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人脐带间充质干细胞外泌体的分离鉴定及其溶血性能研究 被引量:7
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作者 杨玮杰 李佳曌 +5 位作者 陈良键 张婧 刘凯鲁 张驰 肖月 李晶 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期165-170,共6页
目的:分离并鉴定人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUCMSC)分泌的外泌体,研究其对人血的溶血性能。方法:通过超速离心法从脐带干细胞培养上清中分离外泌体,采用蛋白免疫印迹法、透射电镜和纳米颗粒跟踪... 目的:分离并鉴定人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUCMSC)分泌的外泌体,研究其对人血的溶血性能。方法:通过超速离心法从脐带干细胞培养上清中分离外泌体,采用蛋白免疫印迹法、透射电镜和纳米颗粒跟踪分析法进行鉴定;制备人红细胞悬液,加入不同浓度外泌体,进行溶血试验,用试管法观察并用紫外分光光度法测定计算溶血度。结果:分离获得的外泌体特异富集蛋白CD9、CD81、Alix,不含有高尔基体蛋白Gm130;透射电镜下可见其呈杯盘状结构,粒径直径为40~120 nm;脐带干细胞外泌体对人血的溶血率小于5%。结论:HUCMSC分泌的外泌体具有外泌体的经典结构及典型特征,不引起人血溶血反应,为未来脐带干细胞外泌体作为载体进行药物递送提供了实验依据。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 外泌体 溶血试验
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芦丁通过抑制TXNIP/TRX-ROS信号通路促进人脐带间充质干细胞成骨分化 被引量:1
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作者 杨栋梁 段炼 林光辉 《解剖科学进展》 CAS 2023年第5期455-458,共4页
目的探究芦丁对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)成骨分化的作用,并探究其机制。方法不同浓度芦丁处理成骨分化的hUCMSCs,通过CCK-8检测细胞增殖活性,通过茜素红染色检测细胞矿化结节形成,通过碱性磷酸酶染色检测细胞碱性磷酸酶活性,通过Wes... 目的探究芦丁对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)成骨分化的作用,并探究其机制。方法不同浓度芦丁处理成骨分化的hUCMSCs,通过CCK-8检测细胞增殖活性,通过茜素红染色检测细胞矿化结节形成,通过碱性磷酸酶染色检测细胞碱性磷酸酶活性,通过Western blot检测细胞成骨相关蛋白和TXNIP/TRX信号通路蛋白表达,通过ROS探针检测细胞ROS水平。结果芦丁剂量依赖的促进hUCMSCs增殖,能增加hUCMSCs矿化结节形成及ALP活性;芦丁处理增加hUCMSCs成骨相关蛋白RUNX2和OPN蛋白表达水平,降低hUCMSCs ROS水平和TXNIP蛋白表达,增加TRX蛋白表达。结论芦丁促进hUCMSCs增殖及成骨分化,其机制可能与其抑制TXNIP/TRX-ROS信号通路有关。 展开更多
关键词 芦丁 人脐带间充质干细胞 成骨分化 TXNIP/TRX信号通路 活性氧
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脐带间充质干细胞复合β-磷酸三钙生物陶瓷体内外成骨能力的初步研究 被引量:5
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作者 郭昱成 王菲 周洪 《上海口腔医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期24-30,共7页
目的:观察人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)和支架材料β-磷酸三钙(β-TCP)生物陶瓷复合的体内外成骨情况。方法:在体外构建hUCMSCs和β-TCP的复合物,将细胞以3×105/mL的浓度接种到支架... 目的:观察人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)和支架材料β-磷酸三钙(β-TCP)生物陶瓷复合的体内外成骨情况。方法:在体外构建hUCMSCs和β-TCP的复合物,将细胞以3×105/mL的浓度接种到支架材料上进行复合体构建,并进行电镜观察、特异性免疫荧光染色、MTT、ALP检测。将复合物植入裸鼠体内,进行成骨能力研究。实验分为3组,即植入单纯β-TCP支架组、植入体外成骨诱导2周的hUCMSCs和β-TCP复合物组、单纯植入体外成骨诱导2周的hUCMSCs组。植入后2个月取出标本,进行大体观察、X线片观察和组织学观察。采用SPSS16.0软件包对实验数据进行重复测量随机区组设计的方差分析。结果:hUCMSCs植入支架4h后,即可见细胞在支架上附着,1周后可见细胞在支架中大量增殖,β-TCP具有一定的骨诱导性。复合物植入裸鼠内2个月,hUCMSCs和β-TCP复合组X线密度最高。HE染色显示,2个月后,hUCMSCs和β-TCP复合组见不规则新骨和血管形成,单纯β-TCP组未见明显新骨和血管形成。Masson染色显示,2个月后,hUCMSCs和β-TCP复合组见大量胶原形成,单纯β-TCP组未见明显胶原形成。VG染色显示,2个月后,hUCMSCs和β-TCP复合组孔隙中有大量类骨质及少量骨陷窝形成,单纯β-TCP组未见类骨质形成。结论:hUCMSCs和β-TCP具有良好的生物相容性,两者构建的复合物在植入裸鼠体内2个月时可见新骨及血管化形成。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 Β-TCP 成骨 裸鼠
