miR-613阻断宫颈癌进展及其机制

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作者 刘璐 纪红 《锦州医科大学学报》 CAS 2024年第2期92-97,共6页

目的探讨miR-613对宫颈癌细胞进展的影响和作用机制。方法将HeLa细胞随机分为control组、NC组和miR-613过表达组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测宫颈癌HeLa细胞和正常宫颈E6E7细胞miR-613表达;采用细胞计数试剂(CCK-8)... 目的探讨miR-613对宫颈癌细胞进展的影响和作用机制。方法将HeLa细胞随机分为control组、NC组和miR-613过表达组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测宫颈癌HeLa细胞和正常宫颈E6E7细胞miR-613表达;采用细胞计数试剂(CCK-8)检测各组宫颈癌HeLa细胞细胞增殖情况;采用克隆形成实验检测各组细胞克隆数;采用划痕实验检测各组细胞迁移情况;采用Transwell实验检测各组细胞侵袭情况;采用Western Blot实验β-连环蛋白肽(β-catenin)、波形蛋白(vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、c-Myc基因、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinases 9,MMP9)蛋白相对表达量。结果miR-613在宫颈癌HeLa细胞中的相对表达量明显低于宫颈正常细胞(P<0.05)。control组和NC组细胞各时间点的OD(450 nm)值、克隆细胞数、迁移侵袭数、β-catenin、vimentin、E-cadherin、c-Myc和MMP9相对表达量比较,差异均无统计学意义(P>0.05);与control组和NC组相比,miR-613过表达组HeLa细胞各时间点的OD(450 nm)值、克隆细胞数、迁移侵袭数、β-catenin、vimentin、c-Myc和MMP9相对表达量均明显下降,E-cadherin相对表达量明显上升(P<0.05)。结论miR-613可抑制宫颈癌增殖、迁移和侵袭等恶性生物学行为,从而阻断宫颈癌进展,该过程与miR-613抑制Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白有关。 展开更多

关键词 mir-613 宫颈癌 作用机制 WNT/Β-CATENIN信号通路

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miR-206/miR-613对OATP1B1基因和蛋白表达的影响及其机制研究 被引量：3

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作者 饶云 靳高凤 +4 位作者 刘名义 李新华 张红 夏春华 熊玉卿 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1858-1863,共6页

探究miR-206/mi R-613对OATP1B1基因和蛋白表达的影响及其调控机制。通过生物信息学软件预测可靶向作用于OATP1B1 mRNA 3'-UTR的mi RNAs;采用RT-q PCR和Western blot等分子生物学方法检测mi R-206/mi R-613、OATP1B1 mRNA及蛋白表... 探究miR-206/mi R-613对OATP1B1基因和蛋白表达的影响及其调控机制。通过生物信息学软件预测可靶向作用于OATP1B1 mRNA 3'-UTR的mi RNAs;采用RT-q PCR和Western blot等分子生物学方法检测mi R-206/mi R-613、OATP1B1 mRNA及蛋白表达水平;采用双荧光报告基因法,研究mi R-206/mi R-613作用于OATP1B1表达的确切机制。结果发现,mi R-206/mi R-613种子序列与OATP1B1 mRNA 3'-UTR互补配对,具有较高的特异性,且它们之间形成的二级结构较为稳定。与对照组相比,过表达mi R-206/mi R-613,Hep G2细胞中OATP1B1的蛋白表达水平分别下调24.7%、38.8%,反之,抑制其表达OATP1B1的蛋白表达水平分别上调25%、38.2%,而OATP1B1 m RNA表达均未发现明显改变;与对照组相比,过表达或抑制表达mi R-206/mi R-613,pMIR/OATP1B1-WT报告基因荧光素酶活性分别下降35%、30%或增加33.1%、32.5%,而在OATP1B1 m RNA3'-UTR mi R-206/miR-613结合位点突变的报告基因系统中,过表达或抑制表达mi R-206/mi R-613对荧光素酶活性均无影响。因此,mi R-206/mi R-613通过直接靶向作用于OATP1B1 mRNA 3'-UTR,从而转录后调控OATP1B1蛋白表达。 展开更多

关键词 mir-206 mir-613 有机阴离子转运多肽1B1 转录后调控

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疏肝温胆汤对动脉粥样硬化大鼠血脂和miR-613、LXRα mRNA表达的影响 被引量：3

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作者 伍啟华 蔡海荣 +2 位作者 张浩波 陈伯钧 刘淑玲 《中国中医急症》 2022年第7期1149-1152,1169,共5页

