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Analysis of Male Sterility-Related Proteins of Young Panicle in Rice (Oryza sativa L.) by Two-Dimensional Electrophoresis 被引量:1
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作者 HUYao-jun WEILei +2 位作者 LIUShu-nan YUJin-hong DINGYi 《Wuhan University Journal of Natural Sciences》 EI CAS 2005年第3期597-601,共5页
For searching out male sterility-related proteins (polypeptides) in rice(Oryza sativa L. ), we examined the difference of panicle protein (polypeptides) between hybrid rice( Wujin2A/R168, Wujin5A/R988) and their paren... For searching out male sterility-related proteins (polypeptides) in rice(Oryza sativa L. ), we examined the difference of panicle protein (polypeptides) between hybrid rice( Wujin2A/R168, Wujin5A/R988) and their parents (male-sterile line Wujin2A, Wujin5A, and restorerline R168, R988) at the formation stage of pollen mother cell by two-dimensional electrophoresis(2-DE). The results revealed that the 2-DE polypeptide maps were similar among these experimentalmaterials. A small group of polypeptides were disappeared in 2-DE polypeptide maps of male-sterileline (Wu-jin2A, WujinSA) by comparing to restorer line (R168, R988) and the first filial (F, )generation (Wujin2A/R168, Wujin5A/R988). The isoelectric points of these polypeptides were pl5.8-6.5, molecular weight 42. 7 X 10~3-66. 2 X 10~3. 展开更多
关键词 hybrid rice MALE-STERILE protein two-dimensional polyacrylamide gelelectrophoresis
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α辐射致DNA双链断裂的AFM观测 被引量:3
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作者 梅俊平 赵葵 +1 位作者 展永 隋丽 《河北工业大学学报》 CAS 2003年第5期1-5,共5页
利用先进的原子力显微镜(AFM)技术及凝胶电泳技术,对5.48 MeV的α粒子辐照后的水中pGEMTl质粒DNA进行分析,通过AFM观测,得到了清晰的DNA分子及α辐射致其双链断裂的直观图,并采用凝胶电泳对辐照前后DNA的损伤机理进行了研究,结果表明DN... 利用先进的原子力显微镜(AFM)技术及凝胶电泳技术,对5.48 MeV的α粒子辐照后的水中pGEMTl质粒DNA进行分析,通过AFM观测,得到了清晰的DNA分子及α辐射致其双链断裂的直观图,并采用凝胶电泳对辐照前后DNA的损伤机理进行了研究,结果表明DNA链的断裂数目随着粒子照射剂量的增加而增加,并通过测量DNA片段所占比例关系,可获得DNA的片段分布. 展开更多
关键词 α辐射 DNA双链断裂 原子力显微镜 凝胶电泳 质粒DNA
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黄连木叶片基因组DNA提取方法 被引量:2
