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经血间充质干细胞通过IGF-1信号通路改善小鼠卵巢早衰 被引量：6
1
作者 徐焱焱 颜贝 +1 位作者 王锐 王红燕 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2020年第2期13-20,共8页
目的探讨经血间充质干细胞(MenSCs)移植改善化疗所致卵巢早衰(POF)小鼠卵巢功能的效果和分子机制.方法48只C57BJ雌鼠被随机分成3组:对照组、POF组和干细胞组.环磷酰胺和白消安腹腔注射构建POF小鼠;干细胞组小鼠在化疗药物注射后3 d开始... 目的探讨经血间充质干细胞(MenSCs)移植改善化疗所致卵巢早衰(POF)小鼠卵巢功能的效果和分子机制.方法48只C57BJ雌鼠被随机分成3组:对照组、POF组和干细胞组.环磷酰胺和白消安腹腔注射构建POF小鼠;干细胞组小鼠在化疗药物注射后3 d开始鼠尾静脉注射MenSCs.采用qRT-PCR定量分析卵巢内生长因子受体结合蛋白10(GRB10)的mRNA表达;采用Western blotting定量分析卵巢内GRB10、叉头状转录因子O亚家族蛋白3(FOXO3a)、p-FOXO3a、胰岛素样生长因子受体(IGF-1R)、p-IGF-1R、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT的蛋白表达.结果对照组、POF组、干细胞组的血清雌二醇浓度分别为(222.29±35.13)、(90.87±28.76)、(193.24±48.74)pg/mL,3组之间差异有统计学意义(F=19.332,P<0.001);POF组低于对照组(P<0.001)和干细胞组(P<0.001).对照组、POF组、干细胞组小鼠超排的成熟卵子数分别为(40.00±10.07)、(9.00±7.42)、(24.60±10.24)个,3组之间差异有统计学意义(F=13.792,P=0.001);对照组(P<0.001)和干细胞组(P=0.021)高于POF组,且对照组高于干细胞组(P=0.023).Western blotting检测对照组、POF组、干细胞组卵巢内GRB10蛋白条带灰度值分别为1.22±0.05、1.82±0.13、1.10±0.09,3组之间差异有统计学意义(F=94.340,P<0.001);POF组高于对照组(P<0.001)和干细胞组(P<0.001).3组中p-FOXO3a的蛋白条带灰度值分别为0.80±0.08、0.33±0.06、0.76±0.05;3组之间差异有统计学意义(F=98.673,P<0.001);POF组低于对照组(P<0.001)和干细胞组(P<0.001).3组小鼠中p-IGF-1R的蛋白条带灰度值分别为0.31±0.10、0.32±0.08、0.42±0.01,3组之间差异有统计学意义(F=3.882,P=0.044);干细胞组p-IGF-1R蛋白含量高于对照组(P=0.023)和POF组(P=0.039).对照组、POF组、干细胞组小鼠的p-AKT蛋白条带灰度值分别为0.57±0.02、0.51±0.05、0.64±0.03,3组之间差异有统计学意义(F=22.227,P<0.001);干细胞组蛋白含量高于对照组(P=0.005)和POF组(P<0.001),对照组高于POF组(P=0.004 展开更多
关键词 经血间充质干细胞 卵巢早衰 生长因子受体结合蛋白10 胰岛素样生长因子1 叉头状转录因子O亚家族蛋白3
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脱细胞异种神经桥接体联合经血源性间充质干细胞对大鼠坐骨神经缺损的影响
2
作者 王红燕 王贺颖 +5 位作者 梁雪云 贾桦 段昉 张博闻 仇莽莽 何仲义 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期175-181,共7页
