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miR-200a通过β-catenin/TCF-4信号通路抑制胃癌细胞系生长侵袭能力的体外研究 被引量:9
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作者 苏娟 张庆瑜 +3 位作者 康春生 张安玲 王涛 张洁 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期65-69,共5页
目的:研究miR-200a通过β-catenin/TCF-4信号通路对SGC7901胃癌细胞增殖活性及侵袭迁移能力的影响。方法:化学合成miR-200a mimics,采用脂质体Lipofectamine 2000转染胃腺癌细胞SGC7901,qRT-PCR检测转染效果,细胞免疫荧光、Western blo... 目的:研究miR-200a通过β-catenin/TCF-4信号通路对SGC7901胃癌细胞增殖活性及侵袭迁移能力的影响。方法:化学合成miR-200a mimics,采用脂质体Lipofectamine 2000转染胃腺癌细胞SGC7901,qRT-PCR检测转染效果,细胞免疫荧光、Western blot检测转染后目的蛋白的表达,TOP/FOP荧光素酶检测β-catenin/TCF-4活性,Transwell、划痕实验检测细胞迁移侵袭能力、MTT法检测细胞的增殖活性,流式细胞术检测细胞周期分布的改变。结果:脂质体介导的miR-200amimics转染SGC7901后,β-catenin/TCF-4蛋白的表达均降低,β-catenin的表达出现了细胞核向胞浆的转移。TOP荧光素酶活性下降2.27倍,而FOP荧光素酶活性基本不变。转染miR-200amimics组细胞的增殖活性、迁移、侵袭能力比空白组和阴性对照组明显下降,细胞周期出现G_0/G_1期阻滞。结论:提高miR-200a表达可以降低β-catenin/TCF-4信号通路的活性,抑制SGC7901的生长侵袭迁移能力。 展开更多
关键词 mirna-200a β-catenin/TCF-4 胃癌 侵袭
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不同类型肠易激综合征患者血清miRNA-144、miRNA-29a和miRNA-200a水平的临床意义 被引量:4
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作者 杨立顺 康建华 +3 位作者 沈兴娅 李德来 冯绍华 李娜 《国际检验医学杂志》 CAS 2020年第9期1030-1033,共4页
目的探讨不同类型肠易激综合征(IBS)患者血清微小RNA(miRNA)-144、miRNA-29a和miRNA-200a表达水平的相关性及临床意义,为IBS的病因学研究提供理论依据。方法采用病例抽样的方法选取2015年10月至2018年6月该院IBS患者110例,选取同期110... 目的探讨不同类型肠易激综合征(IBS)患者血清微小RNA(miRNA)-144、miRNA-29a和miRNA-200a表达水平的相关性及临床意义,为IBS的病因学研究提供理论依据。方法采用病例抽样的方法选取2015年10月至2018年6月该院IBS患者110例,选取同期110例体检健康者为健康对照组。受试者采样前12 h低蛋白饮食,每位受试者取10 mL静脉血样本,静脉血3000 r/min离心后取上清。采用实时荧光定量反转录PCR测定受试者miRNA-144、miRNA-29a和miRNA-200a表达水平。结果混合型IBS的miRNA-144、miRNA-29a和miRNA-200a表达水平均显著高于其他3种亚型(P<0.05),不确定型IBS的miRNA-144、miRNA-29a和miRNA-200a表达水平均显著高于便秘型IBS及腹泻型IBS(P<0.05)。混合型、不确定型IBS患者的miRNA-144、miRNA-29a、miRNA-200a的表达水平两两之间均存在相关性且有统计学意义(P<0.05),但对于单纯腹泻或者便秘型IBS患者来说,仅miRNA-29a与miRNA-200a的表达水平存在统计学相关性(P<0.05)。结论混合型、不确定型IBS患者血清miRNA-144、miRNA-29a和miRNA-200a表达水平较其他2种亚型高,且血清miRNA-144、miRNA-29a和miRNA-200a表达两两之间具有显著相关性。 展开更多
关键词 肠易激综合征 mirna-144 mirna-29a mirna-200a
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血清人附睾蛋白4联合外泌体miRNA-200a/200b/200c用于糖链抗原125阴性卵巢上皮癌早期诊断的价值 被引量:3
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作者 姜祥兵 王李菲 +3 位作者 吴春林 李凤 王冬花 高雪梅 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第19期2541-2545,共5页
目的研究血清人附睾蛋白4(human epididymal protein,HE4)联合外泌体中的微小RNA(miRNA)-200a/200b/200c用于糖链抗原125(sugar chain antigen,CA125)阴性卵巢上皮癌(epithelial ovarian carcinoma,EOC)早期诊断的价值。方法选取CA125阴... 目的研究血清人附睾蛋白4(human epididymal protein,HE4)联合外泌体中的微小RNA(miRNA)-200a/200b/200c用于糖链抗原125(sugar chain antigen,CA125)阴性卵巢上皮癌(epithelial ovarian carcinoma,EOC)早期诊断的价值。方法选取CA125阴性EOC患者120例作为研究对象,设为研究组;另选取同期收治的115例卵巢上皮良性肿瘤患者作为良性组,107例于武汉市第一医院体检的健康女性作为对照组。比较3组HE4、CA125、miRNA-200a、miRNA-200b、miRNA-200c水平,通过受试者工作特征(ROC)曲线分析各项血清指标鉴别CA125阴性EOC及卵巢上皮良性肿瘤的价值。结果研究组HE4及miRNA-200a、miRNA-200b、miRNA-200c水平显著高于良性组、对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。经ROC分析证实,血清HE4及miRNA-200a、miRNA-200b、miRNA-200c能够用于CA125阴性EOC的诊断,且HE4+miRNA-200a/b/c联合诊断相对于单独及两两诊断可获得更高的曲线下面积,均有P<0.05。经logistic逐步回归分析证实,HE4≥163.110 pmol/L、miRNA-200a≥2.7002^(-△△CT)、miRNA-200b≥1.6652^(-△△CT)、miRNA-200c≥1.3952^(-△△CT)为CA125阴性EOC发生的危险因素(P<0.05)。结论血清HE4及miRNA-200a、miRNA-200b、miRNA-200c可用于CA125阴性EOC的早期诊断中,且四项指标联合诊断具有更高的敏感度与特异性,值得临床医师关注。 展开更多
