miR-28-5p通过抑制FSP1介导的铁死亡逆转肺腺癌细胞顺铂耐药的机制 被引量：3

1

作者 王晓丹 宋国庆 姜丹 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第4期630-636,共7页

目的 研究miR-28-5p对顺铂(DDP)耐药的A549肺腺癌细胞系(A549/DDP)的影响,并探讨其作用机制是否与铁死亡抑制蛋白1(FSP1)介导的铁死亡有关。方法 选择A549肺腺癌细胞和A549/DDP细胞作为研究对象。采用RT-qPCR法检测细胞中miR-28-5p的表... 目的 研究miR-28-5p对顺铂(DDP)耐药的A549肺腺癌细胞系(A549/DDP)的影响,并探讨其作用机制是否与铁死亡抑制蛋白1(FSP1)介导的铁死亡有关。方法 选择A549肺腺癌细胞和A549/DDP细胞作为研究对象。采用RT-qPCR法检测细胞中miR-28-5p的表达水平。通过CCK-8法和集落形成实验测定细胞增殖。miR-28-5p的靶基因通过荧光素酶报告基因和蛋白质印迹分析进行鉴定和验证。使用miR-28-5p模拟物或FSP1过表达质粒转染A549/DDP,评估细胞增殖情况,并采用透射电子显微镜评估线粒体形态,以及试剂盒测定细胞活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)水平。建立了基于细胞系的异种移植模型,在体内评估miR-28-5p对肿瘤生长的影响。结果 与A549细胞相比,A549/DDP细胞中miR-28-5p的表达水平降低(P<0.001)。与A549细胞比较,A549/DDP细胞的细胞活力(F=49.542,P<0.001)和集落形成能力(t=4.412,P<0.01)增加。与miR-NC组相比,miR-28-5p组A549/DDP细胞的细胞活力(t=4.612,P<0.01)和集落数(t=4.503,P<0.01)均降低。在pGL3-FSP1 3′UTR-WT载体存在情况下,用miR-28-5p模拟物转染的细胞中荧光素酶活性降低(P<0.01)。此外,过表达miR-28-5p细胞中FSP1的表达水平被抑制。与载体+miR-28-5p组相比,FSP1+miR-28-5p组细胞活力、集落形成、细胞线粒体长度、GSH增加(P<0.01)且细胞凋亡、ROS产生、MDA形成降低(P<0.05)。体内实验显示,与miR-NC+DDP组相比,miR-28-5p+DDP组裸鼠体内形成的肿瘤大小和质量减少(P<0.05),并且Ki-67和FSP1蛋白表达降低(P<0.05)。结论 miR-28-5p逆转肺腺癌细胞顺铂的耐药机制可能与抑制FSP1介导的铁死亡有关。 展开更多

关键词 mir-28-5p 肺癌 铁死亡抑制蛋白1 铁死亡 顺铂

下载PDF 职称材料

慢性牙周炎患者血清miR-205-5p、miR-28-5p的表达与诊断价值研究 被引量：1

2

作者 夏章晖 付小红 +2 位作者 马威 荣刚 喻祎 《现代生物医学进展》 CAS 2023年第20期3851-3855,共5页

目的:探讨慢性牙周炎(CP)患者血清微小核糖核酸(miRNA)-205-5p、miR-28-5p表达与牙周指标、炎症反应的关系及诊断价值。方法:选取2021年1月-2022年12月我院口腔科收治的102例CP患者为CP组,根据病情严重程度分为轻度组31例、中度组37例... 目的:探讨慢性牙周炎(CP)患者血清微小核糖核酸(miRNA)-205-5p、miR-28-5p表达与牙周指标、炎症反应的关系及诊断价值。方法:选取2021年1月-2022年12月我院口腔科收治的102例CP患者为CP组,根据病情严重程度分为轻度组31例、中度组37例、重度组34例,另选取同期我院65名体检健康者为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测血清miR-205-5p、miR-28-5p表达,酶联免疫吸附法检测白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,检查各组牙周指标[菌斑指数(PLI)、牙龈出血指数(BI)、附着丧失(AL)、探诊深度(PD)]。CP患者血清miR-205-5p、miR-28-5p表达与牙周指标和炎症指标的相关性采用Pearson相关性分析。受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-205-5p、miR-28-5p表达诊断CP的价值。结果:与对照组比较,CP组血清miR-205-5p、miR-28-5p表达降低,PLI、BI、AL、PD和IL-1β、IL-6、TNF-α水平升高(P<0.05)。轻度组、中度组、重度组血清miR-205-5p、miR-28-5p表达依次降低,PLI、BI、AL、PD和IL-1β、IL-6、TNF-α水平依次升高(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,CP患者血清miR-205-5p、miR-28-5p表达与PLI、BI、AL、PD、IL-1β、IL-6、TNF-α呈负相关(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清miR-205-5p联合miR-28-5p诊断CP的曲线下面积分别为0.885大于miR-205-5p、miR-28-5p单独检测的0.792、0.790。结论:CP患者血清miR-205-5p、miR-28-5p低表达,与牙周指标、炎症反应密切相关,血清miR-205-5p、miR-28-5p的表达情况可能成为CP辅助诊断指标,且miR-205-5p联合miR-28-5p诊断CP的价值较高。 展开更多

