右美托咪定对缺氧/复氧心肌细胞的保护作用及机制研究 被引量：3

1

作者 汪艳萍 许宜珍 +3 位作者 袁应川 古丽•亚科夫 陈政文 陈爱芳 《实用临床医药杂志》 2023年第11期108-113,119,共7页

目的探讨右美托咪定(Dex)对缺氧/复氧(H/R)心肌细胞的保护作用及机制。方法选取H9C2细胞构建H/R细胞损伤模型(H/R组),正常培养的细胞为对照组。采用Dex处理细胞24 h后进行H/R处理,纳入H/R+Dex组,将Vector、微小RNA(miR)-138-5p mimic质... 目的探讨右美托咪定(Dex)对缺氧/复氧(H/R)心肌细胞的保护作用及机制。方法选取H9C2细胞构建H/R细胞损伤模型(H/R组),正常培养的细胞为对照组。采用Dex处理细胞24 h后进行H/R处理,纳入H/R+Dex组,将Vector、微小RNA(miR)-138-5p mimic质粒转染至H9C2细胞后采用H/R处理,分别定义为H/R+Vector组、H/R+miR-138-5p组。将Vector、miR-138-5p mimic质粒分别与MUT-SOX9、WT-SOX9载体结合后共同转染至H9C2细胞,得到的转染细胞分别纳入突变型(MUT)-SOX9+Vector组、MUT-性别决定区Y框蛋白9(SOX9)+miR-138-5p组、野生型(WT)-SOX9+Vector组及WT-SOX9+miR-138-5p组。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞增殖;采用流式细胞术检测细胞凋亡;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测miR-138-5p表达;采用Weston blot检测TNF-α、IL-6、白细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl相关X蛋白(Bax)及SOX9的表达;采用荧光素酶报告实验检测miR-138-5p与SOX9的靶向关系。结果与对照组比较,H/R组细胞增殖活力、凋亡率、Bax、SOX9、MDA、LDH、TNF-α及IL-6表达量升高,Bcl-2、SOD及miR-138-5p表达量降低,差异有统计学意义(P<0.001)。与H/R组比较,H/R+Dex组细胞增殖活力、凋亡率、Bax、SOX9、MDA、LDH、TNF-α及IL-6表达量降低,Bcl-2、SOD及miR-138-5p表达量升高,差异有统计学意义(P<0.001)。与H/R+Vector组比较,H/R+miR-138-5p组细胞增殖活力、凋亡率、Bax、SOX9、MDA、LDH、TNF-α及IL-6表达量降低,Bcl-2、SOD及miR-138-5p表达量升高,差异有统计学意义(P<0.001)。H/R+miR-138-5p组细胞SOX9表达量低于H/R+Vector组,差异有统计学意义(P<0.05)。与WT-SOX9+Vector组比较,WT-SOX9+miR-138-5p组细胞SOX9表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05);MUT-SOX9+Vector组与MUT-SOX9+miR-138-5p组细胞SOX9表达量差异无� 展开更多

关键词 右美托咪定 微小RNA-138-5p 性别决定区Y框蛋白9 缺氧/复氧 心肌细胞 炎症反应 氧化应激反应

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lncRNA TTN-AS1通过miR-138-5p/EGFR轴调控胆囊癌细胞增殖、凋亡和迁移 被引量：3

2

作者 王玲华 陈艳 李叶若 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2023年第1期64-74,共11页