关键词 卵巢上皮癌 糖链抗原125 人附睾蛋白4 微小RNA mirna-200a mirna-200b mirna-200c
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miRNA-486、miRNA-200和miRNA-10b在肺癌患者血液中的表达及临床意义 被引量:3
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作者 李逸轩 付君婷 +5 位作者 邓小刚 段欣汝 韩淳 吕鹏飞 邝仕成 肖莎 《海南医学》 CAS 2020年第24期3134-3137,共4页
目的探讨miRNA-486、miRNA-200、miRNA-10b在肺癌患者与非肺癌患者血液中表达的差异性,并分析其与肺癌遗传易感性的关联性。方法采用病例对照研究方法,选择海南医学院附属海南医院2012年1月至2016年7月期间呼吸内科肺癌患者93例作为病例... 目的探讨miRNA-486、miRNA-200、miRNA-10b在肺癌患者与非肺癌患者血液中表达的差异性,并分析其与肺癌遗传易感性的关联性。方法采用病例对照研究方法,选择海南医学院附属海南医院2012年1月至2016年7月期间呼吸内科肺癌患者93例作为病例组,非肺癌患者41例作为对照组,获得知情同意后,采集研究对象的血液样本用于提取总miRNA,采用real-time PCR法检测miRNA-486、miRNA-200、miRNA-10b的相对表达水平,并运用秩和检验方法对实验结果进行多组间分析。结果病例组与对照组患者的性别、年龄、吸烟史,饮酒史比较,差异均无统计学意义(P>0.05);病例组患者的血液miRNA-486相对表达水平明显低于对照组,而miRNA-10b相对表达水平明显高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05),而两组间的miRNA-200相对表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05);病例组中不同性别、年龄、吸烟史,饮酒史患者的miRNA-486、miRNA-200、miRNA-10b相对表达水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论miRNA-486和miRNA-10b与肺癌遗传易感性具有关联,有可能作为肺癌的遗传易感性生物标志物。 展开更多
关键词 mirna-486 mirna-10b mirna-200 肺癌 遗传易感性
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miRNA-200a阻抑小鼠矽肺纤维化的实验研究 被引量:7
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作者 王欣 徐渴 +4 位作者 曾强 张明 杨雪莹 刘静 刘义涛 《公共卫生与预防医学》 2018年第1期21-25,共5页
目的观察过表达miRNA-200a重组慢病毒Lv-miR-200a在小鼠矽肺模型中对β-catenin的影响及矽肺纤维化的抑制作用,为探讨矽肺的分子机制奠定实验基础。方法将小鼠分为生理盐水组、Si O2模型组(3mg Si O2)、过表达miRNA-200a的重组慢病毒(Si... 目的观察过表达miRNA-200a重组慢病毒Lv-miR-200a在小鼠矽肺模型中对β-catenin的影响及矽肺纤维化的抑制作用,为探讨矽肺的分子机制奠定实验基础。方法将小鼠分为生理盐水组、Si O2模型组(3mg Si O2)、过表达miRNA-200a的重组慢病毒(Si O2+Lv-miR-200a)组和对照慢病毒(Si O2+Lv-NC)组,每组18只。染尘7、14和28d后处死动物。Realtime-PCR检测肺组织中miRNA-200a和β-catenin的表达情况;ELISA法检测肺泡灌洗液中TGF-β1、TNF-α、IL-6和IL-1β细胞因子含量;利用羟脯胺酸试剂盒测定肺组织中羟脯胺酸含量;HE和Masson染色观察肺组织病理变化。结果染尘7、14和28d时,Si O2+Lv-miR-200a组中miRNA-200a的表达明显高于其余三组,β-catenin表达明显低于Si O2模型组和Si O2+Lv-NC组,差异有统计学意义(P<0.05);染尘7d时Si O2+Lv-miR-200a组的肺泡灌洗液中TGF-β1、TNF-α、IL-6和IL-1β的含量比Si O2模型组和Si O2+Lv-NC组明显减少,差异有统计学意义(P<0.05);Si O2+Lv-miR-200a组中的羟脯胺酸含量与Si O2模型组和Si O2+Lv-NC组相比明显减少,差异有统计学意义(P<0.05),病理学观察Si O2+Lv-miR-200a组中肺纤维化程度明显减轻。结论 miR-200a通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制矽肺纤维化的发展。 展开更多
关键词 miR-200a Β-CATENIN 矽肺纤维化
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miRNA-200a靶向BRD4对非小细胞肺癌上皮间质转化的影响 被引量:6
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作者 田晓静 周伊兰 薛宏峰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期832-836,共5页
