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木豆叶提取物对人的类成骨细胞TE85成骨功能和体外破骨细胞分化的影响 被引量:27
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作者 郑元元 杨京 +1 位作者 陈迪华 孙兰 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期386-391,共6页
木豆素是从天然植物木豆叶中提取的单体化合物,结构类似乙烯雌酚。本文观察木豆素及4种木豆叶提取物总成分(32-1,35-1,35-2和35-3)对人的类成骨细胞HOS TE85成骨功能、间质矿化及体外破骨细胞分化的影响。以木豆叶提取物作用于细胞48 h... 木豆素是从天然植物木豆叶中提取的单体化合物,结构类似乙烯雌酚。本文观察木豆素及4种木豆叶提取物总成分(32-1,35-1,35-2和35-3)对人的类成骨细胞HOS TE85成骨功能、间质矿化及体外破骨细胞分化的影响。以木豆叶提取物作用于细胞48 h,观察细胞增殖、3H-脯氨酸掺入量及碱性磷酸酶活性;用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法观察体外破骨细胞形成;作用于细胞18 d,用茜素红染色法观察细胞间质矿化。结果表明,作用于细胞48 h后,木豆素可促进细胞增殖,在1×10-8g.mL-1时细胞数增加57.7%,3H-脯氨酸掺入量增加98.5%。35-1和35-3还可明显增加碱性磷酸酶活性。长时程作用后,32-1和35-3可明显增加成骨细胞间质矿化程度。木豆素(1×10-7g.mL-1)对破骨细胞形成有明显的抑制作用,抑制率为22.8%,32-1(1×10-7g.mL-1)的抑制率为37.9%。木豆素及木豆叶提取物都具有刺激成骨细胞骨形成、促进细胞间质矿化及抑制破骨细胞形成的活性,提示木豆素在骨细胞上有类雌激素样作用,具有抗骨质疏松新药的研究前景。 展开更多
关键词 木豆叶提取物 成骨细胞 破骨细胞 细胞增殖 碱性磷酸酶
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淫羊藿总黄酮对体外培养骨细胞功能的影响 被引量:24
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作者 张秀珍 韩峻峰 +1 位作者 杨黎娟 钱国锋 《中国新药与临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期602-606,共5页
目的 :观察淫羊藿总黄酮 (HEF)对体外培养成骨细胞以及破骨细胞功能的影响。方法 :分别用酶消化法和体外机械分离法获得新生SD大鼠成骨细胞、破骨细胞 ,在培养液中分别加入不同浓度的HEF ,观察成骨细胞的增殖功能、分化功能和矿化功能... 目的 :观察淫羊藿总黄酮 (HEF)对体外培养成骨细胞以及破骨细胞功能的影响。方法 :分别用酶消化法和体外机械分离法获得新生SD大鼠成骨细胞、破骨细胞 ,在培养液中分别加入不同浓度的HEF ,观察成骨细胞的增殖功能、分化功能和矿化功能。以抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察破骨细胞数目、形态 ,Image ProPlus图像软件分析骨片上骨吸收陷窝的数目和面积。结果 :增殖率测定HEF浓度为 10 - 4mol·L- 1时与对照组比较差异有非常显著意义 (P <0 .0 1) ;碱性磷酸酶活性浓度≥ 10 - 8mol·L- 1,差异有显著意义 ;矿化结节面积/孔HEF 10 - 10mol·L- 1组和 10 - 4mol·L- 1组与对照组相比均增加(P <0 .0 1)。骨片培养 3d ,吸收陷窝计数的结果显示 ,各浓度对破骨细胞吸收功能均有抑制作用 ,仅10 - 4mol·L- 1组有统计学意义 (P <0 .0 5 )。陷窝面积 10 - 10 mol·L- 1组和 10 - 4mol·L- 1组与对照组相比 ,均无显著意义 (P >0 .0 5 )。结论 :HEF可以通过影响成骨细胞增殖、分化、矿化促进骨形成 ;而在体外减少破骨细胞数目 ,减弱破骨细胞吸收功能。 展开更多
关键词 成骨细胞 破骨细胞 细胞 培养的 矿化 结节 淫半藿总黄酮
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小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)的培养及其在诱导破骨细胞中的应用 被引量:23
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作者 许丹 律颖 +4 位作者 朱小语 陈晓文 冯金秋 范爱琴 许雅君 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1355-1360,共6页