目的 探讨疏肝温胆汤对免疫损伤合并高脂饲料诱导、束缚情志应激法诱导的动脉粥样硬化模型大鼠血脂和miR-613、LXRα m RNA的影响。方法 将60只SD大鼠随机分为正常组,模型组,疏肝温胆汤组高、中、低剂量组和阿托伐他汀组,每组10只。除... 目的 探讨疏肝温胆汤对免疫损伤合并高脂饲料诱导、束缚情志应激法诱导的动脉粥样硬化模型大鼠血脂和miR-613、LXRα m RNA的影响。方法 将60只SD大鼠随机分为正常组,模型组,疏肝温胆汤组高、中、低剂量组和阿托伐他汀组,每组10只。除正常组外,其他各组大鼠采用免疫损伤合并高脂饲料诱导、束缚情志应激法建立动脉粥样硬化模型。于造模同时开始给药,疏肝温胆汤组高、中、低剂量组和阿托伐他汀组分别给予相应剂量药物灌胃8周,正常组和模型组给予等体积生理盐水灌胃。给药结束后,测量各组大鼠体质量、血压,HE染色观察大鼠主动脉病理变化,检测各组总胆固醇(TC)、甘油三酯(TAG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),并计算血浆致动脉粥样硬化指数(AIP),以RT-qPCR检测miR-613、LXRα mRNA表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠腹主动脉内膜病理镜下见内膜明显增厚,管腔明显狭窄;TC、TAG、LDL-C水平及AIP、miR-613 mRNA表达升高,HDL-C水平及LXRα mRNA表达降低(均P <0.05);与模型组比较,疏肝温胆汤高、中剂量组大鼠腹主动脉内膜病理镜下所见病变程度均减轻;中药高剂量组大鼠体质量、收缩压、TC、TAG、LDL-C水平及AIP、miR-613 m RNA表达降低,HDL-C水平及LXRα mRNA表达升高(均P <0.05)。结论 疏肝温胆汤可以延缓大鼠动脉粥样硬化进程,可能通过下调miR-613的表达、上调LXRα的表达进而影响血脂代谢。 展开更多

关键词 动脉粥样硬化 疏肝温胆汤 血脂 mir-613 病理变化 中医药 大鼠

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前列腺癌组织miR-613和E2F转录因子5表达变化及其与临床病理特征的关系 被引量：4

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作者 李志国 苏刚岭 +1 位作者 刘石勇 余钧雷 《中华实用诊断与治疗杂志》 2021年第5期497-500,共4页

目的观察前列腺癌组织miR-613和E2F转录因子5(E2F transcription factor 5, E2F5)表达变化,探讨其与前列腺癌临床病理特征及预后的关系。方法 79例前列腺癌患者均行根治性前列腺切除术+辅助化疗。采用实时荧光定量PCR法检测手术切除前... 目的观察前列腺癌组织miR-613和E2F转录因子5(E2F transcription factor 5, E2F5)表达变化,探讨其与前列腺癌临床病理特征及预后的关系。方法 79例前列腺癌患者均行根治性前列腺切除术+辅助化疗。采用实时荧光定量PCR法检测手术切除前列腺癌组织及癌旁正常组织miR-613和E2F5 mRNA相对表达量,比较前列腺癌组织与癌旁正常组织、不同临床病理特征前列腺癌患者癌组织miR-613和E2F5 mRNA相对表达量,Pearson相关法分析癌组织miR-613与E2F5表达的相关性。依据前列腺癌组织miR-613和E2F5 mRNA相对表达量,将前列腺癌患者分为miR-613高表达组(miR-613相对表达量≥1.63)39例和miR-613低表达组(miR-613相对表达量<1.63)40例,E2F5高表达组(E2F5 mRNA相对表达量≥1.19)42例和E2F5低表达组(E2F5 mRNA相对表达量<1.19)37例。随访3年,比较miR-613和E2F5高、低表达组前列腺癌患者的生存情况。结果前列腺癌组织miR-613相对表达量(1.62±0.47)低于癌旁正常组织(2.98±1.06)(P<0.05),E2F5 mRNA相对表达量(1.18±0.39)高于癌旁正常组织(0.42±0.13)(P<0.05)。癌组织miR-613相对表达量在Gleason评分≥8分(1.06±0.39)、有淋巴结转移(0.53±0.16)、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期者(0.80±0.23)分别低于Gleason评分<8分、无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期者(1.93±0.82、1.76±0.45、1.97±0.82)(P<0.05),癌组织E2F5 mRNA相对表达量在Gleason评分≥8分(2.07±0.92)、有淋巴结转移(3.75±1.52)、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期者(4.01±1.85)分别高于Gleason评分<8分、无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期者(0.69±0.22、0.85±0.38、0.77±0.34)(P<0.05);不同年龄、肿瘤直径及分化程度前列腺癌患者癌组织miR-613和E2F5 mRNA相对表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。前列腺癌组织miR-613表达与E2F5表达呈负相关(r=-0.752,P<0.001)。79例前列腺癌患者的3年总生存率为54.43%;miR-613低表达组3年总生存率(42.50%)低于miR-613高表达组(66.67%)(P<0.05),E2F5高表达组3� 展开更多

关键词 前列腺癌 mir-613 E2F转录因子5 预后

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miR-613对高尔基体磷蛋白3调控乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的研究 被引量：4

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作者 周春 王光华 +2 位作者 张帮柱 余峰彬 范耀刚 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第19期3066-3069,3074,共5页

