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长期施用猪粪水稻土抗生素抗性基因污染研究 被引量:31
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作者 黄福义 李虎 +2 位作者 韦蓓 欧阳纬莹 苏建强 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第10期3869-3873,共5页
为了全面研究猪粪有机肥对水稻土抗生素抗性及分布格局的影响,选择295对抗生素抗性基因引物,采用高通量荧光定量PCR对水稻土中的抗生素抗性基因污染情况进行了研究.结果表明,未施用猪粪水稻土检测出66种抗性基因,而施用猪粪水稻土则检测... 为了全面研究猪粪有机肥对水稻土抗生素抗性及分布格局的影响,选择295对抗生素抗性基因引物,采用高通量荧光定量PCR对水稻土中的抗生素抗性基因污染情况进行了研究.结果表明,未施用猪粪水稻土检测出66种抗性基因,而施用猪粪水稻土则检测出107种抗生素抗性基因,施用猪粪后水稻土中抗生素抗性基因种类显著增加(P<0.05).相对于未施用猪粪水稻土,施用猪粪水稻土有49种抗生素抗性基因丰度显著增加(P<0.05),其中施用猪粪水稻土中喹诺酮类/氯霉素类抗性基因的mexF的丰度相对于未施用猪粪水稻土增加1791倍.高通量定量结果表明,施用猪粪的水稻土抗生素抗性基因分布格局发生显著变化,高通量定量技术是研究环境抗生素抗性基因的一个非常实用的工具. 展开更多
关键词 猪粪 水稻土 抗生素 抗生素抗性基因 高通量定量PCR
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QMEC:a tool for high-throughput quantitative assessment of microbial functional potential in C,N,P,and S biogeochemical cycling 被引量:21
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作者 Bangxiao Zheng Yongguan Zhu +2 位作者 Jordi Sardans Josep Penuelas Jianqiang Su 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2018年第12期1451-1462,共12页
Microorganisms are major drivers of elemental cycling in the biosphere. Determining the abundance of microbial functional traits involved in the transformation of nutrients, including carbon(C), nitrogen(N), phosphoru... Microorganisms are major drivers of elemental cycling in the biosphere. Determining the abundance of microbial functional traits involved in the transformation of nutrients, including carbon(C), nitrogen(N), phosphorus(P) and sulfur(S), is critical for assessing microbial functionality in elemental cycling. We developed a high-throughput quantitative-PCR-based chip, Quantitative microbial element cycling(QMEC), for assessing and quantifying the genetic potential of microbiota to mineralize soil organic matter and to release C, N, P and S. QMEC contains 72 primer pairs targeting 64 microbial functional genes for C, N, P, S and methane metabolism. These primer pairs were characterized by high coverage(average of 18–20 phyla covered per gene)and sufficient specificity(>70% match rate) with a relatively low detection limit(7–102 copies per run). QMEC was successfully applied to soil and sediment samples, identifying significantly different structures, abundances and diversities of the functional genes(P<0.05). QMEC