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北京市西城区食源性与临床感染性单核细胞增生李斯特菌PFGE和MLST分型研究 被引量:8
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作者 霍哲 王晨 +2 位作者 徐俊 高波 曹玮 《中国预防医学杂志》 CAS CSCD 2017年第9期675-679,共5页
目的研究北京市西城区食源性和临床感染性单核细胞增生李斯特菌(listeria monocytogenes,Lm)的脉冲场凝胶电泳(plused-field gel electrophoresis,PFGE)和多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)分型特征,分析两种分型方法的... 目的研究北京市西城区食源性和临床感染性单核细胞增生李斯特菌(listeria monocytogenes,Lm)的脉冲场凝胶电泳(plused-field gel electrophoresis,PFGE)和多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)分型特征,分析两种分型方法的应用价值。方法采用PFGE和MLST两种方法对2012-2015年50株食源性和临床感染性单核细胞增生李斯特菌进行分型研究。结果 50株单核细胞增生李斯特菌PFGE分型得到23种型别,GX6A16.CN0004为优势带型。MLST分析获得12个型别,ST9为优势型别。其中5组数据是ST型别只对应一种PFGE型别,3种PFGE型别同时存在食源性和临床感染性单核细胞增生李斯特菌,并且其ST型别进化关系比较远。结论北京市西城区不同来源单核细胞增生李斯特菌污染长期存在,出现致病型别,并且致病性单核细胞增生李斯特菌的遗传关系呈多元化。两种分子分型方法的结合,从基因水平上解释了单核细胞增生李斯特菌的变化趋势及流行特征。 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特菌 PFGE分型 MLST分型 进化树 分子分型 食源性致病菌 人源性
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中药人源性毒性评判的科学基础、策略与技术关键点 被引量:6
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作者 马红红 魏桂林 +1 位作者 潘秋莎 杨凌 《世界中医药》 CAS 2020年第23期3568-3573,3579,共7页
中药毒性研究中因伦理原则不可能在人体进行还原论模式的临床研究,体内外结合、动物与人体临床研究的结合成为研究模式的必然选择。有毒中药药材面临着药材组成成分的定性与定量水平差异、各不同产地药材组成成分巨大变异、毒理机制的... 中药毒性研究中因伦理原则不可能在人体进行还原论模式的临床研究,体内外结合、动物与人体临床研究的结合成为研究模式的必然选择。有毒中药药材面临着药材组成成分的定性与定量水平差异、各不同产地药材组成成分巨大变异、毒理机制的万变、体内外模型差异、种属差异、器官组织细胞组成差异、代谢与功能非均一性、评价指标与检测方法多重性等差异的众多挑战与难题。现代毒理学高度重视与强调对人源性毒理学(而非动物毒性或细胞毒性)特征及其本质的研究,但人源性毒性在体内外体系、种属差异、脏器组织特征差异、形态结构学与分子组成差异等众多影响因素的干扰下,常常迷失本质性、机制性或原理性研究方向,理清研究逻辑,选择正确的策略与技术切入点才能避免中药毒性评价与研究误入歧途。 展开更多
关键词 有毒中药 人源性 系统毒理学 标志物
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Success rate of current human-derived gastric cancer organoids establishment and influencing factors:A systematic review and meta-analysis
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作者 Kai-Lin Jiang Xiang-Xiang Wang +5 位作者 Xue-Jiao Liu Li-Kun Guo Yong-Qi Chen Qing-Ling Jia Ke-Ming Yang Jiang-Hong Ling 《World Journal of Gastrointestinal Oncology》 SCIE 2024年第4期1626-1646,共21页
BACKGROUND Human-derived gastric cancer organoids(GCOs)are widely used in gastric cancer research;however,the culture success rate is generally low.AIM To explore the potential influencing factors,and the literature o... BACKGROUND Human-derived gastric cancer organoids(GCOs)are widely used in gastric cancer research;however,the culture success rate is generally low.AIM To explore the potential influencing factors,and the literature on successful culture rates of