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结直肠癌中FAK、FAK pY397、Akt、NF-κB表达及相关性研究 被引量:13
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作者 陈玉英 陈克力 +5 位作者 潘凤 杨黎 李建军 向浏欣 何建明 梁后杰 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2009年第3期199-202,共4页
目的:检测黏着斑激酶(FAK)、磷酸化FAK(FAK pY397)、Akt和细胞核因子(NF-κB)在结直肠癌组织中的表达,并探讨其相关性。方法:采用免疫组织化学SP法,检测74例结直肠癌组织与10例正常结肠组织中FAK、FAK pY397、Akt和NF-κB的表达。结果:... 目的:检测黏着斑激酶(FAK)、磷酸化FAK(FAK pY397)、Akt和细胞核因子(NF-κB)在结直肠癌组织中的表达,并探讨其相关性。方法:采用免疫组织化学SP法,检测74例结直肠癌组织与10例正常结肠组织中FAK、FAK pY397、Akt和NF-κB的表达。结果:结直肠癌组织标本中FAK、FAK pY397、Akt和NF-κB的阳性率分别为82.43%、45.95%、52.70%和59.46%,除FAK pY397外,FAK、Akt、NF-κB均与正常结肠壁组织表达的差异显著(P<0.05)。FAK表达与分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05),但不受患者性别、年龄、肿瘤的大小及位置、Dukes分期的影响。Akt阳性表达与分化程度显著相关(P<0.05),NF-κB表达与淋巴结转移显著有关(P<0.05),并且Akt、NF-κB表达与FAK表达呈显著正相关(P<0.05)。结论:FAK、Akt、NF-κB在结直肠癌组织中均高表达,且Akt、NF-κB表达与FAK有显著正相关性,提示生存信号传导通路FAK/Akt/NF-κB在结直肠癌的发生、演进中起重要作用。 展开更多
关键词 黏着斑激酶 AKT 核因子一KB 结直肠癌
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粘着斑相关非激酶对骨桥蛋白促血管平滑肌细胞迁移的抑制作用及分子机制 被引量:11
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作者 刘智敏 韩梅 温进坤 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期131-137,共7页
为阐明整合素 β3 粘着斑激酶 (FAK)信号途径在骨桥蛋白 (OPN)诱导血管平滑肌细胞(VSMC)迁移中的作用 ,用FAK磷酸化特异性抑制剂粘着斑相关非激酶 (FRNK)选择性阻断FAK磷酸化 ,观察对OPN 整合素 β3 相互作用所激活的FAK信号通路的影... 为阐明整合素 β3 粘着斑激酶 (FAK)信号途径在骨桥蛋白 (OPN)诱导血管平滑肌细胞(VSMC)迁移中的作用 ,用FAK磷酸化特异性抑制剂粘着斑相关非激酶 (FRNK)选择性阻断FAK磷酸化 ,观察对OPN 整合素 β3 相互作用所激活的FAK信号通路的影响及其与OPN诱导VSMC迁移之间的关系 .外源性FRNK在VSMC中的过表达可显著抑制OPN诱导的VSMC迁移 ,使跨膜迁移细胞数下降 5 0 5 8% (P <0 0 5 ) .OPN刺激不但明显诱导FAK表达 ,而且还促进其磷酸化 .外源性FRNK对OPN诱导的FAK磷酸化具有显著抑制作用 ,使磷酸化型FAK水平比相应对照细胞下降5 9 1% ,但其对FAK表达不产生明显的影响 .FRNK还具有下调整合素 β3 表达的作用 ,免疫荧光细胞化学分析结果显示 ,在转染FRNK的VSMC中 ,粘着斑蛋白的磷酸化水平降低 ,粘着斑数量明显减少 .结果提示 ,整合素 β3 FAK是介导VSMC迁移的重要信号途径 ,外源性FRNK通过下调 β3 表达、抑制FAK磷酸化和减少粘着斑蛋白磷酸化及粘着斑形成等机制 ,减弱OPN刺激信号的跨膜转导及沿胞内途径传递 ,发挥抑制OPN促VSMC迁移的效应 . 展开更多
关键词 骨桥蛋白 粘着斑激酶 粘着斑相关非激酶 血管平滑肌细胞 迁移
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抗肿瘤新靶点黏着斑激酶FAK及其抑制剂研究进展 被引量:12
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作者 陈瑛 王丹丹 +2 位作者 朱虹 何俏军 杨波 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 2016年第2期255-260,共6页