目的:探讨miRNA-200a靶向BRD4对非小细胞肺癌(NSCLC)上皮间质转化(EMT)的影响及其可能的作用途径。方法:收集2017年1月至2018年12月我院手术切除的NSCLC组织和癌旁组织标本65例,采用RT-PCR检测miRNA-200a在NSCLC组织和癌旁组织中的表达... 目的:探讨miRNA-200a靶向BRD4对非小细胞肺癌(NSCLC)上皮间质转化(EMT)的影响及其可能的作用途径。方法:收集2017年1月至2018年12月我院手术切除的NSCLC组织和癌旁组织标本65例,采用RT-PCR检测miRNA-200a在NSCLC组织和癌旁组织中的表达水平;构建miRNA-NC和miRNA-200a稳定细胞系,采用生物信息学和荧光素酶报告基因分析miRNA-200a和BRD4的靶向关系;pcDNA空载和pcDNA-BRD4过表达载体分别转染miRNA-NC和miRNA-200a细胞,采用Western blot检测miRNA-200a靶向BRD4对E-cadherin和Vimentin蛋白表达的影响;采用Transwell分析miRNA-200a靶向BRD4对NSCLC细胞侵袭能力的影响。结果:miRNA-200a在NSCLC组织中的相对表达水平显著低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。生物信息学分析表明BRD4可能是miRNA-200a的一个作用靶点;双荧光素酶报告基因结果显示,在过表达BRD4-WT的细胞中,miRNA-200a组细胞的相对荧光素酶活性显著低于miRNA-NC组细胞(P<0.05);而在过表达BRD4-MUT的细胞中,miRNA-200a组和miRNA-NC组细胞的相对荧光素酶活性无显著性差异(P>0.05)。Western blot结果显示,与miRNA-NC组比较,miRNA-200a组细胞BRD4和Vimentin的蛋白表达水平显著下降,E-cadherin的蛋白表达显著增加(P<0.05);与miRNA-200a+pcDNA组比较,miRNA-200a+BRD4组细胞中Vimentin的蛋白表达水平明显回升,E-cadherin的蛋白表达显著回落,差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell实验显示,与miRNA-NC组比较,miRNA-200a组细胞的侵袭个数显著下降[(83.66±9.25)个比(32.73±6.02)个,P<0.05];与miRNA-200a+pcDNA组比较,miRNA-200a+BRD4组个细胞的侵袭个数明显回升,差异有统计学意义[(35.06±5.84)个比(62.02±7.28)个,P<0.05]。结论:miRNA-200a在NSCLC组织中高表达,过表达miRNA-200a可靶向下调BRD4的表达,从而抑制NSCLC中BRD4诱导的EMT和侵袭迁移。 展开更多
关键词 mirna-200a BRD4 非小细胞肺癌 上皮间质转化 侵袭
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miRNA-200家族在卵巢癌中作用的研究进展 被引量:6
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作者 辛艳 赵晓晶 +2 位作者 李季杨 兰雪 何秀萍 《现代生物医学进展》 CAS 2017年第7期1387-1389,共3页
MicroRNA(miRNA)是一类非编码小分子RNA,参与基因转录后水平调控,与肿瘤的形成、侵袭及转移、治疗及预后过程密切相关。研究发现,miRNA-200家族包括miR-141、miR-200a、miR-200b、miR-200c和miR-429在卵巢癌中的表达改变明显,且参与卵... MicroRNA(miRNA)是一类非编码小分子RNA,参与基因转录后水平调控,与肿瘤的形成、侵袭及转移、治疗及预后过程密切相关。研究发现,miRNA-200家族包括miR-141、miR-200a、miR-200b、miR-200c和miR-429在卵巢癌中的表达改变明显,且参与卵巢癌的发生、侵袭转移、卵巢癌细胞对紫杉醇的敏感性及复发过程,可能是用于卵巢癌的早期诊断、治疗、预后预测的指标。本文主要对miRNA-200家族在卵巢癌中的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 MI RNA-200 卵巢癌 诊断 预后
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miRNA-200a调控FOXC1增敏肺癌EGFR-TKI治疗的研究 被引量:5
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作者 尹媛 许伟 +3 位作者 吴双双 李燕 赵卫红 吴剑卿 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2017年第9期1067-1075,共9页
目的 :探究miRNA-200a对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)靶向治疗疗效的影响及其调控机制。方法:通过RT-PCR、Western blot等方法检测NSCLC细胞中miRNA-200a、FOXC1的表达量;四甲基偶氮唑盐(MTT)实验、细胞划痕实验、Tr... 目的 :探究miRNA-200a对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)靶向治疗疗效的影响及其调控机制。方法:通过RT-PCR、Western blot等方法检测NSCLC细胞中miRNA-200a、FOXC1的表达量;四甲基偶氮唑盐(MTT)实验、细胞划痕实验、Transwell实验分别检测miRNA-200a、FOXC1对肺腺癌细胞生长、迁移、侵袭等生物学行为的影响;荧光素酶报告实验分析FOXC1与miRNA-200a的靶向关系。结果:高表达miRNA-200a抑制肺腺癌细胞的生长、上皮间质转化、迁移、侵袭,并且增加肺腺癌细胞对吉非替尼的敏感性。此外,敲低FOXC1同样可以抑制细胞生长,恢复肺腺癌细胞对吉非替尼敏感性。结论:上调miRNA-200a或下调FOXC1可以增强NSCLC细胞对吉非替尼的敏感性。为克服表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂治疗的耐药性提供了一种新的有效治疗方法。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂 mirna-200a FOXC1 非小细胞肺癌 吉非替尼
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膀胱癌组织微RNA-212、微RNA-137、微RNA-200表达与临床病理特征的相关性及预测经尿道膀胱肿瘤切除术后复发的效能研究
