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一种新型冠状病毒基因的克隆和序列分析与传染性非典型肺炎病原学的调查 被引量:13
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作者 周伯平 陈心春 +5 位作者 王火生 李美忠 胡毅文 杜凡 徐六妹 杨桂林 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期137-139,共3页
目的 探讨冠状病毒感染与传染性非典型肺炎发病的关系 ,分析冠状病毒基因序列变异的临床意义 ,建立诊断冠状病毒变异株感染的分子生物学方法。方法 收集非典型肺炎 (SARS)患者的不同临床标本 ,采用PCR技术分别进行衣原体、甲肺炎病毒... 目的 探讨冠状病毒感染与传染性非典型肺炎发病的关系 ,分析冠状病毒基因序列变异的临床意义 ,建立诊断冠状病毒变异株感染的分子生物学方法。方法 收集非典型肺炎 (SARS)患者的不同临床标本 ,采用PCR技术分别进行衣原体、甲肺炎病毒以及冠状病毒等的基因检测。以冠状病毒相对保守的依赖RNA的RNA多聚酶基因为靶基因 ,采用NestedRT PCR技术从非典型肺炎患者的鼻咽吸取物标本和漱喉液标本中扩增出冠状病毒基因 ,将PCR产物直接克隆到T载体 ,进行序列测定 ,进一步比较不同分离株间的核苷酸和氨基酸序列同源性。结果 在 2 7例非典型肺炎患者中检出冠状病毒基因阳性 6例 ,阳性率为 2 2 2 %。而在 15例健康对照中 ,全部阴性。采用BLAST软件将所获得的冠状病毒的基因序列与基因库 (GenBank)登记的序列比较 ,结果显示本次分离克隆的冠状病毒基因与既往报道的所有冠状病毒在核苷酸水平没有相关性 ,核苷酸同源性最高不超过 4 0 %。但在氨基酸水平的同源性为 80 %左右 (70 %~ 82 % )。从不同患者中分离的冠状病毒基因之间在核苷酸水平的同源性在 98%以上。与刚刚公布的加拿大、中国香港、英国等SARS冠状病毒的核苷酸序列同源性在 99%以上。结论 相当部分非典型肺炎患者存在冠状病毒的感染 。 展开更多
关键词 冠状病毒 基因 克隆 序列 传染性非典型肺炎 病原学 调查 核苷酸 氨基酸
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大肠癌淋巴结微转移基因检测的意义 被引量:7
2
作者 汤睿 唐思聪 +2 位作者 郭善禹 王兵 刘文勇 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第10期893-898,共6页
目的:应用反转录聚合酶链反应( reverse transcriptase polymerase chain reaction, RT PCR)法检测大肠癌的淋巴结微转移。方法: 17例行根治性手术的大肠癌患者,应用 RT PCR法检测切除的 205个淋巴结中细胞角蛋白 20( cytokeratin... 目的:应用反转录聚合酶链反应( reverse transcriptase polymerase chain reaction, RT PCR)法检测大肠癌的淋巴结微转移。方法: 17例行根治性手术的大肠癌患者,应用 RT PCR法检测切除的 205个淋巴结中细胞角蛋白 20( cytokeratin20, CK20) mRNA的表达,另取 4例良性胃肠道疾病患者的 31个淋巴结作为阴性对照;并采用系列稀释试验检测本法的敏感性。结果:大肠癌患者的 205个淋巴结中有 35个检测到 CK20 mRNA的表达,而病理组织学检查仅发现 18个淋巴结存在肿瘤转移; 4例良性胃肠道疾病的 31个淋巴结 RT PCR结果均为阴性。系列稀释试验提示 CK20 RT PCR的敏感性为每 105个正常淋巴细胞中检测到 1个肿瘤细胞存在。结论: CK20 RT PCR是检测大肠癌淋巴结微转移灵敏而又特异的方法,较病理组织学检出淋巴结转移敏感性更高,其结果可能对改进分期和治疗方案具有积极的临床意义。 展开更多
关键词 大肠肿瘤 淋巴结微转移 基因诊断
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胃肠道癌外周血CK20 mRNA的表达及临床意义 被引量:7
3
作者 那光玮 李军 +4 位作者 何科基 李洪华 赵晓宁 李兴文 弥海宁 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第11期1350-1353,共4页
