期刊文献+
共找到61篇文章
< 1 2 4 >
每页显示 20 50 100
Human Prolactin Improves Engraftment and Reconstitution of Human Peripheral Blood Lymphocytes in SCID Mice 被引量:4
1
作者 RuiSun JianZhang +5 位作者 CaiZhang JianhuaZhang ShujuanLiang AnyuanSun JunfuWang ZhigangTian 《Cellular & Molecular Immunology》 SCIE CAS CSCD 2004年第2期129-136,共8页
Recombinant human prolactin(rhPRL)was administered to huPBL-SCID mice to determine its effects on human immunologic reconstitution and function.The huPBL-SCID mice were given 10 μg i.p.injection of rhPRL every other ... Recombinant human prolactin(rhPRL)was administered to huPBL-SCID mice to determine its effects on human immunologic reconstitution and function.The huPBL-SCID mice were given 10 μg i.p.injection of rhPRL every other day for a total of 10 injections after huPBL were transfered.The results demonstrated that rhPRL improved the engraftment of lymphocytes into thymus,lymph nodes and spleens,showing that the cellularities of these organs increased although the cellularities tended to vary depending on the donor.The amounts of human T cells(HLA-ABC^+/CD3^+)increased greatly in thymus(14.2 folds),spleen(4.16 folds)and lymph nodes(40.18 folds)after rhPRL injections.The amounts of human B cells(HLA-ABC^+/CD19^+)also increased greatly in lymph nodes(42.5 folds)and spleen(5.78 folds).The lymph node cells from the rhPRL-treated huPBL-SCID mice were more sensitive to PHA stimulation([~3H]thymidine incorporation).The supernatant of PHA-stimulated PBL from rhPRL-treated huPBL/SCID chimerism contained more cytokines (IFN-γ and IL-2).The natural cytotoxicity against human sensitive target cells,K562 cells,from spleen and bone marrow of hPBL/SCID chimerism was significantly enhanced by rhPRL administration.The lymph node cells were stimulated with LPS in vitro for 3 days and the lymphocytes from the rhPRL-treated huPBL-SCID mice were more sensitive to mitogen stimulation.Both serum total IgG level and IgM level