关键词 慢性牙周炎 mir-205-5p mir-28-5p 牙周指标 炎症反应 诊断价值

原文传递

miR-28-5p靶向BECN1对OCI-LY7细胞凋亡及自噬过程的调控作用

3

作者 康天 李杨 +4 位作者 路晓飞 张文婷 朱秀丽 刁玉巧 江莲 《河北医药》 CAS 2024年第6期805-810,共6页

目的探讨miR-28-5p靶向BECN1在OCI-LY7细胞凋亡及自噬过程中的作用及机制。方法通过TUNEL荧光染色、Western blot实验明确miR-28-5p及姜黄素在OCI-LY7细胞凋亡及自噬过程的作用,经在线预测并进一步通过双荧光素酶报告基因检测明确miR-28... 目的探讨miR-28-5p靶向BECN1在OCI-LY7细胞凋亡及自噬过程中的作用及机制。方法通过TUNEL荧光染色、Western blot实验明确miR-28-5p及姜黄素在OCI-LY7细胞凋亡及自噬过程的作用,经在线预测并进一步通过双荧光素酶报告基因检测明确miR-28-5p和BECN1的靶向关系。结果TUNEL染色和caspase-3蛋白水平检测:与对照组比较,姜黄素明显增加凋亡细胞百分比并表达裂解蛋白caspase-3(P<0.05)。相比姜黄素单独作用,细胞凋亡被miR-28-5p显著减弱抑制(P<0.05)。与对照组比较,姜黄素组beclin1和LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值显著降低、P62蛋白表达明显升高(P<0.05);与姜黄素组比较,姜黄素+miR-28-5p抑制剂组beclin1表达和LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值明显升高、P62蛋白表达明显降低(P<0.05)。通过在线数据库预测:miR-28-5p与BECN1存在靶向的关系;双荧光素酶报告基因实验显示:与阴性对照组比较,miR-28-5p模拟物显著降低BECN1-wt组的荧光素酶活性,但miR-28-5p模拟物不影响BECN1-mut组的荧光素酶活性。结论miR-28-5p介导姜黄素促OCI-LY7细胞凋亡作用。BECN1是miR-28-5p的靶基因,姜黄素诱导miR-28-5p过表达可直接靶向BECN1抑制自噬过程。 展开更多

关键词 mir-28-5p BECN1 人淋巴瘤细胞系OCI-LY7细胞 细胞自噬 细胞凋亡

下载PDF 职称材料

下调lncRNA LOXL1-AS1表达对乳腺癌细胞增殖和侵袭的影响 被引量：1

4

作者 刘芳 毛婷 +1 位作者 马兰 吕淑贞 《山西医科大学学报》 CAS 2023年第3期302-312,共11页

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)类赖氨酰氧化酶1反义RNA1(LOXL1-AS1)对乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及其作用机制。方法实时荧光定量PCR检测lncRNA LOXL1-AS1、miR-28-5p和IGF-1在乳腺癌细胞(MCF-7细胞)和人正常乳腺上皮细胞(... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)类赖氨酰氧化酶1反义RNA1(LOXL1-AS1)对乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及其作用机制。方法实时荧光定量PCR检测lncRNA LOXL1-AS1、miR-28-5p和IGF-1在乳腺癌细胞(MCF-7细胞)和人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A细胞)及收集的55例乳腺癌组织和癌旁正常组织中的表达量。采用lncRNA LOXL1-AS1 siRNA、miR-28-5p inhibitor、IGF-1 siRNA分别转染MCF-7细胞,MTT法检测MCF-7细胞的增殖活力,Transwell分析MCF-7细胞的侵袭情况,流式细胞仪检测MCF-7细胞凋亡情况。生物信息学软件(miRanda)和双荧光素酶报告基因实验分析lncRNA LOXL1-AS1和miR-28-5p之间的作用靶点及相关性,TargetScan和双荧光素酶报告基因实验分析miR-28-5p与IGF-1之间的作用靶点及相关性;pcDNA-LOXL1-AS1与miR-28-5p mimics共同转染MCF-7细胞后,MTT法检测MCF-7细胞的增殖活力,Transwell分析MCF-7细胞的侵袭情况,流式细胞仪检测MCF-7细胞凋亡情况。结果MCF-7细胞内lncRNA LOXL1-AS1和IGF-1表达高于MCF-10A细胞(P<0.01),miR-28-5p表达低于MCF-10A细胞(P<0.01)。与癌旁组织相比,乳腺癌组织中lncRNA LOXL1-AS1和IGF-1表达明显升高(P<0.01),miR-28-5p表达明显降低(P<0.01)。转染lncRNA LOXL1-AS1 siRNA或IGF-1 siRNA后,MCF-7细胞增殖活力降低,细胞侵袭数目减少,细胞凋亡率增加(均P<0.01)。lncRNA LOXL1-AS1靶向miR-28-5p,miR-28-5p靶向IGF-1;miR-28-5p表达下调后,MCF-7细胞增殖活力提高,细胞侵袭数目增加,细胞凋亡率减少(P<0.05);pcDNA-LOXL1-AS1与miR-28-5p mimics共同转染MCF-7细胞后,MCF-7细胞增殖活力提高,侵袭数目增加,细胞凋亡率减少(均P<0.05)。结论lncRNA LOXL1-AS1在MCF-7细胞中表达上调,下调lncRNA LOXL1-AS1表达通过影响miR-28-5p/IGF-1轴抑制了乳腺癌增殖和侵袭。 展开更多

