LncRNA-HULC靶向miR-597/Rab23分子轴影响肝癌细胞生物学特性的机制研究

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作者 王鑫澳 代扬 +4 位作者 刘君瑞 董钦鹏 刘家铭 吴玉昊 李恒平 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2024年第7期1399-1407,共9页

该文旨在探讨长链非编码RNA(LncRNA)-肝癌高表达基因(HULC)靶向微小RNA-597(mi R-597)/Ras相关蛋白23(Rab23)分子轴影响肝细胞癌(HCC)细胞生物学特性的机制。以湖北医药学院附属襄阳市第一人民医院就诊的罹患HCC的76例患者为研究对象,qR... 该文旨在探讨长链非编码RNA(LncRNA)-肝癌高表达基因(HULC)靶向微小RNA-597(mi R-597)/Ras相关蛋白23(Rab23)分子轴影响肝细胞癌(HCC)细胞生物学特性的机制。以湖北医药学院附属襄阳市第一人民医院就诊的罹患HCC的76例患者为研究对象,qRT-PCR检测HCC患者组织中Lnc RNA-HULC、mi R-597及Rab23表达水平;并分析上述基因的表达水平与HCC的临床相关性;生物信息学方法和双荧光素酶报告实验分析Lnc RNA-HULC、mi R-597、Rab23信号轴的相互作用机制。以HCC细胞Hep G2为研究对象,将其分为si-NC组、si-HULC组、si-HULC+anti-NC组、siHULC+anti-mi R-597组,分别采用CCK8、Transwell实验、流式细胞仪检测各组Hep G2细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡情况;采用Western blot检测Hep G2细胞中Ki67、Caspase-3、Caspase-9、Rab23蛋白的表达情况。结果发现,HCC组织中Lnc RNA-HULC、Rab23的表达水平高于癌旁组织,miR-597的表达水平低于癌旁组织(P<0.05),且其表达情况与患者的TNM分期、分化程度等临床病理特征相关(P<0.05)。Lnc RNA-HULC靶向负调控mi R-597,miR-597靶向负调控Rab23。si-HULC组Lnc RNAHULC、Rab23 mRNA、增殖率、迁移数、侵袭数、Ki67蛋白、Rab23蛋白的表达水平低于si-NC组,mi R-597、凋亡率、Caspase-3蛋白、Caspase-9蛋白的表达水平高于si-NC组(P<0.05);与si-HULC组、si-HULC+anti-NC组比较,si-HULC+anti-miR-597组中mi R-597、凋亡率、Caspase-3蛋白、Caspase-9蛋白表达水平降低(P<0.05),Rab23 mRNA、增殖率、迁移数、侵袭数、Ki67蛋白、Rab23蛋白表达水平升高(P<0.05)。沉默Lnc RNA-HULC可能抑制肝癌细胞生物学特性,其机制可能是通过靶向mi R-597/Rab23分子轴实现的。 展开更多

关键词 长链非编码RNA 肝癌高表达基因 微小RNA-597 Ras相关蛋白23 肝癌 生物学特性

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长链非编码RNA肝癌高表达转录本促进人骨髓间充质干细胞向肝样细胞的分化 被引量：6

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作者 李梦 周云 +2 位作者 禹亚彬 王超群 巩玉森 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第29期4656-4661,共6页