小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)是通过Abelson鼠白血病病毒诱导BALB/c小鼠产生肿瘤后得到的细胞株。RAW264.7细胞在医学研究中应用十分普遍:它是许多白血病相关研究模型的常用细胞株;在微生物学、免疫学等研究中也十分常用;同时... 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)是通过Abelson鼠白血病病毒诱导BALB/c小鼠产生肿瘤后得到的细胞株。RAW264.7细胞在医学研究中应用十分普遍:它是许多白血病相关研究模型的常用细胞株;在微生物学、免疫学等研究中也十分常用;同时也是小鼠源性破骨前体细胞,可通过特定细胞因子的诱导在体外获得成熟破骨细胞,因此也成为许多骨骼疾病研究的体外模型。但RAW264.7细胞形态和分化状态多变,在实际培养中较难把握,给科研工作带来了一定困难。科研工作者在RAW264.7细胞的培养方法、细胞的形态及分化状态等方面始终观点不一,对于用RAW264.7细胞在体外诱导获得破骨细胞的方法也有许多差别。本文结合文献资料及实践,探索了RAW264.7细胞的培养条件,冻存、复苏、传代方法,以及用核因子κB受体活化因子配基(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)诱导其成为成熟破骨细胞的技术关键;旨在总结RAW264.7细胞的培养及诱导其分化为破骨细胞的经验教训,探讨RAW264.7细胞的培养和在体外用RANKL诱导RAW264.7细胞分化为破骨细胞的方法、技巧,供广大科研工作者借鉴。 展开更多
关键词 RAW264.7 单核巨噬细胞 破骨细胞 RANKL 细胞分化
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降钙素对体外培养破骨细胞功能的影响 被引量:11
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作者 张秀珍 韩峻峰 钱国峰 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期158-160,共3页
目的 观察降钙素对体外培养破骨细胞功能以及成骨细胞的骨保护素 (OPG)、细胞核因子 κB受体活化因子配基 (RANKL)的表达的影响。方法 分别用酶消化法和机械分离获得新生SD大鼠成骨细胞、破骨细胞 ,在培养液中分别加入不同浓度的降钙... 目的 观察降钙素对体外培养破骨细胞功能以及成骨细胞的骨保护素 (OPG)、细胞核因子 κB受体活化因子配基 (RANKL)的表达的影响。方法 分别用酶消化法和机械分离获得新生SD大鼠成骨细胞、破骨细胞 ,在培养液中分别加入不同浓度的降钙素 ,以抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP)染色观察破骨细胞数目、形态 ,Image ProPlus图像软件分析骨片上骨吸收陷窝的数目和面积。用RT PCR方法观察成骨细胞OPG、RANKL的表达。结果 各组破骨细胞数目随着降钙素浓度增加而减少 (P <0 .0 5 )。骨片培养5天 ,吸收陷窝计数的结果显示 ,10 -14 mol/L以上浓度降钙素对破骨细胞吸收功能均有明显抑制作用 ,并呈剂量相关性。 10 -12 mol/L组陷窝面积为对照组的 49% (P <0 .0 1) ,10 -8mol/L组为对照组的 3 0 % (P <0 .0 1)。降钙素组破骨细胞OPGmRNA表达较对照组升高 ,RANKL降低 (均P <0 .0 5 )。结论 除了直接作用于破骨细胞外 ,降钙素还通过影响成骨细胞上OPG、RANKL的分泌间接调控破骨细胞功能 ,抑制骨吸收。 展开更多
关键词 降钙素 体外培养 破骨细胞 成骨细胞 细胞培养
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Bone metastases:When and how lung cancer interacts with bone 被引量:14
5
作者 Ilaria Roato 《World Journal of Clinical Oncology》 CAS 2014年第2期149-155,共7页
Bone metastasis is a common and debilitating consequence of lung cancer:30%-40% of patients with nonsmall cell lung cancer develop bone metastases during the course of their disease. Lung cancer cells find a favorable... Bone metastasis is a common and debilitating consequence of lung cancer:30%-40% of patients with nonsmall cell lung cancer develop bone metastases during the course of their disease. Lung cancer cells find a favorable soil in the bone microenvironment due to factors released by the bone matrix, the immune system cells, and the same cancer cells. Many aspects of the cross-talk among lung tumor cells, the immune system,and bone cells are not clear, but this review aims to summarize the recent findings in this field, with particular attention to studies conducted to identify biomarkers for early detection of lung cancer bone metastases. 展开更多
