重组甲型流感病毒NS2蛋白抑制感染小鼠肺组织干扰素的产生 被引量：3

1

作者 朱颜鑫 牟秋菊 +4 位作者 赵兵兵 罗红 智妍 兰露莎 江滟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1615-1619,共5页

目的用大肠杆菌表达获得甲型流感病毒(IAV)非结构蛋白2(NS2),并观察NS2蛋白对小鼠肺组织γ干扰素(IFN-γ)产生的影响。方法构建p ET22b(+)/NS2原核表达质粒并转化大肠杆菌Rosetta-gami(2),通过诱导表达、纯化获得NS2。将40只BALB/c小鼠... 目的用大肠杆菌表达获得甲型流感病毒(IAV)非结构蛋白2(NS2),并观察NS2蛋白对小鼠肺组织γ干扰素(IFN-γ)产生的影响。方法构建p ET22b(+)/NS2原核表达质粒并转化大肠杆菌Rosetta-gami(2),通过诱导表达、纯化获得NS2。将40只BALB/c小鼠,随机分8组,分别为正常对照组、200μg/kg NS2联合病毒组、200μg/kg NS2联合RNA组、100μg/kg灭活病毒、0.2×半数致死量(LD50)病毒组、50μg/kg病毒RNA组、200μg/kg NS2组和100μg/kg NS2组,各组滴鼻给予小鼠处理。通过反转录PCR、Western blot法分别检测肺组织IFN-γ的mRNA和蛋白表达。结果在异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导下表达并纯化获得重组NS2;将NS2或/和IAV滴鼻给小鼠后,反转录PCR和Western blot法检测表明NS2联合病毒组的小鼠肺组织IFN-γmRNA和蛋白水平较病毒组均降低。结论 NS2抑制IAV所诱导的小鼠肺组织IFN-γmRNA和蛋白的水平。 展开更多

关键词 甲型流感病毒 非结构蛋白 Γ干扰素

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重组表达丙型肝炎病毒非结构蛋白2(NS2)及其血清抗NS2抗体检测方法的建立与评价 被引量：1

2

作者 余雨 成军 +1 位作者 戴玉柱 梅传忠 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期361-367,共7页

目的重组表达丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白2(NS2),建立并评价基于化学发光法的血清抗NS2抗体的检测方法。方法以HCV 1b基因型的NS2核苷酸序列质粒(PUC-NS2)为模板,构建包含NS2全序列的重组质粒(pGEX-KG-NS2);诱导NS2蛋白原核表达,将纯... 目的重组表达丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白2(NS2),建立并评价基于化学发光法的血清抗NS2抗体的检测方法。方法以HCV 1b基因型的NS2核苷酸序列质粒(PUC-NS2)为模板,构建包含NS2全序列的重组质粒(pGEX-KG-NS2);诱导NS2蛋白原核表达,将纯化后的NS2融合蛋白包被于微孔板,基于化学发光法制备抗NS2抗体检测试剂盒,并对其方法学指标进行评价。结果成功诱导获得相对分子质量(M_(r))约51000的NS2融合蛋白;并制备血清抗NS2抗体检测试剂盒,试剂盒方法学评价:精密度试验(批内变异系数4.60%~9.17%,批间变异系数6.62%~10.09%)结果良好,空白限和检出限的相对发光强度比值(RLIR)分别为1.57、4.80(r=0.9870),分析测量范围(AMR)为1.63~44.50 RLIR;准确度试验:平均回收率为99.4%,类风湿因子等阳性血清标本对本试验无交叉反应,试剂盒15个月内稳定,45例HCV感染者血清抗NS2抗体阳性率为20%(9/45)。结论获得了原核表达的HCV NS2并制备了检测血清抗NS2抗体的试剂盒。 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒(HCV) 非结构蛋白2(ns2) 抗ns2抗体

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蓝舌病病毒新型NS4蛋白的亚细胞定位分析及功能预测 被引量：9

3

作者 吕爽 杨涛 +3 位作者 孙恩成 徐青元 张继凯 吴东来 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第1期1-7,共7页