目的:研究脱细胞异种神经桥接体(ANX)联合经血源性间充质干细胞(MenSCs)对大鼠坐骨神经缺损的影响。方法:将SD大鼠随机分为自体移植组、单纯ANX组和ANX+MenSCs共培养组,制备SD大鼠右侧坐骨神经缺损模型,将不同组的桥接体移植到SD大鼠右... 目的:研究脱细胞异种神经桥接体(ANX)联合经血源性间充质干细胞(MenSCs)对大鼠坐骨神经缺损的影响。方法:将SD大鼠随机分为自体移植组、单纯ANX组和ANX+MenSCs共培养组,制备SD大鼠右侧坐骨神经缺损模型,将不同组的桥接体移植到SD大鼠右侧坐骨神经缺损处,移植术后8周,用热板实验检测大鼠感觉功能的恢复,斜坡实验来检测运动功能的恢复,通过坐骨神经功能指数(SFI)检测大鼠坐骨神经功能,通过胫骨前肌湿重比率检测神经肌肉的功能,用透射电镜来观察髓鞘的恢复情况。结果:扫描电镜显示ANX组内原有的细胞及结构基本去除,完整保留了神经的基膜及外膜,ANX+MenSCs组可见圆形的细胞在基膜间稳定黏附生长;免疫荧光染色显示神经生长因子(NGF)在ANX+MenSCs共培养组中有阳性表达;移植术后8周,ANX+MenSCs组的患肢回缩时间显著短于单纯ANX组(P<0.05),爬坡坡度、SFI值以及胫骨前肌湿重比率均显著高于单纯ANX组(P<0.05),ANX+MenSCs组与自体组相比,两组的患肢回缩时间、爬坡坡度以及胫骨前肌湿重比均无显著差异(P>0.05),但自体组的SFI值显著增高(P<0.05);透射电镜显示与单纯ANX组相比,ANX+MenSCs组和自体组的髓鞘结构更完整,虽有水肿,但形状小而均匀致密。结论:ANX联合MenSCs修复SD大鼠坐骨神经缺损的效果良好,MenSCs可能成为外周神经系统疾病细胞治疗的潜在候选种子细胞。 展开更多
关键词 经血源性间充质干细胞 脱细胞异种神经桥接体 共培养体系 坐骨神经缺损修复 大鼠
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自体血清与胎牛血清对经血源性基质干细胞增殖的影响
3
作者 王茜 谭季春 《中国临床实用医学》 2017年第4期19-25,共7页
目的 探讨自体血清替代胎牛血清培养经血源性基质干细胞的可行性,从而为疾病的个体化治疗提供参考.方法 收集20~30岁健康育龄女性的月经血,通过密度梯度离心法分离出经血源性基质干细胞,分别均匀地接种于含10%胎牛血清的DMEM/F-12培养... 目的 探讨自体血清替代胎牛血清培养经血源性基质干细胞的可行性,从而为疾病的个体化治疗提供参考.方法 收集20~30岁健康育龄女性的月经血,通过密度梯度离心法分离出经血源性基质干细胞,分别均匀地接种于含10%胎牛血清的DMEM/F-12培养体系和含10%自体血清的DMEM/F-12培养体系中,观察细胞的形态及增殖特性,并采用CCK-8法绘制生长曲线.比较两种培养体系培养的经血源性基质干细胞的成骨及成脂能力.结果 两种培养体系下,经血源性基质干细胞均呈典型的短小梭形生长,均可形成集落.成人自体血清组培养的经血源性基质干细胞在增殖速度上接近于胎牛血清组,CCK-8生长曲线的吸光度值差异无统计学意义（P〉0.05）.结论 两种培养体系下的经血源性基质干细胞均具有成骨及成脂能力.成人自体血清组培养的经血源性基质干细胞的形态和增殖能力接近于胎牛血清组,并维持了经血源性基质干细胞的基本生物学特性,可以替代胎牛血清用于经血源性基质干细胞的扩增培养,作为一种无异种血清的培养体系,为大量扩增经血源性基质干细胞用于开展临床治疗提供了较为安全的选择. 展开更多
关键词 经血源性基质干细胞 自体血清 胎牛血清 细胞增殖 生物安全性
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经血源子宫内膜干细胞培养、鉴定及体外分化潜能的研究 被引量：6
4
作者 严琰 东健沣 +2 位作者 桑运霞 刘召青 齐念民 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期892-899,共8页
现阶段干细胞的来源常具有侵入性,该文旨在研究新来源于经血的经血源子宫内膜干细胞(menstrual blood-derived mesenchymal stem cells,MenSCs)的基本生物学特性及分化潜能。采用密度梯度法从女性经血中分离MenSCs,测定MenSCs群体倍增时... 现阶段干细胞的来源常具有侵入性,该文旨在研究新来源于经血的经血源子宫内膜干细胞(menstrual blood-derived mesenchymal stem cells,MenSCs)的基本生物学特性及分化潜能。采用密度梯度法从女性经血中分离MenSCs,测定MenSCs群体倍增时间,流式细胞仪鉴定细胞表面抗原,免疫荧光法检测MenSCs nestin阳性表达情况,体外验证其成骨成脂分化潜能。结果表明,MenSCs具有典型的梭状结构,细胞倍增时间为32.2 h,均一地高表达CD29、CD90及CD105,不表达CD14、CD45、HLA-DR。免疫荧光表明,MenSCs为nestin阳性。MenSCs成脂诱导后,油红O染色为阳性。成骨诱导前期诱导组细胞胶原表达量升高,诱导两周后MenSCs形成钙结节,诱导组细胞ALP(alkaline phosphatase)活性连续3周呈上升趋势。以上证明,MenSCs具有来源广泛的优势,具有较高的增殖能力、较低免疫原性、nestin阳性及多向分化潜能等特性,可成为干细胞治疗的理想种子细胞。 展开更多
