游离脂肪酸对大鼠胰岛细胞体外分泌功能的影响 被引量：7

1

作者 惠晓丽 王惠芳 +2 位作者 刘惊涛 刘靖芳 徐利 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期173-175,188,共4页

目的探讨饱和脂肪酸软脂酸和单不饱和脂肪酸油酸对大鼠胰岛细胞体外分泌胰岛素功能的影响。方法体外分离大鼠胰岛细胞,分为:①浓度梯度组,将0.125、0.250、.5 mmol/L软脂酸(PA)和油酸(OA)分别与胰岛细胞共培养48 h;②时间梯度组,将0.25 ... 目的探讨饱和脂肪酸软脂酸和单不饱和脂肪酸油酸对大鼠胰岛细胞体外分泌胰岛素功能的影响。方法体外分离大鼠胰岛细胞,分为:①浓度梯度组,将0.125、0.250、.5 mmol/L软脂酸(PA)和油酸(OA)分别与胰岛细胞共培养48 h;②时间梯度组,将0.25 mmol/L软脂酸、油酸及二者的混合物与胰岛细胞共培养24、487、2 h,进行葡萄糖刺激胰岛素释放试验,放射免疫法检测培养液中胰岛素浓度。结果①浓度梯度组,不同浓度PA和OA组葡萄糖刺激后胰岛素分泌水平均明显减少,浓度越高胰岛素分泌越少,高浓度时(0.5 mmol/L),高糖刺激下OA组胰岛素分泌高于PA组;②时间梯度组,PA、OA及混合组,葡萄糖刺激后胰岛素分泌水平均明显减少,随时间延长,胰岛素分泌逐渐减低;相同时间段,各组胰岛素分泌无差异(P>0.05)。结论PA和OA对大鼠胰岛细胞分泌功能均有一定的抑制作用,呈剂量依赖性,PA抑制程度呈时间依赖性;高浓度时PA抑制程度大于OA;OA对PA诱导的胰岛细胞分泌功能损伤无保护及协同效应。 展开更多

关键词 游离脂肪酸 软脂酸 油酸 胰岛细胞 葡萄糖刺激的胰岛素分泌

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小分子GPR40激动剂作为抗Ⅱ型糖尿病候选药物的研究进展 被引量：6

2

作者 李鹤 龙亚秋 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2016年第4期736-743,共8页

目前治疗Ⅱ型糖尿病的主要手段依然是口服或注射降糖药物以达到控制血糖的目的.虽然已有针对不同靶点开发的多种抗Ⅱ型糖尿病药物上市,但是鉴于糖尿病治疗药物长期服用的高安全性要求以及庞大的患病人群,研发新型安全有效的抗糖尿病药... 目前治疗Ⅱ型糖尿病的主要手段依然是口服或注射降糖药物以达到控制血糖的目的.虽然已有针对不同靶点开发的多种抗Ⅱ型糖尿病药物上市,但是鉴于糖尿病治疗药物长期服用的高安全性要求以及庞大的患病人群,研发新型安全有效的抗糖尿病药物仍然是当今药物化学研究的热点.GPR40是G-蛋白偶联受体家族中的一员,激动后可以诱导葡萄糖依赖的胰岛素分泌.因为仅在血糖浓度过高时,GPR40激动剂才能促进胰岛素分泌,所以针对该靶点开发降糖药物将极大地降低目前抗糖尿病药物低血糖副作用的风险.因此,GPR40已成为抗Ⅱ型糖尿病药物研发的前沿和热门靶点,本文将围绕小分子GPR40激动剂的药效团模型,即必需的苯丙酸核心骨架及其疏水末端和连接链的结构改造,对近年来各大制药公司及研究机构报道的小分子GPR40激动剂的研发进展进行总结评述. 展开更多

关键词 Ⅱ型糖尿病 GPR40 激动剂 葡萄糖依赖的胰岛素分泌 苯丙酸

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小檗碱对NIT-1细胞肝细胞核因子-4α表达的影响 被引量：3

3

作者 方新胜 屠庆年 +1 位作者 陆付耳 汪智全 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2009年第2期130-134,共5页

目的:探讨小檗碱促进NIT-1细胞胰岛素分泌的可能分子机制.方法:用不同浓度小檗碱干预NIT-1细胞24h后,行葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS)试验检测小檗碱对胰岛素分泌的影响,胰岛素采用放射免疫法检测.应用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT... 目的:探讨小檗碱促进NIT-1细胞胰岛素分泌的可能分子机制.方法:用不同浓度小檗碱干预NIT-1细胞24h后,行葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS)试验检测小檗碱对胰岛素分泌的影响,胰岛素采用放射免疫法检测.应用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测小檗碱对NIT-1细胞增殖的影响,以RT-PCR及Western blot分别检测HNF-4α基因和蛋白的表达水平.结果:与正常对照组相比,小檗碱显著促进葡萄糖刺激的胰岛素分泌,对基础胰岛素分泌无明显作用;当小檗碱低于10μmol/L,对NIT-1细胞增殖无显著抑制作用,当小檗碱为10mmol/L时,对NIT-1细胞有明显抑制作用(0.341±0.041vs0.392±0.033,P<0.05);经小檗碱干预的NIT-1细胞HNF-4αmRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05或0.01),呈剂量依赖性相关.结论:小檗碱能促进NIT-1细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌,可能与其上调HNF-4α的表达有关. 展开更多