GCOs was reviewed using meta-analysis.METHODS PubMed,Web of Science,and EMBASE were searched for studies.Two trained researchers selected the studies and extracted data.STATA 17.0 software was used for meta-analysis of the incidence of each outcome event.The adjusted Methodological Index for Non-Randomized Studies scale was used to assess the quality of the included studies.Funnel plots and Egger’s test were used to detect publication bias.Subgroup analyses were conducted for sex,tissue source,histo-logical classification,and the pathological tumor-node-metastasis(pTNM)cancer staging system.RESULTS Eight studies with a pooled success rate of 66.6%were included.GCOs derived from women and men had success rates of 67%and 46.7%,respectively.GCOs from surgery or biopsy/endoscopic submucosal dissection showed success rates of 70.9%and 53.7%,respectively.GCOs of poorly-differentiated,moderately-differentiated and signet-ring cell cancer showed success rates of 64.6%,31%,and 32.7%,respectively.GCOs with pTNM stages I-II and III-IV showed success rates of 38.3%and 65.2%,respectively.Y-27632 and non-Y-27632 use showed success rates of 58.2%and 70%,respectively.GCOs generated with collagenase were more successful than those constructed with Liberase TH and TrypLE(72.1%vs 71%,respectively).EDTA digestion showed a 50%lower success rate than other methods(P=0.04).CONCLUSION GCO establishment rate is low and varies by sex,tissue source,histological type,and pTNM stage.Omitting Y-27632,and using Liberase TH,TrypLE,or collagenase yields greater success than EDTA. 展开更多
关键词 Gastric cancer organoids human-derived organoids Gastric cancer Cell lines In vitro research models
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Targeted expression of vascular endothelial growth factor 165 in the hrDNA locus mediated by hrDNA targeting vector
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作者 LIANG Zong-min LUO Hong +7 位作者 YANG Yi-feng LIU Xiong-hao XIE Li XUE Zhi-gang HU Dong-xu LIANG De-sheng XIA Kun XIA Jia-hui 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2007年第5期427-430,共4页
Vascular endothelial growth factor (VEGF) is an angiogenic regulator that stimulates endothelial cell migration, proliferation, and angiogenesis. VEGF gene therapy is a new promising approach to induce therapeutic a... Vascular endothelial growth factor (VEGF) is an angiogenic regulator that stimulates endothelial cell migration, proliferation, and angiogenesis. VEGF gene therapy is a new promising approach to induce therapeutic