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白头翁皂苷D体外抗肝癌作用及其机制研究 被引量:25
1
作者 岳文华 徐坤 +4 位作者 冯育林 张天 许琼明 杨世林 刘艳丽 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第22期3295-3301,共7页
目的探讨白头翁皂苷D体外抗肝癌作用及其相关机制。方法采用MTT法考察白头翁皂苷D对人肝癌细胞BEL-7402增殖的影响,同时观察BEL-7402细胞形态的变化,采用集落形成实验考察白头翁皂苷D对BEL-7402细胞集落形成的影响;Hoechest 33342染色观... 目的探讨白头翁皂苷D体外抗肝癌作用及其相关机制。方法采用MTT法考察白头翁皂苷D对人肝癌细胞BEL-7402增殖的影响,同时观察BEL-7402细胞形态的变化,采用集落形成实验考察白头翁皂苷D对BEL-7402细胞集落形成的影响;Hoechest 33342染色观察BEL-7402细胞凋亡的形态变化;流式细胞术检测BEL-7402细胞凋亡率和线粒体膜电位的变化;采用Western blotting法检测BEL-7402细胞Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达。结果 MTT结果显示白头翁皂苷D对BEL-7402细胞增殖有抑制作用;集落形成实验结果显示白头翁皂苷D能明显抑制BEL-7402细胞集落的形成,白头翁皂苷D(25.00μg/m L)能显著诱导BEL-7402细胞凋亡;白头翁皂苷D(18.75、25.00μg/m L)能显著降低BEL-7402细胞线粒体膜电位;白头翁皂苷D(12.50、18.75、25.00μg/m L)可显著上调BEL-7402细胞中Caspase-3的表达;白头翁皂苷D(25.00μg/m L)可显著下调Bcl-2的表达。结论白头翁皂苷D有良好的体外抗肝癌作用,其机制与调节线粒体途径凋亡相关蛋白Bcl-2、Caspase-3的表达有关。 展开更多
关键词 抗肿瘤 肝癌 细胞凋亡 线粒体途径
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白头翁皂苷D对人乳腺癌MCF-7细胞中Wnt/β-链蛋白信号通路的影响 被引量:13
2
作者 冯晓灵 刘丹 《东南大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2017年第3期379-383,共5页
目的:研究白头翁皂苷D对人乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制效应及其机制。方法:不同浓度的白头翁皂苷D作用于人乳腺癌MCF-7细胞48 h后,CCK-8法检测细胞生存抑制率;Hoechst法检测细胞核凋亡变化;蛋白质印迹法检测MCF-7细胞内Wnt/β-链蛋白信... 目的:研究白头翁皂苷D对人乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制效应及其机制。方法:不同浓度的白头翁皂苷D作用于人乳腺癌MCF-7细胞48 h后,CCK-8法检测细胞生存抑制率;Hoechst法检测细胞核凋亡变化;蛋白质印迹法检测MCF-7细胞内Wnt/β-链蛋白信号蛋白及下游组件蛋白Cyclin D1和c-Myc的表达情况。结果:CCK-8法检测显示白头翁皂苷D可以抑制MCF-7细胞的增殖能力,细胞的生存抑制率呈药物浓度依赖性;Hoechst染色可见部分细胞核的形态发生改变,产生细胞核碎片,核发白等变化;与对照组比较,随着白头翁皂苷D浓度的增加,MCF-7细胞中β-链蛋白的蛋白表达量呈减少趋势;50 nmol·ml^(-1)的白头翁皂苷D诱导组细胞中Cyclin D1及c-Myc的蛋白表达量也明显减少(P<0.05)。结论:白头翁皂苷D可有效抑制人乳腺癌MCF-7细胞的增殖,其机制可能与抑制Wnt/β-链蛋白信号通路的激活,并抑制其下游蛋白Cyclin D1和c-Myc的表达有关。 展开更多
关键词 白头翁皂苷D MCF-7 Wnt/β-链蛋白信号通路
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白头翁及其皂苷对鸡免疫功能的影响 被引量:10
3
作者 时维静 李立顺 胡瑞昌 《中国兽药杂志》 2009年第7期13-15,共3页
