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重组多肽CH50抑制肿瘤细胞侵袭生长和血管形成能力 被引量：7
1
作者 于智睿 张桂梅 +5 位作者 李东 刘毅 耿辉 肖晗 吴丰华 冯作化 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期815-819,共5页
目的观察纤连蛋白重组多肽CH50对小鼠肝癌细胞侵袭和肿瘤血管形成能力的影响,探讨CH50多肽治疗肿瘤可能的分子机制。方法接种H22肝癌细胞建立小鼠肿瘤模型,采用裸DNA-尾静脉注射方法在小鼠体内表达CH50多肽,进行基因治疗。HE染色观察治... 目的观察纤连蛋白重组多肽CH50对小鼠肝癌细胞侵袭和肿瘤血管形成能力的影响,探讨CH50多肽治疗肿瘤可能的分子机制。方法接种H22肝癌细胞建立小鼠肿瘤模型,采用裸DNA-尾静脉注射方法在小鼠体内表达CH50多肽,进行基因治疗。HE染色观察治疗后肿瘤细胞侵袭能力和血管形成的改变；逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和明胶电泳检测肿瘤组织边缘基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA和蛋白表达及活性；体外培养H22细胞,检测CH50多肽对相关基因表达和细胞黏附能力的影响。结果小鼠体内非定位转染表达CH50多肽,对肿瘤生长具有明显的抑制作用,接种后第16天,治疗组瘤重为(0．78±0．18)g,低于质粒对照组和空白对照组(P＜0．05)；从组织水平观察,CH50多肽治疗导致肿瘤细胞大量坏死,可抑制肿瘤细胞侵袭生长和肿瘤血管生成,抑制肿瘤血管建立侧支循环。pCH510治疗组的肿瘤边缘组织中,活性型MMP-9的含量为3．2±0．7,显著低于空白对照组和质粒对照组,且活性型MMP-9占总MMP-9的比例也显著降低,是空白对照组和质粒对照组的1/4左右,但对MMP-9 mRNA表达没有明显影响。CH50多肽可下调H22细胞的αv、β3、cdc2基因的表达水平,降低H22细胞整合素αvβ3的活性。结论CH50多肽可以通过影响MMP-9和整合素αvβ3的功能起到抑制肿瘤生长、侵袭和肿瘤血管形成的作用。 展开更多
关键词 CH50多肽 基质金属蛋白酶-9 整合素αvΒ3
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黄芩素对人乳腺癌细胞系MDA-MB-231侵袭、迁移、上皮间充质转化的调控作用及其机制
2
作者 陈林 梁秋果 +1 位作者 吉杨丹 王恒 《山东医药》 CAS 2024年第6期10-13,共4页
目的观察黄岑素对人乳腺癌细胞系MDA-MB-231的侵袭、迁移及上皮间充质转化(EMT)的调控作用,探讨其可能作用机制。方法取对数生长期MDA-MB-231细胞分为一组、二组、三组及对照组,一组、二组、三组分别加入2.5、5、10μmol/L的黄岑素,对... 目的观察黄岑素对人乳腺癌细胞系MDA-MB-231的侵袭、迁移及上皮间充质转化(EMT)的调控作用,探讨其可能作用机制。方法取对数生长期MDA-MB-231细胞分为一组、二组、三组及对照组,一组、二组、三组分别加入2.5、5、10μmol/L的黄岑素,对照组不做任何处理。培养48 h时采用划痕修复实验观察四组细胞迁移能力、采用Transwell侵袭实验观察四组细胞侵袭能力,采用Western Blotting法检测细胞EMT标志物波形蛋白(vimentin)及E-钙黏蛋白(E-cadherin)、整合素αv、β3、磷酸化黏着斑激酶(p-FAK)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(整合素p-PI3K)。结果与对照组相比,黄岑素组细胞迁移率降低、侵袭细胞数少,细胞E-cadherin相对表达量高,vimentin、整合素αv、整合素β3、p-FAK、p-PI3K蛋白相对表达量低,且呈剂量依赖性(P均<0.05)。结论黄芩素抑制MDA-MB-231细胞的侵袭、迁移及EMT。黄岑素可能通过抑制整合素αv、整合素β3表达,进一步抑制p-FAK、p-PI3K蛋白表达,抑制MDA-MB-231的侵袭、迁移及EMT。 展开更多
关键词 黄芩素 乳腺癌 细胞侵袭 细胞迁移 上皮间质转化 波形蛋白 E-钙黏蛋白 整合素αv、整合素β3 黏着斑激酶 磷脂酰肌醇3激酶
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楝酰胺对人肝癌细胞增殖、凋亡的影响
3
作者 李瑞华 岳爱民 +2 位作者 高国伟 沈裕厚 刘芳艳 《中国社区医师》 2024年第4期10-12,共3页
