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沉默HBXIP通过抑制miR-135a调控宫颈癌CaSki细胞的SCAI表达、上皮-间充质转化和糖酵解 被引量:10
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作者 许娟秀 吴海根 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1423-1431,共9页
目的:探索乙型肝炎病毒X蛋白结合蛋白(HBXIP)通过抑制微小RNA-135a(microRNA-135a, miR-135a)调节宫颈癌CaSki细胞上皮-间充质转化(EMT)和糖代谢的作用及其下游分子机制。方法:体外培养宫颈癌CaSki细胞,采用小干扰RNA(si-HBXIP)沉默HBXI... 目的:探索乙型肝炎病毒X蛋白结合蛋白(HBXIP)通过抑制微小RNA-135a(microRNA-135a, miR-135a)调节宫颈癌CaSki细胞上皮-间充质转化(EMT)和糖代谢的作用及其下游分子机制。方法:体外培养宫颈癌CaSki细胞,采用小干扰RNA(si-HBXIP)沉默HBXIP,miR-135a拟似物(miR-135a-mimic)过表达miR-135a,miR-135a-mimic和si-HBXIP共转染细胞;首先用Western blot检测细胞中EMT转录因子Twist1、EMT标志蛋白N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)及肿瘤细胞侵袭抑制因子(SCAI)的水平,其次用试剂盒法检测细胞培养基中葡萄糖摄取量和乳酸分泌量的变化,Western blot检测葡萄糖转运蛋白1(Glut-1)的水平;再次,用RT-qPCR法检测si-HBXIP对miR-135a水平的影响,Western blot检测miR-135a-mimic和miR-135a-inhibitor对HBXIP水平的影响;最后,用Western blot检测miR-135a-mimic对SCAI表达水平的影响,生物信息学预测并使用萤光素酶报告基因实验验证miR-135a和SCAI的关系。结果:单独转染si-HBXIP,可显著抑制EMT转录因子及其标记蛋白的表达,并上调SCAI的水平(P<0.05),显著上调葡萄糖摄取量并下调乳酸分泌(P<0.05)和Glut-1表达水平(P<0.05);与单独转染si-HBXIP组相比,miR-135a-mimic和si-HBXIP共转染组中EMT转录因子的水平上调(P<0.05),SCAI的水平下调(P<0.05),葡萄糖摄取量下降(P<0.05)、乳酸分泌水平和Glut-1表达水平升高(P<0.05);另外,miR-135a被验证是HBXIP的下游分子;Western blot结合萤光素酶报告基因实验发现SCAI是miR-135a的关键靶基因之一。结论:沉默HBXIP通过抑制miR-135a调控宫颈癌CaSki细胞的SCAI表达、上皮-间充质转化和糖酵解。 展开更多
关键词 宫颈癌 乙型肝炎病毒X蛋白结合蛋白 微小RNA-135a 上皮-间充质转化 糖酵解 SCAI
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人羊膜间充质干细胞外泌体通过微小RNA-135a促进成纤维细胞迁移实验研究 被引量:9
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作者 陈涛 高绍莹 +5 位作者 郝艺 张菲菲 唐修俊 魏在荣 王达利 祁建平 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期234-239,共6页
目的研究人羊膜间充质干细胞外泌体(human amniotic mesenchymal stem cell exosome,hAMSCExo)中的微小RNA-135a(microRNA-135a,miR-135a)对成纤维细胞迁移的作用。方法用外泌体分离试剂盒提取hAMSC-Exo并进行鉴定,划痕实验检测hAMSC-Ex... 目的研究人羊膜间充质干细胞外泌体(human amniotic mesenchymal stem cell exosome,hAMSCExo)中的微小RNA-135a(microRNA-135a,miR-135a)对成纤维细胞迁移的作用。方法用外泌体分离试剂盒提取hAMSC-Exo并进行鉴定,划痕实验检测hAMSC-Exo对成纤维细胞迁移的作用。实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)检测过表达miR-135a后hAMSC-Exo中miR-135a基因相对表达量,划痕实验检测过表达和敲减miR-135a后hAMSC-Exo对成纤维细胞迁移的作用,Western blot检测过表达和敲减miR-135a后hAMSC-Exo成纤维细胞迁移相关蛋白[大分子肿瘤抑制因子2(large tumor suppressor 2,LATS2)、E-钙黏着蛋白(E-cadherin)、N-cadherin、α平滑肌肌动蛋白(αsmooth muscle actin,α-SMA)]的相对表达量;均以293T细胞外泌体及hAMSC-Exo作为对照。结果成功获得hAMSC-Exo;划痕实验检测示,hAMSC组促进成纤维细胞迁移能力最强,GW4869(外泌体抑制剂)处理hAMSC组促进成纤维细胞迁移能力减弱。qRT-PCR检测示过表达miR-135a后,hAMSC-Exo中miR-135a基因相对表达量明显增加。划痕实验检测示,过表达miR-135a后,hAMSC-Exo促进成纤维细胞迁移能力增强;而敲减miR-135a后,hAMSC-Exo促进成纤维细胞迁移能力减弱。Western blot检测成纤维细胞迁移相关蛋白显示,与293T细胞外泌体组比较,各hAMSC-Exo处理组均下调Ecadherin、N-cadherin和LATS2表达,上调α-SMA表达;其中过表达miR-135a后,hAMSC-Exo能力增强,敲减miR-135a后,hAMSC-Exo能力较过表达miR-135a组下降。结论hAMSC-Exo中的miR-135a可促进成纤维细胞迁移,抑制E-cadherin、N-cadherin和LATS2表达,促进α-SMA表达。 展开更多
关键词 人羊膜间充质干细胞 外泌体 miR-135a 成纤维细胞
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miR-135a靶向PTEN促进宫颈癌细胞增殖、凋亡和转移能力的机制研究 被引量:8