关键词 经血源子宫内膜干细胞 多向分化潜能 细胞治疗 NESTIN
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软骨组织工程种子细胞的研究进展 被引量：3
5
作者 何爱娟 张天宇 《中国眼耳鼻喉科杂志》 2020年第1期3-6,共4页
肿瘤、外伤、先天畸形等导致的软骨缺损临床十分常见。目前,组织工程软骨修复技术在整形外科各领域均获得了较多进展,但种子细胞来源问题仍是限制这一技术临床应用转化的重要瓶颈。本文重点综述目前软骨组织工程技术常用的种子细胞来源... 肿瘤、外伤、先天畸形等导致的软骨缺损临床十分常见。目前,组织工程软骨修复技术在整形外科各领域均获得了较多进展,但种子细胞来源问题仍是限制这一技术临床应用转化的重要瓶颈。本文重点综述目前软骨组织工程技术常用的种子细胞来源,阐述各类种子细胞的生物学行为特性、研究进展及面临的挑战,为组织工程软骨的临床应用转化提供参考。 展开更多
关键词 组织工程 种子细胞 软骨细胞 骨髓间充质干细胞 脂肪干细胞 胚胎干细胞 诱导多能干细胞 经血源子宫内膜干细胞
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经血间充质干细胞外泌体对人卵巢癌细胞A2780生物学行为的影响 被引量：1
6
作者 陆茜林 丁娜 +6 位作者 贺红林 袁怡君 贺天文 冯露 田超 刘康 李均 《中国医学前沿杂志（电子版）》 CSCD 北大核心 2024年第2期50-57,共8页
目的 探讨经血源性间充质干细胞(menstrual blood-derived mesenchymal stem cells,MenSCs)来源的外泌体(MenSCs-derived exosomes,MenSCs-Exos)对人卵巢癌细胞A2780增殖、迁移、侵袭能力和细胞周期分布的影响和机制。方法 分离纯化MenS... 目的 探讨经血源性间充质干细胞(menstrual blood-derived mesenchymal stem cells,MenSCs)来源的外泌体(MenSCs-derived exosomes,MenSCs-Exos)对人卵巢癌细胞A2780增殖、迁移、侵袭能力和细胞周期分布的影响和机制。方法 分离纯化MenSCs,流式细胞术鉴定其细胞表型,油红O染色观察其成脂分化能力;超速离心法分离MenSCs-Exos,电子显微镜观察外泌体形态,纳米颗粒追踪分析其大小及分布,蛋白免疫印迹法检测外泌体标志性蛋白分子CD9、TSG101、calnexin的表达。采用CCK-8实验、划痕实验、Transwell细胞体外侵袭实验、流式细胞仪检测MenSCs-Exos对A2780细胞增殖、迁移、侵袭能力和细胞周期分布的影响;蛋白免疫印迹法检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白和迁移相关蛋白的表达。结果 成功分离具有干细胞表型和成脂分化潜能的MenSCs,同时检测发现MenSCs-Exos为边缘清晰、大小分布均匀的膜性囊泡,粒径为30~150 nm,平均为72.89 nm,膜表面标志性蛋白CD9、TSG101表达呈阳性,calnexin表达呈阴性。与对照组相比,MenSCs-Exos能增强A2780细胞增殖、迁移和侵袭能力,影响其细胞周期分布,并且可上调β-catenin、c-Myc、TCF4、Cyclin D1、Vimentin、N-cadherin的表达,下调E-cadherin的表达。结论 MenSCs-Exos可能是通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进A2780细胞增殖,并通过下调E-cadherin的表达促进A2780细胞的迁移和侵袭。 展开更多
关键词 外泌体 经血源间充质干细胞 卵巢癌 WNT/Β-CATENIN信号通路