angiogenesis for the treatment of ischemic myocardial and limb diseases. Recently, clinical studies have demonstrated successful outcomes using plasmids, retroviruses and adenoviruses.l-3 But the safety of those vectors is poor, which has become a serious concern. Besides immunogenicity caused by viral vectors, a further problem is that viral vectors show a preference to integrate into the transcription or control region of active genes, which may induce tumors and other disorders. 展开更多
关键词 human-derived vector site-specific integration targeting expression vascular endothelial growth factor 165
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EGCG辐射保护作用的研究 被引量:18
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作者 刘官树 姚思德 +2 位作者 倪谨 赵芳 孟祥顺 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期87-92,共6页
采用MTT方法和脉冲场凝胶电泳方法 ,以人肝L0 2细胞株为研究对象 ,对没食子儿茶素没食子酸脂 (epigallocatechingallate ,EGCG)的辐射保护作用进行了研究。MTT结果表明 ,EGCG在 5— 5 0 μmol/L的浓度下 ,对细胞有明显的保护作用 ,并对... 采用MTT方法和脉冲场凝胶电泳方法 ,以人肝L0 2细胞株为研究对象 ,对没食子儿茶素没食子酸脂 (epigallocatechingallate ,EGCG)的辐射保护作用进行了研究。MTT结果表明 ,EGCG在 5— 5 0 μmol/L的浓度下 ,对细胞有明显的保护作用 ,并对细胞的修复有促进作用 ;脉冲场凝胶电泳方法结果显示 ,EGCG作用可减少辐射所致的DNA双链断裂水平。 展开更多
关键词 没食子儿茶素没食子酸脂 LO2细胞 MTT方法 脉冲场凝胶电泳方法 抗氧化剂 茶多酚 绿茶 药物研究 EGCG 辐射保护
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氧化型低密度脂蛋白对人血单核细胞基质金属蛋白酶表达及活性的影响 被引量:13
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作者 王长谦 汤大鸣 +5 位作者 谢秀兰 徐依敏 丁弘毅 王利民 王彬尧 黄定九 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2003年第2期126-130,共5页
探讨氧化修饰低密度脂蛋白对人单核细胞源巨噬细胞基质金属蛋白酶的表达及其活性的影响。采用体外培养人单核细胞源巨噬细胞 ,分别应用逆转录聚合酶链式反应和蛋白印迹检测基质金属蛋白酶 2和基质金属蛋白酶 9基因和蛋白表达 ,酶谱法检... 探讨氧化修饰低密度脂蛋白对人单核细胞源巨噬细胞基质金属蛋白酶的表达及其活性的影响。采用体外培养人单核细胞源巨噬细胞 ,分别应用逆转录聚合酶链式反应和蛋白印迹检测基质金属蛋白酶 2和基质金属蛋白酶 9基因和蛋白表达 ,酶谱法检测基质金属蛋白酶活性。结果发现 ,不同浓度 (10、2 0、4 0mg/L)氧化修饰低密度脂蛋白对人单核细胞源巨噬细胞基质金属蛋白酶 2和基质金属蛋白酶 9基因表达的影响均明显高于相应浓度低密度脂蛋白组 ;基质金属蛋白酶 2和基质金属蛋白酶 9蛋白表达也明显高于相应浓度低密度脂蛋白组 ;基质金属蛋白酶 2和基质金属蛋白酶 9的活性明显高于相应剂量低密度脂蛋白组 ,且随剂量增加而增高。提示氧化修饰低密度脂蛋白可刺激人单核细胞源巨噬细胞基质金属蛋白酶 2、基质金属蛋白酶 9基因及蛋白的表达 ,增强其活性 ,因而有可能促进动脉粥样硬化斑块内基质降解 ,形成易损斑块 。 展开更多
关键词 分子生物学 单核细胞基质金属蛋白酶的表达 逆转录聚合酶锭反应 低密度脂蛋白 氧化修饰 动脉粥样硬化 基质金属蛋白酶 免疫印迹
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3种不同组织来源的间充质干细胞促内皮祖细胞血管形成作用的比较 被引量:13
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作者 王斯琪 卢海源 程腊梅 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期184-191,共8页