为考察白头翁及白头翁皂苷对鸡免疫功能的影响,将AA肉鸡于15日龄添加白头翁及白头翁皂苷饮水,以黄芪组为阳性对照、未加药为阴性对照。通过测定免疫器官增重、白细胞吞噬率与吞噬指数等,考察白头翁及白头翁皂苷对鸡免疫功能的影响。结... 为考察白头翁及白头翁皂苷对鸡免疫功能的影响,将AA肉鸡于15日龄添加白头翁及白头翁皂苷饮水,以黄芪组为阳性对照、未加药为阴性对照。通过测定免疫器官增重、白细胞吞噬率与吞噬指数等,考察白头翁及白头翁皂苷对鸡免疫功能的影响。结果表明:白头翁及其皂苷组比对照组在体重和免疫指数方面有明显的优越性,尤其在中性细胞吞噬白色葡萄球菌方面与对照组有极显著差异(P<0.01)。白头翁及白头翁皂苷对鸡免疫有一定的促进作用,试验为白头翁生产应用提供了参考数据。 展开更多
关键词 白头翁 白头翁皂苷 免疫器官指数 白细胞吞噬
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白头翁皂苷调控RA模型大鼠FLS SFRP2表达 被引量:10
4
作者 缪成贵 杨剑婷 +4 位作者 何华奇 马世堂 周国梁 高敏 刘健 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1977-1981,共5页
目的:研究中药白头翁主要活性成分白头翁皂苷(pulchinenoside,PULC)对类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)模型大鼠成纤维细胞样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)SFRP2表达的调控。方法:采用大鼠关节炎评分法和足爪肿... 目的:研究中药白头翁主要活性成分白头翁皂苷(pulchinenoside,PULC)对类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)模型大鼠成纤维细胞样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)SFRP2表达的调控。方法:采用大鼠关节炎评分法和足爪肿胀评分法评价PULC对RA模型大鼠的治疗作用,MTT法检测PULC灌胃治疗后对FLS增殖抑制作用。RT-PCR,Westernblotting检测PULC灌胃治疗对FLS SFRP2基因表达的调控作用,对Wnt通路关键基因β-catenin,Wnt通路下游效应基因C-myc的调控作用。结果:RA模型大鼠FLS中SFRP2基因表达明显下调,经PULC灌胃治疗后,RA模型大鼠FLS中SFRP2表达上调,β-catenin和C-myc基因表达明显下调。结论:PULC通过对Wnt通路的调控抑制RA模型大鼠滑膜异常增殖。 展开更多
关键词 白头翁皂苷 类风湿性关节炎 SFRP2 WNT通路 Β-CATENIN C-MYC
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不同浓度白头翁皂苷对口腔鳞癌细胞增殖、迁移和钙蛋白酶1、E-cadherin、N-cadherin蛋白的影响 被引量:9
5
作者 潘炜娟 丁玲 《中国药师》 CAS 2018年第6期984-988,共5页
目的:探究白头翁皂苷对口腔鳞癌细胞增殖、迁移及钙蛋白酶1(calpain1)表达的影响。方法:用0,1.0,2.0,4.0,8.0,12.0 mg·L^(-1)白头翁皂苷处理人口腔鳞癌CAL27细胞。四甲基偶氮唑(MTT)法检测白头翁皂苷对CAL27细胞增殖的影响;细胞划... 目的:探究白头翁皂苷对口腔鳞癌细胞增殖、迁移及钙蛋白酶1(calpain1)表达的影响。方法:用0,1.0,2.0,4.0,8.0,12.0 mg·L^(-1)白头翁皂苷处理人口腔鳞癌CAL27细胞。四甲基偶氮唑(MTT)法检测白头翁皂苷对CAL27细胞增殖的影响;细胞划痕实验与Transwell实验检测白头翁皂苷对CAL27细胞迁移与侵袭能力的影响;蛋白质印迹(Western blot)技术检测CAL27细胞calpain1、E-cadherin、N-cadherin蛋白的表达变化。结果:与空白对照组比较,白头翁皂苷对CAL27细胞的增殖抑制率显著增加(P<0.05),且具有时间-剂量依赖关系。12.0 mg·L^(-1)白头翁皂苷处理48 h后CAL27细胞细胞形态从长梭形间质样变成鹅卵石状上皮样。随着白头翁皂苷处理浓度的增加,CAL27细胞迁移与侵袭能力逐渐减弱(P<0.05);CAL27细胞中calpain1、N-cadherin蛋白表达水平逐渐降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平逐渐升高(P>0.05)。结论:白头翁皂苷可抑制口腔鳞癌CAL27细胞增殖、迁移与侵袭过程,其机制可能与calpain1、N-cadherin表达下调、E-cadherin表达上调有关。 展开更多
