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哮喘患儿外泌体中miR-7b水平及与肺功能的关系 被引量：2
1
作者 张艳萍 李娜 《国际检验医学杂志》 CAS 2022年第19期2337-2341,共5页
目的 探讨哮喘患儿外泌体中微小RNA(miR)-7b水平及与肺功能的关系,并分析miR-7b在评估患者病情中的临床价值。方法 选择2016-2021年该院收治的101例哮喘患儿为研究对象,并根据病情分为急性发作期组(40例)和临床缓解期组(61例),选择同期... 目的 探讨哮喘患儿外泌体中微小RNA(miR)-7b水平及与肺功能的关系,并分析miR-7b在评估患者病情中的临床价值。方法 选择2016-2021年该院收治的101例哮喘患儿为研究对象,并根据病情分为急性发作期组(40例)和临床缓解期组(61例),选择同期101例体检健康儿童为对照组。比较3组血清外泌体miR-7b、白细胞介素(IL)-4、IL-6、γ干扰素(IFN-γ)、免疫球蛋白E(IgE)、用力肺活量(FVC)、第一秒用力呼气量(FEV)、FEV/FVC水平。采用相关法分析哮喘患儿miR-7b水平与IL-4、IL-6、IFN-γ、IgE、FVC、FEV、FEV/FVC水平的相关性。比较治疗后哮喘患儿各指标水平变化情况。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-7b、IL-4、IL-6、IFN-γ、IgE水平在患儿病情评估中的临床价值。结果 相较于对照组,急性发作期组及临床缓解期组miR-7b、IL-4、IL-6、IgE水平更高(P<0.05),而IFN-γ、FVC、FEV、FEV/FVC水平更低(P<0.05);且相较于临床缓解期组,急性发作期组患儿miR-7b、IL-4、IL-6、IgE水平更高(P<0.05),而IFN-γ、FVC、FEV、FEV/FVC水平更低(P<0.05)。相关性分析结果显示,哮喘患儿miR-7b水平与IL-4、IL-6、IgE水平呈正相关(r=0.345、0.392、0.496,P<0.05),而与IFN-γ、FVC、FEV、FEV/FVC水平呈负相关(r=-0.383、-0.416、-0.452、-0.392,P<0.05)。治疗后,哮喘患儿miR-7b、IL-4、IL-6、IgE水平有所下降,而IFN-γ水平有所上升,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,IL-4、IL-6、IFN-γ、IgE水平评估患者病情的曲线下面积(AUC)均<0.80,而miR-7b及联合检测评估患者病情的AUC均>0.80。结论 哮喘患儿血清外泌体miR-7b水平显著上升,并与患儿炎性反应及肺功能密切相关。miR-7b水平在辅助评估哮喘患儿病情中具有一定临床价值。 展开更多
关键词 哮喘 血清外泌体 微小RNA-7b 肺功能
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微小RNA let-7b通过结合STAT3抑制颞叶癫痫大鼠海马胶质细胞的活化 被引量：4
2
作者 刘云鹏 孟凡刚 +4 位作者 韩春雷 赵学敏 王开亮 张鑫 张建国 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2019年第4期400-406,共7页
目的探讨let-7b和STAT3在癫痫发生过程中的表达情况以及let-7b结合STAT3在颞叶癫痫大鼠海马胶质细胞活化中的作用。方法采用立体定向海人酸注射建立癫痫大鼠模型(模型组,40只)。假手术组注射等量的生理盐水(10只)。采用腺相关病毒载体制... 目的探讨let-7b和STAT3在癫痫发生过程中的表达情况以及let-7b结合STAT3在颞叶癫痫大鼠海马胶质细胞活化中的作用。方法采用立体定向海人酸注射建立癫痫大鼠模型(模型组,40只)。假手术组注射等量的生理盐水(10只)。采用腺相关病毒载体制备let-7b过表达的大鼠。以实时荧光定量PCR检测let-7b的表达。采用双荧光素酶报告基因实验鉴定let-7b与其靶基因STAT3的靶向关系。采用免疫荧光实验检测星形胶质细胞以及小胶质细胞的活化。以免疫印迹法检测Janus激酶(JAK)/信号转导与转录激活因子(STAT)信号通路以及相关炎症因子的表达。结果与假手术组大鼠相比,let-7b在模型组大鼠癫痫发生的潜伏期(造模后3d和7d)的表达降低(均P<0.01),而STAT3在大鼠癫痫发生潜伏期的表达升高(均P<0.001)。双荧光素酶报告基因实验结果表明,let-7b可结合STAT3并抑制其表达(P<0.05)。免疫荧光实验结果表明,let-7b过表达可抑制潜伏期癫痫大鼠海马CA3区的星形胶质细胞和小胶质细胞的活化(均P<0.01)。免疫印迹法实验表明,let-7b过表达可抑制p-Stat3及其下游转录因子c-Myc的表达(均P<0.001)以及相关炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的释放(均P<0.01)。结论Let-7b可通过结合靶基因STAT3抑制癫痫大鼠海马胶质细胞的活化、增生。 展开更多
关键词 癫痫 颍叶 神经胶质增生 微小RNA let-7b STAT3转录因子 大鼠