of rhPRL-treated huPBL/SCID chimerism were increased,and even without DT-rechallenge the base line of DT-specific IgG was elevated after rhPRL treatment in huPBL-SCID mice.Thus,rhPRL stimulation promotes reconstitution of human immune system in huPBL-SCID mice.Cellular & Molecular Immunology.2004;1(2):129-136. 展开更多
关键词 human/mouse chimera PROLACTIN B cell T cell
原文传递
Evolving Models and Tools for Microglial Studies in the Central Nervous System 被引量:4
2
作者 Yang Zhang Donghong Cui 《Neuroscience Bulletin》 SCIE CAS CSCD 2021年第8期1218-1233,共16页
Microglia play multiple roles in such processes as brain development,homeostasis,and pathology.Due to their diverse mechanisms of functions,the complex sub-classifications,and the large differences between different s... Microglia play multiple roles in such processes as brain development,homeostasis,and pathology.Due to their diverse mechanisms of functions,the complex sub-classifications,and the large differences between different species,especially compared with humans,very different or even opposite conclusions can be drawn from studies with different research models.The choice of appropriate research models and the associated tools are thus key ingredients of studies on microglia.Mice are the most commonly used animal models.In this review,we summarize in vitro and in vivo models of mouse and human-derived microglial research models,including microglial cell lines,primary microglia,induced microglia-like cells,transgenic mice,human-mouse chimeric models,and microglial replacement models.We also summarize recent developments in novel single-cell and in vivo imaging technologies.We hope our review can serve as an efficient reference for the future study of microglia. 展开更多
关键词 Microglial cell lines Primary microglia Induced microglia-like cells Transgenic mice human-mouse chimeric models Microglial replacement Single-cell technology In vivo imaging
原文传递
当归多糖联合阿糖胞苷对移植性人白血病小鼠模型肝脏的作用机制 被引量:18