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作者 黄天舒 裴丽鹏 《解放军医药杂志》 CAS 2021年第1期20-26,共7页
目的研究微小RNA-135a(microRNA-135a, miR-135a)靶向十号染色体上缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten, PTEN)对宫颈癌细胞增殖和转移能力的影响及作用机制。方法采用qRT-PCR检测... 目的研究微小RNA-135a(microRNA-135a, miR-135a)靶向十号染色体上缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten, PTEN)对宫颈癌细胞增殖和转移能力的影响及作用机制。方法采用qRT-PCR检测宫颈癌细胞C33A、Caski、HeLa中miR-135a和PTEN mRNA的表达水平,选择miR-135a表达较高的宫颈癌细胞进行后续实验。Targetscan 7.1预测软件及双荧光素酶报道基因试验检测miR-135a对PTEN基因的靶向调控作用。常规培养宫颈癌细胞,将其分为NC组、miR-135a inhibitor组和miR-135a inhibitor+si-PTEN组,采用Lip2000进行各组小分子化合物的转染。MTT实验检测3组细胞的增殖能力,流式细胞仪检测3组细胞的凋亡率,Transwell实验检测3组细胞的转移能力。Western blot检测3组细胞中Akt/mTOR信号通路的活性。结果与永生化宫颈上皮细胞H8相比,miR-135a在宫颈癌细胞系中的表达增加,在宫颈癌细胞Caski中的表达最高(P<0.05)。与永生化宫颈上皮细胞H8相比,PTEN在宫颈癌细胞系中的表达降低(P<0.05)。miR-135a靶向调控PTEN。与NC组相比,miR-135a inhibitor组和miR-135a inhibitor+si-PTEN组宫颈癌细胞增殖和转移能力降低、宫颈癌细胞凋亡率增加(P<0.05)。而与miR-135a inhibitor组相比,miR-135a inhibitor+si-PTEN组宫颈癌细胞增殖和转移能力增加、宫颈癌细胞凋亡率降低(P<0.05)。与NC组相比,miR-135a inhibitor组和miR-135a inhibitor+si-PTEN组细胞中pAkt和pmTOR蛋白表达降低,而与miR-135a inhibitor组相比,miR-135a inhibitor+si-PTEN组pAkt和pmTOR蛋白表达增加(P<0.05)。结论 miR-135a靶向调控PTEN表达促进宫颈癌细胞增殖和转移能力,抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 微小RNA-135a 细胞增殖 肿瘤侵润 肿瘤转移 AKT/MTOR 十号染色体上缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物
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微小RNA-135a通过抑制其靶基因Sp3的表达促进大鼠胰腺腺泡细胞凋亡 被引量:8
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作者 付强 秦涛 +5 位作者 刘传江 陈琳 楚皓源 胡明星 王玉柱 张宏伟 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期666-669,共4页
目的探讨微小RNA135a(miR-135a)是否通过抑制其靶基因Sp3基因的表达促进大鼠急性水肿性胰腺炎中胰腺腺泡细胞(AR42J)凋亡。方法设计miR-135a模拟物及反义寡核苷酸链,并通过慢病毒转染AR42J细胞,72h后于荧光显微镜下观察AR42J细胞... 目的探讨微小RNA135a(miR-135a)是否通过抑制其靶基因Sp3基因的表达促进大鼠急性水肿性胰腺炎中胰腺腺泡细胞(AR42J)凋亡。方法设计miR-135a模拟物及反义寡核苷酸链,并通过慢病毒转染AR42J细胞,72h后于荧光显微镜下观察AR42J细胞荧光表达量,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ.PCR)法检测转染后miR-135a的表达量。使用50陆∥L重组大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF—α)诱导AR42J细胞建立体外急性水肿性胰腺炎模型(AEP),淀粉酶试剂盒检测培养基上清淀粉酶含量,Westernblot法检测活性半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3表达量,流式细胞术检测AR42J细胞的凋亡率。构建Sp3野生型(WT)和突变型(Mut)3’非编码区(3’UTR)-荧光素酶报告载体,通过荧光素酶报告系统检测miR-135a对Sp3基因野生型及突变型3’UTR荧光素酶活性的影响,并通过FQ—PCR和Westernblot法检测转染miR-135a模拟物及反义寡核昔酸链后Sp3基因mRNA及蛋白表达量变化。结果转染miR-135a模拟物组较转染空病毒组miR-135a表达量升高(5.84±0.16)倍,转染miR-135a反义寡核苷酸链组miR-135a表达量是转染空病毒组的(0.54±0.01)倍,差异均有统计学意义(P〈0.05)。建立急性水肿性胰腺炎模型后,转染miR-135a模拟物组AR42J细胞凋亡率[(40.63±3.24)%]较转染空病毒组[(25.40±0.79)%]明显升高,转染miR-135a反义寡核苷酸链组AR42J细胞凋亡率[(15.10±0.10)%]较空病毒组明显降低,差异均有统计学意义(P〈0.05)。生物信息学软件及荧光素酶定量实验结果表明Sp3是mill-135a的靶基因,转染miR-135a模拟物组s03mRNA及蛋白质表达量较转染空病毒组明显降低,转染miR-135a反义寡核苷酸链组Sp3mRNA及蛋白质表达量较空病毒组明显升高,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论miR-135a可能能够通过抑制其靶� 展开更多
关键词 微小RNA-135a 急性水肿性胰腺炎 脱噬作用 胰腺腺泡细胞
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miR-135a/b靶向SIRT1调控葡萄膜黑色素瘤细胞的迁移