关键词 lncRNA LOXL1-AS1 mir-28-5p 乳腺癌 增殖 侵袭

下载PDF 职称材料

miR-28-5p在吸入性肺炎中的表达与临床意义

5

作者 戴清霞 何岱昆 +1 位作者 申捷 邵义如 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期934-941,共8页

目的探讨miR-28-5p在吸入性肺炎患者中的表达水平及临床价值。方法本研究为回顾性对照研究,选取复旦大学附属金山医院重症监护病房重症肺炎患者60例为研究组,根据发病因素分为吸入性肺炎组和其他感染性肺炎组,同时选取20例健康体检患者... 目的探讨miR-28-5p在吸入性肺炎患者中的表达水平及临床价值。方法本研究为回顾性对照研究,选取复旦大学附属金山医院重症监护病房重症肺炎患者60例为研究组,根据发病因素分为吸入性肺炎组和其他感染性肺炎组,同时选取20例健康体检患者为健康对照组。采集研究组患者第1、4、7天的静脉血,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测血清中miR-28-5p的表达水平;酶联免疫法(ELISA)测定各组血清中白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。收集研究组C-反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)的临床检测结果。采用SPSS 26.0进行统计分析,绘制受试者工作特征曲线(receiver operator characteristic,ROC)分析血清中miR-28-5p对吸入性肺炎的诊断价值。Pearson法分析血清miR-28-5p与IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α、CRP和PCT水平的相关性。记录所有患者治疗10 d后的治疗效果,按预后良好与预后不良分为两组,分析miR-28-5p及各项炎症因子表达水平及预后的关系。结果与健康对照组相比,研究组血清miR-28-5p表达水平显著升高,研究组中吸入性肺炎组血清miR-28-5p表达水平显著低于其他感染性肺炎组(P<0.05);与误吸发生时相比,研究组中吸入性肺炎组血清miR-28-5p表达水平显著升高(P<0.05)。ROC曲线分析血清miR-28-5p表达对吸入性肺炎的诊断价值结果显示AUC为0.871,当临界值取1.211时,敏感度为76.67%,特异度为95.00%。Pearson相关分析结果显示miR-28-5p与IL-6呈正相关,与IL-4和IL-10呈负相关(P<0.05)。ROC曲线分析显示年龄、miR-28-5p、IL-8、IL-10、TNF-α、CRP、PCT水平的曲线下面积分别为0.695、0.813、0.655、0.668、0.724、0.651、0.661。结论血清miR-28-5p对吸入性肺炎的诊断具有重要参考意义,同时对区分吸入性肺炎的不同类型有一定的价值。血清miR-28-5p有可能作为潜在� 展开更多

关键词 吸入性肺炎 mir-28-5p 早期诊断 诊断效能 预后

原文传递

血清miR-28-5p、HMGB1表达与多发性骨髓瘤患者病理特征及预后的关系

6

作者 李超 杨如玉 段丽娟 《分子诊断与治疗杂志》 2023年第3期392-395,400,共5页

目的探讨血清miR-28-5p、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达与多发性骨髓瘤(MM)患者病理特征及预后的关系。方法选取2018年1月至2019年6月于河南省南阳市中心医院就诊的MM患者124例为病例组,选取同期健康志愿者50名为对照组,分析两组血清miR-... 目的探讨血清miR-28-5p、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达与多发性骨髓瘤(MM)患者病理特征及预后的关系。方法选取2018年1月至2019年6月于河南省南阳市中心医院就诊的MM患者124例为病例组,选取同期健康志愿者50名为对照组,分析两组血清miR-28-5p、HMGB1表达水平与患者病理特征及其预后的关系。结果与对照组比较,病例组血清miR-28-5p表达水平降低、血清HMGB1水平升高,差异有统计学意义(t=30.327、16.269,P均<0.05);不同D-S分期、ISS分期患者随着分期越晚血清miR-28-5p表达水平降低,差异有统计学意义(F=19.541、22.173,P均<0.05);不同ISS分期患者随着分期越晚血清HMGB1水平越高,差异有统计学意义(F=6.891,P<0.05);存活患者miR-28-5p水平高于死亡患者、HMGB1水平低于死亡患者,差异有统计学意义(t=4.416、2.546,P<0.05)。高表达水平miR-28-5p、低水平HMGB1的累计生存率更高,差异有统计学意义(χ^(2)=16.930、12.417,P均<0.05)。结论MM患者血清miR-28-5p表达水平降低、HMGB1表达水平升高,两项指标均与患者预后有关,或可作为MM患者预后评价的血清生物学指标。 展开更多