胆囊癌(GBC)是胆道系统常见的肿瘤,严重威胁人类的生命健康。该研究旨在探究长链非编码RNA(lncRNA)肌联蛋白反义RNA1(TTN-AS1)/微小RNA-138-5p(miR-138-5p)/表皮生长因子受体(EGFR)信号轴在GBC中的分子机制。qRT-PCR检测GBC组织和细胞系... 胆囊癌(GBC)是胆道系统常见的肿瘤,严重威胁人类的生命健康。该研究旨在探究长链非编码RNA(lncRNA)肌联蛋白反义RNA1(TTN-AS1)/微小RNA-138-5p(miR-138-5p)/表皮生长因子受体(EGFR)信号轴在GBC中的分子机制。qRT-PCR检测GBC组织和细胞系中TTN-AS1、miR-138-5p和EGFR mRNA相对表达水平,并对它们在GBC组织中的相关性进行分析。培养GBC细胞系GBC-SD,分为对照(Control)组、si-NC组、si-TTN-AS1组、si-TTN-AS1+in-miR-138-5p组和si-TTN-AS1+pc-EGFR组。qRT-PCR和Western blot检测细胞转染效率;CCK-8、EdU染色、流式细胞术以及划痕愈合实验检测细胞增殖、凋亡和迁移情况;Western blot检测细胞增殖(PCNA)、凋亡(Cleaved Caspase-3)和迁移(MMP-2、MMP-9)相关蛋白水平。利用体内异种移植肿瘤模型研究TTN-AS1对GBC肿瘤生长,Ki67、PCNA阳性表达以及miR-138-5p、EGFR mRNA表达的影响。结果显示,GBC组织和细胞系中TTN-AS1和EGFR mRNA表达均上调,miR-138-5p表达下调,且GBC组织中TTN-AS1水平与miR-138-5p水平呈负相关,与EGFR mRNA水平呈正相关;miR-138-5p水平与EGFR mRNA水平呈负相关(P<0.05)。生物信息学分析和双荧光素酶证实了miR-138-5p与TTN-AS1或EGFR 3′UTR存在相互作用,且RNA下拉实验证实了TTN-AS1与miR-138-5p结合;qRT-PCR和Westernblot证明TTN-AS1可能通过miR-138-5p调控EGFR表达(P<0.05)。敲低TTNAS1可显著抑制GBC-SD细胞增殖和迁移,诱导细胞凋亡(P<0.05);同时下调PCNA、MMP-2和MMP-9蛋白水平,上调Cleaved Caspase-3蛋白水平(P<0.05)。抑制miR-138-5p或过表达EGFR可部分逆转TTN-AS1敲低对GBC-SD细胞恶性行为的影响。体内实验证实,敲低TTN-AS1可抑制肿瘤生长,同时上调miR-138-5p水平,下调EGFR mRNA和Ki67、PCNA阳性表达水平(P<0.05)。总之,TTN-AS1可能在GBC的发生和发展中发挥促癌作用,且其可能是通过调节miR-138-5p/EGFR信号轴实现的。 展开更多

关键词 胆囊癌 长链非编码RNA肌联蛋白反义RNA1 微小RNA-138-5p 表皮生长因子受体 恶性行为

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微小RNA-138-5p抑制肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的机制研究 被引量：7

3

作者 王向辉 黄江平 +1 位作者 崔丰和 钱海云 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1631-1636,共6页

目的:探讨微小RNA-138-5p(miR-138-5p)抑制肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的相关机制。方法:以肺癌细胞A549和H460作为研究对象,分别转染miR-NC(对照组)或miR-138-5p(实验组);生物信息学技术预测miR-138-5p的靶基因;RT-qPCR检测转染后细... 目的:探讨微小RNA-138-5p(miR-138-5p)抑制肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的相关机制。方法:以肺癌细胞A549和H460作为研究对象,分别转染miR-NC(对照组)或miR-138-5p(实验组);生物信息学技术预测miR-138-5p的靶基因;RT-qPCR检测转染后细胞miR-138-5p、叉头框蛋白C1(FOXC1)mRNA和波形蛋白(vimentin)mRNA的相对表达量;Western blot法检测FOXC1、vimentin、E-cadherin、N-cadherin和β-catenin蛋白表达变化;MTS法和集落形成实验分别检测细胞的增殖能力;划痕愈合实验和Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力。结果:miR-138-5p过表达显著降低FOXC1和vimentin的mRNA及蛋白的表达(P<0.05),E-cadherin和β-catenin蛋白表达上调,N-cadherin蛋白表达下调,显著抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05)。结论:miR-138-5p可以通过靶向干扰FOXC1和vimentin的表达抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,可能是肺癌基因治疗的潜在靶点。 展开更多

关键词 微小RNA-138-5p 叉头框蛋白C1 波形蛋白 肺癌

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老年急性脑梗死患者血清circTTC3和miR-138-5p水平变化及意义