FAK是细胞内一种非受体酪氨酸激酶,参与胞内多条信号通路的传导。FAK在多种类型的肿瘤细胞中都出现表达量和活性上调现象,通过激酶依赖和非激酶依赖机制参与肿瘤细胞侵袭、转移、增殖、生长和抗凋亡等多个过程,是目前研究较多的抗肿瘤... FAK是细胞内一种非受体酪氨酸激酶,参与胞内多条信号通路的传导。FAK在多种类型的肿瘤细胞中都出现表达量和活性上调现象,通过激酶依赖和非激酶依赖机制参与肿瘤细胞侵袭、转移、增殖、生长和抗凋亡等多个过程,是目前研究较多的抗肿瘤靶点之一。多个不同机制的FAK抑制剂正处于临床前研究和临床试验阶段,能够抑制特定类型肿瘤的生长、转移等。本文对近年来FAK与肿瘤的关系以及FAK抑制剂抗肿瘤作用的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 黏着斑激酶(fak) 肿瘤 fak抑制剂
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阳性表达表皮钙粘蛋白增加G0/G1期人乳腺癌细胞比例及其分子机制 被引量:10
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作者 吴衡 沈敏雄 +4 位作者 梁玉龙 段玲玲 王丽影 徐贞 查锡良 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第3期435-441,共7页
表皮钙粘蛋白 (E cadherin)阴性的乳腺癌细胞株MDA MB 2 3 1和MDA MB 43 5转染野生型表皮钙粘蛋白基因 ,通过流式细胞仪测量细胞周期发现表皮钙粘蛋白阳性细胞生长变慢 ,更多细胞停滞在G0 /G1期 ,蛋白质印迹证实由G0 /G1期进入S期的重... 表皮钙粘蛋白 (E cadherin)阴性的乳腺癌细胞株MDA MB 2 3 1和MDA MB 43 5转染野生型表皮钙粘蛋白基因 ,通过流式细胞仪测量细胞周期发现表皮钙粘蛋白阳性细胞生长变慢 ,更多细胞停滞在G0 /G1期 ,蛋白质印迹证实由G0 /G1期进入S期的重要调控分子细胞周期蛋白 D1(cyclinD1)下降了 ,并发现表皮钙粘蛋白还能降低直接激活细胞周期蛋白 D1基因转录的 β 连环蛋白的蛋白质浓度 .蛋白激酶B (PKB)能通过抑制糖原合成激酶 3 β(GSK 3 β)的活性来抑制β 连环蛋白降解 ,并在乳腺癌高转移细胞株中普遍过表达 ,其表达同样受到了表皮钙粘蛋白的抑制 .并且在表皮钙粘蛋白阳性细胞中 ,作为PKB上游信号分子并能激活PKB的粘着斑激酶 (FAK)和整联蛋白相关激酶 (ILK)蛋白量也发生下降 ,能抑制PKB激活的PTEN蛋白量却增加了 .结果显示 ,表皮钙粘蛋白能通过降低乳腺癌细胞中的PKB蛋白浓度 ,并通过上游信号分子抑制PKB的激活 ,进而降低PKB对β 连环蛋白降解的抑制作用 ,导致 β 连环蛋白直接调控的靶基因细胞周期蛋白D1的表达量下降 ,引起更多的细胞停止在G0 展开更多
关键词 表皮钙粘蛋白 G0/G1期 人乳腺癌细胞 分子机制 细胞周期蛋白D1 蛋白激酶B
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黄芩素介导FAK蛋白调控PI3K/Akt信号通路抑制胃癌HGC-27细胞增殖和迁移 被引量:10
5
作者 乔丹 张晟郡 +4 位作者 王时玉 姚光媛 蔡英兰 陈丽艳 朴英实 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期73-80,共8页
目的:研究黄芩素介导黏着斑激酶(FAK)调控磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路影响胃癌HGC-27细胞增殖和迁移的作用和可能的分子机制。方法:使用黄芩素(0、5、15、25、50μmol·L^(-1))处理胃黏膜上皮GES-1细胞、胃癌HGC... 目的:研究黄芩素介导黏着斑激酶(FAK)调控磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路影响胃癌HGC-27细胞增殖和迁移的作用和可能的分子机制。方法:使用黄芩素(0、5、15、25、50μmol·L^(-1))处理胃黏膜上皮GES-1细胞、胃癌HGC-27细胞48 h,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖活力;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测不同浓度黄芩素干预对FAK、上皮细胞-间质转化(EMT)及PI3K信号通路相关蛋白表达情况。利用慢病毒转染技术,构建稳定过表达FAK的胃癌HGC-27细胞,Western blot及绿色荧光蛋白(GFP)荧光检测FAK转染情况。