细胞酪氨酸酶的影响 被引量：13
1
作者 孙秀坤 许爱娥 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期328-330,共3页
目的探讨中药乙醇提取物对酪氨酸酶翻译后加工成熟及运输的影响。方法体外传代培养人无色素黑素瘤细胞YUGEN8,分别加入川芎等7味中药提取液及补骨脂素,利用蛋白免疫印迹、内切糖苷酶酶切及激光共聚焦显微镜亚细胞定位等方法,观察中药处... 目的探讨中药乙醇提取物对酪氨酸酶翻译后加工成熟及运输的影响。方法体外传代培养人无色素黑素瘤细胞YUGEN8,分别加入川芎等7味中药提取液及补骨脂素,利用蛋白免疫印迹、内切糖苷酶酶切及激光共聚焦显微镜亚细胞定位等方法,观察中药处理组细胞内酪氨酸酶的表达、成熟及内质网输出过程与阴性对照组的差异。结果与阴性对照组比,中药菟丝子及桃仁处理组细胞酪氨酸酶蛋白相对分子质量80 000左右成熟片段表达增加,能够耐受内切糖苷酶酶切；共聚焦显微镜下,酪氨酸酶的分布超出了内质网固有蛋白—钙联接蛋白的标记范围。结论中药菟丝子及桃仁对黑素瘤细胞内酪氨酸酶的成熟、稳定及内质网输出具有一定促进作用。 展开更多
关键词 一元酚单氧 菟丝子 桃仁 蛋白质加工 转译后 蛋白质转运
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甘肃中部山区异地肉羊温精人工授精试验研究 被引量：5
2
作者 魏立明 杨杜录 +1 位作者 刘伯河 孟宪煜 《畜牧兽医杂志》 2022年第1期12-14,共3页
本试验针对甘肃中部山区小群体、大规模肉羊养殖模式,开展良种肉羊异地温精人工授精试验研究。试验对澳洲白、杜波、黑头萨福克和特克赛尔种公羊精液镜检合格后用羊专用稀释液按1:2〜1:4稀释,保温箱恒温运输至车程1.5〜2.0 h内周边肉羊养... 本试验针对甘肃中部山区小群体、大规模肉羊养殖模式,开展良种肉羊异地温精人工授精试验研究。试验对澳洲白、杜波、黑头萨福克和特克赛尔种公羊精液镜检合格后用羊专用稀释液按1:2〜1:4稀释,保温箱恒温运输至车程1.5〜2.0 h内周边肉羊养殖合作社、规模养殖户的同期发情处理母羊进行子宫颈口人工输精。结果表明,母羊同期发情率为95.09%,情期受胎率、分娩率、产羔率和繁殖率分别为75.32%、70.23%、184.78%和129.77%,各组合间差异不显著(P>0.05)。该技术为提高我省山区优良种公羊利用率和羊良种化程度,小群体零星分散肉羊规模养殖户开展异地人工授精配种探索出了新的可借鉴模式。 展开更多
关键词 山区 肉羊 人工授精 精液运输 情期受胎率 产羔率
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长期保存绵羊冻精的贮运实践与体会 被引量：3
3
作者 杨菊清 田可川 +5 位作者 周光瑞 杨开伦 臧长江 张增强 周新华 刘汉民 《草食家畜》 2015年第4期26-29,39,共5页
在攻克绵羊冻精长期保存技术后,我国生产的第一批绵羊颗粒冻精已创造了我国绵羊冻精保存时间最长的纪录。本批冻精进行的验证性输精结果均表明,冻精的品质在长期冷冻保存期里的贮存与转运过程中都得到了有效保护,对冻精的品质没有产生... 在攻克绵羊冻精长期保存技术后,我国生产的第一批绵羊颗粒冻精已创造了我国绵羊冻精保存时间最长的纪录。本批冻精进行的验证性输精结果均表明,冻精的品质在长期冷冻保存期里的贮存与转运过程中都得到了有效保护,对冻精的品质没有产生显著的不利影响。在我国首批绵羊颗粒冻精保存时间将近40年之际,我们特总结长期保存期间该批冻精在储存、运输方面的成功经验和实践体会,供同行参考。 展开更多
关键词 绵羊 冻精 贮存 运输 体会
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葛根对细菌性腹泻模型小鼠淋巴细胞水平和胃肠传输功能的影响研究 被引量：4
4
作者 董娟 徐杰 +1 位作者 王新国 郭红梅 《陕西中医》 2020年第8期1047-1050,共4页
目的:探讨葛根对细菌性腹泻模型小鼠外周血浆Th1、Th2、Th17表达的影响,并观察其对胃肠传输功能的作用。方法:制备胃肠感染模型小鼠20只,随机分为模型组10只及干预组10只,干预组利用葛根水溶性生物碱灌胃,连续7 d;再将10只正常小鼠设为... 目的:探讨葛根对细菌性腹泻模型小鼠外周血浆Th1、Th2、Th17表达的影响,并观察其对胃肠传输功能的作用。方法:制备胃肠感染模型小鼠20只,随机分为模型组10只及干预组10只,干预组利用葛根水溶性生物碱灌胃,连续7 d;再将10只正常小鼠设为空白组。比较各组腹泻次数、外周血中Th1、Th2、Th17、血细胞表达水平,IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10、IL-17A、胃动素、血管活性肠肽的表达水平以及小鼠结肠传输时间。结果:造模后小鼠腹泻次数明显增加,造模后小鼠Th1、Th2细胞百分比、IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10、胃平滑肌层Obestatin及其受体GPR39、结肠传输时间明显下降,白细胞数量、中性粒细胞百分比、淋巴细胞百分比、Th17细胞百分比、IL-17A升高,与空白组比较差异均有统计学意义(P<0.05),经过葛根干预后上述指标明显改善,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:葛根可明显改善胃肠感染,其作用机制与介导机体免疫反应有关。 展开更多
关键词 胃肠感染 小鼠模型 葛根 胃肠传输功能 免疫反应 胃动素 血管活性肠肽 OBESTATIN GPR39
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UPLC-MS/MS测定斯皮诺素在Caco-2细胞的转运特征 被引量：2
5