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作者 张家兴 张际青 +5 位作者 杨云波 唐伟 刘海超 刘桂迁 李卫旗 裴志圣 《安徽医药》 CAS 2024年第4期727-732,共6页
目的 探讨膀胱癌组织微RNA-212(miRNA-212)、微RNA-137(miRNA-137)、微RNA-200(miRNA-200)表达与临床病理特征的相关性及预测经尿道膀胱肿瘤切除(TURBT)术后复发的效能。方法 选取2017年6月至2021年6月河北燕达医院100例膀胱癌病人,比... 目的 探讨膀胱癌组织微RNA-212(miRNA-212)、微RNA-137(miRNA-137)、微RNA-200(miRNA-200)表达与临床病理特征的相关性及预测经尿道膀胱肿瘤切除(TURBT)术后复发的效能。方法 选取2017年6月至2021年6月河北燕达医院100例膀胱癌病人,比较癌组织和癌旁组织及不同病理特征病人miRNA-212、miRNA-137、miRNA-200表达,并根据术后复发情况分为复发组、未复发组。比较两组miRNA-212、miRNA-137、miRNA-200表达,采用受试者操作特征(ROC)曲线分析miRNA-212、miRNA-137、miRNA-200预测复发的价值,比较不同miRNA-212、miRNA-137、miRNA-200表达水平病人复发率。结果 癌组织miRNA-212为2.03±0.56低于癌旁组织4.52±1.18(P<0.05),癌组织miRNA-137、miRNA-200表达分别为2.69±0.45、24.56±7.39,高于癌旁组织的1.28±0.30、7.33±2.21(P<0.05);随着组织学分级、TNM分期递增,miRNA-212表达逐渐降低,miRNA-137、miRNA-200表达逐渐升高(P<0.05);肌层浸润性膀胱癌病人miRNA-212低于非肌层浸润性膀胱癌,miRNA-137、miRNA-200高于非肌层浸润性膀胱癌(P<0.05);复发组miRNA-212(1.73±0.39)低于未复发组(2.28±0.44)(P<0.05),复发组miRNA-137、miRNA-200分别为3.06±0.72、37.96±12.18,高于未复发组2.35±0.40、22.86±7.50(P<0.05);miRNA-212高水平病人复发率低于低水平病人,miRNA-137、miRNA-200高水平病人复发率高于低水平病人(P<0.05)。结论 膀胱癌组织miRNA-212、miRNA-137、miRNA-200表达与临床病理特征相关,联合检测对TURBT后复发具有良好的预测能力,可作为预测术后复发的一种方案。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 微RNA-212 微RNA-137 微RNA-200 肿瘤复发 局部
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微小RNA-200家族与肿瘤关系的研究进展 被引量:4
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作者 易小芳 邢荣春 郑家芬 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1309-1312,共4页
肿瘤一直是威胁人类健康的重要致死性疾病,近年来其发病率逐渐上升。随着基因分子水平的深入研究,肿瘤发病机制取得了部分进展。越来越多的研究表明,微小RNA(miRNA)-200家族与肿瘤的发生密切相关,本文主要对近年来miRNA-200参与肿瘤细... 肿瘤一直是威胁人类健康的重要致死性疾病,近年来其发病率逐渐上升。随着基因分子水平的深入研究,肿瘤发病机制取得了部分进展。越来越多的研究表明,微小RNA(miRNA)-200家族与肿瘤的发生密切相关,本文主要对近年来miRNA-200参与肿瘤细胞增殖、分化、侵袭和转移等过程的机制方面做一综述,希望能对肿瘤的早期诊断、治疗和预后判断有所帮助,以降低病死率。 展开更多
关键词 mirna-200 肿瘤 诊断 治疗 耐药
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miRNA-200调控snail1诱导上皮间质转化改善糖尿病肾间质纤维化的研究
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作者 李婷婷 高志辉 +5 位作者 董传令 陈丽 赵硕 丁佳君 李诗瑶 成永霞 《牡丹江医学院学报》 2024年第5期1-7,共7页
目的验证miRNA-200能否通过调控snail来诱导肾小管上皮向间充质转化,从而在糖尿病肾病间质纤维化中发挥作用。方法将来源北纳生物的NRK52E细胞分为六组:正常葡萄糖(5 mM)组;等渗对照(25 mM甘露醇+正常葡萄糖5 mM)组,高葡萄糖(30 mM)组,... 目的验证miRNA-200能否通过调控snail来诱导肾小管上皮向间充质转化,从而在糖尿病肾病间质纤维化中发挥作用。方法将来源北纳生物的NRK52E细胞分为六组:正常葡萄糖(5 mM)组;等渗对照(25 mM甘露醇+正常葡萄糖5 mM)组,高葡萄糖(30 mM)组,高葡萄糖(30 mM)+NC组,高葡萄糖(30 mM)+miRNA-200模拟物组,高葡萄糖(30 mM)+miRNA抑制剂组。给予高葡萄糖(30 mM)组,高葡萄糖(30 mM)+NC组,高葡萄糖(30 mM)+miRNA-200模拟物组,高葡萄糖(30 mM)+miRNA抑制剂组30mM葡萄糖处理,对高葡萄糖(30 mM)+miRNA-200模拟物组,高葡萄糖(30 mM)+miRNA抑制剂组进行过表达质粒转染。qRT-PCR及Western blot法检测各组中snail、Vimentin、Collagen IV、α-SMA、E-cadherin mRNA和蛋白的表达水平;Transwell检测各组细胞的侵袭能力;划痕实验检测各组细胞的迁移能力;双荧光素酶报告基因实验验证靶定效果。结果与正常葡萄糖(5 mM)组相比,高葡萄糖(30 mM)组Vimentin、Collagen IV、α-SMA mRNA和蛋白的表达量增加,E-cadherin mRNA和蛋白的表达量下降(P<0.05);但与高葡萄糖(30 mM)组相比,高葡萄糖(30 mM)+miRNA-200模拟物组Vimentin、Collagen IV、α-SMA mRNA和蛋白的表达量降低,E-cadherin mRNA和蛋白的表达量增加(P<0.05);Transwell检测中,与正常葡萄糖(5 mM)组相比,高葡萄糖(30 mM)组侵袭能力降低,而高葡萄糖(30 mM)+miRNA-200模拟物组与其相比,细胞的迁移能力增强,microRNA-200抑制剂组细胞的迁移能力降低(P<0.01);划痕实验(48 h),与高葡萄糖(30 mM)组相比,高葡萄糖剂组(30 mM)+miRNA-200模拟物组使迁移能力明显增加,高葡萄糖(30 mM)+miRNA抑制剂组迁移能力明显减弱(P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验验证microRNA-200和野生型snail1共转染细胞的荧光素酶活性显著降低,而突变型snail1的荧光无明显变化,证明snail1是miR-200b-3p的直接靶点(P<0.01)。结论miRNA-200可以通过snail1调控肾小管上皮上皮细胞间充质转化诱导糖� 展开更多