背景与目的:检测上皮组织特异性标志物,如CK19、CK20、多形上皮粘蛋白的核心蛋白(MUC1)及CEA等,在外周血、淋巴结及骨髓中的表达,是诊断早期胃肠道癌微转移的重要手段之一。本研究通过检测手术前、后胃肠道癌患者外周血细胞角蛋白20信... 背景与目的:检测上皮组织特异性标志物,如CK19、CK20、多形上皮粘蛋白的核心蛋白(MUC1)及CEA等,在外周血、淋巴结及骨髓中的表达,是诊断早期胃肠道癌微转移的重要手段之一。本研究通过检测手术前、后胃肠道癌患者外周血细胞角蛋白20信使核糖核酸(CK20mRNA)的表达,了解胃肠道癌血行播散转移情况及在围手术期综合治疗中的意义。方法:采用巢式逆转录-聚合酶链式反应(Nest-RT-PCR)检测62例胃肠道癌患者手术前后外周血CK20mRNA的表达状况。结果:62例样本中,34例(54.3%)术前CK20mRNA检测为阳性,31例(50.0%)术后CK20mRNA检测为阳性,对照组10例正常人及12例良性胃肠病患者CK20mRNA测定均为阴性。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者外周血CK20mRNA阳性率依次为37.5%、36.3%、66.7%、100.0%。Ⅰ、Ⅱ期患者与Ⅲ、Ⅳ期患者比较,两者间CK20mRNA的阳性率(分别为36.9%和83.3%)有显著性差异(P<0.05)。胃肠道癌的分化程度及癌栓的形成与外周血CK20mRNA的表达无关。有局部淋巴结转移患者与无淋巴结转移患者的阳性表达率有显著性差异(P<0.01)。手术前后外周血CK20mRNA阳性率差异无显著性(P>0.05)。结论:外周血CK20mRNA检测可作为胃肠道癌微转移的判断指标之一,对临床正确分期及治疗起指导作用。 展开更多
关键词 胃肠道肿瘤 rt-pcr CK20 MRNA
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大鼠脊髓内5-HT_(2C),5-HT_3,5-HT_6和5-HT_7受体亚型mRNAs的表达(英文) 被引量:8
4
作者 武胜昔 王亚云 +2 位作者 刘翔宇 王文 李云庆 《中国神经科学杂志》 CSCD 2003年第2期69-73,共5页
目的 :观察 5 HT2C,5 HT3,5 HT6 和 5 HT7受体亚型mRNAs在大鼠脊髓不同节段的表达。 方法 :反转录PCR方法。 结果 :5 HT2C受体亚型mRNA在颈、胸、腰、骶段脊髓的背角 (DH)和前角 (VH)均有较强的表达 ;5 HT3受体mRNA在各节段脊髓D... 目的 :观察 5 HT2C,5 HT3,5 HT6 和 5 HT7受体亚型mRNAs在大鼠脊髓不同节段的表达。 方法 :反转录PCR方法。 结果 :5 HT2C受体亚型mRNA在颈、胸、腰、骶段脊髓的背角 (DH)和前角 (VH)均有较强的表达 ;5 HT3受体mRNA在各节段脊髓DH的表达水平较高 ,而在VH则较低 ;与 5 HT3受体亚型相反 ,5 HT6 受体亚型mRNA在脊髓VH的表达水平高于DH ;5 HT7受体mRNA在脊髓的表达则与 5 HT3受体相似 ,在各节段的DH均有较高水平的表达。不同的受体亚型在脊髓同一节段以及同一受体亚型在不同脊髓节段的表达水平存在差异。结论 :本研究结果表明 ,上述四种 5 HT受体亚型在脊髓具有不同的表达特点 ,提示它们在脊髓水平可能发挥着不同的生理作用 ,并为深入探讨 5 HT受体参与伤害性感受和运动的调节机制提供了依据。 展开更多
关键词 大鼠 脊髓 5-HT2C 5-HT3 5-HT6 5-HT7 受体亚型 MRNAS
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福建省登革病毒感染的型别鉴定 被引量:3
5
作者 翁育伟 李世清 +2 位作者 何似 许龙善 严延生 《海峡预防医学杂志》 CAS 2002年第6期12-13,共2页
[目的 ]应用 RT- PCR方法鉴别福建省登革热感染及型别的判断。 [方法 ]从血清中提取病毒 RNA,行 RT-PCR,再用型特异性引物扩增出特异性片段 ,电泳后观察判断其型别。 [结果 ]从 6份早期病人血清扩增出 4份登革热 2型特异性条带。 [结论
关键词 登革热病毒 血清型 鉴定 rt-pcr
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Detection of Messenger RNA for Gonadotropin-Releasing Hormone (GnRH) but not for GnRH Receptors in Rat Pancreas 被引量:1
6
作者 王雷 谢莉萍 +1 位作者 黄威权 张荣庆 《Tsinghua Science and Technology》 SCIE EI CAS 2001年第3期212-215,共4页
