miR-30b在高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙化中的作用 被引量：6

1

作者 周薇 徐金升 +4 位作者 白亚玲 张慧然 何雷 张胜雷 张东雪 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期54-59,共6页

目的:观察微小RNA-30b(miR-30b)在高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化中的作用及其机制。方法:将SD大鼠随机分为假手术(sham)组和慢性肾衰竭所致血管钙化(CRF+VC)组。采用硝酸银染色检测血管钙化情况;免疫组织化学法检测成骨转录... 目的:观察微小RNA-30b(miR-30b)在高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化中的作用及其机制。方法:将SD大鼠随机分为假手术(sham)组和慢性肾衰竭所致血管钙化(CRF+VC)组。采用硝酸银染色检测血管钙化情况;免疫组织化学法检测成骨转录因子Runx2的表达。体外培养原代大鼠胸主动脉VSMCs并分为正常组和高磷组。采用邻甲酚酞络合酮比色法及茜素红染色检测VSMCs的钙化情况;ELISA法测定VSMCs中碱性磷酸酶(ALP)活性;RT-qPCR测定VSMCs中miR-30b及Runx2 mRNA的表达;Western blot检测Runx2蛋白的表达。为进一步验证miR-30b对VSMCs的作用,转染miR-30b模拟物(mimic-30b),检测VSMCs钙化、Runx2表达和ALP活性的变化。结果:与sham组比较,CRF+VC组大鼠胸主动脉钙盐沉积和Runx2表达均显著增加(P<0.05);相关分析显示,Runx2与血管钙化呈正相关(r=0.971,P<0.05)。与正常组比较,高磷诱导的大鼠VSMCs钙化增加(P<0.05),Runx2表达及ALP活性均显著升高(P<0.05),而miR-30b水平显著降低(P<0.05)。转染mimic-30b后,miR-30b的表达显著升高(P<0.05),VSMCs钙化程度、Runx2表达及ALP活性均显著降低(P<0.05)。结论:高磷可诱导大鼠VSMCs钙化,可能是通过抑制miR-30b表达、促进细胞表型转化实现的。 展开更多

关键词 微小RNA-30b 高磷 血管钙化 血管平滑肌细胞 表型转化

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miRNA-30b调控ITGB3表达促进乳腺癌细胞凋亡 被引量：5

2

作者 钟科 邓天芝 黄大翠 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2021年第15期761-766,共6页

目的:探讨微小RNA-30b(microRNA-30b,miRNA-30b)和整合素β3(integrinβ3,ITGB3)在乳腺癌组织中的表达及对乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法:选择2016年3月至2019年3月于成都医学院第一附属医院收治的144例包括原位、浸润性和转移性乳... 目的:探讨微小RNA-30b(microRNA-30b,miRNA-30b)和整合素β3(integrinβ3,ITGB3)在乳腺癌组织中的表达及对乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法:选择2016年3月至2019年3月于成都医学院第一附属医院收治的144例包括原位、浸润性和转移性乳腺癌患者的组织标本以及其癌旁组织,同时收集其临床病理资料。采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测miRNA-30b和ITGB3的表达。构建miRNA-30b高表达的miRNA-30b模拟物和ITGB3高表达的miRNA-30b模拟物-pc DNA3.1-ITGB3,转染乳腺癌MCF-7细胞,同时将转染后的细胞皮下注射至小鼠体内。5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)实验、流式细胞术、Transwell小室侵袭实验检测细胞增殖、凋亡、侵袭,Western blot检测细胞中的ITGB3表达。结果:RT-PCR结果显示,原位、浸润性和转移性乳腺癌组织中的miRNA-30b相对表达量分别为0.75、0.52和0.23,ITGB3 mRNA分别为2.17、3.76和5.43,与正常组织相比,差异均具有统计学意义(均P<0.001)。miRNA-30b高表达后,BrdU、流式细胞术、Transwell小室侵袭实验、Western blot检测结果显示,癌细胞的增殖、侵袭能力以及ITGB3表达明显降低,凋亡率升高(均P<0.001)。结论:在乳腺癌组织中miRNA-30b和ITGB3表达异常,miRNA-30b过表达能明显下调ITGB3表达,抑制乳腺癌细胞的增殖、侵袭,并促使其凋亡。 展开更多

关键词 微小RNA-30b 乳腺癌 整合素Β3 增殖 凋亡 侵袭

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人乳中免疫相关microRNA-146b、microRNA-155及microRNA-30b水平及其与母婴健康的关系 被引量：2

3

作者 蒋雪 喜洋洋 +3 位作者 李荣 宋文英 郑雅宁 李晓南 《中华实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第23期1796-1800,共5页