目的研究miR-613靶向调控高尔基体磷蛋白3(GOLPH3)基因对乳腺癌MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭的机制。方法用脂质体技术分别将miR-NC、miR-613 mimic、anti-miR-NC、anti-miR-613、si-NC、si-GOLPH3、miR-613 mimic与pcDNA、miR-613mimic... 目的研究miR-613靶向调控高尔基体磷蛋白3(GOLPH3)基因对乳腺癌MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭的机制。方法用脂质体技术分别将miR-NC、miR-613 mimic、anti-miR-NC、anti-miR-613、si-NC、si-GOLPH3、miR-613 mimic与pcDNA、miR-613mimic与pcDNA-GOLPH3转染至MCF-7细胞。用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-613和GOLPH3 mRNA的表达,用噻唑蓝法、Transwell法检测MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭。结果HBL^-100组和MCF-7组的miR-613表达量分别为1.03±0.09和0.37±0.04,GOLPH3 mRNA表达量分别为1.07±0.11和3.25±0.26,GOLPH3蛋白表达量分别为0.34±0.05和0.75±0.08,MCF-7组的上述指标与HBL^-100组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。miR-NC组和miR-613组72 h时细胞增殖率分别为(0.97±0.09)%和(0.63±0.06)%,迁移细胞数分别为(86.79±8.13)和(40.35±5.27)个,侵袭细胞数分别为(68.43±6.77)和(31.54±4.68)个,miR-613组的上述指标与miR-NC组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实miR-613能够靶向结合GOLPH3。结论过表达miR-613可通过靶向调控GOLPH3抑制MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多

关键词 高尔基体磷蛋白3 mir-613 乳腺癌 增殖 迁移 侵袭

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血清miR-18b-5p和miR-613在急性缺血性脑卒中的表达及临床意义 被引量：1

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作者 黄正义 赵增霞 +1 位作者 刘淑云 符秋红 《心脑血管病防治》 2022年第3期5-8,20,共5页

目的 检测血清miR-18b-5p和miR-613在急性缺血性脑卒中(AIS)的表达水平,并分析其临床意义。方法 筛选2018年1月至2019年12月在深圳市龙华区中心医院入院治疗的131例AIS患者,同时招募131例年龄和性别相匹配的健康对照者,所有参与者采集... 目的 检测血清miR-18b-5p和miR-613在急性缺血性脑卒中(AIS)的表达水平,并分析其临床意义。方法 筛选2018年1月至2019年12月在深圳市龙华区中心医院入院治疗的131例AIS患者,同时招募131例年龄和性别相匹配的健康对照者,所有参与者采集肘静脉血,常规提取血清中RNA并行反转录反应,利用实时定量聚合酶链反应检测miR-18b-5p和miR-613表达水平。分析miR-18b-5p和miR-613表达水平与临床指标的关系。采用受试者工作特征曲线(ROC)分析miR-18b-5p和miR-613的曲线下面积(AUC)、敏感度和特异度。结果 AIS患者血清中miR-18b-5p表达水平低于健康对照者(t=4.192,P <0.01),而miR-613表达水平高于健康对照者(t=3.746,P <0.05)。miR-18b-5p低表达组AIS患者美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分与血糖水平高于miR-18b-5p高表达组AIS患者(t=2.985、2.035,P <0.05),而miR-613高表达组AIS患者NIHSS评分高于miR-613低表达组AIS患者(t=1.886,P <0.05)。miR-18b-5p、miR-613及二者联合检测AIS的AUC分别为0.72、0.67和0.82、敏感度分别为65.22%、62.18%和74.50%,特异度分别为71.57%、70.01%和81.29%(P <0.01)。结论 AIS患者血清中miR-18b-5p表达下调,而miR-613表达上调,二者与NIHSS评分相关。血清miR-18b-5p与miR-613可协助检测AIS,当二者联合应用时效果更佳。 展开更多

关键词 急性缺血性脑卒中 mir-18b-5p mir-613 美国国立卫生研究院卒中量表

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miR-1-3p/206/613对LXRα和OATP1B1蛋白表达的影响及其机制研究 被引量：1

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作者 叶容芳 刘名义 +4 位作者 许玉 张艳丽 朱丹丹 丁薇 熊玉卿 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2018年第8期846-854,共9页