Although gonadotropin releasing hormone (GnRH), GnRH like molecule, and GnRH receptor (GnRH R) have been reported to exist in several tissues other than brain or anterior pituitary, there are no reports concerning ... Although gonadotropin releasing hormone (GnRH), GnRH like molecule, and GnRH receptor (GnRH R) have been reported to exist in several tissues other than brain or anterior pituitary, there are no reports concerning GnRH or GnRH R gene expression in a normal pancreatic gland. In order to define the production of GnRH as well as GnRH R in the pancreatic gland, we examined their gene expression in various developmental stages of rat pancreas using the reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT PCR). GnRH mRNA transcripts were found in pancreas of male and female rats at different ages, expressing at about the same level, whereas GnRH R mRNA transcripts could not be detected in any rat pancreatic gland samples. These results suggest a possible biological role of GnRH in rodent pancreas. 展开更多
关键词 gonadotrophin releasing hormone gonadotrophin releasing hormone receptor gene expression PANCREAS reverse transcriptase polymerase chain reaction (rt pcr) mRNA
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膀胱肿瘤组织c-myc癌基因表达的临床意义 被引量:1
7
作者 邹琳 罗春丽 韩永华 《重庆医学》 CAS CSCD 2002年第11期1043-1044,共2页
目的 探讨c myc癌基因表达与膀胱移行上皮细胞癌 (TCC)生物学行为的关系。方法 应用RT PCR法检测 2 7例TCC组织、16例癌旁组织和 16例正常膀胱粘膜组织c myc癌基因的mRNA表达。 结果 TCC组织中c myc表达阳性率为6 6 7% (18/ 2 7) ,... 目的 探讨c myc癌基因表达与膀胱移行上皮细胞癌 (TCC)生物学行为的关系。方法 应用RT PCR法检测 2 7例TCC组织、16例癌旁组织和 16例正常膀胱粘膜组织c myc癌基因的mRNA表达。 结果 TCC组织中c myc表达阳性率为6 6 7% (18/ 2 7) ,癌旁组织的阳性率为 37 5 % (6 / 16 )而正常膀胱粘膜为 2 5 % (4/ 16 ) ,三者比较具有统计学差异 (P <0 0 5 ) ,不同临床分期和病理分级及肿瘤浸润、复发的TCC组织c myc表达阳性率无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论 TCC组织c myc表达阳性率与癌旁组织和正常膀胱粘膜的阳性表达有差异 ,而TCC的不同分期、分级、浸润及复发等生物学行为与c myc表达未见差异。因此 ,单独将c myc作为TCC的诊断指标时 ,其特异性和灵敏度不够 ,需结合其他有关肿瘤标志物进行诊断和鉴别诊断。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 C-MYC 逆转录聚合酶链反应
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XW630对大鼠成骨细胞雌激素受体基因表达的影响 被引量:3
8
作者 王大章 费伟 +2 位作者 郑虎 翁玲玲 邓力 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 2003年第2期260-263,共4页
探讨抗骨质疏松新化合物 XW6 30促进成骨作用的机理。从 SD大鼠颅骨中分离培养成骨细胞 ,首次采用具有高灵敏度的逆转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)技术直接从大鼠成骨细胞中检测雌激素受体 m RNA的表达。结果表明 ,XW6 30具有促进成骨细... 探讨抗骨质疏松新化合物 XW6 30促进成骨作用的机理。从 SD大鼠颅骨中分离培养成骨细胞 ,首次采用具有高灵敏度的逆转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)技术直接从大鼠成骨细胞中检测雌激素受体 m RNA的表达。结果表明 ,XW6 30具有促进成骨细胞 ERm RNA表达的作用 ,且呈时间依赖性。在相同浓度 (10 - 6 mol/ L)条件下 ,XW6 30作用强于四环素加哌嗪雌酮及单纯雌酚酮。XW6 30可能通过对 展开更多
