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淋巴道转移潜能及ANXA7对肝癌细胞共培养淋巴管内皮细胞的调控作用 被引量：1
1
作者 王静文 钱雪娇 +1 位作者 章明放 唐建武 《山东医药》 CAS 2022年第28期1-6,共6页
目的探讨淋巴道转移潜能及膜联蛋白A7(ANXA7)对肝癌细胞共培养淋巴管内皮细胞(LEC)的调控作用。方法将各肝癌细胞及LEC共培养,收集与F细胞(高淋巴道转移潜能)、P细胞(低淋巴道转移潜能)、F_(A7下调)细胞(ANXA7表达下调)、F_(无关序列)... 目的探讨淋巴道转移潜能及膜联蛋白A7(ANXA7)对肝癌细胞共培养淋巴管内皮细胞(LEC)的调控作用。方法将各肝癌细胞及LEC共培养,收集与F细胞(高淋巴道转移潜能)、P细胞(低淋巴道转移潜能)、F_(A7下调)细胞(ANXA7表达下调)、F_(无关序列)细胞、P_(A7上调)细胞(ANXA7表达上调)、P_(空载体)细胞共培养的LEC(L-F_(共)、L-P_(共)、L-F_(A7下调共)、L-F_(无关序列共)、L-P_(A7上调共)、L-P_(空载体共)细胞)以及正常LEC用于实验。分别用实时定量PCR、Western blotting检测共培养LEC内淋巴管内皮相关分子(VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-3、NRP-2、PDPN、LYVE-1、SOX18)mRNA与蛋白表达。用细胞免疫荧光法检测共培养LEC内淋巴管内皮相关分子定位,用ELISA法检测细胞上清液VEGF-C、VEGF-D水平,用淋巴管成管实验测算淋巴管成管节点数和分支总长度。结果VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-3、NRP-2、PDPN、LYVE-1、SOX18在mRNA和蛋白水平表达上,L-P_(共)、L-F_(共)细胞高于LEC(P均<0.05),L-F_(共)细胞高于L-P_(共)细胞(P均<0.05)。与L-F_(无关序列共)、L-P_(空载体共)细胞相比,L-F_(A7下调共)细胞上述分子表达均低(P均<0.05),L-P_(A7上调共)细胞上述分子表达均高(P均<0.05)。ANXA7调控前后,各细胞中VEGF-C、VEGFR-3、PDPN相对表达量与同类分子(VEGF-D、NRP-2及LYVE-1/SOX18)比较变化更显著(P均<0.05)。VEGF-C、VEGF-D主要在细胞质内表达;VEGFR-3/NRP-2主要在细胞膜表达,少量在细胞质表达;PDPN、LYVE-1主要在细胞质表达;SOX18主要在细胞核表达,少量于细胞质表达。ANXA7调控前,细胞上清液中VEGF-C、VEGF-D表达比较,L-F_(共)、L-P_(共)细胞高于LEC,L-F_(共)细胞高于L-P_(共)细胞(P均<0.05),且VEGF-C表达均高于VEGF-D表达(P均<0.05)。ANXA7调控前后,各细胞上清液中VEGF-C相对表达量与同类分子(VEGF-D)比较变化更显著(P均<0.05)。在节点数和分支总长度上,L-F_(共)、L-P_(共)细胞均多于LEC,L-F_(共)细胞多于L-P_(共) 展开更多
关键词 肝癌细胞 淋巴管内皮细胞 体外共培养 淋巴道转移潜能 膜联蛋白A7 淋巴管内皮相关分子 淋巴管成管
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苏拉明对肿瘤上清液诱发的淋巴管内皮细胞管腔形成能力的影响 被引量：1
2
作者 徐永良 孙平 +2 位作者 张大伟 冯克俭 张伟 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期2604-2606,共3页
目的检测苏拉明对肺癌Calu-1细胞上清液诱发的淋巴管内皮细胞管腔形成能力的影响。方法应用免疫荧光染色对淋巴管内皮细胞进行鉴定;应用Matrigel立体培养法检测淋巴管内皮细胞管腔形成能力。结果苏拉明对淋巴管内皮细胞的管腔形成能力... 目的检测苏拉明对肺癌Calu-1细胞上清液诱发的淋巴管内皮细胞管腔形成能力的影响。方法应用免疫荧光染色对淋巴管内皮细胞进行鉴定;应用Matrigel立体培养法检测淋巴管内皮细胞管腔形成能力。结果苏拉明对淋巴管内皮细胞的管腔形成能力无显著影响;肿瘤上清液能够增强淋巴管内皮细胞的管腔形成能力,呈剂量依赖性;而苏拉明能够抑制肿瘤上清液诱发的淋巴管内皮细胞的管腔形成,并呈剂量依赖性。结论肿瘤上清液能够促进淋巴管内皮细胞的管腔形成,而苏拉明能够抑制这种促进作用。 展开更多
