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猪圆环病毒2型疫苗研究进展 被引量：27
1
作者 欧阳海平 潘永飞 宋延华 《动物医学进展》 北大核心 2020年第1期98-103,共6页
猪圆环病毒2型(PCV2)感染后会导致断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)等"猪圆环病毒相关疾病"(PCVADs),给全球养猪业造成了巨大的经济损失。疫苗免疫是防控该病的有效手段,近年来市场上推出了PCV2灭活疫苗、嵌合疫苗和亚单位疫苗... 猪圆环病毒2型(PCV2)感染后会导致断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)等"猪圆环病毒相关疾病"(PCVADs),给全球养猪业造成了巨大的经济损失。疫苗免疫是防控该病的有效手段,近年来市场上推出了PCV2灭活疫苗、嵌合疫苗和亚单位疫苗。PCV2变异较快,主要临床流行毒株从PCV2b逐渐演变为PCV2d,现有商业化疫苗免疫效果需进一步研究证实。论文就近年来国内外PCV2传统疫苗、新型基因工程疫苗、PCV2疫苗与其他疫苗联合免疫的研究进展进行综述,旨在为猪圆环病毒相关疾病的防控及疫苗的开发与利用提供参考。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 疫苗 研究
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猪圆环病毒2型灭活疫苗的制备与免疫效力研究 被引量：25
2
作者 董信田 李玉峰 +3 位作者 姜平 王先炜 冯志新 俞俐莉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期639-644,共6页
猪圆环病毒2型(PCV2)经0.2%甲醛37℃作用一定时间后接种PK-15细胞,盲传3代,用PCR方法检测灭活效果。将灭活的PCV2加入适量的白油和氢氧化铝胶制成PCV2油佐剂和铝胶佐剂灭活疫苗,免疫小鼠,共免疫2次,时间间隔为3周,分别于一免后第21天和... 猪圆环病毒2型(PCV2)经0.2%甲醛37℃作用一定时间后接种PK-15细胞,盲传3代,用PCR方法检测灭活效果。将灭活的PCV2加入适量的白油和氢氧化铝胶制成PCV2油佐剂和铝胶佐剂灭活疫苗,免疫小鼠,共免疫2次,时间间隔为3周,分别于一免后第21天和二免后第14天进行ELISA抗体检测。同时为了评价国产油佐剂和进口油佐剂的免疫效果,笔者进行了猪体免疫效力试验。通过ELISA抗体、攻毒后临床表现及体温变化、剖解时的病理变化、平均日增重及病毒血症等指标对疫苗免疫效果进行评价。结果如下:①PCV2能被0.2%甲醛完全灭活,灭活时间为16 h。②PCV2油佐剂和铝胶佐剂灭活疫苗免疫小鼠后均能产生较好的免疫应答,并且油佐剂灭活疫苗免疫效果好于铝胶佐剂灭活疫苗。③猪体免疫效力试验表明,两种油苗均能产生较高水平的ELISA抗体。攻毒后,攻毒对照猪的体温高于免疫猪,空白对照猪体温正常。免疫猪及空白对照猪平均体重均升高,而攻毒对照猪平均体重有所降低,且两个免疫组和空白对照组之间平均日增重差异显著(P<0.05)。病毒血症检测及病毒DNA在组织中的分布检测表明两油苗均能够有效降低猪体的带毒。以上结果表明,PCV2灭活疫苗免疫小鼠和猪体后均能诱导机体产生免疫应答,并能够在一定程度上抵抗PCV2对猪体的感染。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 油佐剂 氢氧化铝佐剂 灭活苗
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猪圆环病毒2型分子流行病学及疫苗研究进展 被引量：20
3
作者 赵晨辰 王敏 +6 位作者 刘长辉 牟巍 马阿丽 马惠宇 张家旺 赵亚荣 王贵华 《中国兽药杂志》 北大核心 2015年第2期63-69,共7页
猪圆环病毒2型(PCV2)在世界范围内广泛分布,主要以PCV2a和PCV2b两种基因型为主,PCV2b亚型为当前流行基因型。现有商品化疫苗主要针对PCV2a型病毒,也可对PCV2b型病毒产生部分交叉保护,但不能显著控制PCV2b型病毒在猪群中的传播。除此之外... 猪圆环病毒2型(PCV2)在世界范围内广泛分布,主要以PCV2a和PCV2b两种基因型为主,PCV2b亚型为当前流行基因型。现有商品化疫苗主要针对PCV2a型病毒,也可对PCV2b型病毒产生部分交叉保护,但不能显著控制PCV2b型病毒在猪群中的传播。除此之外,由于已有的商品化疫苗以传统疫苗为主,存在种毒增殖难、疫苗生产周期长等缺点。因此,研发PCV2b新型疫苗可能成为未来PCV2疫苗研制的主要方向。对PCV2的分子流行病学及疫苗研究现状进行了综述,以期为PCV2疫苗的研究提供参考。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 分子流行病学 PCV2b 基因型 疫苗