目的:探究miR-1-3p、miR-206和miR-613对肝X受体α(LXRα)和有机阴离子转运多肽1B1(OATP1B1)蛋白表达及OATP1B1转运能力的影响及其机制研究。方法:通过生物信息学数据库预测可靶向作用于LXRα和OATP1B1 mRNA 3'-UTR的miRNAs;采用RT-... 目的:探究miR-1-3p、miR-206和miR-613对肝X受体α(LXRα)和有机阴离子转运多肽1B1(OATP1B1)蛋白表达及OATP1B1转运能力的影响及其机制研究。方法:通过生物信息学数据库预测可靶向作用于LXRα和OATP1B1 mRNA 3'-UTR的miRNAs;采用RT-q PCR、Western blot方法检测miR-1-3p/206/613及LXRα和OATP1B1蛋白水平;采用LC-MS/MS方法检测Hep G2细胞中瑞舒伐他汀(RSV)的含量;应用双荧光素酶报告基因法,研究miR-1-3p/206/613影响LXRα和OATP1B1表达的分子机制。结果:预测结果表明miR-1-3p/206/613与LXRα和OATP1B1 mRNA 3'-UTR互补配对,且具有较高的特异性、保守性及结合稳定性。与对照组相比,miR-1-3p/206/613 mimics能明显下调Hep G2细胞中LXRα蛋白表达水平16.5%、16.0%、25.1%,OATP1B1蛋白30.4%、30.5%、44.4%;相反,miR-1-3p/206/613 inhibitors明显上调LXRα蛋白表达水平13.3%、13.3%、16.0%,OATP1B1蛋白25.0%、25.6%、30.4%。当RSV浓度为5、60、125μmol/L时,miR-1-3p/206/613mimics显著减少Hep G2细胞对RSV的摄取至对照组的0.50、0.19、0.30倍,0.49、0.24、0.23倍和0.64、0.48、0.31倍;与之相反,miR-1-3p/206/613inhibitors上调1.26、1.59、2.07倍,1.97、2.44、2.63倍,2.22、2.86、2.93倍。与对照组相比,miR-1-3p/206/613 mimics或miR-1-3p/206/613 inhibitors,p GL/LXRα-WT报告基因荧光素酶活性分别下降38.5%、32.5%、32.8%或升高137.0%、75.8%、55.7%,而p GL/LXRα-Mut报告基因荧光素酶活性未见明显改变;同上,p GL/OATP1B1-WT报告基因荧光素酶活性下降24.3%、28.9%、32.1%或升高33.5%、48.3%、61.6%,而p GL/OATP1B1-Mut报告基因荧光素酶活性也未见明显改变。结论:miR-1-3p/206/613既可通过直接靶向作用于OATP1B1 mRNA 3'-UTR而调控OATP1B1的蛋白表达和转运功能,也可通过靶向作用于LXRαmRNA 3'-UTR而发挥间接调控作用。 展开更多

关键词 mir-1-3p mir-206 mir-613 肝X受体Α 有机阴离子转运多肽1B1

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miRNA-613在非小细胞肺癌临床组织中的表达及其对增殖、凋亡及迁移的作用

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作者 施燕燕 施敏 杨茗竣 《中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生》 2023年第7期0061-0064,共4页

非小细胞肺癌发病率高,是预后较差的的恶性肿瘤之一。MiR-613在因不同类别的肿瘤作用不同。非小细胞肺癌组织和细胞中miR-613的表达用实时定量PCR方法进行检测。使用转染技术高表达miR-613,细胞活力通过CCK8测定,增殖活力和凋亡情况分... 非小细胞肺癌发病率高,是预后较差的的恶性肿瘤之一。MiR-613在因不同类别的肿瘤作用不同。非小细胞肺癌组织和细胞中miR-613的表达用实时定量PCR方法进行检测。使用转染技术高表达miR-613,细胞活力通过CCK8测定,增殖活力和凋亡情况分别通过EdU和Tunel测定。用划痕和Transwell实验评估细胞的侵袭和迁移能力的强弱。在NSCLC组织及细胞中,miR-613的表达减少,miR-613的高表达降低了NSCLC细胞的增殖活力、并且侵袭迁移能力减弱,但促进了细胞的凋亡。NSCLC细胞的增殖及侵袭和迁移因为miR-613的高表达而受到抑制,相反细胞凋亡增加。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 mir-613 细胞增殖 细胞凋亡

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miR-613抑制胶质瘤增殖及侵袭能力

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作者 贺彬 丁晨哲 刘家阳 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第5期1219-1223,共5页

目的研究miR-613对胶质瘤增殖及侵袭能力的影响及其作用机制。方法收集正常人和胶质瘤患者脑组织,并测定其miR-613和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)mRNA表达水平。把正常培养传代后的U87MG人脑胶质瘤细胞随机为空白对照组、miR-613 NC组、mi... 目的研究miR-613对胶质瘤增殖及侵袭能力的影响及其作用机制。方法收集正常人和胶质瘤患者脑组织,并测定其miR-613和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)mRNA表达水平。把正常培养传代后的U87MG人脑胶质瘤细胞随机为空白对照组、miR-613 NC组、miR-613模拟物组、miR-613抑制剂组、G6PD组和miR-613模拟物+G6PD组。采用RT-PCR检测mRNA表达水平、Western印迹法检测相关蛋白水平、CCK-8进行细胞增殖检测、Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果RT-PCR结果显示胶质瘤脑组织中的miR-613表达水平显著下降(P<0.05),而G6PD的水平显著上升(P<0.05);RT-PCR结果显示,U87MG人脑胶质瘤细胞在转染miR-613模拟物后,G6PD的平均表达水平显著降低(P<0.05),而miR-613抑制剂转染的U87MG细胞中G6PD表达水平显著上调(P<0.05)。Western印迹分析发现G6PD蛋白的表达在miR-613模拟物处理的细胞中显著降低,但在用miR-613抑制剂转染的细胞中显著上调(P<0.05)。与空白对照组相比,过表达miR-613后显著降低了磷酸化细胞外调节蛋白激酶(pERK)、c-Fos蛋白和G6PD蛋白的表达(P<0.05)。相反,通过转染G6PD或共转染miR-613和G6PD,G6PD的表达显著上调,显著增加了pERK和c-Fos的蛋白表达(P<0.05)。Transwell分析和CCK-8实验表明miR-613的过度表达显著降低了U87MG细胞的增殖和侵袭。结论miR-613可通过靶向G6PD调节ERK通路,进而抑制胶质瘤细胞的增殖和侵袭。 展开更多