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玻璃体腔注射HGF⁃MSCs对糖尿病大鼠视网膜HGF表达的影响 被引量:1
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作者 王惠 王俊 +3 位作者 孙乙 于腾飞 朱玉广 朱艳 《山东大学耳鼻喉眼学报》 CAS 2022年第2期72-77,共6页
目的观察玻璃体腔注射肝细胞生长因子基因修饰的人脐带间充质干细胞(HGF-MSCs)对糖尿病大鼠视网膜组织肝细胞生长因子(HGF)表达的影响,探讨HGF-MSCs对大鼠Ⅱ型糖尿病性视网膜病变的作用。方法体外分离、培养人脐带间充质干细胞(hUCMSCs... 目的观察玻璃体腔注射肝细胞生长因子基因修饰的人脐带间充质干细胞(HGF-MSCs)对糖尿病大鼠视网膜组织肝细胞生长因子(HGF)表达的影响,探讨HGF-MSCs对大鼠Ⅱ型糖尿病性视网膜病变的作用。方法体外分离、培养人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)并鉴定。采用感染复数值(MOI)50的慢病毒载体转染hUCMSCs。4周龄SD雄性大鼠,按照随机数字表法分为正常组(8只),糖尿病组(60只),糖尿病组又分为糖尿病对照组、PBS组、MSCs组和HGF-MSCs组(每组15只)。糖尿病组大鼠采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型。建模3个月后对糖尿病组进行后续实验。糖尿病对照组不行特殊治疗,PBS组玻璃体腔注射磷酸盐缓冲液,MSCs组玻璃体腔注射hUCMSCs,HGF-MSCs组玻璃体腔注射HGF-MSCs。干预2、4、6周后行荧光定量PCR检测大鼠视网膜组织HGF mRNA的表达;Western blot检测大鼠视网膜组织HGF的表达。结果培养的脐带间充质干细胞可以诱导分化为成骨细胞、成脂肪细胞。MOI 50的慢病毒成功转染hUCMSCs。大鼠视网膜荧光定量PCR和Western blot结果显示:在同一时间点,与其他组相比,正常组大鼠视网膜的HGF及其mRNA的表达明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。在同一时间点,与其他组相比,HGF-MSCs组大鼠视网膜的HGF及其mRNA的表达明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。不同时间点各组大鼠视网膜HGF及其mRNA的表达差异没有统计学意义(P>0.05)。结论糖尿病大鼠视网膜HGF及其mRNA的表达增加。单纯玻璃体腔注射hUCMSCs,不影响糖尿病大鼠视网膜HGF及其mRNA的表达。玻璃体腔注射HGF修饰的hUCMSCs,可以促进糖尿病大鼠视网膜HGF及其mRNA的表达,可能与HGF相互作用减轻糖尿病视网膜病变的早期病变发展。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 玻璃体腔注射 HGF 慢病毒转染 hucmscs
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不同移植途径对人脐带间充质干细胞防治NOD鼠糖尿病的影响 被引量:4
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作者 李青 谢洪彬 +2 位作者 王云帅 齐晖 李富荣 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期398-402,共5页
目的观察不同移植途径对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)预防非肥胖型糖尿病(NOD)小鼠糖尿病发病的影响并进一步探索其机制。方法通过胰腺包膜下和尾静脉向4周龄雌性NOD小鼠注射hUCMSCs-EGFP/luc,活体成像观察hUCMSCs的分布。动态监测NOD... 目的观察不同移植途径对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)预防非肥胖型糖尿病(NOD)小鼠糖尿病发病的影响并进一步探索其机制。方法通过胰腺包膜下和尾静脉向4周龄雌性NOD小鼠注射hUCMSCs-EGFP/luc,活体成像观察hUCMSCs的分布。动态监测NOD小鼠血糖水平变化以及Treg/Th17细胞变化,在30周龄时处死小鼠进行胰腺炎评级。结果胰腺移植组在30周龄时糖尿病发病率显著低于尾静脉移植组和对照组。2种途径移植组小鼠Treg细胞呈升高趋势,明显高于对照组,而Th17细胞明显低于对照组,2种移植途径组间无明显差异。病理学发现胰腺组胰腺炎评分最低,对照组最高,移植组胰腺炎性损伤明显减轻。结论 hUCMSCs经2种途径移植后,均能明显降低NOD鼠糖尿病的发生率和延缓发病时间,且胰腺移植组效果显著。除hUCMSCs主要通过诱导Treg细胞抑制Th17细胞发挥免疫抑制作用,阻止自身免疫对胰岛β细胞的攻击外,可能与到达胰腺组织的细胞对胰腺β细胞的保护和损伤修复作用也具有一定关系。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 1型糖尿病 TREG细胞 TH17细胞