4

作者 古红 张奕玲 +2 位作者 赵宇 张婷 沈恺 《疑难病杂志》 CAS 2024年第5期537-541,547,共6页

目的探究老年急性脑梗死(ACI)患者血清环状RNA TTC3(circTTC3)和微小RNA-138-5p(miR-138-5p)水平变化及意义。方法选取2021年9月—2023年9月四川大学华西医院老年医学中心/干部医疗科诊治老年ACI患者128例(ACI组),根据美国国立卫生研究... 目的探究老年急性脑梗死(ACI)患者血清环状RNA TTC3(circTTC3)和微小RNA-138-5p(miR-138-5p)水平变化及意义。方法选取2021年9月—2023年9月四川大学华西医院老年医学中心/干部医疗科诊治老年ACI患者128例(ACI组),根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)分为轻度亚组42例、中度亚组49例和重度亚组37例,同期医院门诊体检的健康人员120例作为健康对照组;采用实时荧光定量PCR法测定血清circTTC3和miR-138-5p表达水平,Pearson法分析老年ACI患者血清circTTC3和miR-138-5p的相关性,Spearman法分析老年ACI患者血清circTTC3和miR-138-5p表达水平与NIHSS评分相关性,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清circTTC3和miR-138-5p表达水平对老年ACI患者神经缺损程度的诊断价值。结果与健康对照组比较,ACI组血清circTTC3表达水平升高,miR-138-5p降低(t/P=17.207/<0.001、16.239/<0.001)。血清circTTC3水平比较,轻度亚组<中度亚组<重度亚组,miR-138-5p表达水平比较,轻度亚组>中度亚组>重度亚组(F/P=26.579/<0.001、105.935/<0.001)。老年ACI患者血清circTTC3表达水平与NIHSS评分呈正相关(r=0.521,P<0.001),与大脑中动脉(MCA)、大脑前动脉(ACA)血流速度呈负相关(r=-0.425、-0.392,P均<0.001);miR-138-5p表达水平与NIHSS评分呈负相关(r=-0.785,P<0.001),与MCA、ACA血流速度呈正相关(r=0.571、0.635,P均<0.001)。circTTC3、miR-138-5p及二者联合诊断ACI神经缺损程度的AUC分别为0.817、0.810、0.878,二者联合诊断价值优于单独诊断(Z/P=2.106/0.035、2.406/0.016)。结论老年ACI患者血清circTTC3表达水平升高,miR-138-5p表达水平降低,二者与患者病情的严重程度密切相关,可能作为ACI病情诊断、治疗相关的作用靶点。 展开更多

关键词 急性脑梗死 环状RNA TTC3 微小RNA-138-5p 神经功能 老年人

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血清miR-138-5p,SORBS2水平与老年冠心病患者斑块稳定性及病变程度的相关性研究

5

作者 高阿芳 郑梅 胡钦 《中国循证心血管医学杂志》 2024年第7期818-821,共4页

目的探讨血清微小RNA-138-5p(miR-138-5p)、Sorbin和SH3结构域连接蛋白2(SORBS2)水平与老年冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者斑块稳定性及病变程度的相关性。方法取2022年7月至2024年1月于石家庄市人民医院收治的131例老年冠心病患... 目的探讨血清微小RNA-138-5p(miR-138-5p)、Sorbin和SH3结构域连接蛋白2(SORBS2)水平与老年冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者斑块稳定性及病变程度的相关性。方法取2022年7月至2024年1月于石家庄市人民医院收治的131例老年冠心病患者,根据超声结果确定血管腔内的斑块情况分为稳定组52例和不稳定组79例;根据冠状动脉造影结果进行Gensini评分,结合病变范围分为单支病变组42例,双支病变组46例和三支病变组43例。另外选取同期在本院进行体检的49例健康者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)对两组血清miR-138-5p和SORBS2水平检测,采用Pearson法和Spearman法分析血清miR-138-5p和SORBS2水平与老年冠心病患者斑块稳定性及病变程度相关性。结果不稳定组血清miR-138-5p低于稳定组、对照组,且稳定组低于对照组。不稳定组血清SORBS2高于稳定组和对照组,且稳定组高于对照组(P<0.05)。Pearson法分析结果显示,老年冠心病患者血清miR-138-5p水平与SORBS2水平呈负相关(P<0.05)。高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、血清miR-138-5p水平是老年冠心病患者不稳定斑块形成的保护因素,三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血清SORBS2水平是老年冠心病患者不稳定斑块形成的危险因素(P<0.05)。与单支病变组相比,双支病变组、三支病变组患者血清miR-138-5p水平降低,其中三支病变组降低更显著(P<0.05),血清SORBS2水平、Gensini评分升高,其中三支病变组升高更多(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,老年冠心病患者血清miR-138-5p水平与Gensini评分呈负相关,血清SORBS2水平与Gensini评分呈正相关。结论血清miR-138-5p和SORBS2水平与老年冠心病患者斑块稳定性及病变程度密切相关。 展开更多

