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生物活性透明质酸对脂多糖诱导的人树突状细胞和巨噬细胞炎症应答作用 被引量：3
1
作者 尤娜 褚萨萨 +3 位作者 朱进 张馨 杨志国 汪茂荣 《中华实验和临床感染病杂志（电子版）》 CAS 2017年第1期14-19,共6页
目的探讨经人透明质酸酶PH20特异处理的重组HA,即生物活性透明质酸(B-HA)对脂多糖(LPS)诱导的人树突状细胞(DC)和巨噬细胞炎症应答的影响。方法 DC细胞和人急性单核细胞白血病单核细胞株(THP-1)经不同浓度的B-HA预先处理,加入LPS刺激不... 目的探讨经人透明质酸酶PH20特异处理的重组HA,即生物活性透明质酸(B-HA)对脂多糖(LPS)诱导的人树突状细胞(DC)和巨噬细胞炎症应答的影响。方法 DC细胞和人急性单核细胞白血病单核细胞株(THP-1)经不同浓度的B-HA预先处理,加入LPS刺激不同时间,收集细胞和培养上清,采用实时荧光定量PCR和ELISA方法检测细胞因子mRNA和蛋白表达水平的变化。结果 THP-1细胞实验中,与LPS组相比,B-HA 20 mg/ml不仅能够显著降低促炎因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-8(IL-8)的表达量,同时能够显著增加抗炎因子白细胞介素-10(IL-10)的表达量。其细胞中TNF-α、IL-8和IL-10 mRNA表达水平分别为24.41±1.94、35.76±4.19和14.99±0.07,而LPS组分别为38.48±1.47、62.7±1.93和2.27±0.16,差异均具有统计学意义(t=5.781、P=0.0290,t=5.695,P=0.0300,t=15.20、P=0.0040)。细胞上清中三者蛋白表达水平分别为(1 609.00±75.66)pg/ml、(213.10±9.14)pg/ml和(496.3±41.92)pg/ml,LPS组分别为(3 018±102.8)pg/ml、(587.4±3.140)pg/ml和(243.3±20.23)pg/ml,差异均具有统计学意义(t=11.04、P=0.0080,t=38.74、P=0.0007,t=5.434、P=0.0320)。在人外周血分化的DC细胞实验中,B-HA对细胞因子TNF-α、IL-8和IL-10的表达均无显著影响(P均>0.05)。结论 B-HA能有效调节人巨噬细胞炎性因子的表达,抑制其炎症反应;对人DC细胞的炎症反应无显著影响,提示B-HA对人炎性免疫细胞的炎症反应作用具有选择性。 展开更多
关键词 生物活性透明质酸 脂多糖 炎症反应 树突状细胞 人急性单核细胞白血病单核细胞株
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弓形虫感染对THP-1巨噬细胞极化影响的研究 被引量：2
2
作者 刘学雷 王云杰 +5 位作者 杨宁爱 安童童 康宇婷 贾伟 苏雅静 赵志军 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期902-907,共6页
目的探讨弓形虫感染对体外诱导的人外周血单核细胞(Human acute monocytic leukemia cell line,THP-1)极化特点的影响。方法用佛波酯(PMA)诱导THP-148h使之由悬浮的单核细胞诱导为贴壁的巨噬细胞,体外选择不同时间点感染弓形虫,用Diff... 目的探讨弓形虫感染对体外诱导的人外周血单核细胞(Human acute monocytic leukemia cell line,THP-1)极化特点的影响。方法用佛波酯(PMA)诱导THP-148h使之由悬浮的单核细胞诱导为贴壁的巨噬细胞,体外选择不同时间点感染弓形虫,用Diff染色分析弓形虫在细胞内的增殖情况。Western blot检测极化相关蛋白,Q-PCR检测mRNA的表达情况。结果成功诱导得到贴壁的巨噬细胞模型,感染弓形虫后,M1型巨噬细胞标志性蛋白iNOS及M2型巨噬细胞标志型蛋白Arg-1 36h表达量与对照组差异明显(t=10.23,P<0.05)。Q-PCR的结果显示不同的处理组IL-1、IL-12、iNOS和TNF-α逐渐减少,而IL-10、Arg-1呈逐渐增加,到36h达到顶峰(t=9.587,P<0.05)。结论弓形虫RH株感染THP-1巨噬细胞后可以在胞内生长增殖,THP-1细胞感染后向M2型巨噬细胞方向极化。 展开更多
关键词 THP-1 弓形虫感染 巨噬细胞极化
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EGCG干预抗β_2GPI/β_2GPI复合物对THP-1细胞的诱导活化作用 被引量：2
3
作者 王婷 周红 +2 位作者 解鸿翔 夏龙飞 穆原 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期430-433,共4页