目的:分析楝酰胺对人肝癌细胞增殖、凋亡的影响。方法:体外培养人肝癌细胞,分别采用0、50、100、200 nmol/L楝酰胺处理,对应为对照组及低、中、高楝酰胺组。测定各组细胞增殖水平、凋亡情况、差异蛋白及其表达水平。结果:干预24、48、72... 目的:分析楝酰胺对人肝癌细胞增殖、凋亡的影响。方法:体外培养人肝癌细胞,分别采用0、50、100、200 nmol/L楝酰胺处理,对应为对照组及低、中、高楝酰胺组。测定各组细胞增殖水平、凋亡情况、差异蛋白及其表达水平。结果:干预24、48、72 h,各组细胞增殖率比较,对照组>低楝酰胺组>中楝酰胺组>高楝酰胺组,差异有统计学意义(P<0.05)。干预24、48、72 h,各组细胞凋亡率比较,对照组<低楝酰胺组<中楝酰胺组<高楝酰胺组,差异有统计学意义(P<0.05)。经质谱分析,整合素αⅤ(ITGAⅤ)、层粘连蛋白β1(LAMβ1)蛋白为差异蛋白。低、中、高楝酰胺组LAMβ1、ITGAⅤ、磷脂酸肌醇-3-激酶/(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)蛋白表达量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:楝酰胺对人肝癌细胞增殖、凋亡具有一定的调控作用,可能通过抑制上游蛋白LAMβ1、ITGAⅤ蛋白靶向激活PI3K/Akt通路,下调PI3K/Akt信号发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 楝酰胺 层粘连蛋白β 整合素αv 磷脂酸肌醇-3-激酶/蛋白激酶B通路 肝癌
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金属有机框架负载小干扰RNA克服乳腺癌的基质屏障
4
作者 曾铖 张剑 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期409-418,共10页
目的开发一种新型递送策略,利用金属有机框架(MOF)负载针对整合素αv(ITGAV)的小干扰RNA siITGAV,以克服基质屏障,进而增强乳腺癌内药物递送及免疫可及性。方法构建MOF@siITGAV颗粒,对其进行材料表征。通过细胞摄取实验观察乳腺癌4T1细... 目的开发一种新型递送策略,利用金属有机框架(MOF)负载针对整合素αv(ITGAV)的小干扰RNA siITGAV,以克服基质屏障,进而增强乳腺癌内药物递送及免疫可及性。方法构建MOF@siITGAV颗粒,对其进行材料表征。通过细胞摄取实验观察乳腺癌4T1细胞对MOF@siITGAV的摄取情况,细胞计数试剂盒8法检测MOF@siITGAV的细胞毒性。设空白对照组、游离siITGAV组和MOF@siITGAV组,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测各组4T1细胞中ITGAV mRNA的表达,采用Western blot检测ITGAV蛋白的表达,采用酶联免疫吸附试验检测TGF-β1的含量。采用3D球体穿透实验观察MOF@siITGAV穿透4T1细胞球的能力。建立三阴性乳腺癌小鼠模型,观察MOF@siITGAV对移植瘤生长及小鼠心、肝、脾、肺、肾等主要脏器的影响,采用免疫组化染色检测肿瘤组织中Ⅰ型胶原蛋白和CD8的表达。结果成功构建MOF@siITGAV颗粒,粒径为(198.0±3.3)nm,电位为-(20.2±0.4)mV。4T1细胞能有效摄取MOF@siITGAV,并触发siRNA的有效释放,MOF@siITGAV组细胞中ITGAV mRNA和蛋白表达水平、TGF-β1的表达水平均显著下调[相对于空白对照组,游离siITGAV组和MOF@siITGAV组4T1细胞中ITGAV mRNA相对表达水平分别为(109.9±19.0)%和(46.5±11.3)%;空白对照组、MOF@siNC组和MOF@siITGAV组TGF-β1浓度分别为(474.5±34.4)pg/ml、(437.2±16.5)pg/ml和(388.4±14.4)pg/ml]。MOF@siITGAV在4T1细胞球中的穿透能力更强,对4T1细胞无明显杀伤效应,0、10、20、40、80和160μg/ml MOF@siITGAV分别处理4T1细胞24 h,细胞活性分别为(99.7±3.5)%、(98.2±5.2)%、(97.3±6.6)%、(92.1±8.1)%和(92.4±4.1)%。MOF@siITGAV能有效抑制小鼠乳腺癌移植瘤的生长,给药15 d后,空白对照组、MOF@siNC组和MOF@siITGAV组小鼠的肿瘤体积分别为(691.1±193.0)mm^(3)、(652.7±306.5)mm^(3)和(135.3±41.9)mm^(3),MOF@siITGAV组小鼠的肿瘤体积小于空白对照组(P=0.025)。与空白对照组和MOF@siNC组相比,MOF@siITGAV组小鼠肿瘤组织� 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 金属有机框架 整合素αv 基因转染 小干扰RNA 细胞外基质
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整合素αv在牦牛繁殖周期输卵管不同部位中的表达与定位 被引量：5
5
作者 杨珊珊 何翃闳 +8 位作者 潘阳阳 段宏伟 刘敏清 高泽川 赵凌 韩小红 王亚营 崔燕 余四九 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期2710-2719,共10页