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猪2型圆环病毒核酸疫苗免疫效应研究 被引量：13
4
作者 宋云峰 肖少波 +2 位作者 金梅林 张松林 陈焕春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1049-1054,共6页
PCR扩增PCV2 ORF2和BVP22基因。将ORF2基因克隆入真核表达载体pCDNA3.1(+),构建了pCORF2作为核酸疫苗免疫小白鼠。同时将具有蛋白转导功能的BVP22基因分别克隆到ORF2基因的上游和下游,使二者融合表达,命名为pCORF2BVP22和pCBVP22ORF2。... PCR扩增PCV2 ORF2和BVP22基因。将ORF2基因克隆入真核表达载体pCDNA3.1(+),构建了pCORF2作为核酸疫苗免疫小白鼠。同时将具有蛋白转导功能的BVP22基因分别克隆到ORF2基因的上游和下游,使二者融合表达,命名为pCORF2BVP22和pCBVP22ORF2。分4组肌肉免疫BALB/c小白鼠,分别注射pCD-NA3.1(+)、pCORF2、pCORF2BVP22和pCBVP22ORF2,共免疫2次,间隔2周,分别于首免后2周和二免后4周采血,ELISA法检测体液抗体。同时为在体外验证ORF2和BVP22基因的真核表达,将ORF2和BVP22基因分别克隆入pEGFP-N1载体,构建了pNORF2和pNBVP22,转染Hela细胞后在荧光显微镜下观察到了ORF2和BVP22在体外的瞬时高效表达。结果显示,通过两次免疫后,各疫苗组均产生了针对ORF2的体液抗体,同时证明BVP22可增强核酸疫苗的免疫效果,其中以BVP22在ORF2上游效果更好。本研究为防制猪2型圆环病毒感染提供了较为理想的侯选疫苗。 展开更多
关键词 猪2型圆环病毒ORF2 BVP22 蛋白转导 核酸疫苗
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猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫佐剂的比较试验 被引量：10
5
作者 刘长明 危艳武 +2 位作者 张超范 张朝霞 袁婧 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期690-693,共4页
以猪圆环病毒2型(PCV2)遗传标记毒株为毒种,经细胞培养传代,优化了病毒增殖条件,获得较高滴度的病毒培养物用于PCV2灭活疫苗的研制。为了比较不同免疫佐剂的效果,本试验对国产矿物质白油和铝胶两种佐剂以及赛比克公司提供的MONTANIDETMI... 以猪圆环病毒2型(PCV2)遗传标记毒株为毒种,经细胞培养传代,优化了病毒增殖条件,获得较高滴度的病毒培养物用于PCV2灭活疫苗的研制。为了比较不同免疫佐剂的效果,本试验对国产矿物质白油和铝胶两种佐剂以及赛比克公司提供的MONTANIDETMISA206、ISA15VG、IMS1315VG3种佐剂配制的灭活疫苗进行了猪体免疫试验。通过临床观察、血清抗体效价测定,确认ISA15VG佐剂配制的疫苗在增强免疫效果方面优于其它佐剂。按5种佐剂免疫效果排序为ISA15VG、IMS1315VG、铝胶、ISA206、国产白油。ISA15VG佐剂属于水包油剂型,可刺激接种动物产生快速免疫应答反应,抗体产生效价高、持续时间长,有可能成为新型PCV2灭活疫苗佐剂的候选。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 灭活疫苗 佐剂比较
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一例猪蓝耳病病毒、猪圆环病毒2型和猪链球菌血清2型混合感染的诊断及防控 被引量：10
6
作者 陈晓雨 于学祥 +3 位作者 孙琪 库旭钢 范盛先 何启盖 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第6期55-59,146,共6页