关键词 苏拉明 淋巴管内皮细胞 肿瘤上清液 管腔形成能力
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自发性高血压大鼠淋巴微循环功能受损 被引量：1
3
作者 王冰 盛有明 +4 位作者 李媛 张晓艳 刘明明 李爱玲 张坚 《微循环学杂志》 2021年第1期1-6,19,共7页
目的:观察自发性高血压大鼠(SHRs)淋巴微循环功能变化。方法:8周龄雄性SHR大鼠(SHR组)和WKY大鼠(WKY组),每组各10只。应用VasTrack测量两组大鼠微淋巴管自律运动;取胸导管分离原代淋巴管内皮细胞(LECs)。应用免疫荧光和Western Blot检测... 目的:观察自发性高血压大鼠(SHRs)淋巴微循环功能变化。方法:8周龄雄性SHR大鼠(SHR组)和WKY大鼠(WKY组),每组各10只。应用VasTrack测量两组大鼠微淋巴管自律运动;取胸导管分离原代淋巴管内皮细胞(LECs)。应用免疫荧光和Western Blot检测LECs血管内皮生长因子受体3(VEGFR3)和淋巴管内皮透明质酸受体-1(LYVE-1)蛋白的表达;应用MTT法、基质胶成管和划痕实验检测两组LECs增殖、成管和迁移能力。结果:SHR组大鼠微淋巴管自律运动功能受损,相对振幅显著降低(P<0.01)。两组LECs LYVE-1、VEGFR3均呈阳性表达,且SHR组LECs VEGFR3蛋白表达水平显著性高于WKY组(P<0.01);SHR组LECs单视野内划痕细胞数显著低于WKY组(P<0.05);SHR组LECs管样结构数量显著增多(P<0.05)。结论:SHR组淋巴微循环功能受损,可能与LECs功能障碍有关。 展开更多
关键词 自发性高血压大鼠 淋巴管内皮细胞 增殖 成管 迁移
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金龙蛇颗粒含药血清对人淋巴管内皮细胞体外成管、迁移及凋亡的影响 被引量：3
4
作者 冯守含 顾雨芳 +5 位作者 徐晶钰 张映城 赵颖 陆烨 岳小强 李勇进 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1235-1240,共6页
目的观察金龙蛇颗粒含药血清(Jinlongshe Granule drug-containing serum,JG-DS)对人淋巴管内皮细胞(human lymphatic endothelial cells,HLECs)体外成管、迁移及凋亡的影响。方法制备JG-DS;将第3代HLECs分为2组:对照组(采用生理盐水血... 目的观察金龙蛇颗粒含药血清(Jinlongshe Granule drug-containing serum,JG-DS)对人淋巴管内皮细胞(human lymphatic endothelial cells,HLECs)体外成管、迁移及凋亡的影响。方法制备JG-DS;将第3代HLECs分为2组:对照组(采用生理盐水血清进行培养)和实验组(采用JG-DS培养)。两组细胞培养12 h后,采用Matrigel基质胶成管实验检测HLECs成管能力;Transwell法检测HLECs迁移能力;采用流式细胞术、Annexin-Ⅴ-FITC/PI双染法检测HLECs凋亡率。结果 10%JG-DS作用12 h后,HLECs小管总长度为(3 084.49±326.27)μm,明显低于对照组的(7 058.93±4 567.39)μm,差异有统计学意义(P<0.01);HLECs迁移指数为(99±26)个,明显低于对照组的(160±32)个,差异有统计学意义(P<0.05)。两组HLECs凋亡率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论金龙蛇颗粒对HLECs体外成管及迁移有抑制作用,可能是其抑制肿瘤微淋巴管生成的机制之一。 展开更多
关键词 金龙蛇颗粒含药血清 人淋巴管内皮细胞 体外成管 迁移 凋亡
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