旨在探究整合素αv在牦牛繁殖周期输卵管不同部位的表达差异,为进一步了解整合素αv在牦牛生殖过程中发挥的作用提供理论依据。本研究采集卵泡期、黄体期和妊娠期健康母牦牛(3~6岁)的输卵管伞部、壶腹部和峡部样品,将卵泡期、黄体期和... 旨在探究整合素αv在牦牛繁殖周期输卵管不同部位的表达差异,为进一步了解整合素αv在牦牛生殖过程中发挥的作用提供理论依据。本研究采集卵泡期、黄体期和妊娠期健康母牦牛(3~6岁)的输卵管伞部、壶腹部和峡部样品,将卵泡期、黄体期和妊娠期输卵管分别按照伞部、壶腹部和峡部分为9组,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western-blotting,WB)检测整合素αv基因和蛋白的表达情况,运用免疫组织化学法检测整合素αv的定位。结果表明:1)qRT-PCR结果显示,在卵泡期,整合素αv基因在输卵管伞部的表达量最高,极显著高于壶腹部和峡部(P<0.01);在黄体期,整合素αv基因在输卵管峡部的表达量最高,极显著高于伞部和壶腹部(P<0.01);在妊娠期,整合素αv基因在输卵管伞部的表达量最高,极显著高于壶腹部和峡部(P<0.01)。2)Western-blotting结果显示,在卵泡期,整合素αv蛋白在输卵管伞部的表达量最高,极显著高于壶腹部和峡部(P<0.01);在黄体期,整合素αv蛋白在输卵管峡部的表达量最高,极显著高于伞部和壶腹部(P<0.01);在妊娠期,整合素αv蛋白在输卵管峡部和伞部的表达差异不显著,但二者极显著高于壶腹部(P<0.01)。3)免疫组织化学结果显示,整合素αv主要分布于输卵管伞部、壶腹部和峡部的纤毛细胞、分泌细胞、基细胞、肌层和浆液腺中。结果显示,整合素αv在牦牛繁殖周期输卵管不同部位中的表达存在显著差异,说明其可能参与了牦牛受精及早期胚胎发育等一系列生殖过程,为牦牛的繁殖性能研究提供了基础资料。 展开更多
关键词 整合素αv 牦牛 输卵管 繁殖周期 表达
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健骨颗粒对体外破骨细胞整合素α_V及β_3 mRNA表达的影响 被引量：5
6
作者 林燕萍 何嘉承 +5 位作者 佘家姮 巫阳生 吴银生 林煜 黄云梅 黄美雅 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期1272-1276,共5页
目的:探讨补肾健脾中药健骨颗粒对体外破骨细胞整合素(Itg)αV、β3mRNA表达的影响。方法:采用破骨前体细胞系诱导培养法,通过M-CSF和RANKL诱导剂诱导RAW264.7细胞,分化为成熟破骨细胞。分别用健骨颗粒含药血清和生理盐水血清干预,运用... 目的:探讨补肾健脾中药健骨颗粒对体外破骨细胞整合素(Itg)αV、β3mRNA表达的影响。方法:采用破骨前体细胞系诱导培养法,通过M-CSF和RANKL诱导剂诱导RAW264.7细胞,分化为成熟破骨细胞。分别用健骨颗粒含药血清和生理盐水血清干预,运用实时荧光定量PCR法检测ItgαV、β3mRNA表达,并取骨片行甲苯胺蓝染色,骨陷窝和骨吸收面积计算分析。结果:经M-CSF和RANKL诱导后,RAW264.7细胞的形态特征、TRAP染色均符合成熟破骨细胞特异性表现;含药血清组破骨细胞ItgαV、β3mRNA表达水平明显低于生理盐水血清组(P<0.05),同时骨磨片的骨吸收陷窝数和面积亦呈同样变化趋势。结论:RAW264.7细胞经诱导分化后可以获取成熟破骨细胞;健骨颗粒能有效抑制破骨细胞Itgαv、β3 mRNA表达,影响破骨细胞功能活性。 展开更多
关键词 健骨颗粒 整合素αv、β3 破骨细胞
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整合素αv亚家族与喉鳞状细胞癌侵袭转移的相关性研究 被引量：4
7
作者 李峰 王婧婷 +2 位作者 鲁建光 刘鸣 王宇 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2019年第5期489-493,共5页
目的探讨整合素αv亚家族在喉鳞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)中的表达,并探讨其表达率与喉鳞癌的肿瘤生物学行为及血管生成的关系。方法①整合素αv亚家族包括αv、β1、β3、β5、β6和β8亚基,用免疫组织化学法在64例L... 目的探讨整合素αv亚家族在喉鳞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)中的表达,并探讨其表达率与喉鳞癌的肿瘤生物学行为及血管生成的关系。方法①整合素αv亚家族包括αv、β1、β3、β5、β6和β8亚基,用免疫组织化学法在64例LSCC患者的癌变组织里检测它们的表达,然后分析其与喉鳞癌的癌变与血管生成之间的关系;②同一组患者行CD105免疫组化染色。采用CD105染色计算LSCC瘤内微血管密度(intratumoral microvessel density,IMVD),探讨IMVD与整合素αv亚家族表达的相关性。结果①在LSCC中可以检测到整合素αv亚家族的所有成员。整合素αv和β5亚基的表达率在喉鳞癌组织中明显高于正常组织,在淋巴转移组中的表达率明显高于无转移组;②在整合素αv和β5亚基高表达组里,IMVD显著高表达,但在β1、β3、β6和β8亚基组里IMVD的表达没有特殊相关性。结论整合素αv亚家族里整合素αvβ5在LSCC的入侵和转移中可能发挥着重要的作用。 展开更多