目的:比较人骨髓、脂肪和脐带来源的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)促进内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)形成血管以及维持血管稳定的能力。方法:采用体外共培养成血管试验比较3种来源的MSCs促EPCs形成管状... 目的:比较人骨髓、脂肪和脐带来源的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)促进内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)形成血管以及维持血管稳定的能力。方法:采用体外共培养成血管试验比较3种来源的MSCs促EPCs形成管状结构的能力;采用体内基质胶Matrigel成血管试验、免疫组织化学染色比较3种MSCs促进EPCs在体内形成功能血管的能力。结果:EPCs在脂肪MSCs单层上形成的管状结构长度和节点数均高于在骨髓和脐带MSCs单层上的形成数;EPCs与脂肪MSCs在Matrigel上共培养时形成的毛细血管样结构稳定性高于骨髓和脐带MSCs;脂肪MSCs与EPCs在体内Matrigel中形成大量有血流灌注的功能血管,脐带MSCs与EPCs在体内Matrigel中形成少量有血流灌注的功能血管,而骨髓MSCs与EPCs在体内Matrigel中只形成有血细胞渗漏的不完整血管。结论:脂肪MSCs在体内、体外促EPCs形成血管结构并维持其稳定的能力高于骨髓和脐带MSCs。 展开更多
关键词 人骨髓来源间充质干细胞 人脂肪来源间充质干细胞 人脐带来源间充质干细胞 内皮祖细胞 血管生成 血管稳定
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人胎盘贴壁细胞的分离培养及造血相关因子表达 被引量:13
8
作者 何津 张毅 +4 位作者 江小霞 刘刚 刘元林 李荷莲 毛宁 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期652-654,共3页
目的 探讨人胎盘贴壁细胞 (hPDAC)的分离培养及造血相关因子的表达。方法 酶消化法分离培养人胎盘组织中贴壁细胞 ,并鉴定其生物学特性 ,用RT PCR方法检测造血相关因子表达。结果 成功分离培养出hPDAC ,并证实其具有间充质干细胞特... 目的 探讨人胎盘贴壁细胞 (hPDAC)的分离培养及造血相关因子的表达。方法 酶消化法分离培养人胎盘组织中贴壁细胞 ,并鉴定其生物学特性 ,用RT PCR方法检测造血相关因子表达。结果 成功分离培养出hPDAC ,并证实其具有间充质干细胞特性 ,表达多种造血相关因子 ,包括SCF、FL、G CSF、GM CSF、M CSF和IL 6。结论 hPDAC可为脐血CD34+ 细胞体外扩增提供潜在滋养层。 展开更多
关键词 人胎盘贴壁细胞 分离培养 造血相关因子 表达
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脐带间充质干细胞治疗严重膝骨关节炎的对照研究 被引量:12
9
作者 杨孝兵 蒋峰 +3 位作者 张帆 施星芬 刘丽敏 徐志国 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2017年第3期305-311,共7页
目的:对照透明质酸钠(sodium hyaluronate or hyaluronic acid,HA)与人源脐带间充质干细胞(human umbilical cord derived mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)膝关节腔两种注射方法治疗中重度膝骨关节炎(osteoarthritis,OA),观察关节疼... 目的:对照透明质酸钠(sodium hyaluronate or hyaluronic acid,HA)与人源脐带间充质干细胞(human umbilical cord derived mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)膝关节腔两种注射方法治疗中重度膝骨关节炎(osteoarthritis,OA),观察关节疼痛、功能的疗效、放射学变化以及安全性。方法:采用随机半盲平行对照的研究方法,将44例中重度膝骨关节炎的患者分为3组:A组16例,5次透明质酸钠注射组;B组15例,2次h UC-MSCs注射组;C组13例,4次h UC-MSCs注射组。观察指标:静止VAP评分,美国膝关节协会(AKS)的膝骨关节炎关节性和功能性评分,Kellgren-Lawrence(K-L)放射学评估。随访期12个月,治疗前和治疗后3、6、12个月进行随访记录临床体检、观察指标结果及安全性评估;治疗前和治疗后6、12个月进行实验室检查和膝关节X片检查。结果:3组治疗前比较,静止VAP评分、AKS关节性评分、AKS功能评分、K-L放射学评估均无统计学差异(P>0.05)。治疗后3、6、12个月时,3组间静止VAP评分、AKS关节性评分、AKS功能评分比较均有统计学差异(P<0.05,P<0.01);K-L放射学评估各时段各组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:h UC-MSCs移植治疗严重OA较透明质酸钠能更快速、更显著、更持久地减轻关节疼痛、改善关节功能,4次注射疗效优于2次注射。 展开更多
关键词 骨关节炎 脐带间充质干细胞 透明质酸钠
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人胎盘源贴壁细胞支持脐血CD34^+细胞体外扩增 被引量:8
10
作者 张毅 何津 +4 位作者 江小霞 刘刚 刘元林 唐佩弦 毛宁 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第6期560-564,共5页
