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重组融合蛋白rTMP-GH对体外培养巨核细胞增殖的影响 被引量：6
1
作者 许杨 王军平 +6 位作者 赵景宏 粟永萍 陈芳 申明强 陈默 王崧 开丽 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期1-4,共4页
目的探讨TPO模拟肽(thrombopoietin mimetic peptide,TMP)与人生长激素(growth hormone,GH)的重组融合蛋白rTMP-GH对体外培养巨核系细胞增殖的影响,以及对血小板生成有显著调控作用的球蛋白转录调节因子(globin transcription factor-1,... 目的探讨TPO模拟肽(thrombopoietin mimetic peptide,TMP)与人生长激素(growth hormone,GH)的重组融合蛋白rTMP-GH对体外培养巨核系细胞增殖的影响,以及对血小板生成有显著调控作用的球蛋白转录调节因子(globin transcription factor-1,GATA-1)表达的调控作用。方法体外培养Dami细胞,100ng/ml的重组融合蛋白rTMP-GH作用7d后,观察巨核细胞集落形成能力,分析rTMP-GH对Dami细胞增殖的影响。同时,采用Western blot和RT-PCR方法分别检测Dami细胞中GATA-1的蛋白水平和mRNA表达变化,探讨rTMP-GH对巨核细胞生成血小板的调节作用。结果rTMP-GH处理后Dami细胞的集落形成能力显著增强,转录因子GATA-1的mRNA和蛋白表达水平显著上调,其调节作用明显强于空白对照组和GH组。结论rTMP-GH能够刺激巨核细胞增殖分化和上调GATA-1的表达,具有促进血小板生成的作用。 展开更多
关键词 rtmp-gh Dami细胞 增殖 GATA-1
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重组融合蛋白rTMP-GH在巴斯德毕赤酵母中表达的研究 被引量：2
2
作者 王崧 王军平 +6 位作者 陈默 许杨 陈芳 申明强 王艾平 粟永萍 开丽 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第21期2037-2040,共4页
目的实现TPO模拟肽(throm bopoietin mimetic peptide,TMP)与人生长激素(human growth hormone,hGH)的重组融合蛋白rTMP-GH在巴氏毕赤酵母中的高效表达。方法以含有rTMP-GH核苷酸序列的原核质粒为模板,PCR方法获得rTMP-GH的编码序列,并... 目的实现TPO模拟肽(throm bopoietin mimetic peptide,TMP)与人生长激素(human growth hormone,hGH)的重组融合蛋白rTMP-GH在巴氏毕赤酵母中的高效表达。方法以含有rTMP-GH核苷酸序列的原核质粒为模板,PCR方法获得rTMP-GH的编码序列,并亚克隆至载体pPIC9K中,将所构建pPIC9K-rTMP-GH表达质粒转化酵母宿主细胞GS115,MD/MM平板及G418抗性筛选高表达株,然后进行试管补料分批表达,Western blot对表达产物进行鉴定,通过巨核细胞集落形成能力对其生物学活性进行初步检测。结果成功构建pPIC9K-rTMP-GH表达质粒,筛选到高表达rTMP-GH重组融合蛋白的巴氏毕赤酵母细胞株,初步证实所表达产物具有刺激巨核细胞集落形成的能力。结论成功实现了rTMP-GH融合蛋白在巴氏毕赤酵母中的高效表达。 展开更多
关键词 rtmp—gh 毕赤酵母 表达
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