关键词 Lung cancer BONE METASTASES osteoclast T cell BONE MICROENVIRONMENT
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不同浓度葡萄糖对大鼠骨髓破骨细胞分化的影响 被引量:13
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作者 孙彦 李兴 朱亦崑 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2007年第4期239-242,共4页
目的观察不同浓度葡萄糖对大鼠骨髓破骨细胞(Osteoclasts OC)分化的影响,探讨糖尿病骨质疏松的发病机制。方法用M-CSF、RANKL诱导大鼠骨髓单个核细胞分化为OC,同时给予不同浓度的葡萄糖(0、5.5、15、25mmol/L)干预,通过观察抗酒石酸酸... 目的观察不同浓度葡萄糖对大鼠骨髓破骨细胞(Osteoclasts OC)分化的影响,探讨糖尿病骨质疏松的发病机制。方法用M-CSF、RANKL诱导大鼠骨髓单个核细胞分化为OC,同时给予不同浓度的葡萄糖(0、5.5、15、25mmol/L)干预,通过观察抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色阳性OC数、TRAP活性测定、OC膜表面RANK mRNA表达量来分析葡萄糖对破骨细胞分化的影响。结果①高浓度葡萄糖组(25mmol/L)培养7d时TRAP染色阳性OC数及TRAP活性测定均高于对照(0mmol/L)组、葡萄糖5.5mmol/L组(P<0.01);与对照组比较高浓度葡萄糖组培养3d时TRAP染色阳性OC数明显增多(P<0.01)。②葡萄糖呈浓度依赖性上调OC膜表面RANK mRNA的表达,其中高浓度葡萄糖组培养的各时间点与其他3组比较差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论①高浓度葡萄糖可促进破骨细胞的分化,其促进作用始于诱导分化的早期。②骨髓微环境中高浓度葡萄糖可引起OC分化增多,可能是糖尿病骨质疏松的发病机制之一。 展开更多
关键词 葡萄糖 破骨细胞 细胞分化 糖尿病骨质疏松
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重组人骨保护素与重组核因子κb活化因子受体蛋白对破骨前体细胞分化的影响 被引量:13
7
作者 熊琦 张里程 +2 位作者 张立海 姚琦 唐佩福 《中国骨伤》 CAS 2013年第4期324-327,共4页
目的:对比重组人骨保护素(rhOPG-Fc)与重组核因子κb活化因子受体蛋白(rhRANK)对破骨前体细胞分化的影响。方法:采用成骨细胞与破骨前体细胞RAW264.7混合培养,在地塞米松、1,25(OH)2VitD3诱导下生成破骨细胞的方法。研究分3组:rhRANK组:... 目的:对比重组人骨保护素(rhOPG-Fc)与重组核因子κb活化因子受体蛋白(rhRANK)对破骨前体细胞分化的影响。方法:采用成骨细胞与破骨前体细胞RAW264.7混合培养,在地塞米松、1,25(OH)2VitD3诱导下生成破骨细胞的方法。研究分3组:rhRANK组:10-5g/L;rhOPG-Fc组:10-5g/L;空白对照组。作用9d后观察破骨细胞数目和形态,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色阳性细胞个数,骨磨片吸收陷窝计数。结果:在空白对照组,小鼠成骨细胞与破骨前体细胞RAW264.7混合培养6d后,开始出现多核细胞,9d时可见大量成熟多核细胞,经TRAP染色证实为成熟破骨细胞,而rhRANK组及rhOPG-Fc组TRAP染色阳性多核细胞数较对照组均减少,特别是rhRANK组减少更明显。骨片吸收陷窝计数显示rhRANK组及rhOPG-Fc组较对照组也明显减少,而相对来说,rhRANK组较rhOPG-Fc组更少。结论:rhOPG-Fc与rhRANK均可以有效抑制破骨前体细胞分化成为成熟破骨细胞,且rhRANK较rhOPG-Fc抑制效果更明显。 展开更多
关键词 骨保护素 核因子κb活化因子受体蛋白 破骨前体细胞 细胞分化
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双因子对体外培养大鼠破骨细胞的诱导作用 被引量:12
8
作者 王兴强 杨富生 葛前进 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2003年第11期628-631,T001,共5页
目的 :研究两种诱导因子复合作用对大鼠破骨细胞体外形成的影响。方法 :采用大鼠脾细胞和骨细胞联合培养 ,实验组分别加入 1,2 5(OH) 2 D3 +M -CSF、1,2 5(OH) 2 D3 +PTH、1,2 5(OH ) 2 D3 +PGE2 、1,2 5(OH ) 2 D3 +IL -1β ,并设 1,2 ... 目的 :研究两种诱导因子复合作用对大鼠破骨细胞体外形成的影响。方法 :采用大鼠脾细胞和骨细胞联合培养 ,实验组分别加入 1,2 5(OH) 2 D3 +M -CSF、1,2 5(OH) 2 D3 +PTH、1,2 5(OH ) 2 D3 +PGE2 、1,2 5(OH ) 2 D3 +IL -1β ,并设 1,2 5(OH) 2 D3 单因子对照组和空白对照组 ,采用TRAP染色、扫描电镜等方法观察破骨细胞形成情况。结果 :第 5d实验组单核细胞出现融合趋势 ,TRAP染色阳性 ,以 1,2 5(OH) 2 D3 +M -CSF和 1,2 5(OH) 2 D3 +PTH组破骨细胞形成数量最多。结论 :双因子联用诱导体外大鼠破骨细胞形成的作用优于单因子。 展开更多