was also able to determine absolute gene abundance. QMEC enabled the simultaneous qualitative and quantitative determination of 72 genes from 72 samples in one run, which is promising for comprehensively investigating microbially mediated ecological processes and biogeochemical cycles in various environmental contexts including those of the current global change. 展开更多
关键词 MICROBIAL genes FUNCTIONAL POTENTIAL high-throughput qpcr ELEMENTAL cycling BIOGEOCHEMICAL cycle ecological process
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城市生活污水和生活垃圾渗滤液抗生素抗性基因污染的比较研究 被引量:21
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作者 黄福义 李虎 +2 位作者 安新丽 欧阳纬莹 苏建强 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第10期3949-3954,共6页
为研究城市生活污水(接收生活垃圾渗滤液后合并进入污水厂处理)和垃圾渗滤液中抗生素抗性的分布格局,采用高通量荧光定量PCR技术对城市生活污水和生活垃圾渗滤液中的抗生素抗性基因的多样性和丰度进行了分析.结果表明,生活垃圾渗滤液中... 为研究城市生活污水(接收生活垃圾渗滤液后合并进入污水厂处理)和垃圾渗滤液中抗生素抗性的分布格局,采用高通量荧光定量PCR技术对城市生活污水和生活垃圾渗滤液中的抗生素抗性基因的多样性和丰度进行了分析.结果表明,生活垃圾渗滤液中检测出39种抗性基因,城市生活污水中检测出187种抗性基因,两者检出的抗生素抗性种类有显著差异(P<0.05);相对于垃圾渗滤液,城市生活污水抗生素抗性基因有119种显著增加(P<0.05),其中增加倍数最大的是转座子tnp A-04基因,blaVEB基因,分别达到了3 338倍和1 061倍,表明可移动元件转座子基因和β-内酰胺类抗生素抗性基因在城市生活污水中得到有效富集和传播;城市生活污水是环境抗生素抗性基因的重要存储库. 展开更多
关键词 城市生活污水 生活垃圾渗滤液 抗生素 抗生素抗性基因 高通量定量PCR
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四川省稻田土壤的抗生素抗性基因多样性研究 被引量:20
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作者 何燕 朱冬 +5 位作者 王东 刘燕 彭超 黄丽萍 彭正松 路璐 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1249-1258,共10页
为了全面明晰四川省稻田土壤中抗生素抗性基因的丰度和多样性,及其与环境因子的相关性,对7个不同地区的稻田土壤采用高通量荧光定量PCR技术,对283种抗生素抗性基因和12种可移动遗传元件遗传标记引物进行检测,揭示抗性基因的污染状况及... 为了全面明晰四川省稻田土壤中抗生素抗性基因的丰度和多样性,及其与环境因子的相关性,对7个不同地区的稻田土壤采用高通量荧光定量PCR技术,对283种抗生素抗性基因和12种可移动遗传元件遗传标记引物进行检测,揭示抗性基因的污染状况及空间分布规律。结果表明,7个稻田土中共检出166种不同的抗生素抗性基因和9种可移动遗传元件,每个土壤分别检出56~84种抗生素抗性基因。7个稻田土的抗生素抗性基因组成各异,且都存在其独有的抗生素抗性基因。不同稻田土的抗生素抗性基因的相对和绝对丰度均不同,抗生素抗性基因的绝对丰度范围为9.55×10^8~2.83×10^10 copies·g^-1(干质量),相对丰度为0.012±0.006 copies·cell^-1。7个稻田土的抗生素抗性基因和可移动遗传元件的丰度都呈极显著正相关(P<0.01),说明抗生素抗性基因的水平转移可能促进抗生素抗性基因的迁移和富集,加剧了农田土壤的抗生素抗性基因污染。总体相对丰度较高的抗生素抗性基因类型为多重耐药类(49.26%)、大环内脂类-林可酰胺类-链阳性菌素B类(11.30%)和β-内酰胺类(10.87%)。冗余分析表明土壤肥力重要指标总氮与7个稻田土中的抗生素抗性基因多样性极显著相关(P<0.01)。四川不同地区的稻田土抗生素抗性基因分布规律各异,农业耕种活动可能影响土壤抗生素抗性基因的多样性。 展开更多
关键词 稻田土 抗生素抗性基因 高通量荧光定量PCR
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梅花鹿养殖场抗生素抗性基因分布特征 被引量:13
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作者 黄福义 安新丽 +2 位作者 陈青林 任红云 苏建强 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第11期4402-4409,共8页