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热适应/热射病大鼠血清中microRNA let-7b的变化及意义 被引量：3
3
作者 李腾达 谷明莉 +7 位作者 邓顺江 孙懿 张薇薇 郭杰 刘云 黄元兰 钱琤 邓安梅 《现代检验医学杂志》 CAS 2017年第2期19-22,共4页
目的探究热适应/热射病大鼠模型血清中microRNA let-7b表达的变化及其与HSP70,IL-6,TNF-αTGF-β和IL-12的相关性,分析其临床意义。方法在第二军医大学实验动物中心选取肛温、体重、用龄基本一致的雄鼠60只随机均分为对照组、热适应组... 目的探究热适应/热射病大鼠模型血清中microRNA let-7b表达的变化及其与HSP70,IL-6,TNF-αTGF-β和IL-12的相关性,分析其临床意义。方法在第二军医大学实验动物中心选取肛温、体重、用龄基本一致的雄鼠60只随机均分为对照组、热适应组、热射病组,于仿真热气候动物舱中建立热适应/热射病大鼠模型后采集心尖血并分离血清。以实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清中microRNA let-7b,以酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中HSP70,IL-6,TNF-α,TGF-β和IL-12的蛋白水平。三组间计量资料的比较采用Kruskal-Wallis H检验,以Spearman秩相关系数表示热射病组两变量之间的相关性。结果 miRNA let-7b在对照组、热适应组、热射病组的M分别为0.99,1.04和1.93,Q分别为0.30,0.25和0.44,差异具有统计学意义(x^2=38.95,P<0.001),组间两两比较结果显示let-7b在对照组与热适应组表达差异无统计学意义(P>0.05),在对照组与热射病组、热适应组与热射病组表达差异具有统计学意义(P<0.05);Spearman相关性分析显示热射病组let-7b/与HSP70,TNF-α和IL-6呈正相关,差异具有统计学意义(r_s=0.579,0.498和0.609,P<0.05)。结论 miRlet-7b可能参与了热射病病理过程,为临床监测高温湿环境下患者的状态提供了潜在的评价指标。 展开更多
关键词 microrna let-7b 热射病 热适应 热休克蛋白 肿痛坏死因子-α
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microRNA let-7b在急性淋巴细胞白血病的表达分析与表观遗传学研究 被引量：2
4
作者 许文前 黄源茂 肖慧芳 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1535-1541,共7页
目的:探讨microRNA let-7b在成人急性淋巴细胞白血病(ALL)的表达及其作用机制,为寻求新的靶向治疗方法提供依据。方法:用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)对ALL患者和非恶性血液病患者骨髓单个核细胞(对照组)中microRNA let-7b启动子区Cp... 目的:探讨microRNA let-7b在成人急性淋巴细胞白血病(ALL)的表达及其作用机制,为寻求新的靶向治疗方法提供依据。方法:用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)对ALL患者和非恶性血液病患者骨髓单个核细胞(对照组)中microRNA let-7b启动子区CpG岛的甲基化状态进行分析;应用实时荧光定量聚合酶链反应(q PCR)检测其microRNA let-7b的表达水平;5-氮杂-2'-脱氧胞嘧啶核苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-d C,DAC)对成人ALL细胞株MOLT-4进行处理;用MSP对药物处理后细胞内microRNA let-7b启动子区CpG岛的甲基化状态进行分析;应用q PCR检测药物处理后细胞内microRNA let-7b的表达水平,探讨microRNA let-7b表达的调控机制。结果:ALL患者microRNA let-7b启动子区CpG岛的甲基化率明显高于非恶性血液病患者,其microRNA let-7b的相对表达量明显降低;5-aza-d C能够显著地抑制MOLT-4细胞株的生长,使细胞周期停滞于G1期,抑制细胞RNA和蛋白质的生物合成,促进细胞发生凋亡,与此同时,能上调microRNA let-7b的表达。结论:在ALL患者中microRNA let-7b的表达受基因组启动子区CpG岛甲基化修饰的调控,microRNA let-7b可能作为抑癌基因,其低表达可能参与ALL的发生、发展,提示microRNA let-7b可能成为治疗ALL的新靶向。 展开更多
关键词 急性淋巴细胞白血病 microrna let-7b 表观遗传学 甲基化
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微小RNA Let-7b靶向CD147对大鼠垂体腺瘤GH3细胞侵袭性的影响 被引量：1
