In this study we have developed a biocompatible current-conductive coating based on carbon nanotubes and bovine serum albumin and have shown its efficiency in culturing cells in vitro. We investigate the proliferation...In this study we have developed a biocompatible current-conductive coating based on carbon nanotubes and bovine serum albumin and have shown its efficiency in culturing cells in vitro. We investigate the proliferation of human embryonic fibroblast (HEF) cells, which were subjected to electrical stimulation when cultured on carbon nanotube surface. A weak increase in proliferation is demonstrated at stimulating field pulses up to 100 mV. It is assumed that the transport mechanism accompanied by higher synthesis of proteins and their polymerization may increase proliferative activity at low voltages. At higher voltages the motility and spatial organization of HEF cell is observed. As a result, a novel technique of supplying the cells with electric field through a system of micro- and nanosized electrodes and a biocompatible composite have been developed.展开更多
目的研究补骨脂素对人皮肤成纤维细胞(ESF-1)衰老相关基因的影响。方法以雌二醇为阳性对照,采用MTT法检测补骨脂素高、中、低剂量组(100,10,1μmol·L-1)对细胞增殖的影响,用RT-PCR技术检测补骨脂素作用于ESF-1细胞后对衰老相关基...目的研究补骨脂素对人皮肤成纤维细胞(ESF-1)衰老相关基因的影响。方法以雌二醇为阳性对照,采用MTT法检测补骨脂素高、中、低剂量组(100,10,1μmol·L-1)对细胞增殖的影响,用RT-PCR技术检测补骨脂素作用于ESF-1细胞后对衰老相关基因Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(ColⅢ)、基质金属蛋白酶1(MMP-1)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)及基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)mRNA表达水平的影响。结果补骨脂素中剂量组的作用与雌二醇相似,能使ESF-1细胞的增殖明显提高,同时使ColⅠ、ColⅢ、T I M P-1、TIMP-2 mRNA的表达水平显著增强,MMP-1 mRNA的表达水平显著降低。结论补骨脂素具有促E S F-1细胞增殖的作用,可促进胶原蛋白合成,提示其具有潜在的抗皮肤衰老作用。展开更多
目的观察rhIL-33对人胚肺成纤维细胞增殖及其间充质细胞标记物的影响,探讨IL-33/ST2L-TRAF信号通路在肺纤维化形成过程中的作用。方法培养HELF细胞,PCR检测IL-33受体ST2L m RNA;不同浓度梯度的rh IL-33刺激细胞,MTT法检测不同时间点（24...目的观察rhIL-33对人胚肺成纤维细胞增殖及其间充质细胞标记物的影响,探讨IL-33/ST2L-TRAF信号通路在肺纤维化形成过程中的作用。方法培养HELF细胞,PCR检测IL-33受体ST2L m RNA;不同浓度梯度的rh IL-33刺激细胞,MTT法检测不同时间点（24、48、72 h）IL-33对HF细胞增殖的影响;Real-time PCR方法检测IL-33刺激HELF后不同时间点（0、6、12、24、48、72 h）细胞标志性基因α-SMA m RNA、Vimentin m RNA、collagn I m RNA及TRAF-6 m RNA的变化;Western blot法检测细胞标志性蛋白α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、波形蛋白（Vimentin）、I型胶原（collagen I）及关键性信号分子TRAF-6与下游信号分子ERK1/2、JNK、NF-kappa B等的改变。结果 IL-33能促进HELF的增殖,10 ng/ml的IL-33促增殖作用最强,且72 h最为明显;随着IL-33刺激细胞时间的逐渐延长,在0～72 h内α-SMA、Vimentin、collagen I在基因与蛋白水平均先上调后下调,信号分子TRAF-6、ERK1/2、JNK、NF-kappa B（P65）等亦呈现先上调后下调的趋势。结论 IL-33能促进HELF细胞增殖、活化及合成胶原,IL-33/ST2L-TRAF-6通路在此过程中起了关键作用,尤其是在病变早期炎症过程中作用最为明显。展开更多
文摘In this study we have developed a biocompatible current-conductive coating based on carbon nanotubes and bovine serum albumin and have shown its efficiency in culturing cells in vitro. We investigate the proliferation of human embryonic fibroblast (HEF) cells, which were subjected to electrical stimulation when cultured on carbon nanotube surface. A weak increase in proliferation is demonstrated at stimulating field pulses up to 100 mV. It is assumed that the transport mechanism accompanied by higher synthesis of proteins and their polymerization may increase proliferative activity at low voltages. At higher voltages the motility and spatial organization of HEF cell is observed. As a result, a novel technique of supplying the cells with electric field through a system of micro- and nanosized electrodes and a biocompatible composite have been developed.