2019年11月底湖北某商品猪场育肥猪只出现咳嗽、喘气、呼吸困难等症状,为了查找病因、控制疫情、减少损失,采用流行病学调查、临床检查、病理剖检和实验室检测方法进行综合诊断,并根据诊断结果及猪场具体问题提出了防控建议。结果表明:... 2019年11月底湖北某商品猪场育肥猪只出现咳嗽、喘气、呼吸困难等症状,为了查找病因、控制疫情、减少损失,采用流行病学调查、临床检查、病理剖检和实验室检测方法进行综合诊断,并根据诊断结果及猪场具体问题提出了防控建议。结果表明:该猪场育肥猪感染了猪蓝耳病病毒NADC30-like毒株、猪圆环病毒2型,同时混合感染了血清2型猪链球菌,分离菌对头孢类药物(头孢曲松、头孢喹肟、头孢他啶)、大观霉素及氨苄西林高敏,通过实施综合防控措施后病情得到了有效控制。说明该猪场育肥猪只发病的主要原因为猪蓝耳病病毒NADC30-like毒株和猪圆环病毒2型及猪链球菌血清2型混合感染,应加强防控。 展开更多
关键词 猪呼吸道疾病综合征 猪蓝耳病 猪圆环病毒2型 育肥猪 混合感染 疫苗 防控
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猪圆环病毒2型疫苗研究进展 被引量：10
7
作者 王宪文 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第4期252-255,共4页
猪圆环病毒2型(PCV2)有多个免疫学和毒力上重要的抗原表位,这些表位为疫苗和诊断制剂的设计提供了理论依据。近年来PCV2弱毒疫苗、灭活疫苗、亚单位疫苗、活载体疫苗和DNA疫苗等多种疫苗已取得新的研究进展和实际应用,且PCV2疫苗在种猪... 猪圆环病毒2型(PCV2)有多个免疫学和毒力上重要的抗原表位,这些表位为疫苗和诊断制剂的设计提供了理论依据。近年来PCV2弱毒疫苗、灭活疫苗、亚单位疫苗、活载体疫苗和DNA疫苗等多种疫苗已取得新的研究进展和实际应用,且PCV2疫苗在种猪和仔猪中的应用效果良好。此外,羧甲基新茯苓多糖、谷氨酸、精氨酸和硒等免疫增强剂及营养物质均有助于提高PCV2感染动物的机体免疫力。为更好地防控猪圆环病毒病,作者对PCV2疫苗相关研究进行综述。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 表位 疫苗
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猪圆环病毒2型疫苗研究进展 被引量：9
8
作者 徐磊 宁蓬勃 +3 位作者 郭抗抗 董平 董福军 张彦明 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第10期64-70,共7页
猪圆环病毒2型(PCV-2)是一种猪疾病综合征的病原体,这种疾病综合征在欧洲被称为猪圆环病毒病(PCVD),在美国被称为猪圆环病毒相关疾病(PCVAD),可导致巨大的经济损失。基于PCV-2a的灭活疫苗和亚单位疫苗在市场上已有销售,这些疫苗为降低... 猪圆环病毒2型(PCV-2)是一种猪疾病综合征的病原体,这种疾病综合征在欧洲被称为猪圆环病毒病(PCVD),在美国被称为猪圆环病毒相关疾病(PCVAD),可导致巨大的经济损失。基于PCV-2a的灭活疫苗和亚单位疫苗在市场上已有销售,这些疫苗为降低商品化猪群的死亡率、增加其生长指数提供了有力的技术支持。从2003年开始,伴随着临床症状的加剧,全球猪群中PCV-2流行亚型逐渐由PCV-2a变成PCV-2b。虽然现在市售的基于PCV-2a的疫苗可以提供对PCV-2b的交叉保护,但已研制出了基于PCV-2b的新型实验性疫苗,比如改良减毒活疫苗,这些新型疫苗可以提供更高的保护力,降低免疫成本。论文主要介绍现在市面上销售的PCV-2疫苗在实验和田间条件下的免疫效果,并对新型PCV-2疫苗的研究进行了展望。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 商品化PCV-2疫苗 实验性PCV-2疫苗
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猪圆环病毒2型疫苗研究进展 被引量：6
9
作者 黄红亮 邵定勇 +1 位作者 罗满林 陈瑞爱 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第2期90-95,共6页
猪圆环病毒2型(PCV-2)感染是一种新发现的猪传染病,以5周龄～12周龄仔猪高发病率、高死亡率及导致机体淋巴系统损伤与免疫缺陷为主要特征。PCV-2感染在世界各养猪国家广泛流行,给各国养猪业造成了巨大的经济损失。PCV-2疫苗研究已成为... 猪圆环病毒2型(PCV-2)感染是一种新发现的猪传染病,以5周龄～12周龄仔猪高发病率、高死亡率及导致机体淋巴系统损伤与免疫缺陷为主要特征。PCV-2感染在世界各养猪国家广泛流行,给各国养猪业造成了巨大的经济损失。PCV-2疫苗研究已成为国内外学者的研究焦点。迄今为止,西欧与美国已有PCV-2疫苗注册上市,主要为灭活疫苗与亚单位疫苗。由于灭活疫苗与亚单位疫苗成本高,且注射次数多,容易造成机体应激,因此,弱毒疫苗、活载体疫苗及核酸疫苗等新型疫苗是目前研究的重点,并取得了长足的进展。论文主要概述了PCV-2疫苗研究的最新进展,以期为PCV-2疫苗研究提供一定的参考资料。 展开更多
