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微小RNA-494通过抑制Survivin诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡 被引量:9
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作者 王礼平 阳东荣 +2 位作者 单玉喜 薛波新 孙承文 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1043-1046,共4页
目的观察微小RNA(miRNA)-494对人前列癌Pc-3细胞中Survivin基因的表达抑制及对Pc-3细胞增殖与凋亡的影响。方法TargetScan5.2预测miRNA-494与SurvivinmRNA配对评分为mjrSVR score:-0.4916、PhastConsscore:0.4876;定量聚合酶链... 目的观察微小RNA(miRNA)-494对人前列癌Pc-3细胞中Survivin基因的表达抑制及对Pc-3细胞增殖与凋亡的影响。方法TargetScan5.2预测miRNA-494与SurvivinmRNA配对评分为mjrSVR score:-0.4916、PhastConsscore:0.4876;定量聚合酶链反应(qPCR)分析PC-3相对于正常前列腺上皮细胞株RWPE-1中miRNA-494的上下调情况;构建过表达miRNA-94的腺病毒载体,应用逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)、Westernblot、噻唑蓝(MTT)法、流式细胞仪分析分别检测感染前后Survivin基因及蛋白的表达差异、细胞增殖及生长周期和凋亡变化。结果miRNA-494在PC-3中的表达为RWPE-1中的(0.547±0.032)倍;Ad—pre—miRNA-494构建成功;实验组细胞增殖抑制呈现时间依赖性;和对照组比较,72h后实验组Survivin蛋白表达为(21.69±4.62)%,与空载体组比较,差异有统计学意义(P〈0.01),流式细胞仪检测结果显示实验组Pc-3细胞G2/M期阻滞率及细胞凋亡率显著增加。结论miRNA-494通过抑制前列腺癌PC-3细胞中Survivin基因的表达而诱导前列腺癌PC-3凋亡。 展开更多
关键词 SURVIVIN 微小RNA-494 前列腺癌 基因治疗
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Insulin-like growth factor 2 mRNA-binding protein 1 promotes cell proliferation via activation of AKT and is directly targeted by microRNA-494 in pancreatic cancer 被引量:8
2
作者 Bai-Shun Wan Ming Cheng Ling Zhang 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2019年第40期6063-6076,共14页
BACKGROUND Studies have shown that insulin-like growth factor 2 mRNA-binding protein 1(IGF2BP1)plays critical roles in the genesis and development of human cancers.AIM To investigate the clinical significance and role... BACKGROUND Studies have shown that insulin-like growth factor 2 mRNA-binding protein 1(IGF2BP1)plays critical roles in the genesis and development of human cancers.AIM To investigate the clinical significance and role of IGF2BP1 in pancreatic cancer.METHODS Expression levels of IGF2BP1 and microRNA-494(miR-494)were mined based on Gene Expression Omnibus datasets and validated in both clinical samples and cell lines by quantitative real-time polymerase chain reaction and Western blot.The relationship between IGF2BP1 expression and clinicopathological factors of pancreatic cancer patients was analyzed.The effect and mechanism of IGF2BP1 on pancreatic cancer cell proliferation were investigated in vitro and in vivo.Analyses were performed to explore underlying mechanisms of IGF2BP1 upregulation in pancreatic cancer and assays were carried out to verify the posttranscriptional regulation of IGF2BP1 by miR-494.RESULTS We found that IGF2BP1 was upregulated and associated with a poor prognosis in pancreatic cancer patients.We showed that downregulation of IGF2BP1 inhibited pancreatic cancer cell growth in vitro and in vivo via the AKT signaling pathway.Mechanistically,we showed that the frequent upregulation of IGF2BP1 was attributed to the downregulation of miR-494 expression in pancreatic cancer.Furthermore,we discovered that reexpression of miR-494 could partially abrogate the oncogenic role of IGF2BP1.CONCLUSION Our results revealed that upregulated IGF2BP1 promotes the proliferation of pancreatic cancer cells via the AKT signaling pathway and confirmed that the activation of IGF2BP1 is partly due to the silencing of miR-494. 展开更多