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作者 林永 杨汝森 +1 位作者 叶菊秀 陈晓燕 《中华眼视光学与视觉科学杂志》 CAS CSCD 2023年第2期88-95,共8页
目的:研究microRNA-135a/b(miR-135a/b)对葡萄膜黑色素瘤(UM)细胞迁移能力的调控作用及其机制。方法:实验研究。采用定量RT-PCR检测UM标本和癌旁组织中miR-135a/b的表达水平。将miRNA模拟物转染入UM细胞(M23和SP6.5)过表达miR-135a/b,... 目的:研究microRNA-135a/b(miR-135a/b)对葡萄膜黑色素瘤(UM)细胞迁移能力的调控作用及其机制。方法:实验研究。采用定量RT-PCR检测UM标本和癌旁组织中miR-135a/b的表达水平。将miRNA模拟物转染入UM细胞(M23和SP6.5)过表达miR-135a/b,转染无义序列作为对照组(NC)。利用小RNA干扰技术和慢病毒过表达载体感染技术分别下调和上调细胞中SIRT1蛋白表达水平,分别以无义小干扰RNA(siNC)和插入无义序列的慢病毒载体(Lv-NC)作为阴性对照。采用划痕实验和Transwell实验检测细胞的迁移能力。双萤光素酶报告实验用于鉴定miR-135a/b的靶基因。Western blot检测SIRT1蛋白的表达水平。采用独立样本t检验进行数据分析。结果:定量RT-PCR结果显示miR-135a/b在UM组织较癌旁组织的表达水平明显下调(miR-135a:t=6.38,P=0.003;miR-135b:t=23.26,P<0.001)。划痕实验和Transwell实验结果显示,与NC组相比,miR-135a/b过表达M23和SP6.5细胞迁移距离减小(miR-135a:t=36.01、8.98,均P<0.01;miR-135b:t=27.53、10.51,均P<0.01)且迁移细胞数量减少(miR-135a:t=7.04、7.02,均P<0.01;miR-135b:t=5.01、7.32,均P<0.01)。双萤光素酶实验证实,miR-135a/b能够明显抑制SIRT1野生组萤光素酶的荧光值(miR-135a:t=2.88,P=0.028;miR-135b:t=4.99,P=0.003);Western blot结果表明,与NC组相比,过表达miR-135a/b的M23和SP6.5细胞中SIRT1的蛋白水平下调(miR-135a:t=9.93、4.13,均P<0.01;miR-135b:t=4.66、6.20,均P<0.01)。siSIRT1转染后划痕实验和Transwell实验结果显示,与siRNC组相比,M23和SP6.5细胞中下调SIRT1蛋白水平后细胞的迁移距离减小(siSIRT1-I:t=13.88、11.78,均P<0.01;siSIRT1-II:t=31.20、6.27,均P<0.01)且迁移细胞数量减少(siSIRT1-I:t=7.57、4.66,均P<0.01;siSIRT1-II:t=5.58、3.25,均P<0.05)。M23和SP6.5细胞中上调SIRT1蛋白水平同时过表达miR-135a/b,Transwell实验结果显示,细胞的迁移数量较仅过表达miR-135a/b升高(miR-135a+Lv-SIRT1:t=4.10、2.75,均P<0.05;miR-135b+Lv-SIRT1:t=2. 展开更多
关键词 葡萄膜恶性黑色素瘤 microrna-135a microrna-135b SIRT1 细胞迁移
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结肠癌组织microRNA-135a表达增高的临床意义与预后分析 被引量:6
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作者 李国东 李星龙 +3 位作者 党树伟 李忠生 林罗强 白明瀚 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2016年第17期1169-1173,共5页
目的 miRNA-135a作为miRNA-135家族的重要组成成员,其与多种肿瘤发生发展密切相关。但关于miRNA-135a的表达异常对结肠癌的临床意义及预后判断的研究较少。本研究旨在明确结肠癌组织miRNA-135a相对表达量与结肠癌患者临床病理因素的相... 目的 miRNA-135a作为miRNA-135家族的重要组成成员,其与多种肿瘤发生发展密切相关。但关于miRNA-135a的表达异常对结肠癌的临床意义及预后判断的研究较少。本研究旨在明确结肠癌组织miRNA-135a相对表达量与结肠癌患者临床病理因素的相关性及对患者生存预后的影响。方法收集2009-01-01-2009-12-31在哈尔滨医科大学附属第四医院行手术切除的结肠癌组织样本及距离肿瘤边缘5cm处癌旁黏膜组织样本共47对。在47对结肠癌样本中应用逆转录实时定量聚合酶链反应,检测miRNA-135a相对表达量,进一步分析其表达变化与结肠癌临床病理特征的相关性。并运用Kaplan-Meier生存曲线进行预后分析。结果 miRNA-135a在结肠癌组织中表达较癌旁组织显著升高,P=0.03。miRNA-135a表达量变化与患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、肿瘤分化程度、浸润深度及远处转移均无关,P值均>0.05。但在淋巴结转移组miRNA-135a表达明显升高,均值为0.49±0.25,而无淋巴结转移组为0.35±0.17,两组比较差异有统计学意义,P=0.03。在临床Ⅲ/Ⅳ期的患者中miRNA-135a表达较Ⅰ/Ⅱ期的患者显著升高,两组比较差异有统计学意义,P=0.04。Logistic二项回归分析显示,miRNA-135a高表达组增加了结肠癌患者淋巴结转移的风险,P=0.03。miRNA-135a高表达同时可增加结肠癌疾病进展(TNM分期)的风险,P=0.04。生存分析表明,21例miRNA-135a高表达组的中位生存期为(41±9.73)个月,26例miRNA-135a低表达组的中位生存期为(58±6.16)个月,两组比较差异有统计学意义,P=0.021。结论 miRNA-135a表达量增高与结肠癌疾病进展及不良预后正相关。miRNA-135a有望成为判断结肠癌预后的潜在靶点。 展开更多
关键词 微小RNA-135a 结肠癌 临床病理 预后 相关性
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miRNA-135a、TGF-α在晚期非小细胞肺癌中的表达水平及其与患者预后的关系 被引量:5
