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没食子酸对猪胰α-淀粉酶和蛋白酶的抑制作用 被引量：11
1
作者 秦昱 邵元元 +3 位作者 熊硕 滕杰 丰金玉 肖文军 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第3期41-45,共5页
以没食子酸为材料,通过考察酶质量浓度、反应体系中底物和酶及没食子酸添加顺序、不同反应时间、不同没食子酸质量浓度对猪胰α-淀粉酶、蛋白酶的活性影响,研究没食子酸对两种酶的抑制作用。结果表明,在底物质量浓度为1g/100mL、体系添... 以没食子酸为材料,通过考察酶质量浓度、反应体系中底物和酶及没食子酸添加顺序、不同反应时间、不同没食子酸质量浓度对猪胰α-淀粉酶、蛋白酶的活性影响,研究没食子酸对两种酶的抑制作用。结果表明,在底物质量浓度为1g/100mL、体系添加顺序为酶液与抑制剂没食子酸溶液37℃预温5min后加入底物溶液的条件下,没食子酸抑制猪胰α-淀粉酶活性最优条件为:α-淀粉酶质量浓度0.64mg/mL,反应时间15min,没食子酸对α-淀粉酶的最大抑制率为95.52%;在体系添加顺序为酶液与抑制剂没食子酸溶液40℃预温5min后加入底物溶液的条件下,没食子酸抑制猪胰蛋白酶活性的最优条件为:胰蛋白酶质量浓度0.63mg/mL,反应时间30min,没食子酸对胰蛋白酶的最大抑制率为99.24%。没食子酸对两种酶的抑制效果均随没食子酸质量浓度的增大而增强。 展开更多
关键词 没食子酸 猪胰α-淀粉酶 猪胰蛋白酶 抑制作用
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重组牛胰蛋白酶抑制剂对小鼠急性肝损伤的保护作用 被引量：5
2
作者 杨莉莉 董文 +2 位作者 贺巾超 任秀宝 颜炜群 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期448-451,共4页
目的观察重组牛胰蛋白酶抑制剂(rBPTI)对小鼠急性肝损伤的保护作用。方法小鼠60只随机分成6组:正常对照组、模型组、rBPTI的3个剂量组(分别为3、6、12×104kIU·kg-1)、抑肽酶组(6×104kIU·kg-1)。每天腹腔注射给药,7... 目的观察重组牛胰蛋白酶抑制剂(rBPTI)对小鼠急性肝损伤的保护作用。方法小鼠60只随机分成6组:正常对照组、模型组、rBPTI的3个剂量组(分别为3、6、12×104kIU·kg-1)、抑肽酶组(6×104kIU·kg-1)。每天腹腔注射给药,7d后体外注射CCl4建立小鼠急性肝损伤模型。末次给药后眼眶取血测定小鼠血清ALT、AST活性,观察肝脏组织病理改变。结果各剂量rBPTI可不同程度降低小鼠血清ALT、AST活性,降低肝组织MDA含量,与模型组比较差异有统计学意义(P<0·05、P<0·01),同时不同程度减轻肝组织病理损伤。结论rBPTI对体外CCl4诱导的小鼠急性肝损伤具有保护作用,作用效果同天然BPTI相当。 展开更多
关键词 重组牛胰蛋白酶抑制剂 四氯化碳 急性肝损伤
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PHOⅠ信号肽在毕赤酵母中引导分泌表达天然N-端rBPTI 被引量：4
3
作者 杨莉莉 贺巾超 +5 位作者 马杰 范伟全 王建秋 魏传宇 颜浩为 颜炜群 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期830-832,共3页