关键词 白头翁皂苷 口腔鳞癌 增殖 迁移 钙蛋白酶1
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白头翁皂抑制佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞凋亡 被引量:8
6
作者 缪成贵 周国梁 +3 位作者 秦梅颂 陈建中 李成凤 何华奇 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期144-149,共6页
目的:研究白头翁皂苷(pulchinenoside,PULC)对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)凋亡的影响。方法:60只SD大鼠被随机分为正常对照组、AA组、PULC低剂量组(50 mg/kg)、PULC中... 目的:研究白头翁皂苷(pulchinenoside,PULC)对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)凋亡的影响。方法:60只SD大鼠被随机分为正常对照组、AA组、PULC低剂量组(50 mg/kg)、PULC中剂量组(100 mg/kg)、PULC高剂量组(150 mg/kg)、布洛芬8 mg/kg阳性药物组,每组10只。原代培养AA大鼠FLS,real time q PCR检测PULC灌胃治疗对AA大鼠FLS抗凋亡基因Bcl-2,促凋亡基因Bax和细胞凋亡因子caspase-3表达的调控作用;MTT检测PULC治疗对FLS增殖的影响;ELISA检测PULC对FLS的IL-6和IL-8表达的影响。结果:与AA组比较,各治疗组FLS中抗凋亡基因Bcl-2表达明显降低(均P<0.05),促凋亡基因Bax和细胞凋亡因子caspase-3表达显著升高(均P<0.05),AA大鼠FLS增殖活力明显降低(均P<0.05),IL-6和IL-8表达显著下降(均P<0.05)。结论:PULC可能通过促进FLS凋亡而抑制AA大鼠滑膜的异常增殖。 展开更多
关键词 白头翁皂苷 佐剂性性关节炎 Bcl-2 BAX caspase-3
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白头翁皂苷对佐剂性关节炎大鼠FZD8表达的影响 被引量:6
7
作者 缪成贵 周国梁 +4 位作者 秦梅颂 陈建中 李成凤 何华奇 张兵 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第20期4063-4067,共5页
研究中药白头翁有效成分白头翁皂苷(pulchinenoside,PULC)对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠Frizzled(FZD)表达的影响。采用足跖注射完全弗氏佐剂制备AA大鼠,原代培养AA大鼠滑膜成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes... 研究中药白头翁有效成分白头翁皂苷(pulchinenoside,PULC)对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠Frizzled(FZD)表达的影响。采用足跖注射完全弗氏佐剂制备AA大鼠,原代培养AA大鼠滑膜成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS),Real-time q PCR检测PULC灌胃治疗对AA大鼠FLS FZD8表达的影响,MTT,ELISA检测FZD8敲除对FLS增殖和IL-1,IL-6,IL-8表达的影响,Real-time q PCR检测miR-375在FZD8异常表达中的作用。检测发现经PULC灌胃治疗后,AA大鼠FLS中FZD8表达明显降低,FZD8敲除后FLS增殖明显减弱,IL-1,IL-6,IL-8表达明显减少,PULC灌胃治疗后miR-375表达明显升高,上调表达的miR-375能够抑制FZD8的表达。PULC可能通过上调miR-375表达抑制FZD8的表达。 展开更多
关键词 白头翁皂苷 佐剂性性关节炎 成纤维样滑膜细胞 FZD8 miR-375
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白头翁皂苷D抗肿瘤的研究进展 被引量:5