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作者 杨光华 向森 +1 位作者 高冬冬 焉然 《癌症进展》 2019年第9期1061-1064,共4页
目的分析晚期非小细胞肺癌患者血清中微小核糖核酸-135a(miRNA-135a)、转化生长因子-α(TGF-α)表达水平及其与患者中位无疾病进展生存期的关系。方法选取87例晚期非小细胞肺癌患者和同期33例健康体检者分别为晚期非小细胞肺癌组和对照... 目的分析晚期非小细胞肺癌患者血清中微小核糖核酸-135a(miRNA-135a)、转化生长因子-α(TGF-α)表达水平及其与患者中位无疾病进展生存期的关系。方法选取87例晚期非小细胞肺癌患者和同期33例健康体检者分别为晚期非小细胞肺癌组和对照组。比较两组受试者血清中miRNA-135a、TGF-α的表达水平及其与患者临床特征的关系,采用Cox比例风险回归模型分析晚期非小细胞肺癌患者预后的影响因素。结果晚期非小细胞肺癌组患者血清中miRNA-135a的表达水平明显低于对照组患者,TGF-α的表达水平明显高于对照组患者(P﹤0.01)。Cox比例风险回归模型分析结果显示,分化程度为低分化、TNM分期为Ⅳ期、有淋巴结转移和TGF-α高表达为晚期非小细胞肺癌患者预后的独立危险因素,miRNA-135a高表达为晚期非小细胞肺癌患者预后的独立保护因素。miRNA-135a低表达患者的中位无疾病进展生存期短于miRNA-135a高表达患者,TGF-α高表达患者的中位无疾病进展生存期短于TGF-α低表达患者(P﹤0.05)。结论血清miRNA-135a、TGF-α水平与晚期非小细胞肺癌患者的无疾病进展生存期有关,可作为晚期非小细胞肺癌患者预后评估的参考指标。 展开更多
关键词 晚期非小细胞肺癌 微小核糖核酸-135a 转化生长因子-Α 无疾病进展生存期
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宫腔镜下宫腔黏连手术后患者血清miR-543、miR-135a表达及预测黏连复发价值 被引量:3
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作者 王青 黄先华 +1 位作者 谢蓉 刘婷 《中国计划生育学杂志》 2022年第6期1369-1373,共5页
目的:探讨宫腔镜下宫腔黏连术后患者血清微小RNA-543(miR-543)、微小RNA-135a(miR-135a)水平与黏连复发关系及预测价值。方法:选取2019年12月—2020年12月于本院行宫腔镜下宫腔黏连分离术的宫腔黏连患者127例,根据术后3个月经周期结束... 目的:探讨宫腔镜下宫腔黏连术后患者血清微小RNA-543(miR-543)、微小RNA-135a(miR-135a)水平与黏连复发关系及预测价值。方法:选取2019年12月—2020年12月于本院行宫腔镜下宫腔黏连分离术的宫腔黏连患者127例,根据术后3个月经周期结束后月经第3-7 d复查是否复发将患者分为复发组(34例)和未复发组(93例)。采用实时荧光定量PCR法检测两组患者术后24 h血清miR-543、miR-135a水平;Pearson法分析术后宫腔黏连复发患者血清miR-543与miR-135a水平相关性;采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清miR-543、miR-135a水平预测术后复发价值;Logistic回归分析影响宫腔镜治疗后黏连复发影响因素。结果:复发组病程、血清miR-135a水平高于未复发组,miR-543水平低于未复发组(P<0.05);复发组血清miR-543与miR-135a水平呈负相关(r=-0.539,P<0.05)。血清miR-543、miR-135a预测宫腔镜治疗后黏连复发的曲线下面积(AUC)分别为0.897、0.864,特异性分别为76.3%、92.5%,敏感度分别为91.2%、70.6%;二者联合预测的AUC为0.947,特异性为88.2%,敏感度为94.1%。miR-135a是影响宫腔镜术后复发的独立危险因素(P<0.05),miR-543是治疗后复发的保护因素(P<0.05)。结论:宫腔镜治疗宫腔黏连后复发与患者血清miR-543、miR-135a水平有关且有一定预测价值。 展开更多
关键词 宫腔黏连 宫腔镜手术 术后复发 微小RNA-543 微小RNA-135a 预测 影响因素
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前列腺癌患者血浆miR-135、miR-103、miR-34b表达水平及其与临床病理特征和预后的关系 被引量:2
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作者 张秀杰 张波 马璨粲 《临床和实验医学杂志》 2022年第5期512-518,共7页
目的探究血浆微小RNA-135(miR-135)、miR-103、miR-34b在前列腺癌中的表达水平,分析三者与临床病理特征、临床预后的关系。方法前瞻性选取2018年5月至2021年6月临沂市肿瘤医院收治的前列腺癌患者87例(前列腺癌组)、良性前列腺增生患者83... 目的探究血浆微小RNA-135(miR-135)、miR-103、miR-34b在前列腺癌中的表达水平,分析三者与临床病理特征、临床预后的关系。方法前瞻性选取2018年5月至2021年6月临沂市肿瘤医院收治的前列腺癌患者87例(前列腺癌组)、良性前列腺增生患者83例(良性前列腺增生组)、体检健康者85名(健康对照组)为研究对象。采用实时荧光定量PCR测定3组研究对象的血浆miR-135、miR-103、miR-34b水平;比较前列腺癌患者治疗前后血浆miR-135、miR-103、miR-34b水平,分析血浆miR-135、miR-103、miR-34b表达与临床病理特征及预后的关系。结果前列腺癌组血浆miR-135水平明显高于良性前列腺增生组及健康对照组,miR-103、miR-34b水平明显低于良性前列腺增生组及健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,前列腺癌患者血浆miR-135水平相比治疗前明显降低,miR-103、miR-34b水平相比治疗前明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。前列腺癌患者血浆miR-135、miR-103、miR-34b表达与病理分级Gleason评分、TNM分期有关(P<0.05)。