从胎盘中分离培养人胎盘源贴壁细胞 (humanplacentaderivedadherentcells,hPDAC) ,研究其对脐血CD34+细胞体外扩增作用。以酶消化法自人胎盘组织中分离培养hPDAC ,并以流式细胞术对其进行鉴定。进一步 ,采用免疫磁珠法分离人脐血CD34+细... 从胎盘中分离培养人胎盘源贴壁细胞 (humanplacentaderivedadherentcells,hPDAC) ,研究其对脐血CD34+细胞体外扩增作用。以酶消化法自人胎盘组织中分离培养hPDAC ,并以流式细胞术对其进行鉴定。进一步 ,采用免疫磁珠法分离人脐血CD34+细胞 ,建立以hPDAC为滋养层的CD34+细胞体外扩增培养体系 ,并与无滋养层的液体培养体系相比 ,观察不同培养体系对有核细胞总数、CFC及CD34+细胞百分率的影响。结果表明 ,人胎盘组织中可分离培养出hPDAC ,并证实其为混合性细胞群体 ,主要含有间充质细胞。以hPDAC为滋养层的共培养体系较无滋养层液体培养体系对有核细胞总数、CFC及CD34+细胞均具有明显的扩增效应 ,其中以SCF +IL 3+IL 6 +FL +hPDAC组扩增效果最强 ,分别扩增了 ( 12 6 .0± 6 .7)倍 ,( 4 9.8± 1.7)倍和 ( 8.3± 1.6 5 )倍。上述结果提示 ,hPDAC具有体外支持造血作用 ,并提供了一与脐血CD34+细胞体外扩增相适应的新滋养层。 展开更多
关键词 人胎盘源贴壁细胞 脐血 CD34^+细胞 hPDAC 生物学 细胞因子 抗体
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人脂肪间充质干细胞的原代培养及体外成骨成脂诱导分化 被引量:8
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作者 闵敏 张雪静 +2 位作者 马红 许辉 李遇梅 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2013年第3期185-190,共6页
目的:建立体外分离培养获得人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived mesenchymal stem cells,hADSCs)的方法,并观察其形态、免疫表型、生物学特性。初步探讨其体外成骨过程中出现成脂现象的原因及机制。方法 :剖宫产手术获得腹部皮... 目的:建立体外分离培养获得人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived mesenchymal stem cells,hADSCs)的方法,并观察其形态、免疫表型、生物学特性。初步探讨其体外成骨过程中出现成脂现象的原因及机制。方法 :剖宫产手术获得腹部皮下脂肪,0.15%Ⅰ型胶原酶消化法获得人脂肪间充质干细胞并进行体外培养。行MTT细胞增殖实验绘制增殖曲线,使用流式细胞及细胞免疫荧光技术检测细胞表面抗原,行成骨成脂分化鉴定其分化潜能。通过RT-PCR技术检测成骨成脂过程中过氧化物酶体增殖物激活受体γ-2(peroxisome proliferator activated receptorγ-2,PPARγ-2)和骨桥蛋白mRNA表达情况。结果 :通过分离培养,获得了大量旋涡状生长的人脂肪间充质干细胞。MTT法显示细胞增殖能力强。流式细胞鉴定结果显示,CD29、CD73、CD105、CD166高表达,CD31、CD34、CD45、HLA-DR低表达。细胞免疫荧光结果与之相符。hADSCs在特定诱导条件下,具有成骨成脂分化潜能。在成骨分化过程中同时伴有成脂发生。RT-PCR结果显示,与对照组相比,成脂诱导组PPARγ-2 mRNA有时间依赖性递增表达,差异具有统计学意义(P<0.01)。与对照组相比,成骨诱导组骨桥蛋白,PPARγ-2 mRNA均有时间依赖性递增表达,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:建立了一种分离培养hADSCs简单可靠的方法。获得的细胞具有贴壁生长、增殖活性强、干细胞表型以及多向分化等特征。hADSCs体外成骨过程中,三酰甘油的形成对成骨具有一定的促进作用。 展开更多
关键词 人脂肪间充质干细胞 鉴定 成骨分化 成脂分化
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重组人碱性成纤维细胞生长因子对人脂肪干细胞分化为脂肪细胞的影响 被引量:7
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作者 徐扬阳 姜南 +4 位作者 杨柳 赵勇 谷玮炜 曹菁 朱梦琳 《中华医学美学美容杂志》 2013年第2期134-137,共4页
目的探讨不同浓度重组人碱性成纤维细胞生长因子(recombinant human basic fibroblast growth factor,rh-bFGF)对体外培养的人脂肪来源干细胞(human adipose-derived stem cells,hASCs)诱导分化为脂肪细胞的影响,通过实验寻找促... 目的探讨不同浓度重组人碱性成纤维细胞生长因子(recombinant human basic fibroblast growth factor,rh-bFGF)对体外培养的人脂肪来源干细胞(human adipose-derived stem cells,hASCs)诱导分化为脂肪细胞的影响,通过实验寻找促进hASCs向脂肪细胞转化的最佳浓度。方法取健康脂肪抽吸者脂肪混悬液进行分离提取hASCs,进行hASCs的培养、鉴定和成脂诱导分化,并在成脂诱导的细胞中分别加入0ng/ml rh-bFGF作为对照组,加入10、20、40ng/ml外源性rh—bFGF作为实验组。MTT比色法检测成脂细胞的增殖速率,油红O染色定性分析新形成脂肪细胞的时间,利用Western印迹法检测成熟脂滴表面标记蛋白CIDEC的表达。结果添加40ng/ml rh-bFGF的脂滴形成平均时间为(11.5±1.9)h,检测细胞增殖的吸光度值平均为0.52±0.10,10、20、40ng/ml rh-bFGF对细胞的增殖均有促进作用,尤以40ng/ml浓度最为明显,40ng/ml rh-bFGF成熟脂滴表面蛋白CIDEC的表达量高于其他组。结论在hASCs成脂诱导剂中添加rh-bFGF能有效促进成脂细胞的增殖速率,加速hASCs向脂肪细胞的分化,其中以40ng/ml rh-bFGF为最佳浓度。 展开更多