3
作者 朱家红 徐春燕 +6 位作者 穆欣艺 刘俊 张梦思 贾道勇 张岩岩 黄国宁 王亚平 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期121-125,共5页
白血病是造血系统的恶性肿瘤,白血病细胞极易进入血液并浸润、损伤肝脏。本室既往研究表明,当归多糖(APS)能抑制白血病细胞的增殖和分化,但治疗白血病时对肝脏的影响未见报道。本研究通过尾静脉移植K562细胞建立人白血病NOD/SCID小鼠模... 白血病是造血系统的恶性肿瘤,白血病细胞极易进入血液并浸润、损伤肝脏。本室既往研究表明,当归多糖(APS)能抑制白血病细胞的增殖和分化,但治疗白血病时对肝脏的影响未见报道。本研究通过尾静脉移植K562细胞建立人白血病NOD/SCID小鼠模型,通过腹腔注射APS、阿糖胞苷(Ara-c)以及两者联合(APS+Ara-c)治疗白血病小鼠,研究对肝脏的影响及其机制。结果表明,与白血病小鼠对照组相比,APS或Ara-c治疗后,外周血白细胞数显著降低;肝功能损伤减轻:丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性与总胆红素(TBiL)降低,白蛋白(Alb)升高;肝脏抗氧化能力下降得以抑制;抗氧化酶谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性升高,谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)降低;炎症因子IL-1β,IL-6水平降低;肝指数减少;白血病细胞对肝小叶浸润减少,且凋亡率增加。APS+Ara-c联合治疗后肝脏病理恢复更加显著。综上所述,APS和Ara-c可减少肝脏内白血病细胞聚集,降低肝功能损伤和炎症因子水平,提高肝组织抗氧化能力,提示APS+Ara-c联合治疗可以发挥更好作用。 展开更多
关键词 K562细胞株 人白血病小鼠模型 当归多糖 阿糖胞苷 肝损伤
原文传递
用于肝脏疾病研究的人源化小鼠模型概述 被引量:7
4
作者 任晓楠 周晓辉 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2014年第5期95-99,共5页
肝脏疾病是危害人类健康的重要疾病之一,合适的小动物模型的缺乏在很大程度上制约了肝脏疾病的相关研究。人源化小鼠作为重要动物模型之一,在肝脏疾病的研究中有巨大的应用价值。本文对早期的uPA小鼠、FAH小鼠、TK-NOG小鼠和近年来的AFC... 肝脏疾病是危害人类健康的重要疾病之一,合适的小动物模型的缺乏在很大程度上制约了肝脏疾病的相关研究。人源化小鼠作为重要动物模型之一,在肝脏疾病的研究中有巨大的应用价值。本文对早期的uPA小鼠、FAH小鼠、TK-NOG小鼠和近年来的AFC8小鼠等几种应用较为广泛且有代表性的人源化小鼠模型及其在肝脏疾病研究中的应用进行了对比分析,阐述了它们各自的模型原理和优缺点,以期对人源化小鼠应用于人类肝脏疾病的研究具有较为直观的认识。 展开更多
关键词 人源化小鼠 肝脏疾病 人肝嵌合
下载PDF
抗人胃癌3H11人-鼠嵌合抗体的构建及表达 被引量:5
5
作者 李竞 王卓智 +5 位作者 王琰 刘群英 化冰 陈宇萍 朱迎春 董志伟 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1998年第2期116-120,共5页
为了降低抗人胃癌鼠单抗3H11的免疫原性,以利于该单抗在临床中的应用。我们构建并表达了3H11的人-鼠嵌合抗体,将3H11的轻、重链可变区基因分别插入到含有人k链及IgGl重链恒定区基因的真核细胞表达载体中,构建了3H11人-鼠嵌合抗体轻、重... 为了降低抗人胃癌鼠单抗3H11的免疫原性,以利于该单抗在临床中的应用。我们构建并表达了3H11的人-鼠嵌合抗体,将3H11的轻、重链可变区基因分别插入到含有人k链及IgGl重链恒定区基因的真核细胞表达载体中,构建了3H11人-鼠嵌合抗体轻、重链表达载体。应用Lipofectin方法先将嵌合轻链表达载体转染到Sp2/0细胞中,经用含霉酚酸的选择培养基筛选及克隆化培养,获得稳定分泌3H11人-鼠嵌合轻链的转染细胞株。再将嵌合重链表达载体转染该细胞系,用含有组氨醇的选择培养基筛选,获得组氨醇抗性细胞株,经亚克隆后得到可稳定分泌人k链和人IgGl的转染细胞系,经ELISA检测该细胞系所分泌的上清含有可与人胃癌细胞系803结合的人IgG抗体活性,RT-PCR结果显示该细胞株有人-鼠嵌合抗体mRNA的转录,证明已获得分泌3H11人-鼠嵌合抗体的细胞系。 展开更多