细胞分为空载体组、黄芩素组、FAK过表达组和黄芩素处理FAK过表达组;MTT比色法检测细胞增殖活力;平板克隆形成实验观察克隆形成能力;Transwell迁移实验检测细胞迁移能力;Western blot检测EMT及PI3K信号通路相关蛋白表达情况。结果:与空白组比较,黄芩素(15、25、50μmol·L^(-1))组可明显抑制胃癌HGC-27细胞的增殖(P<0.05,P<0.01),并呈剂量依赖性,而对胃黏膜上皮GES-1细胞则未见明显抑制作用,黄芩素(5,15,25μmol·L^(-1))还可下调磷酸化(p)-FAK蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01)。慢病毒转染HGC-27细胞后,与空载体组比较,FAK过表达组中FAK蛋白的相对表达量明显升高,GFP荧光拍照显示空载体组和FAK过表达组中HGC-27细胞均带有绿色荧光。MTT比色法、平板克隆形成实验及Transwell迁移实验检测结果显示,与空载体组比较,黄芩素组对HGC-27细胞的增殖、克隆形成和迁移具有抑制作用,FAK过表达组促进胃癌细胞的增殖、克隆形成和迁移能力。与FAK过表达组比较,使用黄芩素处理FAK过表达组则会抑制FAK增强的细胞增殖和迁移能力(P<0.05)。与空白组比较,黄芩素(15、25μmol·L^(-1))可明显上调胃癌HGC-27细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白表达,下调波形蛋白(Vimentin)、Snail、p-PI3K和p-Akt蛋白表达(P<0.05,P<0.01);与空载体组比较,FAK� 展开更多
关键词 黄芩素 胃癌 黏着斑激酶(fak) 细胞增殖 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路
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FAK和Src在甲状腺乳头状癌中的表达及其在肿瘤侵袭转移中的临床意义及机制研究 被引量:11
6
作者 陈蕾 柳玉红 +4 位作者 邹桂华 龚静青 温寿青 邱立 汪春福 《现代肿瘤医学》 CAS 2017年第6期876-880,共5页
目的:探讨黏着斑激酶(FAK)和Src在甲状腺乳头状癌侵袭转移中的临床意义。方法:利用免疫组化检测FAK和Src在100例甲状腺乳头状癌组织中的表达,并分析其与患者临床病理参数的关系。利用Western blot以及qRT-PCR检测FAK和Src在甲状腺癌细... 目的:探讨黏着斑激酶(FAK)和Src在甲状腺乳头状癌侵袭转移中的临床意义。方法:利用免疫组化检测FAK和Src在100例甲状腺乳头状癌组织中的表达,并分析其与患者临床病理参数的关系。利用Western blot以及qRT-PCR检测FAK和Src在甲状腺癌细胞株中与上皮间质转化(EMT)的相关性。结果:FAK与甲状腺乳头状癌的年龄(P=0.000)、T分期(P=0.176)、N分期(P=0.000)、M分期(P=0.000)、临床分期(P=0.038)、局部复发(P=0.000)、淋巴结侵袭(P=0.014)以及与患者较低生存期(P<0.000 1)密切相关;Src与甲状腺乳头状癌的N分期(P=0.000)、M分期(P=0.002)、淋巴结侵袭(P=0.000)、包膜侵袭(P=0.029)以及患者的较低生存期(P<0.000 1)密切相关。并且高表达FAK与Src的细胞其N-cadherin、Vimentin的表达增高,而E-cadherin的表达降低。结论:FAK以及Src与甲状腺乳头状癌的侵袭转移密切相关,并可能通过EMT的方式促进其侵袭和转移。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 fak SRC 免疫组化 临床病理学参数 浸润 转移
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川芎含药血清对大鼠肝星状细胞大麻素受体1相关信号通路的影响 被引量:9
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作者 何娟 曹文富 +1 位作者 王海兰 韩仕庆 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1397-1401,共5页