目的:在毕赤酵母(Pichia pastoris)中分泌表达天然N-端rBPTI。方法:将PHOⅠ/bpti基因克隆到真核表达载体pPICZα,电转化毕赤酵母菌株X-33。结果:构建了含PHOⅠ/bpti基因的表达质粒,并在X-33中分泌表达rBPTI。用胰蛋白酶抑制实验筛选出表... 目的:在毕赤酵母(Pichia pastoris)中分泌表达天然N-端rBPTI。方法:将PHOⅠ/bpti基因克隆到真核表达载体pPICZα,电转化毕赤酵母菌株X-33。结果:构建了含PHOⅠ/bpti基因的表达质粒,并在X-33中分泌表达rBPTI。用胰蛋白酶抑制实验筛选出表达rBPTI的工程菌。表达上清经阳离子交换层析分离纯化为单一组份,SDS-PAGE显示相对分子质量为6 500。结论:PHOⅠ信号肽在毕赤酵母中成功地诱导分泌表达了具有正确N-端氨基酸序列的rBPTI。 展开更多
关键词 牛胰蛋白酶抑制剂 酸性磷酸酶信号肽 毕赤酵母
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重组牛胰蛋白酶抑制剂对大鼠急性胰腺炎的治疗作用 被引量：1
4
作者 杨莉莉 贺巾超 +2 位作者 董文 张馨木 颜炜群 《中国药师》 CAS 2008年第4期375-377,共3页
目的:观察重组牛胰蛋白酶抑制剂(rBPTI)对大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)的治疗作用。方法:取大鼠60只,随机分成6组:假手术组、模型组、rBPTI的3个剂量组、抑肽酶组。注射牛磺胆酸钠建立大鼠ANP模型,股静脉注射给药48h后,测定大鼠血清和组... 目的:观察重组牛胰蛋白酶抑制剂(rBPTI)对大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)的治疗作用。方法:取大鼠60只,随机分成6组:假手术组、模型组、rBPTI的3个剂量组、抑肽酶组。注射牛磺胆酸钠建立大鼠ANP模型,股静脉注射给药48h后,测定大鼠血清和组织淀粉酶和脂肪酶含量,观察胰腺组织病理变化。结果:rBPTI治疗组可明显降低血清和组织淀粉酶、脂肪酶的浓度,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),且使胰腺的病理变化减轻。结论:rBPTI对牛磺胆酸钠诱导大鼠ANP具有治疗作用,作用效果同天然BPTI相当。 展开更多
关键词 重组牛胰蛋白酶抑制剂 牛胆磺酸钠 急性坏死性胰腺炎 大鼠
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rhKD/APPvar毕赤酵母分泌表达质粒的构建及其重组蛋白的表达和纯化
5
作者 王心童 王虹蛟 +3 位作者 王强 孟威宏 颜炜群 任立群 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期529-533,共5页
目的:构建高效分泌表达重组人淀粉样蛋白前体Kunitz型蛋白酶抑制剂结构域变异体(rhKD/APPvar)的毕氏酵母工程菌,建立适合大规模发酵、纯化rhKD/APPvar的工艺。方法:利用已构建的rhKD/APP表达质粒,在其活性中心两侧设计2个酶切位点(ApaⅠ... 目的:构建高效分泌表达重组人淀粉样蛋白前体Kunitz型蛋白酶抑制剂结构域变异体(rhKD/APPvar)的毕氏酵母工程菌,建立适合大规模发酵、纯化rhKD/APPvar的工艺。方法:利用已构建的rhKD/APP表达质粒,在其活性中心两侧设计2个酶切位点(ApaⅠ和SacⅡ),实现人KD/APP活性中心RAM与BPTI活性中心KAR的替换,构建rhKD/APPvar表达质粒。将重组质粒转化到酵母菌X-33中,优化rhKD/APPvar表达最佳pH值,使rhKD/APPvar获得高效表达。利用阳离子交换树脂和超滤除盐对重组蛋白进行纯化。结果:酶切鉴定和测序分析显示成功构建了KD/APPvar-pPICZαC重组质粒。经电转化成功地将重组质粒转化至酵母菌X-33中。SDS-PAGE分析,甲醇诱导表达后在相对分子质量约6 700处出现蛋白条带,pH 6.0、甲醇诱导120h蛋白表达水平最高,经纯化获得纯度达95%的重组蛋白。结论:成功构建KD/APPvar-pPICZαC重组质粒,经毕赤酵母表达和纯化获得了rhKD/APPvar蛋白。 展开更多