关键词 糖尿病肾病 mirna-200 SNAIL1 上皮间质转化
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miRNA-200a通过下调ZEB2抑制鼻咽癌细胞的迁移和侵袭行为 被引量:4
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作者 陈英艳 王正辉 《空军医学杂志》 2017年第6期377-380,共4页
目的探讨miRNA-200a通过下调ZEB2抑制鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞的迁移和侵袭行为的作用及机制。方法 q PCR检测miRNA-200a在不同鼻咽癌细胞株中的表达情况;双荧光素酶报告基因检测miRNA-200a与ZEB2之间的相互作用;划痕... 目的探讨miRNA-200a通过下调ZEB2抑制鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞的迁移和侵袭行为的作用及机制。方法 q PCR检测miRNA-200a在不同鼻咽癌细胞株中的表达情况;双荧光素酶报告基因检测miRNA-200a与ZEB2之间的相互作用;划痕愈合实验和Transwell侵袭实验检测miRNA-200a对鼻咽癌细胞迁移和侵袭能力的影响;Western blot检测miRNA-200a对ZEB2蛋白表达水平的影响。结果与其他鼻咽癌细胞株相比,CNE-1细胞中miRNA-200a的表达水平明显较高;双荧光素酶实验证实miRNA-200a可以调控ZEB2的表达及活性,抑制miRNA-200a的表达可以减弱鼻咽癌细胞的迁移和侵袭能力;抑制miRNA-200a的表达后ZEB2的表达水平受到相应的抑制。结论 miRNA-200a可以靶向调节ZEB2的表达影响鼻咽癌细胞的迁移和侵袭行为。 展开更多
关键词 mirna-200a ZEB2 鼻咽癌 侵袭行为
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加味涤痰汤对慢性间歇缺氧模型大鼠心肌损伤及miR-200a/Nrf2信号通路的影响 被引量:1
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作者 王奕锦 陈沁 +5 位作者 陈乃洁 王丰 徐峰圣 廖燃 陈丽丽 吴润华 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1547-1551,共5页
目的基于MiRNA-200a/Nrf2信号轴探讨加味涤痰汤对慢性间歇缺氧大鼠心肌内质网应激和凋亡的影响。方法雄性SD大鼠,随机分为常氧+加味涤痰汤组、常氧对照组、间歇缺氧+加味涤痰汤组、间歇缺氧组,每组10只。间歇缺氧+加味涤痰汤组、间歇缺... 目的基于MiRNA-200a/Nrf2信号轴探讨加味涤痰汤对慢性间歇缺氧大鼠心肌内质网应激和凋亡的影响。方法雄性SD大鼠,随机分为常氧+加味涤痰汤组、常氧对照组、间歇缺氧+加味涤痰汤组、间歇缺氧组,每组10只。间歇缺氧+加味涤痰汤组、间歇缺氧组置于低氧舱中制备间歇缺氧模型。常氧+加味涤痰汤组、间歇缺氧组+加味涤痰汤组每天造模前给予加味涤痰汤干预,常氧对照组给予生理盐水灌胃,实验干预12周。HE染色观察左心室肌结构;TUNEL染色检测细胞凋亡;Q-PCR检测miRNA-200a、Caspase-3、Bax、Bcl-2、Keap1、Nrf2的mRNA的表达;Western blotting检测内质网应激相关蛋白Atf6、p-Perk、p-Ire1、Chop、Grp78,凋亡相关蛋白Bax、Caspase-3、Bcl-2,Keap1、Nrf2的表达水平。结果间歇缺氧组与常氧对照组相比大鼠心肌损伤明显,细胞界限不均,心肌纤维断裂,微血管扩张,并且出现淋巴细胞浸润,心肌细胞轻微水肿;TUNEL染色显示间歇缺氧组心肌凋亡增加,差异具有统计学意义(P<0.01);Bax/Bcl-2比率上调,Chop、Grp78、Caspase-3、Keap1的表达水平升高,Nrf2表达降低,Atf6、p-Perk、p-Ire1表达升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。间歇缺氧+加味涤痰汤组与间歇缺氧组相比,心肌细胞结构有所改善,凋亡下降,Bax/Bcl-2比率下调,Chop、Grp78、Caspase-3、Keap1的表达水平降低,Nrf2表达升高,Atf6、p-Perk、p-Ire1表达降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。常氧对照+加味涤痰汤组与常氧对照组相比无明显差异(P>0.05)。结论加味涤痰汤可能通过调节MiRNA-200a/Nrf2信号轴减轻内质网应激和细胞凋亡,从而对CIH大鼠心肌损伤起到一定的保护作用。 展开更多
关键词 加味涤痰汤 mirna-200a NRF2 慢性间歇缺氧 大鼠心肌 内质网应激 凋亡
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微小RNA-200a对肺癌细胞增殖影响及抑癌基因功能分析 被引量:1
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作者 谢悦 董礼文 +1 位作者 王军 李雄伟 《中国现代医生》 2018年第31期20-24,共5页