关键词 mir-28-5p 迁移率族蛋白B1 多发性骨髓瘤 临床病理特征

下载PDF 职称材料

microRNA-28-5p在多发性骨髓瘤的表达分析与表观遗传学研究 被引量：3

7

作者 高轶男 马艳萍 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1540-1547,共8页

目的:探讨miR-28-5p在多发性骨髓瘤(MM)中的表达、作用机制及其甲基化水平在MM诊断中的应用,为寻求新的靶向治疗方法提供依据。方法:采用RT-PCR检测MM患者骨髓单个核CD138+细胞和相关疾病对照组(缺铁性贫血患者)骨髓单个核细胞的miR-28... 目的:探讨miR-28-5p在多发性骨髓瘤(MM)中的表达、作用机制及其甲基化水平在MM诊断中的应用,为寻求新的靶向治疗方法提供依据。方法:采用RT-PCR检测MM患者骨髓单个核CD138+细胞和相关疾病对照组(缺铁性贫血患者)骨髓单个核细胞的miR-28-5p及miR-28-5p潜在靶标CCND1的表达水平;甲基化特异性PCR(MSP)检测LPP/miR-28-5p启动子区CpG岛甲基化水平,并分析与其他临床指标的相关性。用甲基转移酶抑制剂5-aza-dc对多发性骨髓瘤细胞株U266进行处理,用MSP对药物处理后细胞内LPP/miR-28-5p启动子区CpG岛的甲基化状态进行分析;应用qPCR检测药物处理后细胞内miR-28-5p的表达水平,并探讨miR-28-5p表达的调控机制。结果:MM患者LPP/miR-28-5p启动子区CpG岛甲基化水平明显高于IDA对照者,MM患者miR-28-5p的相对表达量较IDA对照者明显降低,初诊MM患者miR-28-5p的相对表达水平高于复发/进展期患者,已知的miR-28-5p靶标CCND1在具有LPP/miR-28-5p甲基化的MM患者中以高水平表达,MM患者miR-28-5p的表达水平与β2-MG水平呈相关性;5-aza-dC能够显著地抑制U266细胞株的生长,使细胞周期停滞于G1期,抑制细胞RNA和蛋白质的生物合成,促进细胞凋亡,同时能上调miR-28-5p的表达。结论:在MM患者中,miR-28-5p的表达受基因组启动子区CpG岛甲基化修饰的调控,miR-28-5p可作为抑癌基因,其低表达可能参与MM的发生、发展,提示miR-28-5p可能成为治疗MM的新靶向。 展开更多

关键词 多发性骨髓瘤 甲基化 mir-28-5p 缺铁性贫血

下载PDF 职称材料

MicroRNA-28-5p在大肠癌中表达的诊断价值和对预后的意义

8

作者 薛国友 段家镜 +2 位作者 罗树宾 董蓝青 杨新怀 《中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生》 2023年第12期45-49,共5页

探索miR-28-5p在大肠癌中表达的潜在诊断价值和对预后的意义。方法 纳入我院确诊的大肠癌标本92个以及和配对的癌旁组织标本进研究,时间跨度为2017年1月~2018年3月,对不同标本的miR-28-5p指标进行检测,检测技术为实时荧光定量聚合酶链反... 探索miR-28-5p在大肠癌中表达的潜在诊断价值和对预后的意义。方法 纳入我院确诊的大肠癌标本92个以及和配对的癌旁组织标本进研究,时间跨度为2017年1月~2018年3月,对不同标本的miR-28-5p指标进行检测,检测技术为实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)技术,最终根据miR-28-5p的表达情况分成高低两个表达组。并对不同TNM分期、淋巴结转移、组织学分级、等之间的差异,最后对miR-28-5p的指标水平和结肠癌预后之间的关系进行分析。结果 比较组间miR-28-5p指标表达情况可知,大肠癌组织中的更高,组间差异明显具备统计学意义(p<0.05);并比较不同肿瘤部位以及组织分化程度中大肠癌组织中的miR-28-5p表情况,在组间进行比较,可知组间差异不明显,无统计学意义(P>0.05);一笔有淋巴结转移且TNM高分期的大厂组织,发现miR-28-5p表达比未发生淋巴转移并且TNM低分期的组织明显更高,差异有统计学意义(p<0.05)。结论 miR-28-5p过表达可在一定程度上对大肠腺癌等有一定预测,这类组织中miR-28-5p表达在一定程度预示患者的DFS和OS较差,是影响大肠癌预后的独立危险因素。 展开更多

关键词 大肠癌 mir-28-5p 预后。

下载PDF 职称材料

基于MCP-1/CCR2通路研究miR-28-5p对老龄自发性高血压大鼠的干预作用

9

作者 张贤春 冯静 陈海明 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第24期6052-6055,共4页

目的研究基于单核细胞趋化蛋白(MCP)-1/CC趋化因子受体(CCR)2通路微小核糖核酸-28-5p(miR-28-5p)对老龄自发性高血压大鼠的干预作用。方法选取SPF级雄性Wistar大鼠6只设为正常组,自发性高血压大鼠18只分为模型组、对照组、miR-28-5p组各... 目的研究基于单核细胞趋化蛋白(MCP)-1/CC趋化因子受体(CCR)2通路微小核糖核酸-28-5p(miR-28-5p)对老龄自发性高血压大鼠的干预作用。方法选取SPF级雄性Wistar大鼠6只设为正常组,自发性高血压大鼠18只分为模型组、对照组、miR-28-5p组各6只,miR-28-5p水平检测采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)法,检测肺功能相关指标,采用酶联免疫法检测炎症因子白细胞介素(IL)-1、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,Western印迹检测MCP-1及CCR2通路相关蛋白表达。结果与正常组相比,模型组、对照组、miR-28-5p组miR-28-5p表达及左室收缩压(LVSP)水平明显较高,左室舒张末压(LVEDP)、左室内压最大上升速率(+dp/dtmax)、左室内压最大下降速率(-dp/dtmax)水平明显较低(P<0.05);与模型组相比,对照组、miR-28-5p组miR-28-5p表达及LVEDP水平明显较低,LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax水平明显较高(P<0.05);与对照组相比,miR-28-5p组miR-28-5p表达及LVEDP水平明显较低,LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax水平明显较高(P<0.05)。与正常组相比,模型组、对照组、miR-28-5p组IL-1、IL-6、TNF-α水平及MCP-1、CCR2水平明显较高(P<0.05);与模型组相比,对照组、miR-28-5p组IL-1、IL-6、TNF-α水平及MCP-1、CCR2水平明显较低(P<0.05);与对照组相比,miR-28-5p组IL-1、IL-6、TNF-α水平及MCP-1、CCR2水平明显较低(P<0.05)。结论miR-28-5p可通过调控MCP-1、CCR2通路蛋白水平改善老龄自发性高血压大鼠的心功能,干预抑制炎性反应。 展开更多