关键词 小檗碱 胰岛素分泌 肝细胞核因子 葡萄糖刺激胰岛素分泌

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S-雌马酚改善高糖培养条件下INS-1细胞胰岛素分泌功能的研究 被引量：3

4

作者 王丽 陈卡 +2 位作者 刘凯 高燕翔 糜漫天 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期386-391,共6页

目的研究大豆甙元活性代谢产物S-雌马酚(S-equol,S-Eq)对高糖培养条件下大鼠胰岛素瘤(INS-1)细胞胰岛素分泌功能的影响。方法采用26.2 mmol/L葡萄糖(高糖组,H)及葡萄糖分别与不同浓度S-Eq(0.1、1、10、100μmol/L S-Eq+H组)干预INS-1细... 目的研究大豆甙元活性代谢产物S-雌马酚(S-equol,S-Eq)对高糖培养条件下大鼠胰岛素瘤(INS-1)细胞胰岛素分泌功能的影响。方法采用26.2 mmol/L葡萄糖(高糖组,H)及葡萄糖分别与不同浓度S-Eq(0.1、1、10、100μmol/L S-Eq+H组)干预INS-1细胞24 h,另设未干预的INS-1细胞为对照组(C)。采用CCK-8检测细胞活力,ELISA法测定葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS)功能,TUNEL法联合Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡,Real-time PCR和Western blot分别检测前胰岛素原(preproinsulin,PPI)、葡萄糖转运蛋白2(glucose transporter 2,Glut2)、线粒体阴离子载体解偶联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)mRNA及蛋白表达。结果 S-Eq能显著增加高糖培养条件下INS-1细胞活力(P<0.05),其中1μmol/L S-Eq效果最为明显。GSIS检测发现,与对照组比较,高糖处理后INS-1细胞胰岛素分泌显著降低,而S-Eq能显著增加高糖处理的INS-1细胞的胰岛素分泌(P<0.05)。同时,0.1、1、10μmol/L S-Eq均能明显减少高糖培养条件下INS-1细胞凋亡,上调PPI mRNA、Glut2 mRNA和Glut2蛋白表达,而显著抑制UCP2 mRNA及其蛋白的表达(P<0.05)。结论 S-Eq可有效改善高糖培养条件下INS-1细胞胰岛素分泌功能,可能与抑制细胞凋亡,调节Glut2和UCP2表达有关。 展开更多

关键词 S-雌马酚 INS-1细胞 葡萄糖刺激胰岛素分泌 葡萄糖转运蛋白2 解偶联蛋白2

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新型G蛋白偶联受体40激动剂SZZ15-11的抗糖尿病作用及机制初探 被引量：3

5

作者 周甜 李彩娜 +7 位作者 环奕 刘率男 刘泉 孙素娟 李荣翠 潘璇 刘站柱 申竹芳 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期780-784,共5页

目的探讨G蛋白偶联受体(GPR) 40激动剂SZZ15-11的抗糖尿病作用及机制。方法采用基于荧光素酶报告基因的转录激活检测方法考察化合物的GPR40激活作用;用小鼠原代胰岛评价化合物的促胰岛素分泌能力;用正常ICR小鼠单次给药,评价其对血糖、... 目的探讨G蛋白偶联受体(GPR) 40激动剂SZZ15-11的抗糖尿病作用及机制。方法采用基于荧光素酶报告基因的转录激活检测方法考察化合物的GPR40激活作用;用小鼠原代胰岛评价化合物的促胰岛素分泌能力;用正常ICR小鼠单次给药,评价其对血糖、血胰岛素和胰高血糖素样肽-1分泌及胃排空的影响,采用自发2型糖尿病KKAy小鼠模型长期给药,评价其对血糖的影响。结果化合物SZZ15-11对GPR40激动的EC_(50)为1. 2μmol·L^(-1),在10μmol·L^(-1)浓度下可使高葡萄糖(16. 8 mmol·L^(-1))条件下原代胰岛的胰岛素分泌增加61. 1%(P <0. 05);单次给予该化合物(50 mg·kg^(-1))可显著降低正常ICR小鼠口服葡萄糖负荷后血糖的水平(P <0. 05),使血糖曲线下面积(AUC)下降13. 1%,使正常小鼠葡萄糖刺激的胰岛素分泌增加46. 6%(P <0. 05);此外还可显著延缓正常小鼠胃排空速率,使小鼠血清对乙酰氨基酚浓度-时间曲线下面积降低(P <0. 05);在50和100 mg·kg^(-1)剂量下,能使正常小鼠葡萄糖负荷后的血GLP-1水平增加(P <0. 05);自发性2型糖尿病KKAy小鼠连续灌胃(50和100 mg·kg^(-1)) 4周,其空腹血糖显著降低(P <0. 05),糖化血红蛋白水平降低(P <0. 01和P <0. 05)。结论新型GPR40激动剂SZZ15-11可葡萄糖依赖性地促进胰岛素和GLP-1分泌,从而改善2型糖尿病模型小鼠的糖代谢,是一个潜在的抗糖尿病候选药物,值得进一步研究。 展开更多