目的分析miRNA-200a对肺癌细胞增殖影响及抑癌基因功能影响。方法 Real-time PCR对正常肺支气管上皮细胞16HBE、肺癌细胞SK-MES-1、NCI-H520、A549及25例非小细胞癌癌旁组织与癌组织内miR-200a表达量检测,CCK-8法检测肺癌A549细胞增殖... 目的分析miRNA-200a对肺癌细胞增殖影响及抑癌基因功能影响。方法 Real-time PCR对正常肺支气管上皮细胞16HBE、肺癌细胞SK-MES-1、NCI-H520、A549及25例非小细胞癌癌旁组织与癌组织内miR-200a表达量检测,CCK-8法检测肺癌A549细胞增殖活性受miRNA-200a影响状况,生物信息学对miRNA-200a靶基因进行预测,双荧光素酶联合Western blot及Real-time PCR检验YAP1受miRNA-200a调控影响。CCK-8法检测肺癌549细胞受YAP1增殖影响。结果肺癌细胞株SK-MES-1、NCI-H520及A549内miR-200a表达量均低于正常细胞株16HBE,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-200a mimics组内A549细胞在48、72及96 h时其吸光度均低于Mimics-NC,差异有统计学意义(P<0.05)。肺癌A549转染siRNA-NC或者siRNA-YAP1后,PCR检测显示siRNA-YAP1内YAP1 m RNA表达量为(0.37±0.06),siRNA-NC内YAP1 mRNA表达量为(1.03±0.07),差异有统计学意义(P<0.05);Western blot显示siRNA-YAP1内YAP1蛋白表达量比siRNA-NC低;siRNA-YAP1内YAP1细胞吸光度在48、72及96 h时均低于siRNA-NC,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-200a对肺癌细胞增殖的抑制作用主要是经过靶向作用YAP1基因来实现的,进而在肺癌内起到抑癌功能。 展开更多
关键词 肺癌 mirna-200a YAP1 细胞增殖
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miR-200家族及侵袭相关基因ZEB1、ZEB2和CTNNB1在颅咽管瘤组织中的表达及意义 被引量:1
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作者 张道宝 徐建国 《临床神经外科杂志》 2022年第2期167-170,共4页
目的检测miR-200家族及侵袭相关基因ZEB1、ZEB2和CTNNB1在颅咽管瘤组织中的表达并初步探讨其在颅咽管瘤侵袭性生长中的作用。方法收集四川大学华西医院自2017年6月—2018年12月经手术切除的造釉细胞型颅咽管瘤(ACP)30例和鳞状上皮乳头... 目的检测miR-200家族及侵袭相关基因ZEB1、ZEB2和CTNNB1在颅咽管瘤组织中的表达并初步探讨其在颅咽管瘤侵袭性生长中的作用。方法收集四川大学华西医院自2017年6月—2018年12月经手术切除的造釉细胞型颅咽管瘤(ACP)30例和鳞状上皮乳头型颅咽管瘤(PCP)30例的新鲜标本,手术切除的失活脑组织作为对照组。HE染色观察病理变化。免疫组化检测E-cadherin和β-catenin的表达。qRT-PCR测定miR-200家族成员及与侵袭相关基因ZEB1、ZEB2和CTNNB1的表达水平。结果HE染色见ACP呈“指样”或“岛样”深入周围脑组织,呈浸润性生长,侵袭性明显。免疫组化示,ACP的β-catenin的表达升高,且分布在细胞质或者细胞核,PCP中β-catenin主要分布在细胞膜上;ACP相对于鳞状细胞型E-cadherin的表达下降。qRT-PCR示,与PCP相比,ACP中miRNA-200家族表达整体下降,组织中mRNA(ZEB1/ZEB2,CTNNB1)表达整体上调。结论miRNA-200家族在颅咽管瘤中可能起到类似于抑癌基因的作用。 展开更多
关键词 颅咽管瘤 侵袭性 mirna-200 ZEB1/ZEB2 CTNNB1
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Inhibitory effects of miRNA-200c on chemotherapy-resistance and cell proliferation of gastric cancer SGC7901/DDP cells 被引量:18
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作者 Yong Chen Jing Zuo Ying Liu Hong Gao Wei Liu 《Chinese Journal of Cancer》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1006-1011,共6页
Background and Objective: miRNA-200c can not only inhibit the aggressiveness of cancer cells but also increase the sensitivity of cells to antitumor drugs. However, some mechanisms are still unclear. Recent researches... Background and Objective: miRNA-200c can not only inhibit the aggressiveness of cancer cells but also increase the sensitivity of cells to antitumor drugs. However, some mechanisms are still unclear. Recent researches revealed that E-cadherin is more than an inhibitor of metastasis, and it also plays important roles in reversing drug resistance. We had previously found that miRNA-200c could not only induce the expression of E-cadherin but also increase the sensitivity of gastric cancer SGC7901/DDP cells to cisplatin (DDP). This study aimed to explore the effects of miRNA-200c on biological characteristics of SGC7901/DDP cells and the roles of E-cadherin