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放线菌野生株代谢功能的核糖体工程改造与新产抗肿瘤活性产物研究 被引量:15
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作者 韩晓 崔承彬 +2 位作者 韩小贤 李长伟 杨明 《国际药学研究杂志》 CAS 2009年第6期435-442,446,共9页
目的利用核糖体工程技术,改造放线菌次级代谢功能,筛选获得抗肿瘤活性突变株,并对突变株新产活性产物进行研究。方法以海洋来源无活性放线菌野生株HLF-39和HLF-43为出发菌,通过单菌落挑选与平板划线培养,分离纯化链霉素抗性突变株,通过... 目的利用核糖体工程技术,改造放线菌次级代谢功能,筛选获得抗肿瘤活性突变株,并对突变株新产活性产物进行研究。方法以海洋来源无活性放线菌野生株HLF-39和HLF-43为出发菌,通过单菌落挑选与平板划线培养,分离纯化链霉素抗性突变株,通过摇床液态发酵和发酵提取物乙酸乙酯萃取样品的抗肿瘤活性筛选,获得抗肿瘤活性突变株;采用活性跟踪与微量预试先导-放大实验制备组合的实验模式,与原始菌样品对照比较,在快速确定差异活性斑点基础上,组合各种色谱技术,分离纯化突变株新产抗肿瘤活性产物;根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构;采用MTT法测评抗肿瘤活性。结果链霉素对HLF-39和HLF-43的最低抑菌浓度分别为3和10mg·L-1。经抗性筛选,得到对链霉素产生抗性的HLF-39突变株28株、HLF-43突变株204株。在所得突变株中,3株HLF-39突变株和14株HLF-43突变株有抗肿瘤活性,100mg·L-1样品对K562细胞的抑制率大于20%;其中,4株分别对11、100、200和300mg·L-1链霉素产生抗性的HLF-43突变株CHS-21101、CHS-210010、CHS-220002和CHS-230001活性显著,100mg·L-1样品对K562细胞的抑制率分别达59.5%、50.0%、44.1%和59.6%。从CHS-21101发酵物中分离得到2个该突变株新产抗肿瘤活性产物,并分别鉴定为环(4-羟脯-亮)二肽(1)和phencomycin(2)。化合物1和2对K562细胞呈抑制活性,100mg·L-1抑制率分别为33.9%和21.4%。结论利用核糖体工程抗性筛选技术,从2株无活性放线菌野生菌株成功筛选得到17株具有抗肿瘤活性的链霉素抗性突变株,从其中1株发酵物中分离鉴定了2个该突变株新产抗肿瘤活性产物。用核糖体工程技术改造无活性放线菌野生株的次级代谢功能,可筛选获得活性突变株并提供深入研究新产活性产物,从中筛选新药及其先导结构,从而拓展药源放线菌活性菌株新资源。 展开更多
关键词 海洋微生物 放线菌 核糖体工程 链霉素抗性 抗肿瘤活性 环(4-羟脯-亮)二肽 phencomycin
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海洋来源微生物的分离培养与抗肿瘤活性筛选 被引量:11
2
作者 韩晓 崔承彬 韩小贤 《国际药学研究杂志》 CAS 2008年第4期241-246,共6页
目的从海洋环境样品中分离纯化微生物,经发酵培养与活性筛选,获取抗肿瘤活性菌株以供筛选药源活性产物,获无活性菌株以供核糖体工程转化研究。方法通过单菌落挑选与划线培养分离纯化微生物菌株,经摇床发酵和提取操作制备活性测试样品。... 目的从海洋环境样品中分离纯化微生物,经发酵培养与活性筛选,获取抗肿瘤活性菌株以供筛选药源活性产物,获无活性菌株以供核糖体工程转化研究。方法通过单菌落挑选与划线培养分离纯化微生物菌株,经摇床发酵和提取操作制备活性测试样品。采用MTT法结合显微镜下细胞形态学检测的方法,测试样品的抗肿瘤活性。结果从渤海湾驴驹河潮间带海泥样品中分离得到了微生物127株,其中真菌80株、放线菌47株。在127株中100mg·L-1样品浓度下对K562细胞的抑制率大于40%的活性菌株为8株,占菌株总数的6.3%(其中放线菌4株,占放线菌数的8.5%,真菌4株,占真菌数的5%),抑制率在20%~40%的放线菌6株,占放线菌数的12.7%。结论从渤海湾海泥样品中分离得到真菌80株、放线菌47株,从中获得抗肿瘤活性真菌4株、放线菌10株,从放线菌中获得抗肿瘤活性菌株的频率远远高于真菌。活性菌株为寻找药源活性产物提供了菌株,无活性菌株则为核糖体工程拓展药源菌株来源研究提供了资源。 展开更多
关键词 海洋来源微生物 分离 纯化 抗肿瘤活性 MTT法 K562细胞
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海洋来源白浅灰链霉菌中环二肽类化合物的分离与结构鉴定 被引量:10