关键词 G蛋白偶联受体40 2型糖尿病 胰高血糖素样肽-1 葡萄糖刺激的胰岛素分泌

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磷脂酶Cβ1过表达对葡萄糖刺激胰岛素分泌的影响 被引量：2

6

作者 周恒宇 邓华聪 +3 位作者 郑宏庭 蒋文 南静 陈丹燕 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第15期1471-1474,共4页

目的观察过表达磷脂酶Cβ1(phospholipase Cβ1,PLCβ1)对葡萄糖刺激胰岛素分泌(glucose-stimulated insulin secretion,GSIS)的影响。方法设定葡萄糖浓度梯度:10、20、40、80、100mmol/L,分别刺激INS-1细胞40min,检测细胞培养上清液中... 目的观察过表达磷脂酶Cβ1(phospholipase Cβ1,PLCβ1)对葡萄糖刺激胰岛素分泌(glucose-stimulated insulin secretion,GSIS)的影响。方法设定葡萄糖浓度梯度:10、20、40、80、100mmol/L,分别刺激INS-1细胞40min,检测细胞培养上清液中胰岛素含量,确定最适的葡萄糖刺激浓度;设定时间梯度:20、40、60、80、120min,以最适葡萄糖浓度刺激,检测胰岛素含量,确定最适的刺激时间。②以最适葡萄糖浓度刺激INS-1细胞适当时间后,RT-PCR检测PLCβ1表达变化。③构建PLCβ1真核表达载体(PCMV-HA-PLCβ1),转染INS-1细胞,Western blot检测INS-1细胞中PLCβ1蛋白的表达。④收集转染后INS-1细胞培养上清液,检测胰岛素含量。结果用40mmol/L葡萄糖刺激60min,INS-1细胞的胰岛素分泌量最大;RT-PCR观察刺激后PLCβ1表达显著升高;过表达PLCβ1的INS-1细胞培养上清液中胰岛素含量为(1.906±0.080)ng/ml,较转染PCMV-HA载体的对照组(0.740±0.091)ng/ml显著升高(P<0.01)。结论过表达PLCβ1显著增加INS-1细胞的胰岛素分泌,提示PLCβ1可能参与GSIS信息传递。 展开更多

关键词 磷脂酶Cβ1 葡萄糖刺激胰岛素分泌 过表达 胰岛素 瞬时转染

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丙酮酸循环回补反应与葡萄糖刺激的胰岛素分泌的关系 被引量：2

7

作者 郭莉霞 殷菲 刘建辉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期745-748,共4页

葡萄糖刺激的胰岛素分泌对维持机体葡萄糖代谢的稳态起着至关重要的作用。在此过程中,β细胞的线粒体一方面利用葡萄糖酵解产生的ATP引起ATP依赖的KATP通道关闭,Ca2+通道开放,Ca2+内流,促进胰岛素囊泡向胞外分泌;另一方面通过KATP通道... 葡萄糖刺激的胰岛素分泌对维持机体葡萄糖代谢的稳态起着至关重要的作用。在此过程中,β细胞的线粒体一方面利用葡萄糖酵解产生的ATP引起ATP依赖的KATP通道关闭,Ca2+通道开放,Ca2+内流,促进胰岛素囊泡向胞外分泌;另一方面通过KATP通道非依赖途径,利用丙酮酸回补反应使葡萄糖充分酵解,既补充了由于糖酵解循环代谢造成的中间物的流失,又生成了促进胰岛素分泌的中间产物及促使ATP/ADP比率的增加,进一步促进胰岛素的释放。该文对丙酮酸回补反应的3个途径,即丙酮酸-苹果酸循环途径,丙酮酸-柠檬酸循环途径和丙酮酸-异柠檬酸循环途径,及其在胰岛素分泌中的作用等方面的研究进展进行了综述。 展开更多

关键词 葡萄糖刺激的胰岛素分泌 线粒体代谢 三羧酸循 环 丙酮酸循环 回补反应 糖尿病

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硫酸脱氢表雄酮对MIN6细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌的影响 被引量：2