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人脐带间充质干细胞卵巢原位注射对大鼠卵巢早衰的治疗作用 被引量:4
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作者 吴芸 王皓 +6 位作者 王喆 於洪亮 戴宏健 魏全伟 石放雄 严丽 韩临晓 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2021年第12期2334-2343,共10页
卵巢早衰(POF)是女性不育的主要原因之一,其相关机理复杂,其中涉及自身免疫缺陷。人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)可用于组织再生和修复,因此,该研究旨在探究hUCMSCs在自身组织抗原免疫诱导的大鼠POF中的作用。将不同浓度的hUCMSCs注射入... 卵巢早衰(POF)是女性不育的主要原因之一,其相关机理复杂,其中涉及自身免疫缺陷。人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)可用于组织再生和修复,因此,该研究旨在探究hUCMSCs在自身组织抗原免疫诱导的大鼠POF中的作用。将不同浓度的hUCMSCs注射入诱导的POF大鼠卵巢中,通过评估发情周期、卵泡形态、激素分泌以及颗粒细胞的增殖和凋亡来检查卵巢功能。结果表明,hUCMSCs移植后,大鼠的发情周期恢复正常,卵泡发育得到明显改善。此外,血清17β-雌二醇(E;)浓度,治疗后孕酮(P;)和抗苗勒氏激素(AMH)水平显著上升。hUCMSCs的移植也减少了颗粒细胞的凋亡并促进了颗粒细胞的增殖。而且,上述结果均呈现剂量依赖性。此外,相关基因表达的结果表明,移植hUCMSCs后,POF大鼠卵巢中Bcl-2、AMH和FSHR的表达升高,caspase-3的表达下降。因此,研究结果进一步验证了hUCMSCs促进细胞生长因子释放和增强组织再生的潜在机制,并为干细胞在卵巢早衰治疗中的临床应用提供了理论基础。 展开更多
关键词 卵巢早衰 人间充质干细胞 大鼠 卵巢 原位注射
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SDF-1α/CXCR4生物轴促进静脉移植HUCMSCs在MCAO小鼠体内的迁移和功能恢复 被引量:1
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作者 高志杰 李惠平 王立新 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2021年第12期4452-4459,共8页
目的探讨静脉移植HUCMSCs通过SDF-1α/CXCR4生物轴参与改善脑缺血的作用机制,明确中药通心络胶囊干预后的影响。方法采用随机法将小鼠分组,共4组,每组18只,分别为假手术组(Sham组)、模型组(Model组)、静脉移植组(Vein组)、静脉移植+通... 目的探讨静脉移植HUCMSCs通过SDF-1α/CXCR4生物轴参与改善脑缺血的作用机制,明确中药通心络胶囊干预后的影响。方法采用随机法将小鼠分组,共4组,每组18只,分别为假手术组(Sham组)、模型组(Model组)、静脉移植组(Vein组)、静脉移植+通心络组(Vein+TXL组)。小鼠MCAO模型采用改良线栓法制作;假手术组仅暴露、分离小鼠右侧颈部血管,不做其他操作;其余各组造模方法相同。小鼠脑缺血再灌注72 h通过尾静脉移植1×10^(5)个HUCMSCs,采用灌胃给药方式,静脉移植+通心络组小鼠每天的给药体积为10 mL·kg^(-1),模型组和假手术组给予等量的生理盐水。在移植后1、3、7天对各组小鼠进行取材,参照Longa评分法对小鼠进行神经功能评分,使用TTC染色法测定小鼠脑梗死面积。使用ELISA方法检测SDF-1α的表达,使用Werstern blot方法检测CXCR4的表达。最后采用SPSS 23.0统计软件对实验数据进行分析。结果(1)移植后的第1、3、7天,和Model组相比较,Vein组、Vein+TXL组小鼠神经行为学评分、梗死面积均降低,尤其是移植后第7天,与Model组比较,Vein组、Vein+TXL组神经功能评分、梗死面积差异有统计学意义(P<0.05)。(2)移植后第1、3、7天,与模型组相比较,静脉移植组、静脉移植+通心络组SDF-1α表达在移植后第1、3天升高,在第7天略降低,差异有统计学意义(P<0.05);移植后第1、3、7天,与Model组相比,Vein组、Vein+TXL组CXCR4表达在移植后第1、3天升高,在移植后第7天略降低,中药通心络干预后具有促进作用。结论静脉移植HUCMSCs可明显降低小鼠神经功能评分、减少脑梗死面积,上调SDF-1、CXCR4的表达,促进移植HUCMSCs向缺血组织迁移,修复神经功能缺损;静脉移植HUCMSCs可能通过SDF-1α/CXCR4生物轴参与改善脑缺血,中药通心络干预后具有促进作用。 展开更多
关键词 脑缺血 SDF-1Α/CXCR4 hucmscs 静脉移植 通心络
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刺头复叶耳蕨总黄酮促进脐带间充质干细胞成骨分化 被引量:1