3
作者 古静燕 刘红兵 +1 位作者 崔承彬 顾谦群 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期618-620,共3页
为了寻找新的抗肿瘤活性化合物,采用硅胶、SephadexLH20柱色谱和高效液相色谱,从白浅灰链霉菌Streptomycesalbogriseolus(A2002)中分离得到3个环二肽;利用理化及波谱学方法鉴定其结构分别为环(丙氨酸缬氨酸)[cyclo(AlaVal),1],环(丙氨... 为了寻找新的抗肿瘤活性化合物,采用硅胶、SephadexLH20柱色谱和高效液相色谱,从白浅灰链霉菌Streptomycesalbogriseolus(A2002)中分离得到3个环二肽;利用理化及波谱学方法鉴定其结构分别为环(丙氨酸缬氨酸)[cyclo(AlaVal),1],环(丙氨酸脯氨酸)[cyclo(ProAla),2]和环(脯氨酸酪氨酸)[cyclo(ProTyr),3]。 展开更多
关键词 链霉菌 结构鉴定 STREPTOMYCES 分离 SEPHADEX 肽类 海洋 高效液相色谱 活性化合物 谱学方法 丙氨酸 脯氨酸 抗肿瘤 柱色谱 环二肽 缬氨酸 酪氨酸
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海洋微生物抗肿瘤活性产物研究进展 被引量:8
4
作者 任虹 崔承彬 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期57-63,共7页
海洋环境造就了海洋微生物有别于陆地微生物的代谢途径,使他们往往能代谢生产与陆地微生物不同的结构新颖、活性独特的抗肿瘤活性产物,从海洋微生物发酵产物中已发现了很多抗肿瘤活性新化合物。本文按化合物结构类型归纳介绍近十几年研... 海洋环境造就了海洋微生物有别于陆地微生物的代谢途径,使他们往往能代谢生产与陆地微生物不同的结构新颖、活性独特的抗肿瘤活性产物,从海洋微生物发酵产物中已发现了很多抗肿瘤活性新化合物。本文按化合物结构类型归纳介绍近十几年研究发现的几类较重要的部分海洋微生物抗肿瘤活性产物。 展开更多
关键词 海洋微生物 代谢产物 抗肿瘤活性
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2株无抗肿瘤活性放线菌野生株的抗生素抗性突变株及其抗肿瘤活性筛选 被引量:6
5
作者 田从魁 崔承彬 +2 位作者 赵卫权 李长伟 姚志伟 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期43-46,共4页
以2株放线菌无活性野生株M15(海洋)和M13(陆地)为原始菌,利用核糖体工程抗性筛选技术,通过对M15的链霉素、新霉素、利福平、庆大霉素抗性筛选,得到抗性突变株共63株,经对M13的链霉素抗性筛选,得到链霉素抗性突变株18株。其中,6株M15突... 以2株放线菌无活性野生株M15(海洋)和M13(陆地)为原始菌,利用核糖体工程抗性筛选技术,通过对M15的链霉素、新霉素、利福平、庆大霉素抗性筛选,得到抗性突变株共63株,经对M13的链霉素抗性筛选,得到链霉素抗性突变株18株。其中,6株M15突变株在活性测试中示有抗肿瘤活性,100μg/mL样品对K562细胞的抑制率大于30%,活性最强的1株新霉素8μg/mL抗性突变株CTM154-8N抑制率高达93.3%,而从M13突变株中没有发现活性突变株。 展开更多
关键词 海洋来源微生物 放线菌 核糖体工程 抗性筛选 自发突变 抗肿瘤活性
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对海洋来源放线菌无活性野生株HLF-43的微波诱变结合新霉素抗性与抗肿瘤活性组合筛选 被引量:5
6
作者 张志军 崔承彬 李长伟 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期33-37,共5页
以海洋来源放线菌无活性野生株HLF-43为出发菌,通过微波诱变结合新霉素抗性筛选,得到新霉素抗性突变株共128株,其中微波诱变新霉素抗性株117株、自发突变抗性株11株。经活性筛选,8株微波诱变新霉素抗性突变株对K562细胞有一定抑制作用,... 以海洋来源放线菌无活性野生株HLF-43为出发菌,通过微波诱变结合新霉素抗性筛选,得到新霉素抗性突变株共128株,其中微波诱变新霉素抗性株117株、自发突变抗性株11株。经活性筛选,8株微波诱变新霉素抗性突变株对K562细胞有一定抑制作用,100μg/mL发酵样品对K562细胞的抑制率>20%。经对不同微波辐照时间和不同浓度新霉素组合筛选实验结果的比较分析,初步确定对HLF-43的微波辐照诱变最佳时间为120 s。 展开更多