关键词 人脂肪来源干细胞 重组人碱性成纤维细胞生长因子 脂肪细胞 成脂诱导
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人工蛋白XXA促进人源肿瘤抑素Tumstatin可溶性表达
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作者 敖龙 朱玲玉 +7 位作者 庞欣 辛瑜 郭忠鹏 朱瑞 李默影 顾正华 郭自涛 张梁 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期1-8,共8页
为实现人源肿瘤抑素Tumstatin在大肠杆菌中的可溶性表达,构建了5种不同促溶性融合标签与tumstatin基因融合表达的重组大肠杆菌BL21(DE3),利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导重组菌进行摇瓶发... 为实现人源肿瘤抑素Tumstatin在大肠杆菌中的可溶性表达,构建了5种不同促溶性融合标签与tumstatin基因融合表达的重组大肠杆菌BL21(DE3),利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导重组菌进行摇瓶发酵,利用SDS-PAGE和Western-Blot分析并筛选出能可溶性表达Tumstatin蛋白的重组菌。构建的重组菌中BL21/pGEX-6p-1-Tum(含谷胱甘肽巯基转移酶标签—GST标签)、BL21/pET28a-MBP-Tum(含麦芽糖结合蛋白标签—MBP标签)、BL21/pET28a-Tum(无标签)都是以包涵体的形式表达融合蛋白Tumstatin,只有重组菌BL21/pET28a-XXA-Tum(含抗冻蛋白的反向蛋白—XXA标签)能以可溶性的形式表达融合蛋白且目的蛋白占菌体总蛋白45%以上。利用亲和层析对目的蛋白进行纯化并进行Western-Blot分析,得到分子质量为50.9 kDa的目的条带,与理论分子质量一致。进一步对重组菌BL21/pET28a-XXA-Tum的诱导剂添加浓度、诱导剂添加时间、诱导温度、诱导时间诱导条件进行优化。最终选择Tumstatin融合蛋白诱导条件为:诱导剂浓度0.1 mmol/L、2 h添加诱导剂、诱导温度16℃、诱导时间36 h。人源肿瘤抑素在大肠杆菌中可溶性表达为大量制备可溶性人源肿瘤抑素奠定了基础,可为功能性多肽在大肠杆菌中的可溶性表达提供借鉴。 展开更多
关键词 人源肿瘤抑素 大肠杆菌 可溶性表达 融合标签 抗冻蛋白的反向蛋白
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不同人源性细胞中内参基因的筛选
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作者 李俊慧 裴倩倩 +2 位作者 赵晓转 王新明 刘功成 《中国医学工程》 2024年第6期10-13,共4页
目的为筛选在不同人源性细胞中能够稳定表达的内参基因,以期为不同组织的定量研究提供一定的参考。方法通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测36种人源性细胞中β-珠蛋白(β-Globin)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)、核糖体RNA(18S rRNA)... 目的为筛选在不同人源性细胞中能够稳定表达的内参基因,以期为不同组织的定量研究提供一定的参考。方法通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测36种人源性细胞中β-珠蛋白(β-Globin)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)、核糖体RNA(18S rRNA)和核糖核酸酶P(Rnase P)4个候选内参基因的表达量,并利用geNorm、NormFider和BestKeeper三个软件对候选内参基因的稳定性进行评价。结果同一种细胞中,Rnase P的表达量较高;不同细胞中,18S rRNA的表达较为稳定。结论综合分析发现候选内参基因18S rRNA虽较为稳定,但并不是最优选择。 展开更多
关键词 人源性细胞 内参基因 筛选
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人源肿瘤异种移植动物模型在癌症精准医学研究中的应用 被引量:5
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作者 宋伟杰 周岩 牛瑞芳 《实验动物与比较医学》 CAS 2021年第6期493-500,共8页
人类疾病实验动物模型对于临床转化研究具有不可替代的作用,在生物科学、医药化学和生命健康等领域得到了广泛的应用。在癌症领域,动物模型常被用作研究癌症发生、发展和转移的有效工具。近年来,人源肿瘤异种移植(patient-derivedtumorx... 人类疾病实验动物模型对于临床转化研究具有不可替代的作用,在生物科学、医药化学和生命健康等领域得到了广泛的应用。在癌症领域,动物模型常被用作研究癌症发生、发展和转移的有效工具。近年来,人源肿瘤异种移植(patient-derivedtumorxenograft,PDX)模型在癌症治疗药物研发和个体化治疗方案制定方面的应用不断普及。本文从实验动物肿瘤模型的发展、免疫缺陷动物的使用角度出发,围绕不同类型动物模型的特点,综述了PDX模型在精准医学领域的应用现状、未来的发展趋势和应用前景。 展开更多