关键词 单核细胞趋化蛋白(MCp)-1/CC趋化因子受体(CCR)2通路 mir-28-5p 老龄自发性高血压 炎症反应

下载PDF 职称材料

孤立低高密度脂蛋白胆固醇表型与血浆miR-9-3p、miR-28-5p的表达分析

10

作者 孙泽宁 吴冰 +3 位作者 刘梦迪 李金荣 田卫 周云涛 《国际检验医学杂志》 CAS 2019年第9期1057-1061,共5页

目的探讨孤立低高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)表型血浆miR-9-3p和miR-28-5p的变化模式及其相关性。方法选取唐山市工人医院体检中心2014年1月至2015年12月174例健康体检者资料,收集其外周血血浆样本。根据血清HDL-C水平分为血脂正常表型组... 目的探讨孤立低高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)表型血浆miR-9-3p和miR-28-5p的变化模式及其相关性。方法选取唐山市工人医院体检中心2014年1月至2015年12月174例健康体检者资料,收集其外周血血浆样本。根据血清HDL-C水平分为血脂正常表型组(86例)和孤立低HDL-C表型组(88例)。实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)法测定血浆miR-9-3p和miR-28-5p的表达水平。结果脂代谢表型正常组和孤立低HDL-C表型组血浆中miR-9-3p的检出率分别为86.05%(74/86)和64.78%(57/88),差异有统计学意义(χ2=10.58,P=0.001);女性miR-9-3p水平在脂代谢正常组和孤立低HDL-C异常表型组血浆中的表达水平均高于男性[正常组:0.041(0.024,0.111)vs.0.018(0.009,0.039),Z=3.05,P=0.002;孤立低HDL-C表型组:0.029(0.024,0.059)vs.0.013(0.007,0.027),Z=3.35,P=0.001]。线性回归显示,表观健康者血浆miR-9-3p的相对表达水平与性别(β=-1.337,P<0.001)、血清HDL-C(β=1.638,P=0.041)、空腹血糖(β=0.475,P=0.044)相关。血浆miR-28-5p女性组高于男性组,差异有统计学意义[0.003(0.002,0.008)vs.0.004(0.003,0.011),P=0.028],而不同表型组中男、女比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论血浆miR-9-3p是孤立低HDL-C表型的分子病理特征,性别、血清HDL-C、空腹血糖是其循环水平变化的主要影响因素。 展开更多

关键词 孤立低高密度脂蛋白胆固醇表型 血浆 mir-9-3p mir-28-5p

下载PDF 职称材料

miR-28-5p靶向Nrf2调控LPS诱导的急性肺损伤机制研究 被引量：1

11

作者 张秀军 么春艳 +1 位作者 陶晓东 孙金军 《浙江中西医结合杂志》 2020年第12期963-967,976,共6页

目的探究miR-28-5p在脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)进程中的作用和分子机制。方法将40只C57BL/6雄鼠按随机数字表法分为生理盐水组、ALI-3h组、ALI-6h组和ALI-12h组,每组10只。利用LPS诱导小鼠ALI 3h、6h、12h,取肺组织进行荧光定量... 目的探究miR-28-5p在脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)进程中的作用和分子机制。方法将40只C57BL/6雄鼠按随机数字表法分为生理盐水组、ALI-3h组、ALI-6h组和ALI-12h组,每组10只。利用LPS诱导小鼠ALI 3h、6h、12h,取肺组织进行荧光定量PCR(RT-PCR)检测miR-28-5p表达;同时体外利用LPS刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7发生炎症反应,RT-PCR检测细胞miR-28-5p表达;巨噬细胞过表达miR-28-5p mimic后利用LPS刺激,RT-PCR检测巨噬细胞炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)表达情况;RT-PCR和Western blot检测抗氧化关键分子核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶(HO-1)、醌氧化还原酶(NQO1)表达水平;Targetscan 7.0预测miR-28-5p靶向基因,突变结合位点后,并通过荧光素酶报告基因系统检测miR-28-5p对靶基因的转录调控作用。结果与生理盐水组比较,LPS诱导小鼠ALI 3h、6h、12h TNF-α、IL-1β水平明显升高[TNF-α:(6.24±1.84)、(4.31±0.97)、(2.97±0.49)比(1.00±0.21),P<0.05;IL-1β:(6.29±1.06)、(4.95±0.93)、(3.59±1.05)比(1.00±0.53),P<0.05],肺组织miR-28-5p水平明显升高[(7.24±1.35)、(5.26±1.64)、(3.24±0.97)比(1.00±0.34),P<0.05];与生理盐水组比较,LPS刺激巨噬细胞炎症反应3h、6h、12h细胞miR-28-5p水平明显升高[(5.21±0.15)、(3.51±0.78)、(2.45±0.41)比(1.00±0.35),P<0.05];与mimic-NC组比较,巨噬细胞过表达miR-28-5p mimic组细胞炎症因子TNF-α和IL-1β表达水平明显升高[TNF-α:(4.86±0.59)比(1.00±0.52);IL-1β:(3.54±0.41)比(1.00±0.24),P<0.05];同时与mimic-NC组比较,miR-28-5p mimic过表达组抗氧化关键分子Nrf2及其下游HO-1、NQO1表达明显升高[Nrf2:(5.16±1.03)比(1.00±0.14);HO-1:(4.91±1.08)比(1.00±0.12);NQO1:(5.61±0.80)比(1.00±0.08),P<0.05];Targetscan 7.0预测发现miR-28-5p靶向Nrf2基因3'UTR序列,荧光素酶报告基因实验进一步明确miR-28-5p通过靶向Nrf2基因3'UTR序列调控其转录。结论miR-28-5p在LPS诱导的ALI中表达上� 展开更多