in the regulatory pathway of miRNA-200c. Methods: SGC7901/DDP cells and its parental cell line SGC7901 cells were transfected with miRNA-200c precursor (Pre-200c) and E-cadherin siRNA, respectively. Real-time RT-PCR was used to detect miRNA-200c expression after transfection with Pre-200c in SGC7901/DDP cell line. Drug sensitivities to DDP, 5-fluorouracil (5-FU), paclitaxel, and adriamycin (ADR) after transfection were tested using MTT assay. The proliferation of SGC7901/DDP cells was also detected after transfection. The protein changes of E-cadherin, Bax, and Bcl-2 after transfection were detected by Western blot. Results: The miRNA-200c expression in SGC7901/DDP cells after transfection of Pre-200c was 7.128 ± 0.159 times of that in negative control (P < 0.05). The IC50 of DDP, 5-FU, paclitaxel, and ADR in Pre-200c-transfected group were significantly lower than that in negative control group (P < 0.05). Compared to the control group, cell proliferation was significantly decreased (P < 0.05). The relative protein expressions of E-cadherin and Bax in Pre-200c-transfected group were significantly higher than those in negative control group (P < 0.05), whereas Bcl-2 was significantly lower than that in control (P < 0.05). Additionally, E-cadherin protein expression was significantly inhibited after transfected with E-cadherin siRNA in SGC7901 cells. The Bax prote 展开更多
关键词 mirna 增殖细胞 胃癌细胞 C型 siRNA 细胞转染 钙粘蛋白 化疗
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长链非编码RNA生长阻滞特异转录物5/微小RNA 200c-3p/血管紧张素转换酶2信号轴参与呼吸窘迫综合征人肺上皮细胞A549的凋亡 被引量:13
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作者 李宏宾 訾盼盼 +2 位作者 石慧娟 高敏 孙荣青 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第41期3354-3359,共6页
目的探究长链非编码RNA生长阻滞特异转录物5/微小RNA200e-3p/血管紧张素转换酶2(1ncRNAGAS5/miR-200c-3p/ACE2)信号轴是否参与呼吸窘迫综合征(ARDS)肺上皮细胞的凋亡。方法构建ARDS大鼠模型,实验分为对照组(Control组)、LPS... 目的探究长链非编码RNA生长阻滞特异转录物5/微小RNA200e-3p/血管紧张素转换酶2(1ncRNAGAS5/miR-200c-3p/ACE2)信号轴是否参与呼吸窘迫综合征(ARDS)肺上皮细胞的凋亡。方法构建ARDS大鼠模型,实验分为对照组(Control组)、LPS处理组(ARDS组)、LPS+pcDNA处理组(ARDS+pcDNA组)和LPS+pcDNA-GAS5处理组(ARDS+pcDNA-GAS5组)。ARDS大鼠构建6h后收集4组大鼠动脉血及肺组织,血气分析仪进行测定氧分压(PaO2)和二氧化碳分压(PaCO2),并观察GAS5的表达变化。随后,用LPS处理人肺泡Ⅱ型上皮细胞A549,分为未处理、LPS、LPS+pcDNA、LPS+pcDNA-GAS5、LPS+pcDNA-GAS5+pre-NC和LPS+pcDNA-GAS5+miR-200c.3pmimic组。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测lncRNAGAS5、ACE2和miR-200c-3p的表达水平;RNA免疫沉淀和RNA下拉(pull-down)实验用于检测GAS5与miR.200c-3p的结合与调控:Westernblotting法检测ACE2的蛋白表达;流式细胞术用于检测A549细胞的凋亡。组间数据比较采用t检验。结果ARDS大鼠实验表明与ARDS+pcDNA组相比,ARDS+pcDNA-GAS5组P0,值显著升高[(81.5±3.3)比(57.5±5.1)mmHg,t=4.850,P〈0.05],PC02值显著降低[(50.6±1.9)比(64.0±1.9)mmHg,t=5.940,P〈0.05]。细胞实验中,与Control组相比,LPS组A549细胞中IncRNAGAS5的表达显著下降(0.43±0.01比1.01±0.01,t=0.242,P〈0.05)。与LPS+pcDNA组相比,LPS+pcDNA-GAS5组ACE2的表达水平显著升高(0.85±0.04比0.34±0.02,t=1.800,P〈0.05):与LPS+pcDNA-GAS5+pre-NC组相比,LPS+pcDNA-GAS5+miR-200c-3pmimic组ACE2的表达水平显著降低(0.62±0.01比0.84±0.02,t=9.440,P〈0.05)。与未处理组相比,LPS组A549细胞凋亡百分比明显升高(25.90±0.61比7.90±0.22,t=0.257,P〈0.05);与LPS+pcDNA组相比,LPS+pcDNA-GAS5组凋亡百分比明显降低� 展开更多