目的 探讨人初乳和成熟乳中免疫相关microRNA（miR）的表达水平及其与母婴健康的关系。方法 选择产科分娩的母婴为研究对象，按喂养方式分为人乳喂养组（86例）和配方乳喂养组（48例），并随访至婴儿3月龄，记录母婴的营养状况及疾病状... 目的 探讨人初乳和成熟乳中免疫相关microRNA（miR）的表达水平及其与母婴健康的关系。方法 选择产科分娩的母婴为研究对象，按喂养方式分为人乳喂养组（86例）和配方乳喂养组（48例），并随访至婴儿3月龄，记录母婴的营养状况及疾病状况。实时荧光定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测人乳中miR-146b、miR-155及miR-30b表达水平，并分析其与母婴健康的关系。结果 1.于2012年11月至2013年2月收集人初乳86份及配对的成熟乳34份。人初乳中 miR-146b（5.950±0.823）及 miR-155（3.899 ±0.920）表达水平高于成熟乳（4.840±0.805、2.128±0.969），差异有统计学意义（t=7.176、10.215，P均〈0.01），而成熟乳中miR-30b表达（4.929±0.566）高于初乳（4.057±0.604），差异有统计学意义（t= -8.626，P 〈0.01）。2.初乳中miR-30b的水平与母亲孕前体质量指数呈负相关（r= -0.298，P 〈0.01）。3.自然分娩组母亲初乳中miR-30b、miR-146b的水平高于剖宫产组（t=3.108、2.356，P均〈0.05）。4.分娩女婴的母亲初乳中miR-146b、miR-155水平高于男婴（t= -2.204、-2.985，P均 〈0.05）。5.成熟乳中 miR-146b表达水平与随访时婴儿体质量的Z评分（r= -0.425，P 〈0.05）、身长的Z评分（r= -0.569，P 〈0.01）呈负相关。6.随访期间，人乳喂养婴儿湿疹发生率（8.82% ，3/34例）明显低于配方牛乳喂养组（29.17% ，14/48例）（χ^2=5.012，P =0.025）。结论 免疫相关的miR-146b、miR-155及miR-30b在人乳中含量丰富，并与母亲分娩方式、孕前体质量指数和婴儿性别相关。人乳中持续存在的免疫相关microRNA可能参与调节婴儿体格生长和免疫功能发育。 展开更多

关键词 人乳 免疫 microrna-146b microrna-155 microrna-30b 母婴健康

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肝细胞癌患者血清中微小RNA-432、微小RNA-30b、微小RNA-764水平 被引量：3

4

作者 王晓刚 童钟 +3 位作者 宇汝胜 刘永庆 刘庆元 胡启立 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1887-1889,共3页

目的:观察肝细胞癌患者血清中微小RNA(miRNA,miR)-432、微小RNA-432(miR-30b)及微小RNA-432(miR-764)水平。方法:选取安徽医科大学第三附属医院2015年1月30日至2018年1月30日收治的150例肝细胞癌患者,同时选取150例年龄匹配的体检结果... 目的:观察肝细胞癌患者血清中微小RNA(miRNA,miR)-432、微小RNA-432(miR-30b)及微小RNA-432(miR-764)水平。方法:选取安徽医科大学第三附属医院2015年1月30日至2018年1月30日收治的150例肝细胞癌患者,同时选取150例年龄匹配的体检结果健康者作为对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测研究对象外周血中miR-432、miR-30b及miR-764表达水平。观察miR-432、miR-30b及miR-764与肝细胞癌患者临床病理因素的相关性,并对肝细胞癌患者进行随访,观察miR-432、miR-30b及miR-764与患者总生存期(OS)的相关性。采用独立样本t检验及Log-rank检验。结果:肝细胞癌患者外周血中miR-432(2.11±0.71)、miR-30b(1.88±0.68)及miR-764(1.90±0.65)水平均较对照组高(1.12±0.40、1.01±0.38、0.99±0.35,t=4.879、13.679、15.097,P<0.01)。miR-432、miR-764表达量与肝细胞癌TNM分期有相关(P<0.05),miR-30b与肝细胞癌TNM分期及分化程度有相关(P<0.05)。Kaplan-Meier法及Log-rank检验显示,miR-432、miR-30b及miR-764表达量升高组OS短于降低组(Log-rankχ2=16.433、10.575、7.998,P<0.05)。Cox多因素分析均显示,TNM分期、miR-432、miR-30b、miR-764、肿瘤分化程度是肝细胞癌OS的独立影响因素[比值比(OR)=2.904、2.135、1.651、1.496、1.205,P<0.05]。结论:肝细胞癌患者循环中miR-432、miR-30b及miR-764表达上调,且与患者总生存率降低密切相关。 展开更多

关键词 肝细胞癌 微小RNA-432 微小RNA-30b 微小RNA-764总生存期

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首发精神分裂症病人血清微小RNA-24-2、微小RNA-30b的检测水平及意义 被引量：3

5

作者 雷雨 刘伟 包黎 《安徽医药》 CAS 2021年第6期1204-1207,共4页

目的检测首发精神分裂症(FES)病人血清中微小RNA-24-2(mir-24-2)、微小RNA-30b(mir-30b)水平,并探讨血清中mir-24-2、mir-30b表达水平与FES发病的关系。方法前瞻性选取2016年11月至2018年9月于武汉市精神卫生中心就诊的98例FES病人为研... 目的检测首发精神分裂症(FES)病人血清中微小RNA-24-2(mir-24-2)、微小RNA-30b(mir-30b)水平,并探讨血清中mir-24-2、mir-30b表达水平与FES发病的关系。方法前瞻性选取2016年11月至2018年9月于武汉市精神卫生中心就诊的98例FES病人为研究对象(FES组);同期选取76例健康体检者作为对照(对照组)。分析两组受试者一般资料;采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测两组受试者血清中mir-24-2、mir-30b表达水平,并对FES病人进行阳性与阴性症状量表(PANSS)评分;分析FES病人血清中mir-24-2、mir-30b水平与PANSS评分相关性;分析血清中mir-24-2、mir-30b水平对FES的诊断价值。结果FES组血清mir-24-2(1.81±0.58)、mir-30b水平(1.46±0.37)、PANSS总评分(78.64±12.31)分、阳性症状评分(12.64±3.73)分、阴性症状评分(20.56±4.32)分、认知评分(8.73±1.84)分、兴奋评分(8.96±2.13)分、抑郁情绪评分(6.75±2.06)分显著高于对照组[(1.00±0.31)、(1.00±0.26)、(35.42±5.37)分、(4.51±1.12)分、(6.94±1.21)分、(3.86±0.95)分、(4.19±0.38)分、(4.12±1.08)分](均P<0.05);FES病人血清中mir-24-2、mir-30b水平与PANSS总评分、阳性症状评分、阴性症状评分、认知评分、兴奋评分、抑郁情绪评分均呈正相关(P<0.05);血清mir-24-2、mir-30b诊断FES的曲线下面积(AUC)分别为0.863(95%CI:0.808~0.919)、0.856(95%CI:0.801~0.911),特异度分别为93.4%、84.2%,灵敏度分别为68.4%、76.5%;两者联合诊断FES的AUC为0.936(95%CI:0.899~0.973),特异度为88.2%,灵敏度为89.8%。结论血清mir-24-2、mir-30b水平在FES病人中明显升高,且与PANSS评分呈正相关。血清mir-24-2、mir-30b可能有助于疾病诊断,对评价精神分裂症的早期危险性有重要意义。 展开更多