关键词 猪圆环病毒 2型 疫苗 种类
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猪圆环病毒2型疫苗免疫对母猪繁殖性能及仔猪母源抗体水平的影响 被引量：6
10
作者 张毅 李郁 +2 位作者 刘文 孙裴 魏建忠 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第11期27-30,共4页
为了解接种猪圆环病毒2型(PCV-2)疫苗对母猪繁殖性能及其仔猪母源抗体水平的影响,通过对合肥某猪场640头母猪的PCV-2疫苗免疫,统计其免疫前与免疫后各1年的繁殖性能数据,并分析其繁殖性能的差异,同时采用ELISA和PCR方法检测4头免疫母猪... 为了解接种猪圆环病毒2型(PCV-2)疫苗对母猪繁殖性能及其仔猪母源抗体水平的影响,通过对合肥某猪场640头母猪的PCV-2疫苗免疫,统计其免疫前与免疫后各1年的繁殖性能数据,并分析其繁殖性能的差异,同时采用ELISA和PCR方法检测4头免疫母猪所产仔猪不同日龄血清中PCV-2抗体及其核酸。母猪PCV-2疫苗免疫后与免疫前的繁殖性能进行比较显示,窝产仔数和窝产活仔数分别增加0.36头和0.43头,差异极显著(P<0.01);窝产弱仔数减少0.11头,差异显著(P<0.05);仔猪吮初乳后10日龄时抗体水平高于其他检测日龄,至30日龄时迅速下降,之后随着日龄增长母源抗体逐渐下降,各组试验仔猪均未检测到PCV-2核酸。表明母猪接种PCV-2疫苗能显著提高母猪的繁殖性能,并能降低所产仔猪的PCV-2感染,仔猪20日龄左右首免PCV-2疫苗最佳。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 疫苗 繁殖性能 母源抗体
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猪Ⅱ型圆环病毒ORF2截短基因的表达纯化及动物免疫试验 被引量：6
11
作者 林彦星 刘镇明 +4 位作者 黄毓茂 罗满林 贺东生 鲁俊鹏 杨丽梅 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期354-358,共5页
在最佳诱导条件下获得猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)重组Cap蛋白,表达产物经可溶性分析表明该重组蛋白主要以包涵体形式存在。大量诱导表达重组Cap蛋白,利用His Bind蛋白质纯化试剂盒对表达产物进行纯化,通过Western blotting检测证明表达产物... 在最佳诱导条件下获得猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)重组Cap蛋白,表达产物经可溶性分析表明该重组蛋白主要以包涵体形式存在。大量诱导表达重组Cap蛋白,利用His Bind蛋白质纯化试剂盒对表达产物进行纯化,通过Western blotting检测证明表达产物具有良好的免疫原性。用该纯化的重组蛋白作为亚单位疫苗,与本实验室所构建保存的pcDNA3.1-ORF2分别免疫BALB/c小鼠,对亚单位疫苗和基因疫苗做了对比试验,为进一步研制PCV2基因工程苗奠定良好的基础。 展开更多
关键词 PCV2 亚单位疫苗 CAP蛋白
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猪圆环病毒2型疫苗的应用和研发进展
12
作者 王鹏 沈伟桢 周斌 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第4期139-146,共8页
