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多发性骨髓瘤骨髓基质细胞IL-6和TNF-α的表达及其临床意义 被引量:5
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作者 高力 高蕾 +1 位作者 张曦 陈幸华 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期801-802,810,共3页
目的研究骨髓瘤骨髓基质细胞(BMSCs)分泌的白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)在多发性骨髓瘤(MM)进展中的变化和意义以及人脐血源基质细胞(hUCBDSCs)分泌IL-6和TNF-α的水平。方法用ELISA法检测单独培养的hUCBDSCs和骨髓瘤BMSCs... 目的研究骨髓瘤骨髓基质细胞(BMSCs)分泌的白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)在多发性骨髓瘤(MM)进展中的变化和意义以及人脐血源基质细胞(hUCBDSCs)分泌IL-6和TNF-α的水平。方法用ELISA法检测单独培养的hUCBDSCs和骨髓瘤BMSCs以及它们与KM3细胞共培养后IL-6、TNF-α在培养上清液中的浓度。结果(1)单独培养和共培养时骨髓瘤BMSCs分泌IL-6和TNF-α的水平高于hUCBDSCs;(2)共培养后骨髓瘤BMSCs和hUCBDSCs分泌IL-6和TNF-α的水平明显高于共培养前;(3)Ⅲ期患者BMSCs分泌IL-6的水平高于Ⅰ期和Ⅱ期患者,但是TNF-α水平无变化。结论IL-6与MM的进展有关;hUCBDSCs表达IL-6和TNF-α的水平较骨髓瘤BMSCs低。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 人脐血源基质细胞 骨髓基质细胞 白介素-6 肿瘤坏死因子Α
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人脐血源基质细胞分离培养条件的优化 被引量:2
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作者 张诚 陈幸华 +4 位作者 高蕾 张曦 孔佩艳 彭贤贵 王庆余 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期243-245,252,共4页
目的探索人脐血源基质细胞(hUCBOSCs)的分离扩增条件,并观察其生物学特性。方法取产科胎儿脐带血,比较不同的分离方法、首次换液时间及培养体系对人脐血源基质细胞原代培养的影响。倒置显微镜动态观察细胞生长情况,瑞氏染色观察细胞... 目的探索人脐血源基质细胞(hUCBOSCs)的分离扩增条件,并观察其生物学特性。方法取产科胎儿脐带血,比较不同的分离方法、首次换液时间及培养体系对人脐血源基质细胞原代培养的影响。倒置显微镜动态观察细胞生长情况,瑞氏染色观察细胞形态特征,并采用细胞化学和免疫细胞化学方法对获得的细胞进行鉴定。结果明胶沉淀法优于其他分离方法,首次换液时间为第4天、改良Dexter培养体系培养效果最好。原代培养9-14d(平均12.1d)时贴壁细胞开始形成集落,15-21d(平均19.4d)时集落数量最多,培养28d贴壁细胞铺满培养皿底,细胞类型以“成纤维样”细胞、“巨噬样”细胞、“小圆”类细胞为主。细胞化学染色显示非特异性酯酶(NSE)染色阳性率100%,糖原染色(PAS)阳性率为100%,碱性磷酸酶(ALP)染色阳性率26%,过氧化物酶(POX)染色阴性;免疫细胞化学染色显示CD31阳性率96%,CD68阳性率95%,Fn阳性率94%,CD45阴性。结论在体外可以成功培养人脐血源基质细胞,为进一步的基础及临床研究提供了基础。 展开更多
关键词 胎血 人脐血源基质细胞 细胞分离 细胞培养
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Cx43修饰人脐血源基质细胞输注阻抑白血病MRD小鼠造血干细胞移植后复发 被引量:2
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作者 邓怡 杨世杰 +5 位作者 贾延辉 高蕾 张诚 刘耀 司维柯 张曦 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期813-820,共8页
目的观察间隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)修饰人脐血源基质细胞(human umbilical cord blood-derived stromal cells,h UCBDSCs)体外对L615小鼠白血病细胞株凋亡以及在体对白血病微小残留病(minimal residual disease,MRD)小鼠疾病进... 目的观察间隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)修饰人脐血源基质细胞(human umbilical cord blood-derived stromal cells,h UCBDSCs)体外对L615小鼠白血病细胞株凋亡以及在体对白血病微小残留病(minimal residual disease,MRD)小鼠疾病进展的影响。方法通过Cx43过表达腺病毒(Ad-Cx43-GFP)上调h UCBDSCs中Cx43表达,体外构建L615+Cx43+h UCBDSCs共培养模型,检测其对L615细胞凋亡的影响。建立L615细胞低瘤负荷的MRD小鼠模型,分为骨髓(bone marrow,BM)移植组和Cx43+h UCBDSCs+BM移植组进行移植,以正常L615小鼠作为对照,检测移植后外周血象、骨髓涂片、组织病理及骨髓Cx43表达变化等。结果 Ad-Cx43-GFP能够在mRNA和蛋白水平显著上调h UCBDSCs中Cx43表达。L615+Cx43+h UCBDSCs移植组L615细胞凋亡比例较对照组显著升高[(8.93±1.24)%vs(3.53±0.13)%,P<0.01]。对MRD小鼠移植后,Cx43+h UCBDSCs+BM移植组外周血WBC和PLT恢复更快,17 d时接近正常水平,而BM移植组外周血WBC和PLT恢复延迟,17 d时低于正常水平;17 d时,Cx43+h UCBDSCs+BM移植组骨髓涂片原始细胞比例较BM移植组显著降低[(7.67±1.25)%vs(56.33±1.25)%,P<0.01];与BM移植组比较,Cx43+h UCBDSCs+BM移植组肝、脾、骨髓的白血病浸润程度较低,同时骨髓中Cx43蛋白表达增加。结论上调h UCBDSCs中Cx43表达能在体外促进L615细胞凋亡,Cx43+h UCBDSCs+BM联合移植能够促进MRD小鼠外周血WBC和PLT恢复,阻抑MRD小鼠移植后复发。 展开更多