关键词 冠状动脉粥样硬化性心脏病 微小RNA-138-5p Sorbin和SH3结构域连接蛋白2

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艾司氯胺酮通过上调miR-138-5p表达抑制LPS诱导的星形胶质细胞凋亡和炎症反应的分子机制研究 被引量：2

6

作者 林玉美 符明君 陈基胜 《国际检验医学杂志》 CAS 2023年第8期908-913,共6页

目的探讨艾司氯胺酮对脂多糖(LPS)诱导的星形胶质细胞凋亡和炎症反应的影响及分子机制。方法星形胶质细胞HA1800分为对照(NC)组,0.5、1.0、2.0μg/mL LPS组,低、中、高剂量组,miR-138-5p组,miR-con组,高剂量+anti-miR-138-5p组、高剂量+... 目的探讨艾司氯胺酮对脂多糖(LPS)诱导的星形胶质细胞凋亡和炎症反应的影响及分子机制。方法星形胶质细胞HA1800分为对照(NC)组,0.5、1.0、2.0μg/mL LPS组,低、中、高剂量组,miR-138-5p组,miR-con组,高剂量+anti-miR-138-5p组、高剂量+anti-miR-con组;流式细胞术检测HA1800细胞凋亡情况;蛋白质印迹法检测裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved-caspase-3)蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平;反转录-实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测微小RNA(miR)-138-5p表达水平。结果浓度越高的LPS诱导的星形胶质细胞HA1800凋亡率、Cleaved-caspase-3表达水平、TNF-α、IL-1β和IL-6水平升高(P<0.05)。剂量越高的艾司氯胺酮处理后,LPS诱导的HA1800细胞的凋亡率、Cleaved-caspase-3表达水平、TNF-α、IL-1β和IL-6水平降低,miR-138-5p表达水平升高(P<0.05)。过表达miR-138-5p后,LPS诱导的HA1800细胞的凋亡率、Cleaved-caspase-3表达水平、TNF-α、IL-1β和IL-6水平降低(P<0.05)。抑制miR-138-5p表达可以逆转艾司氯胺酮对LPS诱导的HA1800细胞凋亡和炎症反应的影响。结论艾司氯胺酮通过上调miR-138-5p表达抑制LPS诱导的星形胶质细胞凋亡和炎症反应。 展开更多

关键词 艾司氯胺酮 微小RNA-138-5p 星形胶质细胞 凋亡 炎症反应

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miR-138-5p调控CDC5L表达对胶质瘤细胞增殖、侵袭的影响 被引量：1

7

作者 王欧洋 朱鹏磊 +1 位作者 林杰 童凌云 《中国现代医生》 2023年第8期43-49,共7页

目的探讨微RNA(microRNA,miR)-138-5p对胶质瘤细胞增殖、侵袭的调控机制。方法体外培养人胶质瘤U251细胞,采用随机数字表法将其分为对照组(n=6)、miR-NC组(n=6)、miR-138-5p组(n=6)、miR-138-5p+pc-NC组(n=6)、miR-138-5p+pc-细胞分裂周... 目的探讨微RNA(microRNA,miR)-138-5p对胶质瘤细胞增殖、侵袭的调控机制。方法体外培养人胶质瘤U251细胞,采用随机数字表法将其分为对照组(n=6)、miR-NC组(n=6)、miR-138-5p组(n=6)、miR-138-5p+pc-NC组(n=6)、miR-138-5p+pc-细胞分裂周期5样(cell division cycle 5-like,CDC5L)组(n=6)。采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测细胞中miR-138-5p、CDC5L mRNA水平,检测细胞增殖活力、细胞周期和细胞凋亡以及细胞侵袭能力,检测细胞中CDC5L和侵袭相关蛋白表达。结果miR-138-5p的过表达可下调CDC5L mRNA和蛋白水平,降低胶质瘤细胞增殖活力和侵袭能力,并诱导G2/M期细胞周期停滞,促进细胞凋亡,降低N-钙粘蛋白、波形蛋白水平,升高E-钙粘蛋白水平,差异均有统计学意义(P<0.05);上调CDC5L表达可明显逆转过表达miR-138-5p对胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响(P<0.05);与miR-NC和CDC5L-WT质粒共转染比较,miR-138-5p mimic和CDC5L-WT质粒共转染的细胞中荧光素酶活性降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论过表达miR-138-5p可能通过靶向下调CDC5L,抑制胶质瘤细胞增殖和侵袭。 展开更多