关键词 海洋来源微生物 放线菌 抗生素抗性筛选 微波诱变 新霉素 抗肿瘤活性
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3株海洋来源微生物代谢产物及其抗肿瘤活性 被引量:5
7
作者 任虹 崔承彬 +2 位作者 李长伟 姚志伟 杨明 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期64-68,共5页
从3株海洋微生物发酵物的抗肿瘤活性部位分离鉴定了放线菌内酯素(1)、2-吡咯酸(2)、5,7,4'-三羟基异黄酮(3)、7,4'-二羟基异黄酮(4)、环(脯-甘)二肽(5)、N-甲酰基-星形孢菌素(6)、过氧化麦角甾醇(7)、6,9-环氧麦角甾-... 从3株海洋微生物发酵物的抗肿瘤活性部位分离鉴定了放线菌内酯素(1)、2-吡咯酸(2)、5,7,4'-三羟基异黄酮(3)、7,4'-二羟基异黄酮(4)、环(脯-甘)二肽(5)、N-甲酰基-星形孢菌素(6)、过氧化麦角甾醇(7)、6,9-环氧麦角甾-7,22-二烯-3-醇(8)等8个化合物。这些化合物分别产自2株放线菌L39-3(1和2)、L20-1d1(3-6)和1株真菌LJW-110(7和8)。抗肿瘤活性初步测试结果表明,除2和5以外对K562细胞均有不同程度抑制作用,在100μg/mL浓度下的抑制率约在32%-66%范围之内。 展开更多
关键词 海洋来源微生物 放线菌 真菌 代谢产物 分离鉴定 抗肿瘤活性
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Chartrenoline, a novel alkaloid isolated from a marine Streptomyces chartreusis NA02069 被引量:3
8
作者 Chengli Liu Chenglong Yang +6 位作者 Yingjie Zeng Jing Shi Lingyu Li Wei Li Ruihua Jiao Renxiang Tan Huiming Ge 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2019年第1期44-46,共3页
A novel alkaloid, chartrenoline(1), featuring an unusual 6/6/5/5-tetracyclic nucleus, was isolated from a marine Streptomyces chartreusis NA02069. The structure of 1 including its absolute configurations was establish... A novel alkaloid, chartrenoline(1), featuring an unusual 6/6/5/5-tetracyclic nucleus, was isolated from a marine Streptomyces chartreusis NA02069. The structure of 1 including its absolute configurations was established by extensive analyses of its high resolution mass, NMR and single-crystal X-ray diffraction data. A plausible biosynthetic pathway for chartrenoline(1) is proposed. 展开更多
关键词 ALKALOID Chartrenoline STREPTOMYCES chartreusis 6/6/5/5-Tetracyclic NUCLEUS marine-derived microorganism
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无活性放线菌野生株抗肿瘤活性突变株的自发突变抗性筛选和化学诱变抗性筛选 被引量:3
9
作者 孙玉雯 崔承彬 +2 位作者 韩小贤 李长伟 杨明 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2010年第1期16-20,共5页