关键词 3H11 人-鼠嵌合抗体 胃肿瘤 真核基因 表达
下载PDF
条件培养液中杂交瘤生长因子对人—鼠杂交瘤生长、克隆化及抗体分泌的影响 被引量:3
6
作者 朱勇 金伯泉 +1 位作者 黄传书 刘雪松 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第2期75-78,共4页
本文报道了含有杂交瘤生长因子的人纤维母细胞系CRL1506和EB病毒转化经克隆化的人B淋巴母细胞系N23两种条件培养液,对分泌肾综合征出血热病毒人单克隆抗体的人-鼠杂交瘤和人—(人—鼠)杂交瘤细胞系的生长、克隆化及抗体分泌有明显促进作... 本文报道了含有杂交瘤生长因子的人纤维母细胞系CRL1506和EB病毒转化经克隆化的人B淋巴母细胞系N23两种条件培养液,对分泌肾综合征出血热病毒人单克隆抗体的人-鼠杂交瘤和人—(人—鼠)杂交瘤细胞系的生长、克隆化及抗体分泌有明显促进作用,并排除了白细胞介素2和白细胞介素4作用的可能性。结合文献报道,初步认为来自这两种条件培养液的杂交瘤生长因子很可能含有白细胞介素6。正确选择促进人—鼠杂交瘤生长、克隆化和抗体分泌的条件培养液,对于克服生产人单克隆抗体杂交瘤技术所存在的融合率低、克隆化难、抗体产量少等困难具有较大的应用价值。 展开更多
关键词 条件培养液 杂交瘤技术
下载PDF
抗CD71人-鼠嵌合抗体(D2C)的构建和表达 被引量:5
7
作者 王硕 蒋琳 +4 位作者 叶庆 朱慧芬 杨敬 邵静芳 沈关心 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期665-668,共4页
目的 :构建抗CD71人 鼠嵌合抗体的真核细胞表达载体并在真核细胞中表达嵌合抗体。方法 :将鼠源性抗CD71单抗 (75 79)重、轻链可变区基因 (VH 和VL)分别克隆至含有人IgG轻、重链恒定区的表达载体pγ Expr和pκ Expr中 ;将嵌合表达载体 (... 目的 :构建抗CD71人 鼠嵌合抗体的真核细胞表达载体并在真核细胞中表达嵌合抗体。方法 :将鼠源性抗CD71单抗 (75 79)重、轻链可变区基因 (VH 和VL)分别克隆至含有人IgG轻、重链恒定区的表达载体pγ Expr和pκ Expr中 ;将嵌合表达载体 (Chi75 79 pγ Expr和Chi75 79 pκ Expr)经电转染技术共转染至真核细胞 (SP2 0 )中。结果 :经ELISA法检验阳性转染瘤细胞培养上清 ,证明其表达蛋白产物中同时具有人IgG重链恒定区 (Cγ)和轻链恒定区 (Cκ)蛋白 ;通过间接免疫荧光流式细胞术 (FCM)和间接免疫荧光显微技术 ,证明该表达产物能够特异性识别和结合表达于靶细胞表面的CD71分子。结论 :抗CD71人 鼠嵌合抗体 (D2C)在体外真核细胞表达成功。 展开更多
关键词 CD7l 人-鼠嵌合抗体 构建 表达
下载PDF
不同信号肽对人鼠嵌合CMV-IgM分泌表达的影响 被引量:4
8
作者 崔亚敏 田晓平 +1 位作者 赵巧辉 李桂林 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1223-1231,共9页
为了实现在体外制备巨细胞病毒-免疫球蛋白M(CMV-IgM)和探讨不同信号肽对CMV-IgM表达的影响,通过RLM-RACE技术钓取杂交瘤细胞基因序列,构建人鼠嵌合CMV-IgM表达载体,并通过PCR方法将5种不同的分泌型信号肽(SigA–SigE)代替CMV-IgM自身... 为了实现在体外制备巨细胞病毒-免疫球蛋白M(CMV-IgM)和探讨不同信号肽对CMV-IgM表达的影响,通过RLM-RACE技术钓取杂交瘤细胞基因序列,构建人鼠嵌合CMV-IgM表达载体,并通过PCR方法将5种不同的分泌型信号肽(SigA–SigE)代替CMV-IgM自身信号肽(SigF),利用中国仓鼠卵巢细胞(CHO)作为宿主细胞进行体外表达。对纯化后的CMV-IgM进行SDS-PAGE、SEC-HPLC和酶联免疫吸附试验(ELISA)确定其蛋白表达水平与免疫反应性,最终成功制备出910 kDa的重组蛋白,且研究表明,5种信号肽(SigA–SigE)的人鼠嵌合CMV-IgM表达量较CMV 6#细胞株自身信号肽SigF相比,分别提高了6.72、5.19、1.44、1.85、1.98倍。这将对人鼠嵌合CMV-IgM的开发提供理论基础,且为提高CMV-IgM表达量的研究工作提供了新思路。 展开更多