关键词 实验动物 人源肿瘤异种移植 精准医学 人源化小鼠
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人源干细胞产品的药学评价考虑 被引量:2
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作者 韩冬梅 何伍 +1 位作者 韦薇 魏开坤 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期148-153,共6页
干细胞具有自我更新(self-renewing)和多向分化(multilineage differentiation)潜能,且不同类型的干细胞具有各自不同的优势和局限性,在基础研究和临床应用中成为热点领域。按药品进行研发的人源干细胞产品目前主要来源于成体干细胞、... 干细胞具有自我更新(self-renewing)和多向分化(multilineage differentiation)潜能,且不同类型的干细胞具有各自不同的优势和局限性,在基础研究和临床应用中成为热点领域。按药品进行研发的人源干细胞产品目前主要来源于成体干细胞、人胚干细胞和诱导多能干细胞三大类。人源干细胞产品复杂多样,在多种疾病治疗中展现出独特的治疗优势。本文总结了人源干细胞产品的特点和最新的研究进展,并根据药品开发和技术评价的规律,围绕生产用原材料、生产工艺、质量研究与控制、稳定性和包装容器密封系统等方面提出现阶段的药学审评考虑和讨论,供业界和监管机构探讨交流,以期能促进此类产品的临床转化和应用。 展开更多
关键词 干细胞 人源干细胞产品 药学评价 质量研究与控制
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人胎盘源间充质干细胞多向分化潜能的实验研究 被引量:6
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作者 刘春丽 刘志辉 +2 位作者 王博蔚 朱镇 周延民 《中国实验诊断学》 北大核心 2009年第8期1022-1024,共3页
目的探讨从废弃胎盘中获取的HPMSCS是否具有多向分化潜能。方法从废弃的胎盘组织中分离培养胎盘源间充质干细胞,并对其生物学性状进行鉴定。对鉴定后的胎盘源间充质干细胞在体外通过特定诱导环境下使之向成脂肪细胞、成骨细胞分化,检测... 目的探讨从废弃胎盘中获取的HPMSCS是否具有多向分化潜能。方法从废弃的胎盘组织中分离培养胎盘源间充质干细胞,并对其生物学性状进行鉴定。对鉴定后的胎盘源间充质干细胞在体外通过特定诱导环境下使之向成脂肪细胞、成骨细胞分化,检测其多向分化潜能。结果HPMSCS在培养基中持续培养后,在特定诱导环境下,成功使其向成脂肪细胞转化,培养2周时,可见融合成团的脂滴充满整个细胞;成功使其向成骨细胞转化,培养4周以上可见明显钙化结节,vonKossa染色可将骨结节中沉积的钙染成黑色,碱性磷酸酶染色呈强阳性反应达到95%以上。结论通过密度梯度离心法从废弃胎盘中获取的间充质干细胞具有多向分化潜能。 展开更多
关键词 人胎盘源间充质干细胞 多向分化
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锰对人源性脉络丛乳头状瘤细胞系合成GDF-15的影响及机制研究
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作者 张雨 张国艳 +7 位作者 李子南 田永吉 宁钧宇 洪昭雄 高珊 谭壮生 敬海明 李国君 《毒理学杂志》 CAS 2024年第3期207-214,242,共9页
目的应用人源性脉络丛乳头状瘤细胞系(hCPP)探究锰对脑脉络丛上皮细胞中生长分化因子-15(growth differentiation factor-15,GDF-15)合成的影响及其调控机制。方法应用CCK-8试剂盒检测氯化锰(以下简称锰)处理后hCPP的细胞活力;不同浓度... 目的应用人源性脉络丛乳头状瘤细胞系(hCPP)探究锰对脑脉络丛上皮细胞中生长分化因子-15(growth differentiation factor-15,GDF-15)合成的影响及其调控机制。方法应用CCK-8试剂盒检测氯化锰(以下简称锰)处理后hCPP的细胞活力;不同浓度的锰(25、50、75、100、150和200μmol/L)处理hCPP细胞24、48和72 h,通过Western blot、Real-Time PCR检测GDF-15蛋白表达和Gdf-15 mRNA水平在锰作用下的剂量和时间-效应关系。给予hCPP细胞100μmol/L的锰处理24 h,通过Western blot检测p38 MAPK、NF-κB、AMPK、PI3K/AKT通路的激活情况,随后,给予相应的通路抑制剂后检测GDF-15的蛋白表达。100μmol/L的锰处理hCPP细胞0、6、12、24、36、48、72 h,检测GDF-15、p38 MAPK蛋白表达的时间-效应关系。使用荧光探针试剂盒检测hCPP锰处理(100μmol/L,24 h)后细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量,给予ROS抑制剂N-acetylcysteine(NAC)后检测GDF-15、p38 MAPK蛋白表达。结果用200μmol/L以下的不同浓度的锰处理hCPP细胞24、48和72 h,可引起细胞活力降低、GDF-15蛋白合成增加、Gdf-15 mRNA水平增加,且随锰浓度的增高而变化。100μmol/L的锰处理hCPP细胞24 h,通过增加p38 MAPK、NF-κB p65和AMPKα的磷酸化水平激活p38 MAPK、NF-κB和AMPK信号通路,给予SB 202190(p38 MAPK通路抑制剂)可逆转锰处理hCPP引起的GDF-15合成增加效应。100μmol/L的锰处理hCPP细胞0、6、12、24、36、48和72 h,GDF-15蛋白水平和p38 MAPK磷酸化蛋白水平随着锰处理时间的增加而增高。100μmol/L的锰处理hCPP细胞15、30、60 min以及24 h,细胞ROS水平与对照组相比差异无统计学意义,给予NAC处理不能逆转锰引起的GDF-15合成增加及p38 MAPK通路的激活状态。结论本研究表明,锰处理可增加hCPP细胞中GDF-15的合成,这可能是p38 MAPK信号通路激活后介导的。这些发现为今后阐明GDF-15在锰所致中枢神经系统的毒性效应及分子机制提供了新的线� 展开更多