背景:骨髓间充质干细胞在体外可以被诱导分化为肝样细胞,但是细胞功能不成熟。研究表明,长链非编码RNA可以影响间充质干细胞的分化,但是关于长链非编码RNA肝癌高表达转录本是否能够参与骨髓间充质干细胞向肝细胞分化还未有报道。目的:... 背景:骨髓间充质干细胞在体外可以被诱导分化为肝样细胞,但是细胞功能不成熟。研究表明,长链非编码RNA可以影响间充质干细胞的分化,但是关于长链非编码RNA肝癌高表达转录本是否能够参与骨髓间充质干细胞向肝细胞分化还未有报道。目的:探讨长链非编码RNA肝癌高表达转录本在人骨髓间充质干细胞向肝样细胞分化中的作用。方法:体外添加细胞因子诱导人骨髓间充质干细胞(购自上海中科院细胞库)向肝样细胞分化,诱导4周后倒置显微镜观察细胞的形态学变化,免疫荧光技术检测肝细胞特异性蛋白的表达,qRT-PCR检测分化过程中肝癌高表达转录本的表达;然后通过慢病毒转染构建稳定表达肝癌高表达转录本的人骨髓间充质干细胞株,以转染阴性对照病毒作为对照组,两组同时添加细胞因子进行肝向细胞诱导分化,qRT-PCR、Western blot检测过表达组与对照组肝细胞特异性基因、蛋白表达的差异。结果与结论:①人骨髓间充质干细胞在体外添加细胞因子下可以成功被诱导分化为肝样细胞,在分化过程中肝癌高表达转录本的表达逐渐增高;②过表达肝癌高表达转录本后促进了人骨髓间充质干细胞诱导分化后肝细胞特异性基因及蛋白的表达;③结果表明,肝癌高表达转录本在人骨髓间充质干细胞向肝样细胞分化中发挥着至关重要的作用,将为细胞治疗肝脏疾病奠定坚实的理论基础。 展开更多

关键词 长链非编码RNA 肝癌高表达转录本 骨髓间充质干细胞 肝细胞 细胞分化 肝细胞特异性基因

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肝癌患者血清lncRNA HULC表达水平与肿瘤分期、淋巴结转移的关系 被引量：1

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作者 王慧娜 张静 李月 《华夏医学》 CAS 2023年第2期76-79,共4页

目的:探究肝癌患者血清长链非编码RNA(lncRNA)肝癌高表达转录本(HULC)与肿瘤分期、淋巴结转移的关系。方法:选取肝癌患者92例作为研究组,另选取体检健康人员50例作为对照组,比较分析两组血清lncRNA HULC表达水平。结果:研究组的lncRNA H... 目的:探究肝癌患者血清长链非编码RNA(lncRNA)肝癌高表达转录本(HULC)与肿瘤分期、淋巴结转移的关系。方法:选取肝癌患者92例作为研究组,另选取体检健康人员50例作为对照组,比较分析两组血清lncRNA HULC表达水平。结果:研究组的lncRNA HULC相对表达水平显著高于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);研究组的肝癌不同分期、不同淋巴结转移程度患者lnRNA HULC相对表达水平差异均有统计学意义(P<0.05),且伴随着肝癌恶性分期程度的增加、转移范围的扩大,lnRNA HULC相对表达增加。结论:肝癌患者高水平lncRNA HULC表达提示较为严重的恶性变程度以及广泛的淋巴结转移。 展开更多

关键词 长链非编码RNA 肝癌高表达转录本 肿瘤分期 淋巴结转移

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长链非编码RNA HULC与消化系统肿瘤的相关性研究及作用机制 被引量：2

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作者 李正龙 李鑫恒 +4 位作者 郑汪洋 李景林 王志东 姜兴明 崔云甫 《现代生物医学进展》 CAS 2019年第1期193-196,共4页

随着全基因组测序技术的快速发展,越来越多的长链非编码RNA(long noncoding RNA, lncRNA)分子被发现,逐渐成为新的研究热点。LncRNA HULC(highly up-regulated in liver cancer)是一种在肝癌中呈异常上调表达的长链非编码RNA,并参与调... 随着全基因组测序技术的快速发展,越来越多的长链非编码RNA(long noncoding RNA, lncRNA)分子被发现,逐渐成为新的研究热点。LncRNA HULC(highly up-regulated in liver cancer)是一种在肝癌中呈异常上调表达的长链非编码RNA,并参与调控了肝癌细胞增殖、抗凋亡、侵袭及上皮间质化等诸多肿瘤恶性生物学行为。随着研究的不断深入,发现HULC于其他消化系统肿瘤(胃癌、胰腺癌、结肠癌等)中同样呈现上调表达,可通过不同作用机制调控肿瘤的发生发展,并有望成为新型肿瘤诊断标志物和精准分子治疗的靶点。本文就近年来LncRNA HULC与消化系统肿瘤的相关性研究及其作用机制进行综述。 展开更多