关键词 mir-613 胶质瘤 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路

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miR-613在肝细胞癌中的表达变化及其对癌细胞增殖、凋亡及侵袭、迁移能力的影响 被引量：3

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作者 曾保征 王赣 +2 位作者 陈超 黄远丽 董超 《山东医药》 CAS 2020年第10期41-44,共4页

目的观察miR-613在肝细胞癌(HCC)组织和细胞中的表达情况,并探讨miR-613对癌细胞增殖、凋亡及侵袭、迁移能力的影响。方法选取60例HCC患者,手术切除肿瘤组织和癌旁组织,采用实时荧光定量PCR技术检测癌组织和癌旁组织中的miR-613,并分析m... 目的观察miR-613在肝细胞癌(HCC)组织和细胞中的表达情况,并探讨miR-613对癌细胞增殖、凋亡及侵袭、迁移能力的影响。方法选取60例HCC患者,手术切除肿瘤组织和癌旁组织,采用实时荧光定量PCR技术检测癌组织和癌旁组织中的miR-613,并分析miR-613与HCC患者临床病理特征的关系。采用实时荧光定量PCR技术检测人HCC细胞系MHCC97H、SMMC-7721和人正常肝细胞系L02中的miR-613。将miR-613模拟物和模拟物阴性对照转染入SMMC-7721细胞,设为miR-613 mimics组和mimics-NC组,采用MTT实验检测细胞增殖能力,流式细胞术测算细胞凋亡率,Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力。结果miR-613在HCC组织的表达低于癌旁组织(P<0.05)。TNM分期越晚,miR-613表达越低(P<0.05);Edmondson分级越高,miR-613表达越低(P<0.05)。miR-613在人HCC细胞系中的表达低于人正常肝细胞系(P<0.05)。与mimics-NC组相比,miR-613 mimics组miR-613表达增高(P<0.05),细胞增殖活性降低(P<0.05),凋亡率上升(P<0.05),迁移和侵袭穿膜细胞数均减少(P均<0.05)。结论miR-613在HCC中呈低表达,过表达miR-613能够抑制HCC细胞增殖、迁移和侵袭,同时促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 肝细胞癌 微小RNA-613 细胞增殖 细胞凋亡 细胞侵袭 细胞迁移

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基于网络数据的miR-613介导PI3K/AKT通路抑制肾透明细胞癌增殖及侵袭的机制研究 被引量：2

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作者 段万里 孙羿 +2 位作者 邓骞 任伟 程永毅 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2020年第9期825-831,共7页

目的通过网络数据挖掘miR-613抑制肾透明细胞癌增值及侵袭的作用机制。方法从StarBase、GeneCards数据库筛选肾透明细胞癌和miR-613共同靶点基因;应用TCGA数据库数据分析筛选出在肾透明细胞癌组织样本和正常组织样本中的差异高表达并影... 目的通过网络数据挖掘miR-613抑制肾透明细胞癌增值及侵袭的作用机制。方法从StarBase、GeneCards数据库筛选肾透明细胞癌和miR-613共同靶点基因;应用TCGA数据库数据分析筛选出在肾透明细胞癌组织样本和正常组织样本中的差异高表达并影响预后的共同靶点基因;利用STRING平台构建miR-613-肾癌靶点交互网络;利用R软件对核心靶点蛋白进行GO生物过程分析及KEGG通路富集分析;RT-PCR检测786O、ACHN及慢病毒载体构建的786O-miR-NC、ACHN-miR-NC、786O-miR-613、ACHN-miR-613细胞中miR-613相对表达量;Western blot检测上述细胞中AKT、p-AKT蛋白的表达。结果StarBase网站及GeneCards数据库筛选出miR-613和肾癌共同靶点1315个;TCGA数据库数据分析筛选出71个上调差异基因可能影响患者的总体生存期;筛选出miR-613抑制肾透明细胞癌生物学行为的核心靶标蛋白,主要涉及表皮生长因子受体、CCND1、CDC25C、ETS1等。GO生物过程分析确定377个条目,主要包括血管生成调控、细胞外结构组织、细胞外基质的组织调控、血管生成正调控、细胞周期过程正调控等生物活性过程;KEGG富集分析只得到PI3K-AKT信号通路;RT-PCR结果显示786O-miR-613组miR-613表达量较786O-miR-NC组及786O组明显升高,ACHN-miR-613组miR-613表达量较ACHN-miRNC组及ACHN组明显升高,且差异均有统计学意义(P<0.001);Western blot结果提示miR-613过表达可抑制PI3K-AKT信号通路关键蛋白p-AKT的蛋白的表达。结论miR-613通过PI3K-AKT信号通路多生物途径共同起作用,抑制肾透明细胞癌的增殖、侵袭。 展开更多

关键词 肾透明细胞癌 mir-613 PI3K-AKT

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miR-613通过下调Wnt/β-catenin信号通路活性抑制前列腺癌细胞的增殖与侵袭 被引量：2

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作者 段万里 王莉 +1 位作者 任伟 程永毅 《现代肿瘤医学》 CAS 2020年第11期1821-1825,共5页