关键词 PANCREATIC cancer INSULIN-LIKE growth factor 2 mRNA-binding protein 1 Proliferation microrna-494
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血清miR-494表达水平预测心脏术后AKI患儿的预后价值 被引量:7
3
作者 吴日暖 吴用 +2 位作者 杨丽霞 邓颖云 陈东旭 《中华危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1469-1473,共5页
目的探讨血清微小RNA-494(miR-494)表达水平对心脏术后急性肾损伤(AKI)患儿的预后预测价值.方法选择2016年1月至2019年3月三亚市人民医院收治的116例先天性心脏病(先心病)体外循环手术后并发AKI的患儿.所有患儿均于术后采用实时荧光定... 目的探讨血清微小RNA-494(miR-494)表达水平对心脏术后急性肾损伤(AKI)患儿的预后预测价值.方法选择2016年1月至2019年3月三亚市人民医院收治的116例先天性心脏病(先心病)体外循环手术后并发AKI的患儿.所有患儿均于术后采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测血清miR-494表达,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)及肾损伤分子-1(KIM-1)水平.根据28 d预后将患儿分为存活组和死亡组,比较两组患儿一般资料及血清miR-494、NGAL、KIM-1水平.采用多因素Logistic回归分析心脏术后AKI患儿死亡的危险因素;受试者工作特征曲线(ROC)分析血清miR-494、NGAL及KIM-1水平预测心脏术后AKI患儿预后的价值;Pearson相关性分析血清miR-494表达水平与NGAL、KIM-1的相关性.结果116例先心病体外循环手术后并发AKI患儿28 d死亡27例,存活89例.与存活组比较,死亡组患儿紫绀比例显著升高,血液灌流比例显著下降,体外循环时间、术后机械通气时间明显延长,术后血糖水平明显升高,其他一般资料差异无统计学意义.死亡组血清miR-494、NGAL及KIM-1水平均明显高于存活组〔miR-494(2^-ΔΔCt):3.75±1.28比1.48±0.71,NGAL(mg/L):583.60±52.72比320.52±31.84,KIM-1(μg/L):30.53±6.38比17.40±3.72,均P<0.01〕.多因素Logistic回归分析显示,紫绀〔优势比(OR)=1.716,95%可信区间(95%CI)为1.184~2.982,P=0.039〕、术后血糖(OR=1.925,95%CI为1.262~3.387,P=0.005)、血清miR-494(OR=2.527,95%CI为1.706~5.148,P<0.001)、NGAL(OR=2.473,95%CI为1.620~4.935,P<0.001)及KIM-1(OR=1.805,95%CI为1.213~3.106,P<0.001)升高是心脏术后AKI患儿死亡的独立危险因素.ROC曲线分析显示,血清miR-494、NGAL及KIM-1均可预测心脏术后AKI患儿死亡,ROC曲线下面积(AUC)分别为0.868、0.857、0.819;三者联合预测心脏术后AKI患儿死亡的AUC最大,为0.964(95%CI为0.908~0.997),其敏感度为97.0%,特异度为91.8%.相关性分析 展开更多
关键词 急性肾损伤 心脏手术 儿童 微小RNA-494 预后预测
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老年帕金森病患者血清miR-124、miR-494表达及其临床意义 被引量:4
4
作者 李江涛 尹永锋 +4 位作者 王润青 张平 赵杰 刘荣丽 陈园园 《中华行为医学与脑科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期294-298,共5页
目的探讨老年帕金森病(Parkinson disease,PD)患者血清微小RNA-124(miR-124)、微小RNA-494(miR-494)表达水平及其临床意义。方法选取2018年3月~2020年4月在郑州大学附属郑州中心医院住院治疗的90例PD患者(PD组);同期选择在医院体检中心... 目的探讨老年帕金森病(Parkinson disease,PD)患者血清微小RNA-124(miR-124)、微小RNA-494(miR-494)表达水平及其临床意义。方法选取2018年3月~2020年4月在郑州大学附属郑州中心医院住院治疗的90例PD患者(PD组);同期选择在医院体检中心检查且与PD患者年龄、性别相匹配的100名非PD老年人作对照组。所有研究对象空腹12 h后取清晨静脉血4 ml,采用帕金森等级量表(unified Parkinson disease rating scale,UPDRS)对所有PD组患者从精神状态、行为和情感、生活质量、运动检查进行评分,利用帕金森病Hoehn-Yahr分级量表对PD患者进行分级;利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测血清miR-124和miR-494表达水平;作ROC曲线判断miR-124、miR-494对PD患者的诊断价值。结果UPDRS评分≤60分的PD患者Hoehn-Yahr分级明显低于UPDRS>60分的患者[(2.47±0.43)分,(3.42±0.47)分],差异有统计学意义(t=9.055,P<0.001),但血清miR-124、miR-494表达水平差异无统计学意义[miR-124:(0.72±0.14),(0.70±0.12);miR-494:(1.17±0.19),(1.18±0.22)](t=0.633,0.230,P=0.529,0.819);与对照组相比,PD组血清miR-124表达下调[(0.71±0.20),(1.05±0.24)],miR-494表达上调[(1.18±0.26),(0.96±0.22)](t=10.542,6.315,均P<0.001);ROC曲线结果显示,血清miR-124、miR-494诊断PD的曲线下面积(AUC)分别为0.847,0.760,截断值分别为0.901,1.126,灵敏度分别为86.67%、61.11%,特异度分别为75.03%、79.00%;二者联合诊断PD的AUC为0.898,灵敏度和特异度分别为85.56%、85.00%。结论PD患者血清miR-124呈低表达,miR-494呈高表达,提示二者的水平变化可能与PD的发生、发展有关。二者均对PD有一定的诊断价值,且联合诊断价值更高。 展开更多