关键词 长链非编码RNA HULC 消化系统肿瘤 调控机制

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肝癌高表达转录本调控microRNA613促进肝癌细胞增殖的机制研究 被引量：1

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作者 张海晨 陈佳 +4 位作者 宋云霄 蔡海斌 丰睿捷 倪培华 刘湘帆 《诊断学理论与实践》 2015年第6期533-538,共6页

目的:研究肝癌高表达转录本(highly up-regulated in liver cancer,HULC)调控微小RNA613(micro RNA613,mi R-613)促进肝癌细胞增殖的作用机制。方法 :1在Hep G2肝癌细胞株中,过量或抑制表达HULC,通过实时荧光定量聚合酶链反应(polymeras... 目的:研究肝癌高表达转录本(highly up-regulated in liver cancer,HULC)调控微小RNA613(micro RNA613,mi R-613)促进肝癌细胞增殖的作用机制。方法 :1在Hep G2肝癌细胞株中,过量或抑制表达HULC,通过实时荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)和荧光素酶报告基因系统检测mi R-613的表达量和活性,分析HULC与mi R-613之间的相互关系;2通过高通量表达芯片筛查mi R-613作用的靶基因,在Hep G2细胞株中应用化学合成的mi R-613模拟剂(mimic)和抑制剂(inhibitor),用实时荧光定量PCR和蛋白印迹法分别检测靶基因和靶蛋白的表达情况;3HULC和mi R-613协同作用于肝癌细胞后,用流式细胞仪和软琼脂克隆形成试验观察肝癌细胞周期变化和克隆形成能力。结果:1在肝癌细胞中,HULC可调控mi R-613的表达,随着HULC表达量的增加,mi R-613表达和活性均降低;2Src基因是mi R-613作用的下游靶基因之一;3高表达HULC或抑制mi R-613表达可促进肝癌细胞周期改变和克隆形成。结论:肝癌细胞中HULC可调控mi R-613表达,通过Src基因相关的细胞信号转导途径,改变肝癌细胞的细胞周期等生物学特性。 展开更多

关键词 肝癌高表达转录本 微小RNA613 肝癌 细胞周期

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lncRNAs在肿瘤中的研究进展 被引量：1

6

作者 任惠文 张有为 王翔 《继续医学教育》 2016年第6期73-75,共3页

一直以来,人们一直在努力寻找肿瘤的治疗靶点,对长链非编码RNA(lnc RNAs)的研究可能为更好地研究肿瘤提供了良好的机遇。越来越多的研究证明lnc RNAs在肿瘤发生、发展、转移、基因调节中有重要作用。文章简单综述了几种lnc RNAs在肿瘤... 一直以来,人们一直在努力寻找肿瘤的治疗靶点,对长链非编码RNA(lnc RNAs)的研究可能为更好地研究肿瘤提供了良好的机遇。越来越多的研究证明lnc RNAs在肿瘤发生、发展、转移、基因调节中有重要作用。文章简单综述了几种lnc RNAs在肿瘤中的可能作用机制及临床应用,以期为肿瘤防治的研究提供理论基础。 展开更多

关键词 长链非编码RNA 肿瘤 HOX转录反义RNA 肺腺癌转移相关转录子1 肝癌高表达转录本 前列腺癌基因表达标记1

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长链非编码RNA HULC靶向miR-377-5p对肝癌细胞HepG2生长、侵袭和上皮间质转化及体内肿瘤形成的影响 被引量：1

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作者 冷涛 吴江 +2 位作者 龚虹 丰邡 赵亮亮 《医学分子生物学杂志》 CAS 2020年第6期462-468,共7页