关键词 胶质瘤 微RNA-138-5p 细胞分裂周期5样 增殖 侵袭

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miR-138-5p通过PDK1对人肺癌细胞系H23生物学行为的影响 被引量：3

8

作者 刘利 李婷婷 冯佳 《临床肺科杂志》 2022年第4期576-580,585,共6页

目的探讨微小RNA-138-5p(miR-138-5p)通过3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)对人肺腺癌细胞系H23生物学行为的影响。方法以肺腺癌细胞系H23作为研究对象,分别转染miR-NC(对照组)或miR-138-5p(实验组);qRT-PCR与Western blot法检测miR-138... 目的探讨微小RNA-138-5p(miR-138-5p)通过3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)对人肺腺癌细胞系H23生物学行为的影响。方法以肺腺癌细胞系H23作为研究对象,分别转染miR-NC(对照组)或miR-138-5p(实验组);qRT-PCR与Western blot法检测miR-138-5p、PDK1 mRNA在转染后人肺腺癌细胞系H23中表达水平;双荧光素酶报告基因检测miR-138-5p及基因PDK1之间的靶向关系;MTT法、划痕实验、Transwell实验检测增殖、迁移与侵袭能力。结果qRT-PCR检测H23细胞转染后miR-138-5p mRNA表达水平升高,PDK1 mRNA与蛋白表达下调,荧光素酶报告基因实验提示miR-138-5p可与PDK1的3’-UTR直接结合,与PDK1存在靶向关系。miR-138-5p可抑制H23细胞增殖、迁移和侵袭能力。结论miR-138-5p可通过靶向干扰PDK1抑制人肺腺癌细胞系H23细胞的增殖、迁移与侵袭能力,提示miR-138-5p与PDK1可能是治疗肺癌的潜在靶点。 展开更多

关键词 微小RNA-138-5p 3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1 人肺腺癌细胞系H23 增殖 迁移 侵袭

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miR-138-5p调节HIF-1α/Notch1轴对滋养层细胞侵袭和血管生成的影响

9

作者 刘佳 付丽 杨月美 《中华细胞与干细胞杂志（电子版）》 2023年第5期277-287,共11页

目的探究微小RNA-138-5p(miR-138-5p)对滋养层细胞侵袭和血管生成的影响,并进一步研究其对缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/Notch1轴的调节作用。方法体外培养人滋养层细胞系HTR-8/SVneo,分别转染mimics NC(miR-NC)、miR-138-5p模拟物(miR-138... 目的探究微小RNA-138-5p(miR-138-5p)对滋养层细胞侵袭和血管生成的影响,并进一步研究其对缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/Notch1轴的调节作用。方法体外培养人滋养层细胞系HTR-8/SVneo,分别转染mimics NC(miR-NC)、miR-138-5p模拟物(miR-138-5p mimics)、抑制剂阴性对照(inhibitor NC)、miR-138-5p抑制剂(miR-138-5p inhibitor)、pcDNA-NC(oe-NC)、pcDNA-HIF-1α(oe-HIF-1α)、miR-138-5p模拟物与pcDNA-NC(miR-138-5p mimics+oe-NC)、miR-138-5p模拟物与pcDNA-HIF-1α(miR-138-5p mimics+oe-HIF-1α)。转染后继续培养48 h,采用MTT法和克隆形成实验检测细胞增殖情况;Transwell法检测细胞侵袭情况;流式细胞术检测细胞凋亡率;管形成实验检测血管生成情况;qRT-PCR法检测细胞中miR-138-5p表达;Western blot法检测细胞中HIF-1α、Notch1、MMP-2、MMP-9、VEGF蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-138-5p与HIF-1α的靶向关系。两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析和SNK-q检验。结果过表达miR-138-5p后细胞存活率、克隆形成数、侵袭个数、管形成数量(33.15±3.85比64.53±4.12)下降,细胞凋亡率升高,HIF-1α、Notch1、MMP-2、MMP-9、VEGF蛋白表达(0.26±0.04比0.46±0.05)降低(P均<0.05);抑制miR-138-5p表达上述指标变化相反。双荧光素酶报告基因实验结果显示miR-138-5p与HIF-1α存在靶向关系。过表达HIF-1α后细胞存活率、克隆形成数、侵袭个数、管形成数量升高,细胞凋亡率降低,Notch1及MMP-2、MMP-9、VEGF蛋白表达升高(P均<0.05);过表达HIF-1α可逆转过表达miR-138-5p对上述指标变化的影响。结论miR-138-5p可能通过靶向负调控HIF-1α/Notch1轴对滋养层细胞增殖、侵袭能力与血管生成产生影响。 展开更多