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作者 程世平 施江 +3 位作者 史国安 李亚杰 宋程威 尹小芳 《河南科技大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2010年第3期71-73,共3页
黄连木叶片中酚类化合物、色素、多糖和其它次生代谢物质含量较高,这给黄连木基因组DNA提取带来困难。为了从黄连木叶片中提取高质量基因组DNA,本文运用CTAB法和改良CTAB法提取黄连木基因组DNA,通过定性、定量及PCR分析检测所提取DNA的... 黄连木叶片中酚类化合物、色素、多糖和其它次生代谢物质含量较高,这给黄连木基因组DNA提取带来困难。为了从黄连木叶片中提取高质量基因组DNA,本文运用CTAB法和改良CTAB法提取黄连木基因组DNA,通过定性、定量及PCR分析检测所提取DNA的质量。结果表明:改良CTAB法提取的DNA电泳条带清晰无RNA等污染,OD260和OD280比值在1.8左右,RAPD扩增条带清晰、无弥散现象、亮度均一。说明改良CTAB法提取的DNA纯度较高,适用于PCR扩增反应。 展开更多
关键词 黄连木 基因组DNA提取 改良CTAB法 电泳 PCR
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Differential protein expression between EBV-positive and negative epithelial cells
4
作者 Haibo Yu Lian Zhao +8 位作者 Qijia Yan Lielian Zuo Zhengyuan Yu Wei Xiong Xiaoling Li Shourong Sheng Zhaojian Gong Jianhong Lu Guiyuan Li 《Journal of Biophysical Chemistry》 2013年第2期80-83,共4页
Epstein Barr virus infection is believed to play a role in the development of nasopharyngeal carcinoma. In order to investigate the function of EBV in epithelial cell, proteomic methods were used to find and identify ... Epstein Barr virus infection is believed to play a role in the development of nasopharyngeal carcinoma. In order to investigate the function of EBV in epithelial cell, proteomic methods were used to find and identify the differential proteins and expected to elucidate the mechanism of EBV. Altered protein expressions were found between 293 cell (HEK293) and EBV infected cell (293-EBV). In this study, we separated differential expressed proteins using 2D-DIGE method while matrix-assisted laser desorption/ionization tandem time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS) method was used to identify proteins. The results showed that 14 proteins were up regulated and 3 proteins were down regulated in 293-EBV cells. Bioinformatic analysis showed that these proteins are involved in cell proliferation, metastasis, apoptosis, metabolism, and signal transduction. Western blotting analysis was further carried out to verify the MS results. Thus, EBV may exert its functions by mediating differential expression of these proteins. 展开更多
关键词 EBV Differential In-gelelectrophoresis (DIGE) Mass SPECTROMETRY