关键词 帕金森病 老年人 微小RNA-124 微小RNA-494 诊断价值
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成骨细胞来源的外泌体介导微小RNA-494影响骨质疏松症大鼠骨代谢与骨重建平衡
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作者 林维 李超艺 +1 位作者 唐捷 张丕军 《解剖学报》 CAS CSCD 2024年第3期302-310,共9页
目的探讨成骨细胞来源的外泌体(Exo)中微小RNA(miR)-494对骨质疏松症(OP)大鼠骨代谢与骨重建平衡的影响及其机制。方法从MC3T3-E1成骨细胞系中分离鉴定Exo,并将miR-494电转至Exo,Real-time PCR测定miR-494表达水平。40只SD大鼠随机分为... 目的探讨成骨细胞来源的外泌体(Exo)中微小RNA(miR)-494对骨质疏松症(OP)大鼠骨代谢与骨重建平衡的影响及其机制。方法从MC3T3-E1成骨细胞系中分离鉴定Exo,并将miR-494电转至Exo,Real-time PCR测定miR-494表达水平。40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、miR-494模拟剂(miR-494)组和miR-494抑制剂组,每组10只。除对照组外,其余3组大鼠切除卵巢构建OP模型。模型制作成功后,miR-494组与miR-494抑制剂组分别接受含相应miRNA的Exo尾静脉注射,剂量为3×10^(9)个微粒。4周后,Micro-CT检测各组大鼠的骨参数,ELISA测定血清骨标志物,HE染色观察骨组织病理变化,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)染色检测破骨细胞数量,Western blotting测定骨重建相关蛋白及Toll样受体4(TLR4)相关通路蛋白表达水平。结果成功从MC3T3-E1细胞中分离得到典型杯状或圆形,直径约100 nm的Exo,其含有CD63、CD9、肿瘤易感性基因101(TSG101)、热休克蛋白70(HSP70)蛋白,且能被MC3T3-E1细胞摄取。经电转处理后,miR-494模拟剂和miR-494抑制剂的Exo中miR-494的相对表达量明显升高和降低(P<0.05)。与模型组相比,miR-494组大鼠骨参数降低,血清骨标志物骨钙蛋白(BGP)、TRACP、Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)升高,骨保护蛋白(OPG)、Ⅰ型前胶原N端肽(PⅠNP)降低,骨小梁结构紊乱,破骨细胞增加,骨组织内骨形态发生蛋白2(BMP-2)、Runt相关转录因子2(RUNX2)下调,核因子κB受体激活剂配体(RANKL)上调,TLR4、核因子κB(NF-κB)p65及髓样分化主要响应蛋白88(MyD88)上调(P<0.05)。而miR-494抑制剂组情况则相反,骨参数和OPG、PⅠNP升高,BGP、TRACP、CTX-Ⅰ降低,骨结构恢复正常,破骨细胞减少,骨组织内BMP-2、RUNX2上调,RANKL下调,TLR4、NF-κB p65及MyD88下调(均P<0.05)。结论Exo传递miR-494可加重OP大鼠骨代谢异常,并抑制骨重建平衡,推测其作用机制可能与调控TLR4通路有关。 展开更多
关键词 骨质疏松症 微小RNA-494 外泌体 骨代谢 骨重建平衡 实时定量聚合酶链反应 免疫印迹法 大鼠
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微小RNA-494对促进脊髓损伤后功能恢复和抑制细胞凋亡的研究 被引量:4
6
作者 顾士欣 顾文韬 +2 位作者 刘晓东 寿佳俊 车晓明 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期483-485,共3页
目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-494在脊髓损伤中的作用及其意义。方法应用脊髓表面挫伤的方法建立大鼠脊髓损伤模型。分为1个假损伤对照组和5个脊髓损伤组,每组5只大鼠(购自复旦大学实验动物中心)。用miRNA芯片分析脊髓损伤后不同时间miRN... 目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-494在脊髓损伤中的作用及其意义。方法应用脊髓表面挫伤的方法建立大鼠脊髓损伤模型。分为1个假损伤对照组和5个脊髓损伤组,每组5只大鼠(购自复旦大学实验动物中心)。用miRNA芯片分析脊髓损伤后不同时间miRNA的表达。用agomiR-494鞘内治疗后,评定大鼠运动功能。正态性采用Shapiro-Wilk正态检验,组间差异采用单因素方差分析和双侧t检验。结果与假损伤对照组比较,有14个miRNA上调,有46个miRNA下调2倍,而miR-494是最显著下调的miRNA之一。与单纯SCI组比较,agomiR-494鞘内治疗后的SCI+agomiR-494组,大鼠运动功能明显改善,剩余组织(甲酚紫染色评估)增多,TUNEL阳性细胞减少。agomiR-494对miR-494的上调可促进脊髓损伤后大鼠的功能恢复,减小病变大小并抑制凋亡细胞。脊髓组织中miR-494的表达与第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)的表达呈负相关(r=-0.834,P<0.05)。此外,miR-494通过直接靶向BV-2细胞中的3’端非编码区(3’UTR)来抑制蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)途径的负调节剂PTEN。结论在大鼠脊髓损伤模型中miR-494的过表达通过抑制PTEN的表达来激活Akt/mTOR信号通路,对脊髓损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 脊髓损伤 微小RNA-494 第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路
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microRNA-494通过TLR-4通路抑制成骨细胞分化及基质矿化的分子机制 被引量:3