猪圆环病毒2型(PCV2)是猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)的主要病原,感染后会导致猪淋巴系统功能衰竭和免疫抑制,严重危害养猪业的正常生产。近年来,PCV2疫苗的研发一直备受关注,相关研究已取得一定进展,已上市了多种疫苗,包括灭活疫苗、亚单... 猪圆环病毒2型(PCV2)是猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)的主要病原,感染后会导致猪淋巴系统功能衰竭和免疫抑制,严重危害养猪业的正常生产。近年来,PCV2疫苗的研发一直备受关注,相关研究已取得一定进展,已上市了多种疫苗,包括灭活疫苗、亚单位疫苗、嵌合疫苗和合成肽疫苗等。此外,研究人员还在疫苗的免疫机制和接种策略方面进行了深入探讨,为疫苗的研发和应用提供了重要的理论支持。然而,目前PCV2疫苗的研究仍面临着诸多挑战,如临床流行的主要毒株从PCV2b逐渐转变为PCV2d,疫苗安全性、长期免疫效果等,现有疫苗的免疫效果仍需进一步研究证实。本文对PCV2及其现有疫苗的生产现状、新型疫苗的研发进展、佐剂在疫苗中的应用、疫苗对不同基因型的保护能力等进行了综述,以期为我国有效防控PCVAD提供科学参考。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 疫苗 佐剂 保护力
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猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫效果试验 被引量：6
13
作者 王克才 段亚良 +6 位作者 王军 谷志大 杨国丽 郑洪玲 姚伟 王秀坤 赵鹏 《现代畜牧兽医》 2014年第9期31-36,共6页
本试验将10窝同期出生的共105头仔猪,随机分为试验组和对照组,试验组于14日龄、45日龄分别进行猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫,对照组不免疫。通过临床跟踪观测和定期采血进行猪圆环病毒2型ELISA抗体和PCR病毒核酸检测。结果表明,临床免疫... 本试验将10窝同期出生的共105头仔猪,随机分为试验组和对照组,试验组于14日龄、45日龄分别进行猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫,对照组不免疫。通过临床跟踪观测和定期采血进行猪圆环病毒2型ELISA抗体和PCR病毒核酸检测。结果表明,临床免疫猪群成活率及生长指标明显好于不免疫猪群;试验组及对照组病毒核酸阳性检出率和抗体阳性率差异不显著,且可同时检出圆环病毒核酸及抗体。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 灭活疫苗 免疫 效果
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PCV2 ORF2基因与猪IL-18基因共表达DNA疫苗的免疫原性 被引量：5
14
作者 王子馨 李坤 +4 位作者 刘金朋 崔保安 王淑娟 朱前磊 陈红英 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期532-537,共6页
为研制新型的PCV2基因疫苗,本研究将PCV2ORF2和猪IL-18基因插入真核表达质粒pIRES中,构建共表达capsid(Cap)蛋白和猪IL-18的质粒pIRES-OFR2/IL18和表达Cap蛋白的质粒pIRES-OFR2。将质粒pIRES-OFR2/IL18和pIRES-OFR2通过腿部肌肉多点注射... 为研制新型的PCV2基因疫苗,本研究将PCV2ORF2和猪IL-18基因插入真核表达质粒pIRES中,构建共表达capsid(Cap)蛋白和猪IL-18的质粒pIRES-OFR2/IL18和表达Cap蛋白的质粒pIRES-OFR2。将质粒pIRES-OFR2/IL18和pIRES-OFR2通过腿部肌肉多点注射8周龄昆明小鼠,间隔3周再免疫1次。加强免疫3周后用PCV2Wuzhi株进行攻毒。pIRES-OFR2/IL18免疫昆明小鼠后能促进外周血T淋巴细胞增殖和血清中特异性抗体水平的增加,能明显增强PCV2DNA疫苗对强毒的攻击保护,pIRES-ORF2/IL18免疫组要优于pIRES-ORF2免疫组及其它对照组,差异显著。表明猪IL-18基因与PCV2ORF2共表达可增强猪体对DNA疫苗的免疫应答,提高对PCV2强毒的抵抗力。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 ORF2基因 猪IL-18 DNA疫苗
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融合表达猪圆环病毒2型ORF1和ORF2基因真核质粒的构建及对小鼠的免疫原性 被引量：5
15
作者 史小红 徐志文 +4 位作者 郭万柱 朱玲 年阳阳 古峰 李凤琴 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1246-1251,1275,共7页