8

作者 岳江 刘伟 +1 位作者 李圣贤 王丽华 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期1-4,共4页

目的探讨硫酸脱氢表雄酮(DHEAS)对胰岛β细胞株MIN6葡萄糖刺激的胰岛素分泌的影响。方法以葡萄糖刺激浓度为2.8mmol/L和16.7mmol/L的对数生长期MIN6细胞作为实验对象,分别以1、5、10μmol/LDHEAS干预10min和24h(不同浓度DHEAS组),以5μm... 目的探讨硫酸脱氢表雄酮(DHEAS)对胰岛β细胞株MIN6葡萄糖刺激的胰岛素分泌的影响。方法以葡萄糖刺激浓度为2.8mmol/L和16.7mmol/L的对数生长期MIN6细胞作为实验对象,分别以1、5、10μmol/LDHEAS干预10min和24h(不同浓度DHEAS组),以5μmol/LDHEAS或与10μmol/L糖皮质激素受体阻断剂RU486联合干预24h(DHEAS和DHEAS+RU486组),设立空白对照组。ELISA法测定细胞培养上清液中胰岛素分泌量,Real-TimePCR检测细胞胰岛素mRNA表达。结果干预后10min和24h时点,5μmol/L和10μmol/LDHEAS组MIN6细胞培养上清液中的胰岛素分泌量均显著高于空白对照组(P<0.05);干预后24h时点,DHEAS+RU486组与DHEAS组MIN6细胞培养上清液中胰岛素分泌量比较差异无统计学意义(P>0.05),但均显著高于空白对照组(P<0.05)。干预后24h时点,5μmol/L和10μmol/LDHEAS组MIN6细胞胰岛素mRNA表达均显著高于空白对照组(P<0.05)。结论 DHEAS对MIN6细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌具有促进作用,且其核内信号通路可能不经糖皮质激素受体介导。 展开更多

关键词 硫酸脱氢表雄酮 胰岛Β细胞 葡萄糖刺激胰岛素分泌

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妊娠中晚期SD大鼠胰岛功能研究 被引量：1

9

作者 陈焕珍 王晓 +6 位作者 李凤英 刘赟 龙红梅 吴铃 张翠平 李果 罗敏 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期404-407,共4页

目的研究妊娠中晚期SD大鼠的葡萄糖耐受能力及胰岛素分泌状况。方法选择妊娠15 d的SD大鼠作为实验组(n=6),以同批次未妊娠雌性SD大鼠作为对照组(n=6)。两组大鼠分别行腹腔内注射葡萄糖耐量试验(IPGTT)。原位胶原酶灌注法分离SD大鼠胰岛... 目的研究妊娠中晚期SD大鼠的葡萄糖耐受能力及胰岛素分泌状况。方法选择妊娠15 d的SD大鼠作为实验组(n=6),以同批次未妊娠雌性SD大鼠作为对照组(n=6)。两组大鼠分别行腹腔内注射葡萄糖耐量试验(IPGTT)。原位胶原酶灌注法分离SD大鼠胰岛,倒置相差显微镜观察胰岛形态;放射免疫学法测定葡萄糖刺激后胰岛细胞的胰岛素分泌水平。结果IPGTT结果显示,实验组大鼠葡萄糖负荷后30、60、90和120 min时点的血糖值均明显低于对照组(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,实验组大鼠胰岛体积明显增大,胰岛细胞致密度增加。含16.7 mmol/L葡萄糖的KRB缓冲液刺激1 h时,实验组大鼠胰岛素分泌水平明显高于对照组(P<0.01)。结论妊娠中晚期SD大鼠的葡萄糖耐受能力及经葡萄糖刺激的胰岛素分泌能力均明显增强。 展开更多

关键词 妊娠 胰岛结构 腹腔内注射葡萄糖耐量试验 葡萄糖刺激的胰岛素分泌

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葡萄糖对βHC9细胞内磷脂酶C及钙离子浓度的影响 被引量：1

10

作者 郑宏庭 李丙蓉 +4 位作者 方芳 刘理 冯晓丽 徐梓辉 徐静 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期222-224,共3页

