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南美白对虾4种病原体可视化快速检测试剂盒(生物芯片法)的研发 被引量:6
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作者 宋居易 刘昱辰 +2 位作者 张苏楠 江高伟 杨华卫 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第3期656-665,共10页
利用反向点杂交技术,研制灵敏度较高的南美白对虾4种病原体检测试剂盒,其检测指标包括致对虾急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌(VpAHPND)、对虾白斑综合征病毒(WSSV)、对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)、对虾肝肠胞虫(EHP),用重组质... 利用反向点杂交技术,研制灵敏度较高的南美白对虾4种病原体检测试剂盒,其检测指标包括致对虾急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌(VpAHPND)、对虾白斑综合征病毒(WSSV)、对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)、对虾肝肠胞虫(EHP),用重组质粒分别对其进行了最低检测限测试,并与现有推荐方法进行比较。本研究研发的检测试剂盒对4种病原体的最低检测限为1μl 10~100拷贝。特异性检测结果表明,4种病原体彼此不产生交叉反应,特异性良好,与各病原体推荐检测方法的结果相比,阳性符合率完全一致。本研究研发的检测试剂盒具有操作方便,灵敏度高,特异性好,检测时间短,设备要求简单等特点,适合应用于南美白对虾VpAHPND、WSSV、IHHNV、EHP的检测、筛查工作中。 展开更多
关键词 南美白对虾 病原体 生物芯片法 反向点杂交技术
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妇科门诊妇女人乳头瘤病毒感染现状及基因亚型分布 被引量:5
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作者 黄江渝 唐建 +1 位作者 杨淑哲 刘成桂 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第27期3614-3616,共3页
目的:了解妇科门诊妇女宫颈人乳头瘤病毒(HPV)感染现状及基因亚型分布。方法采用PCR体外扩增和DNA反向点杂交相结合的DNA芯片技术检测HPV感染的基因亚型。结果共检测5052份妇科门诊患者宫颈脱落细胞样本,HPV感染总阳性率为17.52%... 目的:了解妇科门诊妇女宫颈人乳头瘤病毒(HPV)感染现状及基因亚型分布。方法采用PCR体外扩增和DNA反向点杂交相结合的DNA芯片技术检测HPV感染的基因亚型。结果共检测5052份妇科门诊患者宫颈脱落细胞样本,HPV感染总阳性率为17.52%。各年龄组 H PV感染差异有统计学意义( P<0.01),其中20~25岁组的阳性率分别高于26~30岁组和31~35岁组,差异均有统计学意义( P<0.01,P<0.05);36~40岁组的阳性率高于26~30岁组,差异有统计学意义( P<0.05)。高危亚型 HPV基因的阳性检出率(18.1%)高于低危亚型(5.5%),差异有统计学意义(P<0.01)。高危亚型中以HPV52亚型最多,占15.03%,其次是HPV16和 HPV58亚型;低危亚型以 HPV81亚型居多,占7.98%。结论妇科门诊妇女HPV感染阳性率较高,且以高危亚型居多;建议针对不同年龄群开展HPV基因亚型的常规检测。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒亚型检测 PCR-反向点杂交 DNA芯片技术 妇科门诊
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2615例女性患者人乳头瘤病毒感染基因PCR-反向点杂交分型技术检测的研究 被引量:4
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作者 丁亚利 吕慧贤 曹婷 《抗感染药学》 2018年第4期562-565,576,共5页