5
作者 谢仕刚 邱鹏 +3 位作者 杨伟 张玉宝 徐同江 徐广明 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期2096-2098,共3页
目的 探寻微小RNA Let-7b（Let-7b）在大鼠垂体腺瘤GH3细胞中的靶基因,并观察其对GH3细胞侵袭性生长的影响.方法 利用TargetScan、PicTar、MiRanda 3种不同的生物信息学方法对靶基因进行筛选;设计Let-7b模拟物（Let-7b mimic）及反义寡... 目的 探寻微小RNA Let-7b（Let-7b）在大鼠垂体腺瘤GH3细胞中的靶基因,并观察其对GH3细胞侵袭性生长的影响.方法 利用TargetScan、PicTar、MiRanda 3种不同的生物信息学方法对靶基因进行筛选;设计Let-7b模拟物（Let-7b mimic）及反义寡核苷酸链序列（AMO）,采用慢病毒转染,分别外源性导入Let-7b mimic以增加Let-7b的表达量、AMO互补结合以阻碍Let-7b功能实现,转染不含有大鼠同源序列的空白病毒为对照组.实时荧光定量核酸扩增检测系统（FQ-PCR）检测各转染组Let-7b表达量的改变;Westen blot检测转染后各组GH3细胞中细胞外基质金属蛋白酶诱导剂（CD147）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）蛋白表达量的改变;Transwell细胞小室侵袭实验研究各组细胞侵袭能力的改变.结果 大鼠GH3细胞中,Let-7b与CD147存在直接的靶向关系,并对CD147、MMP-9蛋白表达及细胞的侵袭能力有明确的抑制作用.转染mimic组的GH3细胞Let-7b的表达量是空白对照组的（9.56±0.51）倍,CD147、MMP-9蛋白表达降低,细胞的侵袭性生长受到抑制,差异有统计学意义（P＜0.05）;转染AMO组的GH3细胞Let-7b的表达为对照组的（0.31±0.01）倍,CD147、MMP-9蛋白表达量增高,细胞的侵袭能力增强,差异有统计学意义（P＜0.05）;对照组与自然生长组Let-7b的表达量、CD147、MMP-9蛋白表达量及细胞侵袭能力差异均无统计学意义（P＞0.05）.结论 Let-7b靶向CD147对GH3细胞的侵袭性有抑制作用. 展开更多
关键词 垂体腺瘤 微小RNA Let-7b 细胞外基质金属蛋白酶诱导剂 基质金属蛋白酶-9
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T2DM患者外周血单个核细胞miR-let-7b表达及其与肾损害的关系
6
作者 谷明军 孙庆 胡建川 《重庆医学》 CAS 2021年第S02期25-28,共4页
目的检测2型糖尿病(T2DM)患者外周血单个核细胞(PBMC)微小核糖核酸-let-7b(miR-let-7b)表达,并分析其与肾损害的关系。方法选取该院91例T2DM患者和86例健康志愿者分别记为研究组和对照组,均采用实时-逆转录荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR... 目的检测2型糖尿病(T2DM)患者外周血单个核细胞(PBMC)微小核糖核酸-let-7b(miR-let-7b)表达,并分析其与肾损害的关系。方法选取该院91例T2DM患者和86例健康志愿者分别记为研究组和对照组,均采用实时-逆转录荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测外周血PBMC miR-let-7b表达并比较两组差异;比较研究组中肾损害发生和未发生者外周血PBMC miR-let-7b表达;分析外周血PBMC miR-let-7b表达与研究组肾损害的关系。结果研究组PBMC miR-let-7b表达水平低于对照组(P<0.05),研究组中肾损害发生率为34.07%,且肾损害发生患者PBMC miR-let-7b表达水平低于未发生患者(P<0.05);研究组肾损害发生者中老年、肥胖、T2DM病程>6年、血尿酸升高、PBMC miR-let-7b表达降低、未严格遵医嘱治疗占比均高于肾损害未发生者(P<0.05),且上述均是研究组肾损害发生的独立危险因素(P<0.05)。结论T2DM患者PBMC miR-let-7b表达低,且肾损害患者中其水平更低,PBMC miR-let-7b表达降低与老年、肥胖等均可增加肾损害的发生风险。 展开更多
关键词 2型糖尿病 外周血单个核细胞 微小核糖核酸-let-7b 肾损害
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成纤维生长因子受体1通过控制微小RNA let-7b表达调节内皮细胞线粒体生源的作用研究 被引量：2
7
作者 胡琼英 杨矫 +1 位作者 陈高莉 陈秋 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期404-409,共6页