文摘目的研究补骨脂素对人皮肤成纤维细胞(ESF-1)衰老相关基因的影响。方法以雌二醇为阳性对照,采用MTT法检测补骨脂素高、中、低剂量组(100,10,1μmol·L-1)对细胞增殖的影响,用RT-PCR技术检测补骨脂素作用于ESF-1细胞后对衰老相关基因Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(ColⅢ)、基质金属蛋白酶1(MMP-1)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)及基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)mRNA表达水平的影响。结果补骨脂素中剂量组的作用与雌二醇相似,能使ESF-1细胞的增殖明显提高,同时使ColⅠ、ColⅢ、T I M P-1、TIMP-2 mRNA的表达水平显著增强,MMP-1 mRNA的表达水平显著降低。结论补骨脂素具有促E S F-1细胞增殖的作用,可促进胶原蛋白合成,提示其具有潜在的抗皮肤衰老作用。
文摘目的观察rhIL-33对人胚肺成纤维细胞增殖及其间充质细胞标记物的影响,探讨IL-33/ST2L-TRAF信号通路在肺纤维化形成过程中的作用。方法培养HELF细胞,PCR检测IL-33受体ST2L m RNA;不同浓度梯度的rh IL-33刺激细胞,MTT法检测不同时间点（24、48、72 h）IL-33对HF细胞增殖的影响;Real-time PCR方法检测IL-33刺激HELF后不同时间点（0、6、12、24、48、72 h）细胞标志性基因α-SMA m RNA、Vimentin m RNA、collagn I m RNA及TRAF-6 m RNA的变化;Western blot法检测细胞标志性蛋白α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、波形蛋白（Vimentin）、I型胶原（collagen I）及关键性信号分子TRAF-6与下游信号分子ERK1/2、JNK、NF-kappa B等的改变。结果 IL-33能促进HELF的增殖,10 ng/ml的IL-33促增殖作用最强,且72 h最为明显;随着IL-33刺激细胞时间的逐渐延长,在0～72 h内α-SMA、Vimentin、collagen I在基因与蛋白水平均先上调后下调,信号分子TRAF-6、ERK1/2、JNK、NF-kappa B（P65）等亦呈现先上调后下调的趋势。结论 IL-33能促进HELF细胞增殖、活化及合成胶原,IL-33/ST2L-TRAF-6通路在此过程中起了关键作用,尤其是在病变早期炎症过程中作用最为明显。
文摘目的:探讨敲减高迁移率族蛋白A2( HMGA2 )基因表达对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞活力、凋亡、胶原合成和氧化应激的影响。方法:实验分为空白组、TGF-β1组、阴性转染对照组和HMGA2 siRNA(si-HMGA2)组。Western blot 检测HMGA2、AKT和p-AKT蛋白水平;MTT法及流式细胞术分别检测细胞活力及凋亡率;RT-qPCR检测Ⅰ型胶原蛋白(COL -Ⅰ)和COL-Ⅲ的mRNA表达;DCFH-DA探针检测细胞活性氧簇(ROS)的含量。结果:与空白组比较,TGF-β1组HMGA2和p-AKT的蛋白水平、细胞活力及COL -Ⅰ和COL-Ⅲ的mRNA表达均明显升高,细胞凋亡率及ROS水平则明显降低( P <0.05);与TGF-β1组比较,si-HMGA2组HMGA2和p-AKT的蛋白水平、细胞活力及COL -Ⅰ和COL-Ⅲ的mRNA表达均明显降低,细胞凋亡率及ROS水平则明显升高( P <0.05)。结论:敲减HMGA2 基因可抑制TGF-β1诱导的人胚肺成纤维细胞生长和胶原合成,促进细胞凋亡及ROS产生,其机制可能与下调PI3K/AKT信号通路有关。