7
作者 匡嘉兵 徐昊 +2 位作者 张克良 沈波 许闫严 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第10期55-60,共6页
目的探讨microRNA-494(miR-494)通过Toll样受体-4(TLR-4)通路抑制成骨细胞分化及基质矿化的分子机制。方法选用小鼠成骨细胞株MC3T3-E1作为体外模型,采用miR-494 mimic转染小鼠成骨细胞株MC3T3-E1,采用qRT-PCR法测定miR-494在小鼠成骨... 目的探讨microRNA-494(miR-494)通过Toll样受体-4(TLR-4)通路抑制成骨细胞分化及基质矿化的分子机制。方法选用小鼠成骨细胞株MC3T3-E1作为体外模型,采用miR-494 mimic转染小鼠成骨细胞株MC3T3-E1,采用qRT-PCR法测定miR-494在小鼠成骨细胞株MC3T3-E1转染前后的表达情况;通过MTT法检测转染前后小鼠成骨细胞株MC3T3-E1的增殖情况;通过测定碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,研究小鼠成骨细胞株MC3T3-E1的分化情况;通过骨钙素(osteocalcin,OC)定量检测分析和Von Kossa钙化染色检测小鼠成骨细胞株MC3T3-E1的基质矿化情况;通过Western blot等检测转染前后TLR-4蛋白的表达差异。结果 qRT-PCR测定结果显示,与阴性对照组相比,小鼠成骨细胞株MC3T3-E1转染后的miR-494的mRNA的表达量升高(P<0.05),说明miR-494 mimic转染小鼠成骨细胞株MC3T3-E1,成功使miR-494过表达。与阴性对照组相比,经过miR-494 mimic转染后,小鼠成骨细胞株MC3T3-E1的增殖能力受到抑制(P<0.05)。转染后的小鼠成骨细胞株MC3T3-E1中ALP的活性降低(P<0.05)。同时,转染后的小鼠成骨细胞株MC3T3-E1中OC的活性显著降低(P<0.05),矿化结节的数目、减少(P<0.05)。Western blot结果显示,与阴性对照组相比,miR-494 mimic转染组细胞中的TLR-4蛋白表达量显著升高(P<0.05)。结论 miR-494能够通过TLR-4通路抑制小鼠成骨细胞株MC3T3-E1的增殖活力,降低细胞中ALP、OC的活力,减少成骨细胞中的矿化结节数,抑制成骨细胞分化及基质矿化。 展开更多
关键词 microrna-494 成骨细胞 基质矿化 TLR-4
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microRNA-494对大鼠肾间质成纤维细胞分泌细胞外基质的调控作用 被引量:3
8
作者 林海霞 苏震 +1 位作者 舒丹桦 何立梅 《温州医学院学报》 CAS 2015年第3期162-165,170,共5页
目的:探讨microRNA-494(miR-494)对转化生长因子β1(TGF-β1)刺激后大鼠肾间质成纤维细胞(NRK-49F)细胞外基质分泌的调控作用。方法:体外培养NRK-49F细胞株,并分为以下6组:TGF-β1(3ng/m L)组、miR-494模拟物(50ng/m L)组、miR-494抑制... 目的:探讨microRNA-494(miR-494)对转化生长因子β1(TGF-β1)刺激后大鼠肾间质成纤维细胞(NRK-49F)细胞外基质分泌的调控作用。方法:体外培养NRK-49F细胞株,并分为以下6组:TGF-β1(3ng/m L)组、miR-494模拟物(50ng/m L)组、miR-494抑制物(50ng/mL)组、miR-494模拟物(50ng/m L)+TGF-β1(3ng/m L)组、miR-494抑制物(50ng/m L)+TGF-β1(3ng/m L)组、空白对照组。茎环实时荧光定量PCR(RTqPCR)检测细胞miR-494、胶原蛋白I(ColI)、纤维连接蛋白(FN)mRNA;WesternBlot法检测细胞ColI蛋白。结果:与空白对照组比较,TGF-β1组miR-494(P<0.01)、ColI mRNA(P<0.05)及FN(P<0.01)mRNA表达显著升高;miR-494模拟物组ColI、FN mRNA表达显著升高(P<0.05);miR-494抑制物组ColI(P<0.05)、FN(P<0.01)mRNA表达显著降低。与TGF-β1组比较,miR-494模拟物+TGF-β1组ColI、FN mRNA表达显著升高(P<0.05);mi R-494抑制物+TGF-β1组ColI、FN mRNA表达显著降低(P<0.05)。各组间ColI蛋白与ColI mRNA的表达水平相一致。结论:miR-494可能参与调控并促进TGF-β1诱导肾间质成纤维细胞的细胞外基质分泌。 展开更多
关键词 肾间质纤维化 microrna-494 转化生长因子-Β1
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MicroRNA-494参与多种疾病发生发展的分子机制研究进展 被引量:3
9
作者 李广文 赵海苹 罗玉敏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1909-1915,共7页
微小 RNA ( microRNA, miRNA, miR )是一种由20~22个核苷酸组成的内源性非编码小分子单链RNA,它可以在后转录水平通过以完全互补或不完全互补的形式与mRNA的3' UTR区结合调控细胞增殖、分化及凋亡等多个生理病理过程。其中, miR... 微小 RNA ( microRNA, miRNA, miR )是一种由20~22个核苷酸组成的内源性非编码小分子单链RNA,它可以在后转录水平通过以完全互补或不完全互补的形式与mRNA的3' UTR区结合调控细胞增殖、分化及凋亡等多个生理病理过程。其中, miR-494是一种来源于染色体14q32.31的 mi-RNA。近年来的研究发现miR-494参与人体多个生理及疾病的发生发展过程,在肿瘤、缺血缺氧疾病中其表达水平发生上调或下调。本文就miR-494在多种疾病中的表达变化、作用及机制研究进行综述。 展开更多
关键词 微小RNA-494 肿瘤 缺血 缺氧
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MicroRNA-494通过下调Survivin诱导神经胶质瘤细胞凋亡 被引量:3
10
作者 殷俊 陈磊 +1 位作者 翟国锁 朱少锋 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期984-988,共5页