关键词 精神分裂症 早期诊断 血清 微小RNA-24-2 微小RNA-30b

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微RNA-21、微RNA-30b、同源性磷酸脂酶-张力蛋白基因在糖尿病心肌病患者中的水平及其与心功能指标关系 被引量：3

6

作者 郭泉 张怡 +2 位作者 李海军 刘茹 李晶 《心脑血管病防治》 2022年第5期39-42,55,共5页

目的探讨糖尿病心肌病(DCM)患者血清微RNA-21(miR-21)、血清微RNA-30b(miR-30b)以及同源性磷酸脂酶-张力蛋白(PTEN)基因表达情况,分析其与心功能各指标的关系。方法纳入2020年2月至2021年2月期间咸阳市中心医院收治的46例DCM患者作为DCM... 目的探讨糖尿病心肌病(DCM)患者血清微RNA-21(miR-21)、血清微RNA-30b(miR-30b)以及同源性磷酸脂酶-张力蛋白(PTEN)基因表达情况,分析其与心功能各指标的关系。方法纳入2020年2月至2021年2月期间咸阳市中心医院收治的46例DCM患者作为DCM组;另选取同时期40例单纯2型糖尿病的患者作为单纯糖尿病组;纳入同一时期于我院健康体检的40例志愿者为对照组。应用qRT-PCR检测三组研究对象血清PTEN、miR-21、miR-30b表达水平。观察三组研究对象血清miR-21、miR-30b以及PTEN基因相对表达量,分析其与氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、左心室舒张末期内径(LVEDd)、左心室射血分数(LVEF)以及舒张早期/舒张末期心室充盈速率(E/A)的关系。结果三组miR-21、miR-30b和PTEN基因相对表达量比较差异均有统计学意义(F=837.172、918.938、275.941,P<0.05)。DCM组miR-21和miR-30b基因相对表达量均高于单纯糖尿病组和对照组,单纯糖尿病组高于对照组;PTEN基因相对表达量低于单纯糖尿病组和对照组,单纯糖尿病组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。三组NT-proBNP和心功能各指标水平比较差异均有统计学意义(F=467.920、621.689、605.782、76.663,P<0.05)。DCM组NT-proBNP和LVEDd水平大于单纯糖尿病组和对照组,单纯糖尿病组大于对照组;LVEF和E/A水平小于单纯糖尿病组和对照组,单纯糖尿病组小于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。DCM患者miR-21、miR-30b与NT-proBNP、LVEDd水平呈正相关(r=0.689、0.586、0.627、0.563,P<0.05),与LVEF、E/A水平呈负相关(r=-0.552、-0.492、-0.536、-0.437,P<0.05);PTEN与NT-proBNP、LVEDd水平呈负相关(r=-0.624、-0.603,P<0.05),与LVEF、E/A水平呈正相关(r=0.571、0.549,P<0.05)。结论与单纯糖尿病组及对照组比较,DCM患者miR-21和miR-30b基因表达量明显升高,PTEN基因表达量下调,且与心功能各指标有相关性,可能是DCM发生发展的重要原因。 展开更多

关键词 微RNA-21 微RNA-30b 同源性磷酸脂酶-张力蛋白 糖尿病心肌病

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微小RNA-30b对直肠癌细胞系松软蛋白4及程度细胞凋亡基因4表达的影响 被引量：3

7

作者 徐芳 殷宏 +3 位作者 秦岩 吴凡 王娅南 张娟 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第17期1736-1739,共4页

目的探讨微小RNA-30b对结肠癌细胞株松软蛋白4(Sox4)及程度细胞凋亡基因4(Pdcd4)表达的影响。方法用10%新生牛血清培养结肠癌HCT116和SW480细胞株,各分为干预组与模型组。p LVTHM/miR-30b慢病毒载体转染,细胞培养基培养6 h。用免疫印迹... 目的探讨微小RNA-30b对结肠癌细胞株松软蛋白4(Sox4)及程度细胞凋亡基因4(Pdcd4)表达的影响。方法用10%新生牛血清培养结肠癌HCT116和SW480细胞株,各分为干预组与模型组。p LVTHM/miR-30b慢病毒载体转染,细胞培养基培养6 h。用免疫印迹法与荧光定量PCR法对Sox4及Pdcd4表达进行测定。结果与模型组比较,干预组Sox4整合光密度值明显降低,干预组Pdcd4整合光密度值明显增高(P<0.01);与模型组比较,干预组Sox4蛋白表达较低,干预组Pdcd4表达增高(P<0.01)。结论 MicroRNA-30b能够显著降低直肠癌细胞系Sox4蛋白的表达。 展开更多

关键词 直肠癌细胞系 松软蛋白4 程度细胞凋亡基因4 靶向治疗 微小基因30b

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子宫内膜癌患者miR-30b和miR-96水平及与预后的关系 被引量：2