关键词 喉鳞状细胞癌 整合素αv 整合素β CD105
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利用CRISPR/Cas9系统构建ITGαV及ITGβ3敲除细胞系
8
作者 胡艺欣 吴兴一 +2 位作者 李泽辉 靳晓慧 胡慧 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期491-498,共8页
本试验旨在采用CRISPR/Cas9技术获得整合素αV(IntegrinαV,ITGαV)及整合素β3(Integrinβ3,ITGβ3)基因敲除的猪睾丸(Swine testicle,ST)细胞系,进而在细胞水平上研究ITGαV及ITGβ3在猪δ冠状病毒(Porcine deltacorovirus,PDCoV)入... 本试验旨在采用CRISPR/Cas9技术获得整合素αV(IntegrinαV,ITGαV)及整合素β3(Integrinβ3,ITGβ3)基因敲除的猪睾丸(Swine testicle,ST)细胞系,进而在细胞水平上研究ITGαV及ITGβ3在猪δ冠状病毒(Porcine deltacorovirus,PDCoV)入侵过程中的作用及相互作用机制。根据GenBank上猪的ITGαV及ITGβ3基因序列分别设计三对引导RNA(sgRNA),并整合到LentiCRISPR‐V2载体上,与辅助质粒pSPA×2及pMD2.G共转染293 T细胞进行慢病毒包装,包装完成后感染ST细胞并用嘌呤霉素进行压力筛选。用T7酶进行酶切检测,选出编辑效率较高的细胞群体,进一步用有限稀释法筛选出单克隆敲除细胞系。对分离出的ST‐ITGαVKO(敲除ITGαV基因的ST细胞)及ST‐ITGβ3KO(敲除ITGβ3基因的ST细胞)的单克隆细胞系进行测序和Western Blotting鉴定,结果显示ITGαV与ITGβ3均被成功敲除。采用敲除细胞系进行PDCoV感染试验,结果表明敲除ITGαV、ITGβ3基因均可抑制PDCoV在ST细胞内的增殖,成功构建的ST‐ITGαVKO及ST‐ITGβ3KO细胞系为后续阐明ITGαV、ITGβ3在PDCoV入侵过程中的作用提供了细胞模型。 展开更多
关键词 整合素αv 整合素Β3 CRISPR/Cas9 猪睾丸细胞 猪δ冠状病毒
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αv整联蛋白拮抗剂RGD肽对乳腺癌细胞增殖侵袭能力影响的研究 被引量：3
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作者 杨婉华 汪蕊 +4 位作者 陈睿 马湘一 王世宣 卢运萍 马丁 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期728-731,共4页
目的：研究αv整联蛋白拮抗剂RGD肽对乳腺癌细胞株MDA-MB-231、MCF-7增殖侵袭能力的影响,探讨其在肿瘤靶向性治疗中的作用机制。方法：化学合成RGD肽,免疫细胞荧光技术检测RGD肽与MDA-MB-231、MCF-7细胞结合能力；MTT法检测不同浓度RGD... 目的：研究αv整联蛋白拮抗剂RGD肽对乳腺癌细胞株MDA-MB-231、MCF-7增殖侵袭能力的影响,探讨其在肿瘤靶向性治疗中的作用机制。方法：化学合成RGD肽,免疫细胞荧光技术检测RGD肽与MDA-MB-231、MCF-7细胞结合能力；MTT法检测不同浓度RGD肽对细胞增殖能力的影响；流式细胞学检测RGD肽处理对细胞周期和凋亡的影响；Boyden小室体外侵袭实验测定RGD肽处理后细胞迁移与侵袭能力的改变。结果：RGD肽与MDA-MB-231、MCF-7细胞均有特异性结合作用,15μmoI/L及更高浓度的RGD肽作用24h后细胞增殖能力显著降低(P＜0.01),细胞凋亡明显增加,细胞阻滞于G_0/G_1期,且RGD肽对细胞体外侵袭能力有不同程度的抑制作用。结论：RGD肽作为αv整联蛋白的一种拮抗剂,不仅具有药物、基因治疗载体的导向运输功能,更具有肿瘤的直接杀伤效应,是一种理想的肿瘤靶向性治疗药物。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 整合素αv 肽类 RGD MDA-MB-231细胞 MCF-7细胞
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骨桥蛋白和整合素αv表达与鼻咽癌侵袭转移的相关性 被引量：4
10
作者 刘彬 莫立根 +2 位作者 李征威 曾凡艳 李小妹 《中国癌症防治杂志》 CAS 2009年第4期304-306,309,共4页