目的研究长链非编码RNA肝癌高表达基因(LncRNA HULC)耙向miR-377-5p对肝癌细胞HepG2生长、侵袭和上皮间质转化及体内肿瘤形成的影响。方法qRT-PCR检测HULC和miR-377-5p在正常细胞系L-02及3种肝癌细胞HB611、HePG2、H22中的相对表达量;... 目的研究长链非编码RNA肝癌高表达基因(LncRNA HULC)耙向miR-377-5p对肝癌细胞HepG2生长、侵袭和上皮间质转化及体内肿瘤形成的影响。方法qRT-PCR检测HULC和miR-377-5p在正常细胞系L-02及3种肝癌细胞HB611、HePG2、H22中的相对表达量;数据库预测HULC和miR-377-5p的靶向关系,并利用双荧光素酶报告实验证实HULC和miR-377-5p的耙向关系;敲除HUCL和添加miR-377-5 p抑制剂验证HULC对HepG2细胞生长、侵袭及上皮间质转化的影响;通过皮下注射HepG2细胞构建移植瘤模型,验证HULC对裸鼠肿瘤重量、存活率、miR-377-5p相对表达M、Ki67和N-cadherin蛋A阳性表达率的影响。结果与正常细胞系比,肝癌细胞系中HULC表达量显著升高(P<0.05),miR-377-5p表达量显著降低(P<0.05),且在HePG 2细胞中表达变化最显著(P<0.01);与control组比,sh-HULC组HepG2细胞的增殖率、侵袭率、N-cadherin蛋白表达著降低,E-cadherin蛋白表达诚著升高(P<0.05),miR-377-5p inhibitor组HepG2细胞的增殖率、侵袭率、N-cadherin蛋白著升高,E-cadherin蛋白表达显著降低(P<0.05),与miR-377-5p inhibitor组相比,sh-HULC+miR-377-5p inhibitor组HepG2细胞的增殖率、侵袭率、N-cadherin蛋白表达显著降低,E-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.05);与control组裸鼠相比,Sh-HULC组裸鼠瘤体重量、存活率、Ki67和N-cadherin蛋内阳性表达均显著降低。结论HULC可能通过靶向抑制miR-377-5p表达,促进肝癌细胞HePG2的增殖、侵袭及上皮间质转化,促进裸鼠瘤体生长,降低其生存率。 展开更多

关键词 肝细胞癌 肝癌高表达基因 微小RNA 377-5p 侵袭

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lncRNA HULC在乳头状甲状腺癌组织中的表达及意义

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作者 冀叶 袁小笋 +6 位作者 张蕾 马慧利 薛永飞 李长生 张敬伟 任中海 张腾飞 《检验医学》 CAS 2022年第7期605-609,共5页

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)肝癌高表达转录本(HULC)在乳头状甲状腺癌(PTC)组织中的表达,以及干扰其表达后对细胞增殖活性和侵袭能力的影响。方法选取行手术治疗的PTC患者105例,收集术中切除的PTC组织及距离肿瘤边缘2 cm以上的癌旁组... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)肝癌高表达转录本(HULC)在乳头状甲状腺癌(PTC)组织中的表达,以及干扰其表达后对细胞增殖活性和侵袭能力的影响。方法选取行手术治疗的PTC患者105例,收集术中切除的PTC组织及距离肿瘤边缘2 cm以上的癌旁组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测HULC的相对表达量。将不同序列分别转染TPC-1细胞,根据转染序列分为si-HULC组(转染HULC的小分子干扰序列)、si-Con组(转染阴性对照序列)、空白组(不作任何处理),检测各组HULC的表达及细胞的增殖活性、侵袭能力。结果PTC组织中HULC的相对表达量显著高于癌旁组织(P<0.001)。不同肿瘤直径、不同TNM分期、有无淋巴结转移PTC患者癌组织HULC相对表达量差异均有统计学意义(P<0.05),不同年龄、性别、病灶数量和局部侵犯类型PTC患者癌组织HULC相对表达量差异均无统计学意义(P>0.05)。si-HULC组HULC相对表达量、细胞增殖活性及侵袭细胞数均低于si-Con组和空白组(P<0.05),si-Con组与空白组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论PTC组织中HULC表达升高,且与肿瘤大小、TNM分期和淋巴结转移有关。干扰HULC表达可抑制TPC-1细胞的增殖活性和侵袭能力。 展开更多