8

作者 林一禾 庄晓苹 金纬纬 《中华全科医学》 2021年第1期73-76,107,共5页

目的检测子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)miR-30b、miR-96水平,探究其与临床病理及预后的关系。方法选择2012年10月—2014年8月温州市中西医结合医院收治的EC患者及门... 目的检测子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)miR-30b、miR-96水平,探究其与临床病理及预后的关系。方法选择2012年10月—2014年8月温州市中西医结合医院收治的EC患者及门诊健康体检者(对照组)各76例,荧光定量PCR检测PBMC中miR-30b、miR-96水平,Pearson法分析二者相关性,Kaplan-Meier法分析二者与5年生存率的关系;Cox分析不良预后的危险因素。结果EC患者PBMC中miR-30b、miR-96水平均高于对照组(t=21.913、24.188,均P<0.05),二者呈正相关(r=0.553,P<0.05),均与病理分级、FIGO分期、肌层浸润及淋巴结转移有关(均P<0.05)。miR-30b高表达者5年总生存率(16.13%)低于低表达者(66.67%,χ^(2)=16.890,P<0.05);miR-96高表达者5年总生存率(18.18%)低于低表达者(67.44%,χ^(2)=16.307,P<0.05)。miR-30b、miR-96、FIGO分期、淋巴结转移是预后的影响因素(HR=2.861,95%CI:1.427~5.736;HR=1.973,95%CI:1.462~2.663;HR=2.235,95%CI:1.491~3.350;HR=2.439,95%CI:1.365~4.358;均P<0.05)。结论PMBC中miR-30b、miR-96高表达,与EC患者病理分级、FIGO分期、肌层浸润、淋巴结转移及5年生存率有关,是影响预后的独立危险因素。 展开更多

关键词 子宫内膜癌 微小RNA-30b 微小RNA-96

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MicroRNA-30b靶向调节Sema3A对视神经损伤修复的作用 被引量：1

9

作者 乔俊丽 伟伟 杨佳 《临床和实验医学杂志》 2017年第9期880-883,共4页

目的对专MicroRNA-30b靶向调节Sema3A对视神经损伤的临床修复作用进行探究,进而进一步证实Sema3A是MicroRNA-30b的靶基因,明确MicroRNA-30b可以通过对Sema3A的调节来表达、抑制其信号通路,进而保护视网膜神经节细胞并加快轴突的生长,为... 目的对专MicroRNA-30b靶向调节Sema3A对视神经损伤的临床修复作用进行探究,进而进一步证实Sema3A是MicroRNA-30b的靶基因,明确MicroRNA-30b可以通过对Sema3A的调节来表达、抑制其信号通路,进而保护视网膜神经节细胞并加快轴突的生长,为视神经受损提供系的思路与目标靶点。方法择取实验室现有的实验鼠进行SD视神经钳夹损伤模型,并分别采取qRT-PCR、Western blotting以及双荧光素酶报告基因系统对实验鼠健康及受损后,视网膜中MicroRNA-30b、Sema3A等指标的表达变化情况进行检测分析。向实验鼠损伤眼玻璃体腔内分别注射实验室现有的PBS、rAAV-miR-30b mimic、rAAV-miRNA NC以及rAAV-miR-30b Inhibitor等制剂,进而判定损伤后不同时间节点内视网膜神经节细胞(RGCs)的存活率变化,以了解不同组别间视功能恢复情况的差异。最后,进行以Sema3A为靶目标的siRNA,分别在正常情况下体外培养RGCs和取目前抑制效果最佳的siRNA进行培养RGCs状态下检测Sema3A的表达量,以掌握MicroRNA-30b调控Sema3A的信号通路情况。进而判定MicroRNA-30b靶向调节Sema3A对视神经损伤修复中的具体作用。结果在SD神经钳夹损伤模型中可知,实验鼠视网膜中MicroRNA-30b、Sema3A的表达均为先上升而后下降,一般在7 d时达最高峰,免疫组化检测显示Sema3A的表达一般发生于健康视网膜中的节细胞层与内核层中,而在视神经受损后两细胞层内阳细胞数量显著增多。同时,在实验鼠玻璃体内注射注射PBS、rAAV-miR-30b mimic、rAAV-miRNA NC以及rAAV-miR-30b Inhibitor后受损四组RGCs存活率均有不同程度下降,且mimic组最高、inhibitor组最低。结论实验表明,Sema3A为MicroRNA-30b的靶基因,在对视神经修复中具有显著的作用,能够有效提升视神经损伤后RGCs的存活率,进而促进视神经的修复。 展开更多

关键词 视神经损伤 靶基因 microrna-30b 修复 SEMA3A 靶向调节

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miR-30b对血管平滑肌细胞迁移能力的影响 被引量：1

10

作者 俞啟遥 王丹琳 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2019年第5期391-394,438,共5页

目的探究microRNA-30b(miR-30b)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)迁移能力的影响。方法体外分离培养大鼠VSMC,将VSMC随机分为正常对照组(未进行转染)、miR-对照组(转染miR-NC,浓度为50 nmol/L)、miR-30b mimics组(转染miR-30b mimics,浓度为5... 目的探究microRNA-30b(miR-30b)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)迁移能力的影响。方法体外分离培养大鼠VSMC,将VSMC随机分为正常对照组(未进行转染)、miR-对照组(转染miR-NC,浓度为50 nmol/L)、miR-30b mimics组(转染miR-30b mimics,浓度为50 nmol/L)。采用实时荧光定量PCR实验检测miR-30b及钙黏附蛋白E-Cadherin的表达情况;采用划痕愈合实验检测VSMC的迁移率;采用Transwell实验检测VSMC的迁移能力;采用Western blot技术检测E-Cadherin蛋白的表达。结果①miR-30b mimics组与正常对照组和miR-对照组比较,miR-30b表达水平升高(P<0.05)。②划痕愈合实验结果显示,与正常对照组和miR-对照组相比,miR-30b mimics组VSMC的划痕修复率明显降低(P<0.05)。③Transwell实验可见,miR-30b mimics组VSMC的迁移能力较正常对照组和miR-对照组明显减弱(P<0.05)。④miR-30b mimics组E-Cadherin mRNA和蛋白的表达较正常对照组和miR-对照组明显增强(P<0.05)。结论 miR-30b上调E-Cadherin的表达,从而抑制大鼠VSMC的迁移。 展开更多