8
作者 孙善美 宋鲁成 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2017年第12期1143-1146,共4页
白头翁皂苷D是白头翁众多有效单体成分中在抗肿瘤方面研究最广泛、效价最高的单体,是近年来抗肿瘤药物研究的热点之一。白头翁皂苷D通过抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡、抑制能量代谢、调节自噬以及抑制肿瘤细胞迁移和转移等方面... 白头翁皂苷D是白头翁众多有效单体成分中在抗肿瘤方面研究最广泛、效价最高的单体,是近年来抗肿瘤药物研究的热点之一。白头翁皂苷D通过抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡、抑制能量代谢、调节自噬以及抑制肿瘤细胞迁移和转移等方面抑制肿瘤生存,现就近年来白头翁皂苷D抗肿瘤方面的相关研究进行综述。 展开更多
关键词 肿瘤 白头翁皂苷D 细胞凋亡 细胞自噬
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白头翁皂苷H3糖苷酶的分离纯化及酶性质 被引量:4
9
作者 林迪 金凤燮 鱼红闪 《大连工业大学学报》 CAS 北大核心 2015年第6期401-403,共3页
对Absidiasp.P39r所产白头翁皂苷H3糖苷酶进行了分离纯化,得到了电泳纯的酶蛋白,并对其性质做了进一步研究。结果表明,该酶分子质量约为40ku;最适反应温度为40℃,最适反应pH为5.0;在pH 4.0-7.0,温度低于40℃条件下具有相对稳定的酶活力... 对Absidiasp.P39r所产白头翁皂苷H3糖苷酶进行了分离纯化,得到了电泳纯的酶蛋白,并对其性质做了进一步研究。结果表明,该酶分子质量约为40ku;最适反应温度为40℃,最适反应pH为5.0;在pH 4.0-7.0,温度低于40℃条件下具有相对稳定的酶活力;金属离子Na+、K+、Mg2+对酶反应无显著影响,而Fe3+、Cu2+、Zn2+对其有较强的抑制作用;米氏常数为17.01mmol/L,最大反应速度为0.38mmol/(L·min)。 展开更多
关键词 白头翁皂苷 糖苷酶 酶性质
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一株生物转化白头翁皂苷真菌的筛选与鉴定 被引量:3
10
作者 周成 时维静 +3 位作者 肖新 谢越 汪建飞 马忠友 《安徽科技学院学报》 2016年第2期22-26,共5页
目的:筛选能够转化白头翁皂苷的真菌,并对该菌株进行分类鉴定。方法:将白头翁皂苷加入培养基中诱导真菌分泌白头翁皂苷糖苷酶,并通过薄层层析技术检测转化产物。再采用经典的形态学特征观察和现代的ITS-r DNA测序分子生物学分类技术相... 目的:筛选能够转化白头翁皂苷的真菌,并对该菌株进行分类鉴定。方法:将白头翁皂苷加入培养基中诱导真菌分泌白头翁皂苷糖苷酶,并通过薄层层析技术检测转化产物。再采用经典的形态学特征观察和现代的ITS-r DNA测序分子生物学分类技术相结合对真菌进行鉴定。结果:筛选出能够生物转化白头翁皂苷的RCEF4894菌株,该菌株被鉴定为棘孢曲霉Aspergillus aculeatus Iizuka。结论:棘孢曲霉RCEF4894菌株能够被诱导产生白头翁皂苷糖苷酶,将多糖基的白头翁皂苷水解成低糖基的皂苷。 展开更多
关键词 白头翁皂苷 生物转化 棘孢曲霉
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Determination of Pulchinenoside B4 in Compound Radix Pulsatillae Granule
11
作者 Zhang Ying Yang Limei +3 位作者 Xu Qianqian Wang Yanping Guo Shijin Shen Zhiqiang 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2016年第5期266-268,280,共4页
The determination method of pulchinenoside B4 in compound Radix Pulsatillae granule was established in the paper. The results laid a foundation for quality control of compound Radix Pulsatillae granule.