目的:观察microRNA-494(miR-494)对人神经胶质瘤SNB19和LN229细胞中Survivin的表达调控及对细胞增殖和凋亡的影响。方法:收集12例神经胶质瘤及瘤旁组织,运用qRT-PCR技术检测miR-494在神经胶质瘤及瘤旁组织中的表达情况;应用miR-494 mimi... 目的:观察microRNA-494(miR-494)对人神经胶质瘤SNB19和LN229细胞中Survivin的表达调控及对细胞增殖和凋亡的影响。方法:收集12例神经胶质瘤及瘤旁组织,运用qRT-PCR技术检测miR-494在神经胶质瘤及瘤旁组织中的表达情况;应用miR-494 mimic转染人神经胶质瘤细胞系SNB19和LN229,通过qRT-PCR、Western blot、MTT和流式细胞仪检测转染前后Survivin mRNA及蛋白的表达差异以及细胞增殖和细胞凋亡变化。结果:miR-494在神经胶质瘤组织中的表达低于对应的瘤旁组织(t=13.78,P=0.000);SNB19和LN229细胞株中过表达miR-494明显下调Survivin mRNA及蛋白表达,并导致细胞增殖活力降低和细胞凋亡增加。结论:神经胶质瘤组织中miR-494表达下调,其可能通过下调Survivin表达而诱导神经胶质瘤SNB19和LN229细胞凋亡。 展开更多
关键词 microrna-494 神经胶质瘤 凋亡 增殖 SURVIVIN
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脓毒症并发ARDS患儿血清miR-424和miR-494表达变化及其临床意义 被引量:1
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作者 曹利芳 伍平 《山东医药》 CAS 2023年第13期24-27,共4页
目的探讨脓毒症并发急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患儿血清微小RNA-424(miR-424)、微小RNA-494(miR-494)表达变化及其临床意义。方法选择脓毒症并发ARDS患儿213例(并发ARDS组),病情程度:轻度54例、中度86例、重度73例,住院28天内临床结局:死... 目的探讨脓毒症并发急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患儿血清微小RNA-424(miR-424)、微小RNA-494(miR-494)表达变化及其临床意义。方法选择脓毒症并发ARDS患儿213例(并发ARDS组),病情程度:轻度54例、中度86例、重度73例,住院28天内临床结局:死亡62例、存活151例。同期另选单纯脓毒症患儿45例(单纯脓毒症组)、体检健康儿童42例(对照组)。所有研究对象入组后采集外周静脉血,离心留取血清,采用RT-qPCR法检测血清miR-424、miR-494表达。比较三组血清miR-424、miR-494表达以及不同病情程度脓毒症并发ARDS患儿血清miR-424、miR-494表达。分析脓毒症并发ARDS患儿血清miR-424、miR-494表达与氧指数(OI)的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-424、miR-494表达对脓毒症并发ARDS患儿预后不良的预测价值。结果对照组、单纯脓毒症组、并发ARDS组血清miR-424相对表达量依次降低,血清miR-494相对表达量依次升高(P均<0.01)。随着脓毒症并发ARDS患儿病情加重,血清miR-424相对表达量逐渐降低,血清miR-494相对表达量逐渐升高(P均<0.01)。213例脓毒症并发ARDS患儿OI为13.42(7.96,17.46)。Spearman相关分析显示,脓毒症并发ARDS患儿血清miR-424相对表达量与OI呈负相关关系(r=-0.715,P<0.01),血清miR-494相对表达量与OI呈正相关关系(r=0.779,P<0.01)。ROC曲线分析显示,血清miR-424、miR-494表达预测脓毒症并发ARDS患儿预后不良的曲线下面积分别为0.793(95%CI:0.732~0.845)、0.795(95%CI:0.734~0.847),二者联合预测脓毒症并发ARDS患儿预后不良的曲线下面积为0.906(95%CI:0.858~0.941)。血清miR-424、miR-494表达联合预测脓毒症并发ARDS患儿预后不良的曲线下面积显著高于血清miR-424、miR-494表达单独(Z分别为4.051、4.065,P均<0.01)。结论脓毒症并发ARDS患儿血清miR-424低表达、血清miR-494高表达,二者表达变化与脓毒症并发ARDS病情加重密切相关;miR-424、miR-494有可能成为� 展开更多
关键词 脓毒症 急性呼吸窘迫综合征 微小RNA-424 微小RNA-494 儿童
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MicroRNA-494参与多种神经系统疾病发生发展的分子机制研究进展 被引量:3
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作者 李芳芳 赵海苹 罗玉敏 《中风与神经疾病杂志》 CAS 2018年第2期181-183,共3页
MicroRNA(miRNA)是一种长度约为22个核苷酸的非编码单链小RNA,最早于1993年Lee等研究线虫发育时发现,随后在果蝇、小鼠、人类、植物等基因组中发现了更多的此类RNA,这些RNA均为内源性表达的长度约为22个核苷酸的小RNA,被称为miRNA。Mi... MicroRNA(miRNA)是一种长度约为22个核苷酸的非编码单链小RNA,最早于1993年Lee等研究线虫发育时发现,随后在果蝇、小鼠、人类、植物等基因组中发现了更多的此类RNA,这些RNA均为内源性表达的长度约为22个核苷酸的小RNA,被称为miRNA。MiRNA主要在后转录水平通过不完全或完全互补形式与mRNA 3’UTR结合从而降解mRNA或抑制其翻译。虽然miRNA仅占细胞总RNA的一小部分,但成熟miRNA的拷贝数通常远远超过其互补的mRNA的拷贝数, 展开更多
关键词 神经系统疾病 microrna-494 胶质瘤细胞 研究进展
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外周血miR-494及Let-7e在诊断急性缺血性脑卒中患者中的临床价值 被引量:2
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作者 包元飞 王新 王玲玲 《临床与病理杂志》 2016年第12期2028-2032,共5页