作者 黄海英 郭艳丽 +3 位作者 何元松 魏永恒 刘洁 石晋丽 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期980-985,共6页
目的:建立一种测定Caco-2细胞中斯皮诺素的超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法,研究斯皮诺素在Caco-2细胞中的转运方式。方法:采用BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相为水—甲醇溶液,梯度洗脱,流速0.30 mL... 目的:建立一种测定Caco-2细胞中斯皮诺素的超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法,研究斯皮诺素在Caco-2细胞中的转运方式。方法:采用BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相为水—甲醇溶液,梯度洗脱,流速0.30 mL·min^(-1);质谱测定采用电喷雾离子源,负离子模式,多反应监测(MRM)定量离子对m/z 607→427,以Caco-2细胞模型研究斯皮诺素的双向转运,考察斯皮诺素浓度及P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)抑制剂对斯皮诺素转运的影响。运用UPLC-MS/MS检测药物浓度,计算其表观渗透系数。结果:UPLC-MS/MS检测斯皮诺素具有良好的线性(r^2>0.999 0)、精密度的RSD≤15%,准确度在88%~115%之间,绝对回收率均在80%以上,斯皮诺素最低检测限为2 ng·mL^(-1)。斯皮诺素在Caco-2细胞中,其转运方向主要是从绒毛面(AP)→基底面(BL),且与浓度相关。斯皮诺素质量浓度在2~40μg·mL^(-1)时,其表观渗透系数P_(app(AP→BL))随浓度的增加而增加,外排率低于0.2,显示被动转运,但在80μg·mL^(-1)时,其外排率为2.84,大于2,显示有P-gp参与外排;加入P-gp抑制剂后,其外排率显著降低。结论:在低浓度时,斯皮诺素在Caco-2细胞中的转运以被动扩散为主,但在高浓度时,受到P-gp糖蛋白的外排作用,吸收降低。 展开更多
关键词 酸枣仁提取物 斯皮诺素 碳苷类物质 CACO-2细胞 药物转运方式 细胞转运实验 P-糖蛋白 超高效液相色谱串联质谱
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沙苑子苷A对脂肪变性L02细胞HNF4α调控的TG转运通路的影响 被引量：1
6
作者 刘双巧 李丽 +5 位作者 邵紫萱 高晶 贾岚 刘佳琪 扈觐玺 王景霞 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1044-1051,共8页
目的探讨脂质代谢过程中沙苑子苷A对脂肪变性L02细胞肝细胞核因子4α(HNF4α)调控甘油三酯(TG)转运通路的影响。方法体外培养L02细胞,以油酸钠∶棕榈酸钠=2∶1的比例配制1 mmol/L的游离脂肪酸(FFA),干预L02细胞24 h后建立细胞脂肪变性... 目的探讨脂质代谢过程中沙苑子苷A对脂肪变性L02细胞肝细胞核因子4α(HNF4α)调控甘油三酯(TG)转运通路的影响。方法体外培养L02细胞,以油酸钠∶棕榈酸钠=2∶1的比例配制1 mmol/L的游离脂肪酸(FFA),干预L02细胞24 h后建立细胞脂肪变性模型。将L02细胞分为空白组、模型组、沙苑子苷A低浓度组(25μmol/L)、沙苑子苷A中浓度组(50μmol/L)和沙苑子苷A高浓度组(100μmol/L)。细胞贴壁培养24 h后,空白组给予含有10%胎牛血清(FBS)的高糖DMEM培养基(即完全培养基)培养48 h;模型组给予完全培养基培养24 h后,再使用含有1 mmol/L FFA的完全培养基培养24 h;沙苑子苷A各浓度组给予相应浓度的沙苑子苷A预处理24 h后,再使用含有1 mmol/L FFA和不同浓度沙苑子苷A的完全培养基共同培养L02细胞24 h。采用微板法检测各组TG、总胆固醇(TC)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量,酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组瘦素(LEP)、脂联素(ADPN)、抵抗素(Retn)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-10(IL-10)、载脂蛋白B100(ApoB100)含量,Western blotting法检测各组HNF4α、核因子κB(NF-κB)/p65蛋白的表达。结果与模型组相比,沙苑子苷A低浓度组TC、Retn含量降低(P<0.05),IL-10含量升高(P<0.05);沙苑子苷A中浓度组TC、ALT、Retn含量降低(P<0.05),ADPN、IL-10含量升高(P<0.05);沙苑子苷A高浓度组TG、TC、ALT、AST、Retn、ApoB100含量降低(P<0.05),ADPN、IL-10含量升高(P<0.05);沙苑子苷A低、中、高浓度组LEP、IL-2含量降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组相比,沙苑子苷A高浓度组HNF4α蛋白表达上调(P<0.05),NF-κB/p65蛋白表达下调(P<0.05)。结论沙苑子苷A对TG转运通路的影响可能是通过刺激HNF4α转录调控ApoB100的装配和分泌,激活脂肪因子促进脂肪酸氧化,以此加速脂质转运和抑制脂质生成,从而发挥沙苑子维持脂质代谢稳态和减轻肝细胞炎症损伤 展开更多
关键词 沙苑子 沙苑子苷A L02细胞 脂肪变性 脂质代谢 甘油三酯转运 肝细胞核因子4Α
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