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补肾舒脊颗粒对hBMSC软骨内成骨过程中Wnt/β-catenin信号通路的影响 被引量:9
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作者 杨文雪 金玥 +4 位作者 周童亮 夏启胜 陈志华 孔维萍 阎小萍 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期512-516,共5页
目的:探讨补肾舒脊颗粒对hBMSC软骨内成骨过程中Wnt/β-catenin信号通路的作用。方法:原代hBMSC传至第3代后分为5组:补肾舒脊颗粒高、中、低剂量组,西药组,空白对照组,进行软骨细胞诱导分化,运用ELISA法检测细胞上清液中DKK-1表达,Weste... 目的:探讨补肾舒脊颗粒对hBMSC软骨内成骨过程中Wnt/β-catenin信号通路的作用。方法:原代hBMSC传至第3代后分为5组:补肾舒脊颗粒高、中、低剂量组,西药组,空白对照组,进行软骨细胞诱导分化,运用ELISA法检测细胞上清液中DKK-1表达,Western Blot和荧光定量PCR检测SOST、Wnt5a和β-catenin蛋白和基因表达。结果:与空白对照组比较,中药中、高剂量组DKK-1、SOST蛋白水平显著增高(P<0.05,P<0.01);与西药组比较,中药中、高剂量β-catenin蛋白降低(P<0.05)。与空白对照组比较,中药低、中、高剂量组及西药组SOST mRNA水平升高(P<0.05),中药中、高剂量组及西药组Wnt5a mRNA水平下降(P<0.05),中药低、中、高剂量组β-catenin mRNA水平下降(P<0.05);与西药组比较,中药高剂量组SOST mRNA水平升高(P<0.05),β-catenin mRNA水平降低(P<0.05)。结论:补肾舒脊颗粒可能能够抑制hBMSC软骨内成骨过程中的Wnt/β-catenin信号通路。 展开更多
关键词 强直性脊柱炎 补肾舒脊颗粒 hbmsc WNT/Β-CATENIN信号通路
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人骨髓间充质干细胞移植对辐射NOD/SCID小鼠造血重建的影响 被引量:5
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作者 胡佳乐 徐立军 +6 位作者 徐之明 陈海飞 沈红石 李征洋 唐杰庆 王静 吴天勤 《实用癌症杂志》 2013年第2期111-113,共3页
目的探讨人骨髓间充质干细胞(hBMSC)在造血干细胞移植后造血重建中的作用。方法分离培养人骨髓来源的间充质干细胞(hBMSC)和人脐血CD34+造血干/祖细胞(UCB HSC),作为供体细胞。6只NOD/SCID小鼠作为正常对照组。24只NOD/SCID小鼠经60Co... 目的探讨人骨髓间充质干细胞(hBMSC)在造血干细胞移植后造血重建中的作用。方法分离培养人骨髓来源的间充质干细胞(hBMSC)和人脐血CD34+造血干/祖细胞(UCB HSC),作为供体细胞。6只NOD/SCID小鼠作为正常对照组。24只NOD/SCID小鼠经60Coγ射线照射,随机平均分成4组。阴性对照组:6只,不输入任何细胞;实验1组:输入UCB HSC;实验2组:输入UCB HSC和hBMSC(低剂量);实验3组:输入UCB HSC和hBMSC(高剂量)。照射后4 h内从尾静脉输入供体细胞。移植后观察各组小鼠的存活情况和形态特征;计数外周血单个核细胞(MNC)总数;采用流式细胞仪检测供体骨髓人源细胞的嵌合比例。结果阴性对照组和实验1组小鼠均于2周内死亡,骨髓病理检查结果提示小鼠死于骨髓衰竭。实验2、3组小鼠均保持良好的生存状态,皮肤黏膜无溃烂、出血,毛发无缺损。第3周,实验3组小鼠外周血MNC数量高于实验2组小鼠(P<0.01)。第6周,实验2、3组小鼠的外周血均检测出供体细胞,实验3组小鼠人源细胞嵌合比例高于实验2组小鼠(P<0.05)。结论 NOD/SCID小鼠经60Coγ射线照射后,联合输入hBMSC和UCB HSC,可明显促进造血干细胞移植后造血重建,且不增高移植物抗宿主病的发生率。 展开更多
关键词 人骨髓间充质干细胞 NOD/SCID小鼠
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3种血小板生成的关键因子共转染人骨髓基质细胞的研究 被引量:1
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作者 林放 王甜甜 +5 位作者 王世春 孟强 尹智平 陆华 蒋天伦 赵树铭 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期207-212,共6页