目的:通过检测急性缺血性脑卒中患者与正常对照组外周血中miR-494及Let-7e的表达水平,探讨其与急性缺血性脑卒中的关系。方法:收集67例急性缺血性脑卒中患者及50例非卒中正常健康人群,采用实时荧光定量PCR法(Quantitative Real-time PCR... 目的:通过检测急性缺血性脑卒中患者与正常对照组外周血中miR-494及Let-7e的表达水平,探讨其与急性缺血性脑卒中的关系。方法:收集67例急性缺血性脑卒中患者及50例非卒中正常健康人群,采用实时荧光定量PCR法(Quantitative Real-time PCR,QRT-PCR)检测血浆中miR-494及Let-7e表达水平,比较两组外周血中表达水平的差异。并对miR-494及Let-7e行ROC曲线分析,分析其对急性缺血性脑卒中的诊断价值。进一步将急性缺血性脑卒中患者分为预后不佳组(MRS 3-6)和预后良好组(MRS0-2),分析其在两组之间的差异。结果:急性缺血性脑卒中患者外周血中的miR-494(1.71±1.14)及Let-7e(1.43±0.93)的表达水平较正常对照组外周血明显升高(P<0.05)。miR-494及Let-7e ROC曲线下面积分别为0.777、0.756。预后不良组的miR-494(2.04±0.11 vs.1.46±0.05)及Let-7e(1.68±0.61 vs.1.24±0.27)表达水平均较预后良好组显著升高,两组之间有统计学差异(P<0.05)。结论:miR-494及Let-7e可能与急性缺血性脑卒中相关,对急性缺血性脑卒中患者的临床诊断和预后判断具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 缺血性脑卒中 miR-494 LET 7e 实时荧光定量PCR法 MRS评分
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Ad-pre-microRNA-494抑制Survivin对膀胱癌UM-UC-3细胞的凋亡诱导作用 被引量:1
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作者 王礼平 卢晓明 +6 位作者 阳东荣 李兰 王进峰 周国洋 尹九湖 刘亚东 董彬彬 《现代泌尿生殖肿瘤杂志》 2018年第1期43-47,共5页
目的观察腺病毒载体Ad-pre-microRNA-494抑制Survivin表达对人膀胱尿路上皮癌UM-UC-3细胞周期及凋亡的影响。方法使用已构建的腺病毒载体Ad-pre-microRNA-494感染人膀胱尿路上皮癌UM-UC-3细胞,采用RT-PCR法、Western blot法、流式细胞... 目的观察腺病毒载体Ad-pre-microRNA-494抑制Survivin表达对人膀胱尿路上皮癌UM-UC-3细胞周期及凋亡的影响。方法使用已构建的腺病毒载体Ad-pre-microRNA-494感染人膀胱尿路上皮癌UM-UC-3细胞,采用RT-PCR法、Western blot法、流式细胞计数法检测感染前后Survivin基因及蛋白的表达差异和细胞生长周期及凋亡情况。结果实验组细胞与空病毒载体组细胞相比较,Survivin基因表达下调,细胞凋亡率显著增加(P<0.01)。结论 Ad-premicroRNA-494能有效抑制UM-UC-3细胞中Survivin基因表达,从而诱导UM-UC-3细胞凋亡,这为下一步的动物实验研究奠定了基础。 展开更多
关键词 膀胱癌 SURVIVIN microrna-494 基因治疗
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miR-494和ATF3 mRNA在脑膜瘤组织中的表达关系及意义 被引量:1
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作者 王刚 张金仿 +3 位作者 张茜 高琰 董益鹏 吴涛 《疑难病杂志》 CAS 2021年第8期785-789,共5页
目的分析微小RNA-494(miR-494)、激活转录因子3信使RNA(ATF3 mRNA)在脑膜瘤组织中的表达及其意义。方法选取2013年10月—2018年1月于首都医科大学附属北京友谊医院神经外科脑膜瘤切除患者79例为脑膜瘤组,另取因脑外伤切除脑组织患者79... 目的分析微小RNA-494(miR-494)、激活转录因子3信使RNA(ATF3 mRNA)在脑膜瘤组织中的表达及其意义。方法选取2013年10月—2018年1月于首都医科大学附属北京友谊医院神经外科脑膜瘤切除患者79例为脑膜瘤组,另取因脑外伤切除脑组织患者79例为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测2组miR-494、ATF3 mRNA表达水平;分析脑膜瘤组织miR-494、ATF3 mRNA表达水平与脑膜瘤患者临床病理特征及预后的关系;Pearson法分析脑膜瘤组织miR-494表达水平与ATF3 mRNA的相关性;COX回归分析脑膜瘤患者预后的影响因素。结果脑膜瘤组miR-494、ATF3 mRNA表达水平均显著高于对照组(t/P=7.038/0.000、8.271/0.000)。脑膜瘤组织miR-494、ATF3 mRNA低表达亚组有淋巴结转移、WHO分级Ⅲ级、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期患者比例低于高表达亚组(miR-494:χ^(2)/P=5.346/0.021、6.627/0.010、12.381/0.000;ATF3 mRNA:χ^(2)/P=12.868/0.000、14.799/0.000、12.166/0.000);脑膜瘤组织miR-494表达水平与ATF3 mRNA水平呈正相关(r/P=0.578/0.000);脑膜瘤患者miR-494、ATF3 mRNA低表达亚组术后36个月累积生存率分别明显高于miR-494、ATF3 mRNA高表达亚组(χ^(2)/P=21.798/0.019、13.015/0.000)。多因素分析结果显示,发生淋巴结转移、TNM分期增加及miR-494、ATF3 mRNA表达水平升高是影响脑膜瘤患者预后的独立危险因素[OR(95%CI)=2.572(1.582~4.182)、2.463(1.554~3.904)、2.257(1.478~3.447)、2.385(1.547~3.678)]。结论脑膜瘤组织中miR-494、ATF3 mRNA表达水平显著升高,两者可能相互作用共同影响脑膜瘤发生发展,检测miR-494、ATF3 mRNA水平有利于判定患者预后情况。 展开更多
关键词 脑膜瘤 微小RNA-494 激活转录因子3 预后
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微小RNA-494通过抑制第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因的表达促进乳腺癌MCF-7细胞的增殖和转移 被引量:1
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作者 敖翔 周婕 +3 位作者 梁红玲 何伟星 韩国栋 李洪胜 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2691-2694,共4页
