目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)感染患者血清miR-199及miR-483的表达,分析其对肝癌的诊断价值。方法选取121例HCV感染患者和健康体检正常者50例作为研究对象,其中HCV感染患者分为慢性丙型肝炎(CHC)50例、肝硬化43例和肝癌28例。检测各组血清...目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)感染患者血清miR-199及miR-483的表达,分析其对肝癌的诊断价值。方法选取121例HCV感染患者和健康体检正常者50例作为研究对象,其中HCV感染患者分为慢性丙型肝炎(CHC)50例、肝硬化43例和肝癌28例。检测各组血清miR-199及miR-483表达水平和HCV-RNA含量。应用ROC曲线分析miR-199及miR-483对肝癌的诊断价值。Pearson相关分析miR-199与miR-483在HCV感染患者中的相关性。结果肝癌组、肝硬化组和CHC组血清miR-199(3.40±1.25,1.83±0.72,1.70±0.65 vs 0.80±0.14)及miR-483(3.86±1.62,2.04±0.91,1.93±0.82 vs 0.71±0.08)表达水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(t=11.904~16.825,均P<0.001)。肝癌组血清miR-199及miR-483表达水平均明显高于CHC组和肝硬化组,差异均有统计学意义(t=11.604~14.817,均P<0.001)。ROC曲线显示,miR-199及miR-483二者联合诊断肝癌的曲线下面积(0.922,95%CI:0.858~0.977)最大,其敏感度和特异度为93.7%和86.4%。相关性分析显示,肝癌患者血清miR-199表达水平与miR-483呈正相关(r=0.803,P<0.001)。结论血清miR-199及miR-483水平在HCV感染患者中明显升高,二者联合对诊断HCV感染导致的肝癌具有较好的诊断价值。展开更多
目的:探讨miR-483-5p对人胰岛素样生长因子2(IGF2)基因P3启动子驱动的m RNA(P3 m RNA)表达的影响及其在肝细胞癌发生发展中的作用。方法:(1)采用real-time PCR检测人肝癌细胞株Huh7、Hep3B、Bel-7402、Hep G2和SMMC-7721,人正常肝细胞株...目的:探讨miR-483-5p对人胰岛素样生长因子2(IGF2)基因P3启动子驱动的m RNA(P3 m RNA)表达的影响及其在肝细胞癌发生发展中的作用。方法:(1)采用real-time PCR检测人肝癌细胞株Huh7、Hep3B、Bel-7402、Hep G2和SMMC-7721,人正常肝细胞株HL-7702,83例人肝细胞癌组织和配对的癌旁组织,22例正常肝组织中miR-483-5p和P3 m RNA的表达水平,并应用Pearson相关分析评估P3 m RNA与miR-483-5p表达水平之间的关系。(2)将IGF2基因P3 m RNA的5’端非翻译区(5’UTR)克隆入p GL3启动子载体,构建P3 m RNA 5’UTR野生型(p GL3-P3-5’UTR-WT)及P3 m RNA 5’UTR突变型(p GL3-P3-5’UTR-MUT)重组萤光素酶报告质粒,将其分别与miR-483-5p mimic、miR-483-5p inhibitor及scrambled control共转染He La、293T及Huh7细胞,采用双萤光素酶报告系统检测萤光素酶活性。(3)分别将miR-483-5p mimic、miR-483-5p inhibitor及scrambled control转染Huh7及Hep3B肝癌细胞,应用real-time PCR检测这2种肝癌细胞P3 m RNA表达水平的变化。(4)应用real-time PCR检测肝癌细胞Huh7及Hep3B的细胞核和细胞质中miR-483-5p的表达水平;应用核连缀实验(nuclear run-on assay)分析miR-483-5p对P3 m RNA转录的影响;应用RNA稳定性实验分析miR-483-5p对P3 m RNA稳定性影响。(5)应用体外细胞功能实验研究miR-483-5p对Huh7肝癌细胞生长、凋亡、迁移与侵袭能力的影响。