8
作者 严晨 殷嫦嫦 +1 位作者 王子瑶 殷明 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期557-562,共6页
目的研究刺头复叶耳蕨总黄酮(total flavonoids from arachniodes exilis,TFAE)在人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UCMSCs)成骨分化中的作用。方法采用组织块贴壁法分离培养h UCMSCs,取P3代细胞进行... 目的研究刺头复叶耳蕨总黄酮(total flavonoids from arachniodes exilis,TFAE)在人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UCMSCs)成骨分化中的作用。方法采用组织块贴壁法分离培养h UCMSCs,取P3代细胞进行实验,不同浓度的TFAE处理h UCMSCs,CCK-8法检测细胞活性;AMP法测定碱性磷酸酶(ALP)活力,茜素红染色检测钙结节形成;RT-PCR检测成骨相关基因I型胶原酶a1(collagen type I alpha1,Col1a1)、骨桥蛋白(osteopotin,OPN)、Runx2、Osterix(Osx)mRNA表达水平,Western blot检测Col1a1、OPN蛋白表达水平。结果在一定浓度范围内,TFAE(1、5 mg·L^(-1))促进细胞增殖;钙结节数量增多;ALP活力增强,成骨相关基因Col1a1、OPN、Runx2、OsxmRNA及Col1a1、OPN蛋白表达水平上调。结论一定浓度的TFAE促进h UCMSCs增殖及成骨分化。 展开更多
关键词 TFAE hucmscs 增殖 COL1A1 OPN 成骨分化
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磷酸钙骨水泥复合物/脐带间充质干细胞凝胶构建组织工程骨 被引量:3
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作者 赵亮 Hockin Xu +1 位作者 王健 史占军 《中华关节外科杂志(电子版)》 CAS 2012年第2期55-58,共4页
目的构建新型可注射强化型磷酸钙骨水泥复合物/脐带间充质干细胞凝胶组织工程骨,探讨其力学性能,细胞活性和成骨作用。方法选用第四代hUCMSCs,1.2%海藻酸钠水凝胶构建hUCMSCs水凝胶微球。高温煅烧钙/磷比约为1.9的磷酸氢钙和碳酸钙混合... 目的构建新型可注射强化型磷酸钙骨水泥复合物/脐带间充质干细胞凝胶组织工程骨,探讨其力学性能,细胞活性和成骨作用。方法选用第四代hUCMSCs,1.2%海藻酸钠水凝胶构建hUCMSCs水凝胶微球。高温煅烧钙/磷比约为1.9的磷酸氢钙和碳酸钙混合物,按摩尔质量比以1:1混合制备CPC粉末。15%Chitosan,8mm长度可吸收纤维用于提高CPC复合物力学强度。实验组分为四组:(1)单纯hUCMSCs微球;(2)CPC+hUCMSCs微球;(3)CPC+chitosan+hUCMSCs微球;(4)CPC+chitosan+可吸收纤维+hUCMSCs微球,分别检测力学性能,细胞活性和成骨作用。结果新型组织工程骨力学性能显著增强,抗弯曲强度提高到(11.7±2.1)MPa,弹性模量提高到(2.0±0.4)GPa,断裂功提高到(1.65±0.66)kj/m2(P<0.05)。hUCMSCs的ALP活性第7天时明显增高,第14天时达峰,第21天时有所减弱,各组间比较无明显统计学差异(P>0.1)。第7天时,所有实验组中的hUCMSCs均见少量矿物合成。第14天和第21天时,矿物合成数量明显增多。hUCMSCs中ALP基因表达培养第1天最低,第4天达峰,第8天时稍减弱。OC基因表达第8天达峰。结论构建完成新型可注射强化型磷酸钙骨水泥/脐带间充质干细胞凝胶构建组织工程骨。水凝胶微球中hUCMSCs在CPC中具有良好的成骨作用。CPC-chitosan-可吸收纤维组织工程骨力学性能满足松质骨力学要求,支持水凝胶微球中hUCMSCs的细胞活性和成骨作用。为组织工程骨研究和临床应用提供新思路和新方法。 展开更多
关键词 磷酸钙类 脐带间充质干细胞 骨和骨组织 组织工程
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不同浓度hUCMSCs对重度烧伤大鼠急性肺损伤的保护作用初探 被引量:3
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作者 王宇 胡晓红 +2 位作者 刘玲英 郁永辉 柳亚男 《现代生物医学进展》 CAS 2017年第24期4626-4630,4683,共6页