关键词 血管平滑肌细胞 microrna-30b E-CADHERIN 细胞迁移

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微小RNA-30b在小鼠急性心肌缺血中的作用及其机制 被引量：1

11

作者 李斌 胡杰 +2 位作者 陈兴澎 赵勇鹏 权晓强 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1567-1570,共4页

目的建立小鼠急性心肌缺血动物模型,探讨急性心肌缺血中纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的变化以及微小RNA(miRNA,miR)-30b的作用及机制.方法小鼠分成模型组和对照组,模型组气管插管,呼吸机辅助呼吸,胸骨左缘3~4肋间横切口,显露心脏,以6-... 目的建立小鼠急性心肌缺血动物模型,探讨急性心肌缺血中纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的变化以及微小RNA(miRNA,miR)-30b的作用及机制.方法小鼠分成模型组和对照组,模型组气管插管,呼吸机辅助呼吸,胸骨左缘3~4肋间横切口,显露心脏,以6-0无损伤缝合线缝扎前降支.观察小鼠缺血前后心电图J点电压变化.取血清检测过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性.模型组和对照组处死小鼠前抽血,处死小鼠后取心肌组织.以实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)、酶联免疫吸附试验(ELISA)技术检测小鼠心肌和血液中的PAI-1和miR-30b表达变化.应用SPSS 18.0统计软件分析;多组计量资料采用One-way ANOVA,方差齐时采用LSD和SNK法,方差不齐时采用Tamhane's T2或Dunnett's T3法.结果模型组大鼠血液中PAI-1的mRNA和蛋白表达均明显上调(=1.031,P<0.05),心肌中PAI-1的mRNA和蛋白表达上调(t=-4.573,P<0.05),miR-30b表达均明显下调,差异有统计学意义(t=-1.968,P<0.05);双荧光素酶基因报告表明PAI-1为miR-30b直接靶基因.结论急性心肌缺血模型中PAI-1表达明显上调,出现纤溶亢进、增强,可能与miR-30b下调有关,miR-30b可能通过对PAI-1调控参与急性心肌缺血过程. 展开更多

关键词 微小RNA-30b 急性心肌缺血 纤溶酶原激活物抑制剂-1

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微小RNA-30b在急性心肌缺血中的作用及其机制 被引量：1

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作者 李斌 胡杰 +2 位作者 赵勇鹏 陈兴澎 卫向阳 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1535-1537,共3页

目的检测急性心肌缺血患者血液样本,探讨急性心肌缺血中纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的变化以及微小RNA(miRNA,miR)-30b的作用及机制。方法2016年1月至2019年7月采集洛阳中心医院42例急性心肌缺血患者血液样本,以同期42例健康体检志... 目的检测急性心肌缺血患者血液样本,探讨急性心肌缺血中纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的变化以及微小RNA(miRNA,miR)-30b的作用及机制。方法2016年1月至2019年7月采集洛阳中心医院42例急性心肌缺血患者血液样本,以同期42例健康体检志愿者血液样本为对照组。以实时定量反转录聚合聚合酶链反应(RT-qPCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血液样本的PAI-1和miR-30b表达变化。应用SPSS 18.0统计软件分析,多组计量资料采用One-way ANOVA,方差齐时采用LSD和SNK法,方差不齐时采用Tamhane’s T2或Dunnett’s T3法。结果急性心肌缺血组患者血液PAI-1的mRNA表达明显升高(3.49±0.52比1.00±0.12),差异有统计学意义(t=2.962,P<0.05)。PAI-1的蛋白表达明显升高(1.71±0.36比1.00±0.14),差异有统计学意义(t=1.935,P<0.05)。miRNA-30b显著降低(0.48±0.09比1.00±0.12),差异有统计学意义(t=-2.023,P<0.05);双荧光素酶报告基因实验显示,共转染miR-30b mimics和pmiR-REPORT-wild type荧光素酶报告质粒后,荧光值显著下调(0.29±0.03比1.00±0.09),差异有统计学意义(t=3.194,P<0.05);共转染miR-30b mimics与pmiR-REPORT-mutant后,荧光值变化(0.77±0.81比1.00±0.09)差异无统计学意义(t=-0.512,P>0.05),表明miR-30b能与靶基因PAI-1 mRNA的3’端非编码区(3’UTR)种子区结合。结论急性心肌缺血患者血液中PAI-1表达明显上调,出现纤溶亢进,其增强可能与miR-30b下调有关,miR-30b可能通过对PAI-1的调控参与急性心肌缺血病理进程。 展开更多

关键词 微小RNA-30b 急性心肌缺血 纤溶酶原激活物抑制剂-1

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微RNA-30b-5p通过靶向Atg5抑制多囊卵巢综合征大鼠卵巢颗粒细胞自噬 被引量：5

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作者 王雪敏 王亚楠 +2 位作者 牛爱琴 叶英 李飞 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期20-28,共9页