关键词 巨细胞病毒-免疫球蛋白M 人鼠嵌合 信号肽 表达
原文传递
小鼠尾静脉注射^(125)I标记的抗CEA人鼠嵌合抗体rch24的药代动力学研究 被引量:3
9
作者 纪渤 王建 +1 位作者 杨志 路逵阳 《徐州医学院学报》 CAS 2005年第1期29-32,共4页
目的探讨125I-rch24在小鼠体内的药代动力学过程。方法7只BABL/c小鼠,溴代琥珀酰亚胺(NBS)法标记的抗体125I-rch24尾静脉注射,于注射后不同时间尾根部取血,测定放射性计数,绘制血清除曲线,计算药代动力学参数。结果①125I与CEA人鼠嵌合... 目的探讨125I-rch24在小鼠体内的药代动力学过程。方法7只BABL/c小鼠,溴代琥珀酰亚胺(NBS)法标记的抗体125I-rch24尾静脉注射,于注射后不同时间尾根部取血,测定放射性计数,绘制血清除曲线,计算药代动力学参数。结果①125I与CEA人鼠嵌合抗体rch24结合,采用纸层析法测定的标记率为95.5%±02%;②标记抗体的放射化学纯度至14天后为92.6%,35天后为89.3%;③经计算机模拟,为双指数曲线,标记抗体的血液分布、清除符合二房室模型。结论正常小鼠尾静脉注射标记抗体125I-rch24后的药代动力学过程符合二房室模型,静脉注射适宜用于结肠癌放射免疫导向手术。 展开更多
关键词 静脉注射 ^125I标记 药代动力学 正常小鼠 嵌合抗体 CEA 抗C 人鼠 纸层析法 NBS
下载PDF
B7-1人-鼠嵌合抗体对小鼠狼疮样肾炎模型的免疫干预效应 被引量:4
10
作者 沈辉 朱玉强 +7 位作者 孔永 王婧 朱华亭 於葛华 蔡磊 朱莹 王志瑶 邱玉华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1200-1205,共6页
目的:在运用化学法建立小鼠狼疮样肾炎模型并对其进行生物学鉴定的基础上,探讨B7-1人-鼠嵌合抗体阻断B7/D28信号通路对小鼠狼疮样肾炎模型病理损伤的逆转效应。方法:取6周龄雌性C57BL/6J小鼠,予一次性腹腔注射Pristane 0.5ml/只,每月定... 目的:在运用化学法建立小鼠狼疮样肾炎模型并对其进行生物学鉴定的基础上,探讨B7-1人-鼠嵌合抗体阻断B7/D28信号通路对小鼠狼疮样肾炎模型病理损伤的逆转效应。方法:取6周龄雌性C57BL/6J小鼠,予一次性腹腔注射Pristane 0.5ml/只,每月定期检测小鼠的尿蛋白、ANA及肾脏病理学改变。取尿蛋白含量达到++,ANA荧光强度达到++的小鼠随机分为3组,每组5只。抗体干预组用B7-1人-鼠嵌合抗体经眼眶静脉序贯给药,阳性对照组注射免疫抑制剂CTX,阴性对照组注射人同型Ig G。每月定期检测尿蛋白及ANA,干预至3个月时,处死小鼠,取肾脏进行H&E染色分析,免疫复合物(IC)检测及透射电镜观察。结果:Pristane诱导至4个月时,80%的小鼠尿蛋白含量达到+^+++,血清ANA荧光强度为++^+++,出现尿蛋白及ANA的小鼠,其肾小球炎性细胞侵润,肾小管上皮样细胞可见水肿样变性、血管充血明显,纤维组织增生。抗体干预后,尿蛋白逐渐由++^+++降为±^++,ANA由++^+++降为+^++。与阴性对照组比较具有统计学差异(P<0.01)。肾脏HE染色分析的结果显示,抗体干预组肾小球炎性细胞侵润及肾小管充血等表现均得到明显改善。免疫荧光染色可见抗体干预组抗原抗体复合物(IC)的荧光强度明显减弱。经透射电镜观察,抗体干预组与阴性对照组相比,肾小球的电子致密物沉积减少,基底膜厚度趋于均匀。结论:B7-1抗体通过抑制B7-1/CD28信号通路下调机体的免疫应答,减少自身抗体的产生,对自身免疫造成的病理损伤具有逆转作用。 展开更多
关键词 B7-1 人-鼠嵌合抗体 降植烷 狼疮样肾炎 尿蛋白 抗核抗体
下载PDF
基因组印记的研究进展 被引量:2
11
作者 吴萍 《中国畜牧兽医》 CAS 2002年第3期32-35,共4页
综述基因组印记的可能发生机制及人和鼠中常见的印记基因。
关键词 基因组印记 小鼠 DNA甲基化 生物学
下载PDF
人源化小鼠人源细胞检测方法 被引量:2
12
作者 陈炜 冯娟 +2 位作者 施海霞 梁虹 张连峰 《中国比较医学杂志》 CAS 2010年第7期63-66,共4页