蓝舌病病毒（bluetongue virus,BTV）编码4种非结构蛋白（NS1~NS4）,其中NS4是新发现的非结构蛋白。为深入探索该新型非结构蛋白的功能,本研究首先采用生物信息学分析其序列结构特征及可能的功能域,结果发现NS4蛋白的N端α-螺旋结构域... 蓝舌病病毒（bluetongue virus,BTV）编码4种非结构蛋白（NS1~NS4）,其中NS4是新发现的非结构蛋白。为深入探索该新型非结构蛋白的功能,本研究首先采用生物信息学分析其序列结构特征及可能的功能域,结果发现NS4蛋白的N端α-螺旋结构域中具有富含碱性氨基酸的核定位信号（NLS）,而C端α-螺旋结构域中具有亮氨酸拉链结构的核输出信号（NES）。为进一步证实NS4的亚细胞定位,本试验构建了表达NS4全长及其缺失突变体的重组质粒,结果显示缺失NLS的NS4重组蛋白弥散在胞浆,而缺失NES后NS4重组蛋白只定位于细胞核,表明NS4蛋白亚细胞定位具有核—胞浆穿梭过程。最后结合3D同源建模发现NS4与CCAAT增强子结合蛋白（C/EBPβ）等具有较高的同源性,据此推测NS4可能为转录调控蛋白,与DNA或其他转录因子存在相互作用。总之,本研究为NS4蛋白的功能研究提供了更多新线索和新思路,填补了BTV基础研究的空白。 展开更多

关键词 蓝舌病病毒 ns4蛋白 亚细胞定位 同源建模

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基于非结构蛋白1(NS1)的黄病毒感染诊断研究进展 被引量：3

4

作者 仝舟 严景华 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期82-89,共8页

蚊虫传播的黄病毒造成的传染病是人类健康的重要威胁,有效的早期精确诊断对预防与控制黄病毒感染并及时有效开展病患救治至关重要。然而由于黄病毒在血液中核酸可检测窗口短,核酸检测手段难以发挥优势,必须要通过血清学的诊断与病毒分... 蚊虫传播的黄病毒造成的传染病是人类健康的重要威胁,有效的早期精确诊断对预防与控制黄病毒感染并及时有效开展病患救治至关重要。然而由于黄病毒在血液中核酸可检测窗口短,核酸检测手段难以发挥优势,必须要通过血清学的诊断与病毒分离予以佐证,而血清学检测也要面对黄病毒之间存在的交叉反应问题。本文介绍了基于黄病毒非结构蛋白1(NS1)建立的检测手段。NS1蛋白在病人血清中含量很高是良好早期诊断靶标,基于NS1蛋白的黄病毒血清学诊断的检测窗口较长、灵敏度高、特异性强,具有独特的优势。尤其是2016年寨卡病毒暴发以来基于NS1的检测技术在灵敏度与特异性上得到快速与多元的发展,为黄病毒的精确检测带开启了新的局面。 展开更多

关键词 黄病毒 非结构蛋白1 感染诊断 特异性抗体

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丙型肝炎病毒NS3基因真核质粒的构建及其在人肝细胞中的诱导表达

5

作者 李君武 江静 许小亮 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期495-501,共7页

目的:进行丙型肝炎病毒非结构蛋白3基因真核表达载体的构建,并分析其在体外培养的人肝细胞中的表达。方法:从含有丙肝病毒全长基因的重组质粒pBRTM/HCV1-3011表达载体中PCR扩增出HCV NS3基因片段,将其与表达载体pcDNA3.1(-)重组,得到重... 目的:进行丙型肝炎病毒非结构蛋白3基因真核表达载体的构建,并分析其在体外培养的人肝细胞中的表达。方法:从含有丙肝病毒全长基因的重组质粒pBRTM/HCV1-3011表达载体中PCR扩增出HCV NS3基因片段,将其与表达载体pcDNA3.1(-)重组,得到重组的真核表达载体pcDNA3.1(-)/NS3。然后采用阳离子多聚体将其转染人肝细胞QSG7701,以免疫组织化学SP法及Western Blotting检测HCV NS3蛋白的表达。结果:所得到的NS3片段正确,序列正确,所构建的真核质粒成功转染QSG7701细胞并表达蛋白,表达的NS3蛋白相对分子质量为70 000。结论:成功构建了丙型肝炎病毒非结构蛋白3基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)/NS3,并且该载体在体外培养的人肝细胞中能有效表达特异性HCV NS3蛋白。 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒 非结构蛋白3 蛋白表达