关键词 pulchinenoside B4 Compound Radix Pulsatillae Granule Quality control
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白头翁皂苷糖基水解Ⅱ型酶的分离纯化及酶性质 被引量:2
12
作者 代蕊 刘春莹 +2 位作者 徐龙权 林完泽 鱼红闪 《大连工业大学学报》 CAS 北大核心 2017年第4期245-249,共5页
对Absidiasp.P39r所产白头翁皂苷糖基水解Ⅱ型酶(PSGaseⅡ)进行分离纯化,得到电泳纯酶蛋白,对其酶学性质以及该酶对底物的催化反应过程进行了研究。结果表明,该酶蛋白的分子质量为56ku,最适反应pH为4.0,在pH 3.0~7.0酶活力稳定;最适反... 对Absidiasp.P39r所产白头翁皂苷糖基水解Ⅱ型酶(PSGaseⅡ)进行分离纯化,得到电泳纯酶蛋白,对其酶学性质以及该酶对底物的催化反应过程进行了研究。结果表明,该酶蛋白的分子质量为56ku,最适反应pH为4.0,在pH 3.0~7.0酶活力稳定;最适反应温度为40℃,在20~40℃酶活力稳定;金属离子Na^+、K^+、Mg^(2+)对酶反应无显著影响,而Fe^(3+)、Cu^(2+)、Zn^(2+)对其有较强的抑制作用。酶反应动力学参数K_m为19.60mmol/L,v_(max)为21.60mmol/(L·h)。PSGaseⅡ对白头翁皂苷PSⅠ的催化反应过程结果表明反应是分步进行的,PSGaseⅡ以白头翁皂苷PSⅠ为底物,先催化降解为中间产物白头翁皂苷PSⅡ,继续催化反应,最终生成白头翁皂苷A。 展开更多
关键词 白头翁皂苷 水解酶 酶性质
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正交试验优选肠腹宁颗粒中白头翁皂苷B_4的提取工艺 被引量:2
13
作者 赖岳晓 刘佩沂 田素英 《中国药房》 CAS CSCD 北大核心 2011年第15期1374-1375,共2页
目的:优选肠腹宁颗粒最佳提取工艺。方法:以浸泡时间、加水量、煎煮时间、煎煮次数为考察因素,以白头翁皂苷B4的含量为评价指标,用正交试验优选提取工艺。结果:提取工艺为浸泡45 min,加水15倍量,分2次煎煮,每次煎煮40 min。结论:优选得... 目的:优选肠腹宁颗粒最佳提取工艺。方法:以浸泡时间、加水量、煎煮时间、煎煮次数为考察因素,以白头翁皂苷B4的含量为评价指标,用正交试验优选提取工艺。结果:提取工艺为浸泡45 min,加水15倍量,分2次煎煮,每次煎煮40 min。结论:优选得到的工艺稳定、可行,重现性好。 展开更多
关键词 肠腹宁颗粒 白头翁皂苷 提取工艺
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微波辅助提取白头翁皂苷研究 被引量:2
14
作者 于爽 高剑 +1 位作者 郝婧玮 何婷婷 《湖北农业科学》 2016年第20期5348-5351,共4页
利用响应面法对白头翁(Pulsatilla chinensis)皂苷的微波提取条件进行了优化。在单因素试验基础上,利用Box-Behnken中心组合设计原理及响应面法分析并建立二次回归模型。以乙醇体积分数、微波功率、微波时间为考察因素,以白头翁皂苷提... 利用响应面法对白头翁(Pulsatilla chinensis)皂苷的微波提取条件进行了优化。在单因素试验基础上,利用Box-Behnken中心组合设计原理及响应面法分析并建立二次回归模型。以乙醇体积分数、微波功率、微波时间为考察因素,以白头翁皂苷提取率为响应值,研究了各因素对白头翁皂苷提取率的影响。确定最佳微波提取条件为乙醇体积分数50%、微波功率300 W、微波时间4 min,在此条件下,白头翁皂苷提取率达到5.33%。 展开更多
关键词 白头翁(Pulsatilla chinensis) 皂苷 微波辅助提取 响应面法
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白头翁皂苷影响RA模型大鼠FLS Me CP2表达
15
作者 缪成贵 周国梁 +3 位作者 秦梅颂 陈建中 李成凤 何华奇 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第23期4664-4668,共5页