目的构建TPO-pEGFP-N1、IL-6-pcDNA3.1(+)、IL-11-pcDNA3.1(-)3个真核表达载体,并观察其在共转染的人骨髓基质细胞中的表达情况。方法应用基因重组技术,构建TPO-pEGFP-N1、IL-6-pcDNA3.1(+)、IL-11-pcDNA3.1(-)3个真核表达载体,在脂质... 目的构建TPO-pEGFP-N1、IL-6-pcDNA3.1(+)、IL-11-pcDNA3.1(-)3个真核表达载体,并观察其在共转染的人骨髓基质细胞中的表达情况。方法应用基因重组技术,构建TPO-pEGFP-N1、IL-6-pcDNA3.1(+)、IL-11-pcDNA3.1(-)3个真核表达载体,在脂质体介导下将其导入体外培养的人骨髓基质细胞内,24 h后观察TPO、IL-6、IL-11瞬时表达情况、蛋白含量及表达,并与未转染组、空载体转染组做对比。结果 1)酶切及测序结果均可证实TPO-pEGFP-N1、IL-6-pcDNA3.1(+)、IL-11-pcDNA3.1(-)3个真核表达载体的正确性。2)细胞转染24 h后,荧光显微镜下可观察到pEGFP-N1的表达,25%细胞发出绿色荧光;免疫细胞化学染色检测出IL-6及IL-11转染后能在细胞内表达。3)转染48 h后,Western blot检测出骨髓基质细胞内TPO、IL-6及IL-11的蛋白表达量。结论 TPO、IL-6、IL-11这3个基因可共转染人骨髓基质细胞,并在细胞内有效表达。 展开更多
关键词 真核表达载体 血小板相关因子 TPO IL-6 IL-11 骨髓基质细胞 共转染
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缺氧条件下CXCL13通过MAPK信号通路促进人骨髓间充质干细胞增殖和自噬 被引量:6
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作者 李永涛 王璐璐 +2 位作者 姚立杰 孙石柱 沈雷 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期211-216,共6页
目的探索CXC趋化因子配体13(CXCL13)对人骨髓间充质干细胞(hBMSC)自噬和增殖的影响及机制。方法 hBMSC分为对照组、缺氧组、 CXCL13处理组、 CXCL13和SB203580的联合处理组。除对照组外,其余各组均在920 mL/L N_2、 30 mL/L O_2和50 mL/... 目的探索CXC趋化因子配体13(CXCL13)对人骨髓间充质干细胞(hBMSC)自噬和增殖的影响及机制。方法 hBMSC分为对照组、缺氧组、 CXCL13处理组、 CXCL13和SB203580的联合处理组。除对照组外,其余各组均在920 mL/L N_2、 30 mL/L O_2和50 mL/L CO_2建立的细胞缺氧模型下进行培养。缺氧组不进行任何处理, CXCL13处理组给予50 ng/mL CXCL13重组蛋白刺激,联合处理组则预先添加20μmol/L丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)抑制剂SB203580,培养30 min后,再以50 ng/mL CXCL13刺激。分别采用噻唑蓝(MTT)法检测hBMSC增殖活性, annexinⅤ-FITC/PI双标记结合流式细胞术检测hBMSC的凋亡, Western blot法检测hBMSC的核因子κB(NF-κB)、 beclin-1蛋白水平, ELISA检测细胞裂解液自噬相关蛋白7(ATG7)的含量。结果与缺氧组及联合处理组相比, CXCL13处理组hBMSC的细胞增殖活性、 beclin-1及NF-κB蛋白水平均升高、凋亡率明显降低;细胞裂解液ATG7水平升高。结论缺氧环境下, CXCL13通过MAPK/NF-κB信号通路促进hBMSC自噬和增殖。 展开更多
关键词 缺氧 CXC趋化因子配体13(CXCL13) 人骨髓间充质干细胞(hbmsc) 自噬 细胞增殖 MAPK/NF-kB通路
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神经营养因子3增强脂多糖刺激的人骨髓间充质干细胞的成骨能力 被引量:4
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作者 张善强 金海峰 +2 位作者 姚立杰 邓凤春 沈雷 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期47-52,共6页
目的探讨神经营养因子3(NT-3)在炎症环境下对人骨髓间充质干细胞(hBMSC)的保护及促进hBMSC向成骨细胞分化的能力。方法采用脂多糖(LPS)建立细胞炎症模型,未进行任何刺激的hBMSC为炎症对照组;以100 ng/m L人NT-3重组蛋白刺激的hBMSC为NT-... 目的探讨神经营养因子3(NT-3)在炎症环境下对人骨髓间充质干细胞(hBMSC)的保护及促进hBMSC向成骨细胞分化的能力。方法采用脂多糖(LPS)建立细胞炎症模型,未进行任何刺激的hBMSC为炎症对照组;以100 ng/m L人NT-3重组蛋白刺激的hBMSC为NT-3组;若先用100 mmol/L恩波酸吡维铵(PP)作用12 h,再添加100 ng/m L人NT-3重组蛋白刺激者为Wnt抑制剂组,常规条件下培养的hBMSC为正常对照组,每组均进行成骨细胞诱导实验。利用CCK-8法检测hBMSC的增殖情况、异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测hBMSC的凋亡,ELISA检测hBMSC核心结合因子runt相关转录因子2(RUNX2)、碱性磷酸酶(ALP)含量、茜素红染色检测钙结节形成情况。结果与炎症对照组相比,NT-3组的hBMSC增殖活性明显增强,细胞凋亡显著降低,且NT-3组的RUNX2、ALP等蛋白含量或茜素红染色强度均明显增加。与NT-3组相比,Wnt抑制剂组的hBMSC增殖活性降低,细胞凋亡增加,RUNX2、ALP等蛋白含量或茜素红染色强度均明显降低。结论 NT-3具有保护hBMSC抗炎症损伤的作用,并促进hBMSC向成骨细胞分化。 展开更多