目的:研究女性患者人乳头瘤病毒(HPV)感染基因PCR-反向点杂交分型技术的检测,为临床HPV分型及其治疗提供参考。方法:选取2015年10月—2017年11月间就诊的有性生活史或已婚女性受试者2 615例资料,对资料中采用聚合酶链式反应(PCR)反向点... 目的:研究女性患者人乳头瘤病毒(HPV)感染基因PCR-反向点杂交分型技术的检测,为临床HPV分型及其治疗提供参考。方法:选取2015年10月—2017年11月间就诊的有性生活史或已婚女性受试者2 615例资料,对资料中采用聚合酶链式反应(PCR)反向点杂交法检测的女性宫颈分泌物中25种HPV分型结果,分析HPV亚型分类感染情况及其分型,探讨PCR-反向点杂交分型技术在宫颈癌早期筛查中的应用价值。结果:2 615例受试女性中HPV亚型检出率为28.60%,在25型HPV分型中高危型HPV 52亚型的感染率为最高(占6.50%),单重感染占20.23%,多重感染占8.37%;不同年龄段患者中>20岁女性的HPV感染率占86.49%,且不同年龄组女性患者中HPV感染率经比较其差异有统计学意义(P<0.05)。结论:临床HPV感染基因的PCR-反向杂交分型技术检测分型,可有效检测高危型及多重型HPV感染,对宫颈鳞状细胞癌的早期诊断与普查具有重要的应用价值。 展开更多
关键词 聚合酶链式反应(PCR) 反向点杂交分型技术 人乳头瘤病毒 基因 分型
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白粉菌诱导的小麦品种Brock的差异表达基因解析 被引量:2
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作者 王艳红 肖莹 +2 位作者 郑舒扬 刘晓颖 王振英 《天津师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2015年第2期71-76,93,共7页
为了解抗病小麦品种Brock对白粉菌的抗性机制,采用m RNA差异显示技术(DDRT-PCR)和反向Northern杂交技术分析小麦Brock在白粉菌诱导下的差异表达基因.对照组共获得5 072个片段,诱导组获得5 366个片段,反向Northern杂交筛选后,获得94个差... 为了解抗病小麦品种Brock对白粉菌的抗性机制,采用m RNA差异显示技术(DDRT-PCR)和反向Northern杂交技术分析小麦Brock在白粉菌诱导下的差异表达基因.对照组共获得5 072个片段,诱导组获得5 366个片段,反向Northern杂交筛选后,获得94个差异表达片段.基因测序和Blast比对后,共有71个片段得到功能注释,涉及抗病防御相关基因、能量代谢相关基因、转录因子、次级代谢相关基因以及信号转导基因等.选取与RPP13同源的片段7和与MYB44同源的片段10进行半定量表达模式分析,发现白粉菌诱导后这2个基因的表达明显上调,在染菌8 h后达到峰值,表明二者可能参与Brock白粉菌侵染的早期应答反应. 展开更多
关键词 禾布氏白粉菌 差异表达基因 MRNA差异显示技术 反向Northern杂交 抗病基因
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曲靖市某医院女性患者人乳头瘤病毒检测及基因分型结果分析 被引量:2
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作者 毛德超 孙继芹 +2 位作者 陶娅琳 冷丽 包锐 《实用检验医师杂志》 2019年第1期22-25,共4页
目的了解本院女性患者人乳头瘤病毒(HPV)感染情况及HPV基因型分布情况,为临床诊治HPV感染提供依据。方法选取2016年1月1日—2018年11月30日在曲靖市第二人民医院进行HPV检测的20岁及以上女性患者作为研究对象,采用聚合酶链反应(PCR)-反... 目的了解本院女性患者人乳头瘤病毒(HPV)感染情况及HPV基因型分布情况,为临床诊治HPV感染提供依据。方法选取2016年1月1日—2018年11月30日在曲靖市第二人民医院进行HPV检测的20岁及以上女性患者作为研究对象,采用聚合酶链反应(PCR)-反向点杂交技术定性检测HPV并进行基因分型。统计检测结果,分析HPV各年龄段感染率、人群分布以及基因型分布。结果共纳入3 221例受检者,486例患者感染HPV,感染率15.09%;其中408例感染高危型,感染率12.67%。HPV基因分型为16型的患者数量最多,为106例(占21.81%);73型最少,为1例(占0.20%)。体检人群的HPV感染率明显低于门诊和住院患者(10.12%比18.36%、16.25%,P<0.05)。不同年龄段HPV感染率差异不大,≥60岁年龄段人群的感染率最高(21.64%),与30~39岁、40~49岁年龄段感染率(分别为14.13%和14.46%)有明显差异(P<0.05),其他年龄段感染率均无明显差异(均P>0.05)。结论本院体检人群的HPV感染率最低;老年人群的HPV感染率最高;高危型HPV16型、52型、58型以及低危型HPV40型、44型是曲靖市女性HPV感染的主要基因分型。 展开更多
关键词 曲靖市 女性 人乳头瘤病毒 聚合酶链反应 反向点杂交技术 基因分型
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海南2939例女性HPV感染现状及基因型分布 被引量:10
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作者 陈春宝 苏震 +2 位作者 田昕 黄芳 王洁 《中国热带医学》 CAS 2017年第9期904-907,共4页