目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-494对乳腺癌细胞MCF-7的增殖和转移的调控作用以及机制.方法 在乳腺癌细胞株MCF-7转染miR-494模拟物及抑制剂、阴性对照,然后采用噻唑蓝(MTT)方法检测miR494对MCF-7细胞活力的影响,并通过Transwell转... 目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-494对乳腺癌细胞MCF-7的增殖和转移的调控作用以及机制.方法 在乳腺癌细胞株MCF-7转染miR-494模拟物及抑制剂、阴性对照,然后采用噻唑蓝(MTT)方法检测miR494对MCF-7细胞活力的影响,并通过Transwell转移实验检测miR-494对MCF-7转移能力的影响.通过双荧光素酶实验检测miR-494的靶基因,并且用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot进行验证.结果 转染miR-494 mimics后,细胞活力明显提高,24 h细胞活力比值为1.28,48 h后为1.80,(P<0.05),转染miR-494 inhibitor后,细胞活力显著下调,24h细胞活力比值为0.80,48 h后为0.68(P <0.05).对照组细胞均数为67个/视野,转染miR-494mimics后的MCF-7细胞的均数为:122个/视野(P<0.05),转染miR-494 inhibitor后的MCF-7细胞的均数为:47个/视野(P<0.01).野生型载体模拟物组相对荧光素酶活性:0.69(P<0.01),抑制剂组:1.90(P<0.01);突变型载体模拟物组相对荧光素酶活性:1.09,抑制剂组:1.19.miR-494过表达后PTEN的mRNA和蛋白水平确实出现明显下降,相反地,miR-494的抑制却导致PTEN蛋白水平和mRNA水平的上调.结论 高表达miR-494可显著促进乳腺癌细胞株MCF-7的增殖与转移能力,抑制miR-494可显著降低MCF-7的增殖与转移能力,并且证实miR-494是通过靶向第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)的3'端非编码区域(3'-UTR)来调节乳腺癌细胞株MCF-7的增殖和转移能力. 展开更多
关键词 微小RNA-494 乳腺癌
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微小RNA-494通过调节生存素表达对骨肉瘤凋亡和侵袭的调控作用 被引量:1
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作者 张翼 张岩 +3 位作者 刘宏建 卢新昌 吴学建 李甲振 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1508-1510,共3页
目的观察微小RNA(miRNA,miR)-494通过调节生存素(Snrvivin)对骨肉瘤MG-63细胞增殖、凋亡及侵袭的影响。方法miR-494体外模拟物(mimic)转染,构建miR-494上调表达模型,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法验证转染效果;细... 目的观察微小RNA(miRNA,miR)-494通过调节生存素(Snrvivin)对骨肉瘤MG-63细胞增殖、凋亡及侵袭的影响。方法miR-494体外模拟物(mimic)转染,构建miR-494上调表达模型,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法验证转染效果;细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖率变化;流式细胞技术检测细胞凋亡率变化;细胞体外侵袭试验检测细胞侵袭能力变化;Real-time PCR法和Western blot实验分别检测Survivin mRNA和蛋白表达水平。结果miR-494 mimic转染后,MG-63细胞中miR-494表达水平(4.38±0.53)较对照组(1.02±0.02)明显升高(t=6.312,P=0.003),miR-494mimic转染后24h及48h后细胞相对存活率均明显低于对照组,流式细胞仪结果显示mimic组细胞凋亡率[(8.76±0.82)%]较对照组[(5.43±0.63)%]明显提高(t=3.199,P=0.032),体外侵袭实验证实mimic组每视野下平均细胞数[(60.40±11.28)个]明显少于NC组[(109.51±7.46)个,t=3.628,P=0.022],Real-time PCR和Western blot实验分别证实miR-494 mimic转染后,Survivin在mRNA和蛋白水平表达均明显抑制。结论miR-494表达上调可以抑制骨肉瘤细胞增殖和侵袭能力,诱导细胞凋亡,这些作用与下调Survivin表达有关。 展开更多
关键词 骨肉瘤 微小RNA494 生存素 增殖 凋亡 侵袭
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表达生存素相关microRNA-494基因腺病毒载体的构建
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作者 王礼平 阳东荣 +2 位作者 单玉喜 薛波新 孙承文 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1244-1246,共3页
目的构建表达生存素(survivin)相关microRNA-494基因的重组腺病毒载体。方法应用生物学软件Targetscan 5.2对microRNA-494基因与survivin mRNA作相关性分析。RT-PCR调取目的基因,将其连接线性化后的穿梭质粒载体,联合骨架质粒转染入293... 目的构建表达生存素(survivin)相关microRNA-494基因的重组腺病毒载体。方法应用生物学软件Targetscan 5.2对microRNA-494基因与survivin mRNA作相关性分析。RT-PCR调取目的基因,将其连接线性化后的穿梭质粒载体,联合骨架质粒转染入293细胞后同源重组产生重组腺病毒载体。PCR及测序验证重组质粒,荧光显微镜下观察腺病毒荧光蛋白表达。结果重组腺病毒载体构建成功。结论成功构建了重组腺病毒载体,可用于研究其在前列腺癌PC-3细胞中对survivin基因表达的影响。 展开更多
关键词 腺病毒载体 生存素 microrna-494
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环状RNA circ-TNRC6A靶向miR-494-3p抑制膀胱癌细胞增殖和迁移