结果:(1)5种肝癌细胞株miR-483-5p及P3 m RNA表达水平均明显高于正常肝细胞株HL-7702(P<0.01),肝细胞癌组织中miR-483-5p及P3 m RNA表达水平均明显高于配对的癌旁组织及正常肝组织(P<0.01);线性相关分析显示,在5种肝癌细胞株及肝细胞癌组织中,P3 m RNA表达水平均与miR-483-5p水平呈正相关。(2)萤光素酶实验显示,miR-483-5p与P3m RNA 5’UTR的同源位点互补结合可促进P3 m RNA的表达。(3)瞬时转染实验显示,过表达miR-483-5p呈剂量依赖性促进Hep3B和Huh7肝癌细胞P3 m RNA表达水平的增高。(4)miR-483-5p表达�展开更多
目的探讨miR-193a-3P,miR-337-5p和miR-483-5p在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)患者血清中的表达水平,评估其临床应用价值。方法收集2011年6月~2014年5月南京军区南京总医院及徐州市肿瘤医院住院的63例ESCC...目的探讨miR-193a-3P,miR-337-5p和miR-483-5p在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)患者血清中的表达水平,评估其临床应用价值。方法收集2011年6月~2014年5月南京军区南京总医院及徐州市肿瘤医院住院的63例ESCC患者术前、术后血清及随访信息,同时收集63例年龄、性别相匹配的健康体检者血清作为正常对照。利用TaqMan低密度芯片方法筛选出ESCC患者中异常表达的miRNA;实时荧光定量PCR法验证芯片检测到的ESCC中明显上调的miR-193a-3p,miR-337-5P以及文献报道在口腔鳞状细胞癌(OSCC)表达上调的miR-483-5P;最后评价它们的诊断和预后价值。结果与健康对照相比,ESCC患者血清miR-193a-3p(0.459±0.339 vs 0.195±0.084),miR-337-5p(5.686±5.211 vs 2.476±0.808)和miR-483-5p(32.545±22.479 vs 19.509±10.601)的相对含量均显著升高(U值分别为591,605和1037,P值均<0.0001),且在患者术后明显降低(P值均<0.05);三种miRNA的ROC AUC分别为0.851,0.848和0.739,三种miRNA组合在一起的AUC为0.873,均明显大于癌胚抗原;术后高表达miR-483-5p的患者较之低表这的生存期短(P=0.022)。结论血清miR-193a-3p,miR-337-5p和miR-483-5p可作为ESCC患者诊断或预后评估的潜在分子标志物。展开更多
文摘目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)感染患者血清miR-199及miR-483的表达,分析其对肝癌的诊断价值。方法选取121例HCV感染患者和健康体检正常者50例作为研究对象,其中HCV感染患者分为慢性丙型肝炎(CHC)50例、肝硬化43例和肝癌28例。检测各组血清miR-199及miR-483表达水平和HCV-RNA含量。应用ROC曲线分析miR-199及miR-483对肝癌的诊断价值。Pearson相关分析miR-199与miR-483在HCV感染患者中的相关性。结果肝癌组、肝硬化组和CHC组血清miR-199(3.40±1.25,1.83±0.72,1.70±0.65 vs 0.80±0.14)及miR-483(3.86±1.62,2.04±0.91,1.93±0.82 vs 0.71±0.08)表达水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(t=11.904~16.825,均P<0.001)。肝癌组血清miR-199及miR-483表达水平均明显高于CHC组和肝硬化组,差异均有统计学意义(t=11.604~14.817,均P<0.001)。ROC曲线显示,miR-199及miR-483二者联合诊断肝癌的曲线下面积(0.922,95%CI:0.858~0.977)最大,其敏感度和特异度为93.7%和86.4%。相关性分析显示,肝癌患者血清miR-199表达水平与miR-483呈正相关(r=0.803,P<0.001)。结论血清miR-199及miR-483水平在HCV感染患者中明显升高,二者联合对诊断HCV感染导致的肝癌具有较好的诊断价值。