目的探讨骨桥蛋白(OPN)及其受体整合素αv(integrin αv,ITGAV)在鼻咽癌组织中的表达及其与鼻咽癌侵袭、转移的关系。方法应用免疫组织化学方法检测88例鼻咽癌组织、18例鼻咽黏膜慢性炎症组织中OPN及其受体整合素αv的表达,从临床分期... 目的探讨骨桥蛋白(OPN)及其受体整合素αv(integrin αv,ITGAV)在鼻咽癌组织中的表达及其与鼻咽癌侵袭、转移的关系。方法应用免疫组织化学方法检测88例鼻咽癌组织、18例鼻咽黏膜慢性炎症组织中OPN及其受体整合素αv的表达,从临床分期、淋巴结转移和远处转移等方面分别进行对比分析。结果88例鼻咽癌组织中OPN与ITGAV蛋白的阳性表达率分别为53.4%(47/88)、59.1%(52/88),明显高于鼻咽黏膜慢性炎症组织中的表达(P<0.01)。OPN与ITGAV的表达与肿瘤临床分期、淋巴结转移和远处转移有关(P<0.05),与患者性别无关(P>0.05),且二者表达呈正相关(r=0.335,P<0.01)。结论OPN和ITGAV基因蛋白在鼻咽癌的侵袭转移过程中可能起着协同、调控作用,有可能成为反映鼻咽癌生物学特性及评价预后的重要分子生物学指标。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 骨桥蛋白 整合素αv 免疫组化 侵袭转移
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中和血小板源性生长因子对A549人肺癌细胞生长及迁移的影响 被引量：3
11
作者 王志勇 刘钊鸿 +7 位作者 王炜 黄洁鑫 彭瑜 欧阳建军 庄素娟 廖靖梅 钟冬梅 魏培 《广东医学院学报》 2016年第5期475-479,483,共6页
目的探讨中和血小板源性生长因子(platelet-derived growth factors,PDGFs)对A549人肺癌细胞生长和迁移的影响。方法 PDGF中和性抗体作用A549细胞后,MTT法及乳酸脱氢酶释放试验检测细胞增殖;丹单酰磺尸胺及吖啶橙染色检测细胞自噬;DAPI... 目的探讨中和血小板源性生长因子(platelet-derived growth factors,PDGFs)对A549人肺癌细胞生长和迁移的影响。方法 PDGF中和性抗体作用A549细胞后,MTT法及乳酸脱氢酶释放试验检测细胞增殖;丹单酰磺尸胺及吖啶橙染色检测细胞自噬;DAPI染色及caspase 3活性试验检测细胞凋亡;划痕试验及Transwell试验分析细胞迁移;免疫印迹及酶联免疫吸附试验检测整合素αv和基质金属蛋白酶9的表达。结果 PDGFs抗体明显抑制A549细胞体外增殖,诱导细胞发生自噬和凋亡,但同时增强肿瘤细胞迁移能力及整合素αv和MMP9的表达水平,整合素抑制剂西仑吉肽可部分逆转该现象。结论中和PDGFs可抑制A549肿瘤细胞体外生长但促进其迁移。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 血小板源性生长因子 整合素αv 基质金属蛋白酶9 细胞迁移
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猪整合素αv多克隆抗体制备与应用 被引量：3
12
作者 王恩雨 高晶 +2 位作者 郭东华 李春秋 孙东波 《黑龙江八一农垦大学学报》 2017年第4期41-44,共4页
利用大肠杆菌原核表达系统对猪整合素αv基因片段进行表达,纯化目的蛋白免疫小鼠,制备猪整合素αv多克隆抗体,并对其进行鉴定及初步应用。对基因序列进行预测分析后,截取胞外区抗原性较好的基因片段,针对大肠杆菌稀有密码子优化后合成... 利用大肠杆菌原核表达系统对猪整合素αv基因片段进行表达,纯化目的蛋白免疫小鼠,制备猪整合素αv多克隆抗体,并对其进行鉴定及初步应用。对基因序列进行预测分析后,截取胞外区抗原性较好的基因片段,针对大肠杆菌稀有密码子优化后合成该基因序列,克隆至pGEX-6p-1原核表达载体上,诱导表达并纯化重组蛋白,对重组蛋白进行Western blot鉴定后免疫小鼠,制备多克隆抗体。利用间接ELISIA方法检测抗体效价,利用Western blot技术检测猪整合素αv多克隆抗体与天然整合素αv蛋白的反应原性。获得了分子质量为83 ku的重组蛋白,以纯化的重组蛋白作为免疫原制备的多克隆抗体效价大于1∶6 400,且能识别天然整合素αv蛋白。研究成功制备了猪整合素αv多克隆抗体,为后续相关研究提供基础。 展开更多
关键词 猪 整合素αv 多克隆抗体 重组蛋白 病毒受体
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整合素αv和β3反义基因治疗裸鼠种植性肝癌的实验研究 被引量：1
13
作者 李杰 陈孝平 +2 位作者 徐宗珍 时昌文 韩旭 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2006年第23期1777-1780,共4页