关键词 神经营养因子3(NT-3) 人骨髓间充质干细胞 成骨分化 炎症
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骨组织工程中人骨髓间质干细胞动态种植和静态种植的比较研究 被引量:1
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作者 齐欣 刘建国 +1 位作者 常颖 徐莘香 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第1期175-179,共5页
分别采用动态种植(旋转烧瓶法)和静态种植方法种植人骨髓间质干细胞,于种植后的两周内测定细胞-载体构件中DNA含量;利用组织学光镜和扫描电镜观察细胞的分布情况;运用荧光标记RT-PCR技术测定相关成骨基因的表达。构件中DNA含量测定表明... 分别采用动态种植(旋转烧瓶法)和静态种植方法种植人骨髓间质干细胞,于种植后的两周内测定细胞-载体构件中DNA含量;利用组织学光镜和扫描电镜观察细胞的分布情况;运用荧光标记RT-PCR技术测定相关成骨基因的表达。构件中DNA含量测定表明,对于静态种植,当初始种植密度为每载体400×103(8.9×104/mm3)时,DNA的含量达到最高;在此基础上提高初始种植密度,并不能进一步提高构件DNA含量。光镜和扫描电镜观察可见动态种植后人骨髓间质干细胞在载体中的分布相对均匀,静态种植后细胞在载体中出现聚集现象;荧光标记RT-PCR证明,体外构件培养两周后,动态种植后的细胞-载体构件中有较多的成骨基因表达。提示人骨髓间质干细胞的静态种植效率较低;动态种植是一种优于静态种植的可行方法。 展开更多
关键词 组织工程 骨再生 人骨髓间质干细胞 动态种植
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神经营养因子-3在低氧环境中促进人骨髓间充质干细胞增殖
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作者 张善强 姚立杰 +3 位作者 李宇 邓凤春 金海峰 沈雷 《中外医疗》 2018年第6期3-7,共5页
目的探讨神经营养因子-3(NT-3)在低氧环境中对人骨髓间充质干细胞(hBMSC)增殖能力的影响。方法在齐齐哈尔医学院分子生物学研究室利用三气培养体系建立低氧体外细胞培养模型,选取2016年5月购买的hBMSC,在低氧环境下,未行任何刺激的hBMS... 目的探讨神经营养因子-3(NT-3)在低氧环境中对人骨髓间充质干细胞(hBMSC)增殖能力的影响。方法在齐齐哈尔医学院分子生物学研究室利用三气培养体系建立低氧体外细胞培养模型,选取2016年5月购买的hBMSC,在低氧环境下,未行任何刺激的hBMSC为低氧对照组;用100 ng/mL人NT-3重组蛋白刺激的hBMSC为NT-3组;先以MK2206作用30 min,再以NT-3刺激的hBMSC为Akt抑制剂组;正常氧浓度条件下培养的hBMSC为常氧对照组,各组均行成骨诱导实验21 d。分别用噻唑蓝细胞增殖、Western blot、酶联免疫吸附试验(ELISA)等实验检测各组细胞增殖、凋亡,及VEGF和BMP-1等蛋白的表达。结果与低氧对照组相比,NT-3组hBMSC增殖OD值(1.438±0.116)明显提高差异有统计学意义(P<0.01),NT-3组VEGF及BMP-1蛋白含量(1.704±0.132)ng/mL;(1.794±0.098)ng/mL较低氧对照组均有增高差异有统计学意义(P<0.01);相对于NT-3组,Akt抑制剂组hBMSC增殖OD值(0.927±0.103)降低差异有统计学意义(P<0.01),且Akt抑制剂组VEGF和BMP-1蛋白含量(1.428±0.205)ng/mL;(1.157±0.102)ng/mL均低于NT-3组差异有统计学意义(P<0.01)。结论 NT-3可提高hBMSC抗缺氧功能,促进hBMSC在低氧状态下增殖。 展开更多
关键词 神经营养因子-3 骨髓间充质干细胞 增殖 缺氧
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污水水质水量自动监测系统
8
作者 志钢 《军民两用技术与产品》 2003年第7期32-32,共1页
关键词 污水水质水量自动监测系统 远程监测 hbmsc 水污染
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