关键词 XW630 大鼠 成骨细胞 雌激素受体 基因表达 rt-pcr 骨代谢 骨质疏松症
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RT-PCR技术检测猪瘟病毒的应用研究 被引量:34
9
作者 罗廷荣 莫扬 +7 位作者 吴文德 黄玉华 黄伟坚 秦爱珍 刘芳 温荣辉 陆芹章 余克伦 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期307-309,312,共4页
本试验应用反转录_聚合酶链式反应 (RT_PCR)对猪瘟进行诊断应用研究。应用RT_PCR对来自广西不同地区的 135份疑似猪瘟病料进行检测 ,84份诊断为阳性 ,阳性率 6 2 2 %。从百色、柳州地区等采集的健康猪扁桃体和淋巴结共 2 76份 ,经RT_PC... 本试验应用反转录_聚合酶链式反应 (RT_PCR)对猪瘟进行诊断应用研究。应用RT_PCR对来自广西不同地区的 135份疑似猪瘟病料进行检测 ,84份诊断为阳性 ,阳性率 6 2 2 %。从百色、柳州地区等采集的健康猪扁桃体和淋巴结共 2 76份 ,经RT_PCR检测 ,37份为阳性 ,阳性率为 13 4 %。其中健康猪扁桃体带毒较高 ,2 4 6份扁桃体中有 35份阳性 ,占 14 2 %。采自柳州健康猪的 2 6份淋巴结材料全为阴性 ,只有邕宁县的 1份健猪淋巴结阳性。结果表明 ,RT_PCR技术可应用于猪瘟的临床诊断。 展开更多
关键词 猪瘟 反转录-聚合酶链式反应 诊断
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RT-PCR技术诊断猪瘟的应用研究 被引量:26
10
作者 罗廷荣 莫扬 +7 位作者 吴文德 黄玉华 黄伟坚 秦爱珍 刘芳 温荣辉 陆芹章 余克伦 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期219-222,共4页
应用反转录_聚合酶链反应 (RT_PCR)对猪瘟进行诊断应用研究。应用RT_PCR对来自广西不同地区的 135份疑似猪瘟病料进行检测 ,84份诊断为阳性 ,阳性率 6 2 .2 %。从百色、柳州地区等采集的健康猪扁桃体和淋巴结共 2 76份 ,经RT_PCR检测 ,3... 应用反转录_聚合酶链反应 (RT_PCR)对猪瘟进行诊断应用研究。应用RT_PCR对来自广西不同地区的 135份疑似猪瘟病料进行检测 ,84份诊断为阳性 ,阳性率 6 2 .2 %。从百色、柳州地区等采集的健康猪扁桃体和淋巴结共 2 76份 ,经RT_PCR检测 ,37份为阳性 ,阳性率为 13.4 %。其中健康猪扁桃体带毒较高 ,2 4 6份扁桃体中有 35份阳性 ,占 14 .2%。采自柳州健康猪的 2 6份淋巴结材料全为阴性 ,只有邕宁县的 1份健猪淋巴结阳性。结果表明 。 展开更多
关键词 猪瘟 反转录-聚合酶链式反应 诊断
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电离辐射对人外周血淋巴细胞GADD45基因表达的影响 被引量:17
11
作者 徐丽昕 艾辉胜 +5 位作者 蒋本荣 姚波 余长林 郭梅 黄雅静 孙琪云 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期111-114,共4页
观察生长抑制和DNA损伤基因45(Growth arrest and DNA damage gene 45,GADD45)X射线照射后表达的改变,并研究其与照射剂量之间的关系。外周血给予0-5 GyX线照射后分离出单个核细胞并培养,在不同时间点上用反转录聚合酶链反应(Reverse tr... 观察生长抑制和DNA损伤基因45(Growth arrest and DNA damage gene 45,GADD45)X射线照射后表达的改变,并研究其与照射剂量之间的关系。外周血给予0-5 GyX线照射后分离出单个核细胞并培养,在不同时间点上用反转录聚合酶链反应(Reverse transcriptase-Polymerase clain reaction,RT-PCR)的方法测定 GADD45基因的相对表达量,分析该基因的剂量、效应关系。照射后GADD45基因在转录水平表达呈剂量依赖性增加,照射后4h达峰值,以后开始下降,但在24h仍未恢复到初始水平。 展开更多
关键词 研究生长抑制 DNA损伤基因45 生物剂量计 基因表达 反转录聚合酶链反应
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MMP-9,2,7及其抑制剂TIMP-1,2,3在卵巢肿瘤组织中的表达及临床意义 被引量:10