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纳豆芽孢杆菌蛋白酶对大豆分离蛋白凝胶性的影响 被引量:2
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作者 刘敬媛 韩建春 +2 位作者 冯镇 姜帆 谭顺丹 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期164-167,共4页
利用纳豆芽孢杆菌发酵所产微生物蛋白酶对大豆分离蛋白进行酶法改性,以提高其凝胶性,并通过测定凝胶体系的流变学性质、水解程度和分析电泳图谱来探究纳豆芽孢杆菌蛋白酶对大豆分离蛋白凝胶性的影响。结果表明,体系凝胶强度受酶浓度和... 利用纳豆芽孢杆菌发酵所产微生物蛋白酶对大豆分离蛋白进行酶法改性,以提高其凝胶性,并通过测定凝胶体系的流变学性质、水解程度和分析电泳图谱来探究纳豆芽孢杆菌蛋白酶对大豆分离蛋白凝胶性的影响。结果表明,体系凝胶强度受酶浓度和酶解温度的影响,酶浓度为1.072U/mL在40℃条件下形成的凝胶最稳定;同时凝胶强度与水解度有关,50℃时水解度超过12%,则不能形成稳定的凝胶。经微生物蛋白酶作用后,大豆分离蛋白的7s和11s均发生不同程度的水解。 展开更多
关键词 纳豆芽孢杆菌蛋白酶 大豆分离蛋白 凝胶性质 水解度 凝胶电泳
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Effect of Srt A on Interspecies Adherence of Oral Bacteria 被引量:1
6
作者 Ying SONG Jin-zhi HE +2 位作者 Ren-ke WANG Jing-zhi MA Ling ZOU 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2018年第1期160-166,共7页
This study aimed to study whether the Sortase A(srt A)gene helps mediate coaggregation and co-adherence between Streptococcus mutans(S.mutans)and other salivary bacteria.S.mutans UA159 and srt A-deficient mutant serve... This study aimed to study whether the Sortase A(srt A)gene helps mediate coaggregation and co-adherence between Streptococcus mutans(S.mutans)and other salivary bacteria.S.mutans UA159 and srt A-deficient mutant served as"bait"in classical co-aggregation assays and membrane-based co-adherence assays were used to examine interactions of S.mutans with Fusobacterium nucleatum(F.nucleatum),Streptococcus mitis(S.mitis),Streptococcus gordonii(S.gordonii),Streptococcus sanguis(S.sanguis),Actinomyces naeslundii(A.naeslundii)and Lactobacillus.Co-adherence assays were also performed using unfractionated saliva from healthy individuals.Co-adhering partners of S.mutans were sensitively detected using polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis(PCR-DGGE).Both UA159 and its srt A-deficient mutant bound to F.nucleatum but not to any of the other five salivary bacteria.The srt A-deficient mutant showed lower co-adherence with F.nucleatum.The two S.mutans strains also showed similar co-adherence profiles against unfractionated salivary bacteria,except that UA159 S.mutans but not the srt A-deficient bound to a Neisseria sp.under the same conditions.Deleting srt A reduces the ability of S.mutans to bind to F.nucleatum,but it does not appear to significantly affect the binding profile of S.mutans to bulk salivary bacteria. 展开更多