关键词 破骨细胞 细胞培养 1 25(OH)2D3 巨噬细胞集落刺激因子 甲状旁腺激素 前列腺素 白细胞介素
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丹参素抑制RANKL诱导的破骨细胞分化 被引量:12
9
作者 沙鑫 李锋 +3 位作者 吴太林 马文瑞 李寰 陶惠人 《现代生物医学进展》 CAS 2015年第36期7017-7020,共4页
目的:研究丹参素对RANKL诱导的破骨细胞分化的影响。方法:运用冲洗法从股骨、胫骨中获得小鼠骨髓源性单核巨噬细胞用于体外RANKL诱导的破骨细胞分化,同时,施加不同剂量的丹参素干预,经TRAP染色法在形态学上观察观,蛋白印迹法检测蛋白水... 目的:研究丹参素对RANKL诱导的破骨细胞分化的影响。方法:运用冲洗法从股骨、胫骨中获得小鼠骨髓源性单核巨噬细胞用于体外RANKL诱导的破骨细胞分化,同时,施加不同剂量的丹参素干预,经TRAP染色法在形态学上观察观,蛋白印迹法检测蛋白水平的变化,实时定量PCR检测m RNA水平变化来研究丹参素对RANKL诱导的骨髓源单核巨噬细胞破骨分化的影响。结果:1不同剂量丹参素干预组与对照组相比,TRAP阳性破骨细胞数量得到了明显抑制(P<0.05)。2不同剂量丹参素干预组与对照组相比,磷酸化Akt的上调量被明显的降低。磷酸化p38 MAPK,JNK和ERK的变化则不明显。3不同剂量丹参素干预组与对照组相比,c-fos,TRAP,CTSK等参与破骨细胞分化的重要基因表达减少,NFATc1变化不明显。结论:丹参素通过下调磷酸化Akt水平的途径抑制了RANKL诱导的破骨细胞分化。 展开更多
关键词 丹参素 核激活因子κB受体 破骨细胞 细胞培养
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改良的成年大鼠骨髓源性破骨细胞诱导培养体系 被引量:8
10
作者 夏文芳 陈璐璐 曾天舒 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期534-536,F003,共4页
为在短时间内获得更多的破骨细胞 ,在近几年国内成年大鼠骨髓源性破骨样细胞培养的基础上加以改良 ,以建立一个简便、有效的诱导培养体系。收集 3月龄 SD大鼠股骨骨髓细胞悬液 ,置入含有 2 0 %胎牛血清、 1,2 5 (OH) 2Vit D3的培养液中... 为在短时间内获得更多的破骨细胞 ,在近几年国内成年大鼠骨髓源性破骨样细胞培养的基础上加以改良 ,以建立一个简便、有效的诱导培养体系。收集 3月龄 SD大鼠股骨骨髓细胞悬液 ,置入含有 2 0 %胎牛血清、 1,2 5 (OH) 2Vit D3的培养液中。将培养体系分为 4组 :A组为对照组 ,未加入粒细胞 /巨噬细胞集落刺激因子 (GM- CSF)和地塞米松 (Dexamethasone) ;B组加入 GM- CSF;C组加入 Dexamethasone;D组加入 GM- CSF和 Dexamethasone,观察各组破骨样细胞 (osteoclast- like cell,OL C)及骨陷窝形成情况 ,并计数比较。培养第 6 d,便可见所培养细胞衍变为形态不规则、有伪足形成的多核巨细胞 ,抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP)染色 (+) ,且具有骨吸收作用 ,符合破骨细胞的鉴定标准。 D组所形成 OL C及骨陷窝数目较其它 3组明显增多 (P<0 .0 1) ,且 OL C出现较早。结果表明 :成功地建立了一个以 1,2 5 (OH) 2 Vit D3、GM- CSF、Dexamethasone为诱导分化条件的培养体系。所获得破骨细胞数量多 ,特征明显 。 展开更多
关键词 骨髓 破骨细胞 细胞培养 粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 地塞米松
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淫羊藿苷通过Nrf2/HO-1/GPX4信号通路调节破骨细胞铁代谢的机制研究 被引量:9
11
作者 李倩楠 陈大琴 +6 位作者 吕春明 何翔 贺旭峰 杨莉莉 陈文君 丁佩军 张慧敏 《上海中医药大学学报》 CAS 2022年第S01期232-239,共8页