12
作者 胡晓霞 李力 +4 位作者 黎丹戎 张玮 陈心秋 张洁清 唐步坚 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第10期1194-1198,共5页
背景与目的:基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)通过降解细胞外基质在肿瘤的侵袭与转移中起着重要作用,MMPs活性又受到其抑制剂(tissueinhibitorofmatrixmetalloproteinase,TIMPs)的调节。本研究通过检测MMP-9、MMP-2、MMP-... 背景与目的:基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)通过降解细胞外基质在肿瘤的侵袭与转移中起着重要作用,MMPs活性又受到其抑制剂(tissueinhibitorofmatrixmetalloproteinase,TIMPs)的调节。本研究通过检测MMP-9、MMP-2、MMP-7及TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3mRNA在卵巢肿瘤组织中的表达,探讨其与卵巢癌临床病理特征和预后的关系。方法:应用RT-PCR方法检测48例卵巢癌、21例良性肿瘤及22例正常卵巢组织中MMP-9、MMP-2、MMP-7及TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3mRNA的表达。结果:MMP-9阳性率和MMP-9、MMP-2半定量值在卵巢癌组织中明显高于正常卵巢组织(P<0.05)。TIMP-2、MMP-7、TIMP-3在卵巢恶性及良性肿瘤组织中的阳性率及半定量值明显高于正常卵巢组织。MMP-9/TIMP-1在卵巢癌组织中的比值(0.91±0.67)明显高于正常卵巢组织(0.15±0.34)。MMP-9表达水平与卵巢癌的手术病理分期及预后有关,在Ⅲ~Ⅳ期患者中的表达(1.13±0.66)显著高于Ⅰ~Ⅱ期患者(0.60±0.54)(P<0.05);MMP-9其阳性患者平均生存时间为(43.00±17.12)个月,累积生存率为47.37%,明显低于MMP-9阴性者(100%)。结论:MMP-9、MMP-2、MMP-7、TIMP-2、TIMP-3基因在卵巢恶性肿瘤组织中的表达增加。 展开更多
关键词 MMP-9 卵巢癌 表达水平 MMP-7 TIMP-2 TIMP-1 TIMP-3 RNA 抑制剂 高表达
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逆转录聚合酶链反应检测结直肠癌淋巴结微转移的临床意义 被引量:16
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作者 袁宏银 程伏林 +2 位作者 魏正专 杨国樑 陈家宽 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第9期1069-1073,共5页
背景与目的:结直肠癌淋巴结微转移灶是否有预测预后价值目前尚有争议,本文对结直肠癌患者淋巴结微转移情况进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测,研究微转移对临床分期和预后的影响。方法:用RT-PCR技术检测56例结直肠癌患者肠旁及系膜淋... 背景与目的:结直肠癌淋巴结微转移灶是否有预测预后价值目前尚有争议,本文对结直肠癌患者淋巴结微转移情况进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测,研究微转移对临床分期和预后的影响。方法:用RT-PCR技术检测56例结直肠癌患者肠旁及系膜淋巴结中细胞角质蛋白CK20mRNA,揭示微转移灶的存在,并与常规病理苏木精伊红(HE)染色和免疫组化染色结果进行比较;分析HE染色和RT-PCR检测结果对判定临床病理分期和统计生存率的影响。结果:共检测432个淋巴结,HE染色、免疫组化染色和RT-PCR法淋巴结转移检出率分别为57.2%、62.3%和73.1%。HE染色和免疫组化的检出率无显著性差异(P>0.05),而HE染色和RT-PCR法检测结果有显著性差异(P<0.05)。56例患者中,按HE染色结果确定的PN0、PN1和PN2期,其5年无复发转移生存率分别为80%、60%和50%;通过RT-PCR技术检测,升级后的PN0、PN1和PN2期5年无复发转移生存率分别为100%、61.9%和55.6%,两种方法分析的结果有显著性差异(P<0.05)。结论:HE染色未确切指出淋巴结微转移癌;RT-PCR法检测CK20mRNA可以推断淋巴结微转移癌的存在,从而有助于确定结直肠癌临床分期和预测预后。 展开更多
关键词 结直肠癌 淋巴结微转移 逆转录聚合酶链反应 CK20