目的观察葡萄糖浓度对胰岛B细胞(βHC9)内磷脂酶C(phospholipaseC,PLC)活性及钙离子浓度的影响,探讨PLC在B细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌(glucose-stimulatedinsulinsecretion,GSIS)信息传递中的作用。方法以不同浓度的葡萄糖预处理βHC9... 目的观察葡萄糖浓度对胰岛B细胞(βHC9)内磷脂酶C(phospholipaseC,PLC)活性及钙离子浓度的影响,探讨PLC在B细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌(glucose-stimulatedinsulinsecretion,GSIS)信息传递中的作用。方法以不同浓度的葡萄糖预处理βHC9细胞,采用[3H]肌醇法测定PLC活性,Fura-2荧光负荷技术测定[Ca2+]i。结果葡萄糖浓度可显著影响βHC9细胞内的PLC活性及[Ca2+]i,并且[Ca2+]i变化与PLC活性改变相关葡萄糖浓度为1、5、10、15、20mmol/L时的PLC活性依次为8.1、11.0、16.7、19.8、26.4Bq/ml,各组间均有显著性差异(P<0.05);[Ca2+]i依次为82、95、128、150、161nmol/L,除1、2组,4、5组之外,其余各组间均有显著性差异(P<0.05);PLC活性与[Ca2+]i之间存在线性相关关系(P<0.01)。结论葡萄糖浓度可改变胰岛B细胞内的PLC活性及[Ca2+]i,提示该途径可能参与B细胞GSIS信息传递。 展开更多

关键词 βHC9细胞 葡萄糖刺激的胰岛素分泌 磷脂酶C 钙离子

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G蛋白耦联受体119激动剂的研究进展 被引量：1

11

作者 王逸峰 项洁 卜瑞芳 《国际内分泌代谢杂志》 北大核心 2012年第5期328-330,共3页

糖尿病病程中出现的胰岛p细胞功能衰竭和降糖药物引起的低血糖已成为糖尿病治疗的难点。应用G蛋白耦联受体119（GPRll9）激动剂可以降低血糖水平，保护胰岛B细胞功能，且不产生低血糖。GPRll9在胰岛p细胞和肠内分泌细胞中表达，其激活... 糖尿病病程中出现的胰岛p细胞功能衰竭和降糖药物引起的低血糖已成为糖尿病治疗的难点。应用G蛋白耦联受体119（GPRll9）激动剂可以降低血糖水平，保护胰岛B细胞功能，且不产生低血糖。GPRll9在胰岛p细胞和肠内分泌细胞中表达，其激活可增加葡萄糖刺激的胰岛素分泌（GSIS）和胰高血糖素样肽一1（GLP一1）的分泌，并增强胰岛素启动子的活性。GPRll9激动剂表现出的诸多优势提示，其作为一类新的糖尿病治疗药物有良好的应用前景。 展开更多

关键词 GPR119 激动剂 葡萄糖刺激的胰岛素分泌 胰高血糖素样肽一1 胰岛B细胞

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曲格列酮对胰岛β细胞胰岛素分泌的影响及机制研究 被引量：1

12

作者 吴铃 王晓 +8 位作者 周丽斌 李凤英 陈焕珍 张宏利 刘赟 张翠平 龙红梅 李文毅 李果 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期493-495,共3页

研究曲格列酮对胰岛β细胞（MIN6细胞株）胰岛素分泌的影响,并探讨其机制.10μmol/L曲格列酮短期抑制大鼠胰岛和MIN6细胞的葡萄糖刺激的胰岛素分泌（GSIS,P〈0.01）,增加AMP活化的蛋白激酶（AMPK）、乙酰辅酶A羧化酶（ACC）的磷酸化水... 研究曲格列酮对胰岛β细胞（MIN6细胞株）胰岛素分泌的影响,并探讨其机制.10μmol/L曲格列酮短期抑制大鼠胰岛和MIN6细胞的葡萄糖刺激的胰岛素分泌（GSIS,P〈0.01）,增加AMP活化的蛋白激酶（AMPK）、乙酰辅酶A羧化酶（ACC）的磷酸化水平（均P〈0.01）,而AMPK抑制剂复合物C可使其AMPK、ACC的磷酸化水平以及胰岛素分泌完全恢复. 展开更多

关键词 曲格列酮 葡萄糖刺激的胰岛素分泌 AMP活化的蛋白激酶

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Survivin基因转染对NIT-1细胞凋亡的影响 被引量：1

13

作者 徐明彤 吴木潮 +5 位作者 刘丹 黎锋 薛声能 周嘉 严励 程桦 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期210-211,共2页

在小鼠胰岛素分泌细胞NIT-1细胞中过表达survivin，可部分抑制细胞因子诱导的细胞凋亡，并有保护NIT-1细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌功能的趋势。

关键词 SURVIVIN NIT-1细胞 细胞凋亡 葡萄糖刺激的胰岛素分泌

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DTBNP、DTDP促进INS-1细胞葡萄糖刺激胰岛素分泌 被引量：1

14

作者 潘明麟 居来提.赛买提 +1 位作者 刘田 郭嫣嫣 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第6期883-886,共4页