目的:通过气管内给药的方法比较不同浓度人脐带间充质干细胞气管内移植对重度烧伤致急性肺损伤大鼠的保护作用。方法:建立50%面积全层烫伤大鼠模型,将75只成熟雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(A组)、生理盐水组(B组)、1×10~5HUCM... 目的:通过气管内给药的方法比较不同浓度人脐带间充质干细胞气管内移植对重度烧伤致急性肺损伤大鼠的保护作用。方法:建立50%面积全层烫伤大鼠模型,将75只成熟雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(A组)、生理盐水组(B组)、1×10~5HUCMSCs移植组(C)、5×10~5HUCMSCs移植组(D)、1×10~6HUCMSCs移植组(E),每组15只,B组及移植组(C、D、E组)烫伤后立即液体复苏,B组烫伤后气管内滴注0.2 m L生理盐水,移植组气管内滴注不同浓度h UCMSCs,分别在移植后的天第1、3、7天留取大鼠肺组织标本,HE染色观察肺组织病理变化,MPO、CD68免疫组化染色观察肺组织中性粒细胞及肺巨噬细胞阳性表达情况。结果:肺组织病理切片可见:A组各时间点肺泡腔清晰,肺泡结构完整,偶见少量炎性细胞。烫伤后第1天,B组及移植组(C、D、E组)肺泡间隔增厚,大量红细胞漏出及炎性细胞浸润。烫伤后第3天,各组肺泡结构较前清晰,炎性细胞浸润及红细胞漏出较第一天减少,与B组相比移植组肺泡结构清晰,间隔变薄,移植组各组间改变不明显。烫伤后第7天,移植组肺组织损伤较B组明显减轻,E组损伤肺组织恢复最为明显。MPO染色显示:与A组相比,阳性细胞数在烫伤后第1天明显增加(P<0.05),但各组之间无明显差异。在烫伤后第3天,与B组相比,移植组阳性细胞数减少明显(P<0.05),E组阳性细胞减少明显(P<0.05);在烫伤后第7天E组阳性细胞数量较其他组显著减少(P<0.05)。CD68染色显示在烫伤后第1天各组阳性细胞显著增多(P>0.05),在烫伤后第3天移植组阳性细胞数减少(P<0.05),但各移植组间无明显差异,烫伤后第7天移植组阳性细胞数量较B组明显减少(P<0.05),E组较C、D组阳性细胞减少有显著差异(P<0.05)。结论:气管内移植HUCMSCs能修复重度烧伤后损伤的肺组织,减少肺组织中性粒细胞及巨噬细胞的浸润,且1×10~6HUCMSCs移植效果更明显。 展开更多
关键词 急性肺损伤 人脐带间充质干细胞 烫伤 移植
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The Use of Umbilical Stem Cells
11
作者 Peter Cassar Renald Blundell 《Open Journal of Pathology》 2016年第1期41-56,共16页
The use of umbilical stem cells in tissue engineering is gaining in popularity. Some of the various uses of these umbilical stem cells are highlighted in this review, focusing mainly on their cartilage, bone and neuro... The use of umbilical stem cells in tissue engineering is gaining in popularity. Some of the various uses of these umbilical stem cells are highlighted in this review, focusing mainly on their cartilage, bone and neuronal differentiating abilities. The review will also shed light on the application of these abilities in human clinical trials to repair, protect and treat diseases, e.g. neurodegenerative diseases such as Alzheimer’s and cerebral palsy. A side by side comparison with bone marrow mesenchymal stem cells (current gold standard for tissue engineering) will give a better idea of the viability and efficiency of umbilical stem cell use. 展开更多
关键词 hucmscs BONE CARTILAGE NEURONAL
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不同剂量人脐带间充质干细胞对1型糖尿病大鼠的影响 被引量:2
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作者 祁兵 翁孝刚 +1 位作者 王涛 曹毓磷 《中国卫生标准管理》 2014年第9期60-61,共2页
本文通过实验研究移植不同剂量hUCMSCs对1型糖尿病大鼠血糖的影响,寻找hUCMSCs的最高有效剂量及最低有效剂量,探讨不同剂量干细胞hUCMSCs与血糖之间的关系,能否修复受损大鼠胰腺组织。结果表明有效剂量的范围为5×105~5×106,... 本文通过实验研究移植不同剂量hUCMSCs对1型糖尿病大鼠血糖的影响,寻找hUCMSCs的最高有效剂量及最低有效剂量,探讨不同剂量干细胞hUCMSCs与血糖之间的关系,能否修复受损大鼠胰腺组织。结果表明有效剂量的范围为5×105~5×106,在该范围内血糖随着hUCMSCs的剂量上升而下降,血糖与hUCMSCs存在剂量依赖关系。 展开更多
关键词 1型糖尿病 hucmscs 量效关系
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胰岛素样生长因子-I对人脐带间充质干细胞增殖影响的量效关系 被引量:1