关键词 co-aggregation co-adherence membrane-binding assay denaturing gradient gelelectrophoresis Streptococcus mutans sortase A-deficient mutant strain
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电泳技术结合计算机凝胶图像系统检测细胞凋亡
7
作者 赵清 吴锦雅 +3 位作者 黄行许 马晓冬 鲍永耀 周俊岭 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第1期45-46,50,共3页
目的探讨检测细胞凋亡的新方法。方法利用常规电泳技术结合计算机凝胶图像分析系统对经地塞米松处理的巨噬细胞做细胞凋亡的定性定量检测。结果经地塞米松处理的巨噬细胞发生细胞凋亡,用1%琼脂糖凝胶电泳出现典型梯状条带,同时用流式细... 目的探讨检测细胞凋亡的新方法。方法利用常规电泳技术结合计算机凝胶图像分析系统对经地塞米松处理的巨噬细胞做细胞凋亡的定性定量检测。结果经地塞米松处理的巨噬细胞发生细胞凋亡,用1%琼脂糖凝胶电泳出现典型梯状条带,同时用流式细胞术检测出现凋亡峰,计算机凝胶图像光密度分析电泳结果,地塞米松处理0、0.5、1.0、2.04.0h巨噬细胞的凋亡率分别为0%、16.37%、30.72%、35.87%、56.60%,与流式细胞术的检测结果基本一致。结论琼脂糖凝胶电泳结合计算机凝胶图像分析系统是一种简便、低耗、准确的细胞凋亡定性定量检测新方法。 展开更多
关键词 细胞凋亡 凝胶电泳 计算机凝胶图像分析
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海分枝杆菌菌壁蛋白组特性及对Wistar大鼠致病免疫学特征研究 被引量:1
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作者 林存智 王芳芳 +4 位作者 曹艺巍 李海健 张华 李金凤 朱新红 《中华临床医师杂志(电子版)》 CAS 2013年第15期112-115,共4页
目的探讨海分枝杆菌菌壁蛋白组特性及对Wistar大鼠致病免疫学特征,提高对海分枝杆菌致病机制的认识。方法 (1)将临床分离的海分枝杆菌经过培养7∽10 d后,挑取培养的菌落,加入到0.9%氯化钠液体中,离心、PBS冲洗、超声破碎制备菌壁蛋白... 目的探讨海分枝杆菌菌壁蛋白组特性及对Wistar大鼠致病免疫学特征,提高对海分枝杆菌致病机制的认识。方法 (1)将临床分离的海分枝杆菌经过培养7∽10 d后,挑取培养的菌落,加入到0.9%氯化钠液体中,离心、PBS冲洗、超声破碎制备菌壁蛋白。将制备好的样品蛋白进行双向电泳,凝胶图像分析。(2)应用McFarland比浊法,制备菌液,估计所配制的细菌剂量浓度。选取雄性Wistar大鼠45只,数字随机法分成3组:实验组A和B、对照组,每组15只。取菌液0.1 ml(浓度:3×108cfu/ml)经尾静脉注射感染A组,腹腔注射感染B组,对照组经尾静脉注射0.9%氯化钠0.1 ml液体。感染第4周后抽取尾静脉血液1 ml,采用ELISA法分别检测3组大鼠血清中sIL-2R、TNF-α和IFN-γ表达。结果 (1)海分枝杆菌菌壁蛋白分子质量处于10∽100 kD,PI值主要分布于4.5∽6.0之间,在pH 4.5∽5.5之间蛋白点分布比较密集,主要集中在偏酸性侧。(2)实验组A和B大鼠血清中sIL-2R、TNF-α和IFN-γ表达无统计学差异(实验组A和B之间,t=1.39∽1.91,P=0.065∽0.174),分别与对照组比较均有统计学差异(A组与对照组比较,t=5.98∽24.08,P〈0.05;B组与对照组比较,t=3.79∽27.62,P〈0.05)。结论海分枝杆菌菌壁致病性蛋白在10∽100 kD之间,Wistar大鼠全身感染4周后可引起白细胞介素表达增强。 展开更多
关键词 分枝杆菌 大鼠 Wistar 白细胞介素类 菌壁蛋白 凝胶图像
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应用PCR技术检测兽医生物制品中污染病毒的研究