目的观察川芎含药血清对血小板源生长因子(PDGF-BB)活化的大鼠肝星状细胞(HSCs)大麻素受体1(CB1)、黏着斑激酶(FAK)及磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-Akt)蛋白表达的影响,探讨其抗纤维化的作用机制。方法制备川芎含药血清,MTT法检测川... 目的观察川芎含药血清对血小板源生长因子(PDGF-BB)活化的大鼠肝星状细胞(HSCs)大麻素受体1(CB1)、黏着斑激酶(FAK)及磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-Akt)蛋白表达的影响,探讨其抗纤维化的作用机制。方法制备川芎含药血清,MTT法检测川芎含药血清对肝星状细胞增殖情况,Western blot法分析肝星状细胞CB1、FAK、p-Akt蛋白的表达。结果与正常对照组相比,PDGF-BB作用24 h能刺激HSCs增殖,上调CB1、FAK、p-Akt蛋白的表达;川芎含药血清、秋水仙碱及大麻素受体1抑制剂AM251均能明显抑制上述效应;且加入AM251后,川芎含药血清对上述效应的抑制效果增强,且作用呈剂量依赖性。结论川芎含药血清可能通过大麻素相关信号通路抑制HSCs增殖,从而发挥防治肝纤维化的作用。 展开更多
关键词 川芎含药血清 肝纤维化 肝星状细胞 大麻素受体1相关信号通路 黏着斑激酶 磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶
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胃泌素在胃肠道肿瘤中的作用及其信号转导途径的研究进展 被引量:7
8
作者 潘峻涛 吴佩 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2008年第7期822-827,共6页
胃泌素对于胃肠道肿瘤的促进作用已经被很多研究所证实。胃泌素与细胞表面受体结合后,通过一定的信号转导途径来调节某些基因转录与表达,从而促进肿瘤发生与发展。通过对胃泌素在胃肠道肿瘤中作用机制及其信号转导途径研究,有望找到更... 胃泌素对于胃肠道肿瘤的促进作用已经被很多研究所证实。胃泌素与细胞表面受体结合后,通过一定的信号转导途径来调节某些基因转录与表达,从而促进肿瘤发生与发展。通过对胃泌素在胃肠道肿瘤中作用机制及其信号转导途径研究,有望找到更有效的胃肠道肿瘤治疗方法。 展开更多
关键词 胃泌素 受体 信号转导 黏着斑激酶(fak)
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应用组织芯片技术检测KAI1、MRP-1、FAK蛋白在肺癌组织中的表达 被引量:6
9
作者 王新允 刘婷 +4 位作者 朱丛中 李艳 孙锐 孙翠云 王爱香 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第9期1091-1095,共5页
背景与目的:肿瘤的发生发展、浸润转移与多基因改变密切相关。目前Kang-ai-1(KAI1)、移动相关蛋白(motility-relatedprotein-1,MRP-1)和局部粘着斑激酶(focaladhesionkinase,FAK)3种基因在肺癌中的共同作用研究较少。本研究旨在探讨这3... 背景与目的:肿瘤的发生发展、浸润转移与多基因改变密切相关。目前Kang-ai-1(KAI1)、移动相关蛋白(motility-relatedprotein-1,MRP-1)和局部粘着斑激酶(focaladhesionkinase,FAK)3种基因在肺癌中的共同作用研究较少。本研究旨在探讨这3种基因的蛋白产物在肺癌发生发展中的作用及其在肿瘤诊断和预后判断中的价值。方法:应用免疫组化SP方法检测包含240个点的肺癌组织芯片中KAI1、MRP-1和FAK蛋白的表达。结果:KAI1在肺癌原发灶中阳性率为25.9%,MRP-1为42.6%,与正常肺组织(100%)相比均显著下调;FAK蛋白在肺癌组织中阳性率为44.4%,与正常肺组织相比显著增高;KAI1、FAK两种蛋白在肺癌组织中的表达与患者的年龄、性别、肿瘤的大体类型及组织类型无关,而与肿瘤的分化程度、临床分期及是否伴有淋巴结转移密切相关,两种蛋白的表达呈显著负相关。MRP-1蛋白在肺癌组织中的表达与组织类型有关,小细胞肺癌与非小细胞肺癌相比差异显著,MRP-1与KAI1呈显著正相关,与FAK呈显著负相关。结论:KAI1、MRP-1和FAK的异常表达与肺癌的浸润转移有关,联合检测这3项指标对肺癌的发生发展有重要的预测作用。 展开更多
关键词 肺肿瘤/遗传学 肺肿瘤/病理学 KAI1 MRP-1 fak 组织芯片/诊断应用 诊断
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Krüppel样转录因子8(KLF8)的结构及功能 被引量:6
10
作者 万伟峰 朱继 +2 位作者 方升 籍新潮 吕国伟 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期305-309,共5页