随访12~48个月,平均(27.63±4.89)个月;发生骨转移13例(14.94%,死亡3例),复发10例(11.49%,死亡4例);miR-135在有骨转移患者中表达高于无骨转移患者,在复发患者中表达高于无复发患者;miR-103、miR-34b在有骨转移患者中表达低于无骨转移患者,在复发患者中表达低于无复发患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。miR-34b、miR-103降低是前列腺癌患者预后不良的危险因素(P<0.05),miR-135降低是前列腺癌患者预后不良的保护性因素(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,3项联合预测前列腺癌预后的曲线下面积(AUC)为0.984,高于miR-135、miR-103、miR-34b单项检测(0.828、0.899、0.850)(Z=3.515、2.202、2.776,P=0.000、0.028、0.005)。结论前列腺癌患者血浆miR-135呈相对高表达,miR-103、miR-34b水平呈相对低表达;miR-135、miR-103、miR-34b与前列腺癌患者病� 展开更多
关键词 前列腺癌 微小RNA-135 微小RNA-103 微小RNA-34b 临床病理特征 预后
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微小RNA-135a在消化系统恶性肿瘤中的研究进展 被引量:4
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作者 李星龙 刘明 李国东 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期363-365,共3页
微小RNAs(miRNAs,miR)是一类内源性、非编码的单链RNAs,在恶性肿瘤的演进过程中可发挥癌基因或抑癌基因的作用。研究结果表明,miRNA在消化系统肿瘤的发生、发展过程中均发挥着重要作用。目前,miR-135a在消化系统肿瘤发生、发展中... 微小RNAs(miRNAs,miR)是一类内源性、非编码的单链RNAs,在恶性肿瘤的演进过程中可发挥癌基因或抑癌基因的作用。研究结果表明,miRNA在消化系统肿瘤的发生、发展过程中均发挥着重要作用。目前,miR-135a在消化系统肿瘤发生、发展中的作用已引起广泛关注。研究结果证实,miR-135a可通过调控其靶基因的表达而影响肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭和转移等多个关键生物学过程。本文主要就miR-135a在消化系统肿瘤中的最新研究进展予以综述。 展开更多
关键词 微小RNA-135a 消化系统肿瘤 细胞增殖 凋亡 侵袭 转移
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寻常型银屑病患者血清microRNA-135a水平与Th1/Th2平衡的关系 被引量:4
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作者 韩莎莎 王苗苗 《武警后勤学院学报(医学版)》 CAS 2018年第11期916-919,共4页
【目的】分析寻常型银屑病患者血清微小RNA-135a(microRNA-135a,miR-135a)表达水平与Th1/Th2 平衡的关系。【方法】将2017 年5 月至2018 年6 月在本院诊治的63 例寻常型银屑病患者作为病例组,同期60 例健康者作为对照组,采用实时荧光定... 【目的】分析寻常型银屑病患者血清微小RNA-135a(microRNA-135a,miR-135a)表达水平与Th1/Th2 平衡的关系。【方法】将2017 年5 月至2018 年6 月在本院诊治的63 例寻常型银屑病患者作为病例组,同期60 例健康者作为对照组,采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)法检测两组受试者血清miR-135a 相对表达量,采用银屑病皮损面积和严重程度评分(psoriasis area and severity index,PASI)评估病例组患者病情严重程度,采用流式细胞术检测外周血CD4+ T 细胞中Th1、Th2 细胞比例,ELISA 法检测血清干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)及白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)、白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)水平,分析病例组血清miR-135a 表达水平与PASI 评分、Th1/Th2 的关系。【结果】病例组血清miR-135a 相对表达量低于对照组,与PASI 评分呈负相关关系(r=-0.714,P=0.005);病例组Th1 细胞比例及血清INF-γ、IL-2 水平高于对照组,Th2 细胞比例及血清IL-4、IL-10 水平低于对照组,Th1/Th2 水平高于对照组(P<0.05);病例组血清miR-135a 表达水平与Th1/Th2 水平呈负相关关系(r=-0.675,P=0.013)。【结论】寻常型银屑病患者血清miR-135a 表达降低,与Th1/Th2 失衡有关,可能通过影响Th1/Th2 平衡,参与病情发生及发展过程。 展开更多
关键词 寻常型银屑病 微小RNA-135a TH1细胞 TH2细胞
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miR-135a在胶质瘤中的表达变化及作用机制 被引量:3
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作者 许大远 李志强 +2 位作者 宋大勇 权哲 沈冬青 《山东医药》 CAS 2019年第7期27-30,共4页