关键词 微小RNA-138-5p 缺氧诱导因子1Α NOTCH1 先兆子痫 侵袭 血管生成

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胃癌细胞株BGC-823中miR-138-5p负性调控Sirt1基因的表达 被引量：2

10

作者 杨伟 张娜 +2 位作者 金丽娟 摆茹 韩梅 《宁夏医科大学学报》 2016年第9期980-984,993,封4,共7页

目的在胃癌细胞中筛选并鉴定靶向Sirt1基因的micorRNA。方法生物信息学软件预测特异性靶向Sirt1基因3’端非编码区域(3′-UTR)的microRNA;分别构建野生型和突变型与目的 microRNA匹配的Sirt1基因3′-UTR序列双荧光素酶报告基因载体;将mi... 目的在胃癌细胞中筛选并鉴定靶向Sirt1基因的micorRNA。方法生物信息学软件预测特异性靶向Sirt1基因3’端非编码区域(3′-UTR)的microRNA;分别构建野生型和突变型与目的 microRNA匹配的Sirt1基因3′-UTR序列双荧光素酶报告基因载体;将miR-138-5p过表达质粒分别与野生型和突变型双荧光素酶报告基因载体共转染入胃癌细胞株BGC-823中,应用双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性。miR-138-5p过表达质粒转染BGC-823细胞,荧光定量PCR检测转染细胞miR-138-5p与Sirt1 mRNA的表达,Western blot检测SIRT1蛋白的表达。结果生物信息学软件预测显示miR-138-5p为靶向调控Sirt1的候选micro RNA;成功构建野生型和突变型Sirt1基因3′-UTR双荧光素酶报告基因载体;荧光素酶活性实验表明,miR-138-5p可以下调野生型质粒的荧光素酶活性,不影响突变型质粒的荧光素酶。miR-138-5p过表达质粒转染后的BGC-823细胞中,miR-138-5p表达显著上调,Sirt1基因mRNA和蛋白的表达水平明显下调。结论在胃癌细胞中miR-138-5p靶向作用于Sirt1基因3′-UTR,并负性调控Sirt1基因。 展开更多

关键词 microrna-138-5p SIRT1 负性调控 人胃癌BGC-823细胞系

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miR-138-5p靶向HIF-1α对人肾癌细胞GRC-1增殖、凋亡和迁移的影响 被引量：1

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作者 张益萍 吴叶晨 曹廷虎 《国际泌尿系统杂志》 2022年第5期831-836,共6页