梅花鹿养殖是近年来我国南方地区出现的新兴养殖业.为探究梅花鹿养殖对养殖环境抗生素抗性基因的影响,采用高通量荧光定量PCR研究了抗生素抗性基因在养殖场区对照土壤、梅花鹿新鲜粪便、梅花鹿粪便堆肥产物和施用堆肥菜地土壤中的分布... 梅花鹿养殖是近年来我国南方地区出现的新兴养殖业.为探究梅花鹿养殖对养殖环境抗生素抗性基因的影响,采用高通量荧光定量PCR研究了抗生素抗性基因在养殖场区对照土壤、梅花鹿新鲜粪便、梅花鹿粪便堆肥产物和施用堆肥菜地土壤中的分布、丰度和多样性.结果表明,抗性基因的绝对丰度梅花鹿粪便堆肥产物>梅花鹿新鲜粪便>施用堆肥菜地土壤>养殖场区对照土壤,抗生素抗性基因在4种环境样品中具有不同分布格局;梅花鹿养殖场环境中抗性基因丰度与可移动基因元件丰度显著相关(P<0.05),表明可移动基因元件可能加快了抗性基因的水平转移过程,促进了抗性基因的迁移、传播和富集,加剧了养殖环境抗生素抗性基因污染. 展开更多
关键词 梅花鹿 养殖环境 抗生素 抗生素抗性基因 高通量定量PCR
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微塑料对河水抗生素抗性基因的影响 被引量:12
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作者 周昕原 王言仔 +1 位作者 苏建强 黄福义 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第9期4076-4080,共5页
微塑料和抗生素抗性基因都是环境中的新型污染物,两者的复合污染引发了一定的生态环境风险,成为近年的研究热点.本文采集了城市郊区河水,添加不易降解微塑料(聚氯乙烯,PVC)和水溶性微塑料(聚乙烯醇,PVA)进行曝气培养实验,采用高通量定量... 微塑料和抗生素抗性基因都是环境中的新型污染物,两者的复合污染引发了一定的生态环境风险,成为近年的研究热点.本文采集了城市郊区河水,添加不易降解微塑料(聚氯乙烯,PVC)和水溶性微塑料(聚乙烯醇,PVA)进行曝气培养实验,采用高通量定量PCR技术,研究微塑料对河水抗生素抗性基因的影响.结果表明,空白对照河水、添加PVC的河水和添加PVA的河水抗性基因种类数分别为71、87和95种,微塑料的存在显著增加了河水抗生素抗性基因种类,进而可能增加河流生态风险;曝气培养的河水中抗性基因的种类数和丰度有所减少,但是相对于空白对照组(2.8×10^9 copies·L^-1),添加具有水溶性的微塑料仍能显著增加河水抗性基因丰度(8.1×10^9 copies·L^-1),并且抗生素抗性基因丰度与可移动遗传元件呈显著正相关关系,说明可移动遗传元件可能通过基因横向转移机制影响抗生素抗性基因的赋存与演变. 展开更多
关键词 河水 微塑料 抗生素 高通量定量PCR 抗生素抗性基因(ARGs)
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基于SmartChip HT-qPCR分析不同食品中抗生素抗性基因的多样性及丰度
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作者 陈亚波 谭贵良 +5 位作者 胡燕玲 金倩仪 朱爽 孟嫚 邱雨薇 李雪雁 《现代食品科技》 CAS 北大核心 2023年第8期304-310,共7页
抗生素抗性基因(Antibiotics Resistance Genes,ARGs)广泛存在于各种环境中,被认为是一种新型环境污染物,对环境及人类健康具有潜在威胁。但是目前对于不同食品中多种ARGs赋存状况的研究仍然有限。该研究采用SmartChip高通量实时定量PC... 抗生素抗性基因(Antibiotics Resistance Genes,ARGs)广泛存在于各种环境中,被认为是一种新型环境污染物,对环境及人类健康具有潜在威胁。但是目前对于不同食品中多种ARGs赋存状况的研究仍然有限。该研究采用SmartChip高通量实时定量PCR方法(High-Throughput Quantitative Real-Time PCR,HT-qPCR)对水产品、发酵食品、肉类、蔬菜四大类样品中的ARGs及可移动遗传元件(Mobile Genetic Elements,MGEs)进行了定量分析。结果显示,被分析的15个样品中共检出9个ARGs大类,涉及234个ARGs亚类。所有样品中共有的ARGs亚类为79个,特有的为51个;水产品和肉类样品富集多种ARGs,这些基因表现出较高的丰度(最高可达3.6 copies/16S rRNA gene)。MGEs的检出数量达10个,其中所有样均检出整合子基因intI-1(clinic)和转座酶基因tnpA-01。ARGs抵抗机制分析结果表明,抗生素灭活机制、外排泵机制和细胞保护机制为主要的ARGs抵抗机制,抵抗机制贡献大小依次为:抗生素灭活机制>外排泵机制>细胞保护机制。该研究进一步丰富了对不同食品中ARGs赋存情况的认识,可为食品中ARGs的风险分析提供依据。 展开更多
关键词 食品 高通量实时定量PCR 抗生素抗性基因 可移动遗传元件 多样性和丰度
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茅洲河流域民用井中耐药基因的分布特征与健康风险