关键词 白血病复发 微小残留病 CX43 人脐血源基质细胞 微环境
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不同来源基质细胞对骨髓瘤KM3细胞增殖和凋亡的影响 被引量:1
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作者 高力 张曦 +1 位作者 高蕾 陈幸华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期879-882,共4页
目的观察人脐血基质细胞及骨髓瘤患者骨髓基质细胞对骨髓瘤KM3细胞生物学特性的作用。方法体外分离培养骨髓瘤骨髓基质细胞和人脐血源基质细胞,与骨髓瘤KM3细胞共培养。采用扫描电镜观察共培养后基质细胞和KM3细胞的位相关系;应用CCK-8... 目的观察人脐血基质细胞及骨髓瘤患者骨髓基质细胞对骨髓瘤KM3细胞生物学特性的作用。方法体外分离培养骨髓瘤骨髓基质细胞和人脐血源基质细胞,与骨髓瘤KM3细胞共培养。采用扫描电镜观察共培养后基质细胞和KM3细胞的位相关系;应用CCK-8、PI染色流式细胞仪和AnnexinV/PI双标法检测不同培养条件下KM3细胞的增殖、细胞周期和凋亡率。结果人脐血基质细胞比骨髓瘤患者骨髓基质细胞有更强的抑制KM细胞增殖的作用;共培养后骨髓瘤患者骨髓基质细胞使KM3细胞阻滞于G0/G1期[(59.70±1.28)%],人脐血基质细胞使S期的KM3细胞比例增高[(46.07±2.46)%];KM3/MM-BMSCs组KM3细胞凋亡率为(3.26±0.12)%明显低于KM3/hUCBDSCs组KM3细胞凋亡率(4.76±0.12)%(P<0.01);KM3/MM-BMSCs组KM3细胞BaxmRNA的表达较KM3/hUCBDSCs组明显下降(P<0.01);KM3/hUCBDSCs组KM3细胞Bcl-2mRNA的表达较KM3细胞悬浮培养组下降(P<0.05),KM3/MM-BMSCs组KM3细胞Bcl-2mRNA的表达则明显升高,为悬浮培养组的1.982倍(P<0.01)。结论骨髓瘤基质细胞微环境抑制骨髓瘤细胞凋亡和死亡;而人脐血源基质细胞有更强的抑制骨髓瘤细胞增殖的作用,并促进其凋亡。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 人脐血基质细胞 骨髓基质细胞 增殖 凋亡
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人脐血源基质细胞与骨髓基质细胞对造血功能损伤修复作用的比较研究
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作者 樊智敏 张曦 +2 位作者 刘耀 彭贤贵 高力 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期106-109,共4页
目的比较人脐血源基质细胞(hUCBDSCs)与骨髓基质细胞(hBMSCs)对造血功能损伤的修复作用。方法取63只BALB/c小鼠均给予6.0 Gy60Co射线全身照射,随机分为hUCBDSCs组(n=21)、hBMSCs组(n=21)和对照组(生理盐水组)(n=21),分别于移植后1、3、5... 目的比较人脐血源基质细胞(hUCBDSCs)与骨髓基质细胞(hBMSCs)对造血功能损伤的修复作用。方法取63只BALB/c小鼠均给予6.0 Gy60Co射线全身照射,随机分为hUCBDSCs组(n=21)、hBMSCs组(n=21)和对照组(生理盐水组)(n=21),分别于移植后1、3、5、7、10、14、21 d检测1次外周血细胞,于照射后7和21 d分别制备股骨骨髓涂片观察骨髓细胞形态学改变,收集小鼠骨髓细胞并作集落培养。结果 3组小鼠移植后白细胞、血小板、红细胞在3~5 d降至最低,hUCBDSCs组白细胞和血小板均从7 d开始回升,10 d后回升速度与程度提高,21 d时回升接近未照射水平,hBMSCs组从7 d开始回升,回升趋势与hUCBDSCs组相似,21 d后回升程度低于未照射水平,对照组从7 d后开始回升,回升较慢,21 d回升程度低于实验组(P<0.05);hUCBDSCs组,hBMSCs组及对照组红细胞均在3 d时降至最低,21 d后恢复,但实验组较对照组回升更快,(P<0.05),hUCBDSCs组与hBM-SCs无甚差异(P>0.05)。集落培养CFU-E、BFU-E、CFU-GM、CFU-GMEM,hUCBDSCs组21 d为(113±6)、(167±6)、(131±6)、(14±4)个,hBMSCs组(46±6)、(141±11)、(118±18)、(10±1)个,对照组为(87±3)、(122±4)、(84±7)、(5±1)个(P<0.05)。hUCBDSCs组所有小鼠均存活。结论 hUCBDSCs较hBMSCs修复造血功能损伤和血小板恢复的作用更佳,hUCBDSCs移植是1种安全有效的促进造血损伤修复的方法。 展开更多
关键词 人脐血基质细胞 人骨髓基质细胞 造血修复 造血微环境 外周血细胞 集落培养 BALB C小鼠
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