目的探索成纤维生长因子受体l（fihrohlast growth factor receptor1，FGFRl）在调控内皮稳态时对上游分子N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸（N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline、AcSDKP）的影响和下游微小RNAlet-7（microR... 目的探索成纤维生长因子受体l（fihrohlast growth factor receptor1，FGFRl）在调控内皮稳态时对上游分子N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸（N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline、AcSDKP）的影响和下游微小RNAlet-7（microRNA let-7、miR let-7）的诱导作用及与内皮细胞线粒体生源的关系，以期最终研究FGFR1在内皮稳态中的调控作用。方法下调FGF／FGFRl信号通路，蛋白质印迹（Western印迹．WB）法和细胞免疫荧光（Immunofluorescence staining）技术检测线粒体融合蛋白MFN2（mitofusin-2）、OPA1（optic atrophy protein1）和分裂蛋白DRP1（dynamin-related protein-1）的表达；应用线粒体染色（MitoTraker Green）检测线粒体的生成；运用实时荧光定量核酸扩增（Real-time Quantitative PCR、qPCR）检测技术检测microRNA let-7的表达。结果FGFRl通过诱导microRNA let-7b一5p的生成促进AcSDKP维持线粒体的生源；AcSDKP修复细胞因子复合物Triple（TGF-β2、IL-1β和TNF-α）所引起microRNA let-7b-5p表达抑制与线粒体的生成密切相关；抑制microRNA let-7b-5p的表达后，AcSDKP失去促进线粒体生成的作用：上调microRNA let-7b-5p的表达后，可修复内皮细胞中因FGF／FGFRl底物FRS2（fibroblast growth factor receptor substrate）沉默所致通路缺失所致的线粒体生成障碍。结论FGFRl通过上调microRNA let-7b-5p的表达，促进线粒体的生成，从而在内皮细胞的稳态中起着十分重要的作用。 展开更多
关键词 成纤维生长因子受体1 成纤维生长因子受体底物2 线粒体生源 微小RNA let-7b-5p
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miR-let-7b-5p靶向调控LIMD2对胃癌细胞间质-上皮转化的影响
8
作者 伍苏娟 汪金燕 牛涛 《中国现代普通外科进展》 CAS 2023年第4期263-266,272,共5页
目的:探究微小RNA(miR)-let-7b-5p靶向调控含LIM域2蛋白(LIMD2)对胃癌(GC)细胞间质-上皮转化(MET)的影响。方法:采用qRT-PCR检测GES-1、SCG-7901、MGC-803、BGC-823细胞中miR-let-7b-5p相对表达水平;构建绿色荧光蛋白(GFP)和miR-let-7b... 目的:探究微小RNA(miR)-let-7b-5p靶向调控含LIM域2蛋白(LIMD2)对胃癌(GC)细胞间质-上皮转化(MET)的影响。方法:采用qRT-PCR检测GES-1、SCG-7901、MGC-803、BGC-823细胞中miR-let-7b-5p相对表达水平;构建绿色荧光蛋白(GFP)和miR-let-7b-5p稳定过表达细胞株,qRT-PCR法检测miR-let-7b-5p过表达效率;生物信息学和双荧光素酶实验预测并验证miR-let-7b-5p与LIMD2靶向关系;构建pcDNA5-LIMD2过表达载体,将细胞分为NC组、miR-let-7b-5p组、miR-let-7b-5p-pcDNA5组和miR-let-7b-5p-LIMD2组,Western Blot检测各组细胞中LIMD2、Vimentin、N-cadherin、E-cadherin蛋白表达;Transwell法检测miR-let-7b-5p对MGC-803细胞侵袭能力的影响。结果:与GES-1相比,SCG-7901、MGC-803、BGC-823细胞中miR-let-7b-5p相对表达水平明显下降(P<0.05)。与NC组相比,miR-let-7b-5p组miR-let-7b-5p相对表达量升高(P<0.05),转染LIMD2-WT的细胞相对荧光素酶活性明显降低(P<0.05),LIMD2、Vimentin、N-cadherin蛋白表达下调(P<0.05),而E-cadherin蛋白表达上调(P<0.05),细胞侵袭个数减少(P<0.05)。与miR-let-7b-5p组相比,miR-let-7b-5p-LIMD2组LIMD2、Vimentin、N-cadherin蛋白表达上调(P<0.05),而E-cadherin蛋白表达下调(P<0.05),细胞侵袭个数增多(P<0.05)。结论:过表达miR-let-7b-5p可靶向下调LIMD2促进胃癌细胞的MET,从而有效改善肿瘤细胞的侵袭。 展开更多
关键词 微小RNA-let-7b-5p 含LIM域2蛋白 胃癌 间质-上皮转化
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