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蜱传脑炎病毒非结构蛋白1的原核表达、纯化及应用

6

作者 张婷婷 王伟 +4 位作者 陈子杨 李景良 张颖 孙宏亮 常军亮 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1351-1356,共6页

目的原核表达、纯化蜱传脑炎病毒(tick-borne encephalitis virus,TBEV)非结构蛋白1(non-structural protein 1,NS1),并评价其在蜱传脑炎(tick-borne encephalitis,TBE)临床诊断中的应用价值。方法根据GenBank登录的TBEV“森张”株NS1... 目的原核表达、纯化蜱传脑炎病毒(tick-borne encephalitis virus,TBEV)非结构蛋白1(non-structural protein 1,NS1),并评价其在蜱传脑炎(tick-borne encephalitis,TBE)临床诊断中的应用价值。方法根据GenBank登录的TBEV“森张”株NS1基因序列设计引物,PCR扩增TBEV NS1基因,克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-NS1,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经GST bestarose 4FF亲和层析纯化后,Western blot检测其反应原性;以重组NS1蛋白为固相抗原,采用间接ELISA法检测临床血清。结果重组表达质粒pGEX-4T-1-NS1经双酶切及测序鉴定证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约65000,表达量为22.1%,主要以包涵体形式存在;纯化蛋白纯度达93%以上,与TBEV全病毒感染小鼠血清具有良好的反应原性。采用NS1作为包被抗原的间接ELISA法检测临床血清,特异性为95%,敏感度为100%。结论成功在大肠埃希菌中表达并纯化了TBEV NS1蛋白;作为病毒特异性抗原,经间接ELISA法验证,该蛋白在临床疾病的血清学诊断上具有一定的应用价值。 展开更多

关键词 蜱传脑炎病毒 流行性乙型脑炎病毒 非结构蛋白1 原核表达 酶联免疫吸附测定

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H5N1流感病毒NS1蛋白D92E变异趋势的分析 被引量：2

7

作者 范俊婉 郭敬 +2 位作者 于成接 张安定 金梅林 《中国病毒病杂志》 CAS 2012年第6期436-439,共4页

目的分析H5N1流感病毒NS1蛋白D92E的变异趋势,为研究禽流感病毒的致病性及其逃避宿主免疫应答提供科学依据。方法利用美国国立生物技术信息中心(NCBI)的流感数据库,搜索2000年以前以及2000年以后世界各地流行的A/human/H5N1、A/avian/H... 目的分析H5N1流感病毒NS1蛋白D92E的变异趋势,为研究禽流感病毒的致病性及其逃避宿主免疫应答提供科学依据。方法利用美国国立生物技术信息中心(NCBI)的流感数据库,搜索2000年以前以及2000年以后世界各地流行的A/human/H5N1、A/avian/H5N1、A/swine/H5N1流感病毒的相关信息,然后进行NS1蛋白序列比对,分析其变异趋势。结果 2000年以前H5N1流感病毒NS1蛋白第92位大部分是谷氨酸,而2000年以后H5N1流感病毒的NS1蛋白第92位大部分是天冬氨酸。结论 H5N1流感病毒的NS1蛋白第92位天冬氨酸的存在有可能增强了病毒的抵抗力和毒力。 展开更多

关键词 H5N1流感病毒 非结构蛋白ns1 D92E突变

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创建可视化的家蚕杆状病毒表达系统表达家蚕二分浓核病毒非结构蛋白NS1 被引量：2

8

作者 李国辉 王鹏 +3 位作者 李芒芒 徐五 胡朝阳 姚勤 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期625-635,共11页