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通心络对急性心肌梗死患者心功能和肿瘤坏死因子-α表达的影响 被引量:14
14
作者 游敏生 李贤 +3 位作者 王彦芝 赵焕芬 岳文芳 陈淑霞 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期231-232,共2页
目的观察通心络对急性心肌梗死患者心功能的变化和肿瘤坏死因子(TNF-α)表达的抑制作用。方法 91例经冠脉造影确诊的急性心肌梗死患者,随机分为常规治疗组和通心络治疗组,常规治疗组46例,口服阿司匹林、美托洛尔(倍他乐克)、单硝酸异山... 目的观察通心络对急性心肌梗死患者心功能的变化和肿瘤坏死因子(TNF-α)表达的抑制作用。方法 91例经冠脉造影确诊的急性心肌梗死患者,随机分为常规治疗组和通心络治疗组,常规治疗组46例,口服阿司匹林、美托洛尔(倍他乐克)、单硝酸异山梨醇酯、氯吡格雷、阿托伐他汀等常规治疗,通心络治疗组在常规治疗基础上给予通心络胶囊4粒,每日三次,疗程8 w。治疗前后,心脏超声,放射性核素心室造影检查心功能,ELISA法检测血浆TNF-α水平。结果治疗后,通心络治疗组和常规治疗组患者的心脏超声显示,舒张末期左室腔内径(EDD)、室间隔厚度(IVST)、左室后壁厚度(LVPWT)和射血分数(EF),两组间均无显著性差异(P>0.05),左室收缩功能,LVEF和FS无显著变化(P>0.05),通心络组PER有显著增高(P<0.05)。左室舒张功能PFR和1/3FF显著升高(P<0.05),ELISA法检测患者血浆显示,通心络治疗8 w后,患者血浆TNF-α水平明显降低(P<0.01)。结论 TNF-α与左室功能密切相关,TNF-α的升高影响心功能,通心络有降低TNF-α的作用,可改善心功能。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子(TNF-α) 心肌梗死(MI) 心肌纤维化(MF)心肌重塑(MR) 逆转录.聚合酶链反应法(rt-pcr)
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可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)与不明原因复发性流产的相关性研究 被引量:14
15
作者 庞丽红 李敏清 +3 位作者 杨冬梅 石凌 臧宁 林伟雄 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期58-61,共4页
目的:探讨可溶性血管内皮生长因子受体(sFlt-1)与原因不明复发性流产(URSA)的相关性。方法:①采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)测定30例原因不明复发性流产胚胎停育患者(URSA组)和30例正常早孕孕妇(对照组)血清sFlt-1水平;②采用逆转录聚... 目的:探讨可溶性血管内皮生长因子受体(sFlt-1)与原因不明复发性流产(URSA)的相关性。方法:①采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)测定30例原因不明复发性流产胚胎停育患者(URSA组)和30例正常早孕孕妇(对照组)血清sFlt-1水平;②采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定各组孕妇绒毛组织sFlt-1mRNA表达水平。结果:复发性流产胚胎停育组与正常早孕对照组血清sFlt-1水平分别为13796.67±11917.08ng/L和3540.67±2989.80ng/L;复发性流产胚胎停育组与正常早孕对照组绒毛组织sFlt-1mRNA表达水平两组计量资料不符合正态分布,用Mann-Whitney秩和检验比较,RSA组sFlt-1mRNA均秩为41.37,正常组sFlt-1mRNA均秩为19.63,P<0.01,组间差异非常显著性意义(P<0.01)。结论:sFlt-1表达异常与复发性流产具有相关性,其表达水平升高可能参与RSA发生的病理生理过程。 展开更多
关键词 可溶性血管内皮生长因子受体(sFlt-1) 原因不明复发性流产(uRSA) ELISA rt-pcr
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西安地区手足口病与肠道病毒71型的关系 被引量:14
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作者 聂晓晶 张学红 +5 位作者 张国成 许东亮 马超峰 李亚绒 孙新 李小青 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期523-526,共4页