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作者 朱善元 《四川畜牧兽医》 2000年第3期27-28,共2页
本文阐述了PCR(基因扩增 )技术的原理、基本操作方法 ,及其在兽医生物制品疫苗污染病毒检测中的应用。着重介绍了应用PCR技术检测新城疫病毒和瘟病毒的方法 ,具有快速、敏感、特异性高等优点 ,对兽医生物制品的研究。
关键词 兽医生物制品 疫苗 污染病毒 PCR技术 检测
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DNA断裂检测方法──单细胞凝胶电泳法 被引量:36
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作者 秦椿华 沈建英 +1 位作者 黄仕和 王光祖 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1995年第6期517-520,共4页
单细胞凝胶电泳(singlecellgelelectrophoresisassay,SCGE)也叫彗星试验(cometassay),是一种快速、敏感、简便、廉价的检测单个哺乳动物细胞DNA断裂的技术,目前已用于检测氧... 单细胞凝胶电泳(singlecellgelelectrophoresisassay,SCGE)也叫彗星试验(cometassay),是一种快速、敏感、简便、廉价的检测单个哺乳动物细胞DNA断裂的技术,目前已用于检测氧化、紫外线和电离辐射引起的损伤,以及三氯乙烷、丙烯酰胺等化学物及老化、吸烟所致损害的研究.文章介绍SCGE的发展、检测分析方法、原理及其在DNA损伤与修复、生物监测、遗传毒理研究、肿瘤治疗方案优化和疗效研究方面的应用前景. 展开更多
关键词 DNA断裂 单细胞凝胶电泳 检测
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褐藻多糖对氧化应激诱导的淋巴细胞DNA损伤的保护作用 被引量:19
11
作者 詹林盛 张新生 +2 位作者 吴小红 王颖丽 王之贤 《中国海洋药物》 CAS CSCD 1999年第4期4-7,共4页
研究褐藻多糖(BSP)对活性氧引起的淋巴细胞DNA损伤的保护作用。方法是敏感的单细胞凝胶电泳(SCGE)。结果表明在不同的介质中H_2O_2对细胞DNA的损伤程度不同,在同一介质中H_2O_2对细胞DNA的损伤程度呈一定... 研究褐藻多糖(BSP)对活性氧引起的淋巴细胞DNA损伤的保护作用。方法是敏感的单细胞凝胶电泳(SCGE)。结果表明在不同的介质中H_2O_2对细胞DNA的损伤程度不同,在同一介质中H_2O_2对细胞DNA的损伤程度呈一定的量效关系。 100mg/L和 200mg/L的大分子量多糖(BSPh)和小分子量多糖(BSPs)都能明显降低H_2O_2对细胞DNA损伤程度。表明BSP能够清除自由基,减低氧化应激所致的细胞DNA损伤程度,有利于维护细胞的正常结构和功能。提示 BSP可作为一种预防性抗氧化营养素,用于预防氧化应激引起的疾病。 展开更多
关键词 褐藻多糖 单细胞凝胶电泳 DNA损伤 氧化应激
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氧化强度对肌原纤维蛋白结构及凝胶性能的影响 被引量:28
12
作者 曹云刚 马文慧 +5 位作者 艾娜丝 闫林林 赵倩倩 闵红卫 白雪 黄峻榕 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第20期21-27,共7页
采用模拟氧化体系(10μmol/L FeCl3,100μmol/L抗坏血酸,0、0.5、1、3、5、10 mmol/L H2O2),研究不同氧化程度对猪肌原纤维蛋白(myofibrillar protein,MP)结构及凝胶性质的影响.结果表明:随H2O2浓度升高,蛋白羰基含量上升,总巯基含量、... 采用模拟氧化体系(10μmol/L FeCl3,100μmol/L抗坏血酸,0、0.5、1、3、5、10 mmol/L H2O2),研究不同氧化程度对猪肌原纤维蛋白(myofibrillar protein,MP)结构及凝胶性质的影响.结果表明:随H2O2浓度升高,蛋白羰基含量上升,总巯基含量、自由氨基含量及内源荧光强度下降,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳表明氧化诱导二硫键的形成引起蛋白质交联聚集加剧,进而导致蛋白表面疏水性和溶解度降低;当H2O2浓度小于1.0 mmol/L时,MP热诱导凝胶性能无明显变化,当H2O2浓度大于1.0 mmol/L时,热诱导凝胶蒸煮损失显著增强(P<0.05),凝胶强度明显降低(P<0.05),但凝胶白度无明显变化.总体来说,H2O2浓度越高蛋白氧化程度越严重,凝胶强度越低. 展开更多
关键词 氧化 肌原纤维蛋白 结构变化 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 凝胶性能