目的由无活性放线菌野生株转化获取活性突变株,为药源活性产物研究拓展新菌株资源。方法以海洋来源无活性放线菌野生株L35-1为出发菌株,通过自发突变抗性筛选以及化学诱变结合抗性筛选,筛选获得抗性突变株。采用MTT法检测突变株发酵样品... 目的由无活性放线菌野生株转化获取活性突变株,为药源活性产物研究拓展新菌株资源。方法以海洋来源无活性放线菌野生株L35-1为出发菌株,通过自发突变抗性筛选以及化学诱变结合抗性筛选,筛选获得抗性突变株。采用MTT法检测突变株发酵样品对K562细胞的抑制活性。结果通过自发突变抗性筛选,得到新霉素抗性突变株114株、链霉素抗性突变株68株,其中7株新霉素抗性突变株和3株链霉素抗性突变株样品对K562细胞有抑制作用,在100μg/ml浓度下抑制率大于20%。通过化学诱变结合抗性筛选,得到硫酸二乙酯诱变链霉素抗性突变株41株、硫酸二乙酯诱变新霉素抗性突变株32株、亚硝基胍诱变新霉素抗性突变株46株,其中1株硫酸二乙酯诱变链霉素抗性突变株和1株亚硝基胍诱变新霉素抗性突变株有抗肿瘤活性,100μg/ml样品对K562细胞的抑制率大于20%。结论上述结果初步表明,无活性放线菌野生株可通过抗性筛选转化为活性突变株,因此有可能成为筛选获取药源活性新菌株的重要原始资源。 展开更多
关键词 海洋微生物 放线菌 抗生素抗性筛选 化学诱变 抗肿瘤活性
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海洋青霉菌IMB17-009抗菌活性次级代谢产物研究 被引量:2
10
作者 李芳 李娇 +5 位作者 李莎莎 郝晓萌 关艳 刘玉凤 王保国 甘茂罗 《中国医药生物技术》 2021年第3期193-200,共8页
目的分离鉴定从红树林沉积物分离的海洋青霉菌IMB17-009产生的抗菌活性次级代谢产物。方法利用中压柱色谱、凝胶柱色谱和HPLC等多种色谱分离方法对菌株固体发酵产物进行分离纯化,通过紫外可见光谱、质谱和核磁共振谱对化合物进行结构鉴... 目的分离鉴定从红树林沉积物分离的海洋青霉菌IMB17-009产生的抗菌活性次级代谢产物。方法利用中压柱色谱、凝胶柱色谱和HPLC等多种色谱分离方法对菌株固体发酵产物进行分离纯化,通过紫外可见光谱、质谱和核磁共振谱对化合物进行结构鉴定,采用微量液体稀释法评价化合物对革兰氏阳性菌、阴性菌和真菌的抗菌活性。结果从青霉菌IMB17-009固体发酵产物中分离获得11个化合物,其结构分别确定为meleagrin(1)、glandicoline B(2)、roquefortine C(3)、2-(2-(1H-吲哚-3-基)乙酰基)-L-苯基丙氨酸(4)、citreohybridonol(5)、andrastinA(6)、andrastin B(7)、macrophorin A(8)、purpurogemutantin(9)、desferricoprogen(10)和deferriferrichrome(11)。结论化合物1、3、8、9对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌或弯孢霉菌、交链孢菌、镰孢菌和白念珠菌等真菌具有一定的抗菌活性,最低抑菌浓度为8~64μg/ml。化合物4为一新的天然产物。 展开更多
关键词 海洋微生物 青霉属 抗菌 抗真菌 分离纯化
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拓展微生物药源活性新菌株资源的新方法探索 被引量:9
11
作者 崔承彬 《国际药学研究杂志》 CAS 2010年第1期1-7,共7页
在药源微生物活性产物研究中,分离得到的绝大多数菌株往往因无活性而被大量闲置或被选择销毁,造成前期投入的极大浪费和菌株资源开发利用效率严重低下。因此,如何将大量无活性菌株有效转化成活性菌株从而拓展药源微生物资源已成为重要... 在药源微生物活性产物研究中,分离得到的绝大多数菌株往往因无活性而被大量闲置或被选择销毁,造成前期投入的极大浪费和菌株资源开发利用效率严重低下。因此,如何将大量无活性菌株有效转化成活性菌株从而拓展药源微生物资源已成为重要研究课题。本课题组近几年一直在探索开展海洋来源无活性野生菌株的活性化转化与新产活性产物研究,并在无活性放线菌和真菌相关研究中取得了较好进展。本文简要归纳介绍包括尚未详细报道的新近进展在内的部分研究结果。 展开更多
关键词 微生物 海洋来源微生物 放线菌 真菌 抗生素抗性筛选 核糖体工程 自发突变 人工诱变 抗肿瘤活性 抗真菌活性
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海洋微生物抗肿瘤活性菌株的分级组合筛选 被引量:13
12
作者 韩小贤 崔承彬 +4 位作者 刘红兵 朱天骄 顾谦群 李冬 温江妮 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期38-42,共5页