目的调查海南地区女性人乳头瘤病毒(HPV)感染现状及亚型分布情况。方法采用反向斑点杂交-基因芯片技术对海南地区到医院妇科就诊的2 939例女性患者采集宫颈脱落细胞标本进行23种HPV亚型检测。结果 HPV感染阳性共检出652例,阳性率为22.1... 目的调查海南地区女性人乳头瘤病毒(HPV)感染现状及亚型分布情况。方法采用反向斑点杂交-基因芯片技术对海南地区到医院妇科就诊的2 939例女性患者采集宫颈脱落细胞标本进行23种HPV亚型检测。结果 HPV感染阳性共检出652例,阳性率为22.18%,其中单一感染占78.83%,高危型感染占84.08%,主要为HPV52(20.40%),HPV58(11.20%),HPV16(11.08%)。HPV感染阳性率以≤20岁组最高,为33.33%,>50岁组其次,为26.59%,呈"U"形分布。海南与其他地区HPV感染情况对比,具有显著区别。感染率最高的前三位HPV亚型均为52、58、16,但各地区这三个亚型的感染率及排列顺序都具有较大差别,HPV感染具有地域差异。北京、沈阳、重庆、长沙等地区感染率最高的是HPV16亚型,杭州、南宁、河源地区感染率最高的是HPV52亚型,与海南地区一致。结论海南地区女性HPV感染以单一型感染为主,高危型HPV52、HPV58和HPV16为本地区女性HPV感染主要亚型。HPV基因型分布的研究对当地宫颈癌防治有较好的指导意义。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 反向斑点杂交技术 基因分型
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应用反向斑点杂交技术进行脐血HLA-DRB基因分型方法的建立 被引量:4
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作者 黄以宁 廖灿 +3 位作者 汤雪薇 李焱 谢杏梅 曾瑞萍 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第2期148-152,共5页
HLA分子的多态性对于移植有十分重要的意义。常用的HLA基因分型方法中SSOP基因分型方法有较高分辨率 ,但操作过程复杂 ,仅适于大样本的HLA分型。PCR SSP基因分型方法分辨率较低 ,但操作过程简单 ,适于临床要求。有必要建立一种简便、快... HLA分子的多态性对于移植有十分重要的意义。常用的HLA基因分型方法中SSOP基因分型方法有较高分辨率 ,但操作过程复杂 ,仅适于大样本的HLA分型。PCR SSP基因分型方法分辨率较低 ,但操作过程简单 ,适于临床要求。有必要建立一种简便、快速、价廉、高分辨率的基因分型方法。本研究取 6 3份已知HLA DRB型的脐血标本 ,经盐酸胍方法提取DNA用于反向斑点杂交 (RDB)基因分型 ,同时采用SSOP和PCR SSP方法进行比较。结果表明 ,所有样本用RDB方法基因分型均获得成功 ,可准确地分辨 6 0个HLA DRB等位基因 ,且结果与用SSOP和PCR SSP方法的结果完全一致。结论提示 ,RDB方法可准确地分辨HLA DRB等位基因 ,分辨率高 ,操作简单 。 展开更多
关键词 反向斑点杂交技术 HLA-DRB基因分型 脐血 特异性序列引物PCR 序列特异性寡核苷酸探针 白细胞抗原
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BALF Xpert MTB/RIF和PCR-反向斑点杂交技术在涂阴肺结核诊断中的价值
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作者 李邱宏 李赞华 +2 位作者 陈艳玲 吴于青 陈思雨 《中国医学创新》 CAS 2024年第30期138-142,共5页
目的:对比支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)结核分枝杆菌(MTB)/利福平(RIF)耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Xpert MTB/RIF)和聚合酶链反应(PCR)-反向斑点杂交技术在涂阴肺结核诊断中的价值。方法:纳入2021年6月... 目的:对比支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)结核分枝杆菌(MTB)/利福平(RIF)耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Xpert MTB/RIF)和聚合酶链反应(PCR)-反向斑点杂交技术在涂阴肺结核诊断中的价值。方法:纳入2021年6月—2023年1月于江西省胸科医院接受治疗的肺结核患者共200例,所有患者均留取BALF送检,进行Xpert MTB/RIF、PCR-反向斑点杂交技术检测。