关键词 毕赤酵母菌 重组KD APP变异体 牛胰蛋白酶抑制剂 淀粉样蛋白前体
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SPINK1基因突变与特发性慢性胰腺炎研究进展 被引量：4
6
作者 王伟 王剑 +2 位作者 廖专 叶舟 李兆申 《国际内科学杂志》 CAS 2008年第3期162-166,共5页
丝氨酸蛋白酶抑制剂KazalⅠ型(SPINK1)基因突变的致病机制复杂,众多学者对其在特发性慢性胰腺炎(ICP)中的作用和临床特点进行了深入研究,中日韩在该方面的初步结果与欧美国家有所不同,仍需进一步探讨。
关键词 丝氨酸蛋白酶抑制剂Kazal I型 特发性慢性胰腺炎 突变
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聚肌胞对急性胰腺炎大鼠血浆胰蛋白酶与α_2-巨球蛋白的影响及其治疗作用
7
作者 张建新 黄懋魁 伍福乐 《现代应用药学》 CSCD 1990年第3期1-4,共4页
本实验观察了聚肌胞对急性胰腺炎大鼠巨噬细胞功能状态以及血浆胰蛋白酶与a_2-巨球蛋白的影响。发现聚肌胞可明显增高急性胰腺炎大鼠的炭粒吞噬指数,使血浆胰蛋白酶活力降低,a_2巨球蛋白水平升高;并能减轻胰腺病变,降低死亡率,延长存活... 本实验观察了聚肌胞对急性胰腺炎大鼠巨噬细胞功能状态以及血浆胰蛋白酶与a_2-巨球蛋白的影响。发现聚肌胞可明显增高急性胰腺炎大鼠的炭粒吞噬指数,使血浆胰蛋白酶活力降低,a_2巨球蛋白水平升高;并能减轻胰腺病变,降低死亡率,延长存活时间。 展开更多
关键词 聚肌胞 胰腺炎 胰蛋白酶 Α2巨球蛋白
原文传递
环己烷中牛胰蛋白酶与正戊胺复合物的晶体结构
8
作者 巫广腾 黄其辰 +2 位作者 朱广宇 钱民协 唐有祺 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第9期1393-1398,共6页
丝氨酸蛋白酶是有机溶媒中研究酶促反应的主要对象之一 .其中的胰蛋白酶在生物体内有重要的作用 ,对其抑制剂如苯甲脒衍生物的研究可应用于治疗很多疾病 .在水溶液中包括正戊胺在内的开链脂肪胺类小分子对胰蛋白酶的抑制能力有限 ,不能... 丝氨酸蛋白酶是有机溶媒中研究酶促反应的主要对象之一 .其中的胰蛋白酶在生物体内有重要的作用 ,对其抑制剂如苯甲脒衍生物的研究可应用于治疗很多疾病 .在水溶液中包括正戊胺在内的开链脂肪胺类小分子对胰蛋白酶的抑制能力有限 ,不能生成复合物 .我们对浸泡在含有正戊胺的环己烷中的β 牛胰蛋白酶的晶体结构进行了测定 ,分辨率为 0 .2nm ,并与水相中同样处理的晶体作了比较 .结果表明 ,正戊胺于环己烷中和 β 牛胰蛋白酶有强结合作用 ,一个戊胺分子结合到酶活性中心 ;另一个结合在 β 牛胰蛋白酶的表面 ,与也被结合的硫酸根形成氢键 .此X射线蛋白质晶体结构分析提供了一个例子 ,在有机溶剂中可用弱抑制剂的探针小分子研究其和蛋白的结合情况 ,以及描绘蛋白质表面的结合位点 .这些研究可以为搜索弱抑制剂提供有用的结构信息 . 展开更多
关键词 环己烷 β牛胰蛋白酶 正戊胺 晶体结构 X射线蛋白质 有机溶剂 药物设计 抑制剂
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