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细颗粒物暴露对人群DNA损伤的影响 被引量:25
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作者 李朋昆 高知义 +3 位作者 蒋蓉芳 盖冰冰 秦逸秋 宋伟民 《环境与职业医学》 CAS 北大核心 2010年第5期254-256,共3页
[目的]研究人群PM2.5暴露对外周血淋巴细胞DNA的损伤作用。[方法]选择不吸烟或戒烟半年以上且家庭中也无人吸烟的男性交通警察107人为高暴露组,普通社区男性居民101人为低暴露组。使用个体采样器24h连续监测两组的PM2.5暴露情况,并采集... [目的]研究人群PM2.5暴露对外周血淋巴细胞DNA的损伤作用。[方法]选择不吸烟或戒烟半年以上且家庭中也无人吸烟的男性交通警察107人为高暴露组,普通社区男性居民101人为低暴露组。使用个体采样器24h连续监测两组的PM2.5暴露情况,并采集血液进行淋巴细胞彗星试验(单细胞凝胶电泳试验),以判断两组的DNA损伤情况。[结果]高暴露组PM2.5日平均暴露浓度为(115.40±46.17)μg/m3,高于低暴露组的(74.94±40.09)μg/m(3P<0.01)。高暴露组彗尾率(15.20±3.46)%和Olive尾矩1.25±0.29高于低暴露组的(10.05±3.45)%和0.86±0.22(P<0.01)。DNA损伤程度随着PM2.5日均暴露量增大而增加(OR=1.032,P<0.01),未发现年龄与工龄对DNA损伤程度的明显影响。[结论]在正常大气暴露下,PM2.5浓度升高能导致人群DNA损伤程度增加。 展开更多
关键词 PM2.5 彗星试验 交警 DNA损伤
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精养团头鲂池塘沉积物微生物群落的结构特征及组成多样性分析 被引量:20
14
作者 李晓 李冰 +1 位作者 董玉峰 朱健 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期218-227,共10页
为了研究精养团头鲂池塘冬季不投饵期间沉积物不同层次细菌群落结构的特征,实验分层次采集池塘沉积物,采用PCR—DGGE(变性梯度凝胶电泳技术)及基因测序技术,对池塘沉积物垂向空间分布的微生物群落特征及多样性的组成进行分析。结... 为了研究精养团头鲂池塘冬季不投饵期间沉积物不同层次细菌群落结构的特征,实验分层次采集池塘沉积物,采用PCR—DGGE(变性梯度凝胶电泳技术)及基因测序技术,对池塘沉积物垂向空间分布的微生物群落特征及多样性的组成进行分析。结果显示:精养团头鲂池塘的整个停饵期间沉积物微生物群落的丰富度(平均为38)和多样性指数(平均为3.18)均较高,说明精养池塘沉积物中微生物数量多、种类丰富。上层(0—10cm)和中层(10~20cm)沉积物的微生物群落Shannon指数(3.29、3.27)略高于下层(20~30cm)的Shannon指数(3.17),底层沉积物样品的指数最小(2.96),说明在底层沉积物中微生物群落结构趋于稳定,菌群多样性变化较小。精养团头鲂池塘的整个停饵期间沉积物样品中上层(0~10cm和10~20cm)微生物的群落结构相似性较高(80%以上),而底下层(20~30cm和30~40cm)与中上层微生物的群落结构相似性较低(63%以上),说明通过微生物群落结构的相似性程度可以大致看出样品的空间顺序。微生物群落组成多样性的结果显示:精养团头鲂池塘沉积物在整个停饵期间包含的菌群分属于8个门:变形菌门(β-、γ-、δ-亚群)(33.33%)、绿弯菌门(19.05%)、拟杆菌门(14.29%)、蓝细菌门(9.52%)、螺旋体门(9.52%)、硝化螺旋菌门(4.76%)、酸杆菌门(4.76%)、厚壁菌门(4.76%);结果表明变形菌门为精养团头鲂池塘沉积物在停饵期间的优势菌群,δ-变形菌亚群(14.29%)是变形菌门中的优势菌群。本实验以期得到不同种类微生物的分子信息从而为以后筛选有益菌群奠定基础,并为团头鲂精养池塘微生态环境的人工调控提供依据,从而为适时监测养殖生态环境运营状况建立快速的分子生物学分析方法� 展开更多
关键词 团头鲂 沉积物 DNA提取 变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE) 细菌多样性
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蚯蚓过氧化氨酶的纯化及性质 被引量:14
15
作者 徐炜虹 杨齐衡 +1 位作者 路英华 钱锟 《华东师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1996年第4期95-101,共7页