重组杆状病毒感染昆虫细胞是表达外源蛋白常用的一种方法。为有效鉴定转染的细胞中是否产生了重组病毒粒子,对质粒pFastBacI进行改造,构建了极早期基因ie1启动子控制的绿色荧光蛋白egfp基因表达盒,以及多角体基因启动子控制的外源DNA的... 重组杆状病毒感染昆虫细胞是表达外源蛋白常用的一种方法。为有效鉴定转染的细胞中是否产生了重组病毒粒子,对质粒pFastBacI进行改造,构建了极早期基因ie1启动子控制的绿色荧光蛋白egfp基因表达盒,以及多角体基因启动子控制的外源DNA的一个通用型双表达载体;通过酶切、连接的方式,将家蚕二分浓核病毒ns1基因连接到多角体启动子下游;在转座酶的介导下,该供体质粒上部分序列可转座到穿梭载体Bm-Bacmid上,进而构建可同时表达egfp和ns1基因的重组杆粒。将构建的该重组杆粒DNA转染BmN细胞,通过观察可视化的绿色荧光信号,可迅速判定转染后的细胞中重组病毒粒子产生的情况,收集转染后的细胞培养上清,将其感染BmN细胞,对感染4 d后的细胞总蛋白进行Western blotting分析,结果表明能杂交到一条36 kDa大小的特异蛋白,表明NS1蛋白成功获得了表达,进而为深入研究ns1基因的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 杆状病毒 基因表达 家蚕二分浓核病毒 非结构蛋白ns1

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A型流感病毒非结构蛋白NS1的研究进展 被引量：1

9

作者 潘朋歌 《安徽农业科学》 CAS 2016年第10期154-156,159,共4页

对NS1蛋白的进化、结构、调节病毒的致病性等进行了综述,在此基础上,对抗流感病毒药物及其防控技术进行了展望,以期为流感病毒的预防和治疗提供更多的可能性。

关键词 A型流感病毒 非结构蛋白ns1 致病性 功能 结构

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登革病毒非结构蛋白3（NS3）研究进展

10

作者 李莉莉 李玉华 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期549-555,共7页

登革病毒是一种流行于热带亚热带地区的虫媒传播类病毒，可以引起登革热、登革出血热和登革休克综合征等严重的人类疾病。登革病毒基因共编码3个结构蛋白和7个非结构蛋白。其中非结构蛋白3（NS3）的主要功能包括蛋白水解酶和RNA解旋酶... 登革病毒是一种流行于热带亚热带地区的虫媒传播类病毒，可以引起登革热、登革出血热和登革休克综合征等严重的人类疾病。登革病毒基因共编码3个结构蛋白和7个非结构蛋白。其中非结构蛋白3（NS3）的主要功能包括蛋白水解酶和RNA解旋酶等功能。其中,蛋白水解酶功能可以与宿主细胞内的水解酶一同将病毒基因组转录翻译后的总蛋白质水解成为有功能活性的单个蛋白质。解旋酶功能则与病毒基因组RNA的复制、转录翻译密切相关。本文中将对登革病毒非结构蛋白3的蛋白质结构与功能以及相关的抗病毒药物的研究进展进行系统的综述。 展开更多

关键词 登革热病毒 非结构蛋白3 抗病毒

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LXR-alpha/SREBP-1c通路参与HCV NS5A诱导的肝细胞脂质代谢紊乱 被引量：5

11

作者 陈军 邱泽文 +5 位作者 高文婷 李慧玲 董建一 王福金 王爱国 王靖宇 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1231-1235,共5页