Krüppel样转录因子8(Krüppel-like factor 8,KLF8)是KLFs家族中的一员.KLF8在羧基端含有3个保守的C2H2锌指结构域,用于与DNA结合.KLF8的转录受粘着斑激酶(focal adhesionkinase,FAK)、KLF1(erythroid krüppel-like facto... Krüppel样转录因子8(Krüppel-like factor 8,KLF8)是KLFs家族中的一员.KLF8在羧基端含有3个保守的C2H2锌指结构域,用于与DNA结合.KLF8的转录受粘着斑激酶(focal adhesionkinase,FAK)、KLF1(erythroid krüppel-like factor1)、KLF3(basic Krüppel-like factor)的调控.类泛素化是KLF8翻译后主要的修饰方式.KLF8在氨基端含有特定的PVALS/T基序,与辅助抑制因子C末端结合蛋白(C-terminal binding protein,CtBP)相互作用,抑制调节区含CACCC元件的基因表达.此外,还可以通过招募辅助激活因子p300和p300/CBP相关因子(P/CAF)辅助激活靶基因的表达.同时,KLF8在细胞周期循环、细胞侵袭和上皮-间质转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)、细胞致癌性转化及肿瘤发生发展中发挥作用. 展开更多
关键词 Krüppel样转录因子8(KLF8) 上皮-间质转化(EMT) 粘着斑激酶(fak) 细胞周期素D1
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miR-7和ciRS-7在宫颈癌中的表达及意义 被引量:6
11
作者 郝臻凤 王娟 +5 位作者 周留林 刘静 孔桂美 杨纪实 张艳青 钱静 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS 北大核心 2016年第3期20-23,41,共5页
采用实时定量PCR方法检测47例人宫颈癌组织及35例正常宫颈组织中miR-7、ciRS-7及黏着斑激酶(FAK)mRNA的表达,并分析其表达的相关性,探讨其临床意义。结果表明:1 miR-7在人宫颈癌组织中的表达明显低于正常宫颈组织,而ciRS-7在人宫颈癌组... 采用实时定量PCR方法检测47例人宫颈癌组织及35例正常宫颈组织中miR-7、ciRS-7及黏着斑激酶(FAK)mRNA的表达,并分析其表达的相关性,探讨其临床意义。结果表明:1 miR-7在人宫颈癌组织中的表达明显低于正常宫颈组织,而ciRS-7在人宫颈癌组织中的表达高于正常宫颈组织(P<0.05),且miR-7、ciRS-7在宫颈癌中的表达存在明显的负相关(r=-0.644,P<0.05);2 FAK mRNA在正常宫颈组织低表达,在宫颈癌组织中高表达,两组相比差异显著(P<0.05)。说明在宫颈癌组织和细胞中miR-7与ciRS-7的表达存在明显的负相关,且ciRS-7、miR-7与FAK的表达存在相关性,提示这些基因有望为宫颈癌的诊断和治疗提供新的分子靶向。 展开更多
关键词 宫颈癌 微小RNA-7 环状RNA-7 黏着斑激酶(fak) 分子标靶
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Pyk2与肿瘤关系的研究进展 被引量:6
12
作者 王站 张玉石 《基础医学与临床》 CSCD 2019年第4期585-588,共4页
富含脯氨酸蛋白酪氨酸激酶(Pyk2)是黏着斑激酶家族中的一员。Pyk2参与包括乳腺癌、肝癌在内的多种肿瘤的发生、浸润及转移,并且与肿瘤的预后密切相关。明确Pyk2在肿瘤发生发展中的作用,能为新的抗癌靶向药物的研发提供理论基础。
关键词 富含脯氨酸蛋白酪氨酸激酶 黏着斑激酶 肿瘤
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FAK在肝细胞癌中的表达及临床病理意义 被引量:5
13
作者 韩少山 刘青光 +4 位作者 周振宇 姚英民 宋涛 昝献峰 孙昊 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期81-84,127,共5页
目的研究FAK在肝细胞癌组织中的表达情况以及其与临床病理特征的联系,并探讨其表达与肝细胞癌患者预后之间的关系。方法利用RT-PCR法检测了52例肝癌组织及对应的癌旁组织中FAK mRNA的表达水平。分析了FAK mRNA的表达水平与肝癌临床病理... 目的研究FAK在肝细胞癌组织中的表达情况以及其与临床病理特征的联系,并探讨其表达与肝细胞癌患者预后之间的关系。方法利用RT-PCR法检测了52例肝癌组织及对应的癌旁组织中FAK mRNA的表达水平。分析了FAK mRNA的表达水平与肝癌临床病理特征之间的关系。利用免疫组化的方法检测了FAK蛋白在30例肝癌组织及其癌旁组织和10例正常肝脏组织中的表达。Kaplan-Meier生存分析和Cox回归分析了FAK表达与肝癌手术治疗预后的关系。