目的:研究miR-613在人前列腺癌组织中的表达情况,探讨miR-613是否通过下调Wnt信号通路活性抑制前列腺癌细胞系细胞的增殖和侵袭能力。方法:收集临床前列腺癌组织及配对癌旁组织20例,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组组织中miR-613... 目的:研究miR-613在人前列腺癌组织中的表达情况,探讨miR-613是否通过下调Wnt信号通路活性抑制前列腺癌细胞系细胞的增殖和侵袭能力。方法:收集临床前列腺癌组织及配对癌旁组织20例,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组组织中miR-613的表达情况。进一步在细胞实验中,通过转染miR-613 mimic和miR-NC至离体培养的PC-3、DU-145细胞中,随后,采用MTT法、平板克隆实验检测细胞增殖和Matrigel侵袭实验测定前列腺癌细胞的侵袭情况,采用荧光素酶分析方法评估Wnt信号通路活性变化,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因的转录(包括Cyclin D1和c-Myc),WB法检测细胞中β-catenin、c-Myc和Cyclin D1的表达量。结果:相比配对癌旁组织,miR-613在前列腺癌组织中的表达降低(P<0.01);在体外细胞实验中,相比于miR-NC组,转染miR-613 mimic后,PC-3、DU-145细胞增殖能力下降(P<0.05),PC-3、DU-145细胞的迁移侵袭能力下降(P<0.01);miR-613的过表达显著降低Wnt信号通路活性、β-catenin蛋白表达及Wnt信号下游靶基因Cyclin D1和c-Myc的转录及蛋白表达。结论:miR-613通过抑制Wnt/β-catenin信号通路来影响前列腺癌细胞的增殖与侵袭,为前列腺癌的潜在治疗靶点之一。 展开更多

关键词 mir-613 前列腺癌 WNT/Β-CATENIN 增殖与侵袭

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落新妇苷对oxLDL诱导的血管平滑肌细胞凋亡及炎症反应的影响 被引量：1

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作者 马芬芬 王彦 +1 位作者 朱映红 徐海涛 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2022年第2期141-146,共6页

目的 落新妇苷是广泛存在于多种植物中的二氢黄酮醇苷,黄酮类化合物的有效成分,具有抗炎、抗氧化、抗病毒等多种药理活性。文章主要探讨落新妇苷对oxLDL诱导的血管平滑肌细胞凋亡、炎症反应的影响及分子机制。方法 人主动脉血管平滑肌细... 目的 落新妇苷是广泛存在于多种植物中的二氢黄酮醇苷,黄酮类化合物的有效成分,具有抗炎、抗氧化、抗病毒等多种药理活性。文章主要探讨落新妇苷对oxLDL诱导的血管平滑肌细胞凋亡、炎症反应的影响及分子机制。方法 人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC)随机分为对照组、oxLDL组、oxLDL+落新妇苷低、中、高剂量组、oxLDL+miR-NC组、oxLDL+miR-613组、oxLDL+落新妇苷+anti-miR-NC组、oxLDL+落新妇苷+anti-miR-613组;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot法检测蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-1β、TNF-α水平;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-613表达水平。结果 不同剂量落新妇苷处理后,oxLDL诱导的血管平滑肌细胞的凋亡率降低,cleaved-caspase3和cleaved-caspase9蛋白表达水平降低,IL-1β、TNF-α水平降低,miR-613表达水平升高,呈剂量依赖性(P<0.05)。过表达miR-613后,血管平滑肌细胞的凋亡率降低,cleaved-caspase3和cleaved-caspase9蛋白表达水平降低(P<0.05)。与oxLDL+miR-NC组IL-1β水平[(43.33±4.23)pg/mL]、TNF-α水平[(89.15±5.61)pg/mL]比较,oxLDL+miR-613组[(17.98±1.26)、(46.31±4.59)pg/mL]降低(P<0.05)。结论 落新妇苷通过上调miR-613的表达抑制oxLDL诱导的血管平滑肌细胞凋亡、炎症反应。 展开更多

关键词 落新妇苷 mir-613 血管平滑肌细胞 凋亡 炎症反应

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长链非编码RNA UCA1通过靶向调控miR-613进而调控乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭 被引量：3

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作者 陆小琴 牛司强 毛素芳 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第12期2608-2613,共6页

目的探讨尿路上皮癌胚抗原(UCA)1对乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响及潜在的作用机制。方法运用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测人乳腺上皮细胞株HBL-100和人乳腺癌细胞MDA-MB-231中UCA1和miR-613的表达水平;将si-con组(空转染... 目的探讨尿路上皮癌胚抗原(UCA)1对乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响及潜在的作用机制。方法运用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测人乳腺上皮细胞株HBL-100和人乳腺癌细胞MDA-MB-231中UCA1和miR-613的表达水平;将si-con组(空转染)、si-UCA1组(转染si-UCA1)、miR-con组(转染miR-con)、miR-613组(转染miR-613 mimics)、pcDNA组(空转染)、pcDNA-UCA1组(转染UCA1过表达载体)、WT-UCA1+miR-con组(共转染WT-UCA1和miR-con)、WT-UCA1+miR-613组(共转染WT-UCA1和miR-613 mimics)、MUT-UCA1+miR-con组(共转染MUT-UCA1和miR-con)、MUT-UCA1+miR-613组(共转染MUT-UCA1和miR-613 mimics)、si-UCA1+anti-miR-con组(共转染si-UCA1和anti-miR-con)和si-UCA1+anti-miR-613组(共转染si-UCA1和anti-miR-613),均用脂质体法转染至MDA-MB-231细胞;采用MTT法检测各组细胞增殖;Transwell检测各组细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果乳腺癌MDA-MB-231细胞于乳腺上皮HBL-100细胞,UCA1的表达水平显著升高,miR-613的表达水平显著降低(P<0.05);抑制表达UCA1、过表达miR-613均可抑制MDA-MB-231细胞增殖、迁移和侵袭;UCA1可靶向调控miR-613的表达。miR-613抑制表达可部分逆转抑制UCA1表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论长链非编码RNA UCA1可抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与靶向miR-613基因有关,将可为乳腺癌的预防和治疗提供新靶点。 展开更多