目的探讨整合素αv、β3反义基因对肝细胞癌的治疗作用及对肿瘤血管生成及细胞凋亡的影响。方法裸鼠皮下种植肝癌细胞-HepG2,建立肝癌模型,将αvβ3反义基因表达载体AlphaV/pcD-NA3、Beta3/pcDNA3分别以αv、β3及αv、β3联合形式瘤内... 目的探讨整合素αv、β3反义基因对肝细胞癌的治疗作用及对肿瘤血管生成及细胞凋亡的影响。方法裸鼠皮下种植肝癌细胞-HepG2,建立肝癌模型,将αvβ3反义基因表达载体AlphaV/pcD-NA3、Beta3/pcDNA3分别以αv、β3及αv、β3联合形式瘤内转染,同时设载体空壳组对照,观察肿瘤生长抑制情况并检测整合素αv、β3蛋白及CD31、VEGF的表达及细胞凋亡改变。结果αvβ3联合组、αv、β3及空壳对照组肿瘤体积大小依次为(0.92±0.19)、(1.27±0.14)、(1.34±0.21)和(1.75±0.10)cm3,试验组与对照组比较及αvβ3组与αv组和β3组比较差异有统计学意义,P<0.05;各实验组与对照组瘤质量比较差异有统计学意义,P<0.05;αvβ3联合组、αv、β3组的抑瘤率分别为21.41%、6.87%和5.71%。实验组αv、β3蛋白表达与对照组比较被明显下调,P<0.05;αvβ3组与αv组和β3组之间及实验组与对照组间微血管密度差异有统计学意义,P<0.05;各实验组细胞凋亡指数显著高于对照组,P<0.01;αvβ3组与αv组和β3组比较差异也有统计学意义,P<0.05。结论αv、β3反义基因可以通过抑制肿瘤血管生成及促进肿瘤细胞凋亡抑制肿瘤生长,联合应用αv和β3反义基因抑瘤效果更好。 展开更多
关键词 整合素αv 整合素Β3 癌 肝细胞 细胞凋亡 基因疗法
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miRNA-223在肝癌中的研究进展 被引量：2
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作者 张蕾 龚泽众 李岩 《大连医科大学学报》 CAS 2019年第3期272-276,共5页
内源性非编码小分子miRNA-223可作用于靶基因调控肝癌的发生发展,对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡以及耐药等生物学功能产生影响。血清与肿瘤中miRNA-223的表达水平对肝癌的诊断与治疗具有一定的参考价值,是肝癌诊断、治疗以及判断预... 内源性非编码小分子miRNA-223可作用于靶基因调控肝癌的发生发展,对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡以及耐药等生物学功能产生影响。血清与肿瘤中miRNA-223的表达水平对肝癌的诊断与治疗具有一定的参考价值,是肝癌诊断、治疗以及判断预后潜在的生物标志物。本文对近年来miRNA-223在肝癌中的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 肝癌 miRNA-223 IGF-IR STMN1 NLRP3 整合素αv亚基
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整合素αv通过转化生长因子-β1促进子宫内膜异位基质细胞纤维化的研究 被引量：1
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作者 魏华 吕卫琴 +1 位作者 尚云 辛丽 《中国性科学》 2022年第8期90-94,共5页
目的探讨整合素αv对子宫内膜异位基质细胞(ECSC)纤维化的影响,以及其的作用机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测正常子宫内膜细胞(NESC)和ECSC中整合素αv、转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA的相对表达量;采用Western... 目的探讨整合素αv对子宫内膜异位基质细胞(ECSC)纤维化的影响,以及其的作用机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测正常子宫内膜细胞(NESC)和ECSC中整合素αv、转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA的相对表达量;采用Westernblot法检测NESC和ECSC中纤连蛋白(FN)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(Col-1)的相对表达量;对ECSC中整合素αv分别进行过表达和低表达、转染整合素αv模拟物和整合素αv小干涉RNA,对ECSC中TGF-β1分别进行低表达、转染TGF-β1小干涉RNA,Westernblot法检测ECSC中FN、α-SMA、Col-1的相对表达量,qRT-PCR法与Westernblot法共同验证整合素αv与TGF-β1的相对表达量关系。结果ECSC中整合素αv与TGF-β1的相对表达量均明显高于NESC(P<0.05);ECSC中FN、α-SMA、Col-1的相对表达量均明显高于NESC(P<0.05);过表达整合素αv可使ECSC的FN、α-SMA、Col-1的相对表达量均显著增加(P<0.05),低表达整合素αv可使ECSC中FN、α-SMA、Col-1的相对表达量均显著降低(P<0.05),整合素αv能够影响TGF-β1的表达(P<0.05);同时过表达整合素αv和低表达TGF-β1可使ECSC中FN、α-SMA、Col-1的相对表达量均显著降低(P<0.05)。结论整合素αv在ECSC中呈高表达水平,过表达后可促进ECSC的纤维化,其作用机制与影响TGF-β1的表达有关。 展开更多