目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)干预抗β2GPI/β2GPI复合物诱导人急性单核细胞白血病细胞系(THP-1细胞)活化的作用。方法用一定剂量的EGCG、脂多糖(LPS)、抗β2GPI/β2GPI复合物等不同刺激物处理THP-1细胞,实时荧光定量PCR检... 目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)干预抗β2GPI/β2GPI复合物诱导人急性单核细胞白血病细胞系(THP-1细胞)活化的作用。方法用一定剂量的EGCG、脂多糖(LPS)、抗β2GPI/β2GPI复合物等不同刺激物处理THP-1细胞,实时荧光定量PCR检测细胞组织因子(TF)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达;发色底物法检测TF活性;ELISA测定TNF-α蛋白的表达。结果 50 mg/L EGCG能抑制抗β2GPI/β2GPI复合物刺激的THP-1细胞TF mRNA和活性的表达(t值为6.97、3.89,P均<0.05),同时下调该复合物诱导的THP-1细胞TNF-αmRNA和蛋白质的表达水平(t值为3.23、4.65,P均<0.05)。结论 EGCG可干预抗β2GPI/β2GPI复合物诱导THP-1细胞TF及TNF-α的表达,抑制THP-1细胞活化。 展开更多
关键词 表没食子儿茶素没食子酸酯 抗β2GPI β2GPI复合物 组织因子 人急性单核细胞白血病细胞系 肿瘤坏死因子-Α
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视黄醇类X受体激动剂通过抑制蛋白激酶C的激活抑制高糖诱导的人急性单核细胞白血病细胞氧化应激反应
4
作者 柴大军 许昌声 +2 位作者 宁若冰 祝江 林金秀 《中华高血压杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期956-961,共6页
目的探讨视黄醇类X受体(RXR)激动剂对高糖诱导人急性单核细胞白血病细胞(THP-1)产生的氧化应激的影响及作用机制。方法体外培养THP-1,以25mmol/L葡萄糖干预,模拟糖尿病患者体内环境,通过流式细胞仪和荧光显微镜的方法检测细胞内的活性... 目的探讨视黄醇类X受体(RXR)激动剂对高糖诱导人急性单核细胞白血病细胞(THP-1)产生的氧化应激的影响及作用机制。方法体外培养THP-1,以25mmol/L葡萄糖干预,模拟糖尿病患者体内环境,通过流式细胞仪和荧光显微镜的方法检测细胞内的活性氧族水平。分别应用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和免疫印迹的方法检测THP-1烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶亚基NOX2/gp91phox和p22phox的表达水平,用免疫印迹方法检测蛋白激酶C(PKC)蛋白的磷酸化水平。结果在高糖环境下(葡萄糖终浓度为25mmol/L),THP-1内活性氧族生成明显增加(9.54±0.49比2.3±0.58,P<0.05),NADPH氧化酶NOX2/gp91phox和p22phox亚基的mRNA和蛋白表达水平明显上调。RXR激动剂9顺式维甲酸(9-cis-RA)可明显抑制高糖诱导的活性氧族生成及NADPH氧化酶NOX2/gp91phox和p22phox亚基表达水平的增加幅度,且具有浓度依赖性;10-7mol/L浓度的SR11237(RXR的特异性配体)与等浓度9-cis-RA具有相似的抑制效应。PKC抑制剂LY3335(20μmol/L)明显抑制高糖环境下活性氧族的生成及NADPH氧化酶NOX2/gp91phox和p22phox亚基蛋白表达水平的增加幅度。RXR激动剂9-cis-RA和SR11237可抑制高糖诱导的PKC蛋白的磷酸化。结论 PKC的活化参与了高糖诱导THP-1产生的氧化应激反应,RXR激动剂通过抑制PKC蛋白的活化对抗高糖诱导THP-1产生的氧化应激反应。 展开更多
关键词 视黄醇类X受体 人急性单核细胞白血病细胞 蛋白激酶C 高糖 氧化应激
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两性霉素B通过激活THP-1细胞TLR2/NF-κB信号通路对炎症因子IL-1β释放的影响
5
作者 叶雯霞 陈丽芬 +2 位作者 卢淑娇 吕叶露 刘炉香 《医药前沿》 2024年第36期10-13,17,共5页
目的:探讨两性霉素B对人急性单核细胞白血病细胞系(THP-1)Toll样受体2(TLR2)/核转录因子(NF-κB)信号通路及产生白细胞介素-1β(IL-1β)的影响。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测两性霉素B及阳性刺激物肽聚糖(PGN)刺激THP-1细胞... 目的:探讨两性霉素B对人急性单核细胞白血病细胞系(THP-1)Toll样受体2(TLR2)/核转录因子(NF-κB)信号通路及产生白细胞介素-1β(IL-1β)的影响。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测两性霉素B及阳性刺激物肽聚糖(PGN)刺激THP-1细胞后TLR2、IL-1β的mRNA表达水平。TLR2单克隆抗体预先和THP-1细胞共培养,再用两性霉素B及PGN刺激THP-1细胞后检测IL-1β的mRNA表达水平。采用酶联免疫吸附法检测IL-1β分泌量。采用免疫印迹法分析两性霉素B作用于THP-1细胞不同时间后NF-κB抑制蛋白α(IκBα)和磷酸化IκBα蛋白表达水平,激光共聚焦分析NF-κB p65入核水平,并用TLR2抗体阻断后检测IκBα和磷酸化IκBα蛋白表达水平。