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作者 翁彪 唐迪 +1 位作者 彭善君 李洋 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第11期1289-1294,共6页
目的探讨环状RNA circ-TNRC6A在膀胱癌组织中的表达水平及其调控膀胱癌细胞增殖和迁移的作用机制。方法采用癌症基因组图谱数据库分析circ-TNRC6A在膀胱癌组织中的表达水平及其与膀胱癌患者临床分期的关系。实时荧光定量PCR(qPCR)分析ci... 目的探讨环状RNA circ-TNRC6A在膀胱癌组织中的表达水平及其调控膀胱癌细胞增殖和迁移的作用机制。方法采用癌症基因组图谱数据库分析circ-TNRC6A在膀胱癌组织中的表达水平及其与膀胱癌患者临床分期的关系。实时荧光定量PCR(qPCR)分析circ-TNRC6A在人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1和膀胱癌细胞系(MGH-U3、5637、RT-4、T24、J82)中的表达水平。在膀胱癌5637细胞中分别转染circ-TNRC6A质粒(circ-TNRC6A组)和对照质粒(NC组),细胞克隆形成实验和细胞划痕实验分别检测circ-TNRC6A对膀胱癌细胞增殖和迁移的影响。生物信息学技术预测并采用荧光素酶报告基因实验证实circ-TNRC6A和微小RNA(miR)-494-3p的靶向关系。qPCR检测circ-TNRC6A对miR-494-3p表达的影响。蛋白质印迹法检测circ-TNRC6A对Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路关键蛋白表达的影响。结果与癌旁组织比较,circ-TNRC6A在膀胱癌组织中低表达(P<0.01)。circ-TNRC6A表达水平与膀胱癌患者临床分期有关(P<0.05)。与SV-HUC-1细胞比较,circ-TNRC6A在膀胱癌细胞系中低表达(均P<0.05),5637细胞中circ-TNRC6A表达水平最低(P<0.01)。与NC组比较,过表达circ-TNRC6A可抑制5637细胞的增殖(P<0.01),并降低细胞的迁移能力(P<0.01)。circ-TNRC6A能够靶向结合miR-494-3p(P<0.01)。与NC组比较,过表达circ-TNRC6A组降低miR-494-3p表达水平(P<0.01),并抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活(P<0.01)。结论circ-TNRC6A靶向下调miR-494-3p抑制膀胱癌细胞的增殖和迁移,circ-TNRC6A可能成为膀胱癌新的治疗靶点。 展开更多
关键词 膀胱癌 circ-TNRC6A 微小RNA-494-3p 细胞增殖 细胞迁移
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基于NF-κB/miR-494信号调控MUC5AC和CFTR研究小青龙汤与清气化痰丸改善病理性气道黏液的机制 被引量:4
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作者 彭梦薇 刘燕 +4 位作者 陈玉龙 张艳 桑亚洲 郝羚伦 吴耀松 《中华危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期831-836,共6页
目的观察小青龙汤和清气化痰丸对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的人肺癌细胞H292黏液高分泌模型及核转录因子-κB/微小RNA-494(NF-κB/miR-494)信号通路相关分子的影响,探讨两者改善病理性气道黏液的作用机制。方法采用四甲基偶氮唑盐比色... 目的观察小青龙汤和清气化痰丸对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的人肺癌细胞H292黏液高分泌模型及核转录因子-κB/微小RNA-494(NF-κB/miR-494)信号通路相关分子的影响,探讨两者改善病理性气道黏液的作用机制。方法采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测不同浓度小青龙汤、清气化痰丸对IL-1β诱导的H292细胞活性的影响并选择合适浓度进行后续实验。将细胞随机分为空白组、模型组(5μg/L IL-1β)、NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸铵(PDTC)组(5μg/L IL-1β+100μmol/L PDTC)、小青龙汤组(5μg/L IL-1β+1000 mg/L小青龙汤)和清气化痰丸组(5μg/L IL-1β+1000 mg/L清气化痰丸);采用5μg/L IL-1β诱导H292细胞24 h建立气道上皮黏液高分泌细胞模型。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞分泌黏蛋白5AC(MUC5AC)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-8水平及细胞内MUC5AC和囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)蛋白含量;采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测MUC5AC mRNA、CFTR mRNA和miR-494的表达;采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测NF-κB信号通路关键蛋白p65和NF-κB抑制因子(IκB)的蛋白表达。结果选择浓度为1000 mg/L的小青龙汤和清气化痰丸进行后续实验。与空白组比较,模型组细胞分泌MUC5AC、TNF-α和IL-8水平显著升高,细胞内MUC5AC蛋白含量和mRNA表达也显著升高,细胞内CFTR蛋白含量和mRNA表达均显著降低,且细胞内p65蛋白表达显著上调,IκB蛋白表达显著下调,miR-494表达显著升高。与模型组相比,PDTC组、小青龙汤组和清气化痰丸组细胞分泌MUC5AC、TNF-α、IL-8水平显著降低,细胞内MUC5AC蛋白含量和mRNA表达也显著降低,且细胞内p65蛋白表达均显著下调,IκB蛋白表达均显著上调,miR-494表达均显著降低;PDTC组和清气化痰丸组细胞内CFTR蛋白含量和mRNA表达均显著升高。与PDTC组相比,小青龙汤组细胞分泌TNF-α水平显著升高(ng/L: 展开更多
关键词 小青龙汤 清气化痰丸 黏蛋白5AC 囊性纤维化跨膜转导调节因子 核转录因子-κB/微小RNA-494信号通路
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