目的：探讨巯基氧化还原试剂对葡萄糖刺激胰岛素分泌（glucose-stimulated insulin secretion,GSIS）影响,进而揭示其调节胰岛素分泌的可能机制。方法 ：INS-l细胞经传代培养3~4 d后在KRBH液中,37℃培养箱孵育30 min,再用含有不同浓度... 目的：探讨巯基氧化还原试剂对葡萄糖刺激胰岛素分泌（glucose-stimulated insulin secretion,GSIS）影响,进而揭示其调节胰岛素分泌的可能机制。方法 ：INS-l细胞经传代培养3~4 d后在KRBH液中,37℃培养箱孵育30 min,再用含有不同浓度葡萄糖和巯基氧化还原试剂的KRBH液中培养60 min。然后留取上清液进行胰岛素测定。结果：（1）INS-1细胞在2.5、5、10、15、20 mmol/L葡萄糖浓度范围内胰岛素分泌量逐渐增加,G5、G10、G15组间两两相比均有统计学意义（P〈0.05）;（2）与G10组相比,G10＋DTBNP、G10＋DTDP组胰岛素分泌量显著增加（P〈0.05）,且该效应可以被DTT所消除。（3）DTBNP、DTDP均能增加NIF处理组胰岛素分泌,但其增加幅度低于非NIF处理组（P〈0.05）;（4）与非DIA组相比,G10＋DIA＋DTBNP、G10＋DIA＋DTDP组胰岛素分泌增加幅度显著减低（P〈0.05）;（5）同G10组比较,G10＋DIA＋NIF＋DTBNP、G10＋DIA＋NIF＋DTDP组胰岛素分泌值增加（P〈0.05）。结论 ：本研究显示巯基氧化还原试剂对GSIS产生调节作用。DTDP、DTBNP可能通过对K_ATP、L型Ca_V通道及IP_3受体活性的调节,促进胰岛素分泌。 展开更多

关键词 葡萄糖刺激胰岛素分泌 INS-1细胞 巯基氧化还原试剂

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AGK-2对大鼠原代胰岛葡萄糖刺激的胰岛素分泌的影响

15

作者 建方方 邓儒元 +6 位作者 周丽斌 刘赟 李凤英 聂爱芳 张娟 唐红菊 王晓 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期252-256,共5页

目的观察Sirt2特异性抑制剂AGK-2对大鼠胰岛葡萄糖刺激的胰岛素分泌的影响，并探讨其可能机制。方法用免疫组化和免疫细胞化学技术观察Sirt2在胰腺组织、单个胰岛β细胞的表达情况：将分离的大鼠胰岛置于24孔培养板培养，分别在2．8和16... 目的观察Sirt2特异性抑制剂AGK-2对大鼠胰岛葡萄糖刺激的胰岛素分泌的影响，并探讨其可能机制。方法用免疫组化和免疫细胞化学技术观察Sirt2在胰腺组织、单个胰岛β细胞的表达情况：将分离的大鼠胰岛置于24孔培养板培养，分别在2．8和16．7mmoL／L葡萄糖条件下加AGK-2处理1h后．收集上清，检测胰岛素浓度；抽提蛋白，以Western印迹法检测α-tubulin乙酰化水平；用离子成像技术检测单个胰岛B细胞钙离子浓度的变化。结果免疫组化结果显示，在胰腺中Sirt2主要表达在β细胞胞浆中：Sirt2的特异性抑制剂AGK-2对基础胰岛素分泌无显著影响，但使16．7mmol／L葡萄糖刺激的胰岛素分泌降低，呈剂量依赖性，5μmol／LAGK-2能使胰岛素分泌降低75％；离子成像技术结果显示，AGK-2显著抑制高糖引起的钙离子浓度增加。结论Sirt2抑制剂AGK-2可能通过抑制高糖刺激的β细胞钙离子浓度的增加降低胰岛素分泌。 展开更多