用PCR法扩增出猪圆环病毒2型的Rep蛋白基因(933bp)和Cap蛋白基因(705bp),将其定向克隆于真核表达载体pcDNA3.1(+)的多克隆位点上,构建真核表达质粒pcDNA-ORF1-ORF2。将构建好的重组质粒pcD-NA-ORF1-ORF2按100μg/只腿部肌肉注射BALB/c... 用PCR法扩增出猪圆环病毒2型的Rep蛋白基因(933bp)和Cap蛋白基因(705bp),将其定向克隆于真核表达载体pcDNA3.1(+)的多克隆位点上,构建真核表达质粒pcDNA-ORF1-ORF2。将构建好的重组质粒pcD-NA-ORF1-ORF2按100μg/只腿部肌肉注射BALB/c小白鼠,同时设pcDNA-ORF1、pcDNA-ORF2、pcDNA3.1-(+)、PCV2全毒疫苗和PBS为对照,共免疫2次,间隔2周。分别于首免后第0、7、14、21、28、42天用MTT法检测小鼠脾淋巴细胞的增殖效应,用ELISA法检测小鼠的抗体水平;并于首免后第0、7、14、21、28天测定脾淋巴细胞中各细胞亚群的比例,对该核酸疫苗的免疫原性进行初步评价。结果显示,重组质粒能诱导鼠体产生较强的细胞免疫和体液免疫,并从免疫后第7天起所测各组数据均显著高于(P<0.05)或极显著高于(P<0.01)其他试验组。结果表明,将ORF1和ORF2基因共同用于PCV2核酸疫苗的研发具有很好的前景,为研究新型猪圆环病毒疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 ORF1基因 ORF2基因 核酸疫苗
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猪圆环病毒2型Cap蛋白核定位序列对其在毕赤酵母中表达的影响 被引量：5
16
作者 侯成才 何庆东 +2 位作者 王丽敏 王先炜 姜平 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期563-568,共6页
为了研究猪圆环病毒2型(PCV2)Cap基因中核定位序列(NLS)对Cap蛋白免疫特性的影响,以酵母偏嗜密码子优化的Cap基因为模板,采用PCR方法分别构建包含完整的和删除NLS的Cap基因的重组酵母载体,并转化至GS115宿主菌,经筛选获得GS115-pPIC9K-C... 为了研究猪圆环病毒2型(PCV2)Cap基因中核定位序列(NLS)对Cap蛋白免疫特性的影响,以酵母偏嗜密码子优化的Cap基因为模板,采用PCR方法分别构建包含完整的和删除NLS的Cap基因的重组酵母载体,并转化至GS115宿主菌,经筛选获得GS115-pPIC9K-Capo和GS115-pPIC9K-CapoΔNLS重组菌株。SDS-PAGE和Western-blot结果显示,表达产物Capo和CapoΔNLS均具有Cap蛋白的抗原性,大小分别约为43ku和27ku。电镜观察结果显示,仅Capo可以形成病毒样颗粒。小鼠免疫试验结果显示,CapoΔNLS和Capo诱导的ELISA抗体水平相似,但CapoΔNLS免疫组中和抗体水平明显低于Capo组(P<0.05)。结果表明,Cap NLS对其在酵母中表达产物病毒样颗粒的形成及中和抗原特性有重要影响,从而为PCV2酵母表达亚单位疫苗的研发奠定了基础。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 毕赤酵母 核定位序列 亚单位疫苗
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猪圆环病毒2型灭活疫苗效力检验中参考疫苗的应用 被引量：5
17
作者 彭伍平 王延辉 +5 位作者 胡东波 张方彪 姚亚丽 习向锋 乔荣岑 孙进忠 《中国兽药杂志》 2011年第2期9-12,共4页
制备了4批不同抗原含量的猪圆环病毒2型(PCV2)灭活疫苗,灭活前PCV2病毒含量分别为107.0、106.5、105.5和104.5TCID50/mL。对此4批PCV2灭活疫苗,利用本实验室建立的小白鼠效力检验标准进行效力检验,即以PCV2参考疫苗作为对照品,测定待检... 制备了4批不同抗原含量的猪圆环病毒2型(PCV2)灭活疫苗,灭活前PCV2病毒含量分别为107.0、106.5、105.5和104.5TCID50/mL。对此4批PCV2灭活疫苗,利用本实验室建立的小白鼠效力检验标准进行效力检验,即以PCV2参考疫苗作为对照品,测定待检疫苗免疫小白鼠后血清中PCV2抗体效价的高低来判定疫苗效力。3次重复检测结果都显示灭活前病毒含量为107.0、106.5和105.5TCID50/mL批次的疫苗合格,而灭活前病毒含量为104.5TCID50/mL批次的疫苗不合格,这与猪体内的效力检验结果一致,表明建立的针对猪圆环病毒2型灭活疫苗的小白鼠效力检验方法具有良好的准确性和重复性。 展开更多