关键词 尿路上皮癌胚抗原(UCA)1 mir-613 乳腺癌 增殖 迁移 侵袭

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miR-613靶向KLF4对结肠癌增殖及迁移的影响及其分子机制 被引量：2

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作者 李永刚 张生军 +1 位作者 李华 徐子忠 《中国中西医结合消化杂志》 CAS 2020年第5期341-347,355,共8页

[目的]确定miR-613在结肠癌组织和结肠癌细胞系中的表达以及miR-613靶向KrüPPel样因子4(KLF4)对人结肠癌细胞增殖、迁移的影响。[方法]采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测35例结肠癌组织及其癌旁组织中miR-613和KLF4的表达水平,并... [目的]确定miR-613在结肠癌组织和结肠癌细胞系中的表达以及miR-613靶向KrüPPel样因子4(KLF4)对人结肠癌细胞增殖、迁移的影响。[方法]采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测35例结肠癌组织及其癌旁组织中miR-613和KLF4的表达水平,并进行相关性分析。并采用qRT-PCR检测miR-613在结肠癌细胞系(SW480,SW620,HCT116,DLD1,LOVO,NCM460,RKO)中的表达。在HCT116和SW480中分别转染miR-613模拟物和抑制剂。CCK8及EDU实验用于检测转染前后细胞增殖能力的改变。Transwell实验检测细胞迁移能力的改变。使用双荧光素酶报告基因测量miR-613与KLF4的相互作用关系。功能回复实验用于确定miR-613靶向KLF4对结肠癌细胞增殖、迁移的影响。[结果]miR-613 mRNA在结肠癌组织中表达明显高于其癌旁组织(P<0.05);KLF4在结肠癌组织中表达明显低于其癌旁组织(P<0.05);miR-613与KLF4表达呈负相关(R^2=0.74,P<0.001)。在结肠癌细胞系中,HCT116中miR-613的表达水平最低,SW480中miR-613的表达水平最高。在HCT116中,miR-613的表达上调后,细胞增殖活性显著于阴性对照组(P<0.05);细胞迁移能力明显升高(P<0.05);KLF4蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。SW480细胞中,抑制miR-613表达后,增殖活性明显低于阴性对照组(P<0.05);细胞迁移能力明显降低(P<0.05);KLF4蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。在HCT116细胞中,miR-613模拟物与KLF43’UTR野生型质粒共转染,与阴性对照组比较,荧光素酶活性显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-613抑制剂和si-KLF4共转染至结肠癌细胞后,si-KLF4可挽救由于miR-613低表达导致的细胞增殖、迁移能力的降低。[结论]miR-613在结肠癌组织中高表达;miR-613通过靶向KLF4基因调控结肠癌细胞的增殖和迁移。 展开更多

关键词 结肠癌 细胞增殖 微小RNA-613 KrüPPel样因子4

原文传递

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨miR-613对宫颈癌SiHa细胞增殖、迁移与侵袭的影响 被引量：1

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作者 刘云 马立 +2 位作者 赵佳楠 聂婵娟 张玮洪 《现代生物医学进展》 CAS 2022年第5期837-841,871,共6页

目的:研究基于Wnt/β-catenin信号通路探讨微小RNA(mi R)-613对宫颈癌Si Ha细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法:体外培养宫颈癌Si Ha细胞和正常宫颈上皮细胞H8,检测细胞中mi R-613表达。根据转染mi R-613 mimic浓度不同,将Si Ha细胞分为0... 目的:研究基于Wnt/β-catenin信号通路探讨微小RNA(mi R)-613对宫颈癌Si Ha细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法:体外培养宫颈癌Si Ha细胞和正常宫颈上皮细胞H8,检测细胞中mi R-613表达。根据转染mi R-613 mimic浓度不同,将Si Ha细胞分为0μmol/L组,100μmol/L和200μmol/L组。MTT法检测细胞增殖情况,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力。蛋白免疫印迹法检测mi R-613表达对Wnt/β-catenin信号通路蛋白β-catenin、Vimentin、E-cadherin和MMP9表达的影响。结果:宫颈癌Si Ha细胞中mi R-613表达水平均显著低于正常宫颈上皮细胞H8,差异有统计学意义(P<0.05)。转染mi R-613mimic后,100μmol/L、200μmol/L组Si Ha细胞中mi R-613表达水平显著上调,并且具有浓度依赖性(P<0.05)。与0μmol/L组相比,100μmol/L、200μmol/L组的Si Ha细胞增殖,迁移,侵袭能力均明显下降,并且具有浓度依赖性(P<0.05)。免疫印迹结果,与0μmol/L组相比,100μmol/L、200μmol/L各浓度组的Si Ha细胞Wnt/β-catenin信号通路蛋白β-catenin、Vimentin和MMP9表达显著下调,E-cadherin表达显著上调,并且具有浓度依赖性(P<0.05)。结论:mi R-613能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制人宫颈癌细胞系Si Ha细胞的增殖,迁移和侵袭。 展开更多