目的:观察淫羊藿苷对成熟破骨细胞铁代谢的影响,探讨其可能作用机制。方法:建立破骨细胞模型,随机分为对照组及低浓度淫羊藿苷组(0.1μmol/L)、中浓度淫羊藿苷组(1μmol/L)、高浓度淫羊藿苷组(10μmol/L),分组干预后,采用CCK-8测定各组... 目的:观察淫羊藿苷对成熟破骨细胞铁代谢的影响,探讨其可能作用机制。方法:建立破骨细胞模型,随机分为对照组及低浓度淫羊藿苷组(0.1μmol/L)、中浓度淫羊藿苷组(1μmol/L)、高浓度淫羊藿苷组(10μmol/L),分组干预后,采用CCK-8测定各组细胞的增殖能力后选择合适的药物浓度进行后续的实验,加入合适浓度淫羊藿苷-NAC(氧化剂)组,采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)特异性染色测定破骨细胞分化水平,采用ROS试剂盒及亚铁离子荧光探针检测破骨细胞中ROS、亚铁离子水平,采用谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)试剂盒检测破骨细胞内GSH、GSH-PX水平,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白免疫印迹法检测各组破骨细胞Nrf2/HO-1/GPX4信号通路相关蛋白表达。结果:淫羊藿苷可抑制破骨细胞形成,且抑制作用呈剂量依赖性,高浓度淫羊藿苷对破骨细胞活性抑制作用最强(P<0.05);与对照组比较,淫羊藿苷可促进破骨细胞内ROS含量、亚铁离子含量升高,GSH及GSH-Px含量下降;淫羊藿苷可上调氧化应激相关Nrf2/HO-1信号传导通路,促进Nrf2、HO-1基因表达,抑制破骨细胞铁代谢相关的GPX4基因及转录蛋白表达。结论:淫羊藿苷可能通过上调Nrf2/HO-1信号传导通路,促进破骨细胞氧化应激改变,增加破骨细胞内ROS水平,提高破骨细胞内亚铁离子水平,下调铁代谢相关的GPX4基因表达,进而调控破骨细胞内铁代谢水平,增加其氧化应激损伤,从而抑制破骨细胞形成和骨吸收。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 破骨细胞 铁代谢 Nrf2/HO-1/GPX4信号通路 细胞分化
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激素性股骨头坏死发生机制的新认识 被引量:10
12
作者 邓爽 彭昊 《中国医药导报》 CAS 2017年第34期29-32,共4页
糖皮质激素应用是股骨头坏死最常见的非创伤性原因,研究认为其发生机制包含直接和间接两重作用。直接作用包括:成骨细胞与破骨细胞前体生成抑制,成骨细胞与骨细胞凋亡,破骨细胞寿命延长,内皮细胞凋亡;间接作用包括:促进凝血活性,干扰血... 糖皮质激素应用是股骨头坏死最常见的非创伤性原因,研究认为其发生机制包含直接和间接两重作用。直接作用包括:成骨细胞与破骨细胞前体生成抑制,成骨细胞与骨细胞凋亡,破骨细胞寿命延长,内皮细胞凋亡;间接作用包括:促进凝血活性,干扰血管再生,影响骨修复,调节局部血管收缩,诱导骨髓脂肪生成,增高髓内压。多种途径的激活使股骨头血供减少,从而导致坏死发生。此外,激素性股骨头坏死的发生还存在个体敏感性差异及其他的潜在机制,其患病模型为多重命中理论,风险因素越多则患病概率越大。应更深入地认识糖皮质激素的详细作用机制,从而为临床治疗提供更好的选择。 展开更多
关键词 糖皮质激素 股骨头坏死 成骨细胞 破骨细胞 骨细胞 内皮细胞 凋亡
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Osteoclast-like giant cell tumors of the pancreas and liver 被引量:9
13
作者 Juergen Bauditz Birgit Rudolph Wolfram Wermke 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2006年第48期7878-7883,共6页
Osteoclast-like giant cell tumors (OGCT) are rare abdominal tumors, which mainly occur in the pancreas. The neoplasms are composed of two distinct cell populations and frequently show an inhomogenous appearance with... Osteoclast-like giant cell tumors (OGCT) are rare abdominal tumors, which mainly occur in the pancreas. The neoplasms are composed of two distinct cell populations and frequently show an inhomogenous appearance with cystic structures. However, due to the rarity of these tumors, only very limited clinical data are available. Imaging features and sonographic appearance have hardly been characterized. Here we report on two cases of osteoclast-like giant cell tumors, one located within the pancreas, the other within the liver, in which OGCTs are extremely rare. Both patients were investigated by contrast sonography, which demonstrated a complex, partly cystic and strongly vascularized tumor within the head of the pancreas in the first patient and a large, hypervascularized neoplasm with calcifications within the liver in the second patient. The liver OGCT responded well to a combination of carboplatin, etoposide and paclitaxel. With a combination of surgical resection, radiofrequency ablation and chemotherapy, the patient's survival is currently more than 15 too, making him the longest survivor with an OGCT of the liver to date. 展开更多