研究中药白头翁主要活性成分白头翁皂苷(PULC)对类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)模型大鼠Me CP2表达的调控作用。采用佐剂性关节炎大鼠为RA模型,原代培养RA模型大鼠滑膜成纤维细胞样滑膜细胞(FLS),Real time q PCR,Western blo... 研究中药白头翁主要活性成分白头翁皂苷(PULC)对类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)模型大鼠Me CP2表达的调控作用。采用佐剂性关节炎大鼠为RA模型,原代培养RA模型大鼠滑膜成纤维细胞样滑膜细胞(FLS),Real time q PCR,Western blotting检测100 mg·kg-1PULC灌胃治疗对RA模型大鼠FLS Me CP2表达的调控作用,MTT检测PULC治疗对FLS增殖的影响,Me CP2 siRNA干扰RA模型大鼠FLS Me CP2表达后SFRP2,β-catenin表达的变化。检测发现经100mg·kg-1PULC灌胃治疗后,RA模型大鼠FLS中Me CP2表达明显降低,SFRP2表达升高,RA模型大鼠FLS增殖活力降低,Me CP2 siRNA抑制RA模型大鼠FLS Me CP2表达后,SFRP2表达明显上调,β-catenin表达明显降低。PULC可能通过抑制Me CP2表达上调SFRP2表达,抑制RA模型大鼠滑膜Wnt通路活性,抑制RA模型大鼠滑膜异常增殖。 展开更多
关键词 白头翁皂苷 类风湿性关节炎 ME CP2 SFRP2 WNT
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中药白头翁的甙类成分 被引量:17
16
作者 吴振洁 丁林生 赵守训 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第5期265-269,共5页
从中药白头翁的根中,分得5个甙类成分。根据化学反应和光谱分析,其中的4个分别被鉴定为:胡萝卜甙(Ⅰ),白头翁皂苷A_3(Ⅱ),3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-3β,23-二羟基-Δ^(20(29))-羽扇豆烯-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→... 从中药白头翁的根中,分得5个甙类成分。根据化学反应和光谱分析,其中的4个分别被鉴定为:胡萝卜甙(Ⅰ),白头翁皂苷A_3(Ⅱ),3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-3β,23-二羟基-Δ^(20(29))-羽扇豆烯-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖甙(Ⅲ)和白头翁皂苷B_4。其中Ⅲ是一个新的三萜皂甙,命名为白头翁皂甙B(Pulchinenoside B)。 展开更多
关键词 白头翁 甙类
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白头翁皂苷B4体外抑制人肝癌细胞HepG2增殖并诱导其凋亡 被引量:20
17
作者 王海侠 郑新勇 郜尽 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1481-1485,共5页
目的筛查中药白头翁抗肝癌有效成分,探索其抗癌机制。方法分离白头翁皂苷成分,以人肝癌细胞HepG2为作用靶细胞,MTT法测定其对细胞增殖的抑制,流式细胞术检测细胞周期阻滞,DNA片断化方法检测细胞凋亡情况,检测半胱氨酸蛋白酶3酶活性,从... 目的筛查中药白头翁抗肝癌有效成分,探索其抗癌机制。方法分离白头翁皂苷成分,以人肝癌细胞HepG2为作用靶细胞,MTT法测定其对细胞增殖的抑制,流式细胞术检测细胞周期阻滞,DNA片断化方法检测细胞凋亡情况,检测半胱氨酸蛋白酶3酶活性,从信号通路的角度探寻其诱导凋亡的机制。结果白头翁药材含量较高的成分白头翁皂苷B4对HepG2具有显著的抑制作用,最大抑制率达到71.5%;通过细胞周期分布分析,发现最多有83.2%的细胞被阻滞在G2期;用流式细胞仪研究其凋亡情况发现,在40 mg/mL药物浓度作用下,细胞凋亡与孵育时间呈现依赖关系,随着时间从0到48 h,初期凋亡比例从接近于零最高增长到14.3%,并且发生了DNA片段化;进一步研究发现,白头翁皂苷B4处理后的HepG2细胞半胱氨酸蛋白酶3活性显著升高。结论白头翁皂苷B4调控肝癌细胞周期,阻滞G2/M期更替,诱导细胞凋亡,是肝癌治疗的潜在候选分子,奠定了白头翁药材用于肝癌治疗的理论基础。 展开更多