目的·探究microRNA-30b-5p(miR-30b-5p)在多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠中的表达及miR-30b-5p过表达对卵巢颗粒细胞(granulosa cell,GC)自噬的影响。方法·采用脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA... 目的·探究microRNA-30b-5p(miR-30b-5p)在多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠中的表达及miR-30b-5p过表达对卵巢颗粒细胞(granulosa cell,GC)自噬的影响。方法·采用脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA)建立PCOS大鼠模型,实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,qRT-PCR)和Western blotting检测正常组和PCOS组大鼠卵巢组织中miR-30b-5p和自噬相关蛋白5同源物(autophagy-associated protein 5 homologue,Atg5)的表达。分离并培养原代PCOS大鼠卵巢GC,分为对照组、miR-NC组、miR-30b-5p过表达组、miR-30b-5p过表达+pcDNA3.1-NC组、miR-30b-5p过表达+pcDNA3.1-Atg5组,另取正常组大鼠卵巢GC为空白组;将miR-30b-5p mimic和pcDNA3.1-Atg5及相应的阴性对照转染到细胞中,转染48 h后,qRT-PCR检测各组细胞中miR-30b-5p和Atg5 mRNA表达,验证转染效果。CCK-8及流式细胞仪分别检测细胞活力和凋亡率;免疫荧光染色检测各组细胞微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)阳性表达;Western blotting检测自噬相关蛋白Atg5、p62、Beclin-1和LC3蛋白表达。结果·PCOS组大鼠卵巢组织中miR-30b-5p表达水平显著低于正常组,Atg5 mRNA和蛋白水平显著高于正常组(均P=0.000)。转染后,与空白组相比,对照组卵巢GC中miR-30b-5p水平、细胞凋亡率、p62蛋白水平显著降低,Atg5 mRNA和蛋白水平、细胞增殖活性、LC3阳性细胞百分比、Beclin-1蛋白水平和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值显著升高(均P=0.000);与对照组相比,miR-30b-5p过表达组卵巢GC中miR-30b-5p水平、细胞凋亡率、p62蛋白水平显著升高,Atg5 mRNA和蛋白水平、细胞增殖活性、LC3阳性细胞百分比、Beclin-1蛋白水平和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值显著降低(均P=0.000)。上调Atg5可明显减弱miR-30b-5p过表达对卵巢GC增殖和自噬的抑制作用(均P=0.000)。结论·MiR-30b-5p在PCOS中呈低表达;过表达miR-30b-5p可抑制PCOS大鼠卵巢GC增殖和自噬,促进细胞凋亡,其作用 展开更多

关键词 多囊卵巢综合征 microrna-30b-5p 自噬 自噬相关蛋白5同源物 增殖 凋亡

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血浆miR-30b-5p、EVLWI与急性呼吸窘迫综合征患者病情严重程度及预后的关系 被引量：6

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作者 龙威 曾雅军 陈颖 《山东医药》 CAS 2021年第7期15-19,共5页

目的探讨血浆miR-30b-5p、血管外肺水指数(EVLWI)与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者病情严重程度及预后的关系。方法选择172例ARDS患者,根据氧合指数(PaO_(2)/FiO_(2))分为轻度组(PaO_(2)/FiO_(2):201~300 mmHg,53例)、中度组(PaO_(2)/FiO... 目的探讨血浆miR-30b-5p、血管外肺水指数(EVLWI)与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者病情严重程度及预后的关系。方法选择172例ARDS患者,根据氧合指数(PaO_(2)/FiO_(2))分为轻度组(PaO_(2)/FiO_(2):201~300 mmHg,53例)、中度组(PaO_(2)/FiO_(2):101~200 mmHg,71例)、重度组(PaO_(2)/FiO_(2):≤100 mmHg,48例),根据住院28 d内死亡情况将其分为死亡组(64例)和存活组(108例)。采用RT-PCR法检测血浆miR-30b-5p表达,脉波指示剂连续心排出量监测(PiCCO)法检测EVLWI指数,Spearman秩相关分析miR-30b-5p、EVLWI与ARDS分级、急性生理学和慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ)评分、顺序序贯器官衰竭评估(SOFA)评分间相关性,二元Logistic回归分析ARDS患者预后的相关影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-30b-5p、EVLWI预测ARDS患者预后的价值。结果重度组血浆miR-30b-5p表达、EVLWI指数高于中度组和轻度组(P均<0.05),中度组血浆miR-30b-5p表达、EVLWI指数高于轻度组(P均<0.05)。死亡组SOFA评分、APACHEⅡ评分、血浆miR-30b-5p表达、EVLWI指数高于存活组(P均<0.05),PaO_(2)/FiO_(2)低于存活组(P<0.05)。Spearman秩相关分析结果显示,ARDS患者血浆miR-30b-5p表达、EVLWI指数与APACHEⅡ评分、SOFA评分、ARDS分级均呈正相关(r分别为0.502、0.498、0.573,0.568、0.623、0.619,P均<0.05)。二元Logistic回归分析结果显示,高APACHEⅡ评分、高表达miR-30b-5p、高EVLWI指数是ARDS不良预后的危险因素(P均<0.01)。ROC曲线分析结果示,miR-30b-5p、EVLWI、miR-30b-5p+EVLWI预测ARDS患者预后的曲线下面积分别为0.738、0.824、0.913。结论ARDS患者血浆miR-30b-5p、EVLWI与ARDS患者病情严重程度和预后有关,二者可作为预后评估的参考指标。 展开更多

关键词 急性呼吸窘迫综合征 微小RNA-30b-5p 血管外肺水指数 氧合指数 顺序序贯器官衰竭评估评分 急性生理学和慢性健康状况评分Ⅱ 预后

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微小RNA-30b-5p在前列腺癌组织的表达及其过表达对前列腺癌细胞增殖的影响 被引量：6

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作者 刘贤莉 乐汉娥 +2 位作者 陈浩 毛艳艳 江文凛 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1629-1632,共4页