关键词 小鼠 mir-28-5p 急性肺损伤 巨噬细胞 炎症

下载PDF 职称材料

miR-28-5p对结肠癌细胞增殖和迁移的影响 被引量：1

12

作者 朱庭沛 桂裕昌 +3 位作者 覃慧晴 陈建泉 唐云 许建文 《中国医学工程》 2021年第2期21-25,共5页

目的探究miR-28-5p对结肠癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法采用qRT-PCR检测miR-28-5p在正常结肠细胞NCM460与结肠癌细胞HCT116、SW480、SW620中表达量的差异。将HCT116、SW480、SW620各分为三组:对照组,过表达组,沉默组。对照组不予特... 目的探究miR-28-5p对结肠癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法采用qRT-PCR检测miR-28-5p在正常结肠细胞NCM460与结肠癌细胞HCT116、SW480、SW620中表达量的差异。将HCT116、SW480、SW620各分为三组:对照组,过表达组,沉默组。对照组不予特殊处理,其余两组分别转染miR-28-5p mimic和miR-28-5p inhibitor,采用qRT-PCR验证转染效率,采用CCK8法检测三组细胞的增殖能力,采用划痕实验检测三组细胞的的迁移能力。结果miR-28-5p在结肠癌细胞HCT116、SW480、SW620中低表达,与正常结肠细胞NCM460比较差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,过表达组细胞增殖和迁移能力均降低(P<0.05),沉默组细胞增殖和迁移能力均增强(P<0.05)。结论miR-28-5p在结肠癌细胞中低表达且有调控结肠癌细胞增殖和迁移的作用。 展开更多

关键词 mir-28-5p 结肠癌 增殖 迁移

下载PDF 职称材料

miR-28-5p影响结肠癌细胞迁移活力的分子机制初探

13

作者 覃慧晴 桂裕昌 +2 位作者 许建文 潘勤和 胡金翠 《蛇志》 2022年第1期15-19,37,共6页

目的探讨miR-28-5p影响结肠癌细胞迁移活力的分子机制。方法选用结肠癌细胞(HCT116细胞)进行实验,实验分为两部分。第一部分实验:将HCT116细胞分为空白对照组(control组)和爱拉斯汀组(erastin组),control组不进行特殊处理,erastin组使... 目的探讨miR-28-5p影响结肠癌细胞迁移活力的分子机制。方法选用结肠癌细胞(HCT116细胞)进行实验,实验分为两部分。第一部分实验:将HCT116细胞分为空白对照组(control组)和爱拉斯汀组(erastin组),control组不进行特殊处理,erastin组使用加有20μM erastin的培养基培养48 h。第二部分实验:将HCT116细胞分为拮抗剂阴性对照组(inhibitor-NC组)、miR-28-5p拮抗剂组(inhibitor组)、激动剂阴性对照组(mimics-NC组)、miR-28-5p激动剂组(mimics组),两组阴性对照分别转染拮抗剂阴性对照混合物和激动剂阴性对照混合物,miR-28-5p拮抗剂组转染miR-28-5p inhibitor以沉默miR-28-5p,miR-28-5p激动剂组转染miR-28-5p mimics以过表达miR-28-5p。用细胞划痕实验检测细胞迁移活力,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测HCT116细胞中miR-28-5p的相对表达水平,蛋白质免疫印迹(WB)检测VAT1L蛋白的相对表达量。比较48 h后erastin组与control组miR-28-5p、VAT1L表达水平及两组细胞划痕迁移率和转染完成后各组细胞miR-28-5p、VAT1L表达水平。结果第一部分:与control组相比,erastin组miR-28-5p的相对表达量、VAT1L蛋白的相对表达量均有降低(均P<0.05);与control组相比,erastin组的细胞迁移率降低(P<0.05)。第二部分:与inhibitor-NC组比较,miR-28-5p inhibitor组miR-28-5p的相对表达量降低(P<0.05);与mimics-NC组比较,miR-28-5p mimics组miR-28-5p的相对表达量增高(P<0.05)。与inhibitor-NC组比较,miR-28-5p inhibitor组VAT1L蛋白的相对表达量升高(P<0.05);与mimics-NC组比较,miR-28-5p mimics组VAT1L蛋白的相对表达量降低(P<0.05)。结论miR-28-5p可能通过抑制VAT1L的表达,以降低结肠癌细胞迁移活力。 展开更多