关键词 osteoclast-like giant cell tumor Liver cancer Pancreatic cancer Contrast sonography
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白介素-17诱导自噬促进破骨前体细胞分化的机制 被引量:9
14
作者 沈烨琦 王中秀 +2 位作者 谭静怡 钟佳慧 陈莉丽 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期162-170,共9页
目的:探讨白介素-17(IL-17)诱导的自噬及其相关蛋白在促进牙槽骨破坏过程中的具体机制。方法:对照组以含30 ng/m L巨噬细胞集落刺激因子、50 ng/m L核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的培养基诱导小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMM),IL-17组分别... 目的:探讨白介素-17(IL-17)诱导的自噬及其相关蛋白在促进牙槽骨破坏过程中的具体机制。方法:对照组以含30 ng/m L巨噬细胞集落刺激因子、50 ng/m L核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的培养基诱导小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMM),IL-17组分别以0.01、0.1、1.0、10 ng/m L IL-17处理,采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察TRAP阳性多核破骨细胞;鬼笔环肽荧光染色检测肌动蛋白环周长;甲苯胺蓝染色分析骨吸收陷窝形成情况。另设对照组使用含50 ng/m L RANKL的培养基诱导RAW264.7细胞,IL-17组分别以0.01、0.1、1.0、10 ng/m L的IL-17处理,采用蛋白质印迹法检测不同浓度IL-17处理后自噬相关蛋白Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)及破骨细胞相关蛋白c-fos、活化T细胞核因子1(NFATc1)的表达;检测1.0 ng/m L IL-17处理及加入自噬抑制剂3-MA后RAW264.7细胞LC3、NFATc1、TRAF6/ERK/p38信号通路相关蛋白的表达。结果:0.01、0.1、1.0 ng/m L IL-17处理BMM后,TRAP阳性多核破骨细胞数量、肌动蛋白环周长以及骨吸收陷窝面积较对照组均增加,且1.0 ng/m LIL-17处理RAW264.7细胞后,c-fos、NFATc1、Beclin-1、LC3、TRAF6、磷酸化ERK、磷酸化p38蛋白表达均上调(均P<0.05);而采用自噬抑制剂3-MA处理后,LC3、NFATc1、TRAF6、磷酸化ERK、磷酸化p38的表达水平均下降(均P<0.05)。结论:IL-17可促进Beclin-1、LC3等自噬关键蛋白表达,增强破骨前体细胞的分化能力,TRAF6/ERK/p38信号通路参与该过程。 展开更多
关键词 破骨细胞 细胞分化 白介素-17 自噬 TRAF6/ERK/p38通路
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肿瘤坏死因子α对骨组织细胞的调节 被引量:2
15
作者 王鑫 吾布力卡斯木·米吉提 +1 位作者 黄金勇 谢增如 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第21期3400-3406,共7页
背景:肿瘤坏死因子α是一种作用广泛的炎性细胞因子,在机体的免疫炎症反应中起重要作用。目前的研究认为,肿瘤坏死因子α对多种骨组织细胞具有显著的生物学效应。目的:总结肿瘤坏死因子α在成骨及破骨细胞中的表达及作用途径,以进一步... 背景:肿瘤坏死因子α是一种作用广泛的炎性细胞因子,在机体的免疫炎症反应中起重要作用。目前的研究认为,肿瘤坏死因子α对多种骨组织细胞具有显著的生物学效应。目的:总结肿瘤坏死因子α在成骨及破骨细胞中的表达及作用途径,以进一步阐明肿瘤坏死因子α对骨组织细胞的调控作用。方法:检索截至2023年3月的PubMed及中国知网数据库中的相关文献,中文检索词包括“肿瘤坏死因子α,成骨细胞,破骨细胞,骨细胞,骨祖细胞”;英文检索词包括“TNF-α,osteoblast,osteoclast,osteocyte,osteoprogenitor cell”,并根据研究需要确立相应的标准,对最终所得文献进行筛选,最终纳入77篇文献进行综述。