目的探讨miR-138-5p靶向HIF-1α对人肾癌细胞GRC-1增殖、凋亡和迁移的影响。方法将GRC-1细胞分为四组,分别为GRC-1组、miR-138 mimic组、pc-HIF-1α组及共转染组(mimic+pc-HIF-1α组),并将mimic-scramble组设置为miR-138 mimic转染的阴... 目的探讨miR-138-5p靶向HIF-1α对人肾癌细胞GRC-1增殖、凋亡和迁移的影响。方法将GRC-1细胞分为四组,分别为GRC-1组、miR-138 mimic组、pc-HIF-1α组及共转染组(mimic+pc-HIF-1α组),并将mimic-scramble组设置为miR-138 mimic转染的阴性对照组。采用荧光素酶报告实验验证miR-138-5p与HIF-1α的靶向关系,采用qRT-PCR检测miR-138 mimic对GRC-1细胞HIF-1αmRNA水平的影响,采用Western blot检测miR-138对GRC-1细胞HIF-1α蛋白水平的影响。分别采用CCK-8、流式细胞术和划痕实验检测miR-138-5p靶向HIF-1α对GRC-1细胞的增殖、凋亡和迁移的影响。结果荧光素酶报告实验结果显示miR-138-5p可靶向HIF-1α。与GRC-1组比较,miR-138 mimic组的miR-138-5p mRNA表达水平较高,HIF-1αmRNA表达水平较低(均P<0.01);与GRC-1组比较,miR-138 mimic组的HIF-1α蛋白表达水平较低,而pc-HIF-1α组的HIF-1α蛋白表达水平较高(均P<0.01);mimic+pc-HIF-1α组的HIF-1α蛋白表达水平低于pc-HIF-1α组(P<0.01);与GRC-1组比较,miR-138 mimic组的GRC-1细胞增殖倍数较低,而pc-HIF-1α组的GRC-1细胞增殖倍数较高(均P<0.01);mimic+pc-HIF-1α组的GRC-1细胞增殖倍数低于pc-HIF-1α组,差异有统计学意义(P<0.01);与GRC-1组比较,miR-138 mimic组的GRC-1细胞凋亡率较高,而pc-HIF-1α组的GRC-1细胞凋亡率较低(均P<0.01);mimic+pc-HIF-1α组的GRC-1细胞凋亡率高于pc-HIF-1α组(P<0.01);与GRC-1组比较,miR-138 mimic组的GRC-1细胞划痕愈合率较低,而pc-HIF-1α组的GRC-1细胞划痕愈合率较高(均P<0.01);mimic+pc-HIF-1α组的GRC-1细胞划痕愈合率低于pc-HIF-1α组(P<0.01)。结论miR-138-5p可通过靶向HIF-1α,负向调控HIF-1αmRNA和蛋白的表达,进而减弱人肾癌细胞GRC-1的增殖和迁移,促进其凋亡。 展开更多

关键词 肾肿瘤 缺氧诱导因子-1Α 微小RNA-138-5p 细胞凋亡 细胞运动

原文传递

急性髓系白血病患者PD-L1和MicroRNA-138-5p的表达及其临床意义 被引量：1

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作者 黄春燕 查显丰 温旺荣 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期373-378,共6页

目的:探讨PD-L1和MicroRNA-138-5p(miR-138)在急性髓系白血病(AML)患者外周血单个核细胞(PBMNCs)中的表达特点及其临床意义。方法:应用SYBR GreenⅠreal-time PCR方法分别检测20例初治AML患者、9例复发/难治AML患者和8例完全缓解患者PBM... 目的:探讨PD-L1和MicroRNA-138-5p(miR-138)在急性髓系白血病(AML)患者外周血单个核细胞(PBMNCs)中的表达特点及其临床意义。方法:应用SYBR GreenⅠreal-time PCR方法分别检测20例初治AML患者、9例复发/难治AML患者和8例完全缓解患者PBMNCs中PD-L1 mRNA和miR-138的表达水平,并选择20例健康体检者外周血样本作为对照组。结果:初治AML组和复发/难治AML组患者PD-L1的表达水平均显著高于健康对照组(P<0.01),而且复发/难治AML组患者PD-L1的表达水平显著高于初治AML组患者(P<0.01);初治AML组和复发/难治AML组患者miR-138的表达水平均显著低于健康对照组(P<0.01);在20例初治AML患者中共收集了8例完全缓解期标本,完全缓解组mi R-138的表达水平高于初治AML组(P<0.05),而缓解组PD-L1的表达水平与初治AML组差异无统计学意义(P>0.05);初治AML患者中PD-L1 mRNA与mi R-138表达呈负相关(P<0.05)。结论:AML患者PBMC中PD-L1表达增加、miR-138表达下调,且两者间有相关性。 展开更多

关键词 急性髓系白血病 pD-L1 microrna-138-5p 基因表达调控 免疫治疗

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miRNA-138-5p过表达对香烟烟雾暴露所致大鼠睾丸支持细胞损伤的调控作用

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作者 仲春雪 徐华 +1 位作者 张晨 何丽娟 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期692-701,共10页