赤子爱胜蚓(Eiseniafoelide)组织匀浆抽提液经硫酸铵盐析、透析浓缩后,用大柱制备电泳纯化得到两个过氧化氢酶,均为糖蛋白,Mr分别为390000、400000。用氧电极法测得后者的表观Km值为143mM,最... 赤子爱胜蚓(Eiseniafoelide)组织匀浆抽提液经硫酸铵盐析、透析浓缩后,用大柱制备电泳纯化得到两个过氧化氢酶,均为糖蛋白,Mr分别为390000、400000。用氧电极法测得后者的表观Km值为143mM,最适pH值8.0左右。NaN3、KCN及某些金属离子如Cu(Ⅱ)、Cd(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)、Ni(Ⅱ)等抑制酶活性;Pb(Ⅱ)、Fe(Ⅲ)有激活作用。在直隶环毛蚓(Pheretimatschiliensis)体内实验中,Zn(Ⅱ)显著提高过氧化氢酶的总活力;Cd(Ⅱ)、Ni(Ⅱ)先是降低、随后提高酶总活力。 展开更多
关键词 蚯蚓 过氧化氢酶 电泳 氧电极法 纯化
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猪肉高剂量辐照工艺及其营养变化 被引量:14
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作者 侯铮迟 孙大宽 +4 位作者 秦宗英 金江 朱莲娣 姚思德 盛康龙 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期325-328,共4页
高剂量的电离辐射辐照可有效杀灭食品载带的微生物病原体,以确保食品安全并延长保存期。本工作研究了新鲜猪里脊肉的高剂量γ射线辐照工艺,通过蛋白酶热钝化、真空包装和低温辐照等工艺,可将辐照过程中所产生的化学反应的影响降至最小... 高剂量的电离辐射辐照可有效杀灭食品载带的微生物病原体,以确保食品安全并延长保存期。本工作研究了新鲜猪里脊肉的高剂量γ射线辐照工艺,通过蛋白酶热钝化、真空包装和低温辐照等工艺,可将辐照过程中所产生的化学反应的影响降至最小。对辐照猪肉的蛋白质SDS(凝胶电泳)、氨基酸和维生素分析表明,在(–20±5)℃温度下进行45kGy辐照,猪肉样品的蛋白质无重大损伤,仅发生很小的结构变化,氨基酸基本维持不变,维生素B1和B2的保留率分别为22%和61%。 展开更多
关键词 辐射加工 热钝化 真空包装 低温辐照 凝胶电泳
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牛粪强化高含油污泥堆肥生物处理及评价 被引量:14
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作者 王斐 唐景春 +1 位作者 林大明 程秀 《生态学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期164-170,共7页
以农业废弃物牛粪为生物基质,与油泥废弃物按照质量1:1混合为3m×3m×0.35m的大型堆肥和1m×0.5m×0.35m的小型堆肥,采用现场堆肥法研究了牛粪对石油烃各组分、生物毒性和微生物多样性变化的影响。结果表明:堆肥初始C/N... 以农业废弃物牛粪为生物基质,与油泥废弃物按照质量1:1混合为3m×3m×0.35m的大型堆肥和1m×0.5m×0.35m的小型堆肥,采用现场堆肥法研究了牛粪对石油烃各组分、生物毒性和微生物多样性变化的影响。结果表明:堆肥初始C/N为26.4,随着堆肥时间的延长,整体呈下降趋势,处理后小型堆肥的C/N为18.4,大型堆肥样品的C/N为18.5,堆体均达到了腐熟;小型堆肥处理堆至115d后,总石油烃(TPH)降解率达到22.96%;石油烃各组分中饱和烃在堆肥过程中呈减少的趋势;芳香烃在大型堆肥下整体呈升高趋势,小型堆肥下则出现先上升后下降的趋势;发芽指数结果显示,堆肥样品在开始有较大的生物毒性,堆肥过程中发芽指数升高,堆肥结束后由发芽指数得出两种处理方式下的堆肥产物均达到腐熟;由变性梯度凝胶电泳(DGGE)图谱和图谱聚类分析得出,随着堆肥时间的延长,微生物群落也发生了较大的变化。大型堆肥与小型堆肥之间石油烃降解性的差异可能是不同堆肥体积对微生物群落多样性有较大影响所致。 展开更多
关键词 牛粪 强化处理 油泥 堆肥 变性梯度凝胶电泳(DGGE)
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黄檗丛枝菌根(AM)真菌PCR-DGGE条件研究 被引量:10
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作者 接伟光 蔡柏岩 +1 位作者 葛菁萍 阎秀峰 《黑龙江大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2008年第4期534-538,共5页