文摘目的:探讨miR-483-5p对人胰岛素样生长因子2(IGF2)基因P3启动子驱动的m RNA(P3 m RNA)表达的影响及其在肝细胞癌发生发展中的作用。方法:(1)采用real-time PCR检测人肝癌细胞株Huh7、Hep3B、Bel-7402、Hep G2和SMMC-7721,人正常肝细胞株HL-7702,83例人肝细胞癌组织和配对的癌旁组织,22例正常肝组织中miR-483-5p和P3 m RNA的表达水平,并应用Pearson相关分析评估P3 m RNA与miR-483-5p表达水平之间的关系。(2)将IGF2基因P3 m RNA的5’端非翻译区(5’UTR)克隆入p GL3启动子载体,构建P3 m RNA 5’UTR野生型(p GL3-P3-5’UTR-WT)及P3 m RNA 5’UTR突变型(p GL3-P3-5’UTR-MUT)重组萤光素酶报告质粒,将其分别与miR-483-5p mimic、miR-483-5p inhibitor及scrambled control共转染He La、293T及Huh7细胞,采用双萤光素酶报告系统检测萤光素酶活性。(3)分别将miR-483-5p mimic、miR-483-5p inhibitor及scrambled control转染Huh7及Hep3B肝癌细胞,应用real-time PCR检测这2种肝癌细胞P3 m RNA表达水平的变化。(4)应用real-time PCR检测肝癌细胞Huh7及Hep3B的细胞核和细胞质中miR-483-5p的表达水平;应用核连缀实验(nuclear run-on assay)分析miR-483-5p对P3 m RNA转录的影响;应用RNA稳定性实验分析miR-483-5p对P3 m RNA稳定性影响。(5)应用体外细胞功能实验研究miR-483-5p对Huh7肝癌细胞生长、凋亡、迁移与侵袭能力的影响。结果:(1)5种肝癌细胞株miR-483-5p及P3 m RNA表达水平均明显高于正常肝细胞株HL-7702(P<0.01),肝细胞癌组织中miR-483-5p及P3 m RNA表达水平均明显高于配对的癌旁组织及正常肝组织(P<0.01);线性相关分析显示,在5种肝癌细胞株及肝细胞癌组织中,P3 m RNA表达水平均与miR-483-5p水平呈正相关。(2)萤光素酶实验显示,miR-483-5p与P3m RNA 5’UTR的同源位点互补结合可促进P3 m RNA的表达。(3)瞬时转染实验显示,过表达miR-483-5p呈剂量依赖性促进Hep3B和Huh7肝癌细胞P3 m RNA表达水平的增高。(4)miR-483-5p表达�
文摘目的探讨miR-193a-3P,miR-337-5p和miR-483-5p在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)患者血清中的表达水平,评估其临床应用价值。方法收集2011年6月~2014年5月南京军区南京总医院及徐州市肿瘤医院住院的63例ESCC患者术前、术后血清及随访信息,同时收集63例年龄、性别相匹配的健康体检者血清作为正常对照。利用TaqMan低密度芯片方法筛选出ESCC患者中异常表达的miRNA;实时荧光定量PCR法验证芯片检测到的ESCC中明显上调的miR-193a-3p,miR-337-5P以及文献报道在口腔鳞状细胞癌(OSCC)表达上调的miR-483-5P;最后评价它们的诊断和预后价值。结果与健康对照相比,ESCC患者血清miR-193a-3p(0.459±0.339 vs 0.195±0.084),miR-337-5p(5.686±5.211 vs 2.476±0.808)和miR-483-5p(32.545±22.479 vs 19.509±10.601)的相对含量均显著升高(U值分别为591,605和1037,P值均<0.0001),且在患者术后明显降低(P值均<0.05);三种miRNA的ROC AUC分别为0.851,0.848和0.739,三种miRNA组合在一起的AUC为0.873,均明显大于癌胚抗原;术后高表达miR-483-5p的患者较之低表这的生存期短(P=0.022)。结论血清miR-193a-3p,miR-337-5p和miR-483-5p可作为ESCC患者诊断或预后评估的潜在分子标志物。