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作者 徐斌 唐军 刘毅 《中国美容医学》 CAS 2011年第8期1247-1250,共4页
目的:探讨不同剂量胰岛素样生长因子-I对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)增殖的影响及其量效关系。方法:取第2代hUCMSCs接种于96孔板,分为7组(G1,G2…,G7)。前5组分别加入含不同剂量IGF-I(40,60,80,100,120μg/L)的体积分数为0.02的胎牛血... 目的:探讨不同剂量胰岛素样生长因子-I对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)增殖的影响及其量效关系。方法:取第2代hUCMSCs接种于96孔板,分为7组(G1,G2…,G7)。前5组分别加入含不同剂量IGF-I(40,60,80,100,120μg/L)的体积分数为0.02的胎牛血清培养液;第6组加入体积分数为0.05的胎牛血清培养液做为阳性对照,第7组加入体积分数为0.02的胎牛血清培养液做为阴性对照,采用MTT法观察不同剂量的IGF-I对细胞增殖的影响。结果:①第3天、第6天,G1组、G2组和G7组之间差异无显著性(P>0.05);G3组、G4组和G5组之间差异无显著性(P>0.05);②第3天,G6组增殖高于G1组与G2组,低于G3组、G4组和G5组,差异有显著性(P<0.000或<0.006);第4天,G6组增殖高于其余各组,差异有显著性(P<0.000或<0.006)。③第3天、第6天,G1组、G2组和G6组低于G3组,G4组,G5组,差异有显著性(P<0.000);G6组增殖高于G7组,统计分析差异有显著性(P<0.000)。结论:外源性IGF-I对hUCMSCs增殖的促进作用,随IGF-I浓度增高而有增强趋势,100μg/L为其较适合浓度,为实现hUCMSCs体外快速扩增提供适宜的条件。 展开更多
关键词 hUMSCs IGF-I 组织工程
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人脐带间质干细胞的CM-Dil标记及其移植在急性肾损伤大鼠体内的示踪研究 被引量:1
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作者 徐会涛 周颖 +5 位作者 王冰莹 毛飞 徐会娟 许文荣 朱伟 钱晖 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2012年第3期209-212,共4页
目的:探讨人脐带间质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hucMSCs)用CM-Dil染料标记之后生物学特性及体内定位示踪情况。方法:采用脐带组织块贴壁培养法分离人脐带间质干细胞,用CM-Dil染料标记第3代hucMSCs;采用细胞... 目的:探讨人脐带间质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hucMSCs)用CM-Dil染料标记之后生物学特性及体内定位示踪情况。方法:采用脐带组织块贴壁培养法分离人脐带间质干细胞,用CM-Dil染料标记第3代hucMSCs;采用细胞计数法分析CM-Dil标记后hucMSCs的生长变化情况;通过活体成像仪观察CM-Dil染料标记的hucMSCs移植于急性肾损伤大鼠后的体内定位。结果:CM-Dil染料标记hucMSCs的效率很高;标记后的hucMSCs生长增殖能力没有发生明显变化;体内示踪可以观察到标记的hucMSCs。结论:CM-Dil标记不影响hucM-SCs的生长增殖特征,并且能够在体内示踪,为后续研究提供了实验基础。 展开更多
关键词 人脐带间质干细胞 CM-Dil染料 体内示踪 急性肾损伤
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人脐带间充质干细胞分离鉴定及向角质形成细胞的诱导分化 被引量:1
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作者 魏奥 张东 +4 位作者 刘乐 刘春霞 曹俊伟 孟凡华 张焱如 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2019年第4期695-701,共7页
该研究从人脐带华通胶中获得了人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells, hUCMSCs),通过基因鉴定和分化能力检测其纯度,建立hUCMSCs系。检测结果表明,获得的hUCMSCs表达转录因子SOX2、间充质干细胞表面标志物基... 该研究从人脐带华通胶中获得了人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells, hUCMSCs),通过基因鉴定和分化能力检测其纯度,建立hUCMSCs系。检测结果表明,获得的hUCMSCs表达转录因子SOX2、间充质干细胞表面标志物基因CD29、CD90和CD105,不表达造血系细胞表面标志物基因CD34、CD45及人白细胞抗原基因HLA-DR。hUCMSCs可以向神经细胞和成骨细胞分化,证明其多向分化潜能。P3代hUCMSCs向角质细胞分化后,免疫荧光染色鉴定结果为阳性,实时荧光定量PCR检测表达角蛋白CK19基因,随着诱导分化时间的增加而升高。该实验建立了hUCMSCs系和角质形成细胞的诱导分化体系,为后续研究奠定基础。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 诱导分化 角质形成细胞 多向分化潜能