目的人源化小鼠在人类疾病与再生医学研究中具有广泛应用,为获得一种理想的人源化小鼠检测方法,研究人特异性线粒体序列扩增作为人源化动物模型中人类DNA检测方法的可行性。方法设计人线粒体DNA特异性引物,并用该引物对人脐血造血干细... 目的人源化小鼠在人类疾病与再生医学研究中具有广泛应用,为获得一种理想的人源化小鼠检测方法,研究人特异性线粒体序列扩增作为人源化动物模型中人类DNA检测方法的可行性。方法设计人线粒体DNA特异性引物,并用该引物对人脐血造血干细胞嵌合体小鼠进行了检测。结果在人源化动物模型的人类DNA检测中,这种人线粒体DNA的PCR检测方法能够达到理想的特异性与灵敏性,是一种理想的嵌合体小鼠检测方法。结论获得了一种理想的人源化小鼠人源细胞检测方法。 展开更多
关键词 人源化小鼠 脐血干细胞 线粒体DNA
下载PDF
B7-1人-鼠嵌合抗体对小鼠慢性移植物抗宿主病(cGVHD)狼疮样肾炎的免疫干预效应 被引量:3
13
作者 朱莹 王婧 +4 位作者 沈立军 王志遥 颜天铭 王玉玉 邱玉华 《实用药物与临床》 CAS 2017年第12期1368-1372,共5页
目的探讨在诱导c GVHD小鼠狼疮样肾炎模型并通过各项指标鉴定其造模成功的基础上,运用自行研制的B7-1人-鼠嵌合抗体阻断B7/CD28共刺激信号通路对小鼠狼疮样肾炎模型病理损伤的逆转效应。方法将6~8周龄雌性(C57BL/6×BALB/c)BCF1小... 目的探讨在诱导c GVHD小鼠狼疮样肾炎模型并通过各项指标鉴定其造模成功的基础上,运用自行研制的B7-1人-鼠嵌合抗体阻断B7/CD28共刺激信号通路对小鼠狼疮样肾炎模型病理损伤的逆转效应。方法将6~8周龄雌性(C57BL/6×BALB/c)BCF1小鼠随机分为4组,模型组于0、3、7和11 d经眼眶静脉注射100μL雌性亲代BALB/c小鼠脾脏细胞107/只。抗体干预组在造模后第1、3、5、8、15、30及60天分别经眼眶静脉注射100μL B7-1人-鼠嵌合抗体(克隆号2B11)200μg/只,环磷酰胺(CTX)干预组在末次注射淋巴细胞后第1、3、5、8、15天分别腹腔注射100μL CTX 2.5 mg/只。按照上述时间点分析小鼠抗ds DNA抗体、ANA及尿蛋白含量,12周时处死小鼠观察肾脏组织HE染色、免疫复合物(IC)沉积等情况。结果模型组100%小鼠出现蛋白尿,尿蛋白含量为++^++++,抗体干预组12周时仅有30%的小鼠出现蛋白尿,尿蛋白含量为+^++;12周时与模型组相比,抗体干预组小鼠血清抗ds DNA抗体阳性率由50%降至0;抗体干预组ANA阳性率由90%降至40%,且荧光面积与荧光亮度均下降;HE染色镜下观察,抗体干预组肾小球囊腔大小较为均一,炎性细胞浸润减少;直接免疫荧光法可见抗体干预组肾小球血管襻IC沉积减少。结论 B7-1人-鼠嵌合抗体可通过阻断或削弱B7/CD28共刺激信号通路,减少自身抗体和IC生成,逆转狼疮肾炎的病理损伤,提示该自行研制的B7-1人-鼠嵌合抗体对狼疮肾炎具有潜在的防治作用。 展开更多
关键词 B7-1人-鼠嵌合抗体 抗核抗体 免疫干预 CGVHD 狼疮肾炎
下载PDF
抗炭疽保护性抗原人-鼠嵌合抗体在CHO细胞中的表达和活性研究 被引量:2
14
作者 李冰 李建民 +7 位作者 张军 徐俊杰 刘树玲 任军 张金龙 付玲 侯利华 陈薇 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1069-1074,共6页
目的在CHO细胞中表达抗炭疽芽孢杆菌保护性抗原(rPA)人-鼠嵌合抗体,并对其活性进行分析。方法RT—PCR克隆具有中和活性鼠源单克隆抗体的轻、重链可变区基因,分别与人Kappa型轻链恒定区、IgG1重链恒定区基因融合后构建了轻重链嵌合... 目的在CHO细胞中表达抗炭疽芽孢杆菌保护性抗原(rPA)人-鼠嵌合抗体,并对其活性进行分析。方法RT—PCR克隆具有中和活性鼠源单克隆抗体的轻、重链可变区基因,分别与人Kappa型轻链恒定区、IgG1重链恒定区基因融合后构建了轻重链嵌合抗体基因。将轻重链嵌合抗体基因克隆表达载体上,构建了嵌合抗体的双启动子表达载体pSecTag-5E1。将pSecTag-5E1转染CHO—dhfr(DG44)细胞,撤掉胸腺嘧啶和次黄嘌呤并不断提高氨甲蝶呤(MTX)的浓度,筛选表达量高的克隆,扩大培养,收集上清,并纯化,用纯化的嵌合抗体进行SDS—PAGE、Westernblot、抗原结合活性、体外细胞保护试验和动物试验。结果在MTX的浓度为5×10^-8mol/L时,获得稳定表达细胞株,表达量为18mg/L。结论成功在CHO—dhfr(DG44)细胞中表达了具有中和活性的抗rPA人-鼠嵌合抗体,为制备抗炭疽的被动免疫制剂奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 炭疽 人-鼠嵌合抗体 CHO细胞