目的探讨miR-135a在胶质瘤中的表达及对胶质瘤细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其相关分子机制。方法采用实时荧光定量PCR法检测60例的胶质瘤组织及相对应的癌旁组织、人胶质瘤细胞(U87、U251、A172)和人星形胶质细胞HA1800中miR-135a表达... 目的探讨miR-135a在胶质瘤中的表达及对胶质瘤细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其相关分子机制。方法采用实时荧光定量PCR法检测60例的胶质瘤组织及相对应的癌旁组织、人胶质瘤细胞(U87、U251、A172)和人星形胶质细胞HA1800中miR-135a表达水平。将miR-135a mimics转染至U87细胞,采用CCK-8实验、流式细胞术观察U87细胞增殖活性及凋亡率的变化,采用Western blotting法观察U87细胞HOXA10蛋白的表达变化。结果胶质瘤组织较癌旁组织中miR-135a表达低(P<0.01);胶质瘤细胞U87、U251、A172中miR-135a表达较人星形胶质细胞HA1800低(P<0.01);随着胶质瘤病理分级的增高,miR-135a的表达逐渐降低(P均<0.01)。上调U87细胞miR-135a的表达后,细胞的增殖活性降低,凋亡率升高,HOXA10蛋白表达降低(P均<0.01)。结论 miR-135a在胶质瘤中呈低表达,miR-135a通过下调HOXA10基因在胶质瘤中发挥着抑癌作用。 展开更多
关键词 微小RNA-135a 胶质瘤 细胞增殖 细胞凋亡 同源框基因A10
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阿尔茨海默病患者血液标本外吐小体中miRNA-135a的检测 被引量:2
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作者 刘辰庚 王金玲 +4 位作者 李蕾 张雁冰 宋静 洪萍 王培昌 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第22期4361-4363,4287,共4页
目的:提取轻度认知障碍(MCI)、阿尔茨海默型痴呆(DAT)患者血液标本以及PC-12细胞培养基标本中的外吐小体并检测其中miRNA-135a含量。方法:使用超速离心法分离7例MCI、18例DAT患者、健康对照组的血清和血浆及PC-12细胞培养基中的外吐小体... 目的:提取轻度认知障碍(MCI)、阿尔茨海默型痴呆(DAT)患者血液标本以及PC-12细胞培养基标本中的外吐小体并检测其中miRNA-135a含量。方法:使用超速离心法分离7例MCI、18例DAT患者、健康对照组的血清和血浆及PC-12细胞培养基中的外吐小体,使用实时定量PCR检测外吐小体中miRNA-135a的含量。结果:在PC-12细胞培养基、血清和血浆标本外吐小体中检出了miRNA-135a。MCI和DAT患者血清、血浆外吐小体miRNA-135a水平显著低于健康对照组(P<0.05),但MCI患者血清、血浆外吐小体miRNA-135a水平与DAT患者相比无显著性差异(P>0.05)。MCI、DAT和健康对照三者的血清和血浆标本外吐小体miRNA-135a水平均无相关性(P>0.05)。结论:本研究证实了血液和脑脊液标本外吐小体中存在miRNA-135a,对将外吐小体miRNA作为AD诊疗潜在标志物提供了证据。 展开更多
关键词 外吐小体 阿尔茨海默病 超速离心 microrna-135a
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MiR-135a与糖尿病肾病肾脏纤维化的相关性研究 被引量:2
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作者 刘思逸 何凤 +3 位作者 陈钦开 魏昕 张莉 杨玉娟 《江西医药》 CAS 2016年第7期624-629,共6页
目的探讨miR-135a与糖尿病肾病肾脏纤维化关系及其具体作用机制。方法通过RT-PCR技术测定糖尿病肾病患者血清及肾脏组织中miRNA-135a(miR-135a)的含量。采用荧光素酶报告基因实验验证miRNA-135a的靶基因。构建miR-135a过表达质粒,上调... 目的探讨miR-135a与糖尿病肾病肾脏纤维化关系及其具体作用机制。方法通过RT-PCR技术测定糖尿病肾病患者血清及肾脏组织中miRNA-135a(miR-135a)的含量。采用荧光素酶报告基因实验验证miRNA-135a的靶基因。构建miR-135a过表达质粒,上调肾小球系膜细胞及肾小管上皮细胞中miR-135a的表达,通过蛋白印记及免疫荧光法检测与肾脏纤维化相关蛋白的表达,运用荧光素报告基因及免疫印记的方法寻找、确定miR-135a。结果从糖尿病肾病患者以及db/db小鼠的血清和肾组织的miR-135a水平来看,miR-135a表达显著上调。我们证实了瞬时受体电位阳离子通道,亚家族C,成员1(Transient receptor potential channel,subfamily C,member 1,TRPC1)是miR-135a的靶基因。TRPC1的过度表达能够逆转miR-135a对促进肾小球系膜细胞增殖以及增加胞外基质蛋白合成的病理效应。在糖尿病患者肾组织中miR-135a的减少使得TRPC1回到正常水平,并减少了纤维连接蛋白和胶原蛋白I在人体内的合成。抑制TRPC1水平可能是miR-135a在糖尿病肾损伤中促肾纤维化的一种机制。结论 miR-135a可通过靶向调节TRPC1参与糖尿病肾病肾脏纤维化的发生,这些发现表明miR-135a在肾脏纤维化中有重要作用,抑制miR-135a的表达可能成为治疗糖尿病肾病的一种有效方法。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 纤维化 microrna-135a TRPC1
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miR-21和miR-135对前列腺癌筛查的临床价值 被引量:1
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作者 王威 孙克 《现代泌尿生殖肿瘤杂志》 2019年第2期109-111,共3页
目的评估miR-21和miR-135对前列腺癌筛查的临床价值。方法选取2016年8月至2018年6月我院收治的前列腺癌(PCa)患者、良性前列腺增生(BPH)患者和同时期体检正常的健康人群各80例,分别纳入PCa组、BPH组和健康组。采用实时荧光定量PCR法检... 目的评估miR-21和miR-135对前列腺癌筛查的临床价值。方法选取2016年8月至2018年6月我院收治的前列腺癌(PCa)患者、良性前列腺增生(BPH)患者和同时期体检正常的健康人群各80例,分别纳入PCa组、BPH组和健康组。采用实时荧光定量PCR法检测各组血清中miR-21和miR-135的表达水平,分析其对PCa的诊断价值。结果PCa组miR-21和miR-135的表达水平均明显高于BPH组和健康组(P<0.05),BPH组和健康组间差异无统计学意义(P>0.05);Gleason评分>7分的PCa患者血清miR-21和miR-135表达水平均明显高于Gleason评分≤7分的患者(P<0.05)。结论miR-21和miR-135在PCa患者血清中呈高表达,可作为PCa筛查、辅助诊断和预后评估的分子标志物。 展开更多