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西藏小型猪胰岛素样生长因子-1真核表达质粒在脐带间充质干细胞中的表达 被引量:1
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作者 田雨光 王玉珏 +1 位作者 罗烘权 岳敏 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第9期82-84,87,245,共5页
为了明确西藏小型猪胰岛素样生长因子-1(IGF-1)真核表达载体在人脐带间充质干细胞中的表达情况,试验采用RT-PCR方法从西藏小型猪肝脏中克隆IGF-1基因,连接在真核表达质粒PIRES2-EGFP中,用脂质体转染法将重组质粒PIRES2-EGFP-IGF-1转... 为了明确西藏小型猪胰岛素样生长因子-1(IGF-1)真核表达载体在人脐带间充质干细胞中的表达情况,试验采用RT-PCR方法从西藏小型猪肝脏中克隆IGF-1基因,连接在真核表达质粒PIRES2-EGFP中,用脂质体转染法将重组质粒PIRES2-EGFP-IGF-1转染人脐带间充质干细胞,利用实时荧光定量PCR技术检测细胞的IGF-1表达情况。结果表明:转染了质粒PIRES2-EGFP-IGF-1的HUCMSCs中的IGF-1表达明显上调。 展开更多
关键词 西藏小型猪 胰岛素样生长因子-1 真核表达质粒 脐带间充质干细胞 荧光定量PCR
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脐带间质干细胞心肌样分化中干细胞标志物的表达
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作者 钱茜 徐哲 +7 位作者 史云燕 沈俐 孙靖 张徐 毛飞 朱伟 钱晖 许文荣 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2011年第3期185-189,共5页
目的:探讨人脐带间质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hucMSCs)在体外特定条件下是否可以定向分化为心肌样细胞及干细胞标志物的表达变化。方法:采用脐带组织块贴壁培养方法分离人脐带间质干细胞,用第2代hucMSC进... 目的:探讨人脐带间质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hucMSCs)在体外特定条件下是否可以定向分化为心肌样细胞及干细胞标志物的表达变化。方法:采用脐带组织块贴壁培养方法分离人脐带间质干细胞,用第2代hucMSC进行体外心肌细胞诱导分化;采用RT-PCR、透射电镜等鉴定心肌细胞,流式细胞术、实时荧光定量PCR及蛋白质印迹分析干细胞相关基因及蛋白表达。结果:RT-PCR显示诱导组细胞转录心肌钙蛋白T、β-肌球蛋白重链、心房利钠多肽水平增加;在透射电镜下,诱导后细胞具有条索状肌丝结构;流式细胞仪检测未见细胞表面标志改变;而实时荧光定量PCR及蛋白质印迹显示干细胞相关基因及蛋白Nanog、Oct4、Sox2、Sall4在5-氮胞苷(5-azacytidine,5-Aza)诱导后的hucMSCs中表达显著下降。结论:人脐带间质干细胞体外经5-氮胞苷诱导可定向分化为心肌样细胞,其分化可能与干细胞相关基因及蛋白表达下调有关,为深入研究hucMSCs心肌分化机制奠定了实验基础。 展开更多
关键词 人脐带间质干细胞 心肌样细胞 分化 干细胞标志物
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携带HGF基因的人脐带血干细胞复合软骨脱细胞基质移植对兔膝关节软骨缺损修复的生物力学影响
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作者 汪玉海 金丽娟 《宁夏医科大学学报》 2015年第11期1266-1269,封3,共5页
目的评估携带腺病毒介导的人肝细胞生长因子基因(Ad-HGF)的人脐带血干细胞复合软骨脱细胞基质移植对兔膝关节软骨缺损修复后的生物力学影响。方法利用密度梯度法分离脐血干细胞,培养传代。将构建的Ad-HGF转染脐血干细胞,接种在软骨脱细... 目的评估携带腺病毒介导的人肝细胞生长因子基因(Ad-HGF)的人脐带血干细胞复合软骨脱细胞基质移植对兔膝关节软骨缺损修复后的生物力学影响。方法利用密度梯度法分离脐血干细胞,培养传代。将构建的Ad-HGF转染脐血干细胞,接种在软骨脱细胞基质,共同培养。建立兔关节软骨缺损模型(32只,共64条膝)。随机分为4组:A.Ad-HGF转染脐血干细胞组(n=18条膝);B.Ad-HGF转染脐血干细胞复合脱细胞基质组(n=18条膝);C.脱细胞基质组(n=18条膝);D.空白对照组(n=10条膝)。将生长旺盛的Ad-HGF修饰的脐血干细胞(3×106细胞,0.5m L)、接种有Ad-HGF修饰的脐血干细胞(3×106)的软骨脱细胞基质//软骨脱细胞基质和0.5m L生理盐水根据不同组别分别移植于关节软骨缺损处。术后4、8、12周,评价关节活动度,测定再生关节软骨面积以及生物力学。结果在各观察时间点,B组兔关节肿胀度较轻,且关节活动度明显优于其他组(P<0.01)。术后随着时间推移,软骨缺损处逐渐被新生组织覆盖。12周,B组兔膝关节再生软骨的表面积已基本覆盖造模缺损区,与其余三组比较差异有统计学意义(P<0.01)。各组实验兔的软骨缺损处的剪切强度,弹性模量随着时间的推移,逐渐升高,剪切应变随着时间推移,逐渐降低,B组与其余三组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论携带HGF基因的人脐带血干细胞复合软骨脱细胞基质移植可以提高兔关节软骨缺损后愈合的质量,缩短愈合时间,为临床软骨损伤的治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 关节软骨缺损 人脐带血干细胞 肝细胞生长因子 软骨脱细胞基质 生物力学