肝细胞脂肪变性是丙型肝炎患者的突出病理特征,但丙肝病毒（HCV）诱导脂肪变性的分子机制尚不清楚.为探究HCV非结构蛋白5A（NS5A）参与诱导脂肪变性的可能分子机制,本研究以HCV NS5A转基因小鼠为研究对象,采集3～16月龄NS5A转基因小鼠... 肝细胞脂肪变性是丙型肝炎患者的突出病理特征,但丙肝病毒（HCV）诱导脂肪变性的分子机制尚不清楚.为探究HCV非结构蛋白5A（NS5A）参与诱导脂肪变性的可能分子机制,本研究以HCV NS5A转基因小鼠为研究对象,采集3～16月龄NS5A转基因小鼠和同窝非转基因小鼠的肝组织,进行病理学检测,并用气相色谱-质谱（GC-MS）法分析脂质主要成分胆固醇酯的含量.采用RT-PCR法检测肝细胞中与脂质代谢密切相关基因肝X受体（LXR-alpha）、固醇调节元件结合蛋白（SREBP-1c）、脂肪酸合成酶（FAS）、硬脂酰辅酶A去饱和酶1（SCD1）、过氧化物酶体增殖物受体alpha（PPAR-alpha）的mRNA表达水平.结果表明,与同窝非转基因对照小鼠相比,3～5月龄NS5A转基因小鼠的肝组织没有发生显著的病理性变化,但6～16月龄的NS5A转基因小鼠的肝脏发生了显著的脂肪变性（47.1%vs 13.0%;P=0.003）.与此相一致,胆固醇酯的含量在NS5A转基因小鼠的肝脏中显著升高（P〈0.01）.RT-PCR检测结果表明,与对照小鼠相比,14月龄NS5A转基因小鼠肝组织中与脂质代谢相关的基因LXR-alpha、SREBP-1c、FAS、SCD1的mRNA表达水平显著增高（P〈0.05）,而PPAR-alpha的表达则没有显著变化（P〉0.05）.以上结果提示,NS5A在小鼠肝细胞中可能通过调高LXR-alpha/SREBP-1c信号通路相关基因的表达,进而促进脂质重新合成,诱导脂肪变性. 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒 非结构蛋白5A 肝 脂肪变性

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猪瘟病毒非结构蛋白NS4B与宿主蛋白相互作用的研究进展

12

作者 邹宏 罗干 +4 位作者 李玲 夏应菊 徐璐 赵俊杰 张乾义 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第12期88-93,共6页

猪瘟病毒(CSFV)是一种可感染猪只并引起典型或慢性猪瘟(CSF)的单链RNA包膜病毒,严重影响动物的健康和养猪业的经济发展。CSFV自身编码的结构蛋白和非结构蛋白可与宿主蛋白相互作用,促进病毒自身的复制、翻译和增殖,并影响病毒毒力和免... 猪瘟病毒(CSFV)是一种可感染猪只并引起典型或慢性猪瘟(CSF)的单链RNA包膜病毒,严重影响动物的健康和养猪业的经济发展。CSFV自身编码的结构蛋白和非结构蛋白可与宿主蛋白相互作用,促进病毒自身的复制、翻译和增殖,并影响病毒毒力和免疫反应等。CSFV的非结构蛋白NS4B在病毒生命周期中发挥重要作用,其自身结构上含有多种特定区域靶点,可与多种蛋白发生相互作用;其作为CSFV复制体碳价结构最重要的组成部分,还可被非结构蛋白NS3切割,在细胞内与CSFV自身蛋白或其他宿主蛋白,如核糖体蛋白侧柄亚基P1(RPLP1)、铁蛋白重链(FHC)、Rab蛋白22a(Rab22a)、脂肪酸合成酶(FASN)、线粒体抗病毒信号蛋白(MAVS)、肿瘤易感基因101(Tsg101)蛋白和猪指环蛋白114(pRNF114)等相互作用。本文对CSFV非结构蛋白NS4B的结构功能以及与宿主蛋白发生相互作用的研究进展进行概述,以期为CSFV致病机理研究和感染防控提供理论帮助。 展开更多

关键词 猪瘟病毒 非结构蛋白ns4B 蛋白相互作用

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丙型肝炎病毒非结构蛋白3稳定细胞系的建立

13

作者 倪念亲 王娟娟 +1 位作者 陈进 李子博 《实用预防医学》 CAS 2011年第5期813-815,共3页

目的利用丙型肝炎病毒非结构基因NS3的真核表达载体(pCMV-Tag1-NS3)在HEK293细胞中进行表达。方法通过酶切分析和DNA序列分析鉴定pCMV-Tag1-NS3重组载体构建正确后,通过脂质体介导转染HEK293细胞,用RT-PCR和Western blotting证实丙型肝... 目的利用丙型肝炎病毒非结构基因NS3的真核表达载体(pCMV-Tag1-NS3)在HEK293细胞中进行表达。方法通过酶切分析和DNA序列分析鉴定pCMV-Tag1-NS3重组载体构建正确后,通过脂质体介导转染HEK293细胞,用RT-PCR和Western blotting证实丙型肝炎非结构蛋白NS3基因(HCV-NS3)表达。结果 RT-PCR结果显示HCV-NS3基因的mRNA在转染的HKK293细胞中表达,Western blotting结果也显示蛋白质能正确表达。结论成功构建了实现HCV-NS3过表达的稳定HEK293细胞系,为获得HCV非结构蛋白3的重组蛋白以及早期诊断试剂的研制与筛选药物提供了基础。 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒 非结构蛋白 基因转染