关键词 宫颈癌 mi R-613 增殖 迁移 侵袭 WNT/Β-CATENIN信号通路

原文传递

lncRNA 00707通过miR-613调控胃癌MGC-803、SGC-7901细胞的恶性生物学行为 被引量：1

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作者 吕海栋 周堤侠 祁玉娟 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期999-1005,共7页

目的:探讨长链非编码RNA 00707(lncRNA 00707)和微小RNA-613(miR-613)对胃癌细胞增殖和转移的调控作用及其相关机制。方法:收集2014年1月至2018年6月青海省人民医院肿瘤外科89例原发性胃癌组织及癌旁组织标本以及胃癌MGC-803、SGC-790、... 目的:探讨长链非编码RNA 00707(lncRNA 00707)和微小RNA-613(miR-613)对胃癌细胞增殖和转移的调控作用及其相关机制。方法:收集2014年1月至2018年6月青海省人民医院肿瘤外科89例原发性胃癌组织及癌旁组织标本以及胃癌MGC-803、SGC-790、BGC-823细胞,采用qPCR实验检测胃癌组织和细胞系中lncRNA 00707、miR-613的表达水平。分别建立lncRNA 00707低表达和过表达细胞模型,采用CCK-8实验检测MGC-803、SGC-7901细胞增殖能力,Transwell法检测MGC-803、SGC-7901细胞迁移和侵袭能力。用双荧光素酶基因报告实验验证lncRNA 00707与miR-613的靶向关系。结果:与癌旁组织相比,胃癌组织中lncRNA 00707呈明显高表达(P<0.01),lncRNA 00707表达水平与WHO分期呈正相关(P<0.05);与正常细胞系GES-1相比,胃癌细胞系中lncRNA 00707表达明显上调(P<0.05)。敲低lncRNA 00707可明显抑制SGC-7901细胞的增殖、侵袭和迁移能力(均P<0.05);lncRNA 00707过表达可明显提高MGC-803细胞的增殖和迁移能力(P<0.05)。与阴性对照组相比,lncRNA00707过表达显著降低了miR-613荧光素酶报告载体的荧光素酶活性,而下调MGC-803和SCG-7901细胞中lncRNA 00707,miR-613的表达显著增加(均P<0.01)。结论:lncRNA 00707在胃癌组织和细胞系中发挥促癌效应,其可以通过抑制miR-613而促进胃癌MGC-803和SCG-7901细胞的增殖和转移。 展开更多

关键词 长链非编码RNA00707 微小RNA-613 胃癌 MGC-803细胞 SCG-7901细胞 增殖 迁移

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LncRNA RMRP靶向调控miR-613对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

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作者 张英 东丽 《河北医药》 CAS 2020年第19期2891-2895,共5页

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)RMRP对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响和机制。方法qRT-PCR检测正常乳腺细胞HBL-100和4种乳腺癌细胞(SK-BR-3、BT-549、MCF-7和MDA-MB-231)中RMRP和miR-613的表达水平。以MCF-7细胞为研究对象,分别构建沉默R... 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)RMRP对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响和机制。方法qRT-PCR检测正常乳腺细胞HBL-100和4种乳腺癌细胞(SK-BR-3、BT-549、MCF-7和MDA-MB-231)中RMRP和miR-613的表达水平。以MCF-7细胞为研究对象,分别构建沉默RMRP或过表达miR-613的乳腺癌细胞株,qRT-PCR检测RMRP和miR-613的表达水平,MTT法检测细胞存活,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测增殖相关蛋白(Cyclin D1)和凋亡相关蛋白(Cyt-c、Bax和Bcl-2)的表达水平。双荧光素酶报告基因实验和qRT-PCR验证RMRP和miR-613的靶向调控关系。结果与HBL-100细胞相比,4种乳腺癌细胞RMRP的表达显著上调,miR-613的表达显著下调。稳定沉默RMRP或过表达miR-613的细胞株构建成功。沉默RMRP或过表达miR-613均可显著抑制CyclinD1和Bcl-2蛋白的表达,促进Cyt-c和Bax蛋白的表达,抑制MCF-7细胞增殖,促进细胞凋亡。miR-613是RMRP的靶基因,RMRP可负性调控miR-613的表达。抑制miR-613可逆转沉默RMRP对MCF-7细胞增殖和凋亡的影响。结论沉默RMRP通过上调miR-613表达激活线粒体凋亡途径进而促进乳腺癌细胞凋亡,抑制细胞增殖。 展开更多

关键词 LncRNA RMRP mir-613 乳腺癌 细胞增殖 线粒体凋亡途径

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