目的:探讨香烟烟雾暴露对大鼠睾丸支持细胞的损伤作用,阐明微小RNA-138-5p(miR-138-5p)在此过程中发挥的保护作用。方法:200只SPF级雄性SD大鼠随机分为对照组和低、中及高剂量香烟暴露组(每天给予每只大鼠10、20和30支香烟),分别于2、4... 目的:探讨香烟烟雾暴露对大鼠睾丸支持细胞的损伤作用,阐明微小RNA-138-5p(miR-138-5p)在此过程中发挥的保护作用。方法:200只SPF级雄性SD大鼠随机分为对照组和低、中及高剂量香烟暴露组(每天给予每只大鼠10、20和30支香烟),分别于2、4、6、8和12周麻醉处死动物,检测各组大鼠血浆中抑制素B水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组大鼠睾丸组织中miR-138-5p表达水平,免疫组织化学法检测各组大鼠睾丸支持细胞中波形蛋白表达水平。体外培养睾丸TM4细胞(对照组),将制备好的香烟烟雾提取物(CSE)原液稀释至5%和10%,并处理TM4细胞,作为5%CSE组和10%CSE组。采用MTT法检测各组细胞存活率和各组细胞中乳酸脱氢酶(LDH)活性,流式细胞术和TUNEL法检测各组细胞凋亡率。睾丸TM4细胞转染过表达miR-138-5p质粒后,分为对照组、5%CSE组、5%CSE+Pri-miRNA-138-5p Ctrl组、5%CSE+Pri-miRNA-138-5p组、10%CSE组、10%CSE+Pri-miRNA-138-5p Ctrl组和10%CSE+Pri-miRNA-138-5p组,采用上述方法检测各组细胞生存率、细胞中LDH活性和细胞凋亡率。结果:与对照组比较,各剂量香烟暴露组大鼠血浆中抑制素B水平降低;与对照组比较,第8周高剂量香烟暴露组和第12周各剂量香烟暴露组大鼠血浆中抑制素B水平降低(P<0.05)。光镜下观察,对照组大鼠睾丸细胞胞质出现阳性黄染,香烟暴露组大鼠睾丸TM4细胞中睾丸组织波形蛋白表达水平逐渐降低;与对照组比较,不同时间高剂量香烟暴露组大鼠睾丸TM4细胞中睾丸波形蛋白表达水平降低(P<0.05)。与对照组比较,第8周时中和高剂量香烟暴露组及12周时各剂量香烟暴露组大鼠睾丸组织中miR-138-5p表达水平均降低(P<0.05)。与对照组比较,5%CSE组和10%CSE组睾丸TM4细胞存活率明显降低(P<0.01)。与对照组比较,5%CSE组和10%CSE组大鼠睾丸TM4细胞中LDH活性降低(P<0.05或P<0.01)。过表达miR-138-5p后,与对照组比较,5%CSE组、5% 展开更多

关键词 香烟烟雾暴露 睾丸 支持细胞 细胞损伤 微小RNA138-5p

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LncRNA TUG1靶向miR-138-5p调控胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭 被引量：3

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作者 王伟 王慧芳 翟景明 《现代肿瘤医学》 CAS 2020年第23期4051-4056,共6页

目的:探讨长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(TUG1)和微小RNA 138-5p(miR-138-5p)在胰腺癌组织中的表达及其对胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:应用RT-qPCR法检测胰腺癌组织及其细胞系中TUG1和miR-138-5p表达水平。通过小干扰RNA下... 目的:探讨长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(TUG1)和微小RNA 138-5p(miR-138-5p)在胰腺癌组织中的表达及其对胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:应用RT-qPCR法检测胰腺癌组织及其细胞系中TUG1和miR-138-5p表达水平。通过小干扰RNA下调PANC-1细胞中TUG1水平或转染miR-138-5p mimics至PANC-1细胞,MTT、Transwell法检测细胞活力、迁移和侵袭。starBase v2.0在线预测和双荧光素酶报告基因实验验证LncRNA TUG1和miR-138-5p的靶向关系。共转染TUG1-siRNA和miR-138-5p mimics至PANC-1细胞,MTT、Transwell法检测细胞活力、迁移和侵袭。结果:在胰腺癌组织及其细胞系中,TUG1表达上调(P<0.05)而miR-138-5p表达下调(P<0.05)。在PANC-1细胞中敲减TUG1或过表达miR-138-5p,细胞活力、迁移和侵袭能力下降(P<0.05)。starBase v2.0在线预测和双荧光素酶报告基因实验结果表明,TUG1可靶向调控miR-138-5p表达。MTT、Transwell实验结果显示,降低miR-138-5p的表达可逆转TUG1-siRNA对PANC-1细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论:敲减TUG1能够通过上调miR-138-5p水平抑制胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多

关键词 牛磺酸上调基因1 微小RNA 138-5p 胰腺癌 迁移 侵袭

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