从东北林业大学林场采集黄檗根际土壤及菌根,采用Nested—PCR技术分别扩增黄檗菌根及根际土壤AM真菌18SrDNANS31/Glol区域,利用该扩增产物对AM真菌DGGE条件进行优化。表明Nested—PCR技术具有较高的灵敏性,可有效的从微量DNA中扩增... 从东北林业大学林场采集黄檗根际土壤及菌根,采用Nested—PCR技术分别扩增黄檗菌根及根际土壤AM真菌18SrDNANS31/Glol区域,利用该扩增产物对AM真菌DGGE条件进行优化。表明Nested—PCR技术具有较高的灵敏性,可有效的从微量DNA中扩增出约230bp的目标片段;经DGGE条件优化,确定AM真菌最佳DGGE条件为丙烯酰胺浓度8.0%,纯化后的PCR产物作为DGGE上样样品,凝胶变性梯度范围30%~60%,电泳电压130V,电泳时间8h,电泳温度60℃。 展开更多
关键词 黄檗 丛枝菌根真菌 Nested—PCR 变性梯度凝胶电泳
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轮状病毒感染与健康儿童肠道菌群结构的比较 被引量:10
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作者 杜惠敏 陈颖虹 +3 位作者 陈俊仪 张美玲 赵立平 庞晓燕 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第18期1237-1238,1249,共3页
目的比较轮状病毒(RV)感染与健康儿童肠道菌群结构的差异,为临床治疗提供有价值的参考依据。方法采集20例RV感染及6例健康儿童粪便样品,提取粪便样品中细菌的混合DNA,先通过肠道菌重复性基因内一致性序列(ERIC)-聚合酶链反应(PCR)结合... 目的比较轮状病毒(RV)感染与健康儿童肠道菌群结构的差异,为临床治疗提供有价值的参考依据。方法采集20例RV感染及6例健康儿童粪便样品,提取粪便样品中细菌的混合DNA,先通过肠道菌重复性基因内一致性序列(ERIC)-聚合酶链反应(PCR)结合分子杂交技术分析两组儿童之间肠道微生物组成的相似性;再扩增粪便样品中菌群的16 S rDNA基因V3区,利用PCR-TGGE技术分析肠道菌群的组成情况,研究两组儿童肠道微生物菌群组成的差异。结果肠道菌群的组成有很强的宿主专一性。RV感染与健康儿童相比,肠道菌群中糖皮质激素(GC)水平较低的细菌明显减少。微生态制剂治疗组温度梯度凝胶电泳(TGGE)条带数有一个逐渐增加的过程。结论轮状病毒感染时,可致患儿肠道菌群紊乱,但用抗生素治疗将更致肠道微生态失调,不利于患儿肠道菌群恢复,建议临床医师在轮状病毒感染时,慎用抗生素。 展开更多
关键词 轮状病毒 肠道菌重复性基因一致性序列-聚合酶链式反应 温度梯度凝胶电泳 肠道菌群
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含氮杂环化合物对四膜虫的毒性作用研究 被引量:9
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作者 徐忠东 施荣华 +1 位作者 耿明 陶瑞松 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期57-62,共6页
从DNA损伤角度探讨吲哚、吡啶、喹啉和异喹啉4种工业废水中常见的含氮杂环化合物对模式材料四膜虫的毒性作用。采用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)和流式细胞术2种快速而灵敏的检测方法联合检测,以四膜虫的彗尾长度、拖尾率、细胞损伤率、DN... 从DNA损伤角度探讨吲哚、吡啶、喹啉和异喹啉4种工业废水中常见的含氮杂环化合物对模式材料四膜虫的毒性作用。采用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)和流式细胞术2种快速而灵敏的检测方法联合检测,以四膜虫的彗尾长度、拖尾率、细胞损伤率、DNA损伤专用单位以及DNA相对荧光强度为指标,研究以上4种含氮杂环化合物引起四膜虫核DNA损伤而表现的毒性作用。单细胞凝胶电泳检测表明:四膜虫经4种含氮杂环化合物在不同质量浓度(5和50 mg/L)条件下染毒后彗尾长度、DNA损伤专用单位与阴性对照组比较,有显著差异(P<0.01)。吲哚处理组与吡啶处理组同浓度比较,P>0.05,差异不显著;与喹啉、异喹啉处理组同浓度比较,P<0.01,差异显著。吡啶处理组与喹啉、异喹啉处理组相同质量浓度比较,P<0.01,差异显著。喹啉处理组与异喹啉处理组低质量浓度比较差异不显著,高质量浓度比较则差异显著。流式细胞实验表明:2种质量浓度处理组DNA相对荧光强度低的细胞数比对照组明显增加,4种含氮杂环化合物均表现出较强毒性,毒性大小由强到弱依次为异喹啉、喹啉、吲哚、吡啶。 展开更多
关键词 含氮杂环化合物 毒性 四膜虫 DNA损伤 单细胞凝胶电泳 流式细胞术
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