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作者 吴黛灵 邹海燕 +3 位作者 何璐茜 高方舟 应光国 何良英 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第7期3222-3230,共9页
抗生素的大量使用促进了抗生素耐药基因的产生与传播.地下水是重要的供水途径之一,然而地下水中耐药基因的分布特征与健康风险尚不清楚.采用高通量荧光定量PCR技术(high-throughput qPCR),分析了深圳茅洲河流域11口民用井中耐药基因的... 抗生素的大量使用促进了抗生素耐药基因的产生与传播.地下水是重要的供水途径之一,然而地下水中耐药基因的分布特征与健康风险尚不清楚.采用高通量荧光定量PCR技术(high-throughput qPCR),分析了深圳茅洲河流域11口民用井中耐药基因的分布特征和多样性.结果表明, 11口民用井中共检出141种抗生素耐药基因和8种可移动遗传元件,其中磺胺类、多重耐药类和氨基糖苷类耐药基因的丰度最高.此外,民用井井水中也检出了临床重要的耐药基因,如超广谱β-内酰胺酶基因(blaSHV、blaTEM、blaCTX和blaOXA-1),万古霉素类基因(vanB和vanC-03)等.通过对耐药基因进行均一化计算,发现在民用井W7、 W8和W10的井水中,平均每个细菌携带有至少一个耐药基因,而W11井水中甚至每个细菌平均携带有4个耐药基因.磺胺类、多重耐药类、氨基糖苷类、β-内酰胺类以及氯霉素类耐药基因的丰度与可移动遗传元件的丰度均呈显著正相关(P<0.01),表明民用井中可移动遗传元件可能促进了耐药基因在井水中的扩散. 展开更多
关键词 地下水 民用井 抗生素耐药基因(ARGs) 可移动元件(MGEs) 高通量荧光定量PCR
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紫色土丘陵区畜禽养殖场土壤中抗生素抗性基因分布特征 被引量:18
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作者 程建华 唐翔宇 刘琛 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第7期3257-3262,共6页
鉴于紫色土高垦殖丘陵区土壤中抗生素抗性基因的潜在生态环境风险,本研究采用高通量荧光定量PCR技术,分析了抗生素抗性基因在不同类型畜禽养殖场(养猪场、养鸡场和养牛场)土壤中的丰度和多样性.结果表明,3种养殖场土壤中共检出79种抗生... 鉴于紫色土高垦殖丘陵区土壤中抗生素抗性基因的潜在生态环境风险,本研究采用高通量荧光定量PCR技术,分析了抗生素抗性基因在不同类型畜禽养殖场(养猪场、养鸡场和养牛场)土壤中的丰度和多样性.结果表明,3种养殖场土壤中共检出79种抗生素抗性基因和5种可移动基因元件,其中多重耐药类基因是养殖场土壤中丰度最高的耐药基因.不同养殖场土壤中抗生素抗性基因的丰度和多样性均表现为养鸡场和养猪场样品高于养牛场土壤,且3种养殖场土壤样品中的抗性基因表现出不同的类别分布特征.养殖场土壤中较高的可移动基因元件丰度,及其与抗生素抗性基因丰度显著的相关性(P<0.05)说明,可移动基因元件可能促进了抗生素抗性基因在养殖场土壤中的迁移和扩散. 展开更多
关键词 紫色土 畜禽养殖场 抗生素抗性基因(ARGs) 可移动基因元件(MGEs) 高通量荧光定量PCR(HT-qpcr)
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高垦殖丘陵区不同类型农用地土壤中抗生素抗性基因分布特征
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作者 陈瑞 程建华 唐翔宇 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第12期6947-6954,共8页
为揭示高垦殖丘陵区不同类型农用地土壤中抗生素抗性基因分布特征,分析了抗生素抗性基因在菜地、果园和耕地土壤中的丰度和多样性.结果表明,所有土壤样品中共检出70种抗生素抗性基因和4种可移动基因元件,其中β-内酰胺类cphA-01抗性基... 为揭示高垦殖丘陵区不同类型农用地土壤中抗生素抗性基因分布特征,分析了抗生素抗性基因在菜地、果园和耕地土壤中的丰度和多样性.结果表明,所有土壤样品中共检出70种抗生素抗性基因和4种可移动基因元件,其中β-内酰胺类cphA-01抗性基因是农用地土壤中相对丰度最高的耐药基因.在菜地和果园土壤中,主要的抗性基因亚型为cphA-01和cmx(A),而耕地土壤以mexF和aacC基因为主.土壤中抗生素抗性基因的相对丰度和多样性均表现为:耕地<菜地<果园,这与不同农用地土壤的养分条件差异有关.类似地,土壤中可移动基因元件的相对丰度和多样性均以耕地土壤为最低,而其最高值分别出现在菜地和果园样品中.高垦殖丘陵区农用地土壤环境中可移动基因元件与抗生素抗性基因丰度呈显著正相关关系(P<0.05),表明基因水平迁移可能促进抗生素抗性基因在高垦殖丘陵区农用地土壤环境中扩散. 展开更多
关键词 高垦殖丘陵区 农用地 抗生素抗性基因(ARGs) 可移动基因元件(MGEs) 高通量荧光定量PCR(HT-qpcr)
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