关键词 AGK-2 葡萄糖刺激的胰岛素分泌 钙离子 Α-微管蛋白

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Tubacin对β细胞葡萄糖刺激胰岛素分泌的影响

16

作者 邓儒元 张玉青 +6 位作者 周丽斌 刘赟 李凤英 建方方 唐红菊 张娟 王晓 《放射免疫学杂志》 CAS 2013年第6期787-791,共5页

目的:观察去乙酰化酶HDAC6特异性抑制剂Tubacin对MIN6细胞胰岛素分泌的影响,并探讨其可能机制。方法:用RT-PCR检测去乙酰化酶家族成员在MIN6细胞的表达,用免疫荧光技术观察HDAC6在小鼠胰岛和MIN6细胞内的定位;分别在5.6mmol/L和25mmol/... 目的:观察去乙酰化酶HDAC6特异性抑制剂Tubacin对MIN6细胞胰岛素分泌的影响,并探讨其可能机制。方法:用RT-PCR检测去乙酰化酶家族成员在MIN6细胞的表达,用免疫荧光技术观察HDAC6在小鼠胰岛和MIN6细胞内的定位;分别在5.6mmol/L和25mmol/L葡萄糖的DMEM中加和不加10μmol/L Tubacin,用其处理MIN6细胞24h,收集上清,ELISA检测胰岛素浓度。同时用MTT法检测Tubacin对MIN6细胞活力的影响,RT-PCR检测上述处理条件下Insulin基因的表达情况。以Western blot和免疫荧光技术检测Tubacin对MIN6细胞骨架蛋白α-tubulin乙酰化水平的影响。结果:MIN6细胞中各乙酰化酶家族成员mRNA的表达水平相差较大,其中HDAC6表达相对较高。HDAC6主要表达于小鼠胰岛β细胞及MIN6细胞胞浆中。在5.6mmol/L和25mmol/L葡萄糖条件下,Tubacin处理24h可以显著抑制胰岛素分泌,但不影响MIN6细胞活力。同时,在5.6mmol/L葡萄糖存在条件下Tubacin不影响胰岛素基因表达,在25mmol/L葡萄糖存在条件下Tubacin可轻度上调胰岛素基因表达。Western blot和免疫荧光结果发现,Tubacin抑制胰岛素分泌的同时伴有α-tubulin乙酰化水平增加。结论:HDAC6抑制剂Tubacin可能通过增加MIN6细胞α-tubulin乙酰化水平,改变细胞骨架的活动度而抑制胰岛素分泌。 展开更多

关键词 乙酰化 Tubacin 胰岛素分泌 Α-微管蛋白

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PLCζ在INS-1细胞中的表达及功能初步分析

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作者 周恒宇 邓华聪 +1 位作者 吴明 罗娟 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1305-1308,共4页

目的:探讨磷脂酶Cζ(PhospholipaseCζ,PLCζ)在INS-1细胞中的表达,并初步分析PLCζ对葡萄糖刺激胰岛素分泌(Glucose-stimulated insulin secretion,GSIS)的影响。方法:(1)设计6类PLC的引物,RT-PCR检测INS-1细胞中各类PLC的表达。(2)设... 目的:探讨磷脂酶Cζ(PhospholipaseCζ,PLCζ)在INS-1细胞中的表达,并初步分析PLCζ对葡萄糖刺激胰岛素分泌(Glucose-stimulated insulin secretion,GSIS)的影响。方法:(1)设计6类PLC的引物,RT-PCR检测INS-1细胞中各类PLC的表达。(2)设定葡萄糖浓度梯度:10、20、40、80、100 mmol/L,分别刺激INS-1细胞40 min,ELISA检测细胞培养上清液中胰岛素的含量,确定最适葡萄糖刺激浓度,设定时间梯度:20、40、60、80、120 min,以最适葡萄糖浓度刺激后ELISA检测细胞培养上清液中胰岛素含量,确定最适刺激时间。(3)用最适葡萄糖浓度刺激INS-1细胞适当时间后,半定量RT-PCR、Western Blot检测PLCζ的表达变化。结果:(1)6类PLC中PLCβ、PLCγ、PLCδ、PLCζ、PLCη在INS-1细胞中表达,PLCε不表达。(2)用40 mmol/L葡萄糖刺激60 min,INS-1细胞的胰岛素分泌量最大,半定量RT-PCR、Western Blot检测葡萄糖刺激INS-1细胞后PLCζ的表达上调。结论:(1)先前发现在精子中特异表达的PLCζ在INS-1细胞中有表达。(2)葡萄糖刺激INS-1细胞后PLCζ的表达明显增加,提示PLCζ可能参与GSIS信号转导。 展开更多

关键词 磷脂酶cζ 表达 RT-PCR 葡萄糖刺激胰岛素分泌

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糖毒性下UCP2介导的胰岛功能紊乱的研究 被引量：9

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作者 陈莹晖 李裕明 +3 位作者 邓波 李丽华 高海波 陈璐璐 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期193-196,共4页

目的研究不同浓度高糖对胰岛INS-1细胞解偶联蛋白2(UCP2)基因表达的影响,探讨UCP2基因与高糖刺激下氧化应激和胰岛素分泌之间的关系,进一步了解糖尿病糖毒性的发病机制。方法将不同浓度的葡萄糖作用于INS-1细胞,镜下观察INS-1细胞的形... 目的研究不同浓度高糖对胰岛INS-1细胞解偶联蛋白2(UCP2)基因表达的影响,探讨UCP2基因与高糖刺激下氧化应激和胰岛素分泌之间的关系,进一步了解糖尿病糖毒性的发病机制。方法将不同浓度的葡萄糖作用于INS-1细胞,镜下观察INS-1细胞的形态改变,应用可见分光光度计测定丙二醛(MDA)含量,运用ELISA方法检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS),同时应用RT-PCR方法检测UCP2基因的表达。结果①随着糖浓度的增加,INS-1细胞的凋亡增多,MDA含量逐渐增加,GSIS值逐渐下降,不同糖浓度组比较,差异具有显著性意义(P<0.01)。②随着葡萄糖浓度增加,INS-1细胞UCP2 mRNA的表达总体逐渐增强。结论高糖可促进INS-1细胞凋亡,在高糖作用下活性氧物质(ROS)代谢产物MDA增多,通过激活UCP2的途径引起胰岛细胞胰岛素分泌功能受损。这可能也是糖毒性对胰岛β细胞损害的一个重要环节。 展开更多