关键词 整合素αv 转化生长因子-Β1 子宫内膜异位 纤维化
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苦参素对活化肝星状细胞整合素αv的表达和矢巢凋亡的影响 被引量：2
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作者 张汝建 王天才 +2 位作者 卢兴梅 杨明峰 张晓伟 《中国医药》 2008年第11期701-702,共2页
目的探讨苦参素对活化肝星状细胞（HSC）整合素αv的表达和矢巢凋亡的影响。方法把培养激活的大鼠肝星状细胞株（HSC—T6）分为实验组和对照组，实验组以不同浓度的苦参素干预，蛋白质印迹（Western Blotting）法检测整合素αv的表达，... 目的探讨苦参素对活化肝星状细胞（HSC）整合素αv的表达和矢巢凋亡的影响。方法把培养激活的大鼠肝星状细胞株（HSC—T6）分为实验组和对照组，实验组以不同浓度的苦参素干预，蛋白质印迹（Western Blotting）法检测整合素αv的表达，末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记法（TUNUL）检测凋亡指数。结果药物干预后整合素αv的表达随干预浓度的增加而逐渐降低（P〈0．05）．凋亡指数则逐渐增高（P〈0．05），且呈浓度依赖性（r分别为-0．76、0．81）；整合素αv与凋亡之间呈负相关，r为-0．79。结论苦参素能通过抑制活化HSC的整合素αv的表达促进其凋亡，在肝纤维化治疗中具有重要意义。 展开更多
关键词 矢巢凋亡 苦参素 肝星状细胞 整合素αv
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整合素αV在应力刺激促心脏成纤维细胞活化中的作用机制研究 被引量：1
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作者 程培培 丰明会 +3 位作者 李赞 陈誉文 吕嵘 徐明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1345-1353,共9页
目的:探究应力刺激对心脏成纤维细胞活化的影响及整合素αV(integrin αV)在其中可能的作用及其机制。方法:原代1周龄C57BL/6小鼠心脏成纤维细胞,分别以鼠尾I型胶原蛋白(collagen type Ⅰ,Col Ⅰ)制备胶和聚苯乙烯材质为软、硬基质培养... 目的:探究应力刺激对心脏成纤维细胞活化的影响及整合素αV(integrin αV)在其中可能的作用及其机制。方法:原代1周龄C57BL/6小鼠心脏成纤维细胞,分别以鼠尾I型胶原蛋白(collagen type Ⅰ,Col Ⅰ)制备胶和聚苯乙烯材质为软、硬基质培养条件,并结合siRNA下调硬基质培养的心脏成纤维细胞的integrin αV表达,将细胞分为软基质组(soft组)、硬基质组(stiff组)、siRNA阴性对照组(NC组)和integrin αV siRNA组(siRNA组)。显微镜下白场成像评价心脏成纤维细胞形态及其伪足数量和形态;CCK-8及免疫荧光法检测心脏成纤维细胞活力和增殖能力;划痕实验检测心脏成纤维细胞迁移能力;Western blot法检测Col Ⅰ、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅲ型胶原蛋白(collagen type Ⅲ,Col Ⅲ)、integrin αV、黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)、pFAK、蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/Akt)及p-Akt的蛋白水平。结果:与soft组相比,stiff组心脏成纤维细胞表面积显著增大,伪足由丝状向板状演变(P<0.01),增殖能力及合成和分泌Col Ⅰ和Col Ⅲ能力均显著增加(P<0.01),α-SMA蛋白表达增加(P<0.01),向肌成纤维细胞表型转化,同时integrin αV/FAK/Akt信号通路被激活。下调stiff组心脏成纤维细胞的integrin αV表达后,细胞板状伪足回缩,迁移能力降低(P<0.05),合成和分泌Col Ⅰ和Col Ⅲ能力降低(P<0.01),同时抑制integrin αV/FAK/Akt信号通路的激活(P<0.01)。结论:应力刺激通过integrin αV介导的FAK/Akt信号通路激活促使心脏成纤维细胞转分化为更活跃的肌成纤维细胞,发挥抗应力和细胞外基质蛋白重组的作用,从而参与心脏疾病的病理转归。 展开更多
关键词 心脏成纤维细胞 应力刺激 整合素αv 黏着斑激酶 蛋白激酶B
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反义寡核苷酸抑制整合素αv亚基表达对喉癌细胞侵袭和增殖的影响 被引量：1
