目的探讨乳腺癌中微小RNA-326(miR-326)靶向CARD10(caspase recruitment domain family member 10)抑制乳腺癌细胞增殖和侵袭的分子机制。方法 q PCR检测乳腺癌细胞株MCF7、BT549、MB-MDA-468、HCC1937、SKBR3和人正常乳腺上皮细胞MCF10...目的探讨乳腺癌中微小RNA-326(miR-326)靶向CARD10(caspase recruitment domain family member 10)抑制乳腺癌细胞增殖和侵袭的分子机制。方法 q PCR检测乳腺癌细胞株MCF7、BT549、MB-MDA-468、HCC1937、SKBR3和人正常乳腺上皮细胞MCF10A中miR-326的表达。通过microRNA.org预测网站显示miR-326靶向结合CARD10基因。以miR-326表达量最低的乳腺癌细胞株为研究对象,分为阴性对照组(转染miR-NC)和实验组(转染miR-326模拟物),q PCR检测miR-326、CARD10 mRNA的表达,Western blotting检测CARD10、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、锌指转录因子Snail、锌指转录因子Slug蛋白的表达,双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶活性以验证miR-326与CARD10的靶向调控关系,MTT法检测细胞增殖能力,Transwell侵袭实验检测miR-326的表达对乳腺癌细胞侵袭能力的影响。结果与人正常乳腺上皮细胞相比,乳腺癌细胞株中miR-326低表达(P<0.05),BT549细胞表达量最低(P<0.01)。与miR-NC组相比,miR-326组BT549细胞中miR-326表达显著上调(P<0.01),CARD10 mRNA表达显著下降(P<0.01)。E-cadherin蛋白表达升高,CARD10、N-cadherin、Snail、Slug蛋白表达降低。双荧光素酶实验结果表明miR-326能靶向结合CARD10的3'UTR端。与miRNC组相比,miR-326组细胞的增殖能力显著下降(P<0.05),细胞侵袭能力明显降低(P<0.01)。结论过表达miR-326可抑制乳腺癌细胞BT549的增殖和侵袭,其机制可能是靶向抑制CARD10基因的表达。展开更多
目的探究急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者经皮冠状动脉介入术(percutaneous coronary intervention,PCI)后外周血单个核细胞中微RNA-326(microRNA-326,miR-326)水平变化及意义。方法前瞻性选取在首都医科大学附属...目的探究急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者经皮冠状动脉介入术(percutaneous coronary intervention,PCI)后外周血单个核细胞中微RNA-326(microRNA-326,miR-326)水平变化及意义。方法前瞻性选取在首都医科大学附属北京潞河医院就诊的ACS患者205例作为研究对象。用密度梯度离心法获取外周血中单个核细胞;用实时荧光定量聚合酶链反应法检测单个核细胞中miR-326水平。用Cox回归分析和限制性立方样条分析miR-326与ACS患者预后的关系。结果预后不良组和预后良好组miR-326水平随时间进展均呈升高趋势(P<0.05)。PCI后7 d miR-326诊断ACS患者预后的受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)下面积(area under the curve,AUC)高于PCI前miR-326和PCI后3 d miR-326诊断ACS患者预后的ROC AUC,差异均有统计学意义(P<0.05)。高miR-326组平均生存时间高于低miR-326组,差异有统计学意义(P<0.05)。Cox回归分析结果显示miR-362(HR=0.039,95%CI:0.016~0.098,P<0.05)是ACS患者预后的独立保护因素(P<0.05)。miR-362与ACS患者预后有关(P<0.05),且为非线性关系(P<0.05)。miR-326<0.24时,与miR-326=0.24比较,预后不良的风险升高;当miR-326>0.24时,与miR-326=0.24比较,预后不良的风险降低。结论PCI后7 d miR-326与ACS患者预后有关。PCI后7 d miR-326水平低提示预后不良风险较高。展开更多
文摘目的探究急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者经皮冠状动脉介入术(percutaneous coronary intervention,PCI)后外周血单个核细胞中微RNA-326(microRNA-326,miR-326)水平变化及意义。方法前瞻性选取在首都医科大学附属北京潞河医院就诊的ACS患者205例作为研究对象。用密度梯度离心法获取外周血中单个核细胞;用实时荧光定量聚合酶链反应法检测单个核细胞中miR-326水平。用Cox回归分析和限制性立方样条分析miR-326与ACS患者预后的关系。结果预后不良组和预后良好组miR-326水平随时间进展均呈升高趋势(P<0.05)。PCI后7 d miR-326诊断ACS患者预后的受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)下面积(area under the curve,AUC)高于PCI前miR-326和PCI后3 d miR-326诊断ACS患者预后的ROC AUC,差异均有统计学意义(P<0.05)。高miR-326组平均生存时间高于低miR-326组,差异有统计学意义(P<0.05)。Cox回归分析结果显示miR-362(HR=0.039,95%CI:0.016~0.098,P<0.05)是ACS患者预后的独立保护因素(P<0.05)。miR-362与ACS患者预后有关(P<0.05),且为非线性关系(P<0.05)。miR-326<0.24时,与miR-326=0.24比较,预后不良的风险升高;当miR-326>0.24时,与miR-326=0.24比较,预后不良的风险降低。结论PCI后7 d miR-326与ACS患者预后有关。PCI后7 d miR-326水平低提示预后不良风险较高。