关键词 圆环病毒2型 灭活疫苗 效力检验 抗体检测 小白鼠
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国内外商品化猪圆环病毒2型疫苗分类及特点 被引量：5
18
作者 周波 苏小齐 +2 位作者 张永红 苏国兴 崔德凤 《中国兽药杂志》 2013年第10期62-65,共4页
介绍了11种商品化猪圆环病毒2型疫苗的种类、毒株组成、病毒含量及生产厂家,为了解该疫苗的商品化情况提供参考。
关键词 猪圆环病毒2型 商品化疫苗 分类 特点
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含CpG基序系列猪圆环病毒核酸疫苗的构建 被引量：2
19
作者 程凯慧 李俊 +2 位作者 于周 周顺 王金宝 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1055-1059,共5页
人工合成了系列含有1～24个长度不等、序列不同的CpG-ODN基序,经MluⅠ单酶切、连接后插入到已构建好的真核表达载体pVAX1-ORF2的骨架结构中。酶切及测序结果证实,所构建的系列载体正确,表明已经成功构建了系列含有CpG-ODN的表达ORF2编... 人工合成了系列含有1～24个长度不等、序列不同的CpG-ODN基序,经MluⅠ单酶切、连接后插入到已构建好的真核表达载体pVAX1-ORF2的骨架结构中。酶切及测序结果证实,所构建的系列载体正确,表明已经成功构建了系列含有CpG-ODN的表达ORF2编码蛋白的重组质粒pVAX1-ORF2-CpG,为进一步优化和筛选最佳猪圆环病毒核酸疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 系列CpG—ODN pVAX1-ORF2 核酸疫苗
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基于猪圆环病毒2型复制子的复制型表达载体的构建
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作者 蔡晓雪 李俊 +3 位作者 李章勋 杜红旭 曹立亭 马跃 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期2634-2643,共10页
DNA疫苗在动物体内表达抗原基因的水平是决定DNA疫苗免疫效果的关键,而提高DNA疫苗抗原基因表达水平的途径之一是利用可在动物细胞内复制的质粒作为载体。本研究利用pcDNA3.1构建了1个基于猪圆环病毒2(porcine circovirus 2,PCV2)复制... DNA疫苗在动物体内表达抗原基因的水平是决定DNA疫苗免疫效果的关键,而提高DNA疫苗抗原基因表达水平的途径之一是利用可在动物细胞内复制的质粒作为载体。本研究利用pcDNA3.1构建了1个基于猪圆环病毒2(porcine circovirus 2,PCV2)复制子的复制型DNA疫苗载体pCMVori,再将增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因分别克隆入pCMVori和对照质粒pcDNA3.1中,然后分别转染PK-15细胞,48 h后观察两组转染细胞EGFP表达情况后分别提取细胞质粒和RNA。利用Bcl I酶切前、后的质粒为模板通过定量PCR检测质粒的复制效率,并通过反转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测PCV2复制子的Rep基因转录产物。通过Image J软件分析两组转染细胞的平均荧光强度,并通过定量RT-PCR定量检测两组转染细胞的EGFP基因转录水平。结果显示,pCMVori在细胞内48 h的复制效率达到136%,RT-PCR结果证实Rep和Rep’均有转录。pCMVori-EGFP转染细胞的平均荧光强度比pcDNA3.1-EGFP的高39.14%,定量RT-PCR检测结果显示,前者的EGFP转录水平也比后者高40%。本研究结果表明,所构建的复制型DNA疫苗载体pCMVori可在真核细胞中独立复制,克隆的目的基因的表达水平也因此获得提升,为构建复制型DNA疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 DNA复制子 表达载体 猪圆环病毒2型 DNA疫苗
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