目的观察微小RNA（miRNA，miR）-30b-5p在前列腺癌中的表达及其对前列腺癌细胞增殖的影响。方法通过实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）法检测4l例前列腺癌组织及癌旁组织中miRNA-30b-5p的表达差异；分析上述组织中miR-30b-5p的表... 目的观察微小RNA（miRNA，miR）-30b-5p在前列腺癌中的表达及其对前列腺癌细胞增殖的影响。方法通过实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）法检测4l例前列腺癌组织及癌旁组织中miRNA-30b-5p的表达差异；分析上述组织中miR-30b-5p的表达与患者临床病理特征的关系。将人前列腺癌PC-3细胞分为空白对照组，阴性对照组及过表达组，分别进行转染，RT-qPCR法检测各组细胞中miR-30b-5p的表达，细胞计数试剂盒（CCK-8）实验和细胞平板集落实验检测细胞增殖能力，Westernblot检测细胞中细胞核增殖抗原（Ki-67）、13-连环蛋白（13．catenin）及细胞周期蛋白D1（CyclinD1）的蛋白表达。结果前列腺癌组织中miR-30b-5p的表达（0．469±0．032）显著低于癌旁组织（0．997±0．016，t=14．499，P=0．000）。miR-30b-5p低表达的患者在临床分期Ⅲ～Ⅳ期、病理分级G1～G4级及Gleason评分t〉8分者中所占比例明显高于临床分期I-Ⅱ期[65．2％（15／23）与33．3％（6／18）,X^2=4．108，P=0．043]、病理分级G1～G2级[72．7％（16／22）与26．3％（5／19）,X^2=6．145，P=0．013]、及Gleason评分≤7分[72．0％（18／25）与18．8％（3／16）,X^2=11．072，P=0．001]所占比例均明显增加，而不同年龄患者的miR-30b-5p低表达比例比较差异无统计学意义[54．5％（12／22）与47．4％（9／19），X^2=0．210，P=0．647]。转染后，过表达组miR-30b-5p的表达（4．088±0．229）显著高于阴性对照组（1．028±0．054，F=168．200，P=0．000）。48h及72h时，过表达组A450值（0．308±0．040，0．512±0．033）显著低于阴性对照组A450值（0．494±0．035，0．840±0．037，F=6．514，P=0．001）。过表达组细胞菌落数（14．400±2．227）显著低于阴性对照组（87．600±4．760，F=111．000，P=0．000）。过表达组Ki-67、β-eatenin及CyclinD1的蛋白表达（0．622±0．095、0．437±0．091、0．237±0� 展开更多

关键词 前列腺癌 微小RNA-30b-5p 细胞增殖 Wnt/β-连环蛋白信号通路

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血浆微小RNA-30b-5p联合血管外肺水指数评估急性呼吸窘迫综合征患者预后的价值 被引量：5

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作者 李材忠 谭孟源 +2 位作者 王生成 蔡萧阳 李玄丹 《中华危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期570-574,共5页

目的探讨血浆微小RNA-30b-5p(miR-30b-5p)联合血管外肺水指数(EVLWI)对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者预后的评估价值。方法选择2016年1月至2019年6月儋州市人民医院收治的120例ARDS患者作为研究对象。收集患者的性别、年龄、体重指数(B... 目的探讨血浆微小RNA-30b-5p(miR-30b-5p)联合血管外肺水指数(EVLWI)对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者预后的评估价值。方法选择2016年1月至2019年6月儋州市人民医院收治的120例ARDS患者作为研究对象。收集患者的性别、年龄、体重指数(BMI)、基础疾病、病因以及心率(HR)、呼吸频率(RR)、氧合指数(OI)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)和急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ)等基线值,根据住院期间生存情况分为存活组和死亡组,根据OI分为轻中度组(OI>100 mmHg,1 mmHg=0.133 kPa)和重度组(OI≤100 mmHg)。采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测血浆miR-30b-5p表达,并测定EVLWI。绘制受试者工作特征曲线(ROC),分析血浆miR-30b-5p及EVLWI预测ARDS患者死亡的价值;用Pearson相关法分析住院期间不同预后ARDS患者血浆miR-30b-5p与EVLWI的相关性。结果 120例ARDS患者均纳入分析,死亡组42例,存活组78例;轻中度组67例,重度组53例。死亡组患者APACHEⅡ评分高于存活组,但两组性别、年龄、BMI、基础疾病、病因及HR、RR、OI和PaCO2基线值比较差异均无统计学意义。死亡组患者血浆miR-30b-5p表达水平及EVLWI均明显高于存活组〔miR-30b-5p(2-ΔΔCt):2.28±0.74比0.52±0.06,EVLWI(mL/kg):15.38±4.60比10.24±2.15,均P<0.01〕。重度组血浆miR-30b-5p表达水平、EVLWI及住院病死率均明显高于轻中度组〔miR-30b-5p(2-ΔΔCt):2.05±0.65比0.93±0.17,EVLWI(mL/kg):14.65±4.20比11.36±2.28,住院病死率:58.5%(31/53)比16.4%(11/67),均P<0.01〕。ROC曲线分析显示,血浆miR-30b-5p及EVLWI预测ARDS患者住院期间死亡的最佳截断值分别为1.62和13.28 mL/kg,两项指标联合预测的ROC曲线下面积(AUC)明显高于二者单独预测(0.897比0.827和0.785),且联合预测的敏感度和特异度均较高,分别为90.5%和84.2%。Pearson相关分析显示,ARDS死亡患者血浆miR-30b-5p与EVLWI呈显著正相关(r=0.768,P<0.01);而存活者二者无� 展开更多

关键词 急性呼吸窘迫综合征 微小RNA-30b-5p 血管外肺水指数 预后评估

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基于血清miR-30b-3p、sST2表达构建重症心力衰竭患者预后不良的列线图模型

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作者 黄刚 戴大银 +2 位作者 张永红 黄冬梅 唐锴 《中国循证心血管医学杂志》 2024年第12期1461-1466,共6页