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作者 李茗华 张会芳 +3 位作者 鲁建光 肖玉丽 刘颖 冯佳鹏 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2010年第1期10-13,共4页
目的应用反义寡核苷酸体外细胞转染技术抑制喉癌细胞整合素αv(integrin αv,ITGAV)表达,探讨ITGAV表达抑制对喉鳞癌Hep-2细胞侵袭和增殖能力的影响。方法设计合成特异性靶向整合素αv的反义寡核苷酸序列(antisense oligonucleotides se... 目的应用反义寡核苷酸体外细胞转染技术抑制喉癌细胞整合素αv(integrin αv,ITGAV)表达,探讨ITGAV表达抑制对喉鳞癌Hep-2细胞侵袭和增殖能力的影响。方法设计合成特异性靶向整合素αv的反义寡核苷酸序列(antisense oligonucleotides sequence,ASONs),用阳离子脂质体包被并转染喉鳞癌Hep-2细胞,免疫荧光技术检测转染前后整合素αv亚基的蛋白表达,MTT法检测转染后Hep-2细胞的增殖情况,Boyden小室法检测转染前后喉癌细胞的侵袭能力。结果靶向整合素αv的ASONs对喉鳞癌细胞株的侵袭和增殖能力具有明显的抑制作用,并具有剂量-时间依从性。结论靶向整合素αv的ASONs能够抑制喉鳞癌细胞株生长,并使其侵袭能力减弱,整合素αv可能成为喉鳞癌基因治疗的新靶点。 展开更多
关键词 反义寡核苷酸 整合素αv 喉鳞状细胞癌 细胞增殖
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整合素αⅤ亚基在结直肠癌中的表达及意义 被引量：1
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作者 刘胜男 孙大伟 +2 位作者 崔演 孙凤丹 玄延花 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期128-131,共4页
目的探讨整合素αⅤ亚基在结直肠癌中的表达及其临床病理学意义。方法应用免疫组化EnVision法检测整合素αⅤ亚基在19例正常结直肠黏膜、14例增生性息肉、26例结直肠腺瘤及209例结直肠腺癌中的表达。分析结直肠癌组织中整合素αⅤ亚基... 目的探讨整合素αⅤ亚基在结直肠癌中的表达及其临床病理学意义。方法应用免疫组化EnVision法检测整合素αⅤ亚基在19例正常结直肠黏膜、14例增生性息肉、26例结直肠腺瘤及209例结直肠腺癌中的表达。分析结直肠癌组织中整合素αⅤ亚基表达与患者性别、肿瘤分化、淋巴结转移、TNM分期、复发和生存的相关性。结果整合素αⅤ亚基在正常结直肠黏膜及增生性息肉中呈阴性,结直肠腺瘤及结直肠腺癌组织中的阳性率分别为11.5%和57.4%。结直肠癌组织中整合素αⅤ亚基表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移、TNM分期、患者的复发和生存情况密切相关。整合素αⅤ亚基阳性者5年生存率明显低于阴性者。结论整合素αⅤ亚基在结直肠癌组织中的表达对结直肠癌诊断及判定预后具有重要的临床病理学意义。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 整合素αv亚基 免疫组织化学
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ITGAV在结直肠癌中的表达及临床意义 被引量：1
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作者 曾兵 李锦宏 +2 位作者 蔡灿锋 辛海洋 曾军 《岭南现代临床外科》 2021年第3期309-312,共4页
目的探讨整合素αv(ITGAV)在结直肠癌中的表达和临床意义。方法采用免疫组织化学法检测91例结直肠癌组织及18例癌旁组织中ITGAV的表达,分析ITGAV的表达与临床病理因素的关系。利用GEO和TCGA数据库下载结直肠癌ITGAV的表达及临床随访数... 目的探讨整合素αv(ITGAV)在结直肠癌中的表达和临床意义。方法采用免疫组织化学法检测91例结直肠癌组织及18例癌旁组织中ITGAV的表达,分析ITGAV的表达与临床病理因素的关系。利用GEO和TCGA数据库下载结直肠癌ITGAV的表达及临床随访数据进行生存分析。结果ITGAV在结直肠癌组织中的表达显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。91例结直肠癌组织中ITGAV高表达组有61例,低表达组有30例。ITGAV的表达与脉管神经侵犯、浸润深度、淋巴结转移、远处转移及TNM分期相关(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤部位及分化程度无明显相关(P>0.05)。生存分析显示ITGAV高表达组患者总生存率显著低于低表达组(P<0.05)。结论ITGAV高表达与结直肠癌的侵袭转移及预后不良相关。 展开更多
关键词 整合素αv 结直肠癌 预后
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