目的获得2008年西安地区肠道病毒71型(EV71)流行株,探寻快速高效的检测技术,分析所获两安地Ⅸ流行株与安徽阜阳流行株的区别。方法采集手足口病患儿的疱液、咽部分泌物进行病毒分离和RT—PCR检测;利用免疫荧光技术进行病毒鉴定。结... 目的获得2008年西安地区肠道病毒71型(EV71)流行株,探寻快速高效的检测技术,分析所获两安地Ⅸ流行株与安徽阜阳流行株的区别。方法采集手足口病患儿的疱液、咽部分泌物进行病毒分离和RT—PCR检测;利用免疫荧光技术进行病毒鉴定。结果56份咽部分泌物接种RD细胞和HEp-2细胞,病毒分离阳性率分别为5.4%(3/56)、1.8%(1/56);56份疱液标本接种RD细胞和HEp-2细胞,病毒分离阳性率分别为12.5%(7/56)、5.4%(3/56);RD细胞和HEp-2细胞分别于7d和10d出现细胞病变。检测了56例患儿的咽部分泌物和疱液标本,咽部分泌物RT—PCR结果阳性率为21.4%(12/56),疱液标本RT—PCR结果阳性率为33.9%(19/56)。14份出现细胞病变的细胞株通过免疫荧光鉴定9份为EV71感染。获得了2008年西安地区EV71流行株,将核苷酸序列提交NCBIGenbank,获得核苷酸登录号EU812461。结论本流行株可能嗜上皮细胞性弱、与2008年提交的安徽阜阳病毒株EU703812、EU703813、EU703814同源性达97%~98%;RT—PCR技术有快速、高效的优势,足EV71快速诊断的重要手段。 展开更多
关键词 肠道病毒71型 手足口病 肠道病毒感染 逆转录聚合酶链反应
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VEGF-C和FLT-4在非小细胞肺癌组织中的表达及其意义 被引量:7
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作者 刘杏娥 毛伟敏 《实用癌症杂志》 2007年第1期44-46,共3页
目的研究VEGF-C、FLT-4在非小细胞肺癌组织中的表达及其与淋巴结转移的关系。方法采用半定量RT-PCR和免疫组化方法,检测60例非小细胞肺癌肿瘤组织中VEGF-C、FLT-4的表达。结果60例非小细胞肺癌组织中,36例(60%)VEGF-C阳性表达,30例(50%)... 目的研究VEGF-C、FLT-4在非小细胞肺癌组织中的表达及其与淋巴结转移的关系。方法采用半定量RT-PCR和免疫组化方法,检测60例非小细胞肺癌肿瘤组织中VEGF-C、FLT-4的表达。结果60例非小细胞肺癌组织中,36例(60%)VEGF-C阳性表达,30例(50%)FLT-4阳性表达。有淋巴结转移者VEGF-C和FLT-4的阳性表达率分别为80.5%和69.4%,明显高于淋巴结阴性组(29.2%和33.3%),有非常显著性差异(P值均<0.01)。经半定量RT-PCR分析,VEGF-C和FLT-4在有淋巴结转移者中的表达量明显高于无淋巴结转移者,有显著性差异(分别为P<0.01,P<0.05)。结论VEGF-C及其受体FLT-4的表达与非小细胞肺癌的淋巴结转移有关。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子C 血管内皮生长因子受体-3 半定量rtpcr 肿瘤转移 免疫组织化学
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28098名献血者HCV-RNA检测及部分阳性者的随访调查 被引量:10
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作者 孙爱农 隋鲁怀 +2 位作者 查勇 周安娜 葛峰 《中国输血杂志》 CAS CSCD 2005年第2期91-93,共3页
目的评价逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测献血者HCV-RNA的意义,调查献血者HCV感染的“窗口期”情况。方法用RT- PCR检测大批正常献血者的HCV- RNA,并对其中部分HCV -RNA阳性者做随访研究。结果在28098名常规化验项目均正常的献血者中,HC... 目的评价逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测献血者HCV-RNA的意义,调查献血者HCV感染的“窗口期”情况。方法用RT- PCR检测大批正常献血者的HCV- RNA,并对其中部分HCV -RNA阳性者做随访研究。结果在28098名常规化验项目均正常的献血者中,HCV-RNA阳性77人,占0.27%,对11名HCV -RNA阳性献血者跟踪,其中9例在随访检查的常规项目中,ALT和(或)抗HCV均出现不正常,出现的时间距首次HCV -RNA阳性至少4周。结论RT- PCR检测血液HCV- RNA能早期发现HCV感染者,为提高输血安全性,宜在献血者中开展HCV-RNA检测。 展开更多
关键词 逆转录-聚合酶链反应(rt-pcr) 献血者 丙型肝炎病毒/核糖核酸(HCV-RNA)
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MDR1、BCRP和LRP基因在乳腺癌组织中的表达及其意义 被引量:9