结果:刺激后1、3、6h,两性霉素B组与空白对照组TLR2和IL-1βmRNA表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);刺激后1、3、6h,两性霉素B组和PGN组TLR2和IL-1βmRNA表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两性霉素B组和PGN组上清液中IL-1β的含量与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两性霉素B作用于THP-1细胞30min后磷酸化IκBα蛋白水平升高,激光共聚焦显示p65入核。使用TLR2单克隆抗体后,两性霉素B组、PGN组与本组未用TLR2单克隆抗体的IL-1βmRNA表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);未用抗体及使用抗体情况下,两性霉素B组、PGN组和空白对照组的IL-1βmRNA表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:两性霉素B作用于THP-1细胞,激活TLR2/NF-κB信号通路,参与下游炎症因子IL-1β释放。 展开更多
关键词 两性霉素B 人急性单核细胞白血病细胞系 白细胞介素-1Β TOLL样受体2 核转录因子
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刚地弓形虫培养上清抑制THP-1细胞株增殖 被引量：1
6
作者 葛璞 彭净 +2 位作者 李春莉 刘玉姣 叶彬 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2011年第10期1129-1133,共5页
目的提取弓形虫体外细胞共培养上清,研究上清对人急性单核细胞白血病细胞株THP-1增殖及细胞周期的影响。方法取对数生长期的THP-1细胞(浓度为5×105/mL)分别接种于不同细胞培养瓶,对照组加入含10%胎牛血清RPMI-1640,实验组加入相同... 目的提取弓形虫体外细胞共培养上清,研究上清对人急性单核细胞白血病细胞株THP-1增殖及细胞周期的影响。方法取对数生长期的THP-1细胞(浓度为5×105/mL)分别接种于不同细胞培养瓶,对照组加入含10%胎牛血清RPMI-1640,实验组加入相同体积不同数量(2×107、4×107和8×107/mL)弓形虫速殖子培养上清孵育不同时间后,MTT法检测THP-1细胞增殖率;流式细胞仪检测细胞周期;Western blot检测细胞核转录因子NF-κB/P65与周期蛋白CYCLIND1表达或活性。结果弓形虫培养上清呈时间剂量依赖性抑制THP-1细胞株增殖,使细胞周期在G0/G1期产生阻滞;8×107/mL数量组的THP-1细胞48 h抑制率可达(23.71±0.56)%,G0/M1期细胞比例达(58.53±1.03)%,较对照组比较有明显差异(P<0.05),且处理组THP-1细胞株的NF-κB/P65、cyclin D1蛋白表达量下降。结论刚地弓形虫培养上清能够通过NF-κB信号途径下调cyclin D1蛋白表达引起人急性单核细胞白血病细胞株THP-1 G0/G1期阻滞。 展开更多
关键词 刚地弓形虫培养上清 人急性单核细胞白血病细胞株THP-1 细胞周期
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刚地弓形虫培养上清抑制THP-1细胞增殖及诱导凋亡的研究 被引量：1
7
作者 葛璞 彭净 +2 位作者 李春莉 刘玉姣 叶彬 《世界科技研究与发展》 CSCD 2011年第6期1066-1069,共4页
摘要：目的提取弓形虫体外细胞共培养上清，并研究上清对人急性单核细胞白血病细胞THP-1增殖及凋亡的影响。方法收集对数生长期的THP-1细胞以5X10^7／ml细胞浓度接种于不同培养瓶中，对照组加入含10％胎牛血清的RPMll640，实验组加入相... 摘要：目的提取弓形虫体外细胞共培养上清，并研究上清对人急性单核细胞白血病细胞THP-1增殖及凋亡的影响。方法收集对数生长期的THP-1细胞以5X10^7／ml细胞浓度接种于不同培养瓶中，对照组加入含10％胎牛血清的RPMll640，实验组加入相同体积不同数量（2×10^7／ml、4X10^7／ml、8×10^7／m1）弓形虫速殖子培养上清，采用四甲基氮噻唑蓝（MTY）法检测吸光度（A490值）并计算THP-1细胞增殖抑制率；倒置显微镜下观察细胞形态变化；Annexin-V-FITC／PI染色细胞后上流式细胞仪检测各个时间点细胞凋亡率变化，以Western印迹方法分析凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达或活性。结果MTY法检测结果弓形虫培养上清呈时间剂量依赖性抑制THP-1细胞株增殖，倒置显微镜下观察处理组细胞有发泡现象和凋亡小体出现。流式细胞仪检测弓形虫感染后的THP-1细胞凋亡率较对照组有升高趋势（P〈0．05），呈量效依赖性，Westernblot检测刚地弓形虫培养上清作用于THP-l细胞48h后实验组的Bax、Bcl-2蛋白表达较对照组的比值分别有明显的升高与降低（P〈0．05）。结论刚地弓形虫速殖子培养上清对体外培养THP-l细胞增殖有明显的抑制作用，并可诱导THP-1细胞凋亡。 展开更多
关键词 刚地弓形虫培养上清 人急性单核细胞白血病细胞THP-1 增殖 凋亡
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