关键词 mir-28-5p 结肠癌 VAT1L 细胞活力

下载PDF 职称材料

miR-28-5p通过靶向MTSS1调控非小细胞肺癌细胞的恶性生物学行为

14

作者 王永杰 方小丽 +3 位作者 刘仕强 王杰 陈旭 汪华 《生物技术》 CAS 2022年第2期210-215,共6页

[目的]探讨miR-28-5p通过靶向MTSS1调控非小细胞肺癌细胞的恶性生物学行为。[方法]用双萤光素酶检测试剂分析荧光素酶活性,同时应用RT-PCR检测MRC5细胞和A549细胞中miR-28-5p和MTSS1 mRNA水平;用Lipofectamine法将miR-NC、miR-28-5p inh... [目的]探讨miR-28-5p通过靶向MTSS1调控非小细胞肺癌细胞的恶性生物学行为。[方法]用双萤光素酶检测试剂分析荧光素酶活性,同时应用RT-PCR检测MRC5细胞和A549细胞中miR-28-5p和MTSS1 mRNA水平;用Lipofectamine法将miR-NC、miR-28-5p inhibitor和miR-28-5p mimic转染到A549细胞,培养48h后分别采用MTT法、流式细胞术和Transwell法检测细胞增殖、凋亡和迁移情况,同时蛋白印迹法法检测A549细胞中MTSS1、PI3K、AKT和Caspase-3表达。[结果] miR-28-5p与MTSS1有潜在的结合位点;转染miR-28-5p mimic可明显降低MTSS1-WT的荧光素酶活性,对MTSS1-MUT没有影响,而miR-28-5p inhibitor则表现出相反作用,表明miR-28-5p与MTSS1存在靶向调节作用;A549细胞中miR-28-5p mRNA的相对表达量高于MRC5细胞(P<0.05),A549细胞中MTSS1 mRNA的相对表达量低于MRC5细胞(P<0.05);通过miR-28-5p inhibitor降低miR-28-5p后,A549细胞凋亡、MTSS1、MTSS1、PI3K、AKT和Caspase-3的表达增加,细胞增殖和迁移降低(P<0.05);通过miR-28-5p mimic增加miR-28-5p后,A549细胞凋亡、MTSS1、MTSS1、PI3K、AKT和Caspase-3的表达降低,细胞增殖和迁移增加(P<0.05)。[结论] miR-28-5p在A549细胞中高表达,通过基因干预降低miR-28-5p表达后,miR-28-5p通过靶向MTSS1的3’端非编码区,提高MTSS1的翻译水平,抑制A549细胞的恶性生物学行为。 展开更多

关键词 mir-28-5p MTSS1 非小细胞肺癌 恶性生物学行为

原文传递

miR-28-5p和Nrf2与老年脑动静脉畸形出血的关系

15

作者 王辰龙 周红 +3 位作者 呼群 张瑞云 张海廷 李志方 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2022年第14期3385-3389,共5页

目的研究miR-28-5p与Nrf2在脑动静脉畸形(AVM)中的表达及与出血的关系。方法收集2016年2月至2018年2月民航总医院就诊的脑血管AVM未出老年血患者32例为血管畸形组,AVM出血患者25例为出血组,27例为癫痫组,健康体检者30例为健康组,采用逆... 目的研究miR-28-5p与Nrf2在脑动静脉畸形(AVM)中的表达及与出血的关系。方法收集2016年2月至2018年2月民航总医院就诊的脑血管AVM未出老年血患者32例为血管畸形组,AVM出血患者25例为出血组,27例为癫痫组,健康体检者30例为健康组,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法测定各组外周血miR-28-5p与Nrf2的mRNA表达,随访血管畸形组2年,统计AVM患者出血情况并进行相关因子检测。AVM老年患者进行Spetzler&Martin分级,对不同分组、病情分级的数据进行统计。结果在健康组、癫痫组、血管畸形组、出血组外周血中miR-28-5p依次呈低表达;Nrf2依次呈高表达,差异具有统计学意义(P<0.05);不同病情分级对应的miR-28-5p表达均随着病情分级增加表达减弱,不同分级之间差异具有统计学意义(P<0.05)。Nrf2表达随着病情分级增加表达增强,不同分级之间差异具有统计学意义(P<0.05);血管畸形组随访期间14例出现出血症状,单因素回归分析显示出血危险与miR-28-5p弱表达相关,与Nrf2强表达相关(P<0.05)。体外模型中,加入Nrf2抑制剂后,癫痫组、血管畸形组、出血组中miR-28-5p的mRNA表达水平明显升高,miR-28-5p与Nrf2呈负相关(P<0.05)。结论miR-28-5p在老年脑AVM患者中呈现低表达,与临床分级、出血症状呈负相关。Nrf2在老年脑AVM患者中呈现高表达,与临床分级、出血症状呈正相关,MicroRNA-28-5p与Nrf2呈负相关,是临床出血并发症的危险因素。 展开更多

关键词 mir-28-5p 核转录因子 脑动静脉畸形 脑出血 血管内皮细胞

下载PDF 职称材料

TRIM52-AS1通过调控miR-28-5p减轻缺氧/复氧诱导的大鼠脑皮层神经元损伤

16

作者 张广林 李天晓 +1 位作者 常晓赞 行君 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期448-457,共10页