结果与结论:①肿瘤坏死因子α参与调控了骨祖细胞的募集、增殖与分化,但在特定环境下导致骨祖细胞剥离及死亡。同时通过分泌酶类直接或间接参与骨质吸收。②肿瘤坏死因子α能够通过激活破骨系细胞中相关信号通路,提高环境中炎性因子水平,或在特定环境下直接诱导破骨细胞生成。③肿瘤坏死因子α可通过激活核转录因子κB信号通路,抑制RUNX2和Osterix等转录因子的表达从而抑制成骨分化并诱导成骨细胞的凋亡和坏死性凋亡。④肿瘤坏死因子α通过激活骨细胞中核转录因子κB信号通路,诱导RANKL、SOST及DKK1等细胞因子抑制成骨促进破骨,同时增强骨细胞的凋亡,以及凋亡骨组织周围的骨吸收。⑤综合而言,肿瘤坏死因子α在骨组织中的效应以抑制成骨、促进破骨为主,肿瘤坏死因子α在骨组织细胞中实现生物效应通常依赖于肿瘤坏死因子受体及核转录因子κB信号通路的激活。⑥未来的研究中肿瘤坏死因子α与骨组织周围其他组织细胞类型的交互以及在骨免疫调控中的作用仍值得关注。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子Α 成骨细胞 破骨细胞 骨细胞 骨祖细胞 骨组织 细胞因子 信号通路 骨吸收 凋亡
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不同诱导因子对大鼠破骨细胞样细胞体外形成的影响 被引量:8
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作者 王兴强 杨富生 《临床口腔医学杂志》 2002年第2期92-94,共3页
目的 研究不同诱导因子对大鼠破骨细胞样细胞体外形成的影响。方法 建立大鼠脾细胞与成骨细胞的联合培养体系 ,将细胞悬液接种于预置盖玻片或牙本质片的 2 4孔培养板内 ,实验组分别加入骨吸收因子1,2 5 (OH ) 2 D3 、PTH、PGE2 ,对照... 目的 研究不同诱导因子对大鼠破骨细胞样细胞体外形成的影响。方法 建立大鼠脾细胞与成骨细胞的联合培养体系 ,将细胞悬液接种于预置盖玻片或牙本质片的 2 4孔培养板内 ,实验组分别加入骨吸收因子1,2 5 (OH ) 2 D3 、PTH、PGE2 ,对照组不加药 ,每 3d换培养液并加药 1次。结果 培养 5d后实验组可见多核细胞形成 ,并逐渐增多 ,TRAP染色阳性 ,电镜下见牙本质片上有吸收陷窝形成 ,其中以 1,2 5 (OH) 2 D3 组结果最明显。结论 体外培养大鼠破骨细胞样细胞的形成需要骨吸收因子的诱导 ,1,2 5 (OH) 2 D3 展开更多
关键词 破骨细胞 体外细胞培养 1 25(OH)2D3 甲状旁腺激素 前列腺素E2 诱导因子
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Piezo1介导的机械应力刺激在抗骨质疏松中的作用 被引量:3
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作者 黄浩然 卫杨文祥 +5 位作者 章家皓 莫亮 刘予豪 陈镇秋 王海彬 周驰 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第17期2716-2722,共7页
背景:机械敏感通道蛋白Piezo1是机械应力刺激的重要靶蛋白,能将物理的机械力转化成生物电信号,从而调控骨形成与骨吸收,在抗骨质疏松中发挥着重要作用。目的:总结机械应力刺激在抗骨质疏松中的作用机制、Piezo1分子生物学研究进程及Pie... 背景:机械敏感通道蛋白Piezo1是机械应力刺激的重要靶蛋白,能将物理的机械力转化成生物电信号,从而调控骨形成与骨吸收,在抗骨质疏松中发挥着重要作用。目的:总结机械应力刺激在抗骨质疏松中的作用机制、Piezo1分子生物学研究进程及Piezo1在骨质疏松中的研究进展。方法:使用计算机在中国知网、万方、维普、PubMed及Web of Science数据库进行文献检索,中文检索词为“骨质疏松、Piezo1、机械应力、骨”,英文检索词为“osteoporosis,Piezo1,mechanical,osteoblast,osteoclast,chondrocyte,bone”,根据纳排标准对文献进行筛选,最终纳入65篇文献进行综述。结果与结论:①机械敏感通道蛋白Piezo1的蛋白结构在冷冻电镜技术突破中不断得到新的解析,目前研究表明Piezo1蛋白基于三叶螺旋桨状三维构造主体,在静默和应激状态下可表现出不同的结构变化;②Piezo1介导的机械应力刺激能通过调控成骨细胞、软骨细胞、内皮细胞、肠道细胞的功能影响骨形成,同时调控破骨细胞的功能影响骨吸收,进而在抗骨质疏松中发挥重要作用;③Piezo1介导的机械应力刺激主要通过Wnt/β-catenin信号通路调控成骨细胞功能影响骨形成;而其对破骨细胞功能的调节,因机械力的类型、大小、作用时间的不同而对骨吸收有双向调节作用,需进一步量化的研究;④未来基于Piezo1在骨质疏松中的临床研究、骨质疏松动物模型研究、破骨细胞的相关机制及新型复合材料研究仍需更多的关注。 展开更多
关键词 骨质疏松 机械应力 Piezo1 成骨细胞 破骨细胞 软骨细胞 巨噬细胞 内皮细胞 肠道细胞
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类黄酮对人体外周血破骨细胞分化p38MAPK/c-Fos信号通路调控的研究 被引量:7
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作者 王想福 孙凤歧 +3 位作者 叶丙霖 范有福 李盛华 温少瑾 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1488-1491,1529,共5页