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呼吸道合胞病毒非结构蛋白1对凋亡调节机制的研究 被引量：2

14

作者 赵梦 蒋勇 +3 位作者 杨璞 郑君文 谢蒙 赵东赤 《生物医学工程与临床》 CAS 2015年第1期60-65,共6页

目的研究呼吸道合胞病毒(RSV)非结构蛋白(NS)1调节人肺Ⅱ型腺上皮癌细胞(A549)凋亡基因/抗凋亡基因表达的作用机制。方法构建RSV-NS1表达质粒(p NS1),合成si RNA(si RNA-bcl-2、si RNA-NS1、错配序列),制作其复合物。选用A549细胞,进行... 目的研究呼吸道合胞病毒(RSV)非结构蛋白(NS)1调节人肺Ⅱ型腺上皮癌细胞(A549)凋亡基因/抗凋亡基因表达的作用机制。方法构建RSV-NS1表达质粒(p NS1),合成si RNA(si RNA-bcl-2、si RNA-NS1、错配序列),制作其复合物。选用A549细胞,进行质粒转染,获得p NS1 A549细胞、sibcl-2-p NS1 A549细胞、si RNA-p NS1 A549细胞、错配序列A549细胞。进行质粒对凋亡调节实验[p NS1转染组(分2亚组),错配对照组]和抑制基因实验[si NS1干预处理组、RSV感染组、错配对照组]。应用Western blot检测p NS1转染A549细胞后0、24、48、72 h Bax及Bcl-2的蛋白表达水平、流式细胞仪测细胞凋亡率;流式细胞仪测NS1沉默后的细胞凋亡率。结果 Bax和Bcl-2在A549细胞均有表达,当p NS1转染A549细胞后,Bax蛋白表达随时间逐渐降低,Bcl-2表达明显上调,组内蛋白表达量差异有统计学意义(P<0.05)。p NS1转染亚1组细胞凋亡率较错配对照组显著下降(P<0.05)。经sibcl-2转染后的细胞,p NS1转染显著上调Bax的蛋白表达,24 h达到高峰,并持续表达72 h;细胞凋亡率显著增加(P<0.05)。RSV感染组在72 h内显著抑制细胞凋亡(P<0.05),而在si NS1干预处理组,细胞凋亡率虽然均较错配对照组降低,但无统计学意义(P>0.05)。结论呼吸道合胞病毒NS1通过上调抗凋亡基因bcl-2、下调凋亡基因bax延迟A549细胞凋亡。 展开更多

关键词 呼吸道合胞病毒 非结构蛋白ns1 A549细胞 凋亡基因bax 抗凋亡基因BCL-2

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流感病毒对环氧合酶-2表达的影响及其机制探讨

15

作者 喻明 胡耀仁 +1 位作者 高国生 胡爱荣 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2014年第22期3283-3285,共3页

目的探讨流感病毒对环氧合酶2(COX-2)表达的影响及其调节机制。方法流感病毒感染A549细胞,将其非结构蛋白NS1真核表达载体与COX-2基因启动子的报告质粒p COX-2-Luc共转染A549细胞,测定其荧光素酶活性,采用反转录PCR和Western印迹法检测C... 目的探讨流感病毒对环氧合酶2(COX-2)表达的影响及其调节机制。方法流感病毒感染A549细胞,将其非结构蛋白NS1真核表达载体与COX-2基因启动子的报告质粒p COX-2-Luc共转染A549细胞,测定其荧光素酶活性,采用反转录PCR和Western印迹法检测COX-2 mRNA和蛋白表达的变化。结果流感病毒上调mRNA和蛋白的表达,其NS1蛋白能显著激活COX-2基因启动子的活性,并上调COX-2 mRNA和蛋白的表达,激活作用呈剂量依赖关系。结论流感病毒通过其NS1蛋白上调COX-2的表达。 展开更多

关键词 流感病毒 非结构蛋白ns1 环氧合酶2

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