结果肝癌组织中FAK mRNA的表达水平显著高于其癌旁组织(0.48±0.12 vs.0.17±0.07;P<0.05)。FAK mRNA表达水平与肿瘤直径、组织病理分化程度、TNM分期、血管侵犯等临床病理特征显著相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析和COX回归模型分析发现FAK表达是影响肝细胞癌术后生存率的因素。30例肝癌组织细胞质中广泛表达FAK蛋白,主要定位于肝癌细胞质内,阳性率为60%(18/30),癌旁组织阳性率为26.3%(8/30),10例正常肝组织阳性表达率为20%(2/10)。结论 FAK在肝癌组织中高表达,这与肝癌的恶性临床病理特征相关,也是判断肝细胞癌手术治疗预后的指标,提示FAK可能成为肝癌潜在的分子标志物或治疗靶点。 展开更多
关键词 黏着斑激酶(fak) 肝细胞癌 RT—PCR 免疫组化 临床病理
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FAK通过粘着斑蛋白调控血管内皮细胞迁移的研究 被引量:4
14
作者 高敏 刘肖珩 +3 位作者 孙亨 任弘毅 王利娟 沈阳 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第3期567-571,共5页
血管内皮细胞(VECs)迁移导致的肿瘤内血管新生是肿瘤生长和转移的必要条件。本研究目的在于探索粘着斑激酶(FAK)引起的粘着斑蛋白变化以及对VECs黏附和迁移的影响。采用粘着斑激酶抑制剂(50nmol/mL)抑制FAK在Y397位点的磷酸化,划痕法测... 血管内皮细胞(VECs)迁移导致的肿瘤内血管新生是肿瘤生长和转移的必要条件。本研究目的在于探索粘着斑激酶(FAK)引起的粘着斑蛋白变化以及对VECs黏附和迁移的影响。采用粘着斑激酶抑制剂(50nmol/mL)抑制FAK在Y397位点的磷酸化,划痕法测定FAK抑制剂在0、5、10、30、60、120min对VECs迁移的影响,免疫荧光测定FAK抑制剂作用120min后细胞骨架的变化,Western blot测定FAK抑制剂的加入对粘着斑vinculin、talin和paxillin蛋白表达的变化情况。结果表明,FAK抑制剂加入后,与对照组相比细胞迁移距离明显减少,胞间连丝被打断,vinculin蛋白表达在各时间点基本一致,而talin和paxillin表达在初始的5~10min出现降低趋势,30min有缓慢升高,30min后表达再次降低。本研究结果证明了阻断FAK的磷酸化可下调几种粘着斑蛋白复合物的表达,在细胞水平上抑制了VECs的黏附和迁移行为。该研究结果为由VECs迁移引起的肿瘤内血管新生的治疗提供了一定的实验基础。 展开更多
关键词 粘着斑激酶 粘着斑蛋白 血管内皮细胞 细胞黏附 细胞迁移
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蚯蚓纤溶酶对人肝癌细胞侵袭转移潜能的影响 被引量:4
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作者 陈洪 沈珊珊 +1 位作者 张治国 陈宝安 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期383-385,共3页
目的探讨蚯蚓纤溶酶(EFE)对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞侵袭、转移潜能的影响。方法将不同浓度EFE作用于体外培养的SMMC-7721细胞,通过细胞-基质粘附实验检测SMMC-7721细胞与基质胶(matrigel)黏附性,transwell小室模型测定细胞侵袭能力... 目的探讨蚯蚓纤溶酶(EFE)对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞侵袭、转移潜能的影响。方法将不同浓度EFE作用于体外培养的SMMC-7721细胞,通过细胞-基质粘附实验检测SMMC-7721细胞与基质胶(matrigel)黏附性,transwell小室模型测定细胞侵袭能力和迁移能力的改变,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹(Westernblot)分别检测不同药物浓度作用后细胞内黏着斑激酶(FAK)mRNA及蛋白表达量的变化。结果与对照组相比,EFE2、4、6uku/ml作用于SMMC-7721细胞能降低肝癌细胞与基质胶的黏附性(P<0.01)、降低SMMC-7721细胞的侵袭力及迁移能力(P<0.05或P<0.01);同时能够下调FAKmRNA和蛋白的表达(P<0.01)。结论EFE能抑制肝癌SMMC-7721细胞的侵袭和转移,其机制可能与其抑制FAK的表达有关,EFE具有潜在的抗肝癌细胞侵袭、转移作用。 展开更多