关键词 呼吸窘迫综合征 生长阻滞特异转录物5 微小RNA-200c-3p 血管紧张素转换酶2 人肺上皮细胞A549
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结直肠癌及缺氧的结直肠癌细胞中HIF-1α与miRNA-200b表达的相关性 被引量:10
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作者 郭靖 尚杨杨 汪荣泉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期545-549,共5页
目的探讨缺氧诱导因子HIF-1α与miRNA-200b在结直肠癌及缺氧的结直肠癌细胞中的表达以及两者的相关性。方法采用实时定量PCR检测50例结直肠癌患者的结直肠癌组织及其癌旁组织中HIF-1α与miRNA-200b的表达。利用Co Cl_2构建结肠癌细胞系... 目的探讨缺氧诱导因子HIF-1α与miRNA-200b在结直肠癌及缺氧的结直肠癌细胞中的表达以及两者的相关性。方法采用实时定量PCR检测50例结直肠癌患者的结直肠癌组织及其癌旁组织中HIF-1α与miRNA-200b的表达。利用Co Cl_2构建结肠癌细胞系的缺氧诱导模型,通过实时定量PCR和Western blot分别测定缺氧的Caco-2细胞中HIF-1α和miRNA-200b基因表达并确立两者相关性。结果 HIF-1α在癌组织中的表达显著高于癌旁组织(P〈0.01),miRNA-200b在癌组织中的表达显著低于癌旁组织(P〈0.01),且HIF-1α和miRNA-200b在癌组织中的表达呈负相关(r=-0.324,P〈0.05)。缺氧处理2 h后,HIF-1α表达升高,miRNA-200b表达降低;随着缺氧时间延长(4~12 h)HIF-1α表达逐渐降低,miRNA-200b的表达缓慢上升;缺氧16 h,HIF-1α的表达回升且达到另一个高峰,miRNA-200b的表达降至最低。Real-time PCR和Western blot联合检测发现,HIF-1α和miRNA-200b表达呈相反的趋势。结论 HIF-1α可能通过抑制miRNA-200b的表达从而参与结直肠癌上皮细胞EMT的过程。 展开更多
关键词 结肠癌 HIF-1Α mirna-200b EMT
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has-miRNA-200b在宫颈癌中的表达及意义 被引量:9
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作者 张占薪 罗大虎 崔金全 《中国实用妇科与产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期386-387,共2页
目的探讨has-miRNA-200b在宫颈癌组织中的表达情况及与宫颈癌发生之间的关系。方法 2007年1月至2008年12月在郑州大学第二附属医院提取36例宫颈癌组织和36例癌旁正常宫颈组织中的小分子RNA,用实时定量PCR的方法分析hsa-miRNA-200b在宫... 目的探讨has-miRNA-200b在宫颈癌组织中的表达情况及与宫颈癌发生之间的关系。方法 2007年1月至2008年12月在郑州大学第二附属医院提取36例宫颈癌组织和36例癌旁正常宫颈组织中的小分子RNA,用实时定量PCR的方法分析hsa-miRNA-200b在宫颈癌组织和癌旁正常宫颈组织中的表达情况。结果相对于癌旁正常宫颈组织,has-miRNA-200b在宫颈癌组织中的表达显著增高(P<0.01),平均升高7.16倍(P<0.05);has-miRNA-200b在中分化和低分化癌的表达显著高于高分化癌中的表达,平均升高8.62倍(P<0.01);其表达随着肿瘤分化程度的降低而明显增高(P<0.01)。结论 has-miRNA-200b在宫颈癌组织中存在异常高表达,提示其与宫颈癌的发生与进展可能有关,值得进一步研究。 展开更多
关键词 has-mirna-200b 宫颈肿瘤 实时定量PCR
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miRNA-200b通过靶向RhoA抑制宫颈癌细胞增殖、促进细胞凋亡 被引量:8
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作者 何丽杰 陈会佳 +3 位作者 王静 常丹丹 吕丹丹 李海娜 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第13期1576-1581,共6页
目的:探讨miRNA-200b通过靶向调控RhoA对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:将宫颈癌HeLa细胞分为5组:空白对照组、阴性对照组、miRNA-200b mimic组、RhoA阴性对照组、RhoA过表达组,转染后48 h收集细胞。RT-PCR检测miRNA-200b表达;双荧... 目的:探讨miRNA-200b通过靶向调控RhoA对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:将宫颈癌HeLa细胞分为5组:空白对照组、阴性对照组、miRNA-200b mimic组、RhoA阴性对照组、RhoA过表达组,转染后48 h收集细胞。RT-PCR检测miRNA-200b表达;双荧光素酶靶标实验验证miRNA-200b与RhoA的靶向关系;RT-PCR和Western blot检测RhoA mRNA和蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡,CCK8法检测细胞增殖。RT-PCR和Western blot检测Bax、CyclinD1 mRNA和蛋白表达。结果:双荧光素酶报告基因实验分析结果显示,RhoA是miRNA-200b的靶基因;与空白对照组和miRNA-200b mimic-NC组相比,miRNA-200b mimic组细胞凋亡比例显著升高,细胞增殖被抑制(P<0.05)。过表达RhoA,细胞凋亡比例降低,细胞增殖能力显著增强(P<0.05)。结论:miRNA-200b可通过靶向RhoA基因抑制宫颈癌细胞增殖并促进其凋亡。 展开更多
关键词 mirna-200b RHOA 宫颈癌 增殖 凋亡
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