关键词 MIR-21 miR-135 前列腺癌
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微小RNA-135a抑制骨肉瘤干细胞的迁移、侵袭和自我更新
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作者 杨美菊 陈士伟 +1 位作者 李鹏翠 孙晓娟 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2022年第11期2097-2100,共4页
目的探讨微小RNA(miR)-135a对骨肉瘤干细胞(OSCs)迁移、侵袭和自我更新的影响。方法微球体筛选移植瘤原代细胞的OSCs(P-OSCs)和Saos-2的OSCs(S-OSCs)。实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测分化群(CD)CD133、CD44、CD24和BMI1的转录水平,... 目的探讨微小RNA(miR)-135a对骨肉瘤干细胞(OSCs)迁移、侵袭和自我更新的影响。方法微球体筛选移植瘤原代细胞的OSCs(P-OSCs)和Saos-2的OSCs(S-OSCs)。实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测分化群(CD)CD133、CD44、CD24和BMI1的转录水平,蛋白质印迹法(Western blot)检测CD133、CD44、CD24、BMI1和B细胞淋巴瘤2(bcl-2)的蛋白水平。构建miR-135a过表达的P-OSCs或S-OSCs为miR-135a组,相应的阴性病毒转染P-OSCs或S-OSCs为对照组(NC)。划痕、Transwell和球体形成实验分别检测细胞的迁移、侵袭和自我更新能力。采用GraphPad Prism 8.4.2进行分析。结果miR-135a组P-OSCs和S-OSCs的伤口愈合率[(46.33±11.25)%比(73.46±2.24)%和(31.25±2.61)%比(47.20±1.94)%,t=3.346、8.489,均P<0.05]、穿膜细胞数[(287.00±34.29)个比(401.33±14.66)个和(255.67±17.02)个比(574.67±31.58)个,t=4.336、12.570,均P<0.05]、成球率[(1.89±0.44)%比(3.72±0.21)%和(1.57±0.17)%比(2.65±0.05)%,t=5.360、6.789,均P<0.01]和球体直径均低于NC组[(97.21±8.89)μm比(184.91±15.32)μm和(90.68±7.02)μm比(163.75±14.14)μm,t=7.003、6.546,均P<0.01]。CD44和bcl-2蛋白在骨肉瘤组织中表达高于骨组织(分别为0.87±0.11比0.46±0.08和1.96±0.69比0.41±0.13,t=4.286、3.126,均P<0.05),细胞中的表达趋势与组织一致。miR-135a组P-OSCs和S-OSCs中CD44(0.68±0.02比1.02±0.06和0.29±0.01比1.03±0.01,t=9.311、90.630)和bcl-2(0.46±0.01比0.95±0.01和0.41±0.02比0.84±0.01,t=60.010、33.310)的蛋白表达量低于NC组,均P<0.01。结论miR-135能够通过抑制CD44和bcl-2抑制OSCs的迁移、侵袭和自我更新。 展开更多
关键词 微小RNA-135a 肿瘤干细胞 转移 自我更新 CD44
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参附注射液调控大鼠心肌梗死模型microRNA-135a的表达机制
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作者 苏天生 罗继红 +4 位作者 卢静 陈志斌 王志民 廖云海 林磊 《中外医学研究》 2020年第16期1-3,共3页
目的:研究参附注射液对大鼠心肌梗死模型microRNA-135a的调控机制。方法:将60只健康SD大鼠随机分为三组,每组20只。模型组和参附注射液组行结扎冠状动脉左前降支(LAD)术建立心肌梗死模型,假手术组冠状动脉不做结扎。模型组和假手术组予... 目的:研究参附注射液对大鼠心肌梗死模型microRNA-135a的调控机制。方法:将60只健康SD大鼠随机分为三组,每组20只。模型组和参附注射液组行结扎冠状动脉左前降支(LAD)术建立心肌梗死模型,假手术组冠状动脉不做结扎。模型组和假手术组予以0.9%氯化钠注射液6.0 ml/(kg·d)腹腔注射,参附注射液组予以参附注射液6.0 ml/(kg·d)腹腔注射,连续给药12周。比较三组大鼠心肌质量指数。采用Realtime RT-PCR方法检测大鼠心肌microRNA-135a的表达。结果:参附注射液组和模型组大鼠全心质量指数及左心室重量指数均明显高于假手术组,且模型组高于参附注射液组,差异有统计学意义(P<0.01)。与假手术组比较,模型组大鼠心肌microRNA-135a表达量上调,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,参附注射液组大鼠心肌microRNA-135a表达量下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:microRNA-135a在心肌梗死中可能发挥重要作用,参附注射液可能通过抑制microRNA-135a的上调,抑制心肌梗死大鼠心室重构,从而改善大鼠心功能。 展开更多
关键词 参附注射液 心肌梗死 microrna-135a
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微小RNA-135a通过Notch通路调控小儿肝母细胞瘤细胞增殖的机制
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作者 陈志平 潘群雄 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第11期1909-1911,共3页