以病理检查结果为金标准,统计确诊涂阴肺结核的占比情况,并计算Xpert MTB/RIF与PCR-反向斑点杂交技术两种检测方法的阳性率、与金标准结果的一致性,并评估两种检测方法对涂阴肺结核的诊断价值。结果:Xpert MTB/RIF检测涂阴肺结核的阳性率(76.50%)与PCR-反向斑点杂交技术(69.50%)比较,差异无统计学意义(χ^(2)=2.486,P=0.115)。200例肺结核患者中确诊为涂阴肺结核有137例,占比68.50%;Xpert MTB/RIF的符合率(94.89%)高于PCR-反向斑点杂交技术(74.45%),差异有统计学意义(P<0.05)。Xpert MTB/RIF诊断涂阴肺结核的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度均高于PCR-反向斑点杂交技术(P<0.05)。结论:Xpert MTB/RIF、PCR-反向斑点杂交技术均可用于涂阴肺结核诊断中,其中Xpert MTB/RIF的诊断价值更高,可辅助临床早期诊断筛查。 展开更多
关键词 支气管肺泡灌洗液 结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术 PCR-反向斑点杂交技术 涂阴肺结核
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广西钦州地区结核分枝杆菌相关耐药基因变异特征分析 被引量:2
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作者 李崇建 鲍金圭 +3 位作者 陈焯彬 李仕娟 吴海松 梁玲 《国际检验医学杂志》 CAS 2018年第8期936-938,共3页
目的分析广西钦州地区结核分枝杆菌(MTB)相关耐药基因rpoB、katG、inhA、rpsL及embB的变异特征。方法应用聚合酶链式反应(PCR)-反向斑点杂交法对237例MTB-DNA阳性的痰液标本进行结核分枝杆菌5种常见耐药突变基因检测。结果对4种一线抗... 目的分析广西钦州地区结核分枝杆菌(MTB)相关耐药基因rpoB、katG、inhA、rpsL及embB的变异特征。方法应用聚合酶链式反应(PCR)-反向斑点杂交法对237例MTB-DNA阳性的痰液标本进行结核分枝杆菌5种常见耐药突变基因检测。结果对4种一线抗结核药物耐药菌株占30.38%,其中单耐利福平(RIF)占2.53%,单耐异烟肼(INH)占13.92%,仅对链霉素(STR)耐药占3.80%,对两种及以上抗结核药物耐药(PR)占3.80%,同时对RIF和INH耐药(MDR)占6.33%。5种耐药基因的13个突变位点中,INH inhA基因的-15M位点最多见,其次为RIF的S531L位点和STR的43M位点。结论广西钦州地区的主要耐药菌株为INH耐药,其中又以inhA基因突变为主。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 耐药基因 基因突变 PCR-反向斑点杂交
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西北地区16276例女性人乳头瘤病毒亚型感染状况分析
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作者 朱艳 李永霞 +3 位作者 代艳艳 黄蕾 姚伟东 卜虹妍 《国际检验医学杂志》 CAS 2018年第A01期106-109,共4页
目的 分析西北地区(陕西、甘肃、宁夏、青海、内蒙等地)女性人乳头瘤病毒(HPV)的感染及亚型分布情况,对该地区宫颈癌的预防和监测提供依据。 方法 收集2016年3月至2016年7月送检的16 276例来自陕西、甘肃、宁夏、青海、内蒙等地... 目的 分析西北地区(陕西、甘肃、宁夏、青海、内蒙等地)女性人乳头瘤病毒(HPV)的感染及亚型分布情况,对该地区宫颈癌的预防和监测提供依据。 方法 收集2016年3月至2016年7月送检的16 276例来自陕西、甘肃、宁夏、青海、内蒙等地的女性宫颈分泌物样本,使用深圳亚能扩增杂交系统检测HPV-DNA亚型,对其结果进行回顾性分析。 结果 西北地区女性HPV总感染率为29.29%(4 768/16 276),以单一型别感染为主,占63.65%(3 035/4 768)。HPV23种亚型均有检出,共7 666例,以高危型感染为主,占74.82%(5 736/7 666)。高危型检出率较高的有HPV52(12.35%)、HPV16(11.77%)、HPV58(7.47%)。不同地域妇女感染的HPV亚型分布无明显差异。不同年龄阶段妇女感染的HPV亚型分布有差异性,高危型感染率较高的年龄阶段为31~40岁(62.71%)及41~50岁(63.21%)。 结论 西北地区女性HPV感染以单一高危型为主,感染率较高的HPV亚型依次为HPV52、HPV16、HPV58。高危型感染率较高的年龄阶段为31~50岁。 展开更多
关键词 西北地区 人乳头瘤病毒亚型 PCR-反向点杂交技术 感染率
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