关键词 白头翁皂苷B4 肝癌细胞 细胞周期阻滞 凋亡 流式细胞仪 半胱氨酸蛋白酶3
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RP-HPLC法测定白头翁汤中白头翁皂苷B4的含量 被引量:13
18
作者 曲龙妹 赵春杰 +2 位作者 李丹 郑啸 赵国涛 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期45-47,共3页
目的建立白头翁汤中白头翁皂苷B4含量测定的RP-HPLC法。方法采用HypersilC18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以乙腈-水(体积比28:72)为流动相,流速为1.0mL·min^-1,检测波长205nm,柱温30℃,进样量10μL。结果白头翁皂苷B... 目的建立白头翁汤中白头翁皂苷B4含量测定的RP-HPLC法。方法采用HypersilC18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以乙腈-水(体积比28:72)为流动相,流速为1.0mL·min^-1,检测波长205nm,柱温30℃,进样量10μL。结果白头翁皂苷B4质量浓度在0.1—1.5g·L^-1内线性关系良好(r=0.9998);平均加样回收率为103.1%,RSD为1.2%(n=9);重复性RSD为1.6%(n=5)。结论该方法简便、快速、准确、重现性好,为白头翁汤及其新剂型改进提供了一种质量控制方法。 展开更多
关键词 反相高效液相色谱法 白头翁汤 白头翁皂苷B4
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UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS分析白头翁皂苷B_3在大鼠肠道菌群中的代谢产物 被引量:12
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作者 刘亚丽 宋永贵 +4 位作者 魏韶锋 张凌 杨世林 王萌 苏丹 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第23期72-76,共5页
目的:研究大鼠肠道菌群对白头翁皂苷B_3的代谢作用,为皂苷类物质在肠道菌群的代谢特征研究提供参考。方法:以连翘苷为内标物,建立UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS检测条件,流动相乙腈(A)-水(B)梯度洗脱(0~8 min,10%~95%A;8~10 min,95%A;10~10.10 m... 目的:研究大鼠肠道菌群对白头翁皂苷B_3的代谢作用,为皂苷类物质在肠道菌群的代谢特征研究提供参考。方法:以连翘苷为内标物,建立UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS检测条件,流动相乙腈(A)-水(B)梯度洗脱(0~8 min,10%~95%A;8~10 min,95%A;10~10.10 min,95%~10%A),流速0.3 m L·min^(-1),扫描方式为电喷雾(ESI)负离子模式,离子喷雾电压-3 500 V,碰撞电压130 V,干燥气流量12 L·min^(-1),温度350℃,鞘气流量12 L·min^(-1),温度350℃,碎裂电压分别为20,35,50 V。总离子流全扫描的范围m/z 100~1 100。采用负离子和多反应离子监测模式分析白头翁皂苷B_3与大鼠肠道菌群共孵育后的代谢产物。结果:从药物-菌群孵育液中鉴定出白头翁皂苷B3的3-位侧链脱糖代谢产物及苷元母核上羟化、羧化和脱羧、甲基化和去甲基化代谢产物共8种。结论:大鼠肠道菌群在实验条件下能有效代谢白头翁皂苷B3,提示上述代谢产物是其生物活性成分。 展开更多