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子宫内膜异位症患者与健康女性的经血源间充质干细胞自噬功能比较研究 被引量：3
7
作者 张悦健 林陶秀 +5 位作者 何甜甜 杨思晨 李长香 睢丛璐 郭亚楠 马小娜 《药物评价研究》 CAS 2023年第7期1417-1423,共7页
目的比较子宫内膜异位症(EMT)患者与健康女性的经血源间充质干细胞(MenSCs)的自噬功能。方法分别从EMT患者及健康女性的月经血中提取EMT MenSCs(E-MenSCs)和正常MenSCs(H-MenSCs),并借助成脂、成骨诱导分化鉴定其干细胞属性。通过CCK-8... 目的比较子宫内膜异位症(EMT)患者与健康女性的经血源间充质干细胞(MenSCs)的自噬功能。方法分别从EMT患者及健康女性的月经血中提取EMT MenSCs(E-MenSCs)和正常MenSCs(H-MenSCs),并借助成脂、成骨诱导分化鉴定其干细胞属性。通过CCK-8法比较E-MenSCs和H-MenSCs在12、24、48、72、96、120 h时刻于波长450 nm的吸光度(A)值,并绘制细胞增殖曲线,比较2组细胞的细胞活力;运用透射电镜观察E-MenSCs与H-MenSCs的细胞形态,检测比较其中自噬体和自噬溶酶体的数量;采用Western blotting法检测E-MenSCs和H-MenSCs中自噬标志物微管相关蛋白轻链3-II(LC3-II)和Beclin1的蛋白表达。结果E-MenSCs和H-MenSCs均为长梭形,呈辐射状扩散,且经成脂、成骨诱导分化后均有脂滴、钙结节形成。与H-MenSCs比较,E-MenSCs在72、96、120 h的细胞活力均显著升高(P<0.01、0.001),自噬体和自噬溶酶体数量显著减少(P<0.05、0.01),且LC3-Ⅱ、Beclin1蛋白表达量也显著降低(P<0.05)。结论与H-MenSCs比较,E-MenSCs的自噬功能减弱,这可能是EMT发病进展的潜在机制。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 经血源间充质干细胞 自噬 自噬体 自噬溶酶体 BECLIN1 LC3-Ⅱ
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经血源子宫内膜干细胞复合3D打印PLGA支架体外培养的相容性研究 被引量：3
8
作者 许世兵 单乐天 +3 位作者 金红婷 王萍儿 童培建 肖鲁伟 《浙江中医药大学学报》 CAS 2015年第12期854-858,共5页
[目的]通过经血源子宫内膜干细胞(menstrual blood-derived mesenchymal stem cells,Men SCs)与3D打印PLGA支架材料的复合培养,探讨构建组织工程化骨软骨的可行性。[方法]预处理3D打印PLGA支架,取第5代Men SCs,倒置显微镜下观察细胞生... [目的]通过经血源子宫内膜干细胞(menstrual blood-derived mesenchymal stem cells,Men SCs)与3D打印PLGA支架材料的复合培养,探讨构建组织工程化骨软骨的可行性。[方法]预处理3D打印PLGA支架,取第5代Men SCs,倒置显微镜下观察细胞生物学特性,按1.0×106/m L的密度接种到PLGA支架材料上复合培养,通过倒置显微镜、Mico-CT、扫描电镜和组织病理学进行观察,并借此判断Men SCs与3D打印PLGA支架材料复合体外培养的融合性。[结果]Men SCs生长良好,细胞平铺生长,呈梭形或纺锤形,胞质薄,核圆居中,具有成纤维细胞形态。细胞传至第5代,为长梭形细胞单层,呈漩涡状排列。PLGA支架的微观呈现相互连通的多孔结构,结构疏松,孔隙大且互相交通,孔壁较薄。Men SCs在PLGA支架材料上生长状态良好,细胞在支架表面和内部生长,支架孔径内有细胞基质样组织连接,表明Men SCs与3D打印PLGA支架材料复合体外培养的融合性良好。[结论]经血源Men SCs是骨组织工程适宜的种子细胞,与3D打印的PLGA支架材料复合可体外构建组织工程骨。 展开更多
关键词 子宫内膜干细胞 PLGA支架 经血 3D打印 骨组织工程 种子细胞 材料
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经血源性间充质干细胞生物学特性及在组织修复重建中的临床应用 被引量：2
9