关键词 解偶联蛋白2 INS-1细胞 糖毒性 氧化应激 高糖刺激的胰岛素分泌

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姜黄素对INS-1细胞氧化应激和胰岛素分泌的影响及新机制的初步研究 被引量：6

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作者 张又之 徐梓辉 +2 位作者 陈彬 姜晓梅 王杨 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期937-941,共5页

目的采用H2O2制备INS-1氧化应激模型,观察姜黄素对INS-1细胞氧化应激水平及胰岛素分泌的影响及瓣状核酸内切酶(FEN1)和ERK1/2磷酸化的改变在其中的作用。方法将INS-1细胞分为阴性对照组、模型组(H2O2处理)、干预组(5、7、10μM姜黄素+H... 目的采用H2O2制备INS-1氧化应激模型,观察姜黄素对INS-1细胞氧化应激水平及胰岛素分泌的影响及瓣状核酸内切酶(FEN1)和ERK1/2磷酸化的改变在其中的作用。方法将INS-1细胞分为阴性对照组、模型组(H2O2处理)、干预组(5、7、10μM姜黄素+H2O2处理)。采用CCK-8检测细胞增殖,分光光度计法检测细胞丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)水平,酶标仪检测细胞内活性氧(ROS)水平的变化,放射免疫法检测细胞上清液中胰岛素分泌量,Western blot检测FEN1,p-ERK1/2蛋白表达的改变。结果 (1)模型组MDA、ROS值较对照组明显升高(P<0.05);干预组MDA、ROS较模型组明显降低(P<0.05);模型组GSH较对照组明显降低(P<0.05);干预组GSH较模型组显著升高(P<0.05)。(2)模型组胰岛素分泌水平较对照组明显降低(P<0.05),10μM姜黄素干预组胰岛素分泌水平较模型组明显升高(P<0.05)。(3)与模型组比较,10μM姜黄素干预显著提高INS-1细胞FEN1蛋白的表达和ERK1/2的磷酸化,ERK1/2特异性抑制剂U0126可抑制姜黄素引起INS-1细胞FEN1蛋白表达的改变。结论姜黄素可以通过pERK1/2-FEN1通路改善INS-1细胞的氧化应激状态,以及胰岛素分泌,为姜黄素治疗糖尿病提供新的作用机制。 展开更多

关键词 姜黄素 氧化应激 胰岛素分泌 FEN1 pERK1 2

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酒精对NIT-1细胞葡萄糖激酶基因表达的影响 被引量：1

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作者 胡学锋 郝丽萍 +5 位作者 孙秀发 刘烈刚 应晨江 章锡平 杨年红 毛丽梅 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期222-224,共3页

目的　观察酒精对NIT - 1细胞葡萄糖刺激后胰岛素分泌功能及葡萄糖激酶 (Glucokinase)基因表达的影响。方法　体外培养NIT - 1细胞 ,使用不同浓度的酒精 (0 ,5 0 ,1 0 0 ,2 0 0 ,4 0 0mmol/L)作用不同时间后 (6 ,1 2 ,2 4h) ,用放射免... 目的　观察酒精对NIT - 1细胞葡萄糖刺激后胰岛素分泌功能及葡萄糖激酶 (Glucokinase)基因表达的影响。方法　体外培养NIT - 1细胞 ,使用不同浓度的酒精 (0 ,5 0 ,1 0 0 ,2 0 0 ,4 0 0mmol/L)作用不同时间后 (6 ,1 2 ,2 4h) ,用放射免疫法测定NIT - 1细胞分泌胰岛素的量 ,用噻唑蓝 (MTT)法检测NIT - 1细胞代谢活性 ,用RT PCR方法检测葡萄糖激酶基因mRNA的表达。结果　酒精对NIT - 1细胞代谢活性的抑制与酒精剂量和作用时间有关。酒精作用 6h ,NIT - 1细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌增加 ;作用 1 2 ,2 4h ,葡萄糖刺激的胰岛素分泌降低。酒精作用 6h ,各剂量组葡萄糖激酶mRNA表达升高 ;酒精作用 1 2 ,2 4h ,各剂量组葡萄糖激酶mRNA表达均降低。结论　酒精对NIT - 1细胞葡萄糖刺激后胰岛素分泌及葡萄糖激酶mRNA表达的影响与作用时间、剂量有关。而葡萄糖激酶mR NA表达水平的改变可能是酒精影响NIT - 1细胞胰岛素分泌的重要机制之一。 展开更多

关键词 酒精 葡萄糖激酶 葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS) MRNA表达

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