关键词 肝癌高表达转录本 长链非编码RNA 增殖活性 侵袭能力 乳头状甲状腺癌

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HULC在人脑胶质瘤组织中表达变化及对肿瘤细胞增殖侵袭的调控机制 被引量：1

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作者 刘达远 张彩彩 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第21期9-12,共4页

目的观察肝癌高表达转录本(HULC)在脑胶质瘤组织中的表达变化,探讨其对脑胶质瘤细胞增殖侵袭能力的调控机制。方法收集19例正常脑组织、13例低级别及39例高级别脑胶质瘤组织样本,采用RT-PCR技术检测组织中HULC表达。人脑胶质瘤细胞U87... 目的观察肝癌高表达转录本(HULC)在脑胶质瘤组织中的表达变化,探讨其对脑胶质瘤细胞增殖侵袭能力的调控机制。方法收集19例正常脑组织、13例低级别及39例高级别脑胶质瘤组织样本,采用RT-PCR技术检测组织中HULC表达。人脑胶质瘤细胞U87随机分为感染1、2组与对照组,细胞体外慢病毒转染构建U87si HULC 1(感染1组)、U87si HULC 2(感染2组)干扰细胞内HULC表达,RT-PCR技术检测干扰效率,MTT法检测细胞增殖活力(吸光度值),Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力(穿膜细胞数),Western blotting技术检测上皮间质转化(EMT)相关分子[E-钙黏蛋白(E-cadherin)、Snail、波形蛋白(Vimentin)]、肿瘤干性相关分子CD133及侵袭相关分子金属基质蛋白酶2(MMP-2)蛋白的表达。结果高级别脑胶质瘤组织中HULC mRNA的相对表达量高于低级别脑胶质瘤组织、正常脑组织者,P均<0.05。感染1、2组HULC mRNA相对表达量、增殖活力、穿膜细胞数及E-cadherin、Snail、Vimentin、MMP-2及CD133蛋白表达高于对照组,P均<0.05。结论 HULC在人脑胶质瘤组织中呈高表达;HULC可通过促进EMT进程及上调MMP-2、CD133的表达促进人脑胶质瘤细胞增殖、侵袭。 展开更多

关键词 脑胶质瘤 长链非编码RNA 肝癌高表达转录本 细胞增殖 细胞侵袭

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长链非编码RNA肝癌高表达转录本对骨肉瘤细胞放射敏感性的影响 被引量：6

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作者 丁帅 高延征 +3 位作者 张广泉 陈书连 曹臣 李白羽 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期487-492,共6页