作者 常琦圆 谭季春 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第21期3432-3438,共7页
背景:间充质干细胞在免疫调节和组织修复方面表现出了巨大的应用潜能。从经血中分离提取的经血源性间充质干细胞在具有间充质干细胞特性的同时,还具有获取便捷、低免疫原性和无伦理道德限制的优势,近年来备受研究人员的瞩目。目的:对经... 背景:间充质干细胞在免疫调节和组织修复方面表现出了巨大的应用潜能。从经血中分离提取的经血源性间充质干细胞在具有间充质干细胞特性的同时,还具有获取便捷、低免疫原性和无伦理道德限制的优势,近年来备受研究人员的瞩目。目的:对经血源性间充质干细胞的生物学特性以及在多系统和疾病方面的应用进行概述。方法:应用计算机检索PubMed、中国知网期刊全文数据库和谷歌学术2000至2018年与经血源性间充质干细胞相关的文献,检索词为"endometrium;menstrual blood;mesenchymal stem cells"及"子宫内膜;经血;间充质干细胞"。结果与结论:经血源性间充质干细胞拥有非常强的自我更新和多向分化能力,能够调节免疫应答,增加血管生成并促进组织修复。经血源性间充质干细胞在免疫、生殖等系统以及代谢性疾病方面已有不同程度的研究进展。目前研究中关于经血源性间充质干细胞的作用机制解释还不够充分,进一步研究经血源性间充质干细胞的旁分泌作用,将对经血源性间充质干细胞在创伤和退行性疾病的治疗以及血管再生和组织修复方面产生重大意义。而在经血源性间充质干细胞的临床试验研究方面,经血源性间充质干细胞应用于人体的安全性、作用于病灶或调节免疫的持续时间、对于人体的长期影响,这些至关重要的问题都需要进一步研究探讨。 展开更多
关键词 经血源性间充质干细胞 干细胞 再生医学 生物学特性 免疫调节 组织修复 血管生成 旁分泌
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基于CXCL12/CXCR4轴探讨琥珀散含药血清促进子宫内膜异位症患者经血源间充质干细胞自噬活性的作用机制
10
作者 张悦健 林陶秀 +2 位作者 何甜甜 李长香 马小娜 《药物评价研究》 CAS 2023年第7期1424-1430,共7页
目的 基于CXCL12/CXCR4轴探讨琥珀散对子宫内膜异位症(EMT)经血源间充质干细胞(MenSCs)自噬活性的调控作用。方法 从EMT患者和健康女性志愿者的月经血中分离提取EMT MenSCs(E-MenSCs)和正常MenSCs(HMenSCs)。采用12只7周龄雄性SD大鼠制... 目的 基于CXCL12/CXCR4轴探讨琥珀散对子宫内膜异位症(EMT)经血源间充质干细胞(MenSCs)自噬活性的调控作用。方法 从EMT患者和健康女性志愿者的月经血中分离提取EMT MenSCs(E-MenSCs)和正常MenSCs(HMenSCs)。采用12只7周龄雄性SD大鼠制备空白血清和含药血清(ig给予大鼠琥珀散9.9 g·kg^(-1),临床等效剂量)。将细胞分为3组:对照组(H-MenSCs)、模型组(E-MenSCs)和琥珀散组(E-MenSCs),对照组和模型组使用20%空白血清干预,琥珀散组使用20%含药血清干预,均干预48 h。分别采用CCK-8法、透射电镜、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blotting法检测3组细胞的细胞活力、自噬体和自噬溶酶体表达、CXCL12和CXCR4的mRNA水平和CXCL12/CXCR4及自噬标志分子(Beclin1和LC3Ⅱ)的蛋白表达量。结果 与对照组比较,模型组的细胞活力、CXCL12和CXCR4的mRNA和蛋白表达水平均显著提高(P<0.05、0.01、0.001),自噬体和自噬溶酶体数量、Beclin1和LC3Ⅱ的蛋白表达均显著降低(P<0.05、0.01);与模型组比较,琥珀散组的细胞活力、CXCL12和CXCR4的mRNA及蛋白表达水平均显著下调(P<0.05、0.01、0.001),自噬体和自噬溶酶体数量、Beclin1和LC3Ⅱ的蛋白表达均显著上调(P<0.05、0.01、0.001)。结论 琥珀散含药血清能够上调E-MenSCs自噬活性,其作用机制可能与其抑制CXCL12/CXCR4轴有关。 展开更多
关键词 琥珀散 子宫内膜异位症 经血源间充质干细胞 CXCL12/CXCR4轴 自噬 含药血清
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