原文传递
免疫球蛋白变区基因的体外扩增及人-鼠嵌合抗体的表达 被引量:2
15
作者 刘健 潘志美 +2 位作者 郭虹汾 王斌 田培坤 《生物化学杂志》 CSCD 1994年第3期264-269,共6页
应用聚合酶链反应法体外扩增抗人小细胞肺癌单克隆抗体的变区基因,经核苷酸序列分析,轻链变区基因为324bp,编码108个氨基酸;重链变区基因为351bp,编码117个氨基酸。将重链变区基因克隆至pSV_2△HgptHuγ... 应用聚合酶链反应法体外扩增抗人小细胞肺癌单克隆抗体的变区基因,经核苷酸序列分析,轻链变区基因为324bp,编码108个氨基酸;重链变区基因为351bp,编码117个氨基酸。将重链变区基因克隆至pSV_2△HgptHuγ_3质粒,经一系列克隆、筛选,得一插入方向正确的表达人-鼠嵌合重链抗体的载体-pSV_2△Hgpt2F7VHHuγ_3。用电穿孔方法将该质粒导入鼠源骨髓瘤细胞J558L,用霉酚酸进行初步筛选,最终用兔抗人免疫球蛋白IgGFc片段的抗体筛选得七株阳性克隆,免疫印迹法结果表明在与人IgG相同位置上有一阳性条带。 展开更多
关键词 免疫球蛋白 变区基因 人鼠嵌合抗体
下载PDF
ELISA法检测人抗鼠抗体的研究 被引量:2
16
作者 王娟 史敏 +1 位作者 李晓军 武建国 《医学研究生学报》 CAS 2001年第z1期29-31,共3页
目的 :对 10 0 0例健康人和 2 84例全身性红斑狼疮 (SL E)、类风湿性关节炎 (RA)、肾病、肿瘤患者中人抗鼠抗体 (HAMA)进行普筛 ,并对其产生情况进行初步探讨。 方法 :用酶联免疫吸附 (EL ISA)法检测待测血清中的HAMA。 结果 :10 0 0... 目的 :对 10 0 0例健康人和 2 84例全身性红斑狼疮 (SL E)、类风湿性关节炎 (RA)、肾病、肿瘤患者中人抗鼠抗体 (HAMA)进行普筛 ,并对其产生情况进行初步探讨。 方法 :用酶联免疫吸附 (EL ISA)法检测待测血清中的HAMA。 结果 :10 0 0例正常健康人 HAMA阳性检出率为 1.1% ,76例 SL E、40例 RA、6 0例肾病、10 8例肿瘤疾病中 HAMA阳性检出率分别为 7.9%、5 .0 %、8.3%和 7.4%。 结论 :肿瘤患者的 HA MA阳性率与正常对照组相比差异显著 (P<0 .0 1) ,这可能是肿瘤患者较其他疾病组有较多机会接触鼠源性单抗治疗有关 ,其他疾患组总体阳性值未发现有统计学意义。 展开更多
关键词 人抗鼠抗体 酶联免疫吸附法 全身性红斑狼疮 类风湿性关节炎 肾病 肿瘤
下载PDF
抗卵巢上皮癌人单克隆抗体HMD_4的制备及其特性的研究 被引量:1
17
作者 崔恒 钱和年 +3 位作者 冯捷 付天云 韦平 付志云 《北京医科大学学报》 CSCD 1990年第1期25-27,84,共3页
本文报道用人-鼠杂交技术制备出一株分泌人IgG型单克隆抗体的人-鼠杂交瘤细胞系,通过早克隆化和反复再克隆化等使该株细胞已稳定分泌15月以上。染色体核型分析符合人-鼠杂交瘤特征。免疫印迹和免疫组化等方法证实该抗体可识别分子量为55... 本文报道用人-鼠杂交技术制备出一株分泌人IgG型单克隆抗体的人-鼠杂交瘤细胞系,通过早克隆化和反复再克隆化等使该株细胞已稳定分泌15月以上。染色体核型分析符合人-鼠杂交瘤特征。免疫印迹和免疫组化等方法证实该抗体可识别分子量为55KDa的卵巢上皮癌相关抗原,命名为HMD_4。本文还对如何保持种间杂交瘤分泌功能和人单抗筛选中如何克服内源性Ig问题进行了讨论。 展开更多
关键词 单克隆抗体 卵巢肿瘤 上皮癌 HMD4
下载PDF
HSV-IgM人-鼠嵌合抗体制备及稳定细胞株构建工艺开发 被引量:1
18
作者 崔亚敏 田晓平 +3 位作者 孙静静 王志强 赵巧辉 李桂林 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期3887-3898,共12页