目的探讨类黄酮调控p38MAPK/c-Fos信号通路对破骨细胞分化的影响。方法采用人体外周血分离单个核细胞,并诱导形成破骨细胞,干预组应用类黄酮对细胞进行处理,通过细胞形态学观察并检测细胞活性,再分别采用RT-PCR和Western blot两种方法观... 目的探讨类黄酮调控p38MAPK/c-Fos信号通路对破骨细胞分化的影响。方法采用人体外周血分离单个核细胞,并诱导形成破骨细胞,干预组应用类黄酮对细胞进行处理,通过细胞形态学观察并检测细胞活性,再分别采用RT-PCR和Western blot两种方法观察p38MAPK通路及下游转录因子c-fos基因和蛋白的表达水平。结果对照组与干预组细胞形态学观察均可见诱导培养的破骨细胞形态明显;与对照组比较,干预组破骨细胞样细胞的形成减少,活性减弱,差异具有统计学意义(P<0.05);RT-PCR结果显示,干预组p38MAPK通路下游转录因子c-fos表达水平较对照组下降,差异具有统计学意义(P<0.01);Western blot检测结果显示,干预组c-fos蛋白表达水平较对照组降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论类黄酮在体外细胞培养中可抑制破骨细胞形态,并可通过下调p38MAPK通路中c-fos基因和蛋白水平的表达,从而减弱破骨细胞的吸收功能。 展开更多
关键词 类黄酮 破骨细胞 信号通路 细胞分化
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更年春方对破骨细胞的分化与凋亡及骨吸收活性的影响 被引量:7
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作者 杨晓莉 王文君 +2 位作者 李大金 金慰芳 周文江 《上海中医药杂志》 北大核心 2008年第5期71-74,共4页
目的探讨更年春方对破骨细胞的分化、凋亡及骨吸收活性的影响。方法分离培养大鼠破骨细胞,加入含不同浓度的"更年春"药物血清培养液培养,生理盐水作为阴性对照组,尼尔雌醇作为阳性对照组,通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色对T... 目的探讨更年春方对破骨细胞的分化、凋亡及骨吸收活性的影响。方法分离培养大鼠破骨细胞,加入含不同浓度的"更年春"药物血清培养液培养,生理盐水作为阴性对照组,尼尔雌醇作为阳性对照组,通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色对TRAP阳性多核破骨细胞计数;用显微摄影结合计算机图像分析测定骨吸收造成的陷窝面积;采用Annexin V-FITC凋亡荧光染色结合TRAP染色法计数破骨细胞的凋亡率。结果与生理盐水组相比,尼尔雌醇组和更年春高剂量组TRAP染色阳性的破骨细胞数量显著减少(P<0.01);破骨细胞的凋亡率明显增加(P<0.01);尼尔雌醇组,更年春高、中剂量组骨吸收陷窝的面积明显减少(P<0.01)。与尼尔雌醇组相比,更年春高剂量组差别无显著性。结论更年春可抑制破骨细胞的形成和分化及骨吸收活性,促进破骨细胞的凋亡,从而发挥其抗骨质疏松的作用。 展开更多
关键词 更年春方 破骨细胞 细胞分化 细胞凋亡 骨吸收
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益肾蠲痹汤含药血清对大鼠成骨细胞和破骨细胞增殖能力的影响 被引量:7
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作者 张莹莹 李涯松 +3 位作者 邹玉琼 郝桂锋 陈彦霞 王丽娟 《中华全科医学》 2016年第6期911-914,956,共5页
目的通过研究益肾蠲痹汤的含药血清对大鼠成骨细胞、破骨细胞增殖的影响,评价益肾蠲痹法对强直性脊柱炎骨代谢异常的治疗作用。方法 SD正常大鼠(SPF级)经灌胃给药益肾蠲痹汤,收集大鼠含药血清。分离大鼠成骨细胞和破骨细胞,通过Van koss... 目的通过研究益肾蠲痹汤的含药血清对大鼠成骨细胞、破骨细胞增殖的影响,评价益肾蠲痹法对强直性脊柱炎骨代谢异常的治疗作用。方法 SD正常大鼠(SPF级)经灌胃给药益肾蠲痹汤,收集大鼠含药血清。分离大鼠成骨细胞和破骨细胞,通过Van kossa染色和碱性磷酸酶染色鉴定成骨细胞,TRAP染色、甲苯胺蓝染色鉴定破骨细胞。将体外培养的成骨细胞和破骨细胞,分别分为6组:空白对照组,益肾蠲痹汤大、中、小剂量含药血清组,双氯芬酸对照组和阿仑膦酸盐对照组。使用CCK-8法测定成骨细胞、破骨细胞的生长曲线,收集并测定成骨细胞培养液上清碱性磷酸酶活性。结果含有益肾蠲痹汤药物的血清加入体外培养成骨细胞后,成骨细胞的生长曲线呈明显上升趋势,加药后细胞培养上清中碱性磷酸酶浓度增加,提示成骨细胞分泌碱性磷酸酶活性增强。生长曲线上升趋势及分泌碱性磷酸酶活性随含药血清浓度增加而作用增强。体外培养破骨细胞加入益肾蠲痹汤含药血清后,细胞增殖曲线呈下降趋势,曲线下降趋势亦随含药血清浓度升高而幅度增大。结论益肾蠲痹汤具有促进成骨细胞增殖及提高成骨细胞活性,同时,对破骨细胞增殖有抑制作用,作用强度随药物浓度增加而增强。因此,预期益肾蠲痹汤对强直性脊柱炎骨代谢异常具有治疗作用。 展开更多
关键词 益肾蠲痹汤 成骨细胞 破骨细胞 细胞增殖 碱性磷酸酶
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