关键词 生长分化因子-15(GDF-15) 氯化锰 脉络丛 人源性脉络丛乳头状瘤细胞系(hCPP) p38 MAPK信号通路
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人尿源性干细胞条件培养基对高糖诱导足细胞凋亡的影响 被引量:5
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作者 姜珍珍 汪年松 +3 位作者 汪泱 刘四红 王筱霞 范瑛 《中国中西医结合肾病杂志》 2014年第10期861-864,I0002,共5页
目的:通过正常人尿液提取干细胞,探讨尿源干细胞(human urine-derived stem cells,hUSCs)的条件培养基(conditioned medium,CM)对高糖所致人肾脏足细胞损伤的影响。方法:从健康男性尿液提取hUSCs,鉴定后进行体外培养,制备hUSCs-CM;体外... 目的:通过正常人尿液提取干细胞,探讨尿源干细胞(human urine-derived stem cells,hUSCs)的条件培养基(conditioned medium,CM)对高糖所致人肾脏足细胞损伤的影响。方法:从健康男性尿液提取hUSCs,鉴定后进行体外培养,制备hUSCs-CM;体外培养人肾脏足细胞株,按培养条件不同,分为正常葡萄糖对照组(NG组)、高糖组(HG组)、甘露醇高渗对照组(MA组)及HG+hUSCs-CM不同剂量(1×,5×,10×)干预组,干预24 h后收集细胞,以RT-PCR检测足细胞骨架蛋白synaptopodin的表达;以Annexin V-FITC和PI双染方法,应用流式细胞仪观察各组足细胞的早期凋亡率。结果:HG组足细胞synaptopodin mRNA的表达较NG组降低(P<0.05),HG+hUSCs-CM(1×,5×,10×)组的足细胞synaptopodin mRNA的表达较HG组均增加(P<0.05);HG组足细胞凋亡率较NG组增高(P<0.05),hUSCs-CM干预组较HG组足细胞凋亡率均下降,并和hUSCs-CM具有剂量相关性(P<0.05)。结论:hUSCs-CM对高糖诱导的人足细胞凋亡及损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 人尿源干细胞 条件培养基 人足细胞 凋亡
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重组人源胶原蛋白对D-半乳糖致衰老小鼠的抗衰老作用及机制研究 被引量:1
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作者 李佳 安苗青 +3 位作者 吕晨豪 郭荣香 杜冰 贺庆 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第10期343-352,共10页
为探究重组人源胶原蛋白(recombinant human-derived collagen,RHC)的抗衰老作用及机制,通过300 mg/kg D-半乳糖腹腔注射构建衰老小鼠模型,并采用不同剂量RHC进行干预,研究衰老模型小鼠皮肤透明质酸、胶原蛋白、脂褐素、羟脯氨酸含量、... 为探究重组人源胶原蛋白(recombinant human-derived collagen,RHC)的抗衰老作用及机制,通过300 mg/kg D-半乳糖腹腔注射构建衰老小鼠模型,并采用不同剂量RHC进行干预,研究衰老模型小鼠皮肤透明质酸、胶原蛋白、脂褐素、羟脯氨酸含量、抗氧化酶活性、与表皮细胞增殖分化和胶原蛋白合成相关的关键基因、蛋白的表达量等变化。结果表明,与衰老模型组(SLM)相比,小鼠经过RHC干预后,皮肤的褶皱程度明显减轻,胶原蛋白含量和含水量显著增加(P<0.05),超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)含量增加,丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量显著减少(P<0.0001)。与SLM组相比,RHC处理组的抗氧化指标,如谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量显著增加,而褐质素含量、病理评分均有所降低,且不同剂量处理组之间也有一定的差异性。此外,RHC处理组小鼠皮肤中的关键基因(EGFR、TIMP-1、COL1A2、COL3A1、TGF-βⅠ、TGF-βⅡ)的表达水平呈上升趋势,MMP-1、MMP-3基因和蛋白的表达降低。综上所述,RHC具有良好的抗皮肤衰老作用,其作用机制可能通过抗氧化、以及改善EGFR、TGF信号通路,调节MMPs和TIMPs动态平衡,促进表皮细胞的增殖分化和胶原蛋白合成从而起到延缓皮肤衰老的作用。 展开更多
关键词 重组人源胶原蛋白 D-半乳糖 衰老模型 抗衰老 脂褐素
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