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作者 张桂香 刘新兰 李金平 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期79-83,共5页
目的探讨多药耐药基因(MDR1)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)及肺耐药蛋白(LRP)mRNA在乳腺癌组织中的表达及其相互关系,分析它们与乳腺癌临床病理特征的关系。方法采用RT-PCR方法检测2007年1月至2007年12月在宁夏医科大学附属医院手术切除的42... 目的探讨多药耐药基因(MDR1)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)及肺耐药蛋白(LRP)mRNA在乳腺癌组织中的表达及其相互关系,分析它们与乳腺癌临床病理特征的关系。方法采用RT-PCR方法检测2007年1月至2007年12月在宁夏医科大学附属医院手术切除的42例乳腺癌组织、42例癌旁组织及50例乳腺良性病变中MDR1、BCRP和LRP mRNA的表达。结果乳腺癌组织中MDR1、BCRP、LRP mRNA的阳性表达率分别为40.47%、38.09%及61.90%,与癌旁组织及乳腺良性病变组织相比阳性表达率均有统计学差异(P<0.05)。MDR1mRNA表达与绝经状况呈完全正相关(r=0.398,P<0.01),与腋窝淋巴结状况呈完全正相关(r=0.398,P<0.01);BCRP mRNA表达与腋窝淋巴结状况呈正相关(r=0.355,P<0.05);LRP mRNA表达与绝经状况、年龄、腋窝淋巴结状况及肿瘤大小之间均无相关性(P>0.05);MDR1mRNA和BCRP mRNA表达呈正相关(r=0.652,P<0.01),LRP mRNA与MDR1mRNA表达无相关性(r=0.147,P>0.05);LRP mRNA和BCRP mRNA表达无相关性(r=0.111,P>0.05)。2个耐药基因共表达率为47.61%,2种或3种耐药基因共表达率为61.89%。结论乳腺癌组织中存在耐药基因MDR1、BCRP和LRP的表达,单基因和多基因协同作用,以多基因共表达为主;检测MDR1和BCRP基因表达水平可辅助临床判断乳腺癌患者的预后。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 耐药基因 mdr1 BCRP LRP rt-pcr
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鼻咽癌survivin基因和血管内皮生长因子表达的临床意义 被引量:6
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作者 李俊 周绪红 +2 位作者 彭涛 江孝清 薛英 《实用癌症杂志》 2005年第3期263-266,共4页
目的研究鼻咽癌survivin基因表达和血管内皮生长因子(VEGF)的表达及其临床意义.方法运用逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测鼻咽癌组织中survivin、VEGF mRNA的表达情况.结果35例鼻咽癌组织中23例survivin表达阳性(65.7%),22例VEGF表... 目的研究鼻咽癌survivin基因表达和血管内皮生长因子(VEGF)的表达及其临床意义.方法运用逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测鼻咽癌组织中survivin、VEGF mRNA的表达情况.结果35例鼻咽癌组织中23例survivin表达阳性(65.7%),22例VEGF表达阳性(62.9%);14例鼻咽黏膜慢性炎症组织中2例survivin表达阳性(14.3%),3例VEGF表达阳性(21.4%).癌组织与炎症组织相比,survivin、VEGF两者均有表达,但具有显著性差别(P<0.05).鼻咽癌组织中survivin的表达与肿瘤的细胞分化及TNM分期有关,高分化者的表达率明显低于中低分化者(P<0.05),Ⅰ~Ⅱ期的阳性表达率(47.4%)较Ⅲ~Ⅳ期(87.5%)低(P<0.05).鼻咽癌组织中VEGF的表达与颈淋巴结转移及TNM分期有关,有颈淋巴结转移者其阳性表达率较高,Ⅰ~Ⅱ期的阳性表达率(42.1%)较Ⅲ~Ⅳ期(87.5%)低(P<0.01).鼻咽癌组织中survivin、VEGF的表达呈正相关性.结论鼻咽癌组织中存在survivin、VEGF的过表达现象.survivin、VEGF基因的异常表达与鼻咽癌的发生发展存在一定的关系.survivin的异常表达可能在鼻咽癌的血管生成中发挥一定的作用. 展开更多
关键词 鼻咽癌 逆转录聚合酶链反应 SURVIVIN基因 血管内皮生长因子
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