为实现体外大规模制备单纯疱疹病毒HSV-IgM(HSV1,HSV2)人鼠嵌合抗体,本研究通过RNA连接酶介导的cDNA末端快速扩增(RNA ligase-mediated rapid amplification of cDNA ends,RLM-RACE)技术获取其对应杂交瘤细胞基因序列,构建嵌合抗体至真... 为实现体外大规模制备单纯疱疹病毒HSV-IgM(HSV1,HSV2)人鼠嵌合抗体,本研究通过RNA连接酶介导的cDNA末端快速扩增(RNA ligase-mediated rapid amplification of cDNA ends,RLM-RACE)技术获取其对应杂交瘤细胞基因序列,构建嵌合抗体至真核表达载体,在CHO-S细胞中稳定表达所需目的蛋白。同时优化稳定细胞株筛选工艺,对细胞池构建阶段和单克隆筛选阶段的加压条件进行摸索与探究,最后目的抗体采用蛋白L亲和纯化法进行纯化并进行生物活性检测;最终成功制备899 kDa和909 kDa的稳定高表达重组IgM抗体(HSV1,HSV2)细胞株。结果表明,最适筛选压力为20P200M(一轮加压)和50P1000M(二轮加压);使用加压培养基进行单克隆筛选抗体表达量较高,HSV1-IgM和HSV2-IgM单克隆最终表达量分别为1620 mg/L和623 mg/L。本研究为HSV1和HSV2的IgM系列重组抗体质控品开发以及体外高表达分泌IgM亚型抗体提供理论与实践基础。 展开更多
关键词 人鼠嵌合IgM抗体 CHO-S细胞 构建工艺 表达
原文传递
抗人前列腺素D合成酶嵌合抗体基因的构建
19
作者 朱国华 陈德宇 +1 位作者 许晓风 黄宇烽 《南京师大学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期98-102,共5页
 采用RT PCR技术,从 1株稳定分泌抗人L-PGDS单克隆抗体的鼠杂交瘤细胞中扩增抗体的可变区基因,得 2个Vκ和 1个VH.序列经Igblast比对分析,其中 1个Vκ为鼠骨髓瘤细胞系内固有的无功能基因;另一Vκ和VH具备鼠抗体可变区特征,为抗体功能...  采用RT PCR技术,从 1株稳定分泌抗人L-PGDS单克隆抗体的鼠杂交瘤细胞中扩增抗体的可变区基因,得 2个Vκ和 1个VH.序列经Igblast比对分析,其中 1个Vκ为鼠骨髓瘤细胞系内固有的无功能基因;另一Vκ和VH具备鼠抗体可变区特征,为抗体功能基因.经双酶切,将抗体可变区功能基因分别与表达载体pAG4622、pAH4604中的人IgG相应恒定区相连,构建成抗人L-PGDS的人 鼠嵌合抗体基因. 展开更多
关键词 人L-PGDS RT-PCR技术 单克隆抗体 可变区基因 杂交瘤细胞 老鼠 前列腺素D合成酶
下载PDF
^(131)I-chTNT在分化型甲状腺癌肺转移患者体内的生物学分布 被引量:2
20
作者 张浩然 马庆杰 +3 位作者 赵劼 高识 孟祥芹 赵国庆 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期65-67,共3页
目的研究131I标记的肿瘤细胞核人鼠嵌合单克隆抗体(131I-chTNT)在分化型甲状腺癌肺转移病人体内的生物学分布。方法10例分化型甲状腺癌患者,单次静脉注射131I-chTNT(5MBq/kg体重)后测量各时间点血、尿样放射性;应用超饱和三氯醋酸检测13... 目的研究131I标记的肿瘤细胞核人鼠嵌合单克隆抗体(131I-chTNT)在分化型甲状腺癌肺转移病人体内的生物学分布。方法10例分化型甲状腺癌患者,单次静脉注射131I-chTNT(5MBq/kg体重)后测量各时间点血、尿样放射性;应用超饱和三氯醋酸检测131I-chTNT在体内的稳定性和代谢情况。采用连续显像法勾画感兴趣区估算全身、肿瘤和主要器官不同时间点的摄入百分比。结果静脉推注131I-chTNT后血清时间放射性曲线结果符合单次静脉给药二室模型,T1/2(65.28±14.83)h,AUC0-t(8.93±1.32)MBq.h-1.ml-1,AUC0-∞(10.58±2.19)MBq.h-1.ml-1,CL(1635±359.15)ml.min-1.kg-1;静脉推注131I-chTNT后尿液时间排除放射性百分比曲线符合单次静脉给药一室模型,T1/2(99±9.6)h,1w累计有注入剂量(31±9)%的放射性经尿液排泄;血清中131I-chTNT占放射性成分的百分率,其中24,48,72h血清中的131I-chTNT均超过95%,168h131I-chTNT仍达到(88±7)%;尿中放射性物质的化学成分,24,48,72,168h尿液样本放射性100%源于游离的131I;131I-chTNT静脉推注后放射性主要浓聚在肺和肝,脑最少。肿瘤组织放射性24h达到最大值,T/N比值在3~7d达到最大值(1.28~3.83)。结论131I-chTNT在分化型甲状腺癌肺转移病人体内的生物学分布特点有可能为该肿瘤的治疗提供帮助。 展开更多
关键词 放射性核素 肿瘤细胞核人鼠嵌合单抗 分布 肺转移
下载PDF
上一页 1 2 4 下一页 到第
使用帮助 返回顶部