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)肝癌高表达转录本(HULC)对骨肉瘤细胞放射敏感性的影响。方法shRNA HULC慢病毒感染骨肉瘤细胞,以qRT-PCR测定干扰效果。以8 Gy X射线照射处理感染shRNA HULC慢病毒的骨肉瘤细胞,MTT、PI单染、Annexin V-FI... 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)肝癌高表达转录本(HULC)对骨肉瘤细胞放射敏感性的影响。方法shRNA HULC慢病毒感染骨肉瘤细胞,以qRT-PCR测定干扰效果。以8 Gy X射线照射处理感染shRNA HULC慢病毒的骨肉瘤细胞,MTT、PI单染、Annexin V-FITC/PI双染法分别测定细胞增殖、周期和凋亡变化。Western blot检测细胞中p21、Cyclin D1、C-Caspase-3蛋白水平和胞浆、线粒体中细胞色素C(Cyt-C)蛋白水平。平板克隆实验检测骨肉瘤细胞的放射敏感性。结果shRNA HULC慢病毒感染可以明显下调骨肉瘤细胞中HULC表达水平。下调HULC或放射处理均可以抑制骨肉瘤细胞增殖[(100.00±9.65)% vs.(71.36±5.27)%、(63.48±5.93)%, t=4.512、5.585,P<0.05]、阻滞细胞周期[(50.15±5.14)% vs.(62.35±4.22)%、(66.05±5.23)%, t=3.177、3.756,P<0.05]和诱导细胞凋亡[(2.98±0.23)% vs.(22.61±3.26)%、(26.14±2.81)%,t=8.898、10.498,P<0.05],促进细胞中p21、C-Caspase-3蛋白表达并下调Cyclin D1蛋白水平,提高胞浆中Cyt-C蛋白水平并下调线粒体中Cyt-C蛋白水平。下调HULC联合放射对骨肉瘤细胞增殖[(71.36±5.27)%、(63.48±5.93)% vs.(49.32±5.76)%,t=4.890、2.967,P<0.05]、周期[(62.35±4.22)%、(66.05±5.23)% vs.(77.17±7.54)%,t=2.983、2.106,P<0.05]、凋亡[(22.61±3.26)%、(26.14±2.81)% vs.(36.21±3.26)%,t=6.164、4.564,P<0.05]及Cyclin D1、C-Caspase-3、Cyt-C蛋白表达影响作用更大。下调HULC后骨肉瘤细胞放射增敏比为1.432。结论下调HULC提高骨肉瘤细胞放射敏感性,这可能与协同放射阻滞细胞周期并诱导细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 肝癌高表达转录本 放射 骨肉瘤 细胞凋亡 细胞周期

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lncRNA HULC对肝癌细胞miRNA差异表达谱及ceRNA调控网络的影响 被引量：2

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作者 关璐璐 韩松峰 +4 位作者 李世朋 王梦姣 邵晓亚 乔兵兵 席守民 《中国临床新医学》 2022年第5期403-409,共7页

目的探究长链非编码RNA(lncRNA)肝癌高表达转录本(HULC)对肝癌细胞微小RNA(miRNA)差异表达谱及竞争内源性RNA(ceRNA)调控网络的影响。方法选取人肝癌细胞系BEL-7402,瞬时转染HULC siRNA以降低lncRNA HULC的表达。通过高通量测序选取表... 目的探究长链非编码RNA(lncRNA)肝癌高表达转录本(HULC)对肝癌细胞微小RNA(miRNA)差异表达谱及竞争内源性RNA(ceRNA)调控网络的影响。方法选取人肝癌细胞系BEL-7402,瞬时转染HULC siRNA以降低lncRNA HULC的表达。通过高通量测序选取表达具有差异的miRNA,并通过实时荧光定量PCR进行验证。基于参考基因组,预测新miRNA。通过基因富集分析及ceRNA调控网络,研究这些基因的潜在功能。结果经敲低lncRNA HULC表达后,通过高通量测序挑选出了9个表达差异显著的miRNA。5个miRNA表达下调,4个miRNA表达上调。通过miRDeep2打分,挑选出了15个分值较高的新miRNA。基因富集分析结果显示,表达下调的miRNA的靶基因的分子功能与丝氨酸tRNA连接酶活性、蛋白激酶活性、阳离子通道活性、钙转运ATP酶活性等有关;表达上调的miRNA的靶基因与硒代半胱氨酸裂解酶活性、过氧化物酶体机制靶向信号1结合、过氧化物酶体靶向序列结合、蛋白质N-末端结合、肿瘤坏死因子受体超家族结合等有关。miRNA-靶基因互作网络、显著富集功能-功能互作网络揭示靶基因与miRNA的关联性以及功能间的相关性。结论在肝癌细胞系BEL-7402中lncRNA HULC具有调节多个表达差异的miRNA的作用,通过ceRNA调控网络模式,影响肝癌的发生、发展。 展开更多

关键词 长链非编码RNA 肝癌高表达转录本 肝细胞癌 高通量测序 微小RNA

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