目的探讨TRIM52反义RNA1(TRIM52-AS1)对缺氧/复氧(H/R)诱导的大鼠脑皮层神经元损伤的影响及其可能机制。方法(1)将体外培养的大鼠皮层神经元分为对照组和模型组,模型组制备H/R诱导的细胞损伤模型,采用实时定量PCR(RT-qPCR)检测2组神经元... 目的探讨TRIM52反义RNA1(TRIM52-AS1)对缺氧/复氧(H/R)诱导的大鼠脑皮层神经元损伤的影响及其可能机制。方法(1)将体外培养的大鼠皮层神经元分为对照组和模型组,模型组制备H/R诱导的细胞损伤模型,采用实时定量PCR(RT-qPCR)检测2组神经元TRIM52-AS1、微小RNA(miR)-28-5p的表达。(2)将皮层神经元分为对照组、模型组、TRIM52-AS1小干扰RNA(si-TRIM52-AS1)转染组和无义序列转染组,后2组细胞分别转染si-TRIM52-AS1及其无义对照序列,转染6h后,制备H/R诱导的细胞损伤模型。采用RT-qPCR、细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、流式细胞仪分别检测4组神经元TRIMS2-AS1的表达及细胞增殖、凋亡情况;采用酶联免疫吸附实验(ELISA),Westerm blotting分别检测培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)、细胞中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量和Cyclin D1、Bcl-2、Bax蛋白的表达。(3)将皮层神经元分为miR-28-Sp转染组和无义序列转染组,分别转染miR-28-5p模拟物及其无义对照序列、转染6h后,均制备H/R诱导的细胞损伤模型。采用RT-qPCR、CCK-8、流式细胞仪分别检测2组神经元miR-28-5p的表达及细胞增殖、调亡情况;采用ELISA及Western boting分别检测培养上清中LDH、细胞中MDA、SOD含量和Cyclin D1、Bcl-2、Bax蛋白的表达。(4)将皮层神经元分别分为野生型TRIM52-ASI+miR-28-5p模拟物转染组野生型TRIM52-AS1+miR-28-5p无义对照序列转染组和突变型TRIM52-AS1+miR-28-5p模拟物转染组.突变型TRIM52-AS1+miR-28-5p无义对照序列转染组。转染6h后换新鲜培养液继续培养12h后,采用双荧光素酶报告基因实验检测各组细胞的荧光素酶活性。(5)将皮层神经元分为无义序列转染组、miR-28-5p抑制物转染组、无义序列+si-TRIM52-AS1转染组、miR-28-5p抑制物+si-TRIM52-AS1转染组,分别转染miR-28-Sp抑制物无义对照序列、miR-28-5p抑制物、miR-28-5p抑制物无义对照序列+si-TRIM52-ASI、miR-28-5p抑制物+si-TRIM52-AS1.转� 展开更多

关键词 神经元 缺氧/复氧 TRIM52-AS1 mir-28-5p 氧化应激 细胞凋亡

原文传递

CircASPH靶向miR-28-5p/IGF-1R轴对多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞增殖迁移和侵袭的影响

17

作者 毛雅婷 钱瑛 徐云钊 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期566-571,共6页

目的:探讨环状RNA天冬酰胺β-羟化酶(CircASPH)靶向miR-28-5p/胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)轴对多囊卵巢综合征(PCOS)卵巢颗粒细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:使用人卵巢颗粒细胞KGN、COV434为研究对象,通过双荧光素酶报告基因实... 目的:探讨环状RNA天冬酰胺β-羟化酶(CircASPH)靶向miR-28-5p/胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)轴对多囊卵巢综合征(PCOS)卵巢颗粒细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:使用人卵巢颗粒细胞KGN、COV434为研究对象,通过双荧光素酶报告基因实验、下拉实验证实CircASPH、miR-28-5p、IGF-1R三者间的靶向关系。将KGN、COV434细胞分为si-NC组、si-ASPH组、si-ASPH+anti-NC组、si-ASPH+anti-miR-28-5p组,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CircASPH、miR-28-5p和IGF-1R mRNA表达水平,并用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(Edu)染色和迁移小室实验分别检测细胞增殖、迁移和侵袭行为;采用蛋白印迹实验检测增殖细胞核抗原、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、波形蛋白、N-钙黏蛋白、E-钙黏蛋白、IGF-1R蛋白表达。结果:生物信息学分析和双荧光素酶报告基因实验显示,CircASPH、IGF-1R与miR-28-5p有靶向结合位点。与si-NC组比较,si-ASPH组CircASPH表达水平、OD 490值、Edu阳性细胞率、细胞迁移与侵袭数、MMP-2、波形蛋白、N-钙黏蛋白降低,miR-28-5p表达水平和E-钙黏蛋白表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与si-ASPH+anti-NC组比较,si-ASPH+anti-miR-28-5p组miR-28-5p表达水平和E-钙黏蛋白降低,OD 490值、Edu阳性细胞率、细胞迁移与侵袭数、MMP-2、波形蛋白、N-钙黏蛋白升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:在KGN、COV434细胞中,抑制CircASPH表达可通过调节miR-28-5p/IGF-1R轴,抑制卵巢颗粒细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化,可能成为治疗PCOS的一种新靶点。 展开更多

关键词 CircASpH/mir-28-5p/IGF-1R轴 卵巢颗粒细胞 增殖 迁移 侵袭

下载PDF 职称材料