目的观察微小RNA(miRNA,miR)-135a通过Notch通路调控小儿肝母细胞瘤细胞增殖和增殖的影响。方法将传代的肝母细胞瘤细胞分为两组:A组:PEF miR-135a和PSV2neo共转染组,B组:PEE和PSV2neo共转染组,取正常小儿肝脏细胞作为C组。A组... 目的观察微小RNA(miRNA,miR)-135a通过Notch通路调控小儿肝母细胞瘤细胞增殖和增殖的影响。方法将传代的肝母细胞瘤细胞分为两组:A组:PEF miR-135a和PSV2neo共转染组,B组:PEE和PSV2neo共转染组,取正常小儿肝脏细胞作为C组。A组为实验组,B、C两组为阳性对照组和阴性对照组。采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测miR-135a在两组肝母细胞瘤细胞中的表达,采用流式细胞法检测过表达的miR-135a对肝母细胞瘤细胞凋亡的影响,利用噻唑蓝(MTT)法及碱性磷酸酶(ALP)法检测观察两组细胞的增殖和增殖,Western blot检测两组细胞中Jagged1和Notch1蛋白的表达水平。结果Real-time PCR显示miR-135a在肝母细胞瘤细胞中的表达较正常小儿肝脏细胞明显下调(P=0.009);成功构建PEF-miR-135a真核表达载体,Real-time PCR显示:A组细胞miR-135a的表达明显上调(P=0.003)。膜联蛋白V(Annexin V)-异硫氰酸荧光素(FITC)检测显示miR-135a过表达能够显著抑制肝母细胞瘤细胞的凋亡率(P=0.030)。Western blot检测显示miR-135a过表达可以显著下调Jagged1和Notch1蛋白的表达水平。结论miR-135a过表达可能通过下调Notch通路的表达来抑制小儿肝母细胞瘤细胞的增殖。 展开更多
关键词 肝母细胞瘤 微小RNA-135a NOTCH通路 增殖
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MicroRNA-135a通过靶向Rap2a对肾细胞癌细胞迁移侵袭的影响
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作者 陈文炜 高星健 +4 位作者 张华 陈沁 江涛 高锐 毛厚平 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2018年第6期1058-1061,共4页
目的:探讨MicroRNA(miR)-135a对Ras家族小G蛋白2a(Rap2a)下游p-Akt表达及肾细胞癌(RCC)细胞迁移侵袭的影响,深入了解RCC恶化的潜在机制。方法:采用蛋白质印迹法检测正常肾组织细胞HK-2与RCC细胞Ketr-3、786-O、ACHN中Rap2a的表达水平; T... 目的:探讨MicroRNA(miR)-135a对Ras家族小G蛋白2a(Rap2a)下游p-Akt表达及肾细胞癌(RCC)细胞迁移侵袭的影响,深入了解RCC恶化的潜在机制。方法:采用蛋白质印迹法检测正常肾组织细胞HK-2与RCC细胞Ketr-3、786-O、ACHN中Rap2a的表达水平; Target Scan软件预测靶向调控Rap2a的潜在miRNAs;双荧光素酶报告基因实验检测miR-135a与Rap2a基因的靶向关系;蛋白质印迹法检测Ketr-3细胞中Rap2a及其下游信号蛋白磷酸化蛋白激酶B(phosphate protein kinase B,p-Akt)表达;侵袭小室实验检测Ketr-3细胞的迁移侵袭能力。结果:Rap2a在正常肾组织细胞HK-2中低表达,在RCC细胞系中显著高表达;Target Scan软件预测发现miR-135a可与Rap2a的3'UTR互补结合;双荧光素酶报告基因检测与蛋白质印迹法实验均证实了miR-135a与Rap2a间的相互作用;过表达miR-135a可通过降低Rap2a及其下游蛋白p-Akt的表达抑制Ketr-3细胞的迁移侵袭能力。结论:本研究揭示了miR-135a通过靶向Rap2a/Akt信号途径抑制RCC细胞的迁移侵袭能力,miR-135a和Rap2a可能是治疗RCC的潜在分子靶点。 展开更多
关键词 肾细胞癌 microrna-135a Ras家族小G蛋白2a 迁移 侵袭
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miR-135a-5p、GATA3和STAT3在宫颈癌中的表达及其相关性 被引量:12
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作者 张梦 马冬 +4 位作者 袁腾 樊少蓓 郭颖 刘佳 李鸥 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2019年第4期338-344,共7页
目的探讨不同病理类型宫颈组织及宫颈癌细胞系中miR-135a-5p、GATA3和STAT3的表达及其与宫颈癌之间的关系。方法实时定量RT-PCR法检测各宫颈组织及细胞中miR-135a-5p的表达水平;免疫组织化学SP和Western blot法检测宫颈组织和细胞中GATA... 目的探讨不同病理类型宫颈组织及宫颈癌细胞系中miR-135a-5p、GATA3和STAT3的表达及其与宫颈癌之间的关系。方法实时定量RT-PCR法检测各宫颈组织及细胞中miR-135a-5p的表达水平;免疫组织化学SP和Western blot法检测宫颈组织和细胞中GATA3和STAT3蛋白的表达;双荧光素酶报告基因验证miR-135a-5p与GATA3 3’UTR间的作用,分析miR-135a-5p和GATA3 mRNA的表达结果与宫颈癌临床病理参数的关系。结果 miR-135a-5p在宫颈癌组织及细胞系中的表达均上调(均P<0.05)。GATA3 mRNA的表达水平随着宫颈病变程度增加而降低(P<0.05);STAT3 mRNA表达水平随着宫颈病变程度增加而升高(P<0.05)。miR-135a-5p可靶向作用于G ATA 33’UTR。宫颈癌组织中miR-135a-5p与GATA3(r=-0.6656)、GATA3和STAT3 mRNA表达水平呈负相关(r=-0.4534)。在宫颈癌中miR-135a-5p表达水平与临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05);GATA3 mRNA的表达与临床分期、肌层浸润深度及淋巴结转移均有关(P<0.05)。结论宫颈癌中miR-135a-5p和STAT3表达上调,GATA3表达下调,三者可能通过相互作用参与宫颈癌的发生、发展。 展开更多
关键词 宫颈癌 微小RNA-135a-5p GATA结合蛋白3 信号转导与转录激活因子3
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