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木犀草素诱导人脐带间充质细胞化为神经细胞潜能的研究
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作者 周天秀 陆华 +1 位作者 郭丽 任志红 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期5175-5177,共3页
目的:探讨木犀草素诱导脐带间充质细胞(h UCMSCs)分化为神经细胞的潜能。方法:采用终浓度为10μg/m L中药单体木犀草素及0.5‰DMSO对人h UCMSCs进行诱导。显微镜下观察细胞形态变化,细胞免疫荧光技术检测神经细胞细胞标记物nestin和GFA... 目的:探讨木犀草素诱导脐带间充质细胞(h UCMSCs)分化为神经细胞的潜能。方法:采用终浓度为10μg/m L中药单体木犀草素及0.5‰DMSO对人h UCMSCs进行诱导。显微镜下观察细胞形态变化,细胞免疫荧光技术检测神经细胞细胞标记物nestin和GFAP的表达,实时荧光定量PCR测定神经分化相关NSE、nestin、GFAP、MAP2、NEFH 5种基因的表达量变化情况,分析两组数据。结果:木犀草素诱导人h UCMSCs第6天,显微镜下发现胞核增大,细胞呈分叉状改变,细胞伸出较多细长的突起,呈现出神经细胞形态样改变;细胞免疫荧光技术检测显示,实验组大部分细胞神经标记物nestin、GFAP表达阳性,平均荧光分别强度为2.64、4.72,对照组仅有少量细胞nestin、GFAP表达阳性,平均荧光强度分别为0.24、0.46;实时荧光定量PCR结果显示,木犀草素对nestin、GFAP、MAP2、NEFH m RNA的表达有明显影响(P<0.05),对NSE m RNA的表达影响不明显。结论:木犀草素具有诱导h UCMSCs向神经细胞方向分化的潜能。 展开更多
关键词 木犀草素 脐带间充质细胞 神经细胞 分化
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人脐带间充质干细胞移植修复大鼠的卵巢早衰 被引量:8
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作者 谭丽 毛熙光 +1 位作者 钟影 刘敬 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第10期85-91,共7页
目的探讨人脐带间充质干细胞(h UCMSCs)移植修复卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)大鼠卵巢功能的作用机制。方法将30只SPF级SD雌性大鼠随机选取10只作为对照组,其他20只大鼠建立POF模型,模型大鼠分为模型组(10只)和h UCMSCs移植... 目的探讨人脐带间充质干细胞(h UCMSCs)移植修复卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)大鼠卵巢功能的作用机制。方法将30只SPF级SD雌性大鼠随机选取10只作为对照组,其他20只大鼠建立POF模型,模型大鼠分为模型组(10只)和h UCMSCs移植组(10只)。观察各组大鼠卵泡情况和卵巢组织超微结构的变化,采用ELISA法检测血清中E2、FSH、AMH、ROS、8-OHdG水平,采用免疫组化和Western blot检测大鼠SOD1及UCP2的蛋白变化。结果 HE染色显示:模型组与对照组比较闭锁卵泡数量上升,而生长卵泡数量下降(均P <0.05),h UMSCs移植组与模型组比较闭锁卵泡数量下降,而生长卵泡数量上升(均P<0.05);卵巢电镜观察结果显示:h UMSCs移植治疗后,大鼠卵巢细胞出现细胞核,核膜逐渐恢复,出现少量细胞器;ELISA结果显示:h UCMSCs移植组血清LH、FSH水平、ROS和8-OHdG生成量较模型组明显下降(均P<0.05),而与对照组、模型组比较,h UCMSCs移植组E2水平明显上升(P<0.05);免疫组化结果显示:与对照组比较,模型组免疫组化UCP-2、SOD1阳性细胞数增加,而h UCMSCs移植组UCP-2、SOD1阳性细胞数较模型组减少;Western blot结果显示:模型组大鼠卵巢组织中SOD1、UCP-2蛋白表达较对照组显著增加(P<0.05),经过h UCMSCs移植治疗后,SOD1、UCP-2蛋白水平较模型组明显下降(P<0.05)。结论 h UMSCs移植可通过降低SOD1及UCP-2的表达,从而降低氧化应激反应,最终达到修复卵巢功能的作用。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 卵巢早衰 线粒体
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