目的分析重症心力衰竭患者血清微小核糖核酸-30b-3p(miR-30b-3p)、可溶性致癌抑制因子2(sST2)的表达,并构建重症心力衰竭患者预后不良的列线图模型。方法回顾性分析2020年6月至2023年6月于遂宁市中心医院心血管内科收治的332例重症心力... 目的分析重症心力衰竭患者血清微小核糖核酸-30b-3p(miR-30b-3p)、可溶性致癌抑制因子2(sST2)的表达,并构建重症心力衰竭患者预后不良的列线图模型。方法回顾性分析2020年6月至2023年6月于遂宁市中心医院心血管内科收治的332例重症心力衰竭患者(心力衰竭组)及36例同期来院体检的健康人群(对照组)的临床资料,依照7:3的比例将心力衰竭组分为建模队列232例,模型验证队列100例。对心力衰竭组进行随访6个月,根据患者预后效果,将建模列队分为预后良好组(n=162)和预后不良组(n=70);模型验证队列分为预后良好组(n=70)和预后不良组(n=30)。利用二元Logistic回归分析血清miR-30b-3p、sST2在重症心力衰竭患者的表达差异及预后不良的影响因素,构建预测模型并验证,受试者工作特征(ROC)曲线评价模型效能,校准曲线评估预测事件与实际事件的一致性,决策曲线分析(DCA)评价模型的有效性。结果与对照组相比,心力衰竭组脑钠肽(BNP)、miR-30b-3p及sST2高于对照组(t=18.829、11.282、8.313,P=0.000),而左室射血分数(LVEF)低于对照组(t=23.766,P=0.000),差异均有统计学意义。建模队列中预后不良组BNP、miR-30b-3p、sST2水平较预后良好组更高(t=11.734、t=14.181、t=13.218,P=0.000),而LVEF低于预后良好组(t=13.285,P=0.000)。经Logistic多因素分析,BNP增高(OR=1.244,P=0.005)、LVEF降低(OR=0.432,P=0.001)、miR-30b-3p(OR=44.179,P=0.001)及sST2(OR=10.125,P=0.003)升高是重症心力衰竭患者预后不良的影响因素。基于多因素分析结果构建预测模型方程,为Log(P)=0.218×BNP-0.839×LVEF+3.788×miR-30b-3p+2.315×sST2-55.620。建模队列ROC的曲线下面积(AUC)为0.994(95%CI:0.987~1.000),验证队列利用列线图预测验证组存活概率,模型AUC为0.964(95%CI:0.924~1.000)。建模队列、验证队列所生成的列线图实际结果曲线与校准曲线的偏差较小,预测事件与实际事件的一致性较高(χ^(2)=1.206,P=0.99 展开更多

关键词 心力衰竭 微小核糖核酸-30b-3p 可溶性致癌抑制因子2

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miR-30b-5p通过HELLS抑制肺腺癌细胞增殖

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作者 刘爽 郭冉 +2 位作者 苏新云 杨文平 周玉法 《现代免疫学》 CAS 北大核心 2023年第5期376-385,共10页

为探讨miR-30b-5p靶向淋巴样特异性解旋酶(helicase lymphoid-specific, HELLS)对肺腺癌细胞增殖、凋亡的影响及其机制,通过生物信息学分析miR-30b-5p和HELLS在肺腺癌组织中的表达及其与临床表型的关系;将体外培养的A549和Calu-3细胞分... 为探讨miR-30b-5p靶向淋巴样特异性解旋酶(helicase lymphoid-specific, HELLS)对肺腺癌细胞增殖、凋亡的影响及其机制,通过生物信息学分析miR-30b-5p和HELLS在肺腺癌组织中的表达及其与临床表型的关系;将体外培养的A549和Calu-3细胞分为miR-NC组(转染miR-NC)、miR-30b-5p组(转染miR-30b-5p)、miR-30b-5p+HELLS组(转染miR-30b-5p和HELLS),采用RT-PCR检测各组细胞miR-30b-5p和HELLS mRNA的表达,Western blotting检测各组细胞核蛋白抗原Ki67、HELLS蛋白的表达,CCK-8检测各组细胞增殖情况,克隆形成试验检测各组细胞克隆形成数,FACS检测各组细胞周期及凋亡率,双荧光素酶报告试验验证miR-30b-5p与HELLS的靶向关系;建立肺腺癌裸鼠移植瘤模型,分为miR-NC组、miR-30b-5p组,记录裸鼠肿瘤体积、质量,免疫组化分析2组移植瘤Ki67蛋白表达。结果显示,GEO2R和TCGA数据库分析表明,miR-30b-5p在肺腺癌组织中表达下调,且其表达水平与患者生存期、N分期、复发和预后有关(P<0.05)。HELLS在肺腺癌组织中的表达水平高于癌旁组织(P<0.05),且其表达水平与患者肿瘤TNM分期、肿瘤分级、预后和生存期有关(P<0.05)。在A549和Calu-3细胞中,与miR-NC组比较,miR-30b-5p组miR-30b-5p表达量、G0/G1期细胞数、细胞凋亡率增加(P<0.05),细胞活力、克隆形成数、S期细胞数、HELLS mRNA水平及Ki67、HELLS蛋白水平显著降低(P<0.05);与miR-30b-5p组比较,miR-30b-5p+HELLS组G0/G1期细胞数、细胞凋亡率降低(P<0.05),细胞活力、克隆形成数、S期细胞数及Ki67、HELLS蛋白水平增加(P<0.05)。双荧光素酶报告试验表明,miR-30b-5p可靶向调控HELLS。与miR-NC组比较,miR-30b-5p组裸鼠移植瘤体积、质量及Ki67水平降低(P<0.05)。该研究提示,miR-30b-5p可靶向负调控HELLS的表达,抑制肺腺癌细胞增殖并诱导细胞凋亡。 展开更多

关键词 微小RNA-30b-5p 淋巴样特异性解旋酶 肺腺癌细胞 增殖 凋亡

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