为探索如何快速获取活性菌株的筛选模式 ,组合使用海虾生物致死法和tsFT2 10细胞的流式细胞术筛选模型 ,对从青岛前海和胶州湾潮间带海泥、动植物样品中分离的 162株海洋微生物 ,进行了抗肿瘤活性的分级组合筛选。经海虾生物致死法一级... 为探索如何快速获取活性菌株的筛选模式 ,组合使用海虾生物致死法和tsFT2 10细胞的流式细胞术筛选模型 ,对从青岛前海和胶州湾潮间带海泥、动植物样品中分离的 162株海洋微生物 ,进行了抗肿瘤活性的分级组合筛选。经海虾生物致死法一级初筛 ,得到活性菌株 5 8株 (LC50 <5 0 0 μg/mL) ,阳性率为 3 5 .8%。对初筛有效的 5 8株菌利用流式细胞术筛选模型进行二级复筛 ,得到对tsFT2 10细胞有各种活性的活性菌株共 2 5株 ,阳性率为复筛菌株数的 43 .1%、初筛菌株总数的 15 .4% ,其中 ,诱发细胞坏死伴有凋亡诱导活性的菌株 7株 (占总菌株的 4.3 % ) ,具有细胞周期抑制活性的菌株 18株 (占总菌株的 11.1% )。该分级组合筛选模式与流式细胞术筛选模型的单独筛选模式相比 ,无漏筛 ,具有成本低、速度快、宜于大规模筛选等特点。 展开更多
关键词 海洋微生物 分级组合筛选 筛选模型 抗肿瘤 tsF210 海虾 细胞周期 细胞凋亡 细胞毒
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海洋微生物次级代谢产物及其抑菌活性研究进展 被引量:10
13
作者 杨凯琳 程文胜 +3 位作者 侯峰 郑彩娟 邵长伦 王长云 《中国海洋药物》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期71-81,共11页
海洋微生物能够产生大量结构新颖、活性独特的次级代谢产物,这为药物先导化合物的发现提供了重要来源,已成为海洋药物研究的热点。本文综述了自2000年至今从海洋真菌、细菌、放线菌报道的具有抑菌活性次级代谢产物的研究进展,共涉及到... 海洋微生物能够产生大量结构新颖、活性独特的次级代谢产物,这为药物先导化合物的发现提供了重要来源,已成为海洋药物研究的热点。本文综述了自2000年至今从海洋真菌、细菌、放线菌报道的具有抑菌活性次级代谢产物的研究进展,共涉及到活性化合物101个,结构类型主要包括大环内酯类、生物碱类、醌类、肽类和萜类等,其中26个化合物含有氯、溴或硫元素;体外抑菌活性测试结果表明,有33个化合物的MIC<5μg.mL-1。 展开更多
关键词 海洋微生物 次级代谢产物 抑菌活性
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近年国内海洋微生物代谢产物研究概况 被引量:6
14
作者 赵卫权 崔承彬 《国际药学研究杂志》 CAS 2008年第5期330-336,354,共8页
海洋微生物代谢产物是新药及其先导结构的一个重要来源,相关研究近来倍受关注。本文简要综述近年国内海洋微生物代谢产物的研究概况。
关键词 海洋微生物 代谢产物
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国内药用海洋微生物研究模型 被引量:1
15
作者 卢利方 《畜牧与饲料科学》 2010年第10期46-48,共3页
海洋微生物代谢产物的结构新颖、活性独特,是新药及其先导结构的一个重要来源,其相关研究也备受国内外广泛关注。简要综述了近年来国内海洋微生物及其研究模型概况及天然产物的超临界CO2萃取。
关键词 海洋微生物 研究模型 超临界CO2萃取
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海鞘微生物来源活性次级代谢产物研究进展
16
作者 姜明华 陈森华 +1 位作者 郭珩 刘岚 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2023年第3期69-81,共13页
海鞘作为海洋药物的重要来源,从中分离的8%的活性化合物被认为源自其共附生微生物。近年来,海鞘微生物来源次级代谢产物因其新颖的化学结构和显著活性而逐渐受到关注,在海洋药物研发中具有广阔的前景。综述1994—2022年初报道的150个新... 海鞘作为海洋药物的重要来源,从中分离的8%的活性化合物被认为源自其共附生微生物。近年来,海鞘微生物来源次级代谢产物因其新颖的化学结构和显著活性而逐渐受到关注,在海洋药物研发中具有广阔的前景。综述1994—2022年初报道的150个新的海鞘微生物天然产物的来源、化学结构及其生物活性,结构类型主要包括聚酮类、生物碱类、萜类和肽类等,并展望了海鞘微生物天然产物的发展方向。 展开更多
关键词 海鞘微生物 海洋天然产物 化学结构 生物活性
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