关键词 蚯蚓纤溶酶 肝癌 黏着斑激酶
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人黏着斑激酶(FAK)原核表达及多克隆抗体制备与鉴定
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作者 张丽 张娅 +4 位作者 季江颖 魏梓妤 刘家宇 许涛 汪洪涛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期175-180,共6页
目的克隆、表达与纯化黏着斑激酶(FAK)基因C端黏着斑定位序列(第798~1041位氨基酸),制备兔抗FAK多克隆抗体并鉴定。方法PCR法体外扩增FAK基因C端序列(2671~3402 bp),克隆至pCZN1,构建pCZN1-FAK重组表达载体,将重组表达载体转化到大肠杆... 目的克隆、表达与纯化黏着斑激酶(FAK)基因C端黏着斑定位序列(第798~1041位氨基酸),制备兔抗FAK多克隆抗体并鉴定。方法PCR法体外扩增FAK基因C端序列(2671~3402 bp),克隆至pCZN1,构建pCZN1-FAK重组表达载体,将重组表达载体转化到大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)感受态细胞,用异丙基β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达;利用镍-次氮基三乙酸(Ni-NTA)金属鳌合亲和层析树脂进行蛋白纯化,并免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体;通过间接ELISA和Western blot法进行效价和特异性鉴定。结果成功构建pCZN1-FAK重组表达载体,FAK蛋白主要以包涵体形式表达。目的蛋白纯化后,制备的兔抗FAK多克隆抗体效价达1∶512000,且与外源和内源FAK蛋白发生特异性反应。结论成功克隆、表达与纯化FAK蛋白,制备兔抗FAK多克隆抗体,可用于内源FAK蛋白特异性检测。 展开更多
关键词 人黏着斑激酶(fak) 多克隆抗体
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加味四君子汤合骨髓间充质干细胞对阿霉素肾病大鼠骨代谢的影响 被引量:4
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作者 张娟 林秀芹 +4 位作者 郑京 郭珍 陈海燕 陈雪兰 陈小英 《中医药临床杂志》 2015年第4期544-548,共5页
目的:观察加味四君子汤合骨髓间充质干细胞(BMSCs)对阿霉素肾病大鼠骨代谢的影响。方法:制作大鼠阿霉素肾病模型,将60只SD大鼠随机分为6组,即A组:正常组;B组:模型组;C组:激素组;D组:干细胞组;E组:干细胞+激素组;F组:中药+干细胞组。各... 目的:观察加味四君子汤合骨髓间充质干细胞(BMSCs)对阿霉素肾病大鼠骨代谢的影响。方法:制作大鼠阿霉素肾病模型,将60只SD大鼠随机分为6组,即A组:正常组;B组:模型组;C组:激素组;D组:干细胞组;E组:干细胞+激素组;F组:中药+干细胞组。各组于造模后第7天、第21天和第35天收集24h尿标本,以双缩脲比色法测定大鼠尿蛋白,以ELISA法测定血清骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)水平,用实时定量PCR检测骨组织中OPG、RANKL及黏着斑激酶(FAK)的表达,Western blot检测骨组织FAK的表达。结果:与A组比较,第7天,各组尿蛋白升高;与B组比,第21天和35天,C、D、E、F组尿蛋白降低。与B组比较,C组血清OPG、OPG m RNA和FAK m RNA及其蛋白均降低,血清RANKL和RANKL m RNA均升高。与C组比较,D组、F组血清OPG及m RNA和FAK m RNA及其蛋白均升高,血清RANKL及m RNA均降低。与D组比较,E组血清OPG、OPG m RNA和FAK m RNA及其蛋白均降低,血清RANKL和RANKL m RNA均升高。结论:FAK-OPG/RANKL通路可能在泼尼松诱导的骨质疏松的形成中发挥着重要的作用,加味四君子汤合BMSCs能一定程度上逆转这一趋势而延缓诱导的骨质疏松的形成,且有协同作用。 展开更多
关键词 阿霉素肾病 骨质疏松 黏着斑激酶 骨髓间充质干细胞 加味四君子汤
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FAK在宫颈癌中的表达及临床意义 被引量:3
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作者 郝臻凤 王娟 +4 位作者 周留林 刘静 孔桂美 杨纪实 钱静 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS 北大核心 2016年第4期21-26,共6页