关键词 白头翁皂苷B3 肠道菌群 羟基化 连翘苷 白头翁
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基于Notch信号通路研究白头翁汤对溃疡性结肠炎小鼠肠黏液屏障的保护作用 被引量:8
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作者 刘伟 刘又前 +6 位作者 蒋翠花 张东建 方雨夕 龚旻 李寅庆 王甜甜 张健 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第16期5257-5266,共10页
目的探讨白头翁汤对葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)诱导的溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠肠黏液屏障的保护作用以及对Notch通路的影响。方法C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、美沙拉嗪(50 mg/kg)组和白头翁汤... 目的探讨白头翁汤对葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)诱导的溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠肠黏液屏障的保护作用以及对Notch通路的影响。方法C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、美沙拉嗪(50 mg/kg)组和白头翁汤低、高剂量(7.4、14.8 g/kg)组,对照组小鼠自由饮用纯净水,其余各组连续8 d自由饮用2.5%DSS溶液诱导UC模型,造模同时各给药组ig相应药物。每日记录小鼠体质量、粪便稠度以及血便情况;采用苏木素-伊红(HE)染色观察结肠组织病理变化;采用AB-PAS染色观察结肠组织黏蛋白2(mucin 2,MUC2)的分泌情况;ELISA法检测结肠组织中髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性及促炎因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和抗炎因子IL-10的含量;免疫组化法检测结肠组织Ki67的表达情况;免疫荧光法测定结肠组织富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体5(leucine-rich repeat-containing G-protein-coupled receptor 5,Lgr5^(+))肠道干细胞(intestinal stem cells,ISCs)阳性细胞数;Western blotting测定结肠组织Notch-1、Atoh1、Hes1和MUC2蛋白表达。结果与模型组比较,白头翁汤能够缓解DSS诱导的UC小鼠体质量降低和疾病活动指数(disease activity index,DAI)升高(P<0.05、0.01、0.001),缓解结肠组织的缩短、水肿以及病理学损伤(P<0.01、0.001),减少炎性细胞浸润、隐窝的破坏与杯状细胞的丢失,降低结肠组织MPO活性和IL-1β、TNF-α水平(P<0.05、0.01),升高IL-10水平(P<0.05),增加结肠组织Ki67阳性细胞数(P<0.01),促进MUC2的分泌和Lgr5^(+)ISCs的阳性细胞数,并下调Notch和Hes-1蛋白表达水平(P<0.05、0.001),上调Atoh1和MUC2蛋白表达水平(P<0.05、0.01)。结论白头翁汤能够降低UC小鼠结肠组织促炎细胞因子水平,增加Lgr5^(+)ISCs的增殖和分化,保护隐窝和杯状细胞结构,促进MUC-2分泌,其作用可能与调控Notch-1/Atoh1/Hes1通路密 展开更多
关键词 白头翁汤 溃疡性结肠炎 肠道干细胞 黏液屏障 Notch通路 白头翁皂苷B4 黄柏碱 小檗碱 表小檗碱 黄连碱 巴马汀 秦皮甲素 秦皮乙素
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