用免疫组织化学SP方法和实时定量PCR方法检测47例宫颈癌及35例正常宫颈组织中黏着斑激酶(FAK)的mRNA和蛋白的表达情况,探讨其临床意义。结果表明:① FAK在宫颈癌组织中比在正常宫颈组织中表达高(P〈0.05);② FAK在宫颈癌FIGO临床... 用免疫组织化学SP方法和实时定量PCR方法检测47例宫颈癌及35例正常宫颈组织中黏着斑激酶(FAK)的mRNA和蛋白的表达情况,探讨其临床意义。结果表明:① FAK在宫颈癌组织中比在正常宫颈组织中表达高(P〈0.05);② FAK在宫颈癌FIGO临床分期Ⅲ~Ⅳ期中比I~Ⅱ期表达高(P〈0.05);③ FAK在宫颈癌浸润深度〉1/2组织中较浸润深度≤1/2组织中表达高(P〈0.05);④伴有淋巴结转移组的宫颈癌组织比不伴有淋巴结转移组FAK的表达量显著增高(P〈0.05)。说明FAK的表达随宫颈癌病变的发展而逐渐增高,可能参与了宫颈癌的发生发展、侵袭、转移过程,可作为判定早期宫颈癌向中晚期进展的高危指标,为宫颈癌的早期诊断及预后判断提供新的分子标靶。 展开更多
关键词 宫颈癌 黏着斑激酶(fak) 分子标靶
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卵巢癌早期诊断标志物的蛋白质组学筛选 被引量:2
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作者 樊冬梅 史惠蓉 +2 位作者 陈志敏 吴庆华 张瑞涛 《医药论坛杂志》 2012年第2期54-57,共4页
目的采用蛋白质组学方法在卵巢癌患者的多种体液中同时筛选出共同异常的多肽,用于卵巢癌早期诊断的研究,并在组织和血清中进行验证,加深对卵巢癌癌变机制的理解。方法采用WCX磁珠结合MALDI-TOF-MS技术在卵巢癌患者的血清、腹水、尿液、... 目的采用蛋白质组学方法在卵巢癌患者的多种体液中同时筛选出共同异常的多肽,用于卵巢癌早期诊断的研究,并在组织和血清中进行验证,加深对卵巢癌癌变机制的理解。方法采用WCX磁珠结合MALDI-TOF-MS技术在卵巢癌患者的血清、腹水、尿液、囊液中进行比对筛选,将筛选出的异常改变的多肽峰在SWISS-PROT数据库中检索,筛选出相应多肽,并采用免疫组化和ELISA方法在卵巢癌组织和血清中进行验证。结果 4种体液中筛选出来卵巢癌患者血清中下调和上调的多肽峰分别为6081Da和4466Da(P<0.05),在数据库中检索到分别为DLC1和FAK的相应多肽,在卵巢癌组织和血清中呈显著低表达(χ2=29.92,P<0.01)和高表达(χ2=27.65,P<0.01)。结论同一个体的四种体液中同时筛选得到的肿瘤标志物具有较高的特异性,对卵巢癌的早期诊断具有一定价值。 展开更多
关键词 卵巢癌 早期诊断 磁珠 MALDI-TOF-MS 肝癌缺失基因1(DLC1) 黏着斑激酶(fak)
原文传递
FAK和MMP-9蛋白在结直肠癌组织中的表达及相关性研究 被引量:1
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作者 梁水权 吕益中 +1 位作者 王羲中 王育烽 《结直肠肛门外科》 2008年第3期157-160,共4页
目的探讨斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase,MMP-9)在结直肠癌中的表达。方法采用免疫组化法检测了67例结直肠癌和癌旁组织以及51例正常结直肠黏膜组织中FAK和MMP-9的表达,并比较了不同临... 目的探讨斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase,MMP-9)在结直肠癌中的表达。方法采用免疫组化法检测了67例结直肠癌和癌旁组织以及51例正常结直肠黏膜组织中FAK和MMP-9的表达,并比较了不同临床病理参数下FAK和MMP-9的表达情况。结果结直肠癌组织FAK阳性表达(77.6%,52/67)高于癌旁组织(50.8%,34/67)和正常结直肠黏膜组织(37.3%,19/51),结直肠癌组织中MMP-9染色阳性率(73.1%,49/67)高于癌旁组织(49.3%,33/67)和正常结直肠黏膜组织(31.4%,16/51),不同肿瘤分化、局部分期以及有无淋巴结转移者FAK和MMP-9表达水平存在差异(P<0.05)。结论FAK和MMP-9在结直肠癌组织高表达,且FAK和MMP-9表达呈正相关,可能